文摘

本研究调查了在体外在硅甲基胡椒酚的生物属性(MC)及其类似物2 - [(4-methoxyphenyl)甲基]环氧乙烷(MPMO),强调了抗氧化剂和antilipase效果。从MC MPMO合成反应元-chloroperbenzoic酸,分离和纯化后,被发现了¹H和¹³C NMR和ms法。cooxidation DPPH的抗氧化活性研究β胡萝卜素/亚油酸,硫代巴比土酸化验。使用比色法,对胰脂肪酶antilipase影响测试,而分子间相互作用分子对接研究资料进行评估。MC(集成电路₅₀= 312.50±2.28μg / mL)和MPMO (IC₅₀= 8.29±0.80μg / mL)抑制了DPPH自由基。脂质过氧化的抑制(%)为73.08±4.79,36.16±4.11 MC和MPMO,分别。malonaldehyde内容是MC和MPMO显著降低。MC和MPMO抑制胰脂肪酶在26.93%和58.12,分别。MC和MPMO(−6.1千卡·摩尔⁻¹)产生亲和力值低于diundecylphosphatidylcholine(−5.6千卡·摩尔⁻¹)。这些发现表明MC和MPMO抗氧化剂和antilipase活动,这可能是有前途的分子靶点治疗与氧化损伤和脂质代谢相关的疾病。

1。介绍

“prooxidant”和“抗氧化剂”之间的不平衡的化学物种产生氧化应激,导致油脂的过氧化反应,侵略,蛋白质,和损害DNA和RNA和触发机制与炎症有关,心血管,和神经性疾病;过敏;加速老化;出血;白内障;免疫功能紊乱;和癌症(1,2]。在这些疾病中,代谢综合征危险因素包括内脏肥胖、内皮功能障碍、血脂异常、高血压和2型糖尿病的发展有关高心血管风险和死亡率(3]。此外,肥胖和2型糖尿病促进疾病由于氧化损伤的增加蛋白质,脂类,DNA,和炎症过程生成的自由基(FR)和缺乏细胞解毒和修复受损的分子(4]。在这些途径代谢,脂质过氧化作用是触发流程之一,自它形成氢过氧化脂质分子的结合氧的多不饱和脂肪酸。然而,抗氧化剂可以防止FR的形成或抑制自动氧化,而antilipase代理,如奥利司他、用于肥胖症的治疗,能够抑制消化从食物中脂酶,减少脂肪的吸收,减少心血管风险(2,5,6]。这些方面相互影响,寻找新的药物,能抑制氧化和疾病有关的机制可能是一个伟大的策略治疗不同的疾病。

甲基胡椒酚(MC),化学称为1-methoxy-4-prop-2-enylbenzene,草蒿脑,或p-allylanisole,属于糖类的类是一种特殊的代谢物中发现精油的药用植物和食品(7]。的化学结构由一个苯环的存在一个甲氧基集团(哟₃)和丙烯基(ch₃CHCH₂)分别在1和4的位置。的杀虫活性罗勒属种虫害精油是归因于这个成分按蚊braziliensis发射机的疟疾、登革热和黄热病(8]。这种化合物块voltage-activated钠离子通道(9),和抗炎活动是由于抑制白细胞游走和刺激巨噬细胞吞噬作用10]。Pattnaik et al。11)还透露,MC显示弱的抗菌活性和精油罗勒属basilicum对肿瘤细胞株的细胞毒性,如Caco2(结肠癌)HepG2(肝细胞癌)和MCF-7(乳腺腺癌)。

高剂量的MC hepatocarcinogenic潜力,致癌性与1-hydroxy-methyl对烯丙基苯酚,基因毒性代谢物催化细胞色素P4501A2和P4502A612- - - - - -15]。此外,第一阶段代谢包括O-demethylation、环氧化作用,和3羟基化反应形成4-allylphenol,甲基chavicol-2 ,3氧化,3-hydroxyanethole,按照这个顺序16- - - - - -21]。1的磺化反应-hydroxy-methyl胡椒酚生成致癌代谢物,能与DNA反应(14,19,22,23]。

如上所述,生物医药和食品植物精油的性质已被归因于MC,和氧化过程涉及不同的机制和病理反应。从这个意义上讲,有前途的化合物的抗氧化行为的理解一直是战略发展新治疗代谢紊乱的治疗选项。基于这一原则,本研究旨在合成MC的模拟和评价抗氧化活性和抑制胰脂肪酶的使用能力在体外在硅片的方法。

2。材料和方法

2.1。化学药品和试剂

分析产品用于本研究的发展如下:甲基胡椒酚(≥93.63%),元-chloroperbenzoic酸(≥77%),和氘氯仿(CDCl₃99.8%)(Sigma-Aldrich®);己烷(≥98%),乙醚(≥98%)、氯仿(≥99%)、盐酸(≥37%),甲醇(≥98%),二氯甲烷(≥98%),硫酸(≥95%),氯化钠(≥99.5%),氢氧化钠(≥99%),吡啶(≥98%),乙酸酐(≥95%),和高锰酸钾(≥98%)(默克®);碳酸氢钠(≥95%)和乙醇(≥99%)(研究®);碘(≥95%)(Synth®);亚硫酸钠(≥98%)和硫代硫酸钠(≥98%)(雷根®);和无水硫酸钠(≥99%)(Quimex®)。

2.2。合成和表征2 - [(4-Methoxyphenyl)甲基]环氧乙烷(MPMO)

甲基胡椒酚(1)(二氯甲烷更易与0.674毫升)的反应元-chloroperbenzoic酸(MCPBA)(0.35更易与二氯甲烷/毫升)40分钟0°C(冰浴)和温度保持在室温下24小时。经过这一次,60毫升10%亚硫酸钠(水)添加到反应搅拌一小时来分离水和有机相。水相的二氯甲烷处理,最后分离、有机相结合,用5%碳酸氢钠,饱和氯化钠溶液,进行无水硫酸钠去除水中残留。溶剂蒸发,产品使用硅胶色谱柱纯化(70 - 230目ASTM;Sigma-Aldrich)筛选了己烷/乙酸乙酯(8:2)。这个反应的收率为75%(计划1)。

¹H和¹³C核磁共振光谱MC(补充1和2)和MPMO(补充4和5)获得的500 MHz和75 MHz,分别在一个力量皇冠DRX / 500光谱仪。作为内部参考,四甲基硅烷(TMS)或残余氢氘溶剂的使用。的化学位移值(δ)据报道在ppm (ppm)和耦合常数(J在赫兹(Hz)。峰地区收购电子集成及其多样性描述如下:s =单线态;D =紧身上衣;T =三联体;Tdd =三联体双偶极子;Dd =双偶极子;Ddd =双偶极子;和M =多重态。MC光谱数据是在补充报告1,2,3所述的制造商。

MC和MPMO分析气相色谱与质谱法(gc - ms)。物质被稀释1%乙酸乙酯(v / v)和1.0μL是注射流(1:20)气相色谱仪,模型日本岛津公司®GCMS-QP2010另外,毛细管柱类型Rtx-5(5%苯基,95%二甲聚硅氧烷)。氦气作为夹带气体流量为1.0毫升/分钟。温度从60到240°C编程的升温速率8°C /分钟。质量检测器是在电子电离模式(70 eV)。合成产品的成分比例是通过标准化和集成的峰值区域。

色谱柱、硅胶60克0.063 - -0.200毫米(70 - 230目ASTM, Sigma-Aldrich)使用,而对于薄层色谱法(TLC)、预镀铝钢板F_254年(Sigma-Aldrich)和溶剂系统包含己烷/乙酸乙酯(9:1,8:2,7:3、6:4和1:1)。在254 nm紫外线灯和碘蒸气被用作开发人员。

2.3。DPPH自由基封存方法

抗氧化活性是由2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl (DPPH)方法所描述的Mensor et al。24]。股票的解决方案(750毫克/毫升)的MC和MPMO和3,5-di -叔-butyl-4-hydroxy甲苯(二叔丁基对甲酚,1毫克/毫升)爸爸,乙醇稀释准备获得不同浓度。2.5 mL被转移,一式三份,试管,其次是增加1毫升的DPPH(0.03毫米)的解决方案。抗氧化能力是由反应动力学的类别:快速(反应时间< 30分钟)、中(30反应时间>和< 60分钟)和慢速(反应时间> 60分钟)动力学。吸光度绘制零时间之间,210分钟(t₀,t₁₅,t_30.,t₄₅,t₆₀,t_75年,t_90年,t_120年,t_150年,t_180年,t_210年)在15分钟的时间间隔25]。这一次后,样本的能力减少DDPH 2, 2-diphenyl-1-picryl肼是分光光度法观察到(日本岛津公司、uv - 1800®)在518纳米24]。空白(样品和二叔丁基对甲酚)由2.5毫升的解决方案和1.0毫升乙醇。消极的控制是由2.5毫升乙醇和1.0毫升的DPPH的解决方案,其auto-zero只执行了乙醇。的吸光度(Abs),抗氧化活性的百分比(% AA)确定使用以下方程:

最小二乘法的线性回归分析后,一半最大抑制浓度(IC₅₀)确定。

2.4。Cooxidation的β胡萝卜素/亚油酸的方法

MC的抗氧化活性和cooxidation MPMO决心β胡萝卜素/亚油酸的方法描述Koleva et al。26]。一毫升β胡萝卜素(0.2毫克/毫升氯仿),25岁μ亚油酸的L, 200毫克的渐变40放入rotavaporation烧瓶。之后,溶剂移除,50毫升蒸馏水的慢慢补充道,在不断搅拌冒泡氧化,形成乳剂。在一个微型板块,30岁μL的样品和二叔丁基对甲酚(积极控制)在25μ添加了g / mL,一式三份,紧随其后的是250μ乳液的L。消极的控制是由30μ250年乙醇和Lμ乳液的L。280年的空白由μL的乙醇。试验包括微型板块之间的读数0到105分钟(t₀,t₁₅,t_30.,t₄₅,t₆₀,t_75年,t_90年,t_105年每隔15分钟)在烤箱在孵化后50°C。吸光度测量标(ThermoPlate®, TP-Reader)在492海里。衰变的图吸光度(Abs)阐述了作为时间的函数,和脂质过氧化的抑制百分比(%我)决心从以下方程: 在哪里 和 :负控制和Abs_样本:MPMO MC和二叔丁基对甲酚。

2.5。硫代巴比土酸的方法

使用硫代巴比土酸脂质过氧化法·泽和Ullah [27),修改,应用于确定抗氧化活性。这个测试包括malonaldehyde和衍生品的分析物质的脂质过氧化作用通过显色复杂的检测28]。匀浆和25 g的低脂牛肉,准备17毫升蒸馏水,和7.5,15日和30毫克的样品在200年μL的甲醇。匀浆被加热,直到肉是煮熟。这个过程后,蒸馏水被添加到完整的100毫升,和匀浆混合,转移到琥珀瓶,冷藏。一式三份,测试执行与每个匀浆的500毫克,50岁μL二叔丁基对甲酚的4%乙醇,2.5毫升的1%磷酸和1.25毫升的1%的硫代巴比土酸0.05 M氢氧化钠。管中煮15分钟,其次是在冰浴冷却10分钟。冷却后,3.0毫升的丁醇是添加到每个管与搅拌下缓慢反演和离心机在4000 rpm 5分钟。上层清液用于光谱光度测量的读数在535 nm(日本岛津公司,uv - 1800)。thiobarbituric-malonaldehyde酸的浓度复杂计算从标准malonaldehyde (MDA)曲线。丁醇作为空白,二叔丁基对甲酚作为积极的控制,和甲醇作为消极的控制。

2.6。抑制胰脂肪酶酶能力

试验,以确定对胰脂肪酶的抑制能力是由分光光度法与一些修改(29日]。MC和MPMO准备在10毫克/毫升的浓度二甲亚砜(DMSO)。从这个解决方案,分析了使用10 g / L猪胰脂肪酶溶液0.05 mol / L Tris-HCl缓冲区,pH值8.0,包含0.010 mol / L氯化钙和0.025 mol / L氯化钠。底物p硝基酚棕榈酸酯(8更易/ L)溶解在0.5% Triton x - 100。一式三份,50μ样品溶液的L, 100年μL的酶,50μL的衬底置于超小型电子管和孵化37°C水浴乘以10,20、30、40分钟。这一时期后,反应停止冰浴和1.0毫升0.05 mol / L Tris-HCl缓冲区。每一次使用的控制无酶(空白基质)和无基质(空白)的酶。作为一个积极的控制,1毫克/毫升使用奥利司他。脂肪酶产品的吸光度(p用分光光度法测定硝基酚)(日本岛津公司、uv - 1800)在410海里。得到了吸光度后,由最小二乘法进行线性回归分析获得连续方程和角系数(线的斜率),和抑制胰脂肪酶的决心。抑制百分比(%我胰脂肪酶的计算根据以下方程: 在哪里一个吸光度是没有可能的抑制剂,它对应于控制酶测定;一个样品的吸光度在没有和酶(空白基质);B的吸光度的存在可能与酶抑制剂和底物;和b的吸光度在缺乏酶。

2.7。分子对接研究

配体的三维结构中生成MarvinSketch 16.7.4程序(30.]。然后,配体的几何精了半经验的计算使用参数方法(PM7) [731日)中实现MOPAC2012软件使用章鱼工作流(32]。蛋白质的三维结构的晶体坐标得到的蛋白质数据库(PDB)代码1 lpa对胰脂肪酶[33]。验证从PDB获得晶体的配体是由redocking过程,包括复制一个晶体protein-binder复杂的均方根偏差(RMSD)小于2。

分子对接是由AutoDock七弦琴1.1.2程序(34]。此外,生成一个网格框尺寸30×30×30一个分子的目标,和网格框的坐标都集中在晶体的配体x6.309,y27.567,z48.586使用MGLTools软件(35]。分子识别的相互作用进行的分析通过发现工作室4.5 v . 2016项目(36,37]。

2.8。统计分析

结果表示为平均值±标准错误意味着(SEM)。方差分析(方差分析)其次是图基HSD(诚实的显著差异)测试是用于测量程度的意义 。GraphPad棱镜®程序是用于这些分析。

3所示。结果

3.1。合成2 - [(4-Methoxyphenyl)甲基]环氧乙烷

2 - [(4-Methoxyphenyl)甲基]环氧乙烷(MPMO)合成了甲基胡椒酚,显示一个棕色的油性液体的外表分子式C₁₀H₁₂O₂和分子质量164.204克·摩尔⁻¹。反应的收率为75%,纯度为99%时,分析了气相色谱法(GC)(补充7)。

获得的光谱数据如下:¹H NMR, 500赫兹(CDCl₃):δ(ppm): 6.85 (d、2 h,J= 2.14赫兹);6.74 (d, 2 h,J= 2.14赫兹);3.89 (3 h,J= 5.53,5.53,3.89,2.75赫兹);2.70(米,3 h);2.56 (dd, 1 h,J= 5.04、2.59赫兹);和2.11 (m, 3 h)(补充4)。¹³C NMR, 75赫兹(CDCl₃):δ(ppm): 171.395;145.782;145.608;130.553;120.612;115.412;110.935;60.610;56.193;和52.774(补充5)。女士:米/z= 164(米⁺);121;108;91;77;和65年(补充6)。

3.2。DPPH自由基封存方法

动能概要文件显示,MC缓慢的抗氧化能力与反应时间超过一个小时。的比例未反应的DPPH自由基与MC与时间如图1。在达到稳定状态时,约90分钟(甲基胡椒酚)和15分钟(2 - [(4-methoxyphenyl)甲基]环氧乙烷),抗氧化和DPPH停止之间的反应。因此,它是可能的计算实际数量的DPPH自由基,降低了MC,避免不适当的时间间隔的选择仍然发生的反应。

MC的抗氧化潜力、MPMO和二叔丁基对甲酚对DPPH提出了表1。集成电路₅₀的样本值范围从0.01±0.01,312.50±2.28毫克/毫升和明显不同( )。考虑50毫克/毫升的浓度,MPMO在抑制DPPH比MC更有效,因为它产生一个活动的大约80%的抑制百分比(%)。

3.3。Cooxidation的β胡萝卜素/亚油酸的方法

图2显示了吸光度的衰变的时间使用cooxidation关系β胡萝卜素/亚油酸的方法。MC是更有效地抑制脂质过氧化作用,因为这种化合物提出了一个较低的衰减MPMO相比。15分钟后,混合物的吸光度不同于消极的控制( )。

与表中的数据2,一个人可以观察到MC抑制73.08±4.79%的脂质过氧化作用,而MPMO产生减少36.16±4.11%。这些数据还表明,MC是更有效的比二叔丁基对甲酚(积极控制)在脂质过氧化的抑制作用。

3.4。硫代巴比土酸的方法

malonaldehyde的浓度(MDA)下降的匀浆处理二叔丁基对甲酚,MC, MPMO相比,消极的控制(表3)。5日(第四天)的实验,提出MC二叔丁基对甲酚的抗氧化活性与抑制MDA的形成( )。

3.5。抑制作用的甲基胡椒酚和2 - [(4-Methoxyphenyl)甲基]环氧乙烷胰脂肪酶

MC的抑制活性和MPMO胰脂肪酶是26.93%和58.12,分别。奥利司他,积极的控制,有效的抑制了76.80%(图3)。

3.6。分子对接研究

在这个调查中,参数验证使用redocking方法繁殖protein-ligand晶体复杂的均方根偏差(RMSD)小于2。晶体的redocking配体,diundecylphosphatidylcholine (PLC)(1.3232)和奥利司他(1.84)(补充8),胰脂肪酶结合位点表现出晶体复合物的表达重建,进行本研究至关重要。从这些数据,胰脂肪酶的分子对接(PDB 1 lpa)(补充9执行)获得配体的方向。氨基酸残基Ser153、Asp177 His264,催化三分子的组成部分,构成了最重要的分子相互作用,Ser153主要参与脂类分解的氨基酸。范德瓦耳斯和氢键相互作用与Ser153 His264残留物,分别抑制的可能的目标antilipase代理(补充9)。

分子之间的相互作用MC或MPMO胰脂肪酶的氢键类型表现出Ser153 His264残留物和目标氨基酸(补充9)。分子对接的影响研究还显示,MC和MPMO脂肪酶产生亲和力值等于−6.1千卡·摩尔⁻¹,这是比奥利司他(−6.5千卡·摩尔⁻¹相比)和低的PLC(−5.6千卡·摩尔⁻¹)(表4)。

4所示。讨论

MPMO合成烯的环氧化作用组,由于环氧化合物是多才多艺的,提供手性分子。环氧化合物也容易受到大量的亲核试剂的反应,亲电试剂,酸,和基地,减少代理和一些氧化环张力和极性(38]。在这个合成,Prislaschajew反应进行使用元-chloroperbenzoic酸作为epoxidizing试剂。此外,MC的结构允许烯烃的功能化和高酸由可能发生亲电生物分子机制,在高酸循环结构,分子内氢键形成稳定的螯合物(计划2)。这个机制的主要证据反应速率的增加是由于取代基吸电子在高酸的存在。这一事实o - o键和/或增加的亲电性的存在给电子体组织,提高碳碳键的亲核性。亲电机制强化了溶剂的碱度,破坏分子内氢键,减慢反应。从这个意义上讲,烯烃的环氧化作用与高酸通常是在低极性非质子溶剂如二氯甲烷(38]。

抗氧化活性的结果表明,MC和MPMO提出一种抗氧化剂潜力试验与评估机制不同。固DPPH自由基检测,集成电路₅₀MC的价值(312.50±2.28毫克/毫升)38倍低于MPMO(8.29±0.80毫克/毫升)。在MPMO环氧的存在可以证明抗氧化剂行动相比,MC越高,因为这组增加其极性和允许电子捐赠DPPH自由基。此外,精油成分含有羟基基团的芳环、未饱和,和可用性的电子与抗氧化活性相关(39]。然而,的精油万寿菊最亮的星,其中包含95.7%的MC,集成电路生产₅₀37.9μ克/毫升(40),而甜罗勒精油(MC)的17.06%显示集成电路₅₀1.092±0.066毫克/毫升(41]。也许,这种差异与化合物可以促进之间的协同行动他们(41,42]。

脂质过氧化的cooxidationβ胡萝卜素/亚油酸体系和硫代巴比土酸化验在体外测试复制氧化应激的生理情况,从而导致细胞死亡在极端情况下(43,44]。观察到的衰变的吸光度情节作为时间的函数(图2)、MC和MPMO延迟和减少lipoperoxidation,因此,氧化β胡萝卜素。因此,这些发现表明MC与抗氧化分子潜在的对脂质过氧化反应,因为它抑制73.08%的氧化过程,而二叔丁基对甲酚(积极控制)提出了59.66%,和MPMO能够抑制36.16%。另外,硫代巴比土酸测定结果证实cooxidation的数据β胡萝卜素/亚油酸体系,更积极地抑制MC以来malonaldehyde在匀浆的形成。Lipoperoxidation是一个过程,包括启动、传播、和终止的步骤,和抗氧化剂可以阻止第一步(起始)中和活性氧和/或抑制传播通过抑制过氧化氢自由基(44,45]。也许,MC时减少了一代的减少和降低金属螯合配合物的形成。因为它是一个复合极性较低,MC为脂质媒体亲和力高于MPMO。此外,MPMO与环氧基团的结构,在MC烯烃的存在降低了极性,并允许更大的脂质过氧化抑制。

MC的antilipase活动的评价是基于的分解脂肪的水解反应的动力学p硝基酚在棕榈酸和棕榈酸酯p硝基酚。释放这些物质的结果在一个黄色的色原,是加强在高pH值(最适pH = 8) (46]。表面活性剂,如特里同x - 100,增加亲油性和稳定的反应介质以及提高渗透率。盐氯化钠和CaCl等₂减少酶的溶剂化层,这意味着一个更好的溶解,增加介质的离子强度,使ligand-protein复杂的形成(29日]。我们的结果表明,MC是比MPMO更有效,因为MC能够抑制在体外胰脂肪酶58.12%(图3),这些数据是由分子对接研究证实(补充9)。尽管Ser153最重要的氨基酸参与脂类分解,胰脂肪酶抑制发生在催化包含Ser153三和弦,Asp177, His264残留物(47]。MC和MPMO通过氢键与Ser153互动,而晶体粘结剂(PLC)与Ser153通过范德华力和His264通过氢键。His264之间的静电相互作用的形成和羰基氧分化奥利司他行动的其他配体在催化部位。重要的是要注意,氢键相互作用通常比范德华力(更稳定48]。这些发现还表明,MC和比奥利司他MPMO活跃度较低,但比公司更活跃,因为他们生产lower-affinity能源价值(表4)。此外,它验证了的氧环氧中发现MPMO能够维持一个氢键Ser153残留物,但没有交互与其他残留分解脂肪的行动负责。

天然化合物,如生物碱、类胡萝卜素苷、多酚、多糖、皂苷、萜类化合物,被描述为胰脂肪酶抑制剂(48]。特别是,萜烯,比如鼠尾草酸,carnosol, roylenoic酸,7-methoxyrosmanol,据报道,齐墩果酸,抑制胰脂肪酶(49,50]。考虑到这些方面,MC及其合成类似物MPMO antilipase代理人可能构成一个新类属于phenylpropanoid衍生品。

尽管甲基胡椒酚存在于药用植物广泛使用的精油人口(43],致癌和致畸作用应该考虑在可能的治疗应用。草蒿脑及其代谢物1例如,-hydroxyestragole诱导小鼠肝肿瘤后饮食慢性接触或腹腔内或皮下注射后(12- - - - - -14]。此外,草蒿脑的亲电环氧化合物和1-hydroxyestragole直接诱变美国沙门氏菌感染。草蒿脑和1羟基代谢物生产计划外在大鼠肝细胞DNA合成在体外和草蒿脑也在活的有机体内。肝DNA加合物的形成中也得到了证实。从这个意义上讲,甲基胡椒酚的毒性及其模拟有毒代谢产物的生成(12- - - - - -15可以防止他们治疗作为抗氧化剂和antilipase代理。

5。结论

MC和MPMO有抗氧化活性,能够抑制胰脂肪酶酶使用在体外和硅化验。研究结果表明,这些化合物可能是有前途的发展新的治疗选择与氧化相关疾病的治疗过程和代谢的改变。

信息披露

结果本文提出了第11届国际制药科学大会(CIFARP)会议关注“医药科学在新兴经济:挑战一个可持续发展的世界”(小溪Preto,巴西,11月15日,2017)。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

确认

本研究支持的慰问Nacional de Desenvolvimento Cientifico e学府(CNPq) Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de含量比(披肩),Fundacao德帕罗尽管做Estado de米纳斯吉拉斯(FAPEMIG)和Pro-Reitoria德尽管e Pos-Graduacao Juiz德联邦大学的论坛。作者感谢埃德尔路易斯烤面包和耶稣的德波拉•萨尔门托的技术支持。

补充材料

补充1:¹HNMR谱甲基胡椒酚。补充2:¹³CNMR谱甲基胡椒酚。补充3:质谱的甲基胡椒酚。补充4:¹HNMR谱2 - [(4-methoxyphenyl)甲基]环氧乙烷。补充5:¹³CNMR谱2 - [(4-methoxyphenyl)甲基]环氧乙烷。补充6:质谱的2 - [(4-methoxyphenyl)甲基]环氧乙烷。补充7:理化性质和光谱数据的2 - [(4-methoxyphenyl)甲基]环氧乙烷。补充8:redocking晶体的配体PLC和奥利司他RMSD 1.3232和1.84,分别。(补充材料)