绦虫crassiceps抗原控制实验1型糖尿病诱导或者激活巨噬细胞

文摘

1型糖尿病(近年来)是一种自身免疫性疾病引起的胰腺的选择性破坏β肽,导致无法产生胰岛素。促炎细胞因子il - 1等β、il - 6、TNF -α干扰素-γ白介素,IL-17,没有可以通过CD4和CD8被释放⁺淋巴细胞以及经典激活巨噬细胞(凸轮ϕ,在近年来的发展是很重要的。寄生虫感染已被证明,以防止内转,主要通过Th2-biased反应和增加监管细胞群的招聘。以前,我们已经证明绦虫crassiceps感染小鼠显著降低高血糖、胰岛炎和近年来的发病率。在这项研究中,我们确定t . crassiceps -派生产品,如可溶性(TcS)或排泄分泌抗原(tc)可能有益影响实验近年来的发展。用不同剂量治疗之前或之后归纳分析了近年来。老鼠用TcS预处理无法发展近年来,而那些接受tc内转至后早期感应显示显著降低胰岛炎和高血糖增加招聘或者激活巨噬细胞(麦ϕ和myeloid-derived抑制细胞(MDSCs)。最后,我们研究了麦的调节作用ϕ在近年来通过与clodronate-loaded脂质体耗尽巨噬细胞,证明麦ϕs是近年来监管的重要细胞。

1。介绍

1型糖尿病(近年来)是一种自身免疫性疾病引起的胰腺的选择性破坏β肽,降低胰岛素的生产(1]。缺乏胰岛素影响血糖浓度的规定,导致严重的高血糖。糖尿病的发病涉及遗传和环境因素(2]。促炎细胞因子il - 1等β、il - 6、TNF -α干扰素-γ,il - 12、IL-17和一氧化氮(NO)可以通过CD4被释放⁺和CD8⁺T淋巴细胞以及凸轮ϕ年代,这似乎是重要的发展胰岛炎和β细胞的死亡3,4]。糖尿病大鼠实验动物模型如nonobese(点头)或多个低剂量链脲霉素(MLD-STZ)提供了新的知识和策略来调节这种疾病(5]。

在过去的几年里,抗炎反应已被建议作为一个有用的方法来调节免疫系统在自身免疫性疾病。例如,在老鼠点头,il - 4和il - 10的政府可能预防糖尿病的发展(6]。此外,寄生虫感染已经被用于减少近年来发展。这种效应的机制可能包括诱导强烈的th2型反应,增加监管细胞数量,如Treg MDSCs,麦ϕ年代,对宿主的免疫系统起到监管作用[7]。感染曼氏裂体吸虫(8),Heligmosomoides polygyrus(9,10),Litomosoides倍(11),旋毛虫(9),Nippostrongylus取代巴西橡胶树,类圆线虫属venezuelensis(12)可以提供不同级别的保护的发病近年来在点头MLD-STZ-induced内转至老鼠,但所有这些寄生虫在宿主可能引起危险的副作用。例如,曼氏裂体吸虫,Litomosoides倍,旋毛虫复杂的生命周期,包括迁移通过一些组织包括肺、膀胱和肌肉,这些寄生虫造成损害。以前,我们已经表明,感染绦虫绦虫crassiceps显著降低高血糖、胰岛炎,因此,近年来的发病率在老鼠MLD-STZ对待。此外,高水平的血清il - 4和增加麦ϕ人口也诱导,这表明该人群可能是重要的在防止内转13]。

麦ϕs是Th2反应引起的,比如那些寄生虫感染引起的(14]。麦ϕ可以产生il - 10和TGF -β和表达下调的促炎细胞因子水平。此外,麦ϕ表达抑制的分子如PDL-1和PDL-2 (PD-1配体),这都是与抑制增生性反应(15- - - - - -17]。同样,麦ϕ年代表达arginase-1,导致精氨酸代谢转向生产L-ornithine、多胺和胶原蛋白的前体,伤口愈合的重要分子(18,19]。相比之下,凸轮ϕ年代产生进气阀打开,将精氨酸转换成ROS也没有。自由基和没有诱导损伤的关键β肽(15,19]。有趣的是,在很多研究中,感染寄生虫与抗原或治疗导致麦的数量的增加ϕ年代。例如,美国曼感染或治疗可溶性虫抗原(SWA)或可溶性鸡蛋抗原(海)带来减少炎症反应在老鼠点头,已与增加麦ϕ和Treg人口(20.- - - - - -22]。在另一项研究中,E / S的产品肝片吸虫(跳频)减少胰岛损伤和高血糖小鼠点头,增加麦ϕ年代在胰腺和胰淋巴结(23]。此外,麦过继转移ϕ年代在体外诱导小鼠il - 4和IL-13点头降低血糖和胰岛炎,建议保护作用在这个人口(24]。同样,另一项研究使用MLD-STZ模型显示血管再生和伤口愈合过程如果麦更有效ϕ年代出现(25]。然而,在这些研究中,寄生虫或他们的产品管理近年来发病之前,留下的问题,这种治疗方法是否可能是有用的作为一种治疗选择。

另一个重要的人口也能够抑制免疫反应是myeloid-derived抑制细胞(MDSC)人口。MDSCs异构人口骨髓祖细胞、不成熟的髓细胞可以分化,延迟他们的成熟和的表达不同的标记,如CD11b和Gr1一起26]。两个MDSCs最近的子集定义:单核细胞的MDSCs,表达CD11b⁺Ly6C^高Ly6G⁻,和粒细胞MDSCs表达CD11b⁺Ly6G⁺Ly6C^低;每个人都有不同的功能在癌症,寄生虫感染和自身免疫26,27]。然而,他们的角色在近年来的发展在很大程度上是未知的。

本研究的目的是确定可溶性分泌或排泄/产品t . crassiceps可以通过MLD-STZ防止近年来诱导。此外,我们评估AAM的保护作用ϕ年代和MDSCs引起的t . crassiceps在近年来的发展和他们的产品。

2。材料和方法

2.1。老鼠

六到八周大的雄性BALB /端盖老鼠从哈伦购买实验室(墨西哥),保持在一个无菌的环境动物设施FES-Iztacala,自治,按照制度和国家的指导方针。

2.2。寄生虫和抗原制备/量化

Metacestodes的绦虫crassiceps在无菌条件下收获从雄性BALB /端盖小鼠的腹腔感染和2 - 4个月后与冰冷的洗4次,无菌PBS。(我)t . crassiceps可溶性抗原(TcS)是由均质化整个metacestodes体积(10毫升)2轮3秒钟通过使用一个均质器(Polytron Kinematica)。匀浆是离心机在2000 g×20分钟在4°C,和上层清液,含有PBS-soluble抗原,收集和冻结在−80°C,直到进一步的使用。蛋白质浓度测定用布拉德福德分析工具包(BioRad)。TcS的制备是类似于[描述28]。(2)T crassiceps分泌排泄/产品(tc)被Terrazas准备其他地方描述et al。29日];短暂,metacestodes收获在无菌条件下3洗后无菌PBS。Metacestodes被播种在6-well板块(合演,剑桥,MA) 24小时37°C和5%的公司₂。上层清液收集和1000×g离心10分钟。随后,上层部分集中使用50 kDa Amicon超滤管(微孔)和进一步离心机在2000 g×30分钟。蛋白酶抑制剂被添加到≥50 kDa分数,样本在−储存80°C,直到进一步的使用。蛋白质浓度测定用布拉德福德分析工具包(BioRad)。

2.3。治疗

不同的实验组,每组详细表1被使用。

2.4。血糖监测

血糖测定(0,1,3,6周后近年来感应使用Accu-Check优势glucometer(罗氏诊断)的动物,禁食6小时。动物被认为是糖尿病患者空腹血糖时大于200 mg / dl。

2.4.1。葡萄糖耐量试验

在诱导内转至6周后,小鼠受到一个腹腔内葡萄糖耐量试验为了建立他们的糖尿病的葡萄糖代谢的影响。的小鼠禁食6小时前样本集合。基底血液样本(0)收集的尾巴剪断,和血浆葡萄糖是评估使用glucometer Accu-Check优势。小鼠腹腔注射葡萄糖过滤(1.5毫克/公斤)。血糖水平进行评估再次在30 - 60 - 120分钟的时间点。

2.4.2。组织学

胰脏器官从收集所有组6周后诱导糖尿病。在石蜡组织处理和嵌入式,5μ米被削减部分进行分析。薄片被苏木精和伊红染色())和评价存在胰岛炎镜下使用下面的评分系统:noninfiltrated(健康的小岛)peri-insulitis在小岛的边缘(淋巴细胞),胰岛炎20%(胰岛炎到小岛的内部≤20%),和胰岛炎40%(胰岛炎到小岛的内部≥40%,损伤胰岛结构)。代表10所示的胰岛炎评估每组小鼠(至少100小岛)。

2.4.3。细胞因子elisa

外周血收集从尾巴剪1,3,6周后归纳。血清il - 4和TNF -α是衡量使用商品化试剂盒购自Peprotech夹心ELISA,墨西哥。

2.4.4。流式细胞术

腹膜渗出物细胞(胸大肌)获得从腹腔独特的MLD-STZ私家侦探组老鼠6周。细胞和生理盐水洗两次,和红细胞resuspending细胞细胞溶解的博伊尔的解决方案三氯化铵和0.16米(0.17米)。两个洗后,可行的细胞数与纽鲍尔血细胞计数器通过台盼蓝排斥。佩奇被调整(1×10⁶细胞)和Fc受体被封锁anti-mouse CD16 / CD32 (Biolegend、钙、美国),然后沾APC-F4/80, APC-CD11b, FITC-CD11c, FITC-MMR, PE-PDL-1, PE-PDL-2 PE-IL-4Rα,PE-Gr1(从Biolegend、钙、美国)和孵化30分钟在4°C FACSFlow染色缓冲区(正)。分析了细胞使用FACsCalibur和CellQuest软件(正)。

2.4.5。统计分析

数据进行统计显著性检测使用GraphPad棱镜软件(版本5.0;Graphpad软件、圣地亚哥、钙、美国)。两组之间的比较,Mann-WhitneyU用非参数数据测试用于测试的差异。实验测试了多个组克鲁斯卡尔-沃利斯检验其次是邓恩的多重比较检验。数据提出了均值±扫描电镜;值< 0.05被认为是统计学意义( , , )。

3所示。结果

3.1。t . crassiceps可溶性抗原减少实验老鼠内转至只有治疗保持不变

我们的第一个目标是测试是否可溶t . crassiceps抗原可能防止近年来通过之前或持续的接触。因此,老鼠对ip与50μg (TcS每周3次,开始前一周内转至感应和持续的连续六周内转至后感应到安乐死(STZ / TcS-2),或剂量的50μ克可溶性抗原诱导MLD-STZ前一周,一周3次(STZ / TcS-1)(图1(一))。血糖测量一周一次。图1 (b)表明STZ / TcS-2小鼠血糖水平低于STZ 3和6周后疾病感应;然而,STZ / TcS-1没有这种效果。令人惊讶的是,STZ / TcS-2老鼠,有持续的接触TcS抗原表达下调边缘的高血糖非病理性水平(200 mg / dl)。此外,虽然糖尿病的老鼠的比例免费STZ组为0%(与糖尿病定义为葡萄糖水平> 200 mg / dl), STZ / TcS-2组显示显著减少内转(50%),而STZ / TcS-1有积极的影响只有25%的老鼠(图1 (c))。此外,我们评估这些小鼠的糖耐量和葡萄糖注射ip(1.5毫克/公斤),在不同的时间和他们的血糖评估。高血糖是显著降低小鼠接受TcS不断与STZ和STZ / TcS-1组相比,显示高血糖300 mg / dl(图1 (d))。

3.2。持续的接触在T1D-Induced老鼠TcS减少胰岛炎

在第6周内转至感应,小鼠安乐死,其胰脏器官被处理和组织学评估胰岛炎。STZ和STZ / TcS-1组显示广泛而严重的peri-insulitis和胰岛炎胰岛,胰岛结构有明确的损失,而老鼠不断暴露在TcS抗原(STZ / TcS-2)显示的数量显著减少渗透的小岛,在他们中的大多数仍未修改的(数据结构2(一个)和2 (b))。

3.3。常数TcS治疗糖尿病小鼠诱导高水平的il - 4

评估是否TcS治疗可以修改炎症反应,循环在不同组的血清细胞因子水平测量。肿瘤坏死因子-α,一个重要的细胞因子与胰岛损伤,显示类似的团体之间的水平,但在近年来诱导后的第六周,我们观察到轻TNF -程度的增加α在STZ老鼠(图3(一个))。相比之下,il - 4明显升高STZ / TcS-2老鼠从第一周的治疗,而STZ和STZ / TcS-1小鼠显示低水平的细胞因子(图3 (b))。

3.4。常数TcS曝光新兵麦ϕ年代

接下来,我们检查了TcS暴露是否会支持麦的招聘ϕ年代。佩奇被流式细胞术分析,FSC,我们评估^高SSC^高F4/80⁺细胞寻找麦ϕ标记。如图4,STZ-treated STZ-untreated小鼠减少了AAM的百分比ϕ年代,当STZ / TcS-2 AAM的百分比显示ϕ年代,鉴于MMR的表达水平,IL-4Rα、PDL-1 PDL-2显著调节STZ / TcS-2-treated老鼠相比STZ-treated老鼠。

3.5。tc减少治疗近年来的发病率

一个主要的问题是是否接触t . crassiceps产品早期近年来归纳后可以有效保护糖尿病小鼠。我们使用三种不同治疗方案相同的变量描述:小鼠腹腔注射50μg (STZ / TcS-3), 100年μg (STZ / TcS-4),或200年μTcS的g (STZ / TcS-5)开始后第一周内转至感应(图5(一个))。此外,我们测试了tc治疗一个常数形式,50μg /剂量前1周和6周后诱导内转(STZ / TcES-1)或诱导治疗后50,100,或200μg开始后的第一周发布日内转感应(STZ / TcES-2 STZ / TcES-3和STZ / TcES-4 resp)使用之前描述的方案(图5(一个))。我们发现,TcS治疗并没有显示在任何剂量的保护作用,当动物被暴露t . crassiceps派生抗原一周后诱导糖尿病(图5 (b))。同时,常数tc (STZ / TcES-1)治疗是不足以降低高血糖。相比之下,200年μg /鼠标剂tc抗原(STZ / TcES-4)更有效减少葡萄糖的高水平在糖尿病小鼠诱导方案(图5 (c))。此外,糖尿病的老鼠的比例免费STZ组6周是零,而在STZ / TcES-4,比例为50%,在STZ / TcS-2(图5 (d))。

接下来,我们评估胰腺的胰岛炎和胰岛损伤评分。数据5 (e)和5 (f)表明STZ / TcES-4组显著减少胰腺损伤,因此伤害较低分数;大部分的小岛显示渗透和peri-insular渗透,与STZ组,显示严重损伤胰岛和发达胰岛炎在20 - 40%。

STZ / TcES-4治疗也显著增加麦的表达ϕ标记如PDL-2和MMR水平相比STZ-induced老鼠(图6(一))。

3.6。暴露在t . crassiceps -衍生产品在近年来感应FSC的人口增加^高Gr1一起⁺CD11b⁺细胞

检查是否接触t . crassiceps抗原是有效地降低高血糖(STZ / TcS-2和STZ / TcES-4)在糖尿病小鼠可以修改MDSCs的招聘,我们评估CD11b的表达和Gr1一起在腹膜细胞标记流式细胞术。如图6 (b)STZ / TcS-2和STZ / TcES-4治疗导致的百分比明显高于FSC的招聘^高SSC^高CD11b⁺Gr1一起⁺细胞(34%±7和75%±3、职责),相比之下,STZ老鼠(3%±0.9)和未经处理的小鼠(1.7±0.07%)。这些结果表明CD11b可能的积极作用⁺Gr1一起⁺人口以及麦ϕ年代在调节近年来发展。

3.7。巨噬细胞耗竭逆转Helminth-Associated保护近年来

阐明细胞群是参与helminth-associated保护近年来,麦ϕ年代或CD11b⁺Gr1一起⁺,或两者,我们被感染的老鼠t . crassicepsmetacestodes 6周后,近年来与MLD-STZ诱导受感染的老鼠。之后,在第二周内转至感应,糖尿病小鼠注射i.p。每周3次2毫克/鼠标clodronate-loaded脂质体或控制PBS-loaded脂质体为6周内转至感应(图7(一))。治疗糖尿病鼠PBS-loaded脂质体(STZ PBS)和clodronate-loaded脂质体(STZ Cl)显示高血糖在第二周开始post-T1D归纳。相比之下,t . crassiceps来华的老鼠接受控制脂质体(STZ / Tc PBS)显示血糖水平低于200 mg / dl整个治疗期间(图7 (b))。有趣的是,当t . crassiceps来华的老鼠收到clodronate-loaded脂质体(STZ / Tc Cl),这种寄生虫感染的保护作用是逆转,和老鼠像STZ糖尿病老鼠,显示高血糖(图7 (b))。糖尿病的发病率也严重影响clodronate治疗每组:所有STZ PBS老鼠显示高血糖邮寄第二周内转至感应和被认为是糖尿病,而STZ Cl老鼠显示高血糖,直到第四周后近年来归纳。相比之下,STZ / Tc PBS组,观察保护作用,只有50%的这些小鼠高血糖(> 200 mg / dl),和其余的动物仍然健康,但当t . crassiceps来华的动物收到clodronate脂质体(STZ / Tc Cl),所有这些动物迅速把糖尿病,血糖水平较高的第六周,糖尿病(图的,只有15%是免费的7 (c))。最后,获得进一步了解是否麦ϕ年代,CD11b⁺Gr1一起⁺细胞,或者两者都参与了糖尿病小鼠的保护以及是否clodronate-loaded脂质体耗尽其他监管细胞,流式细胞术腹膜细胞。我们观察到STZ老鼠收到PBS-loaded脂质体招募了FSC^高SSC^高F4/80⁺和FSC^高SSC^高CD11b⁺在腹腔细胞;相比之下,老鼠接受clodronate-loaded脂质体显示F4/80耗尽⁺细胞群,但保持CD11b招聘⁺细胞,证明clodronate脂质体耗尽巨噬细胞,主要是麦ϕ年代,没有CD11b等其他人群⁺细胞(图7 (d))。图7 (e)显示,t . crassiceps感染与STZ显著增加标记MMR和PDL-2与其他组相比,而受感染的老鼠接受clodronate脂质体显示显著减少这些麦的表达ϕ标记。

接下来,我们寻找任何MDSCs区别两种不同的亚种,CD11b⁺Ly6C⁺Ly6G⁻和CD11b⁺Ly6G⁺Ly6C⁻,这些数量是否可以改变他们的招聘当我们注入clodronate-loaded糖尿病动物的脂质体。流式细胞术的腹膜细胞显示CD11b表达的各种组织⁺Ly6C⁺标记在一个较高的比例,除了治疗组。然而,当动物收到clodronate脂质体,CD11b的百分比⁺Ly6C^高细胞在小鼠明显高于PBS脂质体(图7 (f))。相比之下,引起细胞,CD11b⁺Ly6C⁻Ly6G⁺,增加注入clodronate loaded-liposomes;STZ / Tc Cl和STZ / Tc PBS相比有显著差异STZ PBS组的老鼠。STZ / Tc Cl和STZ Cl组两CD11b显示更高的百分比⁺Ly6C⁺Ly6G⁻和CD11b⁺Ly6C⁻Ly6G⁺细胞;所有这些观察结果表明,单核细胞的和/或粒细胞MDSCs可以促进炎症反应和损伤,因为两组显示高血糖和近年来的发病率;此外,麦的招聘ϕ在这些团体并不明显。相比之下,STZ / Tc PBS老鼠保持麦ϕ招聘并显示降低血糖和近年来的发病率降低,表明麦ϕ年代监管细胞有一个重要的角色在调制内转MLD-STZ引起的。

最后一个实验设计是复制TcS与动物接触,在老鼠注射TcS前一周内转至感应,之后4周。数据显示在图8表明,小鼠暴露在TcS和对待PBS脂质体(STZ / TcS PBS)显示降低高血糖,而老鼠同样暴露在TcS但接收clodronate-loaded脂质体(STZ / TcS Cl)不是防止增加血糖水平,再次支持麦ϕ年代可能发挥核心作用近年来保护使用helminth-derived分子。

4所示。讨论

寄生虫和他们的产品已经被认为是一个强大的武器对许多炎症性疾病,如1型糖尿病、关节炎、结肠炎、脑脊髓炎、克罗恩病、哮喘(8,32- - - - - -34];这种效应主要是根据寄生虫的能力及其抗原诱导强烈Th2-biased反应,与增加细胞因子il - 4、il - 10, IL-13, TGF -β(19,35]。此外,他们诱导调控细胞,如麦ϕ年代,Treg MDSCs,已与减少炎症反应和组织损伤以及伤口愈合过程(18,27,36,37]。

1型糖尿病是一种自身免疫性疾病,产生胰岛素β肽CD4所摧毁⁺和CD8⁺T细胞和凸轮ϕ年代(1,2]。研究动物模型如点头或MLD-STZ-induced内转至老鼠提供了证据寄生虫的能力减少炎症反应,死亡的β肽,胰岛炎(7]。在先前的研究中,我们发现t . crassiceps感染能够降低血糖和胰岛炎与强烈的麦招聘ϕ年代;这些数据表明,这些细胞可能是重要的预防胰腺损伤和抑制autoreactive T细胞(13]。此外,我们组显示t . crassiceps由autoreactive细胞感染可以减少炎症反应和损伤在结肠炎和实验性自身免疫性脑脊髓炎(运算单元)38,39]。我们的目标在目前的工作是否进行调查t . crassiceps产品(tc或TcS)将模拟实验感染的影响通过减少在近年引起的炎症反应,我们寻找细胞参与监管的回应。在这里,我们表明,两种治疗方法,TcS和tc,可以控制高血糖,胰岛炎,和近年来的发病率,但轻微的差异。我们发现重要的是TcS治疗开始前MLD-STZ诱导内转,继续不断地注入TcS的保护作用。否则,tc治疗糖尿病小鼠更有效降低高血糖高剂量(200μTcS (g),而50岁μg),在感应系统MLD-STZ-induced内转。TcS的影响和tc之间的差异可以解释为以前的工作,接触的巨噬细胞干扰素- tc修改他们的炎症反应γ通过高水平的表达SHP-1 SOCS3,抑制干扰素-γ转导信号,但是当巨噬细胞暴露在TcS,这些细胞并没有阻止干扰素-γ信号(40]。在另一个研究,发现t . crassicepsE / S抗原诱导的耐受性树突状细胞表型,停止了他们的成熟,downmodulated costimulatory分子的表达(29日]。这种差异观察体内和体外TcS和tc可能与不同的成分或生物分子的浓度> 50 kDa分数。

不同的研究已经证明了几个helminth-derived产品减少的能力近年来发展;然而,大多数评估作为近年来的预处理。例如,Zaccone等人发现美国曼产品可以预防糖尿病NOD小鼠的发展,但只有在治疗开始前的第四个星期年龄(21]。在其他的研究中,Amdare等人表明,治疗马来丝虫ES和可溶性(成人和微丝蚴)产品可能防止内转,但只有在一系列注射开始之前内转至感应(41]。最近,在2016年,Ajendra等人证明l .倍抗原(原油虫提取)可能防止近年来在以后治疗10周后(年龄)在小鼠点头,但只有作为综合治疗的一部分,一个鼻内胰岛素原剂量(42]。在这种背景下,我们认为,tc可能是一种有前途的治疗方法,考虑到它的影响不需要额外的治疗预防内转。此外,近年来的诊断的推理在人类到达晚了,当大多数的β肽被摧毁,tc可能预防或延迟内转至起始后胰岛的破坏。本着这种想法,另一个重要的问题是知道t . crassiceps抗原可以被人类细胞;在这方面,Terrazas出版社。表明人类的树突细胞接触t . crassiceps排泄分泌抗原/显示耐受性概要文件(29日]。还需要进一步的研究来证明tc可能调节人类autoreactive细胞治疗在近年来在未来。

另一个重要寄生虫的影响和他们的产品是他们的能力来招募的差别监管细胞参与对这些炎症,已经证明了一些寄生虫感染(美国曼,h . polygyrus,马来丝虫,n取代巴西橡胶树,t . spiralis,f .属的植物,t . crassiceps)减少在近年发展;然而,他们也评估作为近年来的预处理,和他们中的大多数招募了麦ϕ年代(8,9,11,12]。一些研究也一直专注于产品的寄生虫搜索监管细胞参与表达下调炎症。例如,美国曼产品(海、SWA)可能会引起大量的麦ϕ年代和Treg细胞(20.,21]。E / S的产品f .属的植物也增加了麦ϕ和Treg人群糖尿病老鼠,这表明这两个种群保护糖尿病相关(23]。在我们之前的研究中,我们发现t . crassiceps感染MLD-STZ-induced内转至老鼠招募了麦ϕ年代(13]。在这里,我们获得知识AAM的角色ϕ年代期间t . crassiceps抗原(TcS和tc)治疗在近年来,我们发现增加麦的表达式ϕ标记如MMR PDL-1, PDL-2 T1D-protected老鼠。这些数据同意最近的观察,降低高血糖小鼠感染美国曼麦Treg独立,而招聘ϕ年代是重要的过程(43]。在工作中,作者阻塞Treg细胞通过注入特定anti-Treg抗体,高血糖并没有提高,甚至更糟。然而,这些相同的作者并没有测试AAM的特定角色ϕ年代,而在这次调查我们首次展示麦ϕ年代至关重要的保护作用helminth-derived产品近年来发展。此外,而在美国曼感染只有有限的降低高血糖和糖尿病3周后,所有的动物成为我们显示t . crassiceps派生的分子甚至整个感染能够在近年的发病率减少50%至少6周。在一起,这些数据表明t . crassiceps及其衍生的分子显示更强的抗炎活性比观察其他蠕虫感染,这种保护作用是高度依赖于麦的存在ϕ年代。

另外,我们观察到,TcS和tc曝光直接调节CD11b的招聘⁺Gr1一起⁺细胞在糖尿病小鼠相比STZ和未经处理的小鼠。MDSCs获得增加利益,因为他们可以抑制T细胞反应。2010年,阴et al。44]表明,过继转移MDSCs NOD小鼠显著减少糖尿病发病以及胰岛损伤,这些作者认为MDSCs可能调解无效能autoreactive T细胞和支持Treg细胞的存在。相反的,在其他的研究中,MDSCs与损伤有关,因为这些细胞被青睐的CD4细胞的分化⁺向Th17细胞在小鼠发病机理的实验性自身免疫性脑脊髓炎(45]。

阐明细胞可能有一个更重要的角色表达下调近年来在我们的系统中,我们决定通过腹腔注射clodronate-loaded消耗吞噬细胞脂质体中t . crassiceps感染和TcS曝光。之前,它已经表明,clodronate-loaded脂质体只有耗尽吞噬细胞(主要是巨噬细胞)在我们的腹腔注射系统,而不影响树突细胞和嗜酸性粒细胞31日]。在这里,我们发现麦ϕ年代是显著降低STZ / Tc Cl老鼠,而STZ / Tc PBS招募更高比例的麦ϕ年代。然而,我们还发现CD11b⁺Ly6C⁺Ly6G⁻和CD11b⁺Ly6C⁻Ly6G⁺人口增加小鼠接受clodronate脂质体(STZ Cl和STZ / Tc Cl),从其他组有显著差异。最近,我们的团队招募CD11b证明高⁺Ly6C^高colitic小鼠结肠与损伤和炎症(38]。与以前的报告,目前的研究发现类似的结果在近年来的老鼠,MDSCs数量升高(单核细胞的和粒细胞)小鼠的腹腔中接收clodronate,但是没有保护近年来发展;因此,我们的数据表明,粒细胞和单核细胞的细胞不参与保护细胞的数量在我们的系统。还需要进一步的研究来阐明MDSCs在糖尿病小鼠的作用,如证明这些细胞具有抑制能力,名字这些细胞的关键特性。相反,一个强大的角色麦ϕ年代的anti-T1D效应绦虫产品可以认为;鉴于STZ / Tc Cl逆转的保护作用t . crassiceps感染,产生类似于STZ高血糖水平和STZ Cl老鼠和近年来发病率高达100%,而STZ / Tc PBS组保护高达50%,显示高血糖水平低于200 mg / dl。TcS的保护作用的逆转也观察到当老鼠暴露在TcS收到clodronate脂质体。然而,clodronate也可能影响凸轮ϕ年代,因此近年来发展消除危险的细胞群,但鉴于葡萄糖水平的恶化,这个事实可能支持CD8更关键的作用⁺和CD4⁺自体免疫细胞在组织损伤。在一起,这些结果强烈支持麦的假设ϕ年代被t . crassiceps感染和t . crassiceps衍生产品是一个关键的人口,重要的是减少炎症反应与近年来的发展。

5。结论

总之,我们的研究结果表明,接触TcS和tc对MLD-STZ-induced潜在的保护作用近年来开发降低高血糖和这种自身免疫性疾病的发病率。从力学上看,我们的新数据支持麦的假设ϕ年代被t . crassiceps派生产品扮演至关重要的角色表达下调内转,因为当这人口耗尽早期,废除保护作用。有必要阐明引发的公认的信号通路t . crassiceps衍生产品完全了解更多相关的机制与它们的抗炎症和抗糖尿病的效果。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

确认

这项工作是由CONACYT(授予167799年和280013年),由学院Ciencia y Tecnologia del联邦区(319 - 2010和PINVII-16) (301/2011)。这是需求的一部分获得博士学位项目Doctorado en Ciencias基于,大学根据墨西哥,的Arlett Espinoza-Jimenez,谁是支持CONACYT奖学金(215929),墨西哥。

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