文摘

姜黄素有几个属性,如抗炎治疗效果。血红素oxygenase-1 (HO-1)已经显示有cytoprotective效应在某些病理条件。然而,HO-1的角色在姜黄素的抗炎作用是未知的。在这项研究中,我们调查是否姜黄素的抗炎作用在血管可能参与HO-1的激活。新西兰白兔喂养常规控制饮食或控制饮食加上0.3%的姜黄素(wt / wt)四个星期。引起的急性血管炎症的兔子把衣领左侧颈总动脉为24小时。HO-1抑制剂和核被用于调查的角色HO-1在成卷的血管姜黄素的抗炎效果。我们也探讨了HO-1体外curcumin-induced激活的机制。血清胆红素和血管、肝脏和脾脏HO-1 mRNA水平显著增加在curcumin-treated兔子。血管炎症显著降低curcumin-treated动物与控制。 Treatment of the rabbits with an inhibitor of HO or HO-1 siRNA to knock down the carotid artery HO-1 abolished the ability of curcumin to inhibit vascular inflammation. Treatment of cultured human artery endothelial cells with curcumin induced the HO-1 expression through the activation of nuclear factor-E2-related factor 2 (Nrf2) and an antioxidant responsive element via the p38 MAPK signalling pathway. In conclusion, curcumin inhibits vascular inflammation in vivo and in vitro through the activation of HO-1.

1。介绍

姜黄中姜黄素是一种天然的成分,这来自于姜黄通常被使用在南亚和东南亚国家(1]。在传统中药中,姜黄素用于治疗不同的疾病。姜黄素已被证明会表现出一些治疗性能如抗炎、抗氧化、心血管保护特性(2,3]。研究报道,姜黄素治疗的有利影响术后炎症、类风湿性关节炎、炎症性肠病由于其抗炎作用[4- - - - - -6]。炎症也起着重要的作用在血管疾病的发病机制,如动脉粥样硬化和急性冠脉综合征。然而,姜黄素对血管炎症的影响还有待研究。

血红素oxygenase-1 (HO-1)亚型的血红素加氧酶催化血红素生产铁、一氧化碳、胆绿素,转化为胆红素的胆绿素还原酶(7]。良好,过度HO-1抑制动脉粥样硬化的炎症和氧化应激(8,9]。激活HO-1降低ldl受体和载脂蛋白E-deficient小鼠动脉粥样硬化,防止心脏移植动脉硬化(10- - - - - -12]。HO-1基因传递减少neointima形成血管损伤后(13]。相反,抑制HO-1加重动脉粥样硬化(14]。HO-1-deficient老鼠还显示慢性炎症(15]。

最近,据报道,姜黄素能够抑制血管平滑肌细胞的增殖(16]。姜黄素的抗增殖效果相当与HO-1的感应。此外,姜黄素可以激活HO-1表达内皮细胞(17,18),肾上皮细胞(19),和星形胶质细胞20.),而这些类型的细胞的激活HO-1介导姜黄素的药理作用。在这方面,问题是姜黄素对血管炎症的影响是否参与HO-1的感应。在这项研究中,我们提供的证据表明,姜黄素抑制急性血管炎症通过HO-1的激活。

2。方法

2.1。动物和治疗

48雄性新西兰白(NZW)兔子重约2.0公斤每笼在保持一个12 h光/暗周期与免费的食物和水。所有的动物喂养正常兔饮食一周。兔子被随机分为8组( /组)和被允许每天摄入150克的食物。剩下的食物每天都重。组1和2被喂以普通兔子控制饮食。组3和4收到常规控制饮食补充(wt / wt)姜黄素为0.3%。组1和3的动物每天腹腔注射生理盐水。和组2和4是每天腹腔注射何氏特定抑制剂Zinc-protoporphyrin第九(ZnPP)(7.5毫克/公斤体重)4周。

小核RNA)转染用于击倒的表达HO-1其余四组的兔子。这些兔子喂养常规控制饮食(5和6组)或控制饮食加上0.3%的姜黄素(7和8组)四个星期之前衣领植入。动物从5和7组治疗200μL PBS包含40μ克HO-1核(反义:5-GUAGACCGGGUUCUCCUUGTT-3 ,意义:5-CAAGGAGAACCCGGUCUACTT-3)和10μL FuGENE 6 (Promega)在颈动脉之间的空间和衣领的时候领植入击倒血管HO-1的表达。动物组6和8服用200μ包含炒siRNA(反义:5 L PBS-UUCCCUCACCUGUGAGUU-AAGAACG-3 ,意义:5-CGUUCUUAACUCACAGGU GAGGGAA-3)在颈动脉之间的空间和衣领的时候领植入。

所有的兔子都实施安乐死与戊巴比妥钠(100毫克/公斤(四)后24小时内衣领植入。左颈总动脉的成卷的部分,相应部分的noncollared右颈总动脉,肝、脾被安置在冰冷的PBS和清洁的脂肪和结缔组织。所有程序都是通过动物保健和使用委员会深圳疾病控制和预防中心。

2.2。领植入

急性血管炎症是诱导如前所述21]。简单地说,兔子与静脉注射异丙酚anesthetised(5毫克/公斤)其次是肌内注射氯胺酮和甲苯噻嗪(50/10毫克/公斤)。左侧颈总动脉暴露手术,清除结缔组织沿着一条3厘米的长度。一个nonocclusive硅橡胶环(长度、2厘米;内部孔,直径4毫米;内部直径结束,1毫米)放在左颈总动脉和尼龙套管在地方举行。领子和动脉壁之间的空间充满了PBS或核和伤口被关闭。24小时后领植入,动物牺牲,从颈动脉段切除。nonocclusive颈动脉的衣领不影响收缩期峰值速度,内腔直径、地区或剪切应力近端或成卷的段内的血管在兔子。

2.3。免疫组织化学

1厘米的中央部分noncollared和成卷的颈动脉被固定在4% (v/v)多聚甲醛,嵌入在石蜡和分段(5μ米)免疫组织化学染色。部分deparaffinised,和抗原检索是由孵化幻灯片在沸腾的0.01 M柠檬酸缓冲(pH值6.0)10分钟在900 W微波炉,其次是在室温下冷却30分钟。内源性过氧化物酶被孵化的3% (v/v)H₂O₂/甲醇10分钟。部分被封锁在15%血清30分钟在室温和孵化在37°C 1小时用鼠标anti-rabbit血管细胞粘附分子- (VCAM -) 1(1: 400)和鼠标anti-rabbit细胞间粘附分子- 1 (ICAM) (1: 200)。生物素化的山羊anti-mouse免疫球蛋白g(1: 1000)是用作二次抗体。染色是观想使用diaminobenzidine (DAB)系统,其次是与苏木精染色。图像数字化,由调查员分析盲治疗的动物。产生的值表示为图像单元计算像素的数量代表内皮VCAM-1——ICAM-1-positive染色除以腔的周长。

2.4。血清胆红素测定和HO活性测定

血清胆红素水平测定使用QuantiChrom™胆红素测定工具包(生物测定系统)。HO在微粒体化验的活动从兔组织中提取和人类主动脉内皮细胞(HAECs),如前所述[22]。总之,兔子组织在液态氮冷冻,拉低,在PBS resuspended含有蛋白酶抑制剂,然后单一化。HAECs是细胞溶解和三个冻融循环。组织匀浆或细胞溶解产物被离心机,享年15000岁在4°C 20分钟,然后上层清液的收集和超速离心法在100000在4°C 1小时。由此产生的微粒体颗粒悬浮在缓冲区是一个包含250更易与L / L蔗糖和20更易与三(pH值7.4)。HO活性试验使用了反应混合物含有400到600μg微粒体蛋白,200μ2 g鼠肝微粒体,更易与L D-glucose-6-phosphate 1更易与L NADPH, 1 U glucose-6-phosphate脱氢酶,1μL (2.5 L更易与血红素(σ)25%二甲亚砜(DMSO)在100年μL缓冲区在冰上。混合物在37°C在黑暗中孕育了1小时。通过添加100反应停止μL乙醇/ DMSO (95:5v/v)。胆红素是提取后离心,享年13000岁5分钟由上述试验设备和测量。何氏活动计算nanomoles胆红素形成的每小时每毫克的蛋白质。

2.5。细胞培养

HAECs(细胞应用Inc .,圣地亚哥,CA)与胎儿M199系统中添加牛血清(的边后卫(20%)v/v),链霉素(100μg / mL),青霉素(100 U /毫升),肝素(90μg / mL),内皮细胞生长补充(20μg / mL)。细胞培养在37°C公司5%₂孵化器和通道3 - 5实验。

2.6。质粒,转染和荧光素酶活性测定

可拆卸的核转录因子NF-E2-related因子(Nrf2)表达式,HAECs转染200 pmol具体Nrf2核(4个不同的特定序列的混合物)或炒siRNA控制在37°C 48小时。构建抗氧化反应的元素——(是)荧光素酶向量,串联重复序列的双链寡核苷酸序列生成Nrf2绑定网站5-TGACTCAGCA-3插入的限制性位点pGL2子质粒。所有的转染实验使用Lipofectamine试剂盒根据制造商的指导方针。荧光素酶活性测定,细胞溶解产物最初与荧光素酶底物溶液混合,用光度计和荧光素酶活性测定。对于每个检测,荧光素酶活动确定了三个独立的实验,并为每个示例使用正常β牛乳糖活动。

2.7。总RNA提取和定量实时rt - pcr

总RNA分离兔组织和使用试剂盒HAECs试剂(英杰公司)根据制造商的指示。互补脱氧核糖核酸的合成第一链cDNA合成装备。进行了PCR检测使用ABI 7500机和执行三个井为每个样本。放大图的基线和阈值设置自动保持不变获得正常周期和线性回归数据。以下为每个示例使用反应混合物:1μL cDNA、0.8μL的引物的最终浓度10μM 10μL SYBR绿色主结构,1μL火箭参考染料,和7.2μL RNase-free水。所有的实验中,以下PCR条件了:变性在95°C 10分钟,其次是40周期在95°C,持续15秒,然后在60°C 1分钟。信使rna表达的相对水平决定的ΔΔCT方法,使用β肌动蛋白和18岁的控制。补充表中列出了PCR引物1。

2.8。西方墨点法

HAECs被洗4°C PBS和细胞溶解在20 L更易与三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH值7.5)包含0.5 L EGTA-Na更易₂,0.5 L EDTA-Na更易₂,蛋白酶抑制剂。核蛋白质HAECs孤立使用EpiQuik核提取工具包(Epigentek)。蛋白质浓度测定用BCA试剂盒(皮尔斯)。细胞蛋白被sds - page分离,electrophoretically转移到聚乙烯醇denedifluoride (PVDF)膜。与5% BSA在孵化后三羟甲基氨基甲烷缓冲液盐- 0.1% Tween-20 (TBST) 1小时在室温下,一夜之间,细胞膜被孵化在4°C兔多克隆抗体HO-1 (1: 500) (Abbiotec) HO-2 (1: 200) (Santa Cruz), Nrf2 (1: 500) (Santa Cruz), p38 MAPK(1: 1000),和phosphor-p38 MAPK(1: 500)(细胞信号技术)其次是辣根peroxidase-conjugated二级抗体。然后,细胞膜受到化学发光底物(皮尔斯)。带膜的强度量化的数量一个软件,和等效控制蛋白质加载评估反β肌动蛋白抗体(σ)。

2.9。统计分析

表示为均值±SEM的结果。的Mann-WhitneyU测试或双向方差分析与事后Dunnett校正进行了评估群体之间的差异。所有的通过使用SPSS 13.0进行了统计分析。一个概率值小于0.05被认为是显著的。

3所示。结果

3.1。姜黄素抑制急性血管炎症通过激活HO-1的兔子

调查HO-1激活的角色在姜黄素的抗炎效应,NZW兔子喂养。NZW兔子喂养常规控制饮食或饮食中添加0.3%的姜黄素(wt / wt)和日常ip注射PBS或ZnPP颈动脉环植入4周之后的24小时。HO-1的mRNA水平成卷的动脉与noncollared动脉相比增加了50%在控制兔子(图1(一))。补充姜黄素mRNA水平升高的HO-1 noncollared成卷的颈动脉,2.6±0.3,3.1±0.4倍,分别(图1(一))。肝脏和脾脏mRNA水平HO-1明显增加了5.1和5.5倍curcumin-fed动物(图1 (b))。膳食补充姜黄素也显著增加肝脏和脾脏HO活性(图1 (c)(图)和血清胆红素水平1 (d))。每日ip注射ZnPP阻塞HO-1姜黄素治疗(数据的归纳1 (c)和1 (d))。

急性血管炎症诱导的兔子把硅橡胶领左颈动脉24小时左右,颈领显著增加内皮VCAM-1和ICAM-1(图的表达式2)。膳食补充剂与姜黄素减少collar-induced VCAM-1和ICAM-1(图的蛋白表达2)。抑制HO-1表达式ZnPP注射血管炎症和显著增加废除了姜黄素的保护作用血管炎症。

我们进一步确定姜黄素的抗炎作用表达下调HO-1表达式通过转染HO-1-specific siRNA颈动脉。动物的动脉HO-1 mRNA水平补充与姜黄素撞倒了60% HO-1核小干扰rna(相对于炒 )(图3(一个))。然而,转染的HO-1 siRNA颈动脉不显著降低curcumin-increased HO-1表达式在肝脏或血清胆红素水平(数字3 (b)和3 (c))。接收到的控制兔子爬siRNA相比,补充姜黄素减少collar-induced内皮VCAM-1表达式的54%和57% (ICAM-1表达式 )(数据3 (d)- - - - - -3 (f))。与HO-1 siRNA转染成卷的颈动脉血管炎症和增加废除了curcumin-mediated collar-induced血管炎症的抑制(数字3 (d)- - - - - -3 (f))。

确定小干扰rna转染HO-1也减少了HO-1活动,从控制兔胸主动脉段与炒转染核或HO-1 siRNA然后孵化有或没有姜黄素。小干扰rna转染HO-1减少HO-1 mRNA和活动由姜黄素(补充图1)。总的来说,这些发现表明,姜黄素的保护作用在血管炎症是由HO-1的感应。

3.2。姜黄素激活HO-1 HAECs以时间和剂量依赖性的方式

评估的潜在机制的激活HO-1姜黄素在体内,我们在体外复制测试。100年HAECs被处理μmol / L姜黄素1到24小时或20到100μmol / L姜黄素为6小时。姜黄素增加了HO-1蛋白(补充数据2和2 b)和mRNA水平(补充数据2摄氏度和二维)时间和浓度的方式,分别以免疫印迹和定量rt - pcr。此外,姜黄素剂量依赖性增加HO活性(补充图2 e)。姜黄素的诱导HO活性完全被ZnPP治疗(补充图2 f)。相比之下,姜黄素不显著改变HO-2(补充图的蛋白表达3)。

3.3。激活的HO-1姜黄素是由感应Nrf2和

细胞的接触自然抗氧化剂拥有迈克尔反应受体分离Kelch-like ECH-associated蛋白1 (Keap1) -Nrf2复杂,促进Nrf2易位到细胞核,它结合并激活基因转录的HO-1 [19]。调查是否姜黄素促进Nrf2易位的细胞核,核内蛋白的免疫印迹试验curcumin-treated HAECs发现Nrf2水平随着时间的推移逐渐增加(图4(一))。HAECs转染是荧光素酶质粒与姜黄素治疗,和荧光素酶活性的测定。姜黄素浓度也非独立的荧光素酶活性升高(图4 (b))。角色的Nrf2 curcumin-induced HO-1和激活是评估通过使转染Nrf2核或炒siRNA HAECs然后用姜黄素治疗。转染Nrf2 siRNA减少HO-1,荧光素酶的表达活动激活姜黄素(数字4 (c)和4 (d)),这表明curcumin-induced HO-1激活,是由Nrf2的核易位。

3.4。姜黄素激活p38-MAPK信号通路和诱发Nrf2激活和HO-1表达式

绑定Nrf2 Keap1的受多种信号通路,如c-Jun n端激酶(物),细胞外signal-regulated激酶(ERK)和p38 MAPK信号通路(23]。调查个人的角色MAPK和PI3K / Akt信号通路在curcumin-induced HO-1,我们评估SB203580的影响,PD098059, SP600125, LY294002, p38 MAPK的特定抑制剂、ERK,物,和PI3K / Akt信号途径,分别在HO-1蛋白表达。治疗的HAECs SB203580减少curcumin-induced HO-1表达56%(图4 (e))。相比之下,PD098059、SP600125 LY294002没有影响curcumin-increased HO-1表达式。与100年当HAECs孵化μmol / L姜黄素10到120分钟,p38-MAPK迅速磷酸化,最大phosphorylated-p38蛋白表达发生在30分钟( )(图4 (f))。预处理的HAECs SB203580显著废除curcumin-induced Nrf2激活(图4 (g))。这些结果表明,p38 MAPK介导curcumin-induced Nrf2激活和HO-1 HAECs表达式。

3.5。姜黄素抑制肿瘤坏死因子-α刺激炎症通过激活HO-1 HAECs

接下来,检查是否HO-1姜黄素抑制肿瘤坏死因子-的激活α刺激炎症体外,HAECs服用姜黄素和ZnPP TNF -α治疗。治疗50和100μmol / L姜黄素减少TNF-α-induced增加的mRNA水平VCAM-1 ICAM-1,被ZnPP治疗(图5(一个))。我们进一步确定是否在TNF -姜黄素的抗炎效果α激活HAECs还涉及Nrf2激活。当HAECs Nrf2对待核,姜黄素不会降低TNF -α增加全身的mRNA水平的VCAM-1和ICAM-1(图5 (b))。这些发现表明,姜黄素通过激活HO-1 Nrf2的感应,从而抑制TNF -α在HAECs刺激炎症。由于姜黄素升高血清胆红素浓度在兔子,我们进一步确定胆红素具有体外抗炎作用。HAECs孵化1到10μmol / L胆红素前TNF -α刺激。胆红素的剂量依赖性降低TNF -α刺激mRNA VCAM-1和ICAM-1(图的水平5 (c))。相比之下,公司和铁^{2 +}其他两个酶产品HO-1没有抑制TNF -α刺激炎症。这些发现表明,姜黄素的保护作用与血管炎症在兔子可能由血清胆红素浓度升高。

4所示。讨论

姜黄素已被证明有几个细胞属性,如抗氧化剂,抗炎,抗增殖、proapoptotic,抗癌效果24]。然而,姜黄素是否能防止血管炎症和相应的分子机制,通过它,可以实现这一目标还没有清楚地阐明。本研究提供的证据表明,姜黄素抑制血管炎症通过诱导体内和体外HO-1表达式。我们进一步证明HO-1姜黄素涉及核易位的感应Nrf2并通过p38-MAPK激活信号通路。

大量研究表明,姜黄素可以通过不同的机制发挥抗炎作用,例如,姜黄素可以抑制核转录因子-κB (NF -κB)激活,这可能参与肝病不同刺激小鼠肠上皮细胞和小胶质细胞(25,26]。此外,姜黄素可以抑制独立MAPK通路,由大多数炎性刺激激活(27]。在这项研究中,我们发现另一个姜黄素的抗炎作用机制包括HO-1的激活。姜黄素已被证明会激活HO-1施加不同cytoprotective属性在不同的细胞。例如,姜黄素可以激活HO-1表达和抑制血管平滑肌细胞的增殖(16]。在牛主动脉内皮细胞,姜黄素可以防止氧化应激增加HO活性(17]。此外,姜黄素已被证明增加HO-1 mRNA表达和抑制炎症的肺lipopolysaccharide-treated小鼠和carrageenan-induced急性炎症大鼠(28,29日]。我们延长这些发现表明膳食补充剂与姜黄素抑制collar-induced急性血管炎症NZW兔子通过增加HO-1表达和血清胆红素水平,这是被注射与特定抑制剂ZnPP何氏。

与姜黄素的抗炎作用的废除兔子ZnPP完全抑制HO,击倒的血管HO-1特定核只是部分阻塞的姜黄素抑制collar-induced急性血管炎症(图3 (f))。这可能是解释为低收入和短时siRNA转导在维管组织。此外,局部血管击倒HO-1没有完全阻止curcumin-mediated增加肝脏HO-1 mRNA表达和血清胆红素水平(数字3 (b)和3 (c))。这一结果表明,姜黄素诱导HO-1表达在不同的组织包括动脉,脾,肝和提升的循环浓度胆红素HO-1的代谢产物。此外,治疗与胆红素HAECs防止TNF -α全身的血管内皮炎症(图5 (c))。这表明curcumin-induced增加血清胆红素浓度由于HO-1表达式的激活可能介导的抑制姜黄素在急性血管炎症collar-treated兔子。因此,血清胆红素浓度仍增加动脉HO-1 curcumin-treated兔子与特定的抑制,这可能解释了姜黄素的抗炎效果之间的差异,兔子与ZnPP完成块HO活性和地方击倒的动脉HO-1 HO-1-specific核。

核转录因子Nrf2最近被认为是一个重要的监管机构的感应是响应基因的表达。Nrf2驻留在胞质,它结合抑制剂Keap1。在不同的刺激,Nrf2 Keap1和把细胞核是分离的,它将在目标基因的启动子区域如HO-1 [30.]。绑定的多个副本的易位Nrf2在启动子区域的HO-1增加HO-1表达式(31日]。它已经表明,姜黄素水解Nrf2-Keap1复杂,导致增加绑定的Nrf2,介导的转录激活HO-1 [19]。我们的数据表明,姜黄素增加Nrf2进入细胞核的易位和增加了活动最后激活HO-1的表达,这是被转染与培养Nrf2 siRNA HAECs(数字4 (c)和4 (d))。这表明curcumin-activated HO-1表达式是通过Nrf2主要由激活转录监管。

研究表明,不同的信号通路参与Nrf2易位和HO-1激活(23]。MAPKs包括p38 MAPK、物和ERK在Nrf2易位有重要作用和激活HO-1表达在不同的细胞(9]。有研究表明,姜黄素诱导HO-1 PKC激活的信号通路δ和p38 MAPK在肝细胞和肾上皮细胞(19,32,33]。姜黄素还能抑制细胞因子的分泌LPS-stimulated单核细胞内通过感应HO-1通过激活PKCα,PKCδ/ ERK1/2, p38和pi3激酶(28]。此外,bisdemethoxycurcumin,姜黄素的类似物,抑制LPS-stimulated炎症通过激活巨噬细胞通过Ca HO-1表达^{2 +}/ calmodulin-dependent蛋白激酶II-ERK1/2-Nrf2级联(34]。此外,demethoxy curcuminoids调节HO-1表达式通过Nrf2激活PI3K / Akt信号通路在鼠标β肽(35]。在这项研究中,与姜黄素治疗HAECs迅速增加了p38 MAPK磷酸化,这已被证明对炎症刺激如白细胞介素- 10”(8)和其他刺激(36]。然而,尽管姜黄素调节MAPK信号通路在几个不同的细胞,这些发现有些不一致。在一些情况下,姜黄素抑制MAPKs的激活。例如,姜黄素可以抑制p38 MAPK磷酸化后的刺激血管内皮生长因子(VEGF)在人类肠道微血管内皮细胞(37]。这种抗血管新生的影响姜黄素在治疗肠道炎症和肿瘤具有潜在临床医学方面的好处。其他研究矛盾的报道,姜黄素激活MAPK信号通路等物在人类结肠癌HCT116细胞(38)和p38 MAPK在人类中性粒细胞(39]。我们的研究结果表明,选择性抑制p38 MAPK信号通路,但不是物或兵,废除HO-1激活HAECs姜黄素。离散的p38 MAPK的早期磷酸化机制诱发HO-1转录激活HAECs姜黄素的需要进一步研究。

总之,我们发现姜黄素预防急性血管炎症通过活化的核易位HO-1 Nrf2并通过p38 MAPK信号通路激活。这些结果提供新的见解姜黄素的抗炎作用的机制,表明血管炎症的抑制curcumin-induced HO-1激活可能是有用的血管损伤发生急性冠脉事件的结果。

缩写

是:	抗氧化反应的元素
HAECs:	人类主动脉内皮细胞
HO-1:	血红素oxygenase-1
ICAM-1:	细胞间粘附molecule-1
Nrf2:	核factor-E2-related因子2
VCAM-1:	血管细胞粘附molecule-1
ZnPP:	Zinc-protoporphyrin第九。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

的利益冲突

没有人员的利益冲突声明的任何调查。

作者的贡献

YX YK设计研究和起草了手稿。西南,y, JX ZL, SH, HH进行研究和分析数据。XS和JC评论和修改了手稿。

确认

本研究支持由中国国家自然科学基金(81402672)、广东省中医药研究基金(20131037)、深圳市科技计划项目(JCYJ20170306160008504),医学和三明项目在深圳(SZSM201611068)。

补充材料

补充表1:PCR引物序列。补充图1:影响HO-1 siRNA HO-1 curcumin-mediated感应的mRNA水平和胸主动脉的活动。补充图2:诱导HO-1 HAECs姜黄素的表达。补充图3:姜黄素不影响HO-2 HAECs蛋白表达。(补充材料)