SirT1过度抑制HMGB1的乙酰化和易位LPS诱导的RAW264.7细胞。Flag-SirT1和控制的细胞转染质粒;转染24 h后,细胞处理有限合伙人12 h。(一)核和细胞质和总蛋白提取,分别;HMGB1的水平被免疫印迹检测。直方图显示的相对表达HMGB1在核和胞质蛋白归一化核纤层蛋白B1或GAPDH,分别。实验进行了一式三份,数据显示为平均数±标准差。相比之下,无LPS刺激组控制plasmid-transfected细胞。相比之下,Flag-SirT1-transfected无LPS刺激组细胞。相比之下,控制plasmid-transfected和LPS-treated细胞。(b)转染和LPS处理后,细胞激光共焦菜肴和4%多聚甲醛固定,3% BSA阻塞,孵化anti-HMGB1抗体,然后孵化Alexa萤石555山羊anti-rabbit免疫球蛋白(红色)抗体。细胞核与DAPI染色(蓝色),用共焦显微镜观察和HMGB1的本地化。(c)控制和Flag-SirT1质粒的细胞转染24 h,然后用LPS刺激为4 h;HMGB1乙酰化作用是由IP。直方图显示乙酰化的相对表达总HMGB1 HMGB1规范化。实验进行了一式三份,数据显示为平均数±标准差。相比于控制plasmid-transfected集团与LPS刺激。