文摘
背景。帕金森病(PD)是一种非常常见的神经退行性疾病,严重影响许多病人的身心健康,但目前还没有有效的治疗方法。客观的。为此,本研究侧重于调查潜在的机制导致帕金森病的多巴胺能神经元凋亡。方法。鱼藤酮诱导损伤的多巴胺能神经元MN9D细胞。流式细胞术检测细胞凋亡,apoptosis-related蛋白质的表达被免疫印迹检测。RT-qPCR被用来检测MALAT1和miR-23b-3p的表达。的表达α-核蛋白被ELISA检测。双荧光素酶基因记者分析是用来确定目标监管MALAT1和miR-23b-3p miR-23b-3p和之间的关系α-核蛋白。MN9D上层清液与BV-2 cocultured细胞,或与外生BV-2细胞治疗α-核蛋白然后对待一个自噬抑制剂(3-MA)和自噬激活(拉伯)。的表达α-核蛋白BV-2细胞被免疫荧光检测。MIP-1的表达α,小胶质激活的标志,被ELISA检测。NF -核易位κB p65被免疫荧光检测。促炎细胞因子的表达被ELISA检测。西方墨点法用于检测autophagy-related蛋白质的表达。MN9D细胞的细胞凋亡检测BV-2 coculture后上层清液MN9D。结果。MALAT1和的表达α-核蛋白调节,而miR-23b-3p的表达下调在MN9D受损细胞,导致细胞凋亡。MALAT1可以负调控miR-23b-3p的表达,而miR-23b-3p负调节的表达α-核蛋白。α-核蛋白可以输入BV-2细胞通过细胞吞噬作用。Coculture BV-2细胞α-核蛋白或MN9D上层清液overexpressing MALAT1导致BV-2细胞的自噬水平的降低和炎性反应。然而,miR-23b-3p模仿和击倒α-核蛋白逆转的影响MALAT1自噬和BV-2细胞的炎症反应。此外,coculture BV-2细胞后α-核蛋白,自噬水平进一步降低3-MA添加时,而相反的结果发生在拉伯补充说。coculture后α-synuclein-treated BV-2细胞与MN9D细胞上清液,autophagy-impaired BV-2 MN9D细胞的凋亡,和BV-2 3-MA加剧了自噬障碍,进一步促进了MN9D的凋亡细胞,而拉伯扭转了自噬BV-2障碍和缓解MN9D细胞的凋亡。结论。MALAT1可以促进α-核蛋白表达通过调节miR-23b-3p,从而诱导小胶质自噬障碍和炎症反应导致多巴胺能神经元的凋亡。这个新发现的分子机制提供了一个潜在的目标治疗PD的。
1。介绍
帕金森病(PD)是一种有名的神经退行性疾病,其特征是进步的多巴胺神经元的损失,导致身体损伤。PD主要影响老年人,患病率约5.5%的60岁以上的人群中(1]。一旦患有帕金森病,病人的身体会逐渐变硬,不自觉地颤抖。简而言之,病人的流动将继续下降,直到他们失去了照顾自己的能力。帕金森病的主要原因是大量多巴胺(DA)神经元的退行性死亡由于夹杂物聚合α-突触核蛋白(αsyn) [2,3]。神经元的死因是活化的小胶质细胞,这是关键的大脑细胞,调节免疫反应来维持体内平衡,通常表现出neurospecific表型。此外,小胶质细胞产生多种促炎因子,包括interleukin-1β(il - 1β),在人类的大脑4- - - - - -6),这些促炎因子对神经炎症的发展作出贡献。然而,神经炎症通常被认为引发神经退行性疾病(7]。因此,小胶质细胞具有独特的监管职能在中枢神经系统(CNS)。然而,这些小胶质细胞的激活影响因素可能损害他们的神经保护效应在神经退行性疾病,当多巴胺神经元丢失加剧神经炎症,这些机制将作为我们的基础研究帕金森病的病理过程。
众所周知,非编码小RNA包括各种各样的RNA分子,包括microrna和siRNAs。其中,microrna在18 - 23个核苷酸长度。他们可以沉默或降低mRNA,从而影响多个进程,包括细胞死亡(8- - - - - -10]。回顾大量研究和临床证据,我们知道lncRNAs大脑中高度表达,和研究人员相信他们有多个neuromodulatory功能。大量的研究也表明,lncRNAs帕金森氏症患者的大脑中有一个清晰的upregulation表达趋势,表明他们可能在神经系统疾病有独特的监管职能11]。
其中,肺腺癌转移相关记录1 (MALAT1或NEAT2)是lncRNA家族的一员。大量实验数据表明,肿瘤(12)和无序神经元(13)网站的MALAT1超表达。它已经证明MALAT1参与结构如突触的形成(14),它有一个重要的监管作用MPTP-induced PD (15]。
小分子核糖核酸是一种强大的小分子rna,近年来被发现和研究。他们可以沉默或降低mRNA,从而影响许多过程,包括细胞死亡(16]。循环microrna已被证明是潜在生物标志物的诊断PD (17- - - - - -19]。一项研究表明,循环microrna在等离子体中,血清,或血清液是PD的诊断的潜在生物标志物。此外,它已被发现α-核蛋白和microrna在PD,广告,和痴呆20.]。miR-23b-3p可以直接目标和规范的表达α-核蛋白,导致帕金森病的发展(21]。
α-突触核蛋白是一种蛋白质,它是高纯度在突触前神经终端。它是一种可溶性蛋白表达在中枢神经系统的突触前膜路易小体的主要组成部分,及其生理功能包括参与中枢神经系统(CNS)突触的发展,中介DA合成和释放,突触前囊泡运输、脂质代谢和分子伴侣功能。α与PD的发病机制(syn密不可分21]。根据一些研究,αsyn可以神经元之间的传播22,23]。影响的大脑区域路易小体可以在邻近地区产生不良的影响,导致这些地区也形成路易小体。此外,一些实验研究表明更高αsyn水平与更大的大脑的神经炎症有关,特别是黑途径,增加多巴胺神经元的影响α-syn-induced炎症(24]。因此,α-核蛋白可能是一个关键分子导致帕金森病的发展。
它已经表明,经典的抗生素利福平可以防止rotenone-induced小胶质炎症由增强的自噬(25]。自噬是维持内稳态的重要机制26]。文献回顾表明,自噬有一个独特的和强大的功能在免疫抑制炎症反应27- - - - - -32]。自噬的损失,包括α-核蛋白退化和小胶质activation-induced神经炎症,据报道是密不可分的障碍在PD (33- - - - - -37]。影响因素小胶质激活可能出现神经保护作用在神经退行性疾病,当小胶质自噬受损,导致小鼠神经退化(38- - - - - -40),自噬途径过程中失去了它的功能(41]。
据我们所知,PD与MALAT1有关,miR-23b-3p,α-核蛋白分子,但是他们如何导致PD的确切机制仍有待证明。此前,据报道,微rna - 124调节p62 / p38的表达,促进自噬(42]。此外,lncRNA SNHG14调节mir - 133 b /α在PD (syn途径减轻多巴胺神经元损伤43]。因此,我们分析了目标之间的关系αsyn miR-23b-3p和MALAT1 miR-23b-3p生物信息学。我们的目的是调查是否lncRNA MALAT1充当一个海绵miR-23b-3p调节α-核蛋白表达,影响自噬和小胶质细胞的炎症反应,促进多巴胺的神经细胞的凋亡。最终的目标是提供一个科学依据神经退行性疾病的预防和治疗。
2。材料和方法
2.1。细胞和转染
MN9D (BFN60808672)和BV-2 (BFN608006363)细胞购自中国科学院细胞银行(BFB, Qingqi(上海)生物技术开发有限公司),他们种植和通道在DMEM (ExCell生物,中国)含10%胎牛血清。MALAT1、miR-23b-3p模仿和sh -α3000 -核蛋白与Lipofectamine转染到MN9D细胞转染试剂(美国表达载体,卡尔斯巴德,CA)和上层清液收集cocultured小神经胶质细胞。
2.2。通过流式细胞仪检测细胞凋亡
一个膜联蛋白V-FITC /π工具包(BD Pharmingen)用作由制造商,然后,膜联蛋白V和π参考发射波长的荧光测定由贝克曼血细胞计数器(BD生物科学)和FlowJo软件(贝克曼库尔特,TE, CytoFLEX)。
2.3。RT-qPCR
试剂盒RNA提取工具包(美国表达载体,卡尔斯巴德,CA)被用来从收集到的细胞中提取总RNA。然后,合成第一链cDNA使用样品的总RNA作为模板,和cDNA获得被用作qPCR扩增的模板。随后PCR过程完成后使用的互补和U6作为内部参考。SYBR绿色qPCR工具包(豆类,大连,中国)是根据制造商的指示使用。然后,细胞和组织中的表达水平计算使用2- - - - - -ΔΔCt方法。引物序列显示在表中1。
2.4。免疫印迹分析
每组的总蛋白提取和蛋白质浓度测定。然后,样本进行电泳分离和转移到膜。然后,膜与初级孵化抗体(英国Abcam),包括anti-Bcl-2 (ab32124, 1: 1000), anti-Bax (ab32503, 1: 2000), anti-Caspase-3 (ab32042, 1: 500),反α-核蛋白(ab138501 1: 2000), anti-LC3 (ab192890, 1: 2000), anti-Beclin 1 (ab207612 1: 5000), anti-p62 (Abcam ab207305 1: 1000),和一只山羊anti-rabbit二级抗体(Abcam ab205718 1: 2000)。孵化后,膜被评估为半定量的表达增强化学发光(ECL)显色和凝胶成像。实验重复三次。
2.5。酶联免疫吸附试验(ELISA)
样品和标准添加到96孔板涂上相应的抗体使用ELISA试剂盒(Solarbio MIP-1α肿瘤坏死因子-α,il - 1β和il - 6;碧昂丝生物技术,α-核蛋白和正γ),和盘子洗了5次。添加生物素化的抗体和孵化1 h在37°C。然后,这种酶共轭在黑暗中工作的解决方案是添加和孵化。显色底物添加和孵化37°C,持续15分钟。最后,吸光度值测定和酶标准相比,样品浓度是根据标准曲线计算。
2.6。目标结合位点预测和双荧光素酶基因记者分析
母星预测目标结合位点MALAT1和miR-23b-3p miR-23b-3p和和有针对性的结合位点α-核蛋白。miR-23b-3p MALAT1或α-核蛋白3 - - - - - -UTR结合位点及其突变序列插入到pmirGLO双荧光素酶向量(GenePharma、上海、中国)。构造向量cotransfected miR-23b-3p模仿和消极的控制(数控模拟)进入细胞使用Lipofectamine 2000。转染48小时后,荧光素酶活性检测使用一个双荧光素酶报告实验设备(Hanbio生物科技、上海、中国)。
2.7。免疫荧光
小胶质细胞BV-2与PBS cocultured, rotenone-treated MN9D细胞上清液,rotenone-treated MN9D细胞上清液+细胞松弛素D (CCD),α-核蛋白,α-核蛋白+ CCD,培养细胞被固定和permeabilized然后孵化Cy3荧光标记反α-核蛋白(Abcam ab138501 1: 150)抗体,以及山羊anti-rabbit免疫球蛋白二次抗体(Abcam, AlexaFluor®555, 1: 200)在不同条件下。最后,在33342年赫斯特(1:200;Sigma-Aldrich)染色,图像是由激光扫描共焦显微镜使用荧光显微镜(尼康,东京,日本)。此外,阳性细胞的百分比计算的ImageJ盲方法。
2.8。检测NF -κB p65核易位
细胞被固定的指令细胞NF -κB易位工具包(Beyotime生物技术),然后孵化1 h和关闭缓冲区。洗后,细胞与anti-NF -孵化κB p65抗体(Abcam ab183559 1: 100)在室温下1 h,其次是Cy3荧光标记山羊anti-rabbit免疫球蛋白(Abcam ab150077 1: 1000)二级抗体。之后,盖玻片是孵化与磷脂酰肌醇3-kinase (DAPI) 5分钟。最后,图像是用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM) (Thornwood蔡司,纽约)。
2.9。统计分析
Prism 7.0软件(GraphPad)被用来分析数据。数据给出 (SD)。的统计比较,符合正态分布的数据被学生的分析 - - - - - -测试两组之间的比较,单向方差分析是用于比较多个组,和一个非参数检验是用于数据不符合正态分布。 显示统计学意义。
3所示。结果
3.1。微分表达式MALAT1 miR-23b-3p,α-核蛋白在多巴胺能神经细胞受损
流式细胞术的结果,我们发现MN9D细胞的凋亡率表现出上升趋势在鱼藤酮组(图1(一))。此外,观察免疫印迹结果后,我们发现,抗凋亡蛋白的表达bcl - 2表达下调,但proapoptotic蛋白质伯灵顿和半胱天冬酶3显示相反的趋势在鱼藤酮组(图1 (b))。RT-qPCR后评价的定量数据显示的表达MALAT1调节,但miR-23b-3p鱼藤酮组(数据显示相反的趋势1 (c)和1 (d))。此外,通过免疫印迹检测到的数据分析,我们得出的结论是,鱼藤酮的表达α(图-核蛋白在MN9D细胞1 (e)),而ELISA还透露,的表达α-核蛋白在MN9D细胞上清液也是调节鱼藤酮治疗后(图1 (f))。这些结果表明,鱼藤酮会损害多巴胺能神经细胞,促进受伤细胞的凋亡。此外,微分表达式MALAT1 miR-23b-3p,一起α-核蛋白,与多巴胺能神经细胞损伤是不可分割地联系在一起的,大量的α当多巴胺能神经细胞受伤-核蛋白蛋白质积累。
(一)
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(c)
(d)
(e)
(f)
3.2。MALAT1充当miR-23b-3p海绵来调节α-核蛋白表达
生物信息学网站母星被用来预测目标的关系。miR-23b-3p目标MALAT1基于预测结果母星和双荧光素酶基因检测实验(数字2(一个)和2 (b)),RT-qPCR化验结果进一步确定,MALAT1目标和负调节miR-23b-3p(图2 (c))。同样,母星预测miR-23b-3p目标结合位点α-核蛋白(图2 (d))。双荧光素酶基因记者试验验证了绑定关系α-核蛋白和miR-23b-3p(图2 (e))和免疫印迹分析发现,miR-23b-3p目标和消极的调节α-核蛋白表达(图2 (f))。
(一)
(b)
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(g)
(h)
进一步了解他们的监管作用,MN9D细胞,miR-23b-3p模仿后被转染MALAT1或超表达αMALAT1 -核蛋白是撞倒后超表达,免疫印迹和ELISA检测的表达α-核蛋白在不同治疗方法。观察免疫印迹结果后,我们发现的表达α-核蛋白显示上升趋势pcDNA-MALAT1组与NC-pcDNA组相比,转染的miR-23b-3p模仿有效逆转的提升α由MALAT1 -核蛋白表达(图2 (g))。同样,推倒的表达α-核蛋白(sh -α-核蛋白)有效地逆转的提升α由MALAT1 -核蛋白表达,即。,compared with the pcDNA-MALAT1+sh-NC group, the pcDNA-MALAT1+sh-α-核蛋白组表现出表达下调α-核蛋白表达(图2 (g))。ELISA还显示,MALAT1可能增加的表达α-核蛋白MN9D上层清液的细胞,而转染miR-23b-3p模仿或击倒αMALAT1 -核蛋白可以有效地扭转效应α-核蛋白表达促销和它降低α-核蛋白表达在细胞MN9D上层清液(图2 (h))。上述结果表明,MALAT1可以调节α通过影响miR-23b-3p -核蛋白表达。
3.3。α通过Cytophagocytosis -核蛋白进入小胶质细胞
先前的研究结果表明,αsyn之间可以传递细胞(22]。调查的作用α在小胶质细胞-核蛋白,我们对待小胶质细胞(BV-2)和PBS控制,上层清液的提取rotenone-treated MN9D细胞并与BV-2 cocultured上层清液组,然后添加CCD(吞噬细胞松弛素抑制剂D)作为上层清液+ CCD组。与此同时,α-核蛋白添加BV-2细胞的体内α-核蛋白组和α-核蛋白+ CCD分组也设置后添加α-核蛋白然后吞噬作用抑制剂细胞松弛素D的吞噬作用α小胶质细胞-核蛋白。
从免疫荧光实验获得实验结果表明α-核蛋白荧光信号出现在BV-2细胞在上层清液组,而表达α-核蛋白BV-2细胞荧光信号后显著降低的吞噬作用抑制剂CCD。类似地,α-核蛋白蛋白质组表现出更强的解决方案α-核蛋白荧光信号,而吞噬作用的抑制剂CCD的表达也显著降低α在小胶质细胞(图-核蛋白荧光信号3(一个))。此外,观察免疫印迹结果后,我们发现,与对照组相比,rotenone-treated多巴胺能神经元细胞上清液组和α-核蛋白组调节表达蛋白的解决方案α-核蛋白,CCD的表达下降α-核蛋白(图3 (b))。这些数据表明,α通过cytophagocytosis -核蛋白可以进入小胶质细胞。
(一)
(b)
3.4。的影响α-核蛋白在小胶质细胞自噬和炎症反应
我们添加了α在文化-核蛋白BV2细胞(α-核蛋白组)。MN9D细胞的上清液overexpressing MALAT1与BV2 cocultured细胞(上层清液1组),和MN9D细胞治疗与MALAT1过度和转染miR-23b-3p模仿或α-核蛋白撞倒了。然后,MN9D细胞上清液与BV2 cocultured细胞,被记录为上层清液2组和上层的3组。的影响α-核蛋白在自噬和BV2细胞的炎症反应被发现。的表达α-核蛋白被免疫荧光检测,和吞噬作用α-核蛋白BV-2细胞观察。结果表明,对照组没有α-核蛋白荧光信号,而上层清液1组(浮层MN9D细胞overexpressing MALAT1) cocultured BV2细胞显示出强劲α-核蛋白与对照组相比,荧光信号。上层清液2和上层的3组有微弱的荧光信号(图4(一))。ELISA结果显示,与对照组相比,MIP-1的表达α,小胶质激活的一个标志,促炎细胞因子TNF -α,il - 1β、il - 6和正-γ显著的调节α-核蛋白组和上清液1组。此外,与上层清液1组相比,MIP-1的表达水平α肿瘤坏死因子-α,il - 1β、il - 6和正-γ上层清液2和上层的3组表达下调(数字4 (b)- - - - - -4 (f))。
(一)
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(h)
免疫荧光实验被用来观察核易位NF -κB p65。结果表明,与对照组相比,α-核蛋白组显著增强NF -的本地化κB p65 BV-2细胞的细胞核,NF -的本地化κB p65 BV-2细胞核的细胞上清液1组也显著增加。然而,NF -的本地化κB p65 BV-2细胞的细胞核明显减少上层清液2和上层的3组较上层清液(图1组4 (g))。此外,观察免疫印迹结果后,我们发现Beclin - 1的表达和LC3 II /我是表达下调,p62调节的α-核蛋白组和上清液1组。此外,Beclin - 1的表达和LC3 II /我是调节和表达p62上层清液中表达下调2和上层的3组较上层的1组(图4 (h))。这些结果表明,α-核蛋白影响小胶质自噬和炎症反应。
3.5。α-核蛋白影响通过调节自噬小胶质激活
调查的具体机制激活的小胶质细胞α-核蛋白,我们进行了α-核蛋白coculture BV2细胞,接着用一种自噬抑制剂(3-MA)或自噬激活(拉伯)。ELISA结果显示,与对照组相比,小胶质激活MIP-1标志的表达水平α和促炎细胞因子TNF -α,il - 1β、il - 6和正-γ有显著的调节α-核蛋白组。3-MA治疗进一步增加MIP-1的表达α肿瘤坏死因子-α,il - 1β、il - 6和正-γ,而拉伯逆转的促进效应α炎性因子的释放-核蛋白(数字5(一个)- - - - - -5 (e))。
(一)
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(d)
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(g)
免疫荧光实验被用来观察核易位NF -κB p65。结果表明,与对照组相比,α-核蛋白NF的定位——增加κB p65 BV-2细胞的细胞核。相比α-核蛋白组,NF -的本地化κB p65 BV-2细胞核的细胞进一步增加α-核蛋白+ 3-MA组和NF -的本地化κB p65 BV-2细胞核的细胞减少了α-核蛋白+拉伯集团(图5 (f))。免疫印迹结果表明自噬抑制效果α-核蛋白BV-2细胞可以进一步提高3-MA治疗但逆转拉伯(图5 (g))。这些结果表明,α-核蛋白通过调节自噬影响小胶质细胞的激活。
3.6。激活和Autophagy-Impaired小胶质细胞促进多巴胺能神经元的凋亡细胞
我们知道,活化的小胶质细胞释放促炎细胞因子可导致神经元死亡。受损的小胶质细胞的自噬与神经退行性疾病有关。自噬和激活规范α-核蛋白,激活和autophagy-impaired小胶质细胞促进多巴胺能神经元的凋亡细胞。我们cocultured上层清液α-核蛋白,α-核蛋白+ 3-MA,α-核蛋白+ RAPA-treated BV-2细胞与MN9D细胞。
MN9D的流式细胞术检测细胞凋亡显示,与对照组相比,MN9D细胞的凋亡α-核蛋白组(浮层α-synuclein-treated BV-2 cocultured MN9D)增加(图6(一))。相比α-核蛋白组,MN9D细胞凋亡是进一步增加α-核蛋白+ 3-MA集团(浮层α-核蛋白+ 3-MA-treated BV-2细胞cocultured MN9D细胞(图)6(一))。MN9D细胞的凋亡α-核蛋白+拉伯集团(浮层α-核蛋白+ RAPA-treated BV-2细胞cocultured MN9D)同比下降α-核蛋白组(图6(一))。我们也知道apoptosis-related蛋白质免疫印迹分析结果的bcl - 2的表达显示下降趋势,伯灵顿的表达和半胱天冬酶3显示一个相反的趋势α-核蛋白组。相比α-核蛋白组、bcl - 2的表达α-核蛋白+ 3-MA组表达下调,伯灵顿的表达和半胱天冬酶3调节,bcl - 2的表达的调节,伯灵顿的表达和半胱天冬酶3中表达下调α-核蛋白+拉伯集团(图6 (b))。
(一)
(b)
4所示。讨论
帕金森病是一种常见的神经退行性疾病,大多数患者是60岁以上的老人44]。病人的能力严重受损,和身体和四肢会不自觉地颤抖。患有这种病了一段时间后,病人成为无法进行自我保健,大大影响他们的身心健康。同时,帕金森病将相当大的经济和精神病人的家庭的压力。尽管许多人患有帕金森病在世界范围内,目前还没有有效的方法来预防或治疗疾病。因此,它是很有意义的寻求可靠的新的药物或医疗解决方案。
之前的研究表明,PD发病机理与MALAT1有关,miR-23b-3p,α-核蛋白。通过表观遗传的lncRNA MALAT1促进炎症泡激活抑制Nrf2 PD (45]。在PD患者中,miR-23b-3p被认定为PD-associated循环microrna的(21]。此外,过度的αsyn和microrna的被发现在人类样本在PD,广告,和痴呆。我们的研究结果还表明,MALAT1的微分表达式,miR-23b-3p,α-核蛋白与多巴胺能神经细胞损伤和多巴胺能神经细胞损伤导致大量的积累α-核蛋白蛋白质。因此,评估这些分子在自由形式的尿液或与细胞外囊泡在生物体液可能导致早期生物标志物的临床诊断(20.]。
我们建造了一个PD模型通过损害多巴胺能神经细胞与鱼藤酮研究PD发病机制的具体机制。鱼藤酮促进受损的多巴胺能神经元的凋亡细胞,积累了大量的多巴胺能神经元细胞α-核蛋白蛋白质时损坏。此外,我们的研究发现α-核蛋白受损细胞自噬引起,导致小胶质激活和促进炎症反应。慢性炎症是PD的发病机制的一部分,而且它也发现促炎细胞因子的水平,包括il - 1β和il - 6, PD患者的脑脊液中显著增加(46]。自噬增加受损小胶质细胞的敏感性α-核蛋白,导致小胶质激活释放巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)和促炎因子,从而引发炎症反应,促进发展的PD (37]。我们的研究结果与这些研究结果相一致。
然而,miR-23b-3p被认为是一个独特的功能调节α-核蛋白(21]。在这项研究中,目标miR-23b-3p和之间的结合位点α-核蛋白是预测的母星。此外,绑定关系MALAT1 miR-23b-3p也验证了双荧光素酶基因记者分析。总结和分析实验数据后,我们从免疫印迹实验miR-23b-3p目标和负调节的表达α-核蛋白。miR-23b是为了减少神经元凋亡神经炎症造成的,所以不难推测也是密不可分的PD的发病机制(47,48]。此外,文献回顾表明lncRNA MALAT1明显助推器PD-induced炎症(45]。与miR-23b-3p MALAT1展品在敌对的或竞争关系,前者是大量表达,后者的抑制作用在ATG12大大地缓解,导致化学诱导自噬以及药物抗性在GC细胞(49]。我们发现MALAT1目标和负调节miR-23b-3p,从而促进αPD -核蛋白表达,作为一种影响。我们使用了生物信息学网站母星,随着双荧光素酶基因记者化验和RT-qPCR化验,建立这种联系。
总之,我们目前的研究结果表明,MALAT1 PD模型和调节,MALAT1有助于炎症囊泡在小胶质细胞的激活。受损的潜在的作用机制是诱导小胶质细胞通过调节自噬和炎症反应的miR-23b-3p /α-核蛋白分子轴促进多巴胺能神经细胞凋亡α-核蛋白核蛋白质绑定和影响它的内吞作用和细胞间传播。这些研究表明lncRNA MALAT1可能是一个新的研究切入点在帕金森病临床应用由于其对多巴胺能神经元凋亡的影响。
总之,我们的研究表明,MALAT1充当miR-23b-3p海绵、调节α-核蛋白表达诱导小胶质自噬损伤和炎症反应,促进多巴胺能神经元凋亡细胞传播。这提供了一个新的潜在治疗PD的目标。
数据可用性
和/或使用的数据集分析在当前研究可从相应的作者在合理的请求。
的利益冲突
作者没有利益冲突的声明。
作者的贡献
鑫耿和Yanghong邹负责概念化。鑫耿,Yanghong邹,队友王士鹏李负责的方法。Yanghong邹和Renli气负责软件。鑫耿和队友王士鹏李负责验证。队友王士鹏Li Renli气,锐意进去Yu负责正式的分析。鑫耿,Yanghong邹,锐意进去,和李历程是负责调查。锐意进去Yu和李历程负责资源。Yanghong邹、Renli气和历程李负责数据管理。鑫耿,锐意进去,李历程负责原创作品草稿准备。鑫耿,Yanghong邹,锐意进去Yu负责writing-review和编辑。 Shipeng Li and Renli Qi were responsible for the visualization. Jinghui Li was responsible for the supervision. Hualin Yu was responsible for the funding acquisition. All authors have read and agreed to the published version of the manuscript. Xin Geng and Yanghong Zou contributed equally to this study.
确认
这项研究得到了云南省高级卫生和计划生育技术人才培养基金支持云南省卫生委员会的医学储备人才培训项目(h - 2018054);耿新,一个项目为云南省技术创新人才的培训(202205 ad160006);子项目专项基金的应用基础研究神经系统疾病的诊断和治疗中心的云南(ZX2019-03-05);云南省科技重大专项项目(202102 aa100061);和博士研究基金会的昆明医科大学第一附属医院(2020 bs019)。