文摘
目标。最近的研究表明,IL-38与自身免疫性疾病相关。此外,IL-38表达在人类动脉粥样硬化斑块。然而,等离子体水平的IL-38 st段抬高心肌梗死患者肝素)尚未调查。方法。承认,在24小时,48 h,在7天内,等离子IL-38, c反应蛋白(CRP)、心肌肌钙蛋白I (cTNI)和激素原的氨基端脑利钠肽(中位数水平以上病人)水平测定和IL-38基因外周血单核细胞(PBMCs)中检测出STEMI患者。结果。结果表明,等离子体IL-38水平和IL-38基因表达在PBMCs STEMI患者与对照组相比显著增加,与时间有关,达到24 h。此外,血浆IL-38水平大大降低患者再灌注治疗与对照组相比。类似的结果也证明了c反应蛋白,cTNI,中位数水平以上病人的水平。此外,IL-38水平被发现与CRP呈正相关,cTNI,中位数水平以上病人和弱负相关,STEMI患者的左心室射血分数(LVEF)。结论。结果表明,循环IL-38小说是一种潜在生物标志物对STEMI患者和IL-38 MI研究可能是一个新的目标。
1。介绍
急性心肌梗塞(AMI)仍然是一个全世界范围内导致死亡的主要原因。AMI后,炎症介质释放作为响应的心肌组织损伤和促进组织修复和适应性反应1- - - - - -4]。循环炎症标记物,如白介素- 6 (IL)和c反应蛋白(CRP)与不良临床结果相关,而抗炎细胞因子IL - 10的海拔已经关联到一个更有利的预后(5- - - - - -7]。机械和药理再灌注治疗,用于改善急性心肌梗死患者的结果,可能会影响炎症反应(8- - - - - -10]。
Interleukin-38 (IL-38)是最近发现il - 1受体拮抗剂的配体家族和股票43%同源性和IL-1Ra [IL-36Ra和41%的同源性11]。IL-38主要表达在皮肤和增生的b细胞,扁桃体(12]。IL-38结合IL-36Ra IL-36R相似,它可以影响IL-36的proinflammation功能和抑制假丝酵母全身的il - 22生成和IL-17模剂量反应法(13]。此外,在IL-38多态性与人类CRP浓度(14并被发现与冠状动脉疾病(CAD)显著相关(15]。此外,IL-38信使rna被发现在人类动脉粥样硬化斑块的冠状动脉疾病患者(16]。这些结果说明这种细胞因子的一个重要的角色在人类心血管疾病。然而,浓度和基因表达的IL-38外周血没有调查。
在st段抬高心肌梗死肝素),主要经皮冠状动脉介入(PCI)是首选的治疗方法,如果可以在2小时内从第一医学接触。然而,如果PCI术后不能推荐的时间限制内执行,溶栓疗法是治疗的选择17]。先前的研究表明,再灌注治疗的类型决定基底c反应蛋白水平的预测价值AMI患者心肌抢救(18),药物洗脱支架显示PCI后显著降低血浆CRP水平与金属裸支架相比,(19]。然而,是否治疗影响IL-38水平以及IL-38在AMI的作用是未知的。
在目前的研究中,我们测量了等离子体的水平IL-38, c反应蛋白(CRP)、心肌肌钙蛋白I (cTNI)和激素原的氨基端脑利钠肽(中位数水平以上病人)在STEMI患者不同治疗到达应急单位(入学),24 h, 48 h,在入院7天后和分析了IL-38与其他参数之间的相关性,包括左心室射血分数(LVEF)。
2。方法
2.1。病人
我们招募了102名病人诊断冠状动脉造影在工会医院2013年6月至2015年2月,华中科技大学,武汉,中国。从每个病人得到书面知情同意。这项研究是人类道德委员会批准联盟华中科技大学医院。病人包含4组:
(1)对照组:胸痛综合征(CPS)组(19男7女,平均年龄)他的胸部疼痛不是伴随着心电图变化,冠状动脉狭窄或冠状动脉痉挛的冠脉内注射乙酰胆碱在冠状动脉造影。
STEMI患者(52男性和24岁女性,平均年龄为57.28±15.68)根据治疗被分为三组。入选标准是心肌梗死经cTNI显著升高,肌酐激酶MB(水平)的水平,st段变化,和持续性胸痛> 30分钟,入院时在12 h。
(2)紧急PCI(24男性与8名女性,平均年龄)组织进行PCI患者在12 h和不包括溶栓失败。
(3)溶栓(12男6女,平均年龄)组织进行溶栓治疗在12 h,其胸痛消退,st段下降。
(4)选择性PCI(16男性和10个女性,平均年龄)组织进行不溶栓治疗或PCI在两周内。
排除标准:(1)患者抗炎药物如非甾体类抗炎药和类固醇;(2)患有急性或慢性感染性疾病和自身免疫性疾病;(3)血压的严重疾病,糖代谢;(4)严重心力衰竭;(5)心肌病,心脏瓣膜病;(6)肝脏疾病、肾功能不全、胃肠道疾病、血液系统疾病;(7)甲状腺机能障碍和肿瘤;(8)手术或创伤;(9)心肌梗死和PCI的历史。
2.2。血液样本
控制和STEMI组血样从患者获得到达应急单位(入学),24 h,入院后48小时和7天。样本收集到肝素钠真空采血管(正)。PBMCs是由聚蔗糖密度梯度分析的实时聚合酶链反应(PCR)。血液离心10分钟2000×g和血浆储存在−80°C到进一步使用。
2.3。ELISA
等离子体的水平IL-38 (Adipogen AG)、Liestal、瑞士)和c反应蛋白(Biocalvin)测定的酶联免疫吸附试验(ELISA),遵循制造商的指示。其他参数来自生化实验室,心脏病研究所联合医院。最小检测浓度是IL-38 40 pg / mL。ELISA intra-assay和interassay变异系数分别为< 5%,< 10%,。所有的样品都在重复测量。
2.4。实时聚合酶链反应
总RNA分离从新鲜PBMCs使用RNeasy工具包。互补脱氧核糖核酸合成使用六聚体随机引物和核糖核酸酶H-reverse转录酶(美国表达载体)。相对定量实时PCR进行使用SYBR绿色我预混料ExTaq 7900年ABI棱镜(应用生物系统公司,福斯特,CA)后,制造商的指示。特定的引物如下:IL-38 (5-AGGACCAGACACCAC-TGATTG-3和5-TGGGGGCACAAGGCTAAAAC-3)。质量的cDNA经过rt - pcr被放大的记录控制β肌动蛋白。β使用以下引物分析了肌动蛋白:5-CCTAAGGCCAACCGTGAAAAG-3和5-TCTTCATGGTGCTAGGA-GCCA-3 [12]。定量PCR进行ABI棱镜7900序列检测器系统(应用生物系统公司)使用SYBR绿色我化验(豆类生物技术)。相对基因表达水平(的数量目标,规范化内生控制基因)使用比较Ct方法计算公式(20.]。
2.5。多普勒超声心动图
病人接受M-mode和2 d-echocardiography使用通用电气ViVidE7超声机(通用电气医疗集团,美国),经胸廓的1.5 - -4.3 MHz探针(M5S-D)。左心室舒张末期内径(LVEDD)和部分缩短测量。LVEF area-length从顶端four-chamber位置的计算方法。
2.6。Gensini分数
在患者冠状动脉狭窄的严重程度估计的Gensini冠状评分后冠状动脉造影。Gensini积分是计算分配每个冠状动脉狭窄的严重程度评分根据腔的狭窄的程度及其地理意义。减少腔直径和同心的roentgenographic外观损伤和古怪的斑块进行评估(减少25、50、75、90和99%和完整的阻塞被分配Gensini分数1,2,4,8日,16日,32岁的职责)。比分是然后乘以一个系数,病变的位置的重要性在冠状动脉树如下:左主干冠状动脉5;2.5近端冠状动脉左前降枝(小伙子)或左动脉(LCX);mid-LAD 1.5;和远端1的小伙子,右冠状动脉或mid-distal LCX。
2.7。统计分析
结果表示为均值±SD,除非另有指示。IL-38和中位数水平以上病人偏态分布的数据,并进行统计分析后ln转换。比较两组之间进行使用学生的以及。单向方差分析被用于多个≥3组之间比较,其次是LSD测试。斯皮尔曼的相关性是用来计算等离子体生物标志物水平之间的相关性和其他测量参数。采用卡方检验比较的定性数据。GraphPad Prism 6.0是用于统计分析。显著性水平是设定在。
3所示。结果
3.1。基线特征
基线控制和STEMI患者之间的临床特点提出了表1。平均年龄和性别干扰之间的平衡。体重指数没有明显差异,生命体征(血压、脉搏和温度)、糖化血红蛋白、疾病的历史,或烟草使用在四个组。Gensini评分明显高于STEMI患者胸部疼痛综合症患者。相反,STEMI患者LVEF是低于患者胸痛综合征。每组的其他参数,包括脂质和脂蛋白分数,并送往医院之前的药物表中列出1。
3.2。的表达IL-38 STEMI的外围血液中增加
IL-38被发现在心脏,胎盘,胎儿肝、脾、胸腺,扁桃体(11,12]。然而,没有人发现其表达与STEMI血液及其关系。这里,我们测量等离子体的IL-38用ELISA和76年PBMCs使用rt - pcr STEMI患者和26控制。如图1(一)、等离子体IL-38 STEMI患者略增加与胸部疼痛综合症患者入院时,虽然没有显著差异。IL-38浓度STEMI患者达到24小时,显著增加与患者的胸痛综合征。随后,IL-38浓度迅速降低48 h,其水平7天在承认几乎相同。此外,在血浆IL-38水平没有显著差异STEMI患者和胸部疼痛综合症患者在7天。
(一)
(b)
以上结果表明,IL-38表达式的峰值是24小时;因此,它在PBMC表达也被调查。如图1 (b),rt - pcr显示有1.8倍增加IL-38 STEMI患者基因与胸痛综合征患者在24小时。
3.3。等离子体IL-38浓度和其他测量参数在不同再灌注策略
调查的变化IL-38生产STEMI患者不同再灌注策略后,STEMI患者分为紧急PCI组,溶栓组和选择性PCI组。然后,我们发现了等离子体IL-38水平上承认,在24 h,在48小时,7天,比较这三组和对照组之间。同时,CRP、cTNI和中位数水平以上病人被检查。
IL-38入院时,c反应蛋白,或中位数水平以上病人的水平,这些四组之间没有显著差异(数字2(一个)和3(一个))。然而,cTNI浓度显著增加在STEMI患者与控制病人(图3(一个))。
(一)
(b)
(c)
(d)
(一)
(b)
(c)
(d)
在24小时,所有参数包括IL-38在STEMI患者达到顶峰,但无法控制的病人。此外,对于所有参数,没有发现差异紧急PCI组,溶栓组和选择性PCI组(数字2 (b)和3 (b))。
在48 h,所有测量参数在等离子体的紧急PCI组开始下降,溶栓组和选择性PCI组。然而,下降的范围是不同的在不同的治疗方法。IL-38或CRP水平,有一个更重要的紧急PCI组或溶栓组下降比选择性PCI组。此外,中位数水平以上病人或cTNI水平,有一个更重要的紧急下降PCI组比选择性PCI组或溶栓组(数字2 (c)和3 (c))。
在7天,IL-38或CRP水平几乎恢复正常。然而,对于所有测量参数,更重要的下降紧急PCI组比选择性PCI组或溶栓组(数字2 (d)和3 (d))。
3.4。等离子体IL-38浓度和其他测量参数之间的关系
我们评估是否相关的血浆IL-38水平Gensini积分用来量化冠状动脉狭窄的严重程度在CAD。之间没有显著相关性IL-38 Gensini积分(数据未显示)。我们进一步评估IL-38水平是否与CRP, cTNI,中位数水平以上病人,LVEF STEMI患者。结果表明,高IL-38与CRP水平呈正相关,cTNI,中位数水平以上病人在STEMI患者在每个时间点()(数据4(一),4 (b),4 (c)),但不与其他参数(数据未显示),而IL-38水平弱负相关与LVEF STEMI患者入院时()或在24小时(),但不是在48小时或7天()(图4 (d))。
(一)
(b)
(c)
(d)
4所示。讨论
c反应蛋白,在这项研究中,等离子体IL-38 cTNI,中位数水平以上病人和IL-38基因表达研究了PBMCs STEMI患者跨度为4点(入院时、24小时、48 h,和7天)。结果表明,周边血液中表达IL-38 STEMI的增加,血浆CRP, cTNI,中位数水平以上病人水平显著增加STEMI患者与胸痛综合征患者相比。此外,我们发现再灌注策略可以减少上述参数,并与CRP IL-38水平呈正相关,cTNI和中位数水平以上病人,但与LVEF弱负相关。
STEMI通常是与炎症有关,发展成严重的并发症。在AMI,几个介质(包括细胞因子)相互作用,导致净对心肌重构的影响(21]。抗炎策略可能有利于心肌预后,但一些抗炎细胞因子il - 10和TGF -等β减少急性冠脉综合征(ACS)患者中,反映出系统不平衡细胞因子反应在ACS (22- - - - - -24]。IL-38已经证明是一种抗炎细胞因子(13并发现升高血浆STEMI患者在我们的研究中,表明IL-38可能从某些激活细胞诱导。IL-38报道是主要表达在皮肤和增生的b细胞,扁桃体(25),我们发现它PBMCs STEMI患者的增加,表明白细胞是等离子体IL-38的重要来源。事实上,白细胞是一个重要的炎性细胞在STEMI患者和参与心肌坏死和修复STEMI后(26]。循环PBMCs可以表达高水平的促炎细胞因子、tnf、il - 6,也增加了在等离子体27]。抗炎细胞因子,我们之前的研究表明,il - 1的家庭成员,IL-37, ACS病人相比,控制患者的显著增加(28]。最近,van de Veerdonk等人发现,类似于IL-36Ra IL-38可以抑制引发的生产,在人类PBMCs IL-17, il - 22生成(13]。这些结果表明有一个平衡的ACS患者的炎症和抗炎。此外,我们的未发表的数据显示,过度IL-37可以抑制心肌重塑AMI后老鼠。因此,我们推测,作为抗炎细胞因子,IL-38升高可能在STEMI患者对抗炎症反应。然而,升高血浆IL-38是否来自受伤的心脏或动脉除了白细胞值得研究和IL-38的确切作用应该在动物身上得到证实。
然而,我们发现IL-38减少再灌注后病人的策略在48小时或7天在我们的研究中,特别是在急诊PCI治疗。AMI后,心肌坏死细胞因子级联触发器。如果再灌注梗塞的面积开始,参加了一个强烈的炎症反应。尽管这种潜在的伤害在很短的时间内,大量证据表明,再灌注增强心脏修复改善病人生存(3]。越快的水平下降IL-38后再灌注策略在我们的研究表明减少炎症反应在48小时或7天。我们猜测这是归因于减少梗塞的面积和药物洗脱支架。事实上,据报道,药物洗脱支架显示紧急PCI后显著降低血浆CRP水平与金属裸支架相比,(19),但不是在24小时和7天观察到与我们的研究是相一致的。
接下来,结果显示,与传统标记IL-38水平呈正相关(cTNI、中位数水平以上病人和c反应蛋白)和与LVEF弱负相关。心肌肌钙蛋白I (cTNI)已被广泛研究作为ACS的诊断和预后标记,并增加cTNI循环水平高度指示性心肌损伤的29日]。此外,以往的研究表明,cTNI但不是心肌肌钙蛋白T (cTNT)诱发严重自身免疫性心肌炎症(30.]。这些结果表明,肌钙蛋白i不仅可以代表程度的实验组中心脏损伤还预测AMI后自身免疫性炎症。因为与cTNI水平正相关,IL-38水平可能是心肌损伤的指标或自身免疫性。中位数水平以上病人,另一个标记是释放心脏心室在墙上增加压力的反应31日),在STEMI后24 h(迅速上升32,33]。当测量梗死后2 - 7天,高浓度的中位数水平以上病人识别患者生存和较低的是不良预后的独立预测指标(34]。我们发现,中位数水平以上病人紧急PCI或溶栓后下降速度比对照组。CRP是急性期反应物之一,主要由肝脏,和最近的研究表明,升高血清CRP水平已经被广泛认为是特异性的但敏感标记的急性炎症反应。降低CRP的崛起已经证明表明相关冠状动脉再灌注疗效和专利(10,35]。高CRP AMI后预测梗死扩张,心脏破裂、和死亡率(5,10,36]。梗塞的组织也可以提高c反应蛋白。因此,也有可能减少心肌梗塞大小和炎症反应紧急PCI或溶栓负责降低CRP在这个组。IL-38水平和CRP水平之间的正相关关系表明IL-38可能预测梗死扩张,心脏破裂,和死亡率。相比之下,相关分析也表明,增加IL-38 LVEF只配水平弱负相关,24小时。
大约一半的研究人口在STEMI患者糖尿病。实际上,我们分析的水平IL-38 STEMI患者,发现糖尿病和非糖尿病患者之间无显著差异(数据没有显示)。此外,没有显著差异在STEMI患者糖化血红蛋白和控制之间STEMI患者和糖尿病患者和非糖尿病,显示良好的血糖控制在过去6个月,合理的解释在STEMI不变IL-38糖尿病患者相比,那些没有糖尿病。以前,双胍类、磺酰脲类包含的治疗药物,用于控制糖尿病和对抗慢性炎症。因此,AMI急性冠状动脉事件,主导着这些患者的炎症。然而,IL-38在糖尿病的确切作用还有待研究。
基于上述发现,等离子体IL-38水平可能是一个规则判断是否PCI是成功,站在身体对抗炎症反应的程度。然而,它的意义是否不同于其他炎症标记物可用值得调查。一方面,作为后续还不够7天,IL-38和心脏重塑的关系或诊所结果有待进一步的研究,可能需要1个月或1年。另一方面,和IL-38确切作用机制MI应该在动物模型验证。
研究限制。本研究也有一些局限性。首先,样本容量不是太大在我们的研究中。它是困难的病人在医院停留超过7天。第二,有一个缺乏心脏循环和组织浓度的样品直接联系IL-38在我们的研究中。理想情况下,相关性应该已经建立了地方和系统性炎症或抗炎之间的标记。第三,与其他标记,IL-38不同时间和不同群体之间的差异最小,表明使用IL-38作为诊断和预后标记物的损害是不确定的。
5。结论
总之,等离子IL-38浓度和c反应蛋白之间的关系,cTNI,中位数水平以上病人、LVEF表明IL-38可能预测成功的再灌注和STEMI的诊断和预后标记。这些问题需要进一步研究在动物实验和大长时间的随访研究。
缩写
| 计算机辅助设计: | 冠状动脉疾病 |
| 一种总线标准: | 经皮冠状动脉介入 |
| STEMI: | st段抬高心肌梗死 |
| c反应蛋白: | c反应蛋白 |
| PBMCs: | 外周血单核细胞 |
| LVEF: | 左心室射血分数 |
| ACS: | 急性冠脉综合征 |
| cTNI: | 心肌肌钙蛋白I |
| 中位数水平以上病人: | 激素原脑利钠肽的氨基端 |
| cTNT: | 心肌肌钙蛋白T |
| CPS: | 胸部疼痛综合症。 |
利益冲突
作者宣称没有利益冲突有关的出版。
作者的贡献
海盐县钟、Kunwu Yu和湘王的贡献同样这项工作。
承认
这项工作是由中国国家自然科学基金(没有。81300213博士运城钟,不。81270354也没有。81470420曾Qiutang博士)。