研究文章
凝血酶诱导cox - 2和铂族元素2表达式通过PAR1 / PKCalpha MAPK-Dependent NF-kappaB激活人类气管平滑肌细胞
图5
凝血酶诱导通过NF - cox - 2的表达κb (a)细胞使用helenalin 1 h,然后用凝血酶孵化6 h。cox - 2蛋白的水平是由蛋白质印迹。(b)细胞使用helenalin (3μ米)1 h,然后孵化与凝血酶4 h。cox - 2 mRNA水平和启动子活性的测定。(c)媒体免于(a)被用来确定PGE2的水平的一代。(d)细胞转染炒或p65 siRNA然后用凝血酶孵化6 h。确定p65和cox - 2蛋白的水平。(e)细胞转染野生型cox - 2启动子或mt-NF -κB cox - 2启动子,然后孵化与凝血酶4 h。启动子的活性cox - 2确定。(f)细胞治疗与凝血酶显示时间间隔。核和胞质分数准备使用anti-p65抗体进行免疫印迹。GAPDH和核纤层蛋白被用作标记蛋白胞质及核分数,分别。与凝血酶(g)细胞治疗指定的时间间隔。启动子的活性NF -κB是确定。(h)细胞进行预处理或helenalin (3μ米)1 h,然后用凝血酶治疗指定的时间间隔。phospho-p65是由免疫印迹的水平。(我)细胞治疗与凝血酶显示时间间隔。NF -κB p65绑定活动由芯片进行了分析测定。数据表示为三个独立的实验。#
,相比于控制或与抑制剂预处理表示在图中。
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| (b) |
| (c) |
| (d) |
| (e) |
| (f) |
| (g) |
| (h) |
| (我) |