单个核细胞中的超氧化物歧化酶2（SOD2）蛋白质含量与血液透析治疗患者的更好的存活相关

抽象的

线粒体超氧化物歧化酶2（SOD2）将超氧化物阴离子转化为过氧化氢和氧气。对慢性肾病（CKD）中SOD2蛋白质含量的人体数据缺乏稀疏和死亡率。我们研究了血液透析治疗患者单核细胞中的SOD2蛋白质含量（），CKD阶段1-5（）和健康的对照（)用于细胞免疫分析。SOD2蛋白从CKD第1阶段下降到第4阶段，而在有无血液透析的第5阶段再次增加。通过实时定量PCR分析SOD2基因表达，各组之间没有显著差异。提高细胞超氧物生成量降低SOD2蛋白含量。这种效应被超氧化物歧化酶模拟物Tempol所消除。使用凝胶电泳和westernblot，我们没有检测到CKD中SOD2的硝基酪氨酸修饰。最后，在CKD 5期患者中，血液透析治疗的SOD2蛋白含量高于平均值与更高的全因死亡率相关。综上所述，CKD中SOD2蛋白含量在第4阶段之前有所下降，而SOD2基因表达则没有下降。细胞超氧阴离子产生增加可能影响SOD2蛋白含量。在晚期CKD（5期）患者中，SOD2蛋白含量再次增加，但高于这些患者的SOD2蛋白含量中位数并不会带来生存益处。

1.介绍

在慢性肾脏疾病(CKD)中，氧化应激经常发生，并被认为是CKD进展和CKD相关并发症和死亡率的发病机制中的一个中心机制[1］．特别是透析患者显示出更高的死亡率，并与一般人群患者心血管死亡率与透析治疗是高10〜20倍[2］．氧化应激描述了反应性氧物种的形成与过氧化氢和过氧化氢的形成，以及抗氧化剂防御系统[3.］．由于炎症或降低的抗氧化能力导致抗氧化能力降低的活性氧物质的产量增加，导致蛋白质，碳水化合物和氨基酸的脂质过氧化和氧化[4.］．反应性氧物种是常规副产物的细胞新陈代谢[5.］．据估计，线粒体消耗的1至3％的氧被降低到反应性氧等如超氧化物阴离子，其由分子氧的单电子减少产生[6.那7.］．超氧化物歧化酶（SOD）催化超氧化物阴离子对氧气和过氧化氢的歧化，因此代表了主要的抗氧化防御机制[8.］．在哺乳动物中存在不同的超氧化物歧化酶亚型:超氧化物歧化酶1 (SOD1，胞质铜锌超氧化物歧化酶)、超氧化物歧化酶2和超氧化物歧化酶3 (SOD3，细胞外铜锌超氧化物歧化酶)(综述见Fukai和Ushio-Fukai [9.]）。超氧化物歧化酶2（SOD2，锰超氧化物歧化酶）是三种同种型中的一个，位于线粒体[10.］．

早期对突变小鼠模型的研究表明，sod在线粒体中的重要性[11.那12.]. 在纯合子突变小鼠（Sod−/−) SOD2蛋白的完全缺失导致进一步的线粒体酶受损，随后动物在出生后1至20天内死亡。杂合Sod2+/− 小鼠表现出氧化应激增加[12.］．

在慢性肾脏疾病，据报约有SOD2酶对比结果。而在尿毒症大鼠模型Lim等。发现在肝脏Finch等人减少SOD2蛋白质含量。发现增加SOD2蛋白质在肾脏[13.那14.］．在人CKD SOD2中，研究迄今为止，迄今为止，基因表达在外周白细胞中分析。Akiyama等。在Zaza等人的同时，在健康受试者和CKD或CKD和血液透析治疗患者之间没有发现SOD2基因表达的显着差异。在15例腹膜透析患者中​​报道了与健康对照相比，SOD2基因表达明显高度高[15.那16.］．SOD2蛋白在CKD以及有关SOD2蛋白含量死亡率分析分析所缺乏的。

因此，我们研究了CKD患者的SOD2蛋白质含量和基因表达，并分析了CKD阶段5例血液透析治疗患者的存活率与SOD2蛋白相关。

2。材料和方法

共调查了81名连续接受维护性血液透析的5期慢性肾脏疾病患者，120名未接受血液透析治疗的1-5期慢性肾脏疾病患者，以及13名健康对照组。每个受试者均获得书面知情同意，并由当地伦理委员会给予伦理批准。血液透析患者每周使用生物相容膜透析3次，每次4-5小时。血液透析患者的血液样本在血液透析开始前采集。

我们研究了外周血中的单核细胞，因为这些细胞对CKD患者特别感兴趣。单核-巨噬细胞系参与CKD的不同致病过程：全身炎症[17.]，血管疾病和动脉粥样硬化[18.-21.]，肾损伤[22.]，以及免疫功能受损[23.］．使用针对CD14膜抗原（Invitrogen Dynal，Norway）的初级单克隆抗体的超顺磁聚苯乙烯珠粒从肝素化血液中分离单核细胞，并在Hanks平衡盐溶液（HBSS）中洗涤几次。

通过蛋白质印迹单核细胞在均匀化缓冲液中裂解单核细胞（含有50mmol / L Tris-HCl，pH8; 100mmol / L NaCl，100mmol / L.β-巯基乙醇，50 mmol/L氟化钠，2 mmol/L乙二胺四乙酸和完整的迷你蛋白酶抑制剂鸡尾酒（罗氏诊断；德国）；蛋白质用12.5%十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）在150℃下分离 静置90分钟，转移至纯硝化纤维素膜（Biorad；美国）。用奥德赛封闭缓冲液（Licor biosciences；与抗超氧化物歧化酶2（SOD2）和β-肌动蛋白（Abcam）的一级抗体一起孵育。用HBSS洗涤后，用Alexa Fluor680别藻蓝蛋白荧光标记（MoBiTec，美国）或IRDye800CW红外荧光染料标记（biomol，德国）二级抗体孵育膜。使用奥德赛红外成像系统（Licor biosciences；（美国）700 纳米或800 激发波长680 nm的发射 纳米或780 纳米。我们的实验证实了人类单核细胞中使用的SOD2和β-肌动蛋白抗体的特异性。

为了检测硝基葡萄丝氨酸，膜用奥冬奈封闭缓冲液（LicoSies; USA）封闭，并与对硝基葡萄酒（Chemicon，Millipore; USA）的一抗孵育。用HBSS洗涤后，将膜与辣根过氧化物酶 - 缀合的抗兔二抗（Dakocytomation;丹麦）一起温育。使用ECL化学发光系统（Amersham，USA）进行可视化。

为了定量SOD2蛋白质含量，我们对我们的组最近描述的单核细胞中的细胞西部测定进行[24.］．该方法提供了可以用初生抗体检测的蛋白质（蛋白质物种）的不同后期改性和未加入的形式的总和测量。我们在关于超氧化物歧化酶1（SOD1）蛋白质物种的出版物中证明了这一概念，在那里我们研究了CKD患者单核细胞中的SOD1蛋白质含量与二维凝胶电泳平行。后者透露，我们在细胞内检测中蛋白质含量的SOD1和分析覆盖了至少6种SOD1蛋白质[25.］．

将96个孔板中的人单核细胞用TRITON X100透化，并用针对SOD2和β-肌动蛋白（ABCAM）的初级抗体掺入2小时。洗涤步骤后，用相应的第二抗体（参见下文）将单核细胞与1小时合辛。成像在700nm或800nm发射以680nm或780nm的激发波长进行。SOD2的蛋白质含量总是标准化为相同细胞的β-肌动蛋白蛋白含量。进行对照实验，而不孵育一抗。

用于活化和抑制实验vorbol-myristate - 乙酸酯（PMA，Sigma-Aldrich，终浓度100ng / ml）和4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶-1- oxyl（Tempol，Sigma-Aldrich，最终浓度100. μ.M），使用（温育时间3小时）。

根据制造商的描述进行RNA分离，转录和定量实时PCR（高纯RNA分离试剂盒，转录器第一链CDNA合成试剂盒，LightCycler®FaststartDNAMasterPlus Sybr Green I套件; Roche;德国）。使用以下用于实时PCR的引物：SOD2 / NM_000636:F-5'- GGT GGT猫ATC AAT CAT AG -3';R-5′-agt gga ata agg ttt gtt gt-3′（260 英国石油公司）；Beta-Actin / NM_001101：F-5'- AAC TGC TTA GCA CCC CCC CCC -3';R-5′- atg acc ttg ccc aca gcc tt -3′ (200 bp);使用LightCycler 2.0仪器（德国罗氏诊断公司）的PCR条件如下：95°C下10分钟 在95°C条件下进行10分钟和40次循环 s55°C（对于SOD2）或60°C（对于β-肌动蛋白）持续10天 s温度为72℃，温度为10℃ s计算SOD2 mRNA表达相对于管家基因β-肌动蛋白mRNA表达的标准化比率，包括效率校正和校准标准化。PCR产物也在1.0%琼脂糖凝胶上进行大小分级，并通过溴化乙锭染色进行可视化。

2．1.统计数据

数据以中位数和四分位数范围给出。组间数据比较采用Mann-Whitney检验或Kruskal-Wallis检验和Dunn多重比较后检验（视情况而定）。使用对数秩检验（GraphPad prism软件，5.0版，GraphPad软件，加利福尼亚州圣地亚哥）比较Kaplan-Meier生存曲线。所有的统计检验都是双侧的。双重价值小于0.05被认为是统计学意义的。

结果

我们在慢性肾疾病（CKD）和健康对照中使用细胞内测定（表中给出的受试者特征，研究了从慢性肾疾病（CKD）和健康对照的单核细胞中的超氧化物歧化酶2（SOD2）蛋白质1）。首先，通过Western印迹显示我们实验中使用的SOD2和β-肌动蛋白抗体的特异性（图1（a））。我们在单核细胞中证明了SOD2和β-肌动蛋白蛋白质检测，其中分子量为21kDa和41kDa。数字1（b）以来自健康对照对象的单核细胞，具有CKD的患者的单核细胞和血液透析患者（每个受试者的四丙烯测定），显示单核细胞中SOD2和β-肌动蛋白蛋白的代表性蛋白酶类西部测定。

接下来，针对所有CKD阶段的患者分析SOD2蛋白质含量，血液透析治疗患者和健康对照。数字2显示了SOD2蛋白含量的总结数据，该蛋白含量随着肾小球滤过率的下降而下降，直到CKD 4期。相比之下，没有接受血液透析治疗或同时接受血液透析治疗的5期CKD患者则再次表现出较高的SOD2蛋白含量，从而形成j形图案。Kruskal-Wallis分析表明，SOD2蛋白质含量在各组间的分布差异显著(）。

除了量化蛋白质含量外，我们研究了血液透析患者的单核细胞中的SOD2基因表达，CKD患者和健康对照受试者。数字3（a）和3（b）从血液透析患者，具有CKD的患者和对照对象的典型扩增和熔融曲线和管家基因β-肌动蛋白mRNA和对照组。PCR产物的大小在1.0％琼脂糖凝胶上分离并被溴化乙锭染色（图3（c））。来自CKD和健康对照受试者的SOD2 mRNA表达水平如图所示4.。单核细胞中的相对SOD2至β-肌动蛋白基因表达表达为比例。虽然似乎是从健康到CKD阶段4患者增加SOD2基因表达的趋势，但Kruskal-Wallis分析没有显示出在组之间的SOD2基因表达的分布的显着差异（）。

由于我们没有检测到SOD2基因表达的变化来解释我们在SOD2蛋白含量中发现的差异，所以我们研究了单核细胞中细胞超氧化物产生增加对SOD2蛋白含量的影响。为了刺激细胞超氧化物的产生，在有或没有拟sod Tempol的情况下用PMA处理单个核细胞。数字5.显示与PMA的细胞孵育后SOD2蛋白的变化，没有TEMPOL。与PMA孵育后，在基线（1.00（0.98-1.02）的细胞中SOD2的蛋白质含量（0.82（0.77-0.86）;）虽然加入Tempol显着增加了SOD2蛋白质含量（1.22（1.02-1.44;）;每个）。

我们还进行了SDS-PAGE和Western blot分析，以寻找在健康受试者(H)和CKD 4期(CKD)和CKD 5期(HD)患者中sod蛋白的硝基酪氨酸修饰。抗硝基酪氨酸抗体未检测到SOD2预期位点的蛋白染色(补充图1(C))http://dx.doi.org/10.1155/2016/7423249.）。

最后，我们对CKD 5期血液透析患者单核细胞SOD2蛋白含量与全因死亡率之间的关系感兴趣。我们将患者分为SOD2蛋白低于中位数的组和SOD2蛋白高于中位数的组（SOD2/β肌动蛋白=42.54）。桌子2显示了这两个患者组的临床参数的比较。如图所示6.血液透析患者在外周血单核细胞中较低的血液透析患者（Chi Square，6.25;通过日志排名测试）。

4。讨论

我们研究了CKD患者单核细胞中的SOD2基因表达和蛋白质含量。此外，在血液透析患者中​​，据报道，据报道高的全因和心血管死亡率，我们分析了SOD2蛋白质含量与死亡率之间的关系。我们研究中的主要发现如下：（）SOD2蛋白质含量显示与健康对照相比具有显着较低值的J曲线图案，直至CKD阶段4在CKD阶段5中的较高SOD2蛋白含量和血液透析处理患者再次进行。（）基团之间的SOD2基因表达在组之间没有显着差异。（)在接受血液透析治疗的患者中，SOD2蛋白含量高于中值与较高的死亡率相关。

两者都是我们研究中SOD2蛋白质含量和基因表达的结果是有趣的。在早期的研究中，我们的小组研究了CKD患者单核细胞中胞质超氧化物歧化酶同种型（SOD1）的基因表达和蛋白质含量。与SOD2相比，CKD中的SOD1蛋白减少，显示出血液透析治疗患者的最低蛋白质含量;CKD中的SOD1基因表达增加，血液透析患者具有很高的意义[25.]. 这些结果得到了文献的支持。在血液透析患者的外周血单个核细胞中，与健康对照组相比，SOD1 mRNA显著增加，而SOD2 mRNA与对照组无显著差异[15.］．CKD中SODS的不同基因表达可以通过SOD1和SOD2之间的基因调控的多种差异来解释（审查见MIAO和St. CLAIR [26.]). 关于我们目前研究中发现的CKD 3期和4期SOD2蛋白含量降低，文献提出了不同的解释。CKD中的两个因素可促进蛋白质的降解：氧化应激和尿毒症。已经描述了SOD2蛋白质的氧化修饰。我们自己的westernblot分析并不表明CKD中SOD2的酪氨酸硝化，尽管精细分析需要对CKD患者和健康受试者的SOD2蛋白进行质谱分析。而一些使用重组SOD2蛋白的作者在用过氧亚硝酸盐处理后表现出酪氨酸硝化和酪氨酸氧化[27.]，髓母细胞瘤从细胞SOD2蛋白质种类的蛋白质的生化分析显示色氨酸氧化和组氨酸氧化作用，但没有酪氨酸硝化[28.］．因此，需要分析每种致病病症的氧化SOD2修饰。通过相邻的SOD2蛋白质降解和SOD2酶活性可以揭示进一步的见解。

我们在目前研究表明在调节SOD 2蛋白质含量中的反应性氧物种的研究表明，因为我们观察到单核细胞中的PMA诱导的SOD 2蛋白减少，其可通过用SOD模拟潮热剂处理而被废除。此外，可能涉及提高尿素环境中的SOD2蛋白质降解。显示SOD2蛋白被泛素 - 蛋白质途径降解[29.］．通过泛素 - 蛋白质途径的CKD蛋白质降解增强[30.那31.］．通常，从其它细胞类型的已知为SOD2翻译后蛋白修饰，也应考虑为单核细胞。这些酪氨酸硝化酪氨酸氧化[27.，组氨酸和色氨酸氧化[28.乙酰化（审查见Zou等人。[32.]）和泛素灭绝[29.］．

大量研究表明，信使RNA（mRNA）分析量化的基因表达与蛋白质含量量化之间的相关性通常是有限的（综述见[33.那34.]）。具体地，对于蛋白质含量的变化，但未改变的mRNA水平的调节或蛋白质降解的调节变化可以是潜在的机制。

如上所述的以下条件：降低mRNA水平，但恒定的蛋白质含量[35.]恒定mRNA水平，但由于蛋白质降解增加而降低蛋白质含量[36.]，和恒定mRNA水平但是增加了蛋白质含量，由于减少蛋白质降解[37.］．此外，我们自己的小组向慢性肾病患者的单核细胞中的超氧化物歧化酶1显示出MRNA水平增加，与过量的超氧化物歧化酶1蛋白质含量[25.］．

与我们观察到的CKD 3和CKD 4相比，晚期CKD (CKD5伴和不伴血液透析)中SOD2蛋白含量增加并导致SOD2蛋白含量呈j形的机制尚不清楚。在这方面，令人感兴趣的是，在尿毒症大鼠中报道的sod蛋白上调可被维生素D受体激动剂逆转[14.］．由于晚期尿毒症是1,25-二羟基维生素D缺乏症，但也具有维生素D受体缺乏和功能障碍，维生素D受体相关的尿毒症效应可以参与我们观察到的SOD2蛋白的J形型蛋白质[38.］．

最后，我们观察到SOD蛋白含量低于该患者组中位数的血液透析患者比SOD蛋白含量高于中位数的患者生存率更高。这一观察的潜在机制尚不清楚，但考虑到上述与维生素D代谢的联系，较高的sod蛋白含量可能与更严重的尿毒症维生素D受体信号转导障碍有关。

在未来的实验中，有必要使用2 de，质谱和免疫印迹识别潜在的SOD2蛋白质修饰。

综上所述，我们的研究表明，随着肾功能损害程度的增加，SOD2蛋白含量发生显著变化。我们还证明，与我们自己以前的研究以及其他许多研究小组一样，在临床实验研究中，对基因表达和蛋白质含量的平行研究是必不可少的。最后，我们首次报道了血液透析治疗的CKD患者SOD2蛋白含量及其与生存率的关系。

利益争夺

作者声明无利益冲突存在。

作者的贡献

凯瑟琳·克鲁格和沈健林对这项工作做出了同样的贡献。

补充材料

参考

1. N. D.Vaziri，M.DiCus，N.D .Ho，L.Boroujerdi-rad和R.K.Sindhu，“超氧化物歧化酶的氧化应激和肾功能不全的NADPH氧化酶”，“国际肾脏，卷。63，否。1，pp。179-185,2003。浏览：出版商网站|谷歌学术
2. RN福利，P。s帕弗雷和M。JSarnak，“慢性肾脏疾病中心血管疾病的流行病学，”美国肾病学会杂志，卷。9，补充12，PP。S16-S23，1998。浏览：谷歌学术
3. J.加勒“在慢性肾功能衰竭的氧化应激，”肾移植透析，卷。16，不。11，pp。2135-2137，2001。浏览：出版商网站|谷歌学术
4. J.希默尔法布，P. Stenvinkel，T.A。Ikizler和R. M.哈基姆“在尿毒症大象：氧化应激，如尿毒症心血管疾病的统一概念，”国际肾脏，卷。62，没有。5，第1524至1538年，2002年。浏览：出版商网站|谷歌学术
5. V. AFONSO，R. Champy，D. Mitrovic，P.Collin和A. Lomri，“反应性氧气种类和超氧化物歧义酶：在关节疾病中的作用”关节骨质脊柱，卷。74，没有。4，第324-329，2007。浏览：出版商网站|谷歌学术
6. B. M. Babior，R. S. Kipnes，和J. T. Curnutte，“生物防御机制。由超，一个潜在的杀菌剂的白细胞生产”临床调查杂志号，第52卷。3，页741-744,1973。浏览：出版商网站|谷歌学术
7. I.G.Muñoz，J.F.Moran，M.Bocana和G. Montoya，“真核铁超氧歧化酶的晶体结构表明在催化期间的Intersubunit合作，”蛋白质科学，卷。14，不。2，pp。387-394,2005。浏览：出版商网站|谷歌学术
8. I. Fridovich，“超氧化物的生物学效应”生物化学和生物物理学档案，卷。247，没有。1，pp。1-11,1986。浏览：出版商网站|谷歌学术
9. T.Fukai和M. Ushio-Fukai，“超氧化物歧化酶：在氧化还原信号传导，血管功能和疾病中的作用”抗氧化剂和氧化还原信号，卷。15，不。6，第1583至1606年，2011。浏览：出版商网站|谷歌学术
10. F. J. O. Paludo，I. J. Bristot，C. S. ALHO，D. P. Gelain，和J. C. F.莫雷拉，的“效果47C.等位基因（RS4880） 的SOD2在外周血单核细胞中产生细胞内反应物种的基因，无脂多糖诱导，“自由基研究，第48卷，第2期，第190-199页，2014年。浏览：出版商网站|谷歌学术
11. Y. Li，T.O.黄，E.J.Carlson等，“在缺乏锰超氧化物歧化酶的突变小鼠中扩张心肌病和新生儿致死性，”自然遗传学，卷。11，不。4，pp。376-381,9995。浏览：出版商网站|谷歌学术
12. H. van Remmen，C.萨尔瓦多，H.杨，T.T.Huang，C.J.Epstein和A. Richardson，“杂合锰超氧化物歧化酶敲除小鼠的抗氧化状态的表征”生物化学和生物物理学档案，卷。363，没有。1，pp。91-97,1999。浏览：出版商网站|谷歌学术
13. C. S.ILIM和N.D.Vaziri，“肾功能不全的铁和氧化胁迫，”美国肾脏病杂志，第24卷，第2期6，页569-575,2004。浏览：出版商网站|谷歌学术
14. J.L.FINCH，E.B.Suarez，K. Husain等，“将ACE抑制剂和VDR激活剂结合在肾小球粥样硬化，蛋白尿和肾氧化胁迫下的血糖性大鼠，”美国生理学 - 肾生理学杂志，卷。302，没有。1，pp。F141-F149,2012。浏览：出版商网站|谷歌学术
15. S. Akiyama，M. Inagaki，M. Tsuji等，“血液透析治疗Cu / Zn超氧化物歧化酶诱导的”MRNA研究“肾临临床实践，卷。99，没有。4，PP。C107-C114,2005。浏览：出版商网站|谷歌学术
16. G. Zaza，S. Granaata，V.Masola等，“透析慢性肾病患者氧化代谢的核编码基因下调，”普罗斯一体，卷。8，不。10，2013年物品ID e77847,2013。浏览：出版商网站|谷歌学术
17. J.P.考兰，P.Kotanko，A. M.W. J. Schols，P.G.Shiels，和P. Stenvinkel，“慢性肾病和过早衰老”自然评论肾脏学，卷。10，不。12，PP。732-742,2014。浏览：出版商网站|谷歌学术
18. T. Watanabe，K. Yasunari，M. Nakamura和K. Maeda，“颈动脉内膜介质厚度和活性氧物种在高血压患者中形成，”人类高血压杂志，卷。20，没有。5，pp。336-340,2006。浏览：出版商网站|谷歌学术
19. C. Ulrich，G. H. Heine，M.K.Gerhart，H.Köhler和M.Girndt，“Proinflampatory CD14⁺CD16⁺单核细胞与肾移植患者亚临床动脉粥样硬化有关，”美国移植杂志，卷。8，不。1，pp。103-110,2008。浏览：出版商网站|谷歌学术
20. 五杆，M，F，林顿和S.法齐奥，“动脉粥样硬化慢性肾脏病：巨噬细胞的作用，”自然评论肾脏学，卷。7，不。1，pp。45-54,2011。浏览：出版商网站|谷歌学术
21. S. Zewinger，T. Schumann，D. Fliser，以及T. Sper，“CKD相关血管疾病的先天免疫”，肾移植透析，2015年。浏览：出版商网站|谷歌学术
22. “巨噬细胞在肾脏损伤、炎症和纤维化中的作用”，生理，第30卷，第2期3, pp. 183-194, 2015。浏览：出版商网站|谷歌学术
23. M. A. Verkade，C.J。面包车Druningen，L. M. B. Vaessen，D. A.海塞林克，W.魏玛，和M. G. H. Betjes，“在患有严重的慢性肾脏疾病的单核细胞衍生的树突细胞的功能性损伤，”肾移植透析，卷。22，没有。1，第128-138，2007。浏览：出版商网站|谷歌学术
24. K. Krueger, K. Koch, A. Jühling, M. Tepel，和A. Scholze，“硫代硫酸盐硫转移酶(rhodanese)的低表达预测血液透析患者的死亡率，”临床生物化学，卷。43，不。1-2，PP。95-101，2010。浏览：出版商网站|谷歌学术
25. A. Scholze，K.Krueger，M. Diedrich等，“慢性肾病患者单核细胞中的超氧化物歧化酶1”，氨基酸，卷。41，没有。2，pp。427-438，2011。浏览：出版商网站|谷歌学术
26. L.苗族D. K.圣克莱尔，“超氧化物歧化酶基因调节：在疾病的影响，”自由基生物学与医学，卷。47，没有。4，第344-356，2009。浏览：出版商网站|谷歌学术
27. L.A.Macmillan-Crow和J.A.Thompson，“酪氨酸的修饰和活性位点锰超氧化物歧化酶突变体（Y34F）的酪氨酸修饰和失活，”生物化学和生物物理学档案，卷。366，没有。1，pp。82-88,1999。浏览：出版商网站|谷歌学术
28. J. P. P.约翰，A.波拉克和G的Lubec，“锰超氧化物歧化酶髓母细胞瘤细胞的完全测序和氧化修饰，”电泳，第30卷，第2期17，第3006-3016，2009。浏览：出版商网站|谷歌学术
29. 多发性硬化症。Kim，S.Ramakrishna，K。 -林，J.-H.金，和K.-h.BAEK，“线粒体超氧化物歧化酶SOD2的蛋白质稳定性受USP36调节”杂志细胞生物化学，卷。112，没有。2，pp。498-508，2011。浏览：出版商网站|谷歌学术
30. H.Peng，J.Cao，R. Yu等，“CKD通过RHO相关蛋白激酶1激活刺激肌肉蛋白质损失，”美国肾病学会杂志，卷。27，不。2，第509-519，2016。浏览：出版商网站|谷歌学术
31. J. Luo，A. Liang，M. Liang等，“血清糖皮质激素调节激酶1阻断CKD诱导的肌肉浪费通过失活Foxo3a和Smad2 / 3，“美国肾病学会杂志，2016年。浏览：出版商网站|谷歌学术
32. X. Zou, C. A. Santa-Maria, J. O'Brien, D. Gius, and Y. Zhu, “Manganese superoxide dismutase acetylation and dysregulation, due to loss of SIRT3 activity, promote a luminal B-like breast carcinogenic-permissive phenotype,”抗氧化剂和氧化还原信号，2016年。浏览：出版商网站|谷歌学术
33. M.A.Nevepper，“蛋白质组学和肾脏”美国肾病学会杂志，第13卷，第2期5，pp。1398-1408,2002。浏览：出版商网站|谷歌学术
34. B.Schwanhäusser，D. Busse，N. Li等，“哺乳动物基因表达控制的全球量化”，自然，卷。473，没有。7347，PP。337-342，2011。浏览：出版商网站|谷歌学术
35. N.高桥，H. L. Brooks, J. B. Wade等人，“肾脏特异性的NaK2Cl共转运基因杂合子中断的转录后补偿”美国肾病学会杂志，第13卷，第2期3，第604-610页，2002。浏览：谷歌学术
36. R. Tan，J. Zhang，X. Tan，X. Zhang，J. Yang和Y. Liu，“阻塞性肾病的鼻子表达下调是通过增强的泛素依赖性降解介导的，”美国肾病学会杂志，卷。17，不。10，pp。2781-2791,2006。浏览：出版商网站|谷歌学术
37. G. Monteleone，G. del Vecchio Blanco，I. Monteleone等，“炎症肠道疾病患者的肠道中的Smad7后转录调节”，胃肠病学，卷。129，没有。5，pp。1420-1429,2005。浏览：出版商网站|谷歌学术
38. A. S. Dusso和M.德本，“不良肾维护维生素d内分泌系统也妨碍维生素d肾脏保护的：在肾脏疾病下降通道，”国际肾脏，第79卷，第7期，第715-7292011页。浏览：出版商网站|谷歌学术

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