壳聚糖纳米粒将ISAV融合蛋白cDNA导入黑色素瘤细胞：开发溶瘤抗癌疗法的途径

图2

NP-ISAV特性和效应。（a）通过琼脂糖凝胶电泳迁移，评估壳聚糖和pIRES-ISAV载体之间的复合物系综。DNA阶梯（L）显示在通道1中，裸载体显示在通道2中，复合物显示在通道3中。显示了（b）尺寸和（c）zeta电位等物理参数的代表性直方图。（d）转染48小时后通过RT-PCR检测ISAV融合蛋白（上图）和GAPDH（下图）的表达。代表性凝胶显示DNA梯形图（L，泳道1）、PCR空白对照（空白，泳道2）、未转染的亲代细胞（n/transf，泳道3）、转染的Lipofectamine ISAV细胞（Lipo-ISAV，泳道4）和转染的NP-ISAV细胞（NP-ISAV，泳道4）。（e）通过评估合胞体48的存在来确定ISAV-F蛋白的融合活性转染后h比较B16亲代细胞（上面板）、Lipo-ISAV转染的B16细胞（中面板）和NP-ISAV转染的B16细胞（下面板）。细胞用DAPI（左列）和CellMask（中列）染色。两种颜色的合并显示在右栏中，白色箭头表示合胞体。（f）应在B16、B16 Lipo ISAV和B16 NP-ISAV中量化合胞体的数量，并对应于3个独立实验的5个场的平均值。（g）在24、48和120时评估转染对细胞活力的影响 h转染后，对照未转染细胞进行标准化；来自脂质体胺（Lipo-ISAV）和纳米颗粒（NP-ISAV）转染细胞的数据如图所示 .使用Mann–Whitney检验进行统计分析( ).

（a）

（b）

（c）

（d）

（e）

（f）

（g）