文摘
Alhagi maurorum(骆驼刺植物)是一种很有前途的药用植物由于黄酮类化合物和酚类化合物作为主要成分的内容。没有以前的研究一直在进行答:maurorum提取作为一个抗氧化压力和/或治疗糖尿病药草STZ-induced DM大鼠。因此,四组老鼠作为控制(C),分配STZ-induced DM (D)和STZ-induced DM补充300毫克/公斤的水提物(我们)或ethanolic提取(EE)答:maurorum。血浆葡萄糖水平,TG, TC,低密度和VLDL-C, MDA、胆红素及转氨酶的活动和GR在糖尿病组显著增加。此外,糖尿病老鼠都出现严重的葡萄糖耐受不良,肝脏组织病理学变化。此外,胰岛素水平、总蛋白、谷胱甘肽,高密度脂蛋白胆固醇和SOD的活动,GPx,销售税降低糖尿病大鼠与对照组相比。的摄入答:maurorum提取降低了血糖水平在糖尿病大鼠OGTT相比,和所有测试参数恢复正常水平除了胰岛素水平不能恢复。得出答:maurorum提取物降低血糖水平升高,高脂血症和抑制氧化应激引起的大鼠糖尿病。
1。介绍
糖尿病的发病率增加,每年世界各地和糖尿病患者的数量将从3.82亿病人在2013年到5.92亿年的2035年1]。大多数糖尿病患者非胰岛素依赖和相对较小的比例(7 - 10%)的糖尿病患者胰岛素依赖型糖尿病(近年来)2]。1型糖尿病(近年来)是一种慢性疾病,自身免疫性破坏的结果β胰腺的肽。因此,缺乏胰岛素和高血糖的主要结果是近年来(3]。这可能会产生一个数组的干扰葡萄糖和脂质稳态导致高血糖和血脂异常4]。持续高血糖糖尿病导致产量的增加氧自由基从自然氧化葡萄糖5)和糖基化的蛋白质(6)导致氧化应激与几个相关的并发症包括芥蒂狠、心血管疾病、失明、肾衰竭、疾病和癌症3,7]。
最近,从天然草药药物配方,用于治疗糖尿病和其他疾病的药物,引起了许多研究者的注意8]。Alhagi maurorum(豆科)也叫骆驼刺植物或aqool骆驼是一个有利的食物。广泛分布在亚洲,中东,欧洲,非洲9]。作为发汗剂,利尿、祛痰剂,溃疡治疗(10]。从它的叶子是用于类风湿治疗和泻药11,12]。水提取物的根是用来扩大输尿管和消除肾结石,而methanolic提取用作止泻的代理(13)和草药止咳糖浆(12]。答:maurorum物种包含脂肪酸、甾醇类、黄酮类、香豆素类、生物碱、维生素。此外,六大类黄酮苷ethanolic提取的孤立答:maurorum(10]。此外,答:maurorum根含羽扇豆醇(11),这是用作反血管增生,抗氧化,抗炎剂(14,15]。
Streptozotocin-treated老鼠发达的临床特征和迹象,类似发现在1型糖尿病16]。我们所知,没有先前的研究前进行调查ethanolic和水提取物的抗糖尿病的作用答:maurorum通过测定血糖水平、自由基、抗氧化酶和血脂STZ-induced糖尿病大鼠。因此,本研究进行调查的有效性答:maurorum提取STZ-induced糖尿病老鼠和评估他们的治疗糖尿病的潜在治疗。
2。方法和材料
2.1。准备Ethanolic和水提取物Alhagi maurorum
骆驼刺植物(答:maurorum)收集Wadi El Natrun区域(埃及)后的协议荒野地区主任El-Beheira省Salama El敢和身份验证,植物生态学、植物学、微生物学部门,教授亚历山大大学理学院。我们确认没有特定的许可要求收集这种植物从Wadi El Natrun地区,因为它是一个沙漠。此外,我们确认这一领域的研究并没有造成任何危险的任何植物。天线的部分答:maurorum收集,用自来水洗了三次,两次用蒸馏水,干在树荫下,磨细粉由威利密尔(模型4-GMI,德国)。地面植物(100克)和1升70%乙醇回流的双重蒸馏水或1升1小时。过滤后,溶剂被减压在40°C下使用旋转蒸发器(Buchi,型号462,德国)和冷冻干燥,冷冻干燥器获得干提取。水悬浮液从乙醇或水提取物及其管理准备到老鼠口服。
2.2。总酚和类黄酮含量的测定Alhagi maurorum提取
ethanolic和水提取物的总酚含量答:maurorumFolin-Ciocalteu测定的方法(17]。没食子酸(0 - 0.9 mg / dL)酚类化合物作为标准。数据被表示为毫克没食子酸当量/ g冻干粉。总类黄酮含量测定用氯化铝比色方法如前所述[18]。芦丁(0-20 mg / L)是类黄酮作为标准。结果表示为毫克芦丁等价物/ g冻干粉。
2.3。链脲霉素诱导糖尿病
1型糖尿病诱导的大鼠刚做好的腹腔内注射链脲霉素(STZ)的剂量45毫克/公斤0.1柠檬酸缓冲溶液溶解在BW (19]。三天注射STZ后,从尾静脉血液被撤回,葡萄糖水平确定。老鼠糖尿病时空腹血糖水平超过200 mg / dL。
2.4。实验设计
四十健康、成熟的雄性动物屋提供的白化病老鼠的医学院,埃及亚历山大大学。老鼠的平均重量是140克和维护在wire-bottomed的笼子里。老鼠可以免费获得食物和水,并保持在°C和50 - 60%湿度。批准的协议处理的动物是道德准则规定的核磁共振,埃及亚历山大,亚历山大大学。经过诱导的糖尿病,糖尿病老鼠被随机分配到3组(10大鼠):(1)糖尿病组(:享有);(2)糖尿病组接受300毫克/公斤水提取物答:maurorum(提出);和(3)糖尿病组接受300毫克/公斤体重ethanolic提取的答:maurorum(EE-group)。十大鼠收到蒸馏水,被用来作为对照组(留存)。的答:maurorum提取是悬浮在蒸馏水和口服药物剂量为四个星期。老鼠禁食过夜,颈椎错位安乐死。血液样本被收集在EDTA-coated管。肝脏和胰脏器官被移除,用生理盐水洗净,并存储在−80°C。
2.5。口服葡萄糖耐量试验和生化参数的测定
短暂,通宵禁食后,老鼠intragastrically富含葡萄糖(2 g / kg)。从尾静脉血样撤回0,30、60、90和120分钟,血糖水平是决定使用商业套装被Tietz [20.]。非放射性分析被用于测定大鼠的血浆胰岛素水平根据制造商的协议(21]。甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白胆固醇,天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)和总胆红素测定血浆使用商业套装从生物系统公司(埃及)。蛋白质含量是决定根据洛瑞的方法等。22]。
2.6。评价氧化应激标记
脂质过氧化是评估通过测量硫代巴比土酸活性物质(TBARS)据德雷伯和哈德利的方法23]。减少谷胱甘肽测定spectrophotometrically描述,谢赫et al。24]。肝脏超氧化物歧化酶估计的方法Marklund和g Marklund [25]。肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶活动浮在表面的测量根据Flohe和Gunzler[的方法26]。肝脏谷胱甘肽还原酶的活性是化验根据史密斯的方法等。27]。glutathione-S-transferase活动是根据测量的方法Habig et al。28]。
2.7。组织学分析
胰腺和肝脏组织标本的不同组立即在10%福尔马林固定,然后接受传统的等级的酒精和二甲苯。组织病理学检查,6M标本厚度的胰腺和肝脏都沾染了苏木精和伊红())染色(29日]。
2.8。统计分析
用SPSS软件包进行统计分析(版本17.0)。数据分析使用单向方差分析(方差分析)和所有组的差异意味着测试用最小显著差(LSD)。被认为具有统计显著性概率值小于0.05。
3所示。结果
3.1。总类黄酮和酚类的内容Alhagi提取
本研究的结果显示,总酚和类黄酮化合物的浓度的水提物答:maurorum没食子酸(毫克)和芸香苷(分别mg)等效/ 100 g dried-weight虽然ethanolic提取的内容答:maurorum从这些组件是没食子酸(毫克)和芸香苷(mg)等效/ 100 g dried-weight分别。
3.2。Alhagi提取和生化参数
活动的ALT和AST和总胆红素水平显著增加()在糖尿病大鼠与对照组相比。水和ethanolic提取的答:maurorum表现出显著改善糖尿病大鼠的肝脏功能(表1)。糖尿病大鼠的空腹血糖水平显著()高于对照组。然而,政府的水和/或ethanolic提取的答:maurorum糖尿病组显著(恢复他们的空腹血糖水平控制的价值。血浆胰岛素水平显著()降低糖尿病组与对照组相比。然而,我们和EE没有糖尿病组血浆胰岛素水平恢复到正常水平(图1)。
时间进程血糖水平的变化在口服葡萄糖耐量试验(0 - 120分钟)的团体都是显示在图2。血糖水平达到管理的最大30分钟后每公斤体重2 g葡萄糖,然后降低到初始水平在2小时内所有组除了糖尿病大鼠显示严重的葡萄糖耐受不良在整个实验周期(0 - 120分钟)。然而,治疗糖尿病大鼠300毫克/公斤体重的水或ethanolic提取的答:maurorum显著()降低了血糖水平正常水平(图2)。
血浆甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(低密度脂蛋白),和VLDL-cholesterol (VLDL-C)在糖尿病大鼠相比,增加了控制老鼠(表1)。另一方面,脂蛋白胆固醇(hdl - c)水平下降在糖尿病大鼠与对照组相比。口服水或ethanolic提取的答:maurorum导致显著()降低TG、TC、低密度和VLDL-C相比糖尿病组和增加高密度脂蛋白胆固醇浓度在我们——和EE-treated糖尿病组相比,参与糖尿病组(表1)。
3.3。Alhagi提取和氧化应激
MDA和GR活性的显著水平()在肝组织中增加糖尿病大鼠对照组相比(表2)。然而,SOD的肝脏谷胱甘肽和活动内容,GPx和销售税明显()降低糖尿病大鼠对照组相比(表2)。我们和EE治疗显著()减少肝脏MDA水平和GR活性比糖尿病组。另外,治疗糖尿病大鼠与我们或EE改善肝组织的抗氧化状态通过增加谷胱甘肽水平和SOD的活动,GPx,销售税相比糖尿病组(表2)。
3.4。组织病理学研究
3.4.1。胰腺组织
控制老鼠揭示正常胰腺架构;密集的胰腺腺泡和圆形的细胞核组成的金字塔形状的细胞(a), pale-stained正常胰岛腺泡之间的(是)分散保存了大量的细胞质和细胞核正常小叶间结缔组织隔膜(红色箭头),图3(一):数据3(B1),3(B2),3(B3) STZ-diabetic组大鼠显示腺泡模式的扰动结构,致密的原子核的腺泡细胞(黑色箭头),严重损害;扩张、增厚和堵塞的血管(虚线箭头和红色箭头);和有液泡的腺泡(绿色箭头)。小岛与不规则的轮廓,有液泡的细胞质(圆),和退化β胰岛细胞(绿色箭头)胰管周围炎症细胞浸润(申)(数据3(C)和3(D)): STZ +我们和STZ + EE-treated胰腺腺泡的老鼠表现出轻微的组织学改变。
3.4.2。肝组织
肝组织的组织学检查在图表示4。光显微图肝组织肝细胞的正常结构和中央静脉和正常对照组血液正弦曲线(图4(一)),而STZ-diabetic老鼠显示严重的病理变化包括拥堵和扩张的肝血窦。此外,门户地区显示胆道上皮细胞的增生和肝动脉壁厚。淋巴细胞的焦聚合也注意到在糖尿病大鼠。肝细胞变性和坏死的变化透露。漫空泡的,水肿的退化和过度增大的枯氏细胞被认为在糖尿病大鼠(图4 (b))。然而,治疗糖尿病大鼠的肝脏答:maurorum提取显著减少,减毒的组织学变化严重的适度的更改(数字4 (c)和4 (d))。
(一)
(b)
(c)
(d)
4所示。讨论
从古代,糖尿病患者使用药用植物维持血糖水平(30.]。在这方面,目前的研究扩展到显示的影响答:maurorum提取物对血糖水平、氧化应激和脂质在STZ-induced糖尿病大鼠(31日]。1型糖尿病是由于缺乏引起的胰岛素分泌(32]。符合这一发现,目前的研究显示,胰岛素水平显著降低糖尿病大鼠治疗后没有恢复与水或ethanolic提取的答:maurorum。的血糖过低的影响答:maurorum提取并非归因于再生β的肽或胰岛素分泌增加。证实了这一发现的组织学分析糖尿病大鼠胰腺组织因为显示胰岛数量的减少和退化β肽。同意目前的研究中,选择性的坏死β肽胰岛STZ-treated老鼠被发现的33]。人们已经发现一个变量的变化在糖尿病大鼠胰腺胰岛的晶核和其中一些出现固缩的核由于凝结和收缩的核材料34),这是在协议与本研究的发现。然而,治疗糖尿病的老鼠答:maurorum只提取显示略有衰减胰腺腺泡。
众所周知,1型糖尿病高血糖在动物和人类的结果增加肝葡萄糖输出和外围的减少葡萄糖利用率(35]。因为答:maurorum提取不影响β肽再生或胰岛素分泌,这些提取物的降糖作用可能是由于没食子酸的存在和芦丁作为这些提取物的主要成分。有趣的是,没食子酸增加葡萄糖摄取和增强GLUT4的易位浓度与没食子酸的量。的血糖过低的影响答:maurorum酚类化合物的提取可能是由于存在这些提取物。支持我们的发现,人们已经发现,通过不同的机制(没食子酸增加葡萄糖摄取36]。此外,据报道,槲皮素、类黄酮答:maurorum,增加葡萄糖摄取和增加GLUT4转位(37]。此外,它已经发现,芦丁为血糖控制作为一个潜在的代理通过胰岛素依赖型受体激酶活性增强,从而诱导的胰岛素信号通路导致增加GLUT4转位和增加葡萄糖摄取[38]。在骨骼肌,芦丁显著增加细胞内钙离子浓度可能诱导葡萄糖transporter-4 (GLUT-4)易位顺向葡萄糖吸收(39]。
肝脏疾病是糖尿病人群(更普遍40]。活动的AST和ALT和胆红素的水平增加了糖尿病大鼠。然而,治疗STZ-induced糖尿病大鼠与水或ethanolic提取的答:maurorum减少AST和ALT活动和总胆红素水平相比,糖尿病大鼠的发现是一致的瓶等。41]。王亚南的答:maurorum提取可能是由于ethanolic提取物中的黄酮结构的存在(42]。
高甘油三酯血症和低水平的高密度脂蛋白是最常见的血脂异常与糖尿病相关的(43]。在目前的研究中,糖尿病大鼠表现出高甘油三酯血症、高胆固醇血症、低密度脂蛋白胆固醇升高,VLDL-C升高,高密度脂蛋白胆固醇水平降低与对照组相比。然而,治疗糖尿病大鼠与水或乙醇提取物改善LDL / HDL比率及其降低TG, TC, VLDL-C水平。这个改进可能是因为羽扇豆醇的存在,的一个组成部分答:maurorum提取,它扮演着一个重要的角色在血脂正常化15]。
氧化应激在糖尿病动物的水平升高是由于自然氧化葡萄糖,蛋白质糖化,脂质过氧化作用和低抗氧化酶的活动(44]。符合这一发现,目前的研究表明,MDA水平,增加谷胱甘肽水平,降低和减少抗氧化酶的活动,如SOD、GPx,和销售税STZ-induced糖尿病大鼠的肝脏。这些与其他先前的研究结果一致表明,谷胱甘肽水平降低糖尿病的不同阶段(45]。增强氧化应激的机制可能是由于蛋白糖化和抑制抗氧化酶活动(超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶)(46]。此外,它已经发现,亚麻子油饮食调节表达和诱导活动的猫和SOD、GPx的蛋白表达,而鱼油饮食诱导的活动和表达肝脏的猫streptozotocin-nicotinamide诱导糖尿病大鼠(47]。在最近的研究中,答:maurorum提取缓解氧化应激诱导抗氧化酶的活动(GPx和销售税)抑制糖尿病大鼠。这些结果与其他研究报道称,协议的ethanolic提取物答:maurorum改善氧化应激增加谷胱甘肽的水平和降低MDA水平(41]。此外,抗氧化的效果答:maurorum可能是由于黄酮类化合物的存在48槲皮素等),保护人体肠道细胞和血红蛋白氧化应激攻击(49]。
谷胱甘肽的耗竭水平在糖尿病大鼠可能会由于其利用缓解氧化应激在糖尿病50]。因此,GR在糖尿病大鼠活动的增加补偿的谷胱甘肽水平降低通过减少氧化谷胱甘肽(GSSG),这可能是由于增加的存在高水平的自由基在DM。另一方面,治疗糖尿病的老鼠答:maurorum提取谷胱甘肽水平升高和恢复活动的谷胱甘肽还原酶在糖尿病大鼠的正常水平。肝脏是经常损坏在糖尿病,由于增加水平的氧化应激和免疫功能的失调16]。肝脏的组织学异常的退行性变化本地化和渗透STZ-induced hepatocytic核被发现的糖尿病。另一方面,治疗糖尿病大鼠的肝脏答:maurorum提取显示大部分的这些变化从严重减到温和的改变是一致的发现Alqasoumi et al。51]。
总之,答:maurorum提取血糖水平降低,增加在糖尿病大鼠抗氧化酶活动。此外,答:maurorum提取物抑制自由基和血脂异常在糖尿病大鼠的水平,因此可以减轻TD的并发症。进一步研究活性成分的分离答:maurorum需要治疗糖尿病。
缩写
| 糖尿病: | 糖尿病 |
| SOD: | 超氧化物歧化酶 |
| GPx: | 谷胱甘肽过氧化物酶 |
| 格: | 谷胱甘肽还原酶 |
| 销售税: | Glutathione-S-transferase |
| TG: | 三酰甘油 |
| TC: | 总胆固醇 |
| 密度: | 低密度脂蛋白胆固醇 |
| 高密度脂蛋白胆固醇: | 高密度脂蛋白胆固醇 |
| VLDL-C: | 极低密度脂蛋白胆固醇 |
| ROS: | 活性氧 |
| MDA: | 丙二醛 |
| STZ: | 链脲霉素 |
| ALT: | 丙氨酸转氨酶 |
| AST: | 天冬氨酸转氨酶 |
| OGTT: | 口服葡萄糖耐量试验。 |
利益冲突
作者宣称没有利益冲突有关的出版。