文摘
客观的。确定新标记的少年系统性红斑狼疮(JSLE)事件预测患者分层和预后至关重要。本研究的目的是分析尿蛋白表达的改变和屏幕少年系统性红斑狼疮的潜在有价值的生物标志物(JSLE)。方法。患者的尿液收集或没有JSLE和质谱分析探测到蛋白质组的变化。ELISA用于验证Vitronectin (VTN)一套新的病人的变化。临床相关性进行分析VTN和临床病理参数之间的关系。世行和ELISA用于分析pyroptosis VTN-mediated细胞。结果。这里,我们已经确定了一组105个差异表达蛋白≥1.3倍upregulation在JSLE差别或≤0.77倍对这些病人。这些蛋白参与了几个重要的生物过程,包括急性期炎症反应、补体的激活,止血,免疫系统调节通过基因本体和功能富集分析。有趣的是,尿ephrin a受体4 (EPHA4)和VTN显著降低在动态和静态JSLE病人,THP-1派生的巨噬细胞和VTN治疗导致显著增加细胞的激活pyroptosis nod样受体家族蛋白3 (NLRP3) inflammasomes,导致caspase-1激活,裂解gasdermin D (GSDMD)和地震-分泌。最重要的是,尿VTN JSLE也是线性相关的临床特点,暗示VTN可能是一个特定的动态和静态JSLE诊断生物标记来区分。结论。这项研究提供了一个新颖的角色在pyroptosis VTN JSLE JSLE通过尿蛋白质组剖面,这可能是临床诊断不干扰监测策略。
1。介绍
系统性红斑狼疮(SLE),自身免疫性疾病和炎症,会影响多个器官系统的特点是过度生产的抗核抗体和高发病率和低质量的生活1- - - - - -3]。系统性红斑狼疮的精确的病理生理机制在很大程度上是未知的。最重要的一个机制系统性红斑狼疮是免疫反应的改变,涉及自身抗体这一目标病人自己的组织,随后导致炎症(4]。尽管巨大的基础和临床研究进展关于治疗(5),各种细胞因子和趋化因子已成为系统性红斑狼疮疾病活动的潜在生物标记物(6]。然而,由于这种疾病的复杂性,这些潜在生物标志物的临床有效性评估系统性红斑狼疮疾病并不完善,尤其是通过非侵入性和容易收集尿液样本诊断肾系统性红斑狼疮活动。
体液代谢组学的变化,包括血清、血浆、尿液和唾液,能够提供丰富的生理和病理状态的个人信息和有用的临床参数。因此,理解方面的巨大潜力揭示疾病条件也将带来一场革命的承诺在疾病诊断和治疗监测7- - - - - -10]。在先前的研究中,23个微分代谢物和5摄动通路包括氨酰生物合成,硫胺素代谢、氮代谢、色氨酸代谢,cyanoamino酸代谢之间的识别系统性红斑狼疮患者和健康对照组1]。此外,研究显示,immunoglobulin-binding蛋白(7)、尿维生素D-binding蛋白质和S100钙结合蛋白(S100)的潜在生物标志物在狼疮肾炎患者11,12]。用蛋白质组学技术的重大进展,综合分析蛋白表达的biofluids特定疾病患者提示疾病的深入探索和它的底层机制。为了达到更大的对发病机制的理解,利用蛋白质组学技术的基础上,我们试图寻求潜在信息的尿液来区分不活跃的少年从活跃的系统性红斑狼疮(JSLE)患者和健康的捐赠者。
多功能糖蛋白Vitronectin (VTN),展示了丰富的血清,细胞外基质,和血小板13)和调节细胞粘附、凝血纤维蛋白溶解,补体的激活,细胞凋亡与整合素av交互β3、纤溶酶原激活物Inhibitor-1 (PAI-1)和尿激酶纤溶酶原激活物(uPAR) [14,15]。此外,据报道,VTN在多个生物过程与炎症有关,如急性肺损伤、烧伤、败血症,参与中性粒细胞和autoreactive T和B淋巴细胞活化和组织损伤16- - - - - -19]。除了VTN, ephrin a受体4 (EPHA4),属于ephrin受体酪氨酸蛋白激酶家族的亚科,已经涉及到中介发育事件和与系统性红斑狼疮的发展,尤其是中枢神经系统红斑狼疮(CNS-SLE) [20.,21]。更重要的是,ephrin-A1-EphA4信号报告了消极的调节中枢神经系统的髓鞘形成(20.]。到目前为止,一些尿蛋白质组的变化已经在系统性红斑狼疮患者描述。然而,尿杰出的特定生物标志物的蛋白质组学不活跃的JSLE和主动JSLE依然。
在这项研究中,我们进一步表明VTN EPHA4,减少在JSLE尿蛋白分析,可以认为这部小说与自身免疫性炎症相关生物标志物在动态和静态JSLE健康的捐赠者和病人。因此,VTN和EPHA4蛋白质的改变可能是一个潜在的战略发展创新的治疗方法。
2。材料和方法
2.1。病人和研究设计
总共9健康对照组(1 / G1组)和19个病人诊断为系统性红斑狼疮(组2 / G2: 9活性JSLE病人;组3 / G3: 10活跃JSLE病人)招募了广州市妇女儿童医疗中心。书面的知情同意是获得所有科目根据《赫尔辛基宣言》。这个临床伦理道德委员会批准广州妇女和儿童的医疗中心。清洁早上尿液样本收集和离心机在3000 g,在4°C,持续15分钟。上层清液储存在-80°C进行进一步的蛋白质组学分析。
2.2。疾病活动的评估
疾病活动评估是使用修改后的执行系统性红斑狼疮疾病活动指数2000 (SLEDAI-2K)描述了在前面的研究22]。修改后的SLEDAI-2K排除2免疫项目(补充水平和anti-double-stranded DNA / dsDNA)从原始SLEDAI-2K,同时保持16个临床表现和4实验室检测(白细胞计数、血小板计数、验尿和24小时蛋白尿)。自2004年不列颠群岛狼疮评估集团(bilag - 2004)指数提供了详细的评估包括严重受影响的器官和系统的表现(23),我们修改了总bilag - 2004指数基于生长残痕 , , ,和 。JSLE患者的疾病活动被定义为以上修改bilag - 2004指数 或修改SLEDAI-2K 。主动JSLE患者由修改bilag - 2004指数 或修改SLEDAI-2K 。几个健康对照组的临床表现也证明了在比较JSLE病人。因此,差异化的蛋白质含量之间的相关性和某些器官/系统表现的严重程度JSLE病人也被确定。
2.3。样品制备、质谱(MS)和女士解释
所有的样品都准备用以下准备。蛋白质组学分析尿液中蛋白质含量是决定使用BCA试剂盒(Beyotime P0009)根据制造商的指示。对消化、二硫苏糖醇用于集中总蛋白溶液为30分钟56°C,然后,与11更易/ L碘乙酰胺烷基化的蛋白质执行在黑暗中在室温下15分钟。胰蛋白酶消化后,抗菌肽结合干然后受到氮溶解指数来源之后,串联质谱分析(MS / MS) Q-Exactive(热费希尔科学、圣何塞、钙、美国)耦合网络ultraperformance液相色谱系统。结果MS / MS数据与综合加工利用MaxQuant仙女座的搜索引擎(v.1.5.2.8)。基因本体论(去)是一个主要的生物信息学计划统一表示基因和基因产物属性在所有物种。GO注释蛋白质组是来源于UniProt-GOA数据库(http://www.ebi.ac.uk/GOA)。基因和基因组的京都百科全书(KEGG)是用于连接已知分子间相互作用的信息网络。这些途径是分层分类根据KEGG网站。
2.4。蛋白质相互作用(PPI)网络建设和模块分析
检索的搜索工具相互作用基因(字符串)在线数据库(https://string-db.org/cgi/input.pl)工具来构建PPI网络。
2.5。细胞培养和治疗
THP-1细胞从美国购买类型文化集合(写明ATCC马纳萨斯,弗吉尼亚州)和培养根据制造商的建议。杜尔贝科的修改鹰介质(DMEM)和胎牛血清(的边后卫)从Gibco购买(美国热费希尔科学)。细胞治疗和PMA (100 nM, P6741 Solarbio,北京,中国)72小时,诱导巨噬细胞。细胞治疗,VTN (P00082 Solarbio,中国北京)是用于治疗THP-1-derived巨噬细胞在4μm .其他试剂用于本研究从σ购买。
2.6。西方墨点法
如我们之前所述研究[24),整个细胞溶解产物是收获和sds - page和转入硝基转移膜。孵化后5% ( )牛奶在PBS / 0.05% ( )Tween-20 1小时,膜是孵化表示抗体在一夜之间在4°C,随后紧接着孵化与辣根过氧化物酶二次抗体(杰克逊ImmunoResearch)在室温下1小时。蛋白质检测使用一个增强化学发光(PerkinElmer)。在这项研究中使用的抗体来自Abcam: NLRP3 (WB ab263899, 1: 2000), il - 1β(WB ab254360, 1: 1000), caspase-1 (WB ab179515, 1: 1000), ASC (WB AB283684, 1: 2000), GSDMD (WB ab219800, 1: 2000), NF -κB (WB ab207297, 1: 2000), phospho-NF -κB (WB ab239882, 1: 2000),β肌动蛋白(WB ab8226, 1: 4000),和α微管蛋白(WB ab7291, 1: 5000)。
2.7。实时聚合酶链反应
如我们之前所述研究[25),总RNA提取根据指令。一体化的第一链cDNA合成设备和一体化qPCR混合被用来执行逆转录和定量PCR (qPCR)根据制造商的协议。在这项研究中使用的引物如下:il - 1β:转发:5 - - - - - -ATGATGGCTTATTACAGTGGCAA-3和反向:5 - - - - - -GTCGGAGATTCGTAGCTGGA-3 ;地震-:转发:5 - - - - - -TCTTCATTGACCAAGGAAATCGG-3和反向:5 - - - - - -TCCGGGGTGCATTATCTCTAC-3 ;GSDMD:转发:5 - - - - - -GTGTGTCAACCTGTCTATCAAGG-3和反向:5 - - - - - -CATGGCATCGTAGAAGTGGAAG-3 ;NLRP3:转发:5 - - - - - -GATCTTCGCTGCGATCAACAG-3和反向:5 - - - - - -CGTGCATTATCTGAACCCCAC-3 ;ASC:转发:5 - - - - - -TGGATGCTCTGTACGGGAAG-3和反向:5 - - - - - -CCAGGCTGGTGTGAAACTGAA-3 ;caspase-1:转发:5 - - - - - -CCTTAATATGCAAGACTCTCAAGGA-3和反向:5 - - - - - -TAAGCTGGGTTGTCCTGCACT-3 ;哥伦比亚大学:转发:5 - - - - - -ATTTGGGTCGCGGTTCTTG-3和反向:5 - - - - - -TGCCTTGACATTCTCGATGGT-3 。
2.8。ELISA
il - 1β(ab229384)和地震(ab215539)文化浮在表面的测量和量化表示group by ELISA根据制造商的指示,分别。
2.9。相对细胞死亡分析
LDH测定工具包(Abcam ab102526)是用于分析在上层清液LDH THP-1-derived巨噬细胞治疗在实验中根据制造商的指示。相对确定细胞死亡中描述周等人的研究(26]。
2.10。统计分析
的统计分析在活的有机体内每个试验的数据部分中描述。结果表示为 (SD)正态分布数据。Mann-Whitney测试是测试连续变量。比较不同群体是由克鲁斯卡尔-沃利斯方差分析(方差分析),其次是邓恩的后续测试的比较和计算概率的差异( )每一对价值比较。所有的假设都是双尾值小于0.05被认为是重要的。斯皮尔曼等级相关的测试是用来评估之间的直系相关性尿VTN JSLE病人的临床参数表达式。是相关系数。的 - - - - - -测试执行qPCR和ELISA分析。数据分析使用GraphPad棱镜(美国GraphPad软件,拉霍亚,CA)。
3所示。结果
3.1。病人和临床特点
如表所示1,共有28日早上从9健康对照组,收集尿液样本9活性JSLE患者,患者和10 JSLE活跃。我们发现健康控制肌酐水平低于非活动JSLE患者( 与 , );越高意味着比天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)中观察到的活动( 与 , )和活跃的( 与 , )JSLE患者与健康对照组相比,分别降低血红蛋白(HB)水平在活跃JSLE患者( )被发现在健康对照组相比( 与 )和不活跃的JSLE患者( 与 ),分别。
与不活跃的JSLE患者相比,咽部菌( 与 , ),安娜( 与 , ),和dsDNA ( 与 , )高,而红细胞沉降率(ESR) ( 与 , )和补体C3 ( 与 , )和C4 ( 与 , )在活跃JSLE病人。然而,没有获得的统计差异分析SLICC,蛋白尿,白细胞(WBC)、血小板(PLT),和c反应蛋白(CRP)。详细的统计差异JSLE患者和健康对照组之间的临床特点是列在表中1。
3.2。前生命JSLE尿液中蛋白质组的病人
蛋白质组学分析然后进行尿液样本。如图1(一),热图结果表明,已确定在105种不同的蛋白质组(组1 / G1:健康对照组;组2 / G2:不活跃JSLE病人;和group3 / G3:活跃JSLE病人)通过液相色谱-质谱(MS) (LC -)。生物信息学分析16)差别(≤0.77倍对这些基因的表达下调蛋白质和9调节蛋白(≥1.3倍upregulation)之间获得JSLE (G2 + G3)患者和健康对照组(数字1(一)和1 (b))。进一步的研究结果表明,共有3增加(≥1.3倍upregulation)和34减少)差别(≤0.77倍对这些蛋白质进行量化G1和G2之间(图1 (c)),而21增加(≥1.3倍upregulation)和16个减少)差别(≤0.77对这些蛋白质被观察到在G3和G1(图之间的比较1 (d))。G2相比,有趣的是,只有2减少蛋白质和47增加蛋白质活性JSLE患者的尿液中发现了(图1 (e))。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
基于这些研究结果,进一步探讨具体(度)三组之间的差异表达基因,我们重叠反映基因表达的蛋白质表达下调,我们实现了两个表达下调蛋白质JSLE患者与健康对照组相比(VTN EPHA4,如图2(一个)获得的),而没有重叠的调节蛋白(图2 (b))。所有这些度图中列出2 (c)。
(一)
(b)
(c)
3.3。功能富集分析
进一步分析这些度参与可能的生物功能,执行的富集分析和KEGG条款,包括分子功能,细胞组件,和生物过程大大丰富,表示性质的差异表达蛋白在尿液JSLE患者和健康对照组使用数据库的注释,可视化和综合发现在线工具。
至于度分析不活跃JSLE患者和健康对照组,多个丰富条款和KEGG通路被证明。前20名丰富条款和KEGG途径选择,如图所示3。图3 (b)表明,主要丰富条款主要与细胞粘附,生物粘附,peptidyl-tyrosine磷酸化,peptidyl-tyrosine修改,通过质膜粘附分子,和附着力。JSLE患者与健康对照组相比,列出了差异化KEGG通路图3(一个)。唾液分泌的参与,PI3K-Akt信号通路和人类乳头状瘤病毒感染以及粘着斑被观察到,而生物功能与转译后的蛋白质修饰、蛋白质修饰、细胞粘附和细胞蛋白质改性过程的比较活跃JSLE患者和健康对照组(数字3 (c)和3 (d))。此外,从动态和静态的比较结果JSLE患者中,我们还发现度参与多种生物学途径,如necroptosis、粘着斑,PI3K-Akt信号参与调控有丝分裂的核分裂和核分裂(数字3 (e)和3 (f))。
(一)
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(f)
3.4。差异基因的蛋白质相互作用分析
清楚地理解度使之抑制之间的相互作用,生成这些度的PPI网络识别的关键基因及其交互JSLE利用在线数据库的字符串。如图4,这些结果表明,VTN形成作为核心PPI网络的分子在三组中,至少与其他基因在原子间相互作用网络,包括十八α1型胶原(COL18A1) fibulin 5 (FBLN5) aggrecan(能),交叉的粘附分子—季受体(F11R)和朊蛋白(PRNP)。至于活跃的和不活跃的JSLE、VTN COL18A1,也能显著基因中心原子间网络。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
3.5。尿液VTN水平之间的相关性和狼疮临床参数
在这项研究中,定量结果,我们试图寻求临床值检测尿VTN JSLE病人。我们发现VTN与血清dsDNA负相关(不活跃JSLE: , ,图5(一个);活跃JSLE: , ,图5 (b)),类似的关系得到安娜的相关性和VTN(不活跃JSLE: , ,图5 (c);活跃JSLE: , ,图5 (d))。此外,补体C3和C4两不活跃的积极与VTN JSLE (C3: , ,图5(e);C4: , ,图5(g)和主动JSLE (C3: , ,图5(f);C4: , ,图5(h))。
(一)
(b)
(c)
(d)
3.6。相关性尿VTN水平和不同的淋巴细胞亚群
系统性红斑狼疮的特点是耐自体抗原的损失,下游活动,扩大autoreactive T和B淋巴细胞(19]。在这项研究中,定量的结果,我们发现尿液VTN % CD19水平负相关+B细胞( , ,图6和% CD3 (a))+CD4- - - - - -CD8- - - - - -T细胞( , ,图6(b))外周血单核细胞(PBMC),以及与% CD16呈正相关+CD56+NK细胞( , ,图6(c)) JSLE全血的无所作为。相似关系得到的相关性分析VTN % CD3的比率+T细胞/ % CD45+淋巴细胞( , ,图6(d)), % CD3+CD4+辅助T细胞(Th) ( , ,图6(e)), % CD3+CD8+抑制T细胞(Ts) ( , ,图6(f)), % CD4的比率+Th / % CD8+Ts ( , ,图6(g))和% CD16+CD56+NK细胞( , ,图6(h))和NK细胞的绝对数量( , ,图6(我)JSLE PBMC的活跃。此外,没有观察到显著的关联VTN和其他指数之间(数据没有显示)。
3.7。VTN诱导细胞Pyroptosis THP-1-Derived巨噬细胞
进一步探索的可能功能VTN在系统性红斑狼疮,THP-1-derived巨噬细胞在体外模型和治疗有或没有VTN检测细胞pyroptosis变化。如图7(一)坏死细胞,形态,更多的观察与VTN THP-1-derived巨噬细胞治疗与对照组相比。LDH释放试验表明,细胞死亡在thp-1-derived大大增加巨噬细胞在VTN刺激(图7 (b))。这些发现暗示VTN propyroptosis效应。
(一)
(b)
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(d)
(e)
(f)
实时PCR试验的结果表明,VTN治疗导致地震的一个重要upregulation和GSDMD表达,一个关键的刽子手的细胞pyroptosis [27,28),而il - 1的结果无显著差异β表达式(图7 (c))。符合这一点,西方墨点法和量化结果还表明,地震和GSDMD表达显著增强THP-1-derived巨噬细胞被VTN刺激与对照组相比(图7 (d))。进一步ELISA结果表明地震释放增加VTN刺激,和VTN未能改变il - 1β表达式(图7 (e))。这些发现表明VTN GSDMD-executed触发细胞pyroptosis,导致地震释放的增加会加重炎症。
3.8。通过触发NLRP3 VTN监管Pyroptosis Inflammasome激活
著名的NLRP3 inflammasome描述inflammasome,由NLRP3、凋亡和speck-like蛋白质包含一张卡片(ASC)和caspase-1,集中我们的注意力在NLRP3探索VTN的影响inflammasome [29日]。在此基础上,我们发现NLRP3 inflammasome THP-1-derived变化与VTN刺激巨噬细胞。qPCR和世行的结果表明VTN THP-1-derived巨噬细胞诱导NLPR3和caspase-1表达式,得到无显著差异在ASC表达式,从而提高裂解GSDMD GSEMD-N表达式(数据8(一个)和8 (b))。
(一)
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(c)
(d)
(e)
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我们先前的研究已经表明NF -κB途径参与细胞pyroptosis [24),进一步要求我们揭示VTN-regulated细胞pyroptosis背后的潜在机制。如图8 (c)磷酸化的NF -κB在THP-1-derived巨噬细胞显著增加响应VTN治疗,同时抑制NF -κ湾11 - 7085 B的反向VTN地震-表达和分泌的诱导效应(数字8 (d)- - - - - -8 (f))。这些发现表明VTN提升细胞pyroptosis NF -κB通路。
4所示。讨论
系统性红斑狼疮的发展与改变分子功能密切相关,生物过程和信号通路。然而,分子特征和分子功能,途径,和交互在系统性红斑狼疮的不同阶段是不清楚。在目前的研究中,我们发现105种不同的蛋白质比较JSLE患者和健康对照组基于蛋白质组学分析。结果表明,这些特定度有不同的分子功能、生物学途径,形成复杂interactome网络。更重要的是,我们发现尿液EPHA4和动态和静态JSLE VTN水平降低患者与健康对照组相比。进一步的生物信息学分析暗示我们EPHA4和VTN尿液中可能有一个潜在的生物标志物的可能性JSLE病人由于临床病理参数之间的关系和VTN。最重要的是,VTN治疗导致显著激活NLRP3 inflammasomes,导致裂开GSDMD-N和地震在THP-1-derived巨噬细胞分泌,加重炎症,这表明VTN可能作为一个有用的临床预后的生物标志物。
巧合的是,据报道,高水平的VTN相关的循环免疫复合物(CIC)——溶膜攻击复杂(MAC)在系统性红斑狼疮患者活动肾炎(30.),这意味着肾炎VTN可能值的活跃。有趣的是,在我们的研究中,我们进一步证明显著减少尿VTN和低水平表达血清C3和C4的不活跃JSLE也积极联系VTN C3 / C4,这可能源于在JSLE CIC-MAC肾小球的代谢分解,识别一个新颖的机制可能导致JSLE肾炎。更重要的是,它已经表明,EPHA4执行一个重要的角色在许多细胞过程,包括促进细胞增殖和细胞adhesion-mediated耐药性通过一种蛋白激酶信号通路(30.),而COL18A1与VTN并通过绑定EPHA4调节急性肝损伤α1β1整合素在肝细胞(31日]。此外,EPHA4 activation-mediated受体PI3K / Akt和Wnt /β连环蛋白信号通路以及ERK1/2发挥重要作用在调节epithelial-mesenchymal过渡发展(32),这是符合这些途径如图的分析4 (d)和4 (e),包括PI3K-Akt,细胞粘附分子,粘着斑。具体来说,EPHA4是最丰富的ephrin受体,与几乎所有ephrin配体,从对炎症反应的影响到中枢神经系统轴突退化和再生,尤其是神经功能恢复通过调节各种流程,如神经炎症,血管,神经发生,轴突重组和突触可塑性33]。虽然没有证据证明EPHA4的功能在SLE的发病机制,EPHA4可能炎性介质可能导致免疫病理疾病如多发性硬化和神经精神障碍在系统性红斑狼疮(34- - - - - -39]。有时候,在我们的研究中,我们展示了一个重要的蛋白质水平降低EPHA4 JSLE患者的尿液,这暗示EPHA4的潜在作用通过PI3K-Akt JSLE患者的神经发育的信号通路。然而,EPHA4和临床参数之间的关系将进一步解决在未来研究与大量的JSLE病人。
除了EPHA4,我们发现dsDNA和安娜与尿液VTN水平成负相关的关系,这是类似于其他研究血清S100流通和触发受体表达在骨髓电池140,41]。否则,VTN被报道参与促进炎性因子的表达,如il - 6和白血病抑制因子通过integrin-focal黏附激酶和uPAR信号通路42),促进神经发生(43]。另一项研究还显示colocalization增加MAC VTN, VTN受体(avβ3整合素),这两个是内部和周围的牙龈存款在膜性肾病44]。更重要的是,自身免疫性疾病的预防取决于免疫内稳态平衡的结果不同T淋巴细胞的子集。因此,在这项研究中,我们发现尿液VTN水平与% CD19显著负相关+在PBMC和% B细胞CD3+CD4-CD8——JSLE全血T细胞的无所作为。类似的关系被发现在一个分析与% VTN CD3的相关性+CD8+JSLE PBMC抑制T细胞的活跃。这些结果暗示由于更高的表达VTN在不活跃的活跃JSLE和低表达的VTN JSLE,相应的增加了% CD3+CD8+抑制T细胞活跃JSLE和更高的% CD19+B细胞在不活跃的JSLE可能涉及到autoinflammation和积累的MAC。这提醒尿液VTN水平可能成为一种新的生物标志物的诊断JSLE进展。
Inflammasomes胞内multiprotein复合物,协调antipathogenic宿主防御在髓细胞在炎症性自身免疫性炎症反应期间风湿性疾病,特别是巨噬细胞(45]。有趣,VTN已经证明通过触发来诱导细胞pyroptosis NLRP3 inflammasomes,导致caspase-1激活,裂开GSDMD-N,和地震,而无显著差异的ASC表达式得到VTN刺激的反应。进一步分析表明,VTN大幅增强的磷酸化NF -κB细胞pyroptosis的关键调节器。然而,进一步的工作是需要解决如何VTN监管NF -κB的活动。
总之,目前的研究证明了微分JSLE患者的尿液中丰富的蛋白质,它提供了一个新的见解JSLE的预后和发展。尤其是尿VTN被认为是潜在的生物标记物,这应该是进一步研究之前JSLE诊断的实用程序。
缩写
| ASC: | 凋亡和speck-like蛋白质包含一张卡片 |
| 肌萎缩性侧索硬化症: | 肌萎缩性脊髓侧索硬化症 |
| ALT: | 丙氨酸氨基转移酶 |
| 安娜: | 抗核抗体 |
| AST: | 天冬氨酸氨基转移酶 |
| BILAG: | 不列颠群岛狼疮评估指数 |
| 中投公司: | 循环免疫复合物 |
| COL18A1: | 胶原蛋白类型十八α1 |
| c反应蛋白: | c反应蛋白 |
| 度: | 差异表达基因 |
| dsDNA: | 双链DNA |
| EPHA4: | Ephrin a受体4 |
| ESR: | 红细胞沉降率 |
| FBLN5: | Fibulin |
| F11R: | 交叉的粘附分子—季受体 |
| 走: | 基因本体论 |
| GSDMD: | Gasdermin D |
| HB: | 血红蛋白 |
| IL: | 白介素 |
| KEGG: | 京都基因和基因组的百科全书 |
| LC: | 液相色谱法 |
| 麦克: | 膜攻击复杂 |
| 女士: | 质谱分析 |
| NF -κB: | 核因子kappa-light-chain-enhancer激活B细胞 |
| NLRP3: | nod样受体家族蛋白质3 |
| PBMC: | 外周血单核细胞 |
| PLT: | 血小板 |
| PPI: | 蛋白质相互作用 |
| PRNP: | 朊蛋白 |
| JSLE: | 少年系统性红斑狼疮 |
| 咽部菌: | 系统性红斑狼疮疾病活动指数 |
| SLICC: | 系统性红斑狼疮国际合作诊所 |
| 字符串: | 检索的搜索工具相互作用的基因 |
| S100: | S100钙结合蛋白 |
| uPAR: | 尿激酶纤溶酶原激活物 |
| VTN: | Vitronectin |
| 白细胞: | 白细胞。 |
数据可用性
和/或使用的数据集分析在当前研究可从相应的作者以合理的要求。
伦理批准
书面的知情同意是获得所有科目根据《赫尔辛基宣言》。这个协议是经伦理委员会批准的广州市妇女儿童医疗中心。
同意
同意不适用。
信息披露
工作提出了作为e-poster iccr - 2021年根据以下链接:https://iccr2021.iccreg.com/e poster/pdf/b - 3 - 1. - pdf,手稿提交预印在以下链接:https://www.researchsquare.com/article/rs-103494/v1(46]。
的利益冲突
作者声明没有潜在的利益冲突的研究,本文的作者,和/或出版。
作者的贡献
所有作者研究设计作出了实质性的贡献,分析和解释数据,起草文稿,编辑对本文的重要知识内容。万福徐、哲Cai和Huasong曾负责研究概念和设计。张歌,哲Cai、Wenxu锅和新华社梁做了实验。程之,Yanhao林,伍子胥,任气,萍,鲁伊·陈,李冯应谢,王张歌,宏力负责数据的采集。春郭黄、香港唐许万福,Huasong曾造成试剂/材料/分析工具。万福徐、张歌和哲Cai写道。王歌张Wenxu锅,宏力贡献同样这项工作。
确认
我们感谢所有为本研究作者的贡献。我们感谢美国过敏、免疫学和风湿病学的支持。这项工作得到了广东基础研究和应用基础研究基金会(2021号。2020 a1515110109 a1515012194, 2020 a1515110193)、广州市科技项目(103270671136)、广州儿科研究所资助/广州市妇女儿童医疗中心(没有。gwcmc2020 - 1 - 005),临床重点专科的建设和培养的关键主题广州妇女和儿童医学中心(170000105)、广州医学重点学科、专业(011006003号),国家健康委员会热带疾病预防与控制重点实验室(2022 nhctdckfkt21001),内部资金广州儿科研究所、广州市妇女儿童医疗中心的博士后研究项目(3001098),国家自然科学基金(81873869),和广州2018年博士后国际培训项目。