文摘

背景。Butyrylcholinesterase (BChE)是合成主要是在肝脏和许多感染/炎症性疾病的一个重要标志,但它在获得性免疫缺陷综合症(AIDS)患者中的作用还不清楚。我们希望确定如果BChE水平与发展/艾滋病患者的预后。方法。BChE水平(U / L)测定505例;< 4500年被定义为“低”作为“正常和≥4500。“BChE水平之间的关联和CD4细胞计数阶段,身体质量指数(BMI)、c反应蛋白(CRP)水平,和住院时间进行了测定。使用kaplan - meier曲线和Cox比例风险模型来评估BChE水平低和死亡率之间的关联,在调整年龄,CD4细胞计数,阶段,实验室参数。结果。共有129名患者(25.5%)较低BChE水平。BChE是与CD4细胞计数密切相关,阶段,c反应蛋白水平,BMI(所有 )。八十四名患者(16.6%)死于第一年的随访。一年期低BChE患者生存率为64.5±4.5%和87.6±1.8%的正常BChE (log-rank, )。调整后的性别、年龄、BMI,舞台,CD4细胞计数,以及血清水平的血红蛋白,钠,白蛋白,风险比为1.8(95%置信区间,1.0 - -3.2)低BChE患者与正常组相比BChE ( )。结论。BChE水平与艾滋病毒/艾滋病的严重程度和是一个独立的危险因素在艾滋病患者死亡率增加。

1。介绍

消化系统感染的发病机制中发挥着重要的人类免疫缺陷病毒(HIV) (1]。肠道粘膜和内脏相关淋巴结可以作为“HIV水库”[2,3]。作为最大的消化系统器官,肝脏与艾滋病毒感染有关。例如,树突特异性细胞间粘附molecule-3-grabbing nonintegrin表达丰富在正弦肝脏内皮细胞,促进艾滋病病毒感染(4]。此外,在艾滋病毒感染肝脏可以调节几个过程通过调节淋巴细胞的功能,尤其是liver-associated淋巴细胞,导致获得性免疫缺陷综合症(艾滋病)的发病机制(5]。

另一方面,艾滋病毒感染对肝脏产生直接和间接的影响。研究已经证明,艾滋病毒可以感染肝细胞、枯氏细胞(6,7),肝星状细胞(hsc) [8]。感染艾滋病毒的这三种类型的肝细胞诱导炎性细胞因子的生产,以及增加肝脂肪变性的风险(9,10]。因此,循环水平的几个肝脏中蛋白质合成(如白蛋白、前白蛋白和转铁蛋白)减少损伤和炎症反应在许多危重病人,和衰减等水平的蛋白质与艾滋病患者死亡的风险增加(11]。

以前,我们显示,85%的艾滋病患者住院在中国拥有先进的艾滋病毒疾病和死亡率几乎25%在第一年的高活性抗逆转录病毒疗法(HAART),特别是在后前6个月的鸡尾酒疗法(12]。因此,易得的生物标志物的鉴定,可以预测短期死亡率将护理的一个重要进步。

Butyrylcholinesterase (BChE)是一种重要的酶在肝脏合成。在中国,血清肝功能的BChE被公认为一个参数包含在几乎所有病人的常规化学概要文件。BChE的正常范围是大约从4500 U / L - 15000 U / L在成年中国人,和测量血清BChE非常便宜(≈1美元)。它通常是作为一个预后的生物标志物,肝脏疾病,如病毒性肝炎,肝硬化,肝细胞癌,甚至肝衰竭(13- - - - - -15]。BChE也是一个重要的临床标记在炎症16,17],严重的细菌感染[18),真菌感染(19]。重要的是,减少BChE表示严重的系统性炎症在危重病人(20.]。此外,BChE水平反映了病人的营养状态(21]。有趣的是,患者感染艾滋病毒和乙肝病毒或丙肝病毒显示之间的直接相关性降低BChE和CD4计数减少22]。然而,BChE和艾滋病之间的关系还不清楚。自低BChE反映了可怜的免疫状态,增加炎症、感染、营养不良的病人,我们假设BChE可能是艾滋病毒/艾滋病患者的潜在生物标志物。

在目前的研究中,BChE来评估艾滋病患者的病程和预后和比较它与其他常见的生物标志物。我们想知道如果BChE水平与发展/艾滋病患者的预后。

2。材料和方法

2.1。伦理批准这项研究的协议

研究协议是按照1975年赫尔辛基宣言》和第一附属医院伦理委员会批准,浙江大学医学院(杭州)。书面知情同意了所有的病人参与这项研究。

2.2。研究群体

2010年4月至2015年3月,共有589艾滋病患者从第一附属医院、医学院、浙江大学,招生的都有资格在这个前瞻性研究。其中,84年被排除在外的原因如下:56了艾滋病毒/乙型肝炎病毒(HBV)感染,13个HIV / HCV感染,1例HIV /乙肝病毒和丙肝病毒感染,4病人得了癌症,和18名患者接受手术。因此,505例研究对象(图形成的1)。受试者接受HAART如果他们的CD4细胞计数≤350细胞/μL或疾病阶段III或IV (23,24]。基本方案是齐多夫定(AZT)或泰诺福韦(TDF) +拉米夫定(3 tc)结合奈韦拉平(一步法),依法韦伦(EFV),或双lopinavir (LPV / r)。


图1
病人选择的研究流程图。
2.3。实验室测试

住院后,血液样本被吸引后12小时的快。BChE化验了一个Autobiochemical分析仪(美国贝克曼库尔特,富勒顿,CA)使用胆碱thiobutyrate方法。BChE≥4500 U / L被定义为“正常BChE”和BChE BChE < 4500 U / L为“低。“数字CD4 +和CD8 + T细胞用流式细胞分析仪测定(美国新泽西州,正欲富勒顿)与荧光素isothiocyanate-conjugated反人类的CD4, phycoerythrin-conjugated反人类的CD8,和phycoerythrin-Cy5-conjugated反人类的CD3单克隆抗体(正)。hiv - 1 RNA是根据标准协议的化验COBAS®AmpliPrep / TaqMan®48分析仪(罗氏、巴塞尔、瑞士)。检测艾滋病毒的下限是400拷贝/毫升。

2.4。跟踪和收集的临床资料

每隔三个月随访是根据前面描述的方法(12,25]。后续的时间从住院的第一天。病例随访1年。

2.5。统计分析

连续正常变量平均值±标准偏差。分类变量是病例数(百分比)。CD4细胞计数(细胞/μL)表示为中位数(四分位差、差)。hiv rna水平(拷贝/毫升)log10-transformed到变量(日志拷贝/毫升)为统计分析符合正常标准。连续变量比较单向方差分析或学生的t以及。分类变量进行比较χ2分析或确切概率法。分析的BChE对患者生存的影响kaplan meier和Cox比例风险模型方法。被定义为一个“艾滋病相关死亡事件。”患者的数据审查最后访问日期(对于那些活着的最后随访期间),日期最后还活着(对于那些未知的生命体征),或日期的参与者来说,死亡的原因是不知道艾滋病。临床实验室收集的日期的前三天内日期只有病人的入院。数据不可用或超出病人的头三天承认被定义为“缺失的数据。“BChE (U / L)类别的< 4500年和≥4500;(年)的< 30岁和≥30;谁的我,II, III, IV;CD4细胞计数(细胞/μL)缺失的数据,< 50岁和≥50;hiv rna(缺失的数据拷贝/毫升),< 105和≥105;血红蛋白(g / L)的缺失数据,< 110年,≥110;血清钠浓度(更易/ L)的缺失数据,< 130年,≥130;和缺失数据的白蛋白(g / L), < 35岁和≥35。这些类别包括在模型作为协变量时间。单变量Cox模型中的这些协变量进行了分析。然后,反是; 在单变量模型多变量Cox比例风险模型的选择使用远期逐步(似然比)方法。多变量分析的失踪日期被排除在外。 (双尾)被认为是显著的。数据使用SPSS进行分析v19.0(美国、IBM、纽约Armonk)和Graphpad Prism 5.0版(美国加州La Jolla Graphpad软件)。

3所示。结果

3.1。患者的基本特征

五百零五例研究对象形成的。其中,441人(87.3%)是男性和64名女性(12.7%)。患者的平均年龄为41.8±13.8年。流行疾病进展的患者处于III或IV是80.8%。病人患有晚期免疫抑制状态CD4细胞计数中位数为76 /(20 - 233)细胞μL . BChE病人的平均水平为6073.8±2280.8 U / L。患者的基本特征如表所示1。

表1
病人基本特征( )。
3.2。BChE与艾滋病毒/艾滋病的进展密切相关

在目前的研究中,CD4细胞计数和阶段被用来表明艾滋病毒/艾滋病的进展。血清水平之间的相关性BChE, CD4细胞计数,阶段进行评估。降低血清BChE水平呈正相关,CD4损耗( )(图2(一个))。血清水平的BChE和世卫组织艾滋病毒/艾滋病的阶段也进行了评估。的血清水平BChE (U / L)的患者为7389.2±2152.2阶段I / II, III期6296.0±2261.4,5538.2±2138.2,四期,利用方差分析和LSD事后修正,我们发现患者在那些阶段I / II BChE水平相比,水平明显高于中观察到患者III期( )和四期( )。BChe的血清水平是负相关与世卫组织阶段( )(图2 (b))。

(一)
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图2
BChE与艾滋病毒/艾滋病的进展有关。(一)BChE水平与CD4细胞计数( )。(b)。BChE水平与艾滋病毒/艾滋病阶段(呈现负相关 )。 用单向方差分析测试。

此外,hiv rna测试在54个病人在我们的研究中。BChE之间没有显著的相关性被发现和hiv rna ( )。

3.3。BChE与炎症和营养状况显著相关

白细胞计数(WBC)、中性粒细胞比例和c反应蛋白(CRP)作为炎症指标/感染病人。我们评估了BChE的血清水平之间的关系和白细胞和中性粒细胞比例以及CRP。皮尔森相关分析表明,减少BChE的血清水平与CRP水平负相关( ),白细胞( )和中性粒细胞比例( )(数据3(一个)- - - - - -3 (c))。

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图3
BChE、感染和营养。BChE水平降低CRP浓度显著增加,白细胞和中性粒细胞比例( , , 、职责)(a - c)。BChE水平与身体质量指数呈正相关,白蛋白和血红蛋白(所有 )(d-f)。

我们使用了身体质量指数(BMI)、血清白蛋白和血红蛋白来评估病人的营养状态。BChE的血清水平之间的关系和体重指数和血清白蛋白和血红蛋白也进行了研究。相关性分析表明,血清BChE水平与BMI(密切相关 )、血清白蛋白( )、血红蛋白( )(数据3 (d)- - - - - -3 (f))。

3.4。血清水平BChE与治疗结果相关

进一步说明BChE在住院的血清水平的影响,对住院病人的血清水平的BChE,生存和死亡患者出院后进行了分析,分别。平均血清水平的BChE面(U / L)幸存在住院患者为5951.3±2089.7,6399.1±1960.5出院后,分别为( )。相比之下,平均血清水平的BChE面(U / L)减少从在住院4932.7±2118.3,4122.9±2009.1转移到太平间死去的患者,分别在病人住院期间死亡( )(图4(一))。幸存的患者在第三阶段,住院时间(天)的持续时间为14.5岁(范围7.9 - -22.8)患者的血清水平的BChE (U / L)≥4500和21.5(14.0 - -31.8)患者的血清水平的BChE < 4500 ( )。幸存的患者在四期,住院时间(天)的时间是20(范围、13-31)的血清水平BChE (U / L)≥4500和21(14-32)患者的血清水平的< 4500 ( )(图4 (b))。

(一)
(一)
(b)
(b)
图4
BChE水平和住院治疗。(a)意味着BChE水平增加从5951.3±2089.7 U / L 6399.1±1960.5 U / L ( )在住院患者中幸存下来,而意味着BChE水平下降从4932.7±2118.3 U / L 4122.9±2009.1 U / L ( )住院期间去世。(b)患者低BChE更长的住院时间比正常水平的患者BChE在第三阶段( ),但这种趋势并不明显的患者中四期。 , 使用t以及。
3.5。血清水平BChE是1年死亡率的独立预测指标住院艾滋病患者

招募的505名病人在我们的研究中,84名(16.6%)患者去世1年随访,包括42例(8.3%)患者血清低水平BChE和42例(8.3%)患者与正常血清BChE水平( )。七十一名患者(14.1%)3个月随访时已死亡。五个病人(1.0%)死于3-6-month随访,和8个病人(1.6%)死于6-12-month随访。64.5 kaplan - meier分析显示,1年累积的幸存者±4.5%患者的血清水平BChE < 4500 U /毫升和87.6±1.8%的血清水平BChE > 4500 U /毫升(生存率较, )(图5)。


图5
据BChE kaplan meier生存曲线的水平。BChE水平影响主要是1年死亡率。一年累积生存率低BChE患者是64.5±4.5%和87.6±1.8%患者正常BChE级别(log-rank, )。
3.6。BChE血清水平是预测的艾滋病毒/艾滋病患者的生存期

我们分层患者根据以下标准:年龄(年;< 30岁和≥30)、体重指数(公斤/米2;缺失数据,< 18岁和≥18),谁阶段(I、II、III和IV), CD4细胞计数(细胞/μL;缺失的数据,< 50岁和≥50),血清水平的血红蛋白(g / L;缺失的数据,< 110和≥110),血清白蛋白水平(g / L;< 35岁和≥35),血清钠浓度(更易/ L;缺失的数据,< 130和≥130),血清水平BChE (U / L;< 4500和≥4500)。在未经调整的模型中,我们的数据表明,以下因素导致了死亡率:年龄、BMI, CD4细胞计数,和世卫组织阶段,以及血清钠浓度、血红蛋白、白蛋白、BChE。风险比率(小时)3.5(95%可信区间(CI), 2.3 - -5.3)的血清水平低的患者BChE相比与正常血清BChE水平。接下来,我们分析了383例没有数据丢失。在多变量Cox比例风险模型调整年龄,CD4细胞计数,和世卫组织阶段,以及血清钠,血红蛋白,白蛋白,我们的数据表明,相比之下,一个正常的患者血清BChE水平,人力资源为1.8 (95% CI, 1.0 - -3.2)患者血清低BChE水平( )(表2)。这些数据表明BChE的血清水平是预测艾滋病毒/艾滋病患者的生存期。低血清水平的BChE患者有更高的死亡率比人力资源与正常血清BChE水平。

表2
死亡率的危险因素的患者在单变量或多变量Cox比例风险模型。

4所示。讨论

BChE测量是一种非常廉价的(约1美元)和常规项肝功能测试在中国几乎所有的住院病人。然而,BChE和艾滋病毒感染之间的关系尚不清楚。在这住院艾滋病患者的前瞻性研究,我们发现,低水平的BChE时承认与住院死亡和1年死亡率的风险更高。即使调整性别、年龄、BMI,舞台,CD4细胞计数,以及血清水平的血红蛋白,钠,和白蛋白在多变量模型中,低水平的BChE与双重的相关死亡的风险更高。BChE可能是一个有用的生物标志物预测HIV / AIDS患者的临床结果。

胆碱酯酶包括乙酰胆碱酯酶和BChE。乙酰胆碱酯酶是目前主要的胆碱能神经,胆碱能神经元,红细胞。BChE是一个α糖蛋白发现主要在肝脏和经常作为参数的蛋白质合成器官(26]。BChE水平下降等疾病严重的肝脏疾病,与有机磷化合物中毒,癌症,和恶病质,而水平的提高BChE已报告在肥胖、糖尿病、尿毒症、甲状腺机能亢进、高脂血症(26- - - - - -28]。

BChE扮演着一个重要的角色在急性和慢性炎性疾病。之前的研究表明,两种胆碱能反应状态,增强和抑制,被发现在急性炎症性噬菌体。增强剂显示增加BChE水平,完成白细胞恢复,和改善胆碱能状态调节血浆il - 6水平的急性感染或炎症,但抑制不29日]。同样,BChE活动和血清水平与慢性低级的和严重的炎性疾病(16,17,20.]。人类大脑,有趣的是,BChE也可检测参与胆碱能状态调制和nerve-macrophage交互。总的来说,BChE扮演着一个重要的角色在控制extrasynaptic胆碱能抗炎通路的信号,副交感神经功能障碍,和炎症相关的疾病30.,31日]。

BChE作为标志来预测预后的几个障碍(炎症性疾病、感染、营养不良、恶性肿瘤重要疾病,肝脏疾病,和代谢疾病32]),但BChE在艾滋病毒/艾滋病的作用是不完全理解。在这里,我们评估之间的联系的血清水平BChE和艾滋病毒/艾滋病患者的预后。我们的数据表明,≈30%的病人有降低血清BChE水平。

三个复杂的因素使BChE的血清水平的减少艾滋病患者。首先,营养不良和消耗综合征与蛋白质能量营养不良(PEM)和占BChE的血清水平的减少。研究已经证明,在小肠吸收异常是艾滋病患者的共同特征有或没有腹泻(1,33]。肠道功能紊乱和营养的摄入不足的主要原因是减肥和消耗综合征在艾滋病毒/艾滋病患者34]。血清水平的BChE、总蛋白和白蛋白较低在营养不良的儿童与正常儿童消瘦症比测量;这些值增加营养康复3周后,血清水平和一个类似的趋势BChE一直营养不良的成年人中观察到的35]。营养状况可能在PEM妥协,对结果有着重要的不利影响。一些作者认为血清水平的BChE营养和预后标记(21]。在我们的研究中,大多数病人(≈80%)是在那些阶段III / IV,所以大部分受试者体重不足或浪费综合症。患者后期的重要疾病失去食欲,导致营养物质的摄入不足。同时,我们发现血清BChE水平与BMI密切相关,白蛋白、血红蛋白,这表明BChE是一个潜在的营养状况的标志。较低的血清水平BChE反映了减少营养的病人,这是一个坏的预测结果。

第二,感染和炎症会影响血清水平BChE。慢性炎症中扮演一个重要的部分在未经治疗的艾滋病毒感染的发病机制36]。这样的炎症可以导致肝脏合成蛋白质的功能障碍,导致减少BChE生产(16,20.]。全身感染也会导致BChE衰减;BChE水平显著低于那些菌血症,可能有助于早期发现脓毒症(18]。低水平的BChE也被指出在深部真菌感染,可能是由于浓缩的血液流经肝脏或入侵真菌(例如,白色念珠菌,假丝酵母tropicalis)肝脏从肠道通过退化壁垒胃肠粘膜的渗透37]。同时,HIV-mediated破坏肠道粘膜导致微生物易位,导致持续的局部和全身炎症,从而促进艾滋病病毒/艾滋病的进展(36]。进行微生物产品也通过肝脏,导致肝损害和受损的蛋白质的合成36]。早期的研究表明两种类型的胆碱能状态反应者,命名为增强剂和抑制。设置的急性感染或炎症,前者指的是BChE高水平和改善白细胞状态以及胆碱能改善状态调节对血浆il - 6水平,而后者没有显示任何前述的状态。在我们的研究人群,大多数患者免疫抑制和患有严重机会性细菌/真菌感染。重要疾病或感染促进炎症反应迅速,对肝脏合成蛋白质分解代谢的影响。血清炎性细胞因子如白细胞介素- 6的水平,移行,BChE以及BChE活动和活动没有测量在目前的研究中,但我们发现BChE水平与CRP水平负相关,白细胞、中性粒细胞比例,证明感染导致低水平的BChE。

第三,艾滋病毒感染本身可能直接或间接影响肝功能(38]。发现hiv rna在正弦体内细胞和肝细胞(6]。高水平的hiv rna是一个独立的因素与丙氨酸转氨酶水平增加有关HIV-only-infected患者(39),这表明艾滋病毒促进肝脏功能障碍。艾滋病毒可以感染肝细胞(6[],枯氏细胞7),肝星状细胞(8,40]。在我们的研究中,hiv rna水平测定54例。然而,没有明显的相关性被发现的hiv rna水平和BChE之间。研究表明,艾滋病毒感染可诱导肝细胞凋亡(肝功能的损害41),从而削弱枯氏细胞的能力清除细菌易位的产品(7)和促进HSC促炎细胞因子的生产(40]。在艾滋病患者中,微生物易位造成系统性脂多糖浓度的增加导致慢性免疫激活,导致蛋白质合成障碍(42)(包括BChE合成)。因此,直接hiv rna和BChE之间的关系可能会被上面提到的三个因素。

重要的是,我们的研究表明,BChE可能与治疗结果相关。血清水平的BChE增加从住院到出院幸存的患者。然而,血清BChE减少患者住院期间死亡。这些数据表明,有效的治疗(包括抗感染药物和营养治疗)可能促进肝脏BChE合成。BChE也与住院时间有关。平均住院期间患者的BChE低于正常水平与低水平的情况下BChE III期但不是四期。这种差异可能是因为四期患者有更多的并发症和感染(表1),这可能掩盖BChE水平的影响平均住院时间。

我们的研究的主要局限是,首先,我们没有充分评估hiv rna和BChE水平之间的关系。在中国hiv rna测试是相对昂贵,执行这个测试在所有的病人是很困难的。尽管如此,我们和其他研究人员对肝功能了解hiv rna的潜在价值。另一个限制是缺失的数据,尤其是CD4细胞计数在14.1%的病人失踪了。这是因为中国政府实施国家免费抗逆转录病毒治疗项目(NFATP)在2003年,“四个自由和一个护理”政策(免费提供艾滋病毒检测和CD4 + T细胞测试;免费抗逆转录病毒治疗的艾滋病患者;免费的药物来预防母婴传播;为艾滋病孤儿免费教育;和政府关心艾滋病患者居住在贫困)[43]。因此,一些患者免费CD4 + T细胞测试执行在当地疾控中心诊所每三个月,而不是在我们医院,我们不能有访问CDC数据。其他缺失的数据主要是由于数据前三天内没有得到病人的入院。然而,我们的数据显示,BChE水平显然是与病人的死亡率在多变量Cox比例风险模型中,表明BChE水平与艾滋病毒/艾滋病的严重程度和是一个独立的危险因素在中国艾滋病患者死亡率增加。

5。结论

我们的研究表明,尽管它不是一个特定的艾滋病的标志,一个较低的水平的BChE是一个独立的代理标记患者的疾病进展的艾滋病毒/艾滋病患者。患者血清低BChE有更长时间的1年内住院和死亡的风险更高。BChE一般是利用生物标志物在中国和应包括作为一个实验室评估时对HIV / AIDS病人住院治疗。BChE可能受益的患者血清水平较低密集的营养支持,实施早期抗生素治疗,减少炎症和策略。

附加分

篇文章的主要观点。Butyrylcholinesterase (BChE)与艾滋病病毒/艾滋病的进展有关。患者血清低BChE再住院和死亡的风险更高。BChE血清水平的评估提供了一个常规生化方法预测中国艾滋病患者的临床结果。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

作者的贡献

一派徐和吴南平设计研究。彪朱镕基和贾阳光收集的数据。Zongxing杨负责数据分析。应黄和Jinlei郑随访研究。一派徐负责论文写作。应黄,燕许,Jinlei郑随访研究。Sabine金洛克,Michael t .阴,宏磊翁修订了纸和重写一遍。一派徐是第一作者。

确认

作者感谢王宏钜和Ruoyu盾技术援助和艾滋病毒/艾滋病病房的工作人员在第一附属医院,浙江大学医学院。这项研究得到了浙江省科学技术厅(合同号LY12H26005)。