卵巢衰老样表型在高腺癌诱导的多囊卵巢模型中

摘要

有显着类似的症状，效应器，并且在大多数卵巢老化和多囊卵巢综合征（PCOS）之间的特性的共性。尽管氧化应激在PCOS和老化的发病机制中批准作用，但尚未调查PCO和老龄化之间的联系。In this study we investigated the possible exhibition of ovarian aging phenotype in murine model of PCO induced by daily oral administration of letrozole (1 mg/kg body weight) for 21 consecutive days in the female Wistar rats. Hyperandrogenization showed irregular cycles and histopathological characteristics of PCO which was associated with a significant increase in lipid peroxidation (LPO) and reactive oxygen species (ROS) and decrease in total antioxidant capacity (TAC) in serum and ovary. Moreover, serum testosterone, insulin and tumor necrosis factor-alpha (TNF-α.)水平升高，卵巢基质金属蛋白酶-2 (MMP-2)水平升高，雌二醇和孕酮水平下降。有趣的是，几乎所有这些发现都与(卵巢)衰老特征相同，表明大鼠高雄激素诱导的PCO与卵巢衰老样表型相关。据我们所知，这是第一个提供证据的有关老化现象的PCO。

1.介绍

如今，夫妻大大推迟生育自己的晚生育年龄期间由于越来越多的社会经济需求。此外，社区的产业化又增加了多种环境风险因素可能导致的病症，疾病和各种器官的癌症。

已经显示，暴露于寿命期间某些环境因素和化学品可能会加速进展朝向官能生殖期末[1].因此，若干环境因素已被证实有助于生殖老化[2]．女性生殖系统的独特之处在于，它在生理上表现出更快的衰老速度，当它达到衰老状态时，身体的其他器官通常保持健康。

卵巢是女性生殖系统中最重要的器官之一，也是通过在卵泡的数量的连续减少，卵母细胞的质量下降，月经不规则性，卵巢激素缺乏，无论是导致的更年期是该过程中的最后一步[3.]．

似乎有几种机制涉及老化，氧化应激（OS）被认为是最重要的一种[4.].OS是由于在存在最低抗氧化活性的情况下过度形成氧衍生和/或氮衍生的有毒产品而发生的[5.]．

在中等浓度下，活性氧物质（ROS）调节女性生殖生理功能，如卵泡，卵母细胞成熟，类固醇生成，黄体功能，和黄体溶解[5.]然而，卵巢老化过程中OS的增加可能导致卵泡闭锁以及卵母细胞数量和质量的降低[6.]．大量理论解释，长期过量产生的有毒自由基、抗氧化剂不足以及暴露于内分泌干扰物质中可能与生殖障碍有关，最终导致性腺加速衰老和生殖过早老化。

多囊卵巢综合征（PCOS）是一种炎症性疾病，是育龄妇女无排卵性不孕的主要原因，其特征是雄激素分泌增加、月经不调、排卵少/无排卵、多囊卵巢（PCO）、不孕和妊娠并发症[7.]卵巢囊肿是由于激素失衡而形成的，具有闭锁的充满液体的卵泡结构和薄颗粒细胞壁[8.]．不仅PCOS患者展示生殖特征，而且还制定了2型糖尿病和心血管疾病的几种代谢风险，包括腹部肥胖，胰岛素抵抗（IR），高胰岛素血症，葡萄糖不耐受，高血压和代谢综合征[9.]．多囊卵巢综合征有几种不同的诊断标准。因此，不论种族，多囊卵巢综合征在女性功能性生殖期的患病率不同。根据鹿特丹标准，估计多囊卵巢综合征的平均患病率约为18%，过高[10.]．

由于其发病机制复杂和无法识别的病因，没有预防措施已经实施PCOS日期。OS和PCOS和抗氧化剂的潜在好处的发病机制慢性低度炎症的作用一直是近来研究的主题[11.那12.]在大多数多囊卵巢综合征患者中，高水平的雄激素被认为是第一步。高雄激素血症会损害卵巢中发育中卵泡的成熟，从而导致发育中的膀胱发生[13.]．广泛的动物性实验已表明，低剂量的通过芳雄激素与雌激素的结果青春期前或青春期曝光在长期生殖后果，包括恒定动情周期，hyposteroidogenesis，无排卵，和在成年囊状卵泡的发展[14.]．此外，成年期暴露于外源性雌激素对卵巢生理和内分泌有有害影响，最终可能导致膀胱发生、卵泡池丧失和早期衰老[15.]．有一些证据意味着老化和PCO之间可能存在关联。例如，最近表明，D-半乳糖诱导的小鼠中加速的老化与卵巢囊肠同时同时进行[16.]．然而，高雄激素血症和卵巢加速衰老之间的因果关系尚未明确认识。因此，有必要了解哪些激素、细胞、分子、代谢、环境和/或遗传因素导致了这种情况，以及它们如何影响卵泡发育。我们最近记录了氧化/亚硝化应激和炎症反应在高雄激素诱导的大鼠PCO发病机制中的潜在作用[17.那18.]．然而，存在于对卵巢老化的高腺化效应和受干扰的卵泡生成和囊胞发生的分子基础的可忽略的信息。

总体而言，它应该是相当大的兴趣，调查高雄激素PCO大鼠卵巢衰老的可能发展。因此，本研究的主要目的是通过细胞，分子，病理，生化和内分泌评估研究卵巢老化与高雄激素血症引起的PCO的关联。

2。材料和方法

2.1。试剂

除非另有说明，所有化学品购自Sigma-Aldrich公司（美国）。的Krebs-Ringer碳酸氢盐（KRB）和乙酸乙酯，购自Fluka（USA），大鼠TNF-αα.自Bender医学系统（奥地利），大鼠MMP-2 ELISA kitfrom Cusabio生物技术有限公司，（中国），类固醇激素放射免疫测定试剂盒从的Neogen（USA），并从SOHA制药有限公司曲唑（伊朗）ELISA试剂盒中的用于这项研究。

２.２.老鼠

成年女性白化Wistar.大鼠（180-200只） g） 本研究采用正常发情周期，将动物随机分为两组，每组10只，所有大鼠均为正常发情周期随意获得颗粒食品和自来水，并将其置于相对湿度为40-55%和12%的受控温度（22-25℃）下 h光和暗周期。只有雌性至少连续3次4-5次 在整个治疗过程中，每天对动物称重并进行阴道涂片检查（以确定生殖周期的阶段）直到尸检当天，所有的老鼠都按照国家卫生指南接受治疗，研究协议得到了德黑兰医学大学（TUMs）审查委员会的批准。

2.3.性周期

为了研究治疗是否改变了发情周期中，通过阴道冲洗每日获得，并且在治疗期间评估显微镜涂片。正如在以前的研究确定[17.那18.]在涂片上连续至少10天观察角质细胞被定义为持续发情，表明无排卵和卵泡囊肿的发展。在实验开始时，所有的老鼠都有规律的周期。

2.4。治疗方法

对照组10只大鼠口服0.9% NaCl溶液，每日1次。治疗组10只大鼠灌胃1 mg/kg浓度的来曲唑，口服0.9% NaCl溶液。来曲唑(伊朗德黑兰SOHA制药公司)的有效剂量是根据之前的实验选择的。治疗期为21天[17.那18.]．

2.5。采样

最后一次治疗后，所有大鼠称重并用乙醚麻醉，直接从心脏采集血样。血样在1000℃下离心 ×g，15分钟 最小和收集的血清储存在−70°C，直到检测性类固醇（雌二醇、孕酮和睾酮）以及胰岛素、TNF-α.麻醉后处死所有大鼠，称量新鲜解剖的卵巢，并按如下方式进行分组：每组5只立即固定在4%（w/v）多聚甲醛中进行组织病理学检查，而其余组织立即在室温下冷冻−70°C，直到用于测定基质金属蛋白酶2（MMP-2）和氧化剂抗氧化标记物。

2.6。组织病理学研究

通过福尔马林固定，石蜡嵌入，纵向和连续切割来自每组的五个卵巢。 μ.载有旋转线机的载体滑块，用H＆E（苏木精和曙红）染色，并通过两名蒙蔽的两人进行评估。在每个卵巢部分中只计算含有卵母细胞核的卵泡。卵泡是特征性分为原始卵泡（由单层颗粒细胞包围的卵母细胞和直径<100 μ.m） 生长中的卵泡（卵母细胞被几层颗粒细胞包围，没有腔，直径为100到300 μ.m） 或graafian卵泡（被卵丘细胞和几层颗粒细胞包围的外周卵母细胞，一个腔，直径>300 μ.m）。通过颗粒细胞层中散射的单杆菌核，颗粒细胞层分散，卵母细胞层的脱落，卵母细胞的损失，卵母细胞破裂，Zona pellucida（ZP）的破坏以及细胞碎片的破坏以及细胞碎片的破坏以及细胞碎片的存在的损失在卵泡的窦。根据其严重程度，组织病理学变化也分类为（ - ）至（+++），其中（ - ）不是突出或明显的病理发现，并且得分（+），（++）和（+++）分别代表了33％，<33-66％和> 66％的贫恶卵泡的病理发现。考虑到组织病理学发现的平均值，并且当两位观察者之间存在分歧时，对一些组织学特征的解释进行解释时，案件被重新审视，结论是通过共识的结论。

2.7。氧化应激生物标志物的评估

为了评估对卵巢氧化剂，抗氧化平衡hyperandrogenization的效果，TAC的LPO指数，ROS和水平进行了分析。

2.7.1。细胞脂质过氧化的测定（LPO）

蜂窝LPO用硫代巴比土酸反应物质在血液和卵巢评估（TBARS）测定法如在我们以前的工作中描述19.]．将LPO水平表示为丙二醛（MDA）的生产的酸加热反应过程中的程度。数据报告为μ.g / mg蛋白质。

2.7.2。活性氧（ROS）的测定

将分离的卵巢置于含有0.25 M蔗糖、20 mM KCl、1.0 mM EDTA和5.0 mM HEPES (pH 7.4)的线粒体分离缓冲液中，重量:体积比1:10。组织被彻底切碎并在0-4°C下用手动玻璃均质器均质。用一部分匀浆和血清来测定ROS的产生，用荧光DCFH进行一些修饰，如在我们实验室中设置的那样。缓冲液含有130mm KCl, 5mm MgCl₂， 20mm NaH₂人事军官_4.Tris-HCl, 0.1 mM FeCl_3.那1。7. mM ADP, and 0.1 mM NADPH and 30 mM glucose (pH 7.4) with a total volume of 200 μ.L.含有5%的分析缓冲液 μ.M DCFH-二乙酸酯（DCFH-DA）用5溶于1.25mM甲醇 μ.M终甲醇浓度。匀浆,50μ.L (〜1 mg蛋白)加入任一检测培养基中，在37℃下孵育15分钟。这使得DCFH- da被细胞内酯酶破坏，生成游离DCFH。在488 nm的激发波长和525 nm的发射波长下，跟踪从DCFH氧化到指示氧化剂生成的二氯荧光素(DCF)的速率，并使用ELISA F-2000荧光光谱仪每6分钟测量一次，持续60分钟。在不同浓度的蛋白存在下，至少在60 min内，该速率呈线性关系，校正了DCFH的自氧化速率[20.]．

2.7.3。总铁离子还原抗氧化能力分析

通过测定卵巢和血清的减铁能力来评价其总抗氧化能力³⁺Fe.²⁺为了做到这一点，我们使用了TPTZ，它与Fe相互作用²⁺导致形成蓝色，最大吸光度为593nm。数据表达为Mmol / L铁离子，每毫克蛋白质还原成黑色蛋白质，如我们以前的工作所述[21.]．

2.8。血清胰岛素的评价作为代谢生物标志物

8小时禁食后，通过如前所述的酶联免疫测定（ELISA）技术分析血清胰岛素浓度[20.]．

2.9。评估炎症生物标志物

tnf-的浓度α.使用大鼠夹心ELISA试剂盒进行了评估，并表示为pg / mg蛋白质。据的程序，是在形成彩色产品成比例的细胞因子存在于样品中的量。一种fter adding stop solution to terminate the reaction, absorbance was measured at 450 nm as the primary wavelength and 620 nm as the reference wavelength [22.]．为了确定TNF-α的浓度α.每个蛋白质的单位，使用Bradford方法用浓考马斯蓝作为试剂和BSA作为标准来测量蛋白质含量。

2.10。基质金属蛋白酶2 /明胶酶A（MMP-2）的评价

在-80℃下保存的卵巢样品被温热至-20℃并称重。以重量适当量制备的磷酸盐缓冲液（pH7.4）稀释10次。组织样品均匀化，然后以2000×g在冷藏离心机中离心15分钟，将其上清液转移到微管中。使用商业定量免疫测定套件分析MMP-2;（Cusabio Biotech Co.，Newark，NJ，美国）。根据制造商的指导方针进行测定。

2.11.性类固醇的评价

卵巢cystogenesis诱导后卵巢类固醇激素合成的功能是通过竞争性放射免疫法测定，使用商业RIA试剂盒（的Neogen，美国）在我们以往的研究[描述18.那19.]．

2.12。统计分析

对两组的几个参数进行比较时采用方差分析。对照组与PCO组的差异以学生评分计算-测试。所有分析均使用StatsDirect 3.0.97进行。一种被认为是统计上显著。结果表示为平均值±SD。

结果

3.1。身体和卵巢体重（g）

结果表明，大鼠hyperandrogenized获得显著（）更多的身体和相比于对照卵巢重量（表1)．

３．２．性周期

关于性周期，所有的对照大鼠规律动情周期与连续两个周期之间4-5天的预期时间。然而，所有hyperandrogenized大鼠完全无环并表​​现出不断发情。

３．３．形态学和组织病理学表现

卵巢的组织学特征见表1和2。控制女性的所有卵巢有黄体（CL）在确认正常排卵和在不同的发展阶段，包括初级和次级卵泡，graafian卵泡包含卵泡，并在最近形成的CL（图1（a）和1(b))。在高雄激素水平的女性中，明显没有大的次级和三级卵泡以及CL，可见多个卵泡囊肿，在卵巢表面形成囊状液体1和2；数字1(c))。此外，在高雄激素化的卵巢中，闭锁的窦前和窦卵泡数量增加，卵巢膜间质组织增生(见表)2和数字1（d））。此外，发现大部分胃窦卵泡中的颗粒细胞被丁黄（图1（E））和许多卵母细胞用透明带（ZP）碎片在闭锁卵泡迹象（图畸形1（e）和1(f))。

3.4。os生物标志物

在卵巢组织和血清中，PCO组的LPO和ROS显著高于对照组（表1）3.)．卵巢和血清抗氧化活性均显著降低()PCO大鼠与对照组相比。

3.5。炎症，代谢生物标志物

该hyperandrogenized PCO大鼠表现出显着增加（）在血清中TNF-αα.与对照相比，浓度（相对、职责)。血清胰岛素浓度显著()PCO大鼠高雄激素化后与对照组相比增加(相对；桌子3.)．

3.6。MMP-2活动

卵巢MMP-2的平均组织水平见表3..统计显著性差异(）中的溶液控制的MMP-2的值和hyperandrogenized大鼠之间找到（相对、职责)。

3.7。性甾体激素水平

如表所示4.与对照组相比，高雄激素血症显著增加血清睾酮浓度(那相对、职责)。同时，血清浓度的雌二醇（那相对）和孕激素（那相对（与对照相比，高腺化大鼠的大鼠显着降低。

4。讨论

老化和繁殖生物学是两种现代生物医学研究的迅速增长的领域。老化过程不仅对科学家而且对公共卫生感兴趣;因此，这是许多研究的研究问题，包括生殖生物学领域的研究。然而，衰老与生殖障碍的关联尚未得到很好的研究和记录。在本研究中，我们调查了PCO作为最普遍的女性生殖障碍之一的卵巢老化特征的证据。

在这项研究中，我们显示出与来曲唑诱导的雄激素过多症在治疗由于阻断雄激素转化为雌二醇这导致更高的血清睾酮浓度（高雄激素血症）。高雄激素血症与卵巢cystogenesis相关联，并且显著增加LPO和总ROS（OS的标志物），并在大鼠PCO降低TAC（抗氧化能力的标记物）。此外，合成或炎症介质等TNF-α的释放α.通过高腺化化显着增加胰岛素和MMP-2活性的浓度。这些分子和生化改变与与对照组相比，与卵泡发生的微观特征显着破坏的组织学证据一致。组织病理学揭示了因异常卵泡发生而在高床过生大鼠中缺乏Cl形成，无循环，无循环性的大幅增加，这是由于异常卵泡发生。卵巢重量增加似乎是PCO病例卵巢内流体填充囊肿和大型胃肠卵泡增加的结果。几乎所有这些发现都有趣的是，与讨论的（卵巢）衰老鉴定的特征有意义地发现。有趣的是，我们观察到患有卵巢衰老的卵巢蛋白衰老的卵巢老化症状和效应之间存在密切关联，因此所有这些特征都与最近的几项研究中的（卵巢）老化有关[3.那4.那6.那7.那16.]．

4.1。低雌激素水平及雄激素的高浓度（高雄激素血症），导致加速卵泡闭锁

来曲唑块芳构睾酮对雌二醇导致血清雌二醇浓度的显著减少，因此nonaromatizable雄激素的积累[17.那18.]．此外，由于CL的发展或由于无排卵而导致的成熟CL的数量减少，可预测PCO患者血清孕酮浓度的下降。这些激素紊乱与持续的发情表现有关。已知雌二醇在预防OS中发挥重要作用，因此较低的雌二醇浓度与卵泡OS的增加有关[23.]．雌二醇水平有意义的耗竭导致细胞凋亡和氧化DNA损伤。同样，由于雌二醇浓度降低而导致的升高的OS将使颗粒细胞促使颗粒细胞在预保育卵泡中的细胞凋亡[24.]．因此，很可能降低的雌二醇水平，至少部分地，刺激渐进卵泡闭锁和易患过早衰老卵巢。

4.2。胰岛素的高浓度（高胰岛素血症），导致高雄激素血症和加速卵泡闭锁

多囊卵巢综合征与高胰岛素血症。高胰岛素血症已经确定刺激卵巢cystogenesis导致在囊状卵泡的大小，并在卵巢[的尺寸的增加25.]胰岛素过量刺激卵泡膜细胞产生雄激素，提高血清游离睾酮水平，从而使卵巢高雄激素血症永久化[26.]．在本研究中，卵巢卵泡膜间质细胞的生长是有高浓度的睾酮和胰岛素的与对照相比是一致的。卵巢间质（卵泡膜间质组织）是雄激素和正常卵巢功能，包括卵泡和类固醇生成的主要来源，这需要有效的机制调节卵泡膜间质生长和功能。然而，在PCOS，卵巢卵泡膜间质组织是增生性由于增加的细胞增殖和/或细胞凋亡减少其伴随雄激素oversynthesis [27.]．因此，雄激素可能会增强颗粒细胞的凋亡，导致滤泡闭锁率的增加[28.]．

4.3。增加tnf-α.活动产生持续的炎症状态，进卵巢Cystogenesis和卵泡闭锁

在本研究中，PCO大鼠具有更高的血清TNF-α.浓度比控制。高腺癌和血清之间存在阳性关系 -α.  excessive concentration as hallmarks in patients with PCOS [11.那12.]．TNF-α.被认为是炎症级联的引发剂。此外，较高的TNF-α.生产涉及OS [14.那29.]逮捕卵泡发展[30.]和相关因素与卵母细胞的质量差[31.]．类似的情况在雌性大鼠，肿瘤坏死因子，其中水平被确定α.作为衰老的实验模型，旧卵巢切除的动物升高了LPO [32.]因此，在高雄激素血症状态下，OS和促炎细胞因子，特别是TNF之间的相互作用-α.似乎发挥卵巢cystogenesis，卵泡闭锁和卵巢早衰功能障碍的进展举足轻重的作用，在本研究中是显而易见的。

与衰老和TNF-有关α.，TNF的年龄依赖性增加α.发现在衰老加速的小鼠中[33.]．已有研究表明，衰老在机制上与促炎细胞因子(如TNF-)的基因表达有关α.，导致炎症和细胞凋亡34.]．此外，它已经很好地确定肿瘤坏死因子α.能够通过刺激延长炎症来显着增加细胞衰老[35.]．

4.4。卵巢内毒性自由基的过量产生与TAC的消耗

活性氧在多囊卵巢综合征发病机制中的作用已成为众多研究和新证据的主题，这些研究和新证据表明活性氧和炎症通路的激活在多囊卵巢综合征中起着核心作用[5.那11.那12.]．在本研究中，我们发现，hyperandrogenization显著上升LPO和总ROS（OS的标志），并在PCO大鼠降低TAC（抗氧化能力的标志）。老化已经显示出与涉及有毒的自由基生产过剩和降低的抗氧化活性[受损的线粒体功能被机械地相关联的36.]．

4.5。交替在细胞外基质（ECM）

本研究报告的主要发现之一是，与对照组相比，高雄激素化增加了大鼠MMP-2的活化。基质金属蛋白酶（MMPs）它是一组基质降解酶，参与各种ECM蛋白的降解，在各种生理过程以及疾病的病理状态中起着重要作用。研究表明，卵泡破裂需要局部降解顶端ECM，部分由卵巢MMPs控制MMP-2被认为在颗粒细胞与卵泡膜细胞的分离中起着重要作用[37.]．在我们的实验中，MMP-2水平的升高与之前的一份报告一致，该报告显示患有多囊卵巢综合征的肥胖女性MMP-2水平升高[38.]．在多囊卵巢综合征女性中，循环MMPs的失衡与循环中过量的雄激素有关[39.]．在这方面，MMP-2表达已显示雄激素通过雄激素受体反式激活进行刺激的[40]．基质金属蛋白酶和发育中的卵泡质量之间也存在相关性[41]．而且，从PCOS患者黄素颗粒细胞（作为闭锁特性）已获准表现出更大的MMP-2的活性[41]．在老化方面，一些金属蛋白酶在衰老细胞中过表达已经报道[42]．因此，可以合理地推测，MMP-2可以与PCOS例不适当卵泡闭锁最终导致卵巢要衰老比正常条件更快相关联。

4.6。卵巢衰老样表型在高雄激素血症的诱导PCO

卵巢衰老过程的特征是卵巢中排卵前卵泡池的消失，由于CL缺乏形成、无排卵和性周期活动中断而停止女性的生育能力[43]．业已证明，在任何阶段进行性卵泡闭锁通过细胞凋亡可以从卵巢滤泡加速耗竭和导致过早衰老生殖[44]．此外，作为PCO常见模型之一的高腺化似乎表现出一些老化特异性特征。支持该受试者，已显示产后雄激素诱导卵巢间质腺体的加速老化和大型嗜睡剂转化为囊性卵泡，作为高腺化和老化大鼠之间的常见相似性[45]．据信，与各种疾病相关的更年期是通过雌二醇水平的降低介导的[46]．有趣的是，慢性雌二醇缺乏和较高的雄激素水平（如被看见在我们的结果）的状况会导致如肥胖心血管障碍[许多与年龄有关的变化，代谢综合征，糖尿病，骨骼异常，以及47]所有这些疾病和紊乱都可以在PCOS妇女身上观察到[7.]．考虑到事实和这项研究的结果，它不会令人惊讶的认为PCO（S）和卵巢老化特别是有类似的症状，效应，和通用在大多数它们的特性。尽管这项研究没有调查，也有一些研究结果支持这一想法。例如，最近在加速老化，不规则动情周期和卵巢囊肿，卵巢衰竭的常见症状的小鼠模型中，被确定[16.]．另一个很好的例子是晚期糖基化终产物(AGEs)。AGEs的积累是许多衰老原因中众所周知的[48]．的AGEs直接有助于蛋白质损伤，中毒性应力，并增加了炎症反应[49]最近的研究表明，多囊卵巢综合征（PCOS）与体内AGEs增加之间存在明显的联系，因此AGEs及其受体在多囊卵巢的颗粒细胞中高度表达[50]．年龄似乎与Anoviration和hyperdrogenism相关[51]．

总之，根据上述讨论，在来想到的第一概念是PCOS状况期间，卵母细胞和其他卵巢细胞OS，和激素交替的恒定曝光易患卵巢卵泡的闭锁导致耗尽卵巢具有减少的数量的渐进率完整的毛囊。因此，保留的卵巢的卵母细胞将被较早高雄激素条件洗涤后，按照acyclicity和恒定发情的过早发生。此外，超生理长效雄激素微环境，最终可能影响卵泡招募，发展和排卵导致早期卵巢衰老进程[15.]通过卵巢内环境的破坏。这是一种类似于卵巢过早/加速老化的现象。根据包括我们的报告在内的最新研究和基于当前数据，我们认为多囊卵巢综合征患者的高雄激素血症通过以下机制触发卵巢衰老：（1）雌二醇水平和高浓度雄激素的关键性降低导致卵泡闭锁加速；（2）TNF增加-α.活性，导致操作系统和持续的炎症状态;（3）配有TAC的耗尽沿着卵巢内毒性自由基的生产过剩。

尽管在我们的研究中观察到多囊卵巢综合征与高雄激素血症引起的多囊卵巢综合征和(卵巢)衰老的症状和效应物密切相关，但一些重要的问题可能会提出:多囊卵巢综合征与卵巢衰老的确切机制联系是什么?认为多囊卵巢综合征是危险个体卵巢衰老加速发展的原因之一，这合乎逻辑吗?总的来说，多囊卵巢综合征是一种独特而复杂的加速卵巢衰老现象吗?这是一个想法/假设，我们将在接下来的项目中仔细审查并适当地讨论作为一个研究问题。

5.结论

据我们所知，这是第一份提供PCO老化现象证据的报告伴随着持续发情、OS和促炎症状态的过早发作，可能通过内分泌干扰导致过早过渡到生殖衰老，并在卵巢水平上发展为加速衰老的特征之一。需要进一步的研究来阐明解释相似性的确切机制高雄激素血症导致PCO和卵巢老化。

利益冲突

作者有没有利益冲突的披露。

作者的贡献

这里介绍的工作是所有作者之间的协作进行。穆罕默德·阿明Rezvanfar定义的研究主题，设计方法和实验和起草的文件。哈比卜A. Shojaei萨阿迪参与的理念和编辑稿件。Maziar Gooshe和阿米尔Hosein Abdolghaffari cocarried了实验。玛丽亚姆Baeeri进行的实验室实验和分析数据。穆罕默德Abdollahi了这个想法，构思了研究，并编辑了手稿。

致谢

作者感谢TUMS部分支持。

参考

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