文摘

介绍。本研究的目的是探讨几丁质酶的变化存在正CHI3L1)患者的主动脉冠状动脉粥样硬化,并确定是否抑制lentivirus-mediated CHI3L1的RNA干扰可以在载脂蛋白E-knockout (ApoE稳定动脉粥样硬化斑块^−−/老鼠)。方法。我们收集废弃的主动脉标本接受冠状动脉搭桥手术的患者和肾动脉组织从肾脏捐赠者。慢病毒携带小干扰RNA针对CHI3L1的表达了。五十载脂蛋白e^−−/老鼠分为对照组和CHI3L1基因沉默的群体。束紧的衣领是诱导周围放置颈动脉斑块的形成。然后慢病毒转染到颈动脉斑块。结果。我们发现CHI3L1过表达在动脉粥样硬化患者的主动脉及其表达与动脉粥样硬化的危险因素。慢病毒转导后,信使rna和蛋白表达CHI3L1的减毒在颈动脉斑块,导致减少斑块脂质含量和巨噬细胞,并增加菌斑胶原蛋白含量和平滑肌细胞。此外,CHI3L1基因沉默表达下调当地促炎介质的表达。结论。CHI3L1过表达在动脉粥样硬化患者主动脉和lentivirus-mediated CHI3L1基因沉默可以代表一个新的策略来抑制斑块的进展。

1。介绍

冠状动脉疾病(CAD)已经成为导致死亡的主要原因。作为一个系统性疾病通常影响大型和中型动脉弹性和肌肉的身体,动脉粥样硬化是最无赖的潜在病理。大量的证据支持这一概念,动脉粥样硬化是一种慢性炎症性疾病,其特征是纤维矩阵和脂质在动脉壁的沉积。根据“response-to-injury”假说,内皮剥蚀和内皮功能障碍引起的一些风险因素在动脉粥样硬化发展的第一步1]。活化的内皮细胞促进单核细胞浸润血管壁。然后,这些单核细胞分化成巨噬细胞,脂质积累的循环,保持血管壁,从而成为泡沫细胞。上面提到的这些细胞能合成并释放促炎的分子如肿瘤坏死因子α(肿瘤坏死因子-α)、单核细胞化学引诱物蛋白1 (MCP-1)和白介素1 (il - 1),它可以诱发进一步积累的单核细胞和血管平滑肌细胞的迁移和增殖(smc) [2]。

存在1 CHI3L1),也称为软骨糖蛋白39或人类和乳房YKL-40回归蛋白39在老鼠身上,是一个40 kDa chitin-binding没有几丁质酶活性的糖蛋白,它已被证明作为一个重要的监管机构的急性和慢性炎症3,4]。它是由多种细胞分泌,包括smc和巨噬细胞在组织炎症和细胞外组织重构。到目前为止,一些研究已经表明一个重要CHI3L1和炎症或代谢疾病之间的联系,包括哮喘(5)、高血压(6)、糖尿病(7,8],胰岛素抵抗[9),和动脉粥样硬化10,11),自然相信CHI3L1可能是一个潜在的生物标志物和治疗相关疾病的目标。

虽然CHI3L1与CAD的关系是很重要的,有一个争议的血CHI3L1水平和动脉粥样硬化的严重程度之间的联系。一项研究调查出CHI3L1外周动脉疾病患者的作用表明,动脉粥样硬化的严重程度与血液CHI3L1水平较高(12)和另一篇论文得出结论,循环CHI3L1不是特别相关的动脉粥样硬化性狭窄的大小(13]。这些相互矛盾的结果可能是由于不同的研究对象和诊断方法评价冠状动脉和动脉粥样硬化的严重程度。为了阐明CHI3L1与CAD的关系而且验证CHI3L1的治疗价值,我们设计了本研究。首先,我们调查了CHI3L1表达式与动脉粥样硬化的发病机制之间的相关性通过测量的变化CHI3L1的主动脉组织患者接受冠状动脉搭桥手术(CABG)。第二,我们构建慢病毒载体,它可以有效地提供小干扰rna (siRNAs)由于其稳定的转导:间期细胞分裂和细胞,并针对推倒CHI3L1探讨载脂蛋白E-knockout CHI3L1的动脉粥样硬化的机制老鼠是一个潜在的治疗目标。

我们发现CHI3L1的表达增强在主动脉冠状动脉粥样硬化患者及其表达与动脉粥样硬化密切相关的危险因素和CAD的严重程度。此外,干扰CHI3L1表达导致动脉粥样硬化的负担和斑块稳定性的改善老鼠。

2。方法

2.1。研究人群

从2011年到2012年,39例冠脉搭桥CAD定于患者调查和被定义为一个研究小组。入院后,详细的疾病历史,体检和常规实验室检测进行了建立临床诊断。特别关注动脉粥样硬化危险因素包括吸烟状态、高血压和糖尿病。所有CAD患者经冠状动脉造影(CAG)。CAG使用5 f导管Judkins方法得到。Gensini积分系统是用来评估CAD严重程度,根据分布、程度和冠状动脉狭窄的严重程度。排除标准的急性或慢性感染、中风、急性或慢性肝脏或肾脏疾病,自身免疫性疾病、肿瘤和创伤。11那些捐赠肾脏的正常受试者进行调查作为对照组。肾脏捐赠者都是血亲的受惠者。他们没有遭受任何疾病包括CAD、高血压、糖尿病、外伤、恶性肿瘤、急性或慢性炎症状态。 In addition, they were nonsmokers and reported no long-term drug use.

主动脉标本经主动脉冠脉搭桥时总是删除按钮孔。此外,收集废弃的肾动脉组织没有动脉粥样硬化病变的11人捐赠的肾脏。被随机分配在每一组中,动脉组织进行组织学分析和免疫印迹分析。

本研究协议符合赫尔辛基宣言的原则,通过山东省Qianfoshan医院的伦理委员会。所有患者和正常受试者参加本研究签署了知情同意表格。

2.2。生物化学分析

静脉血液样本研究小组的患者和正常对照组受试者获得12 h禁食后测量血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(低密度脂蛋白),高密度脂蛋白胆固醇(hdl - c)、脂蛋白(a) [Lp (a)],和载脂蛋白(ApoA)、载脂蛋白B(飞机观测)。以上所有项目测量标准的实验室技术的临床化学、山东省Qianfoshan医院。

2.3。细胞培养

的293 T人类胚胎肾细胞系表达猴病毒40大T抗原和促进最佳的生产的病毒,和RAW264.7老鼠巨噬细胞细胞系购自中国社科院典型文化收集细胞库(上海,中国)。所有细胞培养在杜尔贝科的修改鹰与10%胎牛血清的培养基补充,100 u /毫升青霉素和链霉素100 ug /毫升。所有的细胞都在37°C湿润孵化器孵化与95%的空气和5%的公司₂。

2.4。慢病毒筛查RNAi建设和目标

四个不同的序列(网站A, B, C, D) CHI3L1基因的老鼠为核糖核酸干扰(RNAi)设计目标(Genepharma、上海、中国)。站点的顺序是5′-GCGACAACATGCTTAGCACATTTCAAGAGAATGTGCTAAGCATGTTGTCGCTT-3′;site B的序列是5′-GGCCATTGACACTGGCTATGATTCAAGAGATCATAGCCAGTGTCAATGGCCTT-3′;网站的序列C 5′-GCACTGGATTTGGATGATTTCTTCAAGAGAGAAATCATCCAAATCCAGTGCTT-3′;站点的顺序D 5′-GCCAGAAGGACACTAGGTTTGTTCAAGAGACAAACCTAGTGTCCTTCTGGCTT-3′。控制,炒序列(模拟siRNA) 5′-GTTCTCCGAACGTGTCACGTTTCAAGAGAACGTGACACGTTCGGAGAACTT-3′。然后pShuttle向量包含鼠标CHI3L1 RNAi序列构造。小干扰rna表达的慢病毒是由共转导pShuttle向量pGag /波尔,上一页,和pVSV-G 293 t细胞。然后使用慢病毒转染RAW264.7细胞。筛选最有效的目标基因的干扰,RAW264.7细胞收集下列聚合酶链反应(PCR)和免疫印迹实验在72 h和96 h后转导,分别。 Nonlentivirus and lentivirus containing mock siRNA transduction served as controls.

2.5。动物实验

我们获得50个男老鼠,8周大,从北京大学动物研究中心(中国,北京)。所有老鼠每笼住五,被喂以高脂肪饮食(15%可可脂和0.25%胆固醇)和免费的水。老鼠被分为两组:对照组和CHI3L1慢病毒沉默。动脉粥样硬化模型是如前所述14]。总之,戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后(40毫克/公斤),压缩性的硅环(内径0.3毫米;外直径0.5毫米;和长度,2.5毫米)放在老鼠的右颈总动脉。术后8周,颈衣领被移除和右颈总动脉近端和远端对内部和外部的颈动脉暂时结扎。然后20μ我的慢病毒悬液你/ mL被灌输进右颈总动脉,离开了原位前15分钟关闭皮肤切口(15]。

所有动物程序依法进行机构的指导方针的山东省Qianfoshan医院。

2.6。组织准备和组织学分析

根据常规实验室免疫组织化学分析方法(16]。对动脉组织获得CABG手术和肾脏捐赠者,在一夜之间4%的缓冲福尔马林固定标本的标本4°C,然后在一个提升乙醇脱水系列,通常嵌入在石蜡,分段3μm。在传统deparaffinage、水化和抗原检索、内源性过氧化物酶灭活3%过氧化氢。孵化了兔子的部分反人类的CHI3L1多克隆抗体(bios稀释至1:200年,北京,中国)在4°C 12 h。与磷酸盐(PBS)洗后,部分被孵化的山羊anti-rabbit免疫球蛋白聚合物在室温下30分钟。然后用3部分是可视化3-diaminobenzidine产生一个棕色的产品,然后用苏木精复染色、脱水、transparention,固定中性树脂。消极的控制,兔子多发地血清应用与兔子反CHI3L1的多克隆抗体。

老鼠牺牲戊巴比妥钠腹腔注射(200毫克/公斤)4周后转导并通过左心室与PBS灌注。右颈总动脉仔细切除,沉浸在4%的甲醛。六横截面上每只小鼠被用于一个特定类型的染色。一个部分是与苏木精和伊红染色())。另一个部分是应用与兔子anti-mouse CHI3L1多克隆抗体(稀释1:300年,圣克鲁斯,sc: 98954)。胶原蛋白和脂质沉积在斑块被天狼星红染色,油红O染色,分别。与反smc和巨噬细胞被应用α肌动蛋白抗体(Boshide稀释1:300年,武汉,中国)和macrophage-specific抗体(Boshide稀释1:200年,武汉,中国),分别。一个自动图像分析系统(银泉Image-Pro + 5.0)是用于定量测量。positive-staining的胶原蛋白、脂质、smc和巨噬细胞是由计算机辅助color-gated量化测量,positive-staining面积比内层的面积计算。脆弱性指数由以下公式计算:positive-staining面积(巨噬细胞+脂质)/ positive-staining面积(smc +胶原蛋白)。

此外,新鲜的一小部分小鼠动脉组织被用来接受电子显微镜检查。总之,动脉组织被置于2.5%戊二醛和2%多聚甲醛的1 h;船只被切成大约,回到另一个1小时的固定剂。组织在1%锇酸1 h后缀用2%的醋酸双氧铀染色1 h。通过乙醇脱水,然后组织被嵌入Spon812。最后,50 nm部分与醋酸铀酰柠檬酸铅和染色检查jem - 1010电子望远镜(JEOL、日本)。

2.7。实时定量rt - pcr分析

信使rna表达水平肌动蛋白和CHI3L1 RAW264.7细胞,β肌动蛋白、CHI3L1 TNF -α,引发MCP-1和基质金属蛋白酶9 (MMP-9)斑块组织根据常规定量分析了使用实时rt - pcr方法(17]。总之,RNA提取试剂盒的使用试剂(英杰公司)按照制造商的指示。管家基因肌动蛋白被量化为一个内部RNA控制。正向和反向引物如下:5′-AGGCTTTGCGGTCCTGAT-3′, 5′-CCAGCTGGTGAAGTAGCAGA-3′CHI3L1;5′-CACCACGCT CTTCTGTCTACTGAAC-3′, 5′20 GACTGCGTGATGTCTAAGTACT-3′TNF -α;5′-CAGCCAGATGCAGTTAACGC-3′, 5′-GCCTACTCATTGGGATCAT CTTG-3′MCP-1;5′-ACTGAGAGTGATTGAGAGTGGAC-3′, 5′-AACCCTCTGCACCCAGTTTTC-3′引发;5′-CCTGGAACTCACACGACATCTTC-3′, 5′-TGGAAACTCACACGCCAGAA-3′MMP-9;5′-CACTGTGCCCATCTACGA-3′, 5′-GTAGTCTGTCAGGTCCCG-3′肌动蛋白。所有值获得归一化鼠标肌动蛋白和相对表达分析涉及到方法。

2.8。免疫印迹分析

CHI3L1的蛋白表达水平、MAPK AKT, GAPDH和肌动蛋白在人类动脉组织,RAW264.7细胞,斑块组织被免疫印迹分析化验(18]。总之,等量的蛋白质14%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶上分离和转移到硝酸纤维素。与5%脱脂牛奶阻塞后,包含0.1%的墨迹洗了PBS渐变20和孵化一个适当的主要抗体在4°C 12 h。这些墨迹与抗体探测人类CHI3L1 (bios稀释1:500年,北京,中国),老鼠CHI3L1(稀释1:1000年,圣克鲁斯),老鼠p44/42 MAPK (ERK1/2) (CST稀释1:1000年,4695年),phospho-ERK1/2 (CST稀释1:1000年,4370年),一种蛋白激酶(CST稀释1:1000年,4691年),phospho-AKT (CST稀释1:1000年,4060年),GAPDH或肌动蛋白(中山稀释1:500年,北京,中国)。然后洗了屁股Tris-buffered盐水渐变20和孵化与适当的二次抗体结合辣根过氧化物酶。墨迹处理增强chemifluorescence使用一种皮尔斯ECL免疫印迹基质。管家基因GAPDH或肌动蛋白是量化内部控制。

2.9。统计分析

统计分析与社会科学统计软件包(SPSS 12.0)和定量变量表示为平均值±标准偏差。正态分布变量的测试后,学生的以及用于分析连续的正态分布变量。两个变量之间的相关性是由线性相关分析。一般来说,2-tailed被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

3.1。基线特征

总结了两组的基线特征表1。术前血清TC、低密度和Lp (a) 39名患者的研究小组明显升高,而血清高密度脂蛋白胆固醇和ApoA明显减少,与对照组相比。此外,11个肾脏捐赠者对照组没有有高血压或糖尿病史。此外,都不吸烟。

3.2。冠状动脉粥样硬化病变的研究小组

CAG的39名患者接受CABG显示19例左主冠状动脉病变,6和两个冠状动脉病变患者,所有患者和14三冠状动脉病变。观察到明显钙化和狭窄冠状动脉的患者的研究小组。患者的平均Gensini积分39。

3.3。在人类动脉组织CHI3L1的存在

如图1(一)健康的捐赠者动脉组织小CHI3L1表达式可以证明根据免疫组织化学染色。然而,CHI3L1的表达升高动脉标本的CAD患者。免疫印迹分析是用来评估CHI3L1蛋白的表达。如图1 (b)有显著差异,对照组和研究组之间CHI3L1表达水平。

3.4。动脉CHI3L1表达之间的相关性和动脉粥样硬化的临床标准

我们调查了CHI3L1的相对表达水平之间的相关性和动脉粥样硬化的临床标准,包括性别、吸烟、高血压和糖尿病。CHI3L1的表达水平在男性和女性之间没有显著差异,但显著差异在吸烟者和非吸烟者中,高血压药物和nonhypertensives,糖尿病患者和刻意。如图1 (c),CHI3L1的表达水平增加了吸烟者和高血压或糖尿病患者,而性别无显著影响。如图1 (d)线性相关分析显示动脉CHI3L1表达水平与冠状动脉严重Gensini成绩显著相关,涉及到从24到120 (,)。

3.5。慢病毒转导的影响在体外

RAW264.7细胞系与慢病毒转染表达不同CHI3L1 siRNAs和基因沉默分析显示站点C慢病毒是最有效的向量阻塞CHI3L1表达式。如图2(一个),CHI3L1击倒克隆A, B, C和D展出38岁,18岁,64年,减少14%,分别在蛋白表达和32岁,17岁,65年,减少30%,分别在mRNA的表达。然后选择站点C慢病毒和模拟慢病毒的病毒效价你/毫升(Genepharma、上海、中国)在活的有机体内研究。

3.6。慢病毒转导CHI3L1表达式在斑块的影响

评估的有效性lentivirus-mediated基因沉默在活的有机体内、CHI3L1组织学的变化、蛋白质、和mRNA表达在动脉粥样硬化斑块测量。如图2 (b),在对照组CHI3L1表达式可以证明根据免疫组织化学染色。然而,小CHI3L1表示沉默组。电子显微镜,对照组内皮细胞的大部分赤裸的还有大量的脂质颗粒在血管壁的基底膜。占领了动脉粥样硬化斑块坏死粒子,钙化晶体,和细胞碎片。然而,沉默组脂质颗粒的数量相对减少。内皮细胞再生被部分覆盖裸露的表面。胶原蛋白包和弹性纤维被认为血管内皮。smc迁移到斑块组织。免疫印迹分析是用来评估CHI3L1的表达蛋白质斑块组织。如图2 (c)沉默组与对照组相比,显示CHI3L1的减少50%的蛋白表达。此外,有显著差异CHI3L1 mRNA的表达水平在对照组和沉默组(图2 (d))。

3.7。慢病毒转导对斑块成分的影响

脂类的相对含量,胶原蛋白、smc,巨噬细胞在斑块组织派生了组织学和免疫组织化学染色(图3)。脂类的相对含量斑块组织对照组和沉默组48.8%和35.2%,这是在沉默组显著低于对照组。脂质含量的相对减少斑块组织沉默组与对照组相比27.5%。胶原蛋白的相对含量斑块组织对照组和沉默组19.5%和29.8%,这是在沉默组比对照组显著增加。胶原蛋白含量的相对增加斑块组织沉默组与对照组相比53.2%。相对smc内容斑块组织对照组和沉默组14.8%和22.5%,这是在沉默组高于对照组。smc含量的相对增加斑块组织沉默组与对照组相比51.2%。相对对照组斑块组织巨噬细胞含量和沉默组11.9%和7.5%,这是在沉默组比对照组下降。巨噬细胞含量的相对减少斑块组织沉默组与对照组相比36%。对照组的脆弱性指数和沉默组和,这是在沉默组比对照组下降。沉默组的相对减少脆弱性指数是53.8%,与对照组相比。

3.8。出CHI3L1基因沉默对病灶内炎症介质的影响

阐明出CHI3L1基因沉默抑制斑块的分子机制发展和稳定斑块,促炎的mRNA表达变化分子包括TNF -αMCP-1,引发,MMP-9小鼠颈动脉进行调查。如图4沉默组显示,TNF -的信使rna表达水平降低α,引发MCP-1 MMP-9,与对照组相比,抑制CHI3L1减少促炎细胞因子的归纳。此外,我们研究了蛋白表达水平的ERK1/2, phospho-ERK1/2, AKT, phospho-AKT小鼠颈动脉组织和发现的蛋白表达水平phospho-ERK1/2和phospho-AKT减少沉默组与对照组。

4所示。讨论

在目前的研究中我们发现CHI3L1的表达增强患者的主动脉冠状动脉粥样硬化及其表达与动脉粥样硬化密切相关的危险因素和CAD的严重程度量化的冠状血管显像仪。更重要的是,CHI3L1的干扰导致动脉粥样硬化的负担和斑块稳定性的改善老鼠。

炎症和内皮功能障碍被认为是动脉粥样硬化的进展的关键过程。多种促炎细胞因子、急性phase-reactants和细胞粘附分子似乎发挥重要作用在低品位炎症的发展,有大量的证据支持TNF -的作用α、il - 6和MCP-1心血管风险因素和参与动脉粥样硬化的发病机制1,14,16]。

作为chitinase-like蛋白质,CHI3L1是高度保守的,是由各种各样的细胞如巨噬细胞、中性粒细胞、smc,癌症细胞,和关节炎软骨细胞。尽管哺乳动物不能合成或代谢甲壳素和CHI3L1的确切功能尚不可知,但最近的研究涉及CHI3L1在不同的生物过程,如炎症、组织重构、纤维化,血管生成(19]。

用人类动脉组织引导等人研究了CHI3L1 mRNA表达在动脉粥样硬化斑块20.]。类似于他们的研究,我们研究了CHI3L1蛋白表达与冠状动脉粥样硬化患者的主动脉。更重要的是,确定动脉粥样化形成CHI3L1的潜在作用,我们研究了CHI3L1和心血管危险因素之间的关系。性别、吸烟、高血压、糖尿病、血脂异常都是危险因素,导致动脉粥样硬化的发展,一些证据表明CHI3L1的循环水平与吸烟的关系(5)、高血压(6),和糖尿病7,8]。我们的研究结果表明,主动脉CHI3L1表达式与吸烟有正相关,高血压和糖尿病。这些结果表明,主要的心血管风险因素可能促进CHI3L1的表达和CHI3L1可以通过调节这些影响动脉粥样硬化的危险因素。Gensini评分系统是一个有用的工具来估计CAD根据CAG结果的严重性。我们发现有显著相关性主动脉CHI3L1表达和冠状动脉严重建议CHI3L1的重要作用在血管生成和动脉粥样硬化斑块形成的过程。

沉默信使RNA, RNA干扰是一种有效的方法,它被用于治疗一些疾病(21,22]。使用siRNAs比其他gene-specific瞄准方法更有效。作为一种病毒载体、腺病毒通常应用于RNA干扰。然而,它会导致显著的免疫原性反应,限制基因表达有关。慢病毒有几个优点比腺病毒,如基因转导效率高,长期感染由于基因整合到宿主细胞的染色体,没有毒性和免疫反应。因此,慢病毒载体表达siRNAs应用在我们的研究中。

等表型特征的动脉粥样硬化斑块纤维帽厚度、胶原蛋白含量,和巨噬细胞数量已被广泛用作斑块稳定性的指标。斑块薄纤维帽和大的脂质核心被认为是脆弱的。此外,在急性冠脉综合征的过程中,斑块组件比斑块的大小更重要。我们调查出CHI3L1基因沉默对先进的动脉粥样硬化病变的影响,发现CHI3L1动脉粥样硬化斑块的发展很重要,作为CHI3L1基因沉默组始终显示巨噬细胞和脂肪含量下降,增加胶原蛋白和smc的内容。上面提到的形态变化导致血小板减少脆弱性指数CHI3L1基因沉默组与对照组相比,表明斑块破裂是不容易发生。

CHI3L1的研究已经证明,增加表达在人类动脉粥样硬化病变与生产和激活炎症因子(11,20.]。尽管CHI3L1的膜受体特定绑定并没有被确认,CHI3L1的heparin-binding亲和力似乎是必不可少的活动,类似于heparin-binding血管内皮生长因子的属性。CHI3L1可以启动MAPK和phosphoinoside-3激酶的磷酸化(PI3K) ERK1/2 AKT,分别,从而调节信号级联(17,18,23,24]。传播途径都有完善的角色的促有丝分裂的信号,并在这一过程中发挥重要作用的动脉粥样硬化斑块的形成。在我们的研究中,我们发现的蛋白表达水平phospho-ERK1/2和phospho-AKT减少沉默组与对照组。的主要促炎因子,肿瘤坏死因子-αMCP-1,引发,MMP-9已发现在人类动脉粥样硬化病变(25- - - - - -27]。肿瘤坏死因子-αMCP-1,引发扮演重要角色在招聘和活化的单核细胞,巨噬细胞,smc。反过来,激活巨噬细胞参与MCP-1等炎症因子的分泌。MMP-9在动脉粥样硬化斑块可以降解细胞外基质,因此导致斑块纤维帽的变薄。在目前的研究中,TNF -的信使rna表达水平α,引发MCP-1和MMP-9减少沉默组与对照组。这些结果表明,这些细胞因子水平的降低引起的干涉CHI3L1导致动脉粥样硬化斑块的稳定性。

5。限制

应该提到,这项研究包括一个相对较少的患者,正常受试者,老鼠,限制的统计力量。虽然我们使用Gensini评分系统来评估冠状动脉粥样硬化的严重程度,这一点决定使用CAG和并不能反映实际的动脉粥样硬化斑块的体积。因此,其他诊断方法,如血管内超声和angioscopy,可能需要评估斑块体积。另一个主要限制在人类动脉组织研究是正常的主题,考虑到健康人体主动脉组织很少可以获得的道德。因此,我们选择丢弃从肾脏捐赠者对照组动脉。肾脏捐赠者都是血亲的接受者。据我们所知,到目前为止没有数据显示任何CHI3L1的差异表达人类升主动脉、肾动脉之间。还应该提到collar-induced颈动脉动脉粥样硬化不同于自然主动脉动脉粥样硬化老鼠。颈动脉病变发生在一个地区近端突出斑块的束紧的衣领负担,而主动脉病变发展与分散在升主动脉斑块体积小。尽管如此,颈动脉病变老鼠像先进的人类动脉粥样硬化和代表可再生的和可靠的模型来研究脆弱的斑块。最后,当地的慢病毒携带小干扰RNA可以吸收循环,导致一般的效果。

6。结论

总之,CHI3L1的表达是增强患者的主动脉冠状动脉粥样硬化及其表达与动脉粥样硬化密切相关的危险因素和CAD的严重程度。更重要的是,沉默CHI3L1减少动脉粥样硬化的负担和增加斑块的稳定老鼠,它可能提供一个新的治疗方法来治疗动脉粥样硬化。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

本研究支持的山东省自然科学基金(没有。y2007c066 - 2009)。作者感谢王栋,解读太阳,魏,姚明王,Bo李、杨之技术援助和他们感谢所有病人的合作。