文摘

巨噬细胞主要由两个子集:M1子集促炎和抗炎M2。7-oxo-cholesterol,最丰富的胆固醇在动脉粥样硬化斑块自然氧化产品,可以斜M1和M2的平衡对促炎的概要文件。在目前的研究中,我们探索的能力多酚化合物白藜芦醇,以抵消7-oxo-cholesterol-triggered促炎在巨噬细胞信号。Resveratrol-pretreated人类被质疑7-oxo-cholesterol monocyte-derived M1和M2巨噬细胞的表型和内吞作用的能力和分析流式细胞术,对金属蛋白酶- 2 (MMP)和明胶zymography MMP-9,检查参与组成分泌腺和细胞因子,趋化因子,生长因子复合免疫测定。我们也调查了NF -κB信号通路。M1子集,白藜芦醇的差别阻碍了对这些CD16和upregulation MMP-2 7-oxo-cholesterol,而M2巨噬细胞它阻止了upregulation CD14, MMP-2, MMP-9的差别,对这些基因的内吞作用。白藜芦醇防止upregulation几种促炎和proangiogenic分子在两个子集。我们确定了调制的NF -κB作为一个潜在的机制涉及7-oxo-cholesterol和白藜芦醇的影响。我们的结果加强前发现白藜芦醇的免疫调节能力,突出其作为潜在的治疗或预防化合物,以抵消proatherogenic oxysterol信号在动脉粥样硬化斑块。

1。介绍

动脉粥样硬化是一种慢性炎症性疾病,其特征是积累(动脉粥样硬化斑块内的免疫细胞1,2),包括巨噬细胞的主要细胞成分(3]。人类动脉粥样硬化斑块由大量元素的混合物,主要是脂质氧化脂质,lipid-loaded巨噬细胞和平滑肌细胞,形成泡沫细胞。铭牌内容进行动态变化在斑块的进展,在一个常数与血液循环的互动(4]。动脉粥样硬化斑块的命运是高度依赖于招聘和monocyte-derived激活的巨噬细胞之间的平衡,在他们的血管壁的间隙5)和巨噬细胞的极化状态(6]。巨噬细胞M1和M2激活巨噬细胞的表型代表一个功能性的两极偏振状态(6),这可能会加速或减速动脉粥样硬化疾病进展通过点燃或冷却炎性反应。促炎M1,或经典激活子集,产生炎性细胞因子和活性氧的主要来源在动脉粥样硬化病变7,8]。平方米,或者极化巨噬细胞,是一个异构群显示抗炎细胞表型和似乎是解决炎症的关键(7,9]。可塑性是monocyte-macrophage谱系细胞的一个标志10]。分子和机制与可塑性和极化激活的巨噬细胞可能会提供一个创新的诊断和治疗方法的基础(10]。我们最近表明7-oxo-cholesterol,最丰富的胆固醇自氧化产品在动脉粥样硬化病变(11- - - - - -14),能够影响人类巨噬细胞极化通过扭曲M1和M2的平衡对促炎的概要文件(15]。因为在动脉粥样化形成炎性巨噬细胞发挥关键作用,斑块破裂,和随后的临床事件,这个新7-oxo-cholesterol-triggered抑制促炎通路使用治疗方法能够调节动脉粥样硬化斑块中的M1和M2巨噬细胞的平衡可能会提供有趣的治疗前景在减少动脉粥样硬化和/或预防斑块破裂。有新兴的证据表明,在当前西方疗法,许多选择和营养疗法可以调节免疫系统,破坏炎性级联通过多种机制,包括抗氧化效果,改变细胞信号传导,细胞因子和炎性介质16]。白藜芦醇,红酒和葡萄中含有的多酚化合物,起着潜在重要的作用在许多疾病(17]。它具有抗氧化、抗炎、抗增殖和抗血管新生的影响,许多信号通路是其分子目标之一。

抗炎和免疫调节作用,这个过程由白藜芦醇激活尚未明确,即使它似乎并不是机械地简单的非特异性抑制炎症(16]。

在这项研究中,我们研究了白藜芦醇的能力来对抗引发的促炎信号7-oxo-cholesterol M1和M2巨噬细胞子集,我们调查了一个潜在的机制与预防。通过流式细胞仪的使用,明胶zymography和多路复用免疫测定我们证明白藜芦醇能够抵消oxysterol-induced促炎的表型和功能变化在M1和M2的子集。

2。材料和方法

2.1。试剂

重组体人(rh)集落刺激因子(gm - csf)和rh巨噬细胞集落刺激因子(csf)从系统研发(明尼阿波利斯、锰)。胎牛血清(的边后卫)从Hyclone实验室(洛根,UT)。Anti-CD14-coated微来自Miltenyi研究(格拉德巴赫,德国)。从GIBCO RPMI 1640年(英国佩斯利)。藻红蛋白(PE)共轭单克隆抗体(mab) CD1a和人类白细胞antigen-D region-related (HLA-DR)和异硫氰酸荧光素(FITC)共轭马伯,CD16来自PharMingen(圣地亚哥,CA);allophycocyanin - (APC)共轭马伯CD14和CD163(克隆GHI / 61)来自BioLegend (CA)圣地亚哥。7-oxo-cholesterol、白藜芦醇和其他化学物质来自Sigma-Aldrich(意大利米兰)。白藜芦醇溶解在乙醇在50毫克/毫升和整除冻结在无菌条件下−80°C。

2.2。准备人力Monocyte-Derived M1和M2巨噬细胞

4健康献血者的血液样本从输血中心罗马Sapienza大学被用来获得外周血单核细胞(PBMCs)。依法进行的这项研究是1975年和1983年赫尔辛基宣言。

单核细胞是来自PBMCs,如前所述18]。总之,PBMCs被孤立的密度梯度(Lympholyte Cedarlane,牛津大学、英国)。CD14 +单核细胞被孵化PBMCs纯化anti-CD14-coated微,紧随其后的是排序与磁设备(MiniMacs, Miltenyi研究)。单核细胞在细胞培养诱导分化为6天菜(100毫米)(BD-Biosciences,圣地亚哥,CA),要么在rhGM-CSF (10 ng / mL)获取M1巨噬细胞或rhM-CSF (10 ng / mL)获得M2。细胞培养在8×10⁵细胞/毫升RPMI 1640 - 1%不重要的氨基酸,补充丙酮酸钠1%,50 U /毫升青霉素、50μg / mL链霉素,5×10⁻⁵M 2-mercaptoethanol, 10%的边后卫。

2.3。流仪Monocyte-Derived M1和M2巨噬细胞表型分析

流仪分析之前执行任何治疗证实M1和M2感应,后来用来评估白藜芦醇和7-oxo-cholesterol巨噬细胞表型的影响。表型特征的存在表面标记(,,,M1和,,,FACSCanto M2)进行了分析,利用CellDIVA软件(BD-Biosciences)。巨噬细胞是沾PE-conjugated HLA-DR马伯,CD16 FITC-conjugated马伯,APC-conjugated马伯,CD14和CD163(克隆GHI / 61)或与isotype-matched控制在4°C马伯30分钟。所有样本分析流式细胞术(FACSCanto BD-Biosciences)。

2.4。治疗M1和M2与白藜芦醇和接触7-Oxo-Cholesterol巨噬细胞

6天,收集巨噬细胞附着和7×10⁵细胞培养24孔板(BD-Biosciences)和治疗与否与白藜芦醇(30μ米)为1小时37°C, 5%的公司₂。白藜芦醇浓度选择的基础上初步剂量/响应实验使用浓度范围从3到80μm .然后用7-oxo-cholesterol细胞被刺激的乙醇(15μ米)20小时。LPS-treated细胞(100 ng / mL)被用作积极控制。巨噬细胞进行预处理或不与白藜芦醇和刺激7-oxo-cholesterol暴露于0.2%台盼蓝,然后计算在血细胞计数器来计算细胞生存能力和坏死细胞的百分比。

2.5。流仪分析巨噬细胞内吞作用

提供更多信息M1 / M2巨噬细胞歧视,我们研究了巨噬细胞甘露糖受体介导内吞作用如前所述[15]。总之,巨噬细胞治疗与否与白藜芦醇1小时37°C,然后用7-oxo-cholesterol刺激(15μ在37°C M) 20小时孵化(2×10⁵细胞/样本)与FITC-dextran(1毫克/毫升;分子质量40.000σ)30分钟在37°C。孵化后,巨噬细胞被洗两次与PBS和甲醛固定为1%。至少5×10³细胞/样本分析流式细胞术(FACSCanto BD-Biosciences)。

2.6。评估MMP-2,明胶Zymography MMP-9

白藜芦醇和7-oxo-cholesterol治疗对巨噬细胞功能的影响评估,确定金属蛋白酶活性。巨噬细胞培养上清液收集与白藜芦醇预处理后和刺激7-oxo-cholesterol (15μ米)。MMP-2和MMP-9活动是衡量明胶zymography如前所述[15]。细胞上清液受到聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds - page)。与明胶凝胶(10.5%)copolymerised (0.9%)。对于每一个样品,6μL细胞上清液中6μL加载缓冲区(Bio-Rad)加载本地条件下。电泳进行了使用mini-gel板装置迷你千变万化3 (Bio-Rad、米兰、意大利)以恒定电压为150 V。电泳后,凝胶在renaturating洗缓冲区(50 mM Tris-HCl Triton x - 100 2.5%, pH值7.5)1 h轨道振动器。然后,吻合孵化18 h在37°C三羟甲基氨基甲烷缓冲液pH值7.5 (0.15 M氯化钠,10毫米CaCl₂,0.02%的南₃在50 mM Tris-HCl)。凝胶被沾Coomassie蓝色和7%甲醇和5%醋酸使退色。酶活性的区域,出现清楚乐队在黑暗的背景下,量化使用ChemiDoc密度计(Bio-Rad大力神,CA)。为分析目的,图像是数字倒这乐队的集成报告为积极的价值观。像素密度确定后背景减法和用于计算集成密度的选择带报告为三种不同的测量的均值相同的凝胶为每个样本一式三份。

2.7。评估MMP-2 MMP-9西方墨点法

识别macrophage-derived MMP-2和9是由西方墨点法。上层清液受到10.5% sds - page,然后涂抹到聚偏二氟乙烯膜(Immobilon-P,微孔、Tullagreen、爱尔兰)。墨迹图与反MMP-2孵化或9 Abs(圣克鲁斯生物技术公司,圣克鲁斯,CA),然后与抗体HRP-coupled二级Ab (Bio-Rad大力神,CA)。免疫反应性与发射极耦合逻辑系统是由化学发光反应评估(Amersham,白金汉郡,英国),分析了ChemiDoc密度计(Bio-Rad)。

2.8。Secretome的细胞因子,趋化因子,生长因子在巨噬细胞文化上层清液

条件媒体收获和加工为细胞因子分析与自定义复制Bio-Rad Bio-Plex人类细胞因子il - 1受体拮抗剂(IL-1ra)试剂盒,il - 6,引发,il - 10、il - 12,粒细胞集落刺激因子(g - csf), gm - csf, interferon-inducible蛋白质(IP-10)、单核细胞化学引诱物蛋白1 (MCP-1)、巨噬细胞炎性蛋白1 -α(MIP-1α或MIP-1 CCL3)β(亚兰),监管和正常T细胞表达和分泌(咆哮),TNF -α和血管内皮生长因子(VEGF)根据制造商的指示(Bio-Rad大力神,CA)。数据获得在Bio-Rad Bio-Plex 200读者配备磁性工作站和分析使用Bio-Plex软件6.0版本(Bio-Rad)。价值观呈现变异系数超过10%被丢弃之前最后的数据分析。最低限度的检测IL-1ra (pg / mL)分别为4.89,0.23 il - 6,引发0.58,0.17 il - 10、il - 12 0.26, 0.1 g - csf, gm - csf 2.26, 1.83为IP-10 MIP-1 MCP-1 3.56, 2.38α2.69,MIP-1β8.84,0.49咆哮,TNF -α3.54对VEGF。

2.9。核因子-κB (NF -κB)易位

NF -κB (p65和p50)转录因子分析工具包(美国活跃的动机卡尔斯巴德,CA)是用于监控NF -κ如前所述B激活(19]。巨噬细胞治疗与否与白藜芦醇为30分钟37°C,然后用7-oxo-cholesterol刺激(15μ在37°C M) 1小时细胞溶解。蛋白质含量是量化,激活水平的p65和p50子单元在等量的溶解产物测定Abs针对子单元的使用绑定到包含NF -寡核苷酸κ结合位点B共识。

2.10。统计分析

平均值和标准偏差计算为每个变量的研究。所有的统计程序都由GraphPad棱镜软件(美国圣地亚哥,CA)。数据检测与Kolmogorov-Smirnov高斯分布测试。正态分布数据分析使用Bonferroni单向方差分析事后测试评估统计学意义在所有测试变量组与组之间的差异。值< 0.05被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

3.1。白藜芦醇可以防止7-Oxo-Cholesterol-Induced CD16和CD14 M1和M2巨噬细胞亚群的变化

白藜芦醇7-oxo-cholesterol-induced表型变化的影响在M1和M2巨噬细胞进行分化和激活的流仪分析表面标记CD14、CD16 CD163, HLA-DR(图1、表1)。减少CD16表达式()和增加HLA-DR表达式()观察M1子集,而M2子集显示CD14表达增加()。细胞治疗与白藜芦醇在挑战面前oxysterol阻止在M1和M2巨噬细胞CD14 upregulation差别CD16对这些(7-oxo-cholesterol +白藜芦醇与7-oxo-cholesterol: CD16,;CD14,)。白藜芦醇本身没有造成任何表面标记的变化。

3.2。白藜芦醇可以防止损伤7-Oxo-Cholesterol M2巨噬细胞内吞作用的反应

流仪分析表明,白藜芦醇预处理预防减少占用FITC-dextran M2巨噬细胞能力以应对7-oxo-cholesterol-treated M1 7-oxo-cholesterol而没有影响巨噬细胞内吞作用(图2)。白藜芦醇本身并没有改变如果M1和M2巨噬细胞的内吞作用的能力。

3.3。白藜芦醇可以防止7-Oxo-Cholesterol-Induced MMP-2 MMP-9生产M1和M2巨噬细胞子集

白藜芦醇对巨噬细胞功能的影响进行了研究,确定其调节能力应对7-oxo-cholesterol MMP-2和MMP-9生产。分析基本吻合的蛋白水解活性的巨噬细胞上清液表明,M1和M2巨噬细胞持续表达pro-MMP-2 (72 kDa)和pro -和活动形式的MMP-9(92和84 kDa)。7-oxo-cholesterol调节的表达MMP-2 M1和M2子集的MMP-9 M2(图子集3)。与白藜芦醇预处理细胞阻止upregulation MMP-2 M1和M2的MMP-9子集和M2巨噬细胞响应7-oxo-cholesterol ()(图3)。白藜芦醇本身没有造成任何金属蛋白酶表达的变化。免疫印迹显示72 kDa, 92 - 84 kDa gelatinolytic活动中观察到基本吻合与MMP-2 MMP-9,分别。

3.4。白藜芦醇可以防止7-Oxo-Cholesterol-Induced促炎和Proangiogenic分子生产M1和M2巨噬细胞子集

探讨白藜芦醇对促炎的影响巨噬细胞激活7-oxo-cholesterol,我们为细胞因子筛选检查参与组成分泌腺的概要,趋化因子,生长因子释放文化上层清液由M1和M2巨噬细胞治疗与否与白藜芦醇在刺激oxysterol(图3)。7-oxo-cholesterol强的促炎的能力引发显著upregulation M1细胞的细胞因子TNF -α和il - 6(图4(一))、趋化因子引发的CCL3,亚兰,咆哮,IP-10(图4 (b)),生长因子g - csf的gm - csf和VEGF(图4 (c))。也扭曲了M2细胞极化对M1-like表型细胞因子TNF -通过增加生产α的il - 12、il - 6,尤其是趋化因子引发,MCP-1, CCL3,亚兰,和咆哮,最后生长因子g - csf和VEGF的生产。它还增加了生产的抗炎细胞因子il - 10。

在M1巨噬细胞,白藜芦醇预处理明显阻止TNF -α和il - 6 upregulation 7-oxo-cholesterol观察到反应()。它还阻止了upregulation趋化因子引发的CCL-4,咆哮和生长因子的g - csf和gm - csf ()。

在M2巨噬细胞子集,白藜芦醇预处理显著预防肿瘤坏死因子-α()和il - 12 ()upregulation 7-oxo-cholesterol和增加il - 10 ()和IL-1ra生产()。它还阻止了引发,MCP-1 CCL3 (),CCL-4 (),咆哮,VEGF upregulation ()。白藜芦醇本身没有造成任何改变检查参与组成分泌腺的概要文件。

3.5。白藜芦醇可以防止NF -κB为了应对7-Oxo-Cholesterol激活

NF - 7-oxo-cholesterol治疗显著增加活跃κB p50和p65水平在M2巨噬细胞(图5)。它也倾向于增加p65水平M1子集,虽然不具有统计学意义。白藜芦醇预处理的巨噬细胞阻止活跃的upregulation p50和p65 7-oxo-cholesterol M2的子集。

4所示。讨论

在我们目前的研究表明,白藜芦醇,已知的抗氧化剂和抗炎天然酚类化合物(20.),具有免疫调节和抗炎活动在人类M1和M2巨噬细胞与7-oxo-cholesterol挑战,胆固醇自氧化产品。

在最近的一项研究中,我们证明了7-oxo-cholesterol影响人类巨噬细胞生物学通过切换M2巨噬细胞从一个反促炎和proatherogenic M1-like表型(15]。我们推测,这新途径可能在动脉粥样硬化疾病氧化应激的影响,产生氧化脂质和细胞炎性机制是紧密相连的。在这个研究中,我们证明了表面标记7-oxo-cholesterol-stimulated M1激活的巨噬细胞表现出增加表达标记HLA-DR,比那个更加明显由有限合伙人(15]。这指向一个upregulation支持的巨噬细胞作为抗原呈递细胞的激活适应性免疫反应。在相同的子集,我们证明了7-oxo-cholesterol能够表达下调CD16,低亲和力Fc受体免疫球蛋白抗体,从而可能削弱antibody-antigen复合物的吞噬作用21]。在我们目前的研究中,我们证实了7-oxo-cholesterol对M1细胞表型的影响,表明,白藜芦醇可以防止oxysterol-induced表型变化(图1)。这样,白藜芦醇可能发挥抗炎活动通过限制激活免疫系统,保护细胞M1的抗炎清关能力(21]。有关的影响7-oxo-cholesterol M2子集,我们证实它能够增加表面CD14表达单核细胞分化抗原,模式识别coreceptor细菌有限合伙人和炎症反应的细胞激活中介22]。白藜芦醇能够抵消M2子集的oxysterol-induced开关更明显炎性表型(图1)。

许多调查显示旁边phenotype-a不同极化巨噬细胞之间的主要区别在于子集的生产关键细胞因子和趋化因子,蛋白酶和其他介质(23]。巨噬细胞是先天免疫系统的主要组件。激活的巨噬细胞已被证明在起始和发展发挥关键作用的炎症反应产生大量的促炎介质(24]。

巨噬细胞是细胞外蛋白酶的重要来源,包括基质金属蛋白酶,以及支持和抗炎细胞因子,调节细胞外基质重塑,招聘和激活炎症细胞,血管平滑肌细胞增殖和细胞凋亡。所有这些事件在动脉粥样硬化病变的进展中发挥作用,促进一个不稳定的表型(15]。更好地研究白藜芦醇对M1和M2巨噬细胞亚群的影响,我们分析了巨噬细胞内吞作用的活动,两个关键金属蛋白酶的释放,检查参与组成分泌腺和概要文件的一些细胞因子,趋化因子,生长因子与白藜芦醇oxysterol-stimulated巨噬细胞进行预处理或不。在生理条件下,巨噬细胞促进组织内稳态通过清除残骸和防止过度炎症反应环境压力(25]。这通常代表一个标志M2-like巨噬细胞的功能,表达高水平的表面清道夫,甘露糖,galactose-type受体参与碎片间隙比M1细胞(26]。在目前的研究中,我们证实的能力7-oxo-cholesterol减少M2巨噬细胞内吞作用的清除能力高(19),并演示了白藜芦醇的能力保护这个基本的抗炎特性M2子集。

众所周知,促炎M1巨噬细胞释放大量的比抗炎M2细胞基质金属蛋白酶。我们之前已经证明7-oxo-cholesterol增加M2细胞分泌的能力MMP-9 [15),在我们目前的研究表明,它也上调MMP-2的表达在M1和M2子集,支持这个概念oxysterol能够极化巨噬细胞对促炎的状态。作为进一步的证据,我们在这里提供了一个相关结果白藜芦醇MMP-2和MMP-9活动的抑制作用在巨噬细胞用白藜芦醇预处理upregulation 7-oxo-cholesterol的挑战。我们的结果同意先前的发现沃克et al。20.)表明,白藜芦醇能够表达下调PMA-mediated感应MMP-9活动的u - 937巨噬细胞通过抑制MMP-9基因转录。

目前的研究清楚地表明,白藜芦醇可以调节许多细胞因子的释放,趋化因子,生长因子在应对7-oxo-cholesterol M1和M2巨噬细胞。

在我们之前的研究中,分析细胞因子,趋化因子,和生长因子分泌的多路复用珠试验系统显示7-oxo-cholesterol选择性地激活巨噬细胞子集的生产许多关键proatherogenic介质参与促炎、proinvasive和proangiogenic机制在动脉粥样硬化斑块(15]。我们曾观察到7-oxo-cholesterol M1细胞提高了生产的促炎细胞因子TNF -α和il - 6的分泌,从而导致增量这些细胞的促炎的态度。有趣的是,7-oxo-cholesterol诱导释放肿瘤坏死因子- M2子集αil - 6和M1-polarizing细胞因子il - 12 (27),从而进一步证实的能力7-oxo-cholesterol斜M2细胞极化M1-like表型。值得注意的是,在这个研究中,我们研究了白藜芦醇的抗炎作用在细胞因子的分泌相同的面板,趋化因子,生长因子M1和M2巨噬细胞。我们发现白藜芦醇预处理明显阻止TNF -α和il - 6在应对7-oxo-cholesterol upregulation M1细胞和肿瘤坏死因子-α和il - 12平方米的,从而确认这种化合物的能力来抵消oxysterol在巨噬细胞的促炎的信号。白藜芦醇的抗炎和免疫调节活动进一步证实了许多人的抑制趋化因子在两个子集,特别是引发MCP-1, CCL3,亚兰,咆哮和生长因子g - csf和gm - csf (M1细胞)和VEGF (M2细胞)。这些炎症介质,在其积极作用在招募白细胞炎症网站,可能刺激内皮细胞的迁移、扩散,和neo-vessel形成,从而促进血管生成相关的动脉粥样硬化斑块的进展(28]。肿瘤坏死因子-白藜芦醇抑制的影响α、il - 6、引发MCP-1 CCL-4,咆哮,g - csf在M1巨噬细胞和肿瘤坏死因子-子集α、il - 12、引发MCP-1、CCL3 CCL-4,咆哮,和金属蛋白酶抑制VEGF在M2巨噬细胞可能被添加到各种各样的白藜芦醇antiatherogenic行动,因为这些分子被认为与动脉壁炎症反应在动脉粥样硬化的进展(29日]。

我们的结果符合白藜芦醇抑制作用的促炎介质的释放各种细胞模型所示和脂多糖刺激后在活的有机体内动物模型(30.- - - - - -36]。沃克et al。20.),在u - 937细胞与脂多糖刺激大肠杆菌,证明了10毫米白藜芦醇完全抑制了大肠杆菌-LPS-induced释放il - 6和TNF -减少α释放了48.1%。按照沃克et al。20.),库雷希et al。37)显示,0.1到10毫米白藜芦醇抑制LPS-stimulated释放肿瘤坏死因子-α和基因表达的肿瘤坏死因子-α,il - 1β264.7、il - 6和伊诺从原始巨噬细胞。另一项研究表明,白藜芦醇预处理的原始264.7巨噬细胞(≥25μ米)其次是LPS刺激导致减少il - 6和TNF -α版本相比,有限合伙人治疗(30.]。

调查潜在的白藜芦醇机制(s)与巨噬细胞激活促炎的预防应对7-oxo-cholesterol我们分析了NF -调制的影响κB,典型的转录因子,在先天免疫反应中扮演着中心角色38]。在我们的研究中我们证实了以前的发现oxysterols触发NF -的能力κB激活(39- - - - - -41]。特别是我们观察到7-oxo-cholesterol增强核NF -绑定活动κB p50 p65 M2巨噬细胞和白藜芦醇完全避免这样的信号通路激活。这个观察白藜芦醇的影响是在协议与先前的调查显示,白藜芦醇能够表达下调炎症反应通过这种机制(19,42]。白藜芦醇存在两个同分异构体,独联体和trans-resveratrol [24]。的顺式异构体被认为是在葡萄发酵自然产生的反式异构体的异构化酵母异构酶;此外,cis-resveratrol可以通过接触阳光的反式异构体24]。黄等。24)提供发现cis-resveratrol产生抗炎作用通过抑制规范化和经典之中inflammasomes人类巨噬细胞和相关的通路。

缺乏强有力的临床/科学证据提示怀疑关于心血管效应在许多心脏病专家通过与特定的饮食干预分子或休集中(43]。然而,在许多研究与大军团,心脏病专家开始认为下降的百分比死于冠心病归因于风险因素的变化通过实施健康的生活方式,包括饮食,可以归因于比例高于特定的治疗。迄今为止,根据临床试验进行了迄今为止在心血管疾病患者中,白藜芦醇可能发挥心脏保护通过改善炎症,纤溶,和硬化的概要文件,以及改善葡萄糖代谢和内皮功能。然而,这些影响和剂量相关的具体机制需要达到一个最佳的效益/风险比迄今为止尚未明确建立。此外,实际的代谢物(s)负责的影响尚不清楚。它必须考虑化学不稳定和白藜芦醇制备低收益率生物制药应用[有限44]。为了克服这些问题,提高白藜芦醇的药理作用,一些团体试图合成和derivatize白藜芦醇(44]。

5。结论

我们的研究,我们所知,第一个研究表明白藜芦醇对人类M1和M2巨噬细胞的表型和功能。综上所述,这里给出的结果加强之前发现白藜芦醇对先天免疫细胞的免疫调节作用和突出的角色白藜芦醇作为潜在的治疗性化合物,以抵消proatherogenic oxysterol信号在动脉粥样硬化斑块中的巨噬细胞子集。

最后,虽然我们的研究没有提供证据白藜芦醇机制和代谢物(s)与观察到的免疫调节作用,它仍然是明显的,我们的在体外屏幕模式可能是有用的药物活性的免疫调节效应白藜芦醇衍生物,具有抗炎作用和较高的化学稳定性和较低的细胞毒性。

此外,它被证明是有用的在调查白藜芦醇和白藜芦醇衍生物之间的相互作用与其他抗炎和antiatherogenic化合物。

利益冲突

作者没有竞争金融利益与本研究。

确认

蛋白质组学的支持设施对于复杂的蛋白质混合物(CPM) Telethon蛋白质组学分析和服务(项目号GTF08002)史Superiore di Sanita、罗马、承认。作者感谢博士Giuseppina Mandarino语言修改的论文。