文摘
精神分裂症是一种神经发育紊乱,NMDA受体(NMDAR)机能减退出现集中。精神分裂症通常出现在青春期或成年早期。电生理和神经化学变化与GABA赤字引起的异常行为NMDAR机能减退。然而,很少有研究系统地调查了GABA的分子基础赤字,尤其是在青春期。为了解决这个问题,我们暂时管理mk - 801对患产后抑郁症的老鼠在青春期表现出schizophrenia-relevant赤字。片记录显示GABA减少传输和元太+机能减退,表明gaba ergic机能减退。皮质蛋白质组学评价结合单细胞分析的数据来自艾伦大脑显示各种代谢过程浓缩在高层和兴奋性神经元的不同改变,gaba ergic中间神经元和神经胶质细胞。值得注意的是,GABA-related氨基酸代谢过程在中间神经元和星形胶质细胞,干扰我们发现一组表达下调的GABA-related蛋白质(GAD65、SYNPR DBI, GAT3 SN1,和CPT1A)。他们协同调节GABA的合成、释放、再吸收和补充。表明差别他们对这些受损的GABA周期和体内平衡受interneuron-astrocyte沟通在青春期。我们的发现GABA的分子基础赤字可以提供潜在的药物靶点的GABA ergic救援早期预防和干预。
1。介绍
精神分裂症是一种破坏性疾病,扰乱了多个大脑系统,结束长达十年的精神病社会和认知障碍(1]。尽管视为神经发育障碍(2),出现精神病症状通常出现在青春期或成年早期1]。最近的研究表明,治疗干预措施在青春期,通常在出现症状之前,可能预防或改善疾病的发展(3]。随着前额叶皮层(PFC)继续成熟通过青少年精神分裂症是密切相关的4),了解PFC中断发生在青春期会揭示疾病的主要病理机制,帮助预防和早期干预。
NMDA受体(NMDAR)机能减退在精神分裂症的病理生理学中扮演着重要角色5,6]。支持这一假说的观察,NMDAR拮抗剂苯环己哌啶、mk - 801,氯胺酮可以产生精神分裂症状在健康人类和加剧现有症状精神分裂症患者(7]。啮齿动物,多次接受NMDAR拮抗剂(6),在新生儿时期,也概括schizophrenia-related行为,包括运动过度活跃、空间学习和记忆障碍,减少感觉门控(8]。
NMDAR hypofunction-related异常行为与excitation-inhibition (E / I)不平衡受GABA赤字(9]。GABA(Ƴ-aminobutyric酸)是主要抑制GABA ergic中间神经元释放的神经递质在中枢神经系统(10]。电生理记录NMDAR拮抗剂显示减少突触前gaba ergic传输和锥体神经元的抑制解除(9,11]。救援与GABA一个受体可能恢复行为赤字(9]。在动物中,重复插入NMDAR拮抗剂减少小清蛋白的表达(12]。双向操作的小清蛋白和GAD67(调节GABA合成)水平在小鼠海马可以调节他们的学习能力13]。此外,后期对精神分裂症的研究持续记录低水平的小清蛋白(14,15]和GAD67 [16,17在parvalbumin-positive gaba ergic中间神经元(元太+),表明赤字gaba ergic电路。虽然电生理和神经化学变化涉及到几个gaba ergic赤字NMDAR机能减退,此外,目前数据显示星形胶质细胞在调节动态GABAergic-astrocyte沟通的重要性(18),和一些研究提供分子基础的全景gaba ergic赤字,尤其是在青春期。
为了解决这个问题,我们是暂时性的管理mk - 801小鼠患产后抑郁症的10。他们在青春期表现出schizophrenia-relevant行为。因此,电生理记录的PFC显示GABA减少传输和元太+机能减退。我们进行皮质蛋白质组学研究和结合单细胞测序数据的分析从艾伦大脑。组学的综合分析显示,代谢过程在兴奋性神经元不同改变,中间神经元和神经胶质细胞。值得注意的是,一组GABA-related蛋白质调节GABA周期,包括合成、释放,再吸收和补充,是表达下调。特别是,这些蛋白质只在中间神经元和星形胶质细胞特异表达,表明受损GABAergic-astrocyte沟通。我们发现GABA的分子基础赤字,提供一个全局视图的GABA功能障碍发生在青春期。我们的研究结果可以提供深入了解精神分裂症的病理生理机制。
2。材料和方法
2.1。老鼠和mk - 801管理
对所有实验中,我们使用野生型雄性老鼠C57BL / 6 J。动物实验都是通过上海交通大学实验动物委员会。住房条件包括12 h光/暗周期,湿度 ,和一个控制温度22 - 25°C个人通风制动系统(印度河流域文明,TECNIPLAST S.P.A.)。食物和水都是随意提供的。出生的日子被定义为患产后抑郁症的1。患产后抑郁症的10,幼崽收到两个腹腔注射生理盐水或mk - 801 (Sigma-Aldrich)剂量的0.5毫克/公斤(即。10毫升/公斤)9:00点17:00点,分别。小鼠断奶在患产后抑郁症的21日和安置在单性别组每笼(4 - 5)。
2.2。行为测试
一连串的行为测试与精神分裂症相关,包括开放的现场试验,升高加上迷宫测试,嵌套建筑,巴恩斯迷宫,和前脉冲抑制试验,进行了青春期小鼠(~患产后抑郁症的35)。行为测试之前,老鼠适应测试室的1 h,和测试期间进行了9:00点4:00点。行为方法的细节提供的补充方法。电生理记录、蛋白质组学分析、免疫印迹和免疫组织化学也表现在青少年老鼠。
2.3。电生理记录
冠状切片准备从冰冷的PFC和含氧含蔗糖溶液(212毫米)蔗糖,3氯化钾,26 NaHCO31.25不2阿宝40.5 CaCl27 MgSO4,10 D(+)葡萄糖。30分钟的潜伏期后,录音进行的含氧人工脑脊液(ACSF)。微量吸液管(4 - 6米Ω)充满了一个细胞内的解决方案包含以下(毫米):130 K+葡萄糖酸10玫瑰5氯化钾,0.5 EGTA 10磷酸肌酸,4 ATP-Na MgCl GTP-Na 0.3和2.52,pH值7.23,同渗重摩313 mOsm /公斤。从元太全细胞膜片箝记录获得+或二/三层的锥体神经元prelimbic地区(PrL)。衡量内在兴奋性,电流注入在25 pA的步骤从0 pA - 800 pA。动作电位(AP)阈值和频率都被记录下来。sIPSC和sEPSC录音(持有势-70 mV)监测在锥体神经元。sIPSC录音,ACSF包含10μM NBQX和50μM APV和高氯细胞内的解决方案。sEPSC录音,ACSF包含100μM苦味毒和K+葡萄糖酸细胞内的解决方案是使用。数据获取与PatchMaster (HEKA、德国)仪器和分析使用MiniAnalysis (Synaptosoft NJ)。数据归一化平均基线反应。细胞其访问阻力超过25米Ω,有一个不稳定的静止膜电位或异常飙升模式被排除在分析之外。
2.4。MS分析样品制备
美国上钻PFC机械均质(小孔)的强大里帕裂解缓冲。100年μg蛋白在UA缓冲区(8 M尿素变性NH 50毫米4HCO3降低pH值7.8),5毫米TCEP(三羟甲基氨基甲烷(2-carboxyethyl)磷化氢液)、烷基化和15毫米IAA(碘乙酰胺)在黑暗中30分钟。蛋白质与预冷丙酮沉淀和消化在37°C 18 h与胰蛋白酶(Promega)的浓度1:50 NH (w / w)在50毫米4HCO3。消化后,肽被脱盐使用Mono旋转列(GL科学、东京)。
2.5。Nano-LC-MS /女士
300 ng肽重组在0.1%甲酸(FA)和由纳米级反相UPLC nanoAcquity UPLC系统(水公司),配备了对称C18 5毫米, 陷阱列和高速钢T3 C18 1.8毫米, 分析柱(水公司)。注入肽分离在120分钟梯度从3 - 35% B 300 nL /分钟的流量。溶剂由足总0.1% H2啊,,足总在乙腈溶剂B是0.1%。质量光谱分析进行一个Synapt G2-Si四极飞行时间质谱仪(水公司)可以E(ultradefinition女士E)模式。正离子的质量范围50到2000 m / z是在一项决议方式(半宽度)20000年的半最大值宽度。30年代的频率锁质量修正[Glu1]血纤维蛋白肽B是交付。
女士原始光谱处理进行初期发育的水域气(QIP,版本3.0.2)如前所述19),搜索对UniProt鼠标蛋白质组数据库版本(2020/06)。峰的默认参数选择和对齐算法。Carbamidomethylation半胱氨酸和蛋氨酸氧化指定为固定和可变修改,分别。一个错过了胰蛋白酶乳沟是允许的。罗斯福对蛋白质识别阈值设置在4%。只有七个氨基酸肽的最小长度确定的 和< 20 ppm质量被认为是错误。
2.6。蛋白质组学数据分析
数据归一化肽水平在QIP软件自动进行。蛋白质是量化使用前三的方法(20.,21]。只有蛋白质肽被认为至少有一个独一无二的。复制技术进行了复制。蛋白质的强度范围以外的 每组被定义为异常值和删除。 - - - - - -最近邻(事例)归责适用于转嫁缺失值。samr包(22)是用于识别差异表达蛋白质使用成对的两个类samr 1000排列和罗斯福阈值为0.05 (23]。确定至少有两个独特的肽和蛋白质的褶皱变化≥1.3 | |被定义为差异表达蛋白质。生物功能分析和蛋白质交互进行字符串(http://string-db.org/),后者是可视化Cytoscape 3.6.1 [24]。每个皮质细胞类型的蛋白表达是下载的老鼠大脑单细胞测序数据库(http://mousebrain.org)[25]。
2.7。免疫印迹
蛋白质分离和涂抹10% sds - page凝胶主要抗体如下:鼠标anti-PV(1: 1000年,σ),鼠标anti-GAD65(1: 500年,Abcam),兔子anti-GAD67(1: 1000年,细胞信号技术),兔抗β肌动蛋白(1:2000年,细胞信号技术)。使用的二次抗体包括山羊anti-rabbit免疫球蛋白g(1: 10000年,σ)和山羊anti-mouse免疫球蛋白(σ1:10000)。
2.8。免疫组织化学
大脑进行解剖和固定在4% PFA在4°C cryoprotection在30%蔗糖。大脑被冠方在20个分段μ米使用冷冻切片机切片(莱卡)。部分前囱1.54毫米到2.46毫米之间进行细胞计数。主要抗体是anti-PV抗体(1:500;σ)。的年代econdary antibody was Alexa Fluor 488 donkey anti-mouse antibody (1 : 000; Jackson lab). PVIs+PrL地区与电生理记录一致,被数每六部分。
2.9。统计分析
学生的 - - - - - -测试时使用比较两组。双向方差分析(方差分析)其次是事后图基的多重比较分析两个因素和多个组比较。重复测量方差分析统计累积分布的差异决定的。被定义为统计意义 。
3所示。结果
3.1。瞬态的封锁NMDARs 10患产后抑郁症的诱发精神分裂行为青少年老鼠
元太+有记载NMDAR抑制最敏感,特别是在开发过程中(26]。患产后抑郁症的10当(1)老鼠的大脑增长达到高峰(27),(2)成熟的老鼠大脑皮层小清蛋白元太的免疫反应性+出现(28),(3)兴奋性突触和fast-spiking元太的属性+出现在两天(29日]。因此,我们针对患产后抑郁症的10的临界点诱导NMDAR机能减退。雄性幼崽收到两个连续注射mk - 801每隔8 h患产后抑郁症的10。考虑到短半衰期MK801 (h ~ 2)在大脑中30.),有效地诱导异常瞬态行为的封锁战略,高剂量的MK801(0.5毫克/公斤)被选中31日- - - - - -33]。相比之下,低(0.05 - -0.1毫克/公斤)或中度(0.2 - -0.25毫克/公斤)剂量一般用于啮齿类动物的慢性治疗(8]。一连串的行为测试与精神分裂症进行在青少年阶段(从患产后抑郁症的35)(34当精神分裂症通常出现在人类[1)(图1(一))。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
mk - 801注射患产后抑郁症的10并不影响小鼠的体重在青春期(图S1a)。开放的现场试验表明,小鼠运动活动没有干扰(图S1c)。精神分裂症可能增加与焦虑障碍共病。我们发现mk - 801小鼠注射花更少的时间在张开双臂有较高闭臂持续时间(图1 (b)),这表明高焦虑性活动。接下来,我们进行了PPI测试测量感觉运动控制,这是经常减少精神分裂症患者(35]。我们观察到在基线振幅的惊吓反应无显著差异(图1 (c))。然而,mk - 801治疗小鼠显示出显著降低前脉冲抑制在85分贝(图1 (d)),表示感觉门控受损。鸟巢建筑是一个衡量合作或社会活动的啮齿动物(36)的减少可能对应于精神分裂症患者阴性症状(37]。我们发现mk - 801治疗小鼠表现出明显降低巢建筑(图的能力1 (e)),未能建立毛茸茸的巢和倾向于分散的棉花在笼子里地板(图1 (f))。长期受损显式或陈述性记忆38,39)是一个精神分裂症的认知障碍,可测量的巴恩斯迷宫在啮齿动物40]。mk - 801治疗小鼠显示大大延长延迟进入比控制老鼠逃跑室的日常培训(图的四个街区1 (g))。然而,所花费的时间在探索目标洞探测器测试并不是不同的两组之间(图S1e)。这些数据表明学习但在青春期小鼠没有记忆能力受损。总的来说,这些观测结果表明,瞬态的封锁NMDARs患产后抑郁症的10可以诱导小鼠精神分裂行为的青少年。
3.2。Schizophrenia-Relevant GABA减少传输和元太+机能减退在青春期小鼠诱导
GABA赤字,尤其是元太+功能障碍,与精神分裂症的疾病病理学(14,15]。电生理记录GABA减少传输一直在观察NMDAR拮抗剂的动物。因此,我们观察到显著降低interevent间隔分布和平均频率的锥体神经元的sIPSCs mk - 801治疗小鼠在青春期(数字2(一个)- - - - - -2 (c))。然而,我们没有发现显著变化的累积幅度分布和平均振幅(图2 (d)在这些神经元)。这些观察表明减少gaba ergic抑制锥体神经元的输入。我们下一个调查元太的生理功能+在PrL地区。Fast-spiking特性被用来识别元太+。元太的发射频率+在mk - 801治疗小鼠经历了大幅下降而增加当前注射(数字2 (e)和2 (f))。然而,我们没有发现不同动作电位(AP)阈值(图2 (g))。这些数据表明元太的兴奋性下降+。我们没有发现元太的密度下降+(图2 (h))或小清蛋白表达(图2(我)PrL地区),这表明兴奋性下降可能是由于功能元太的赤字+而不减少他们的数量。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
(我)
(j)
(k)
(左)
(m)
(n)
(o)
元太+控制神经回路的练习平衡,抑制可能方式锥体神经元的活动。然而,我们没有发现差异美联社阈值或锥体神经元的放电频率当比较两组小鼠(数字2(j) -2(左))。平均振幅、频率和累积分布的sEPSC锥体神经元也不是不同组(数字2(米)- - - - - -2 (o)),这表明在青春期锥体神经元的兴奋性不受影响。
3.3。改变全球蛋白质组青少年PFC的老鼠
mk - 801治疗患产后抑郁症的10个结果在青春期异常行为和gaba ergic机能减退,让人想起精神分裂症。我们接下来研究的分子基础gaba ergic赤字PFC(图的蛋白质组学分析3(一个))。我们生成的高技术高质量的蛋白质组学数据( 和 ,图S2a - c)和intersample再现性( ,图S2d)。4833年的蛋白质鉴定,3222人的简历 所有样品,用于后续分析(图3 (b))。119皮质蛋白质差异表达(DEPs) ( 调整后 )在mk - 801治疗小鼠(数字3 (c)和3 (d))。值得注意的是,77%的DEPs表达下调(92 v年代。27日,图3 (c))。他们最基因本体论()函数参与代谢过程(图的不同方面3 (e))。相比之下,我们并没有发现显著富集生物功能调节蛋白(数据未显示)。这些数据表明受损的代谢过程在青春期mk - 801治疗的老鼠。因此,我们假设观察GABA减少传输电生理记录可能与GABA-related受损的代谢过程有关。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
3.4。综合分析蛋白质组学和单细胞测序显示,代谢过程是根据细胞类型的不同影响
可以coregulated GABA-related代谢过程不同的细胞类型。因此,我们用鼠标绘制了DEPs单细胞测序数据(http://mousebrain.org)检查特异性功能变更。我们下载的表达值DEPs皮质细胞类型。我们使用层次聚类分类DEPs有他们最表达的细胞类型。我们发现DEPs主要是集群分为三个细胞类型:兴奋性神经元,中间神经元和胶质细胞(图4(一))。这些细胞参与代谢和发育过程(数据的不同方面4 (b)和4 (c),图S3a - b)。GABA水平的降低是GABA机能减退的核心特性。GABA是自然发生氨基酸作为抑制大脑中神经递质。有趣的是,我们发现蛋白质丰富的中间神经元和星形胶质细胞都大大丰富的氨基酸代谢过程(数据吗4 (b)和4 (c))。此外,星形胶质细胞也参与离子传输,这可能与神经传递(图4 (c))。因此,我们进一步分析了蛋白质参与两个细胞的代谢过程。值得注意的是,我们发现六人与GABA信号有关,包括GAD65(编码谷氨酸脱羧酶65),SYNPR(编码synaptoporin) GAT3(编码伽马氨基丁酸钠和氯化物依赖运输车3),SN1(编码耦合的中性氨基酸钠转运体3),DBI(编码酰coa结合蛋白),CPT1A(编码碱O-palmitoyltransferase 1)(图4 (d))。这些蛋白是由星形胶质细胞或中间神经元和mk - 801治疗小鼠都表达下调。这些数据显示GABA信号由星形胶质细胞受损,在青少年中间神经元。
(一)
(b)
(c)
(d)
3.5。表达下调gaba ergic网络Coregulated中间神经元和星形胶质细胞
我们进一步分析了这些GABA signaling-related蛋白质可能影响GABA ergic机能减退。我们发现GAD65的表达、SYNPR GAT3, SN1, DBI, CPT1A彼此表现出显著相关性(图5(一个)),来显示他们的交互在网络。因此,我们探索的所有GABA-related蛋白质蛋白质组学数据。SYNPR,我们发现GAD65 GAT3、SN1 DBI,和CPT1A互动与其他gaba ergic网络组件,像GAD67 GAT1, VGAT PVALB, GLU(图5 (b))。然而,这些组件没有互动改变了mk - 801治疗小鼠(图5 (b))。GABA是谷氨酸的合成谷氨酸脱羧酶(GAD),存在于两个亚型,即GAD65 GAD67。迦得65年和67年都是表达gaba ergic神经元。我们验证GAD65的表达下调表达免疫印迹,是与我们的蛋白质组学的结果。然而,GAD67是没有改变的表达在mk - 801治疗小鼠(数字5 (c)和5 (d))。SYNPR也表达了gaba ergic神经元。SYNPR与陷阱核心交互复杂和负责突触囊泡融合调节GABA释放(41]。此外,DBI可以作用于星形胶质细胞的刺激neurosteroid线粒体生物合成,调节GABA一个R (42)活动。GAT3是GABA运输车发现星形胶质细胞再摄取GABA和不活跃的GABA ergic信号(43]。有趣的是,SN1也只表现在星形胶质细胞。需要用它来释放谷氨酸盐的星形胶质细胞和神经元提供GABA ergic GABA的主要神经递质前体合成(44]。此外,GABA释放是通过减少CPT1A减少(45]。这些蛋白质显示的差别因此,对这些基因的抑制GABA自行车(合成、释放、终止和补给)coregulated GABA ergic神经元和星形胶质细胞在青春期,这就可以解释GABA ergic机能减退(图的分子机制5 (e))。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
4所示。讨论
在这里,我们建立了一个瞬态的封锁NMDARs患产后抑郁症的10,这是足以诱发青少年小鼠schizophrenia-relevant赤字,赤字等感觉门控和损害社会和学习能力。老鼠在青春期表现出GABA减少传输和元太+机能减退的电生理记录,显示gaba ergic赤字,这是精神分裂症的病理特征和NMDAR拮抗剂(与以前的研究一致9,11]。然后,我们提出了一个皮质蛋白质组学评价和单细胞测序数据的分析相结合。我们在全球范围内确定的分子基础gaba ergic赤字引起NMDAR在青春期机能减退,这是先前的一些研究。这些基本概述可以提供潜在的药物靶点的gaba ergic救援预防和干预。
比较长期的封锁NDMARs拮抗剂在新生儿期的啮齿动物,对患产后抑郁症的瞬态封锁战略10显示诱导schizophrenia-relevant可比影响行为。患产后抑郁症的10元太的生理成熟的关键时期+(29日]。元太+是皮质gaba ergic神经元和精致的主要人口控制的兴奋与抑制的平衡46]。元太的功能和分子损伤+经常观察精神分裂症。元太+相比更敏感NMDAR机能减退锥体神经元(47),特别是在开发过程中(48),部分是由于其高表达NMDARs在这个时期比在成年期(49]。元太的遗传NMDAR消融+在新生儿期,而不是成年的老鼠,赋予精神分裂表型(48),支持元太的敏感窗口+对NMDAR机能减退。因此,它是可能的,瞬态的封锁NMDARs患产后抑郁症的10改变元太的策划过程+成熟,造成后续的异常行为。我们的研究结果表明,NMDAR机能减退,甚至一个微妙在新生儿发展的关键阶段,可能负面影响放大在晚年,强调新生儿保健的重要性。
我们的研究发现受损的元太的兴奋性+在青春期,但不是他们的数量或PV免疫反应性。我们建议观察GABA减少传输可以与元太兴奋性降低有关+。元太的抑制+可能会减少抑制性输入到锥体神经元的强度(9,11];然而,在我们的研究中,我们发现锥体神经元的兴奋性没有影响。它可能是一个补偿策略,防止过度兴奋和细胞损伤。然而,需要进一步的研究来证实这些发现。
我们发现77%的交替蛋白表达下调在青春期产后mk - 801治疗。其中的一些(如GLOT1 PLXAN2, TUBB5)此前已经与精神分裂症相关(50- - - - - -52]。我们发现表达下调的蛋白质主要是丰富的一系列代谢过程,兴奋性神经元,中间神经元,星形胶质细胞,少突胶质细胞不同的影响。能源和氨基酸过程在中间神经元和星形胶质细胞优先打扰。有机物质和氮代谢过程的影响在兴奋性神经元和少突胶质细胞。这些差异可能与NMDARs这些细胞类型的不同的功能。研究表明,mk - 801年寡树突胶质细胞可能影响glycolysis-related蛋白质,但更在神经元和星形胶质细胞53]。
值得注意的是,我们发现多个GABA-related蛋白质在青春期明显下调,包括GAD65 SYNPR, DBI, GAT3 SN1, CPT1A。这些分子参与GABA周期,由伽马氨基丁酸的合成、释放,再摄取,补充,保持适当的GABA体内平衡。我们的发现表明GABA ergic赤字的分子基础电生理记录观察到的,这可能是导致受损的GABA体内平衡。
抑制gaba ergic神经传递由相位的补剂。前者是由经典的水泡释放GABA局限于突触,而紧张性抑制包括突触的GABA溢出和激活extrasynaptic受体。GAD65坐落在轴突终端和明确专门调节GABA的水泡释放突触传递(54]。虽然均匀分布的细胞溶质GAD67产生~ 90%的GABA细胞新陈代谢和大脑中神经传递,它已经表明GAD65是至关重要的维持突触GABA的转换通过谷氨酸(星形谷氨酰胺55),特别是当需要大量的突触GABA在高峰需求56,57),以微调gaba ergic突触功能。此外,GAD65的维护是很重要的紧张性抑制(58),估计是gaba ergic传输(重要的一部分59]。证据表明紧张性抑制的关键角色在内存中,认知,和精神分裂症60]。GAD65- / -小鼠表现出明显的赤字pre-pulse抑制(61年]。虽然后期研究一贯表明低表达GAD67背外侧前额叶皮层的主题与精神分裂症,在我们的研究中,我们没有发现它的交替之前报道。我们建议GAD65的赤字,而不是GAD67,可能是精神分裂症的发育特征。
星形胶质细胞环绕pre和突触后神经元的元素和对神经网络产生深远的影响18]。当前的数据支持星形胶质细胞在调节动态GABAergic-astrocyte沟通的意义。星形胶质细胞调节GABA ergic突触的活动调节突触GABA含量的高亲和性转运蛋白通过其对GABA间隙和提供神经递质的前体合成。我们的研究发现,这两个过程的差别可能会减少在青春期对这些GAT3 SN1。除了病患间隙,GABA可以清除从突触通过GABA摄取到突触前神经元转运体1 (GAT1)。然而,我们没有发现GAT1交替表达式,表明神经元间隙的过程不干扰在青春期。更重要的是,我们建议GABA吗一个R信号DBI的差别在星形胶质细胞也可以抑制对这些。DBI选择性基因敲除小鼠显示某种形式的空间学习和记忆受损(62年]。NMDARs表达在星形胶质细胞丰度较低。星形胶质细胞的激活NMDARs可能产生胞内钙信号。然而,他们的角色在astrocyticneuronal交互神经传递的不清楚。只有一项研究报道,消融或封锁NMDARs海马体提升兴奋性神经元的突触前抑制的语气(63年]。集体,我们建议相互抑制网络监管在青春期gaba ergic神经元和星形胶质细胞受损,这可能是星形NMDAR-dependent或独立。
5。结论
这个研究表明,瞬态的封锁NMDARs后天有慢性行为和GABA赤字在青春期。我们的结果显示一组表达下调的GABA-related分子、协同调节GABA循环的整个过程,包括伽马氨基丁酸的合成、释放,再吸收和补充。尽管有研究针对GABA在新药开发或其他目标,我们的研究结果提供了一个全面的观点GABA赤字在青春期,这是一些研究。此外,分子像SYNPR SN1, CPTA1尚未调查作为药物靶点。因此,我们的研究提供了更多的线索和药物开发中获益。
数据可用性
使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
作者的贡献
X.D.W.小鼠模型和执行行为,建立体外片电生理学和形象。Y.H.建立了小鼠模型和执行行为。W.X.L.进行免疫印迹。Y.Y.M图像进行计数。X.C.画原理图。T.X.设计研究中,进行了蛋白质组学的实验和数据分析,和编辑文章中写道。D.H.C.构思研究和审查和编辑。
确认
作者要感谢Tifei元博士和黄纸讨论和Lanting Yanjia罗,彭羽,Xinyou Lv电生理学的指导。这项工作是由中国国家自然科学基金青年项目(81801324)、上海帆船项目(yf141630 17日),中国国家自然科学基金(81671336)。
补充材料
图与mk - 801 S1老鼠管理患产后抑郁症的10显示,青少年精神分裂行为。图S2:蛋白质组学数据的质量控制。图S3:综合分析蛋白质组学和单细胞测序数据的差异表达蛋白质的老鼠。补充信息方法:开放的现场试验,高架+迷宫测试,前脉冲抑制试验、筑巢行为测试和巴恩斯迷宫。(补充材料)