文摘
背景。芳基碳氢化合物受体(AhR)多功能调节器感知和响应环境刺激,在正常细胞中发挥作用的发展和免疫调节。最近的证据支持一个重要的环境暴露和AhR之间的联系发展的过敏性疾病。我们试图调查AhR是否在调停蟑螂allergen-induced过敏免疫反应中发挥作用。方法。AhR表达在人类从哮喘肺成纤维细胞,健康的个人和蟑螂提取(CRE)人类肺成纤维细胞(WI-38)检查治疗。调制CRE TGF诱导的气道高反应性的作用β1生产调查使用兴奋剂气道高反应性,TCDD,对手CH122319,气道高反应性和可拆卸的。潜在的TGF的角色β1结合蛋白1 (LTBP1)调解TCDD TGF诱导活跃β1版本也检查了。结果。表达更高的气道成纤维细胞在哮喘气道高反应性与健康对照组相比。成纤维细胞被激活的AhR TCDD cyp1a1和cyp1b1的增加表达。在CRE-treated成纤维细胞表达观察气道高反应性增加。重要的是,CRE诱导TGFβ1生产成纤维细胞显著增强了TCDD但CH122319抑制。减少TGFβ1生产进一步证实了成纤维细胞可拆卸的气道高反应性。此外,可拆卸的气道高反应性抑制CRE诱导成纤维细胞分化。此外,TCDD TGF诱导活跃β1释放显著抑制LTBP1击倒。结论。这些结果提供证据的作用在调节气道高反应性通过控制活动TGF蟑螂allergen-induced免疫反应β1版本,显示暴露于过敏原之间可能的协同效应和环境化学物质过敏疾病的发展。
1。介绍
哮喘是最常见的严重的慢性疾病的儿童。年代(1]。虽然人们普遍认为环境化学物质和污染物会引起哮喘的发生和恶化2- - - - - -5),机械的链接在很大程度上仍未知。具体地说,环境化学物质和污染物已被证明调节环境allergen-induced过敏性哮喘等疾病6- - - - - -8]。AhR是一种多功能调节器,感觉和响应环境刺激和发展在正常细胞中发挥作用和免疫调节。众所周知,二恶英和二恶英类多氯化合物,TCDD,多环芳烃,可吸入颗粒物(PM),可以激活AhR,然后把气道高反应性的核和二聚核转运蛋白(ARNT)。在细胞核内,AhR / ARNT异质二聚体结合异型生物质响应要素(XRE)序列和导致基因转录的变化(例如,cyp1a1、cyp1b1)和各种各样的毒理学效应,如活性氧生成、细胞分化、炎症细胞因子的生产(9,10]。最近的发现关于AhR和环境毒物相互作用及其对免疫反应的影响(11- - - - - -14)强调之间的潜在联系环境暴露和调制allergen-induced过敏疾病的气道高反应性。一个有趣的和合理的推断是,过敏和炎症性疾病的表达可以归因于那些新免疫“佐剂”因素,例如,环境化学物质,通常与过敏原共存和导致进行性纤维化病理重塑哮喘。
事实上,最近的研究改变了我们对哮喘的认识从一个纯粹的炎性疾病的疾病炎症和结构组成也同样涉及(15]。有人建议,有一种强烈的联系allergen-induced过敏性气道炎症和重塑16,17]。特别是,接触蟑螂过敏原在生命早期可导致过敏性气道炎症和患哮喘的风险增加18,19]。气道重构的核心组件之一是牙龈纤维化引起的哮喘、胶原的沉积过程中,成纤维细胞和myofibroblast是至关重要的。已经表明,有一个关联的数量myofibroblasts和牙龈纤维化的程度在哮喘患者的气道20.]。我们感兴趣的过敏原可以诱导增加数量的myofibroblasts [21),这可能导致牙龈纤维化的进展(22]。招聘的成纤维细胞在哮喘气道建议通过一种机制会使使用IL13涉及改变增长factor-beta1 (TGF -β1)和基质金属蛋白酶(23]。
TGF -β1是由许多细胞在肺内,包括成纤维细胞,并起着至关重要的作用在细胞生长,分化,免疫调节,一直认为是气道重构的主要中介(24- - - - - -27]。最近的研究表明,在TGF中断β1信号为人类过敏疾病[强加了一个强烈的倾向28]。具体来说,TGF增加活跃β1已经从哮喘病人中观察到航空公司[29日),在实验小鼠过敏性气道炎症(30.)(Gao et al .霁2014年修订)。此外,增加TGFβ1活动似乎是由潜在的TGF控制β结合蛋白1 (LTBP-1) [31日]。有趣的是,主要的小鼠胚胎成纤维细胞/−−小鼠气道高反应性的表达增加LTBP1 TGF和更高水平的总活跃β1,可以部分被抗体LTBP1 [32气道高反应性),这表明可能控制TGF LTBP1表达式,随后激活β1信号。尽管TGFβ1信号通路已经被充分研究过的,气道高反应性和气道高反应性之间的交互和TGF的详细信息β1信号在很大程度上仍是个未知数。已经提出几种机制TGF气道高反应性有关的规定βTGF 1信号,包括放松管制β1分泌,抑制TGFβLTBP1的差别1,或者对这些基因的表达(11,32,33]。此外,尽管研究一个兴奋剂气道高反应性,表明,尽管可以扰乱TGFβ1信号通过抑制核易位TGF Smad2/3/4和块β1-induced myofibroblast分化和细胞外基质生产(34]。TGFβ1,反过来,可以通过放松管制的气道高反应性抑制介导基因表达表达和/或本地化(气道高反应性35]。因此,研究cross-regulation AhR和TGF之间β1信号可能会更好地理解底层机制所必需的环境化学物质之间的协同效应和过敏原过敏疾病的发展。具体来说,我们假定TGF活跃β1,从成纤维细胞或上皮受损发布重复的环境暴露,诱导细胞分化和免疫调控和气道高反应性规定。
在目前的研究中,我们主要集中在功能意义的AhR调制蟑螂通过释放活性TGF allergen-induced免疫反应β1。我们发现增加哮喘病人的表达航空气道高反应性。尤其是WI-38表达增加,气道高反应性,肺成纤维细胞系在暴露于蟑螂过敏原。然后我们证明TCDD的AhR受体激动剂,可以诱导特定的下游基因cyp1a1和cyp1b1表达气道高反应性。重要的是,我们发现蟑螂allergen-induced TGF信号被调制气道高反应性的影响β1生产和纤维母细胞分化。最后,我们证明了TGF TCDD-induced活跃β1明显被LTBP击倒。综上所述,我们建议在调节过程中发挥作用蟑螂allergen-induced气道高反应性免疫反应TGF通过控制活跃β1版本,有一个接触过敏原之间可能的协同效应和环境化学物质过敏疾病的发展。
2。材料和方法
2.1。人类气管气道高反应性的评估
石蜡包埋人工气道部分(5μ米)从哮喘(和健康的人)被用于免疫荧光分析。这些人工气道部分提供的艾伦博士(约翰霍普金斯哮喘&过敏原中心)。虽然并不清楚这些哮喘的过敏状态,所有健康的人都nonallergic个人。人工气道部分从三个nonallergic重度吸烟者还包括气道高反应性控制表达式。总之,非特异性结合被阻塞在PBS血清1小时使用10%。部分随后被孵化与反多克隆抗体对芳基碳氢化合物受体(Abcam ab84833, 1: 20日)和成纤维细胞标记抗体ER-TR7 (sc - 73355, 1: 50,圣克鲁斯生物技术)在一夜之间在4°C。正常兔免疫球蛋白(Sigma-Aldrich)和大鼠免疫球蛋白作为消极的控制。部分被孵化594 -标记山羊anti-rabbit Alexa萤石和FITC-labeled兔子anti-rat二级抗体免疫球蛋白在1/100稀释2小时沿核和4′,复染色6-diamidino-2-phenylin-dole,盐酸盐(DAPI) (Sigma-Aldrich)。随后部分脱水、安装和荧光显微镜下观察。幻灯片进行评估使用显微图由荧光显微镜(奥林巴斯BX-5)。 Imaging software (iVision; Biovision) was used to analyze areas of positive staining.
2.2。流式细胞术
WI-38细胞被固定与BD Cytofix / Cytoperm解30分钟,然后孵化与特定的第一抗体或同形像控制在4°C在黑暗中30分钟。然后这些细胞被洗和孵化fluorescent-conjugated第二抗体。以下使用抗体:anti-AhR (ab2770 Abcam)和anti-pSmad2/3(细胞信号)。样品被分析在FACSCalibur流式细胞分析仪(BD生物系统)。
2.3。采用免疫分析在WI 38细胞
在室温下培养细胞与10%福尔马林固定(RT) 10分钟和permeabilized 5分钟PBS包含Triton X100和BSA缓冲区(TTX 0.3%, 1%牛血清白蛋白:TTX / BSA缓冲区)。阻止10%血清的细胞进一步阻止了30分钟,然后孵化与第一抗体与PBS rt,洗后的1小时,细胞被孵化与荧光标记二次抗体30分钟rt,核与DAPI复染色。随后部分脱水、安装和荧光显微镜下观察。以下使用抗体:anti-AhR主要抗体(Abcam ab2770 1: 20);反αsma (Abcam ab32575);和anti-vimentin (eBioscience)。
2.4。实时定量rt - pcr(存在)
提取总RNA从WI38 RNAeasy设备(试剂盒,瓦伦西亚,CA)。rt - PCR进行使用SYBR绿色PCR反应混合液(美国应用生物系统公司)根据制造商的协议。每个基因的引物设计各自的信使rna序列的基础上,目标是100 - 200个基点。相对mRNA表达被标准化的表达水平计算actinandΔΔCT比未经处理的控制细胞的方法如前所述[36]。以下引物被使用:
肌动蛋白:F, AGAAAATCTGGCACCACACC;R, CAGAGGCGTACAGGGATAGC;AhR:F, GTCGTCTAAGGTGTCTGCTGGA;R, CGCAAACAAAGCCAACTGAGGTG;cyp1a1:F, GATTGAGCACTGTCAGGAGAAGC;R, ATGAGGCTCCAGGAGATAGCAG;cyp1b1:F, GCCACTATCACTGACATCTTCGG;R, CACGACCTGATCCAATTCTGCC;ltbp1:F, TGAATGCCAGCACCGTCATCTC;R, CTGGCAAACACTCTTGTCCTCC;ltbp-2:F, CTGCACAGATGACAACGAGTGTC;R, AGAGTGTAGCCAGGGTAGCAGA;ltbp-3:F, CGGTCACTACAAGTGCAACTGC;R, CTTGTTCTCGCATTTGCCATCCG;ltbp-4:F, TTCCAGTGCAGGACCTGTCCTT;R: GAAGGAGCCTTCGGTGTTAGTG。
2.5。ELISA
上层清液从培养的成纤维细胞(WI38)收集和测量TGF活跃β1通过ELISA (eBiosciences),根据制造商的指示。结果读与Bio-Rad Bio-Plex仪器(Bio-Rad实验室、大力神、CA)。
2.6。由核基因击倒
转录可拆卸的小干扰rna寡核苷酸是由转染与工器的最终浓度20 nM DMEM使用DharmaFECT转染试剂(热科学、沃尔瑟姆,MA)。核/转染试剂时就形成了复杂的核和转染试剂混合了20分钟。然后转染复合物添加到每个实验和血清中孵化自由媒体6小时37°C。转染介质代替完全培养基和孵化在37°C的额外的24 - 48小时。证实了基因可拆卸的存在和免疫印迹。AhR特定核从热科学和LTBP1购买特定的核是购自σ。
2.7。西方墨点法
细胞被洗两次冰冷的PBS和细胞溶解里帕缓冲区包含蛋白酶和磷酸酶抑制剂鸡尾酒(σ)。蛋白质含量测定用BCA试剂(皮尔斯)。等价的蛋白质样本进行sds - page电泳,然后转移到一个聚乙二烯二氟化物膜(微孔)。与5%脱脂奶粉TBST阻塞后,膜与初级孵化anti-AhR (Abcam) anti-LTBP1 (GeneTex),反αsma (Abcam ab32575) anti-vimentin (eBioscience),或反β肌动蛋白(克隆C4, Santa Cruz)抗体作为标准化的加载控制。蛋白质活性主要Abs与HRP-conjugated可视化次要Ab和ECL试剂(Amersham)。蛋白质的水平被ImageJ量化(美国国家卫生研究院)的光密度分析乐队强度和规范化的β肌动蛋白。
2.8。统计分析
数据表示为±SEM为每个组的手段。统计学意义的正态分布样本使用一个独立的双尾学生的评估t以及与方差分析或通过使用GraphPad Prism 5.1版本软件(GraphPad软件,拉霍亚,CA)。差异与被认为是具有统计学意义。
3所示。结果
3.1。表达成纤维细胞在哮喘病人气道高反应性增加
检查是否存在一个微分表达式在哮喘气道高反应性和健康的个体,我们进行了免疫荧光分析AhR和纤维母细胞标记ER-TR7人类气道部分。而健康人(图1中间面板),哮喘病人气道部分显示重要的气道高反应性的表达,增加了成纤维细胞标记ER-TR7,基底膜增厚(图1上面板)。特别是,AhR是主要表现在成纤维细胞和基底膜。有趣的是,气道高反应性显著增加表达式也观察气道成纤维细胞重度吸烟者(图1,下半部分)。这些发现表明增加表达成纤维细胞在哮喘病人气道高反应性,并可能从那些反复暴露于吸烟。
3.2。气道高反应性的增加表达CRE-Treated人类肺成纤维细胞
气道高反应性的角色描绘在成纤维细胞的作用及其机制的规定,我们使用人类作为肺成纤维细胞系在体外模型。在成纤维细胞表达气道高反应性验证,我们发现WI-38 AhR的表情,一个人肺成纤维细胞系,通过流式细胞术和免疫印迹(数据没有显示)。我们发现AhR是既定的成纤维细胞(图中表示2(一个))。我们下一个检查是否AhR是功能;我们使用不同剂量的成纤维细胞治疗TCDD知道AhR配体(0.1和1 nM) 2 48小时;下游气道高反应性表达的基因cyp1a1(图2 (b))和cyp1b1(图2 (c))被rt - pcr检测。比未经处理的纤维母细胞,增加表达在TCDD cyp1a1的成纤维细胞治疗剂量和时间的方式。有将近2倍增加cyp1a1表达治疗后为1.0 nM TCDD 48小时。同样,增加18.5倍时观察cyp1b1 1.0 nM TCDD用于治疗成纤维细胞48小时,表明TCDD可以在成纤维细胞激活通路气道高反应性。此外,气道高反应性调查CRE能否诱导表达,我们对成纤维细胞与50μg / mL CRE 2-48小时和AhR表达被rt - pcr检测。气道高反应性增加表达式被认为与峰值水平在4小时与未经处理的细胞相比,增长了5.7倍(图2 (d))。气道高反应性的增加表达方式存在剂量依赖的相关性进一步观察到免疫荧光分析(图2 (e)气道高反应性),这表明蟑螂过敏原可以诱导表达可能是调节allergen-induced免疫反应的关键。
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3.3。调节CRE诱导TGF气道高反应性β1生产成纤维细胞
气道高反应性调查是否可以调节蟑螂allergen-induced TGFβ1可能控制细胞分化和免疫调节的生产,我们对成纤维细胞与CRE (50μg / mL)受体激动剂TCDD气道高反应性的存在与否或拮抗剂CH122319和活跃的水平TGF信号被探测到β1在上层清液的成纤维细胞培养和治疗。我们发现,TCDD诱导活跃TGF大量泄露β1,成纤维细胞在不同剂量服用TCDD (1.0, 10 nM)和时间(24、48小时图3(一个))。蟑螂过敏原和TCDD作为个体TGF诱导增加水平的活跃β1由成纤维细胞。有趣的是,TGF增加β1进一步提高时,他们两个都结合(图3 (b))。相比之下,对手CH122319气道高反应性抑制CRE + TCDD诱导TGFβ1生产(图3 (b))。蟑螂allergen-induced活跃TGFβ1释放的抑制CH122319进一步证实了使用自然净化蟑螂过敏原,Bla g2(图3 (c))。这些发现表明,可以调节气道高反应性蟑螂allergen-induced TGFβ1生产。
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3.4。TGF减少水平的活跃β1在成纤维细胞可拆卸的气道高反应性
进一步检查调制的AhR蟑螂allergen-induced TGFβ1生产,我们使用siRNAs撞倒了在成纤维细胞气道高反应性。可拆卸的气道高反应性是通过rt - pcr验证(图4(一)),这表明至少60% si-RNA-2击倒,并通过免疫印迹(图4 (b))。AhR的表情图4 (b)进一步量化了ImageJ带强度的光密度分析和归一化的β肌动蛋白相比,然后争夺si-RNA治疗组(图4 (c))。至少有70%为si-RNA-2击倒。我们接下来用成纤维细胞与AhR si-AhR-2检测TGF撞倒了β1的表达在RNA水平通过rt - pcr(图4 (d)TGF)和活跃β通过ELISA(图1分泌4 (e))。我们发现TGFβ1的表达在RNA水平或分泌显著降低了成纤维细胞可拆卸的气道高反应性。击倒的气道高反应性是否会影响TGF的激活β气道高反应性信号,我们对待这些成纤维细胞有或没有与5 ng / mL TGF击倒β1,测量磷酸化Smad2/3 (p-Smad2/3)在不同时期通过流式细胞术(图4 (f))。我们提到的激活增加Smad2/3 15分钟的所有这些细胞治疗但我们指出下降30分钟和120分钟。有趣的是,成纤维细胞和可拆卸的气道高反应性的水平,显示出了非凡的减少p-Smad2/3在120分钟而控制细胞。这些数据表明,可能有途径和TGF气道高反应性之间的串扰β1通路。
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3.5。AhR调节CRE诱导成纤维细胞分化
检查是否由CRE控制纤维母细胞分化诱导气道高反应性,我们培养的成纤维细胞与气道高反应性,没有击倒和对待CRE (50μg / mL) 24和72小时。分化成纤维细胞被表达的评估αsma与DAPI核immune-staining。虽然没有明确指出在变化αsma表达为成纤维细胞和没有击倒在基础水平气道高反应性和24小时,增加表达式被当CRE 72小时处理成纤维细胞没有击倒气道高反应性。的αsma阳性染色在成纤维细胞是由成像量化和分析软件(图5 (b))。明显的表达αsma与CRE治疗观察成纤维细胞。最后,减少αsma表达的rt - pcr检测成纤维细胞气道高反应性和可拆卸的比那些没有基因击倒(图5 (c)气道高反应性),这表明可能控制蟑螂allergen-induced分化。CRE诱导成纤维细胞分化进一步证实了immune-staining(图5 (d))和西方的屁股(图5 (e))与另一个myofibroblast标记,波形蛋白。
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3.6。增加LTBP1表达TCDD处理成纤维细胞
TGFβ1活动已被证明是由LTBP-1控制(31日]。此外,有人建议,可以控制气道高反应性LTBP1表达式,随后TGF激活β1信号[32]。调查是否可能控制TGF的配体可以激活LTBP1气道高反应性β1释放,我们对待成纤维细胞使用不同剂量的TCDD(0.1和10 nM)不同时间48小时(2),和LTBP1 4的RNA表达水平是通过rt - pcr来衡量的。其中,增加治疗后观察LTBP1 TCDD(图6(一))。峰值水平在4 h为0.1 nM和24小时1 nM TCDD,分别。减少表达LTBP-2检测(图6 (b)),而未发现显著变化LTBP-3和4(数据没有显示)。看到的重要性增加LTBP-1 TGF调节气道高反应性活跃β1版本,我们进行预处理成纤维细胞与LTBP-1特定的核。我们发现,TCDD TGF诱导活跃β1显著抑制LTBP-1击倒时(图6 (c)),这表明LTBP-1可能控制释放积极的TGF气道高反应性的关键β1。
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4所示。讨论
在目前的研究中,我们调查了在调制蟑螂allergen-induced气道高反应性的功能性意义通过控制释放活性TGF免疫反应β1。我们发现增加表达式在哮喘病人气道,气道高反应性主要在气道上皮细胞和成纤维细胞。虽然认识到二恶英和二恶英类多氯化合物,TCDD,多环芳烃,和点,可以激活并导致气道高反应性ROS生成,细胞分化,细胞因子和炎症生产,我们第一次发现AhR配体可以提高蟑螂TGF allergen-induced活跃β1生产。研究结果表明可能的生物环境暴露与调制allergen-induced过敏疾病的气道高反应性。因为增加的气道高反应性的表达在上皮细胞,并主要在成纤维细胞基底膜增厚的哮喘病人,为气道高反应性可能是传感器对环境化学物质和过敏原有助于进行性纤维化和哮喘病理重构。
TGFβ1已被证明是至关重要的在细胞生长、分化、免疫调节、气道重构的主要中介(24- - - - - -27]。我们最近的研究观察TGF增加活跃β1在航空公司从蟑螂allergen-induced小鼠模型(提交高et al ., 2013)。在这项研究中,我们发现,蟑螂过敏原可以诱发积极TGF的增加产量β1在成纤维细胞。众所周知,TGFβ气道高反应性1和信号通路相互crossregulate特异性的方式(37]。我们发现TCDD气道高反应性作为受体激动剂可以提高蟑螂allergen-induced TGFβ1生产,但是CH122319作为拮抗剂可以抑制allergen-induced TGFβ1分泌。TCDD在这项研究中,我们使用已被视为最有效的AhR配体已知的和已被证明是仅略代谢和相对缓慢排出38,39]。气道高反应性的作用在调节蟑螂allergen-induced TGFβ1版本进一步证实了使用Bla g2,纯化蟑螂过敏原检测不到内毒素水平,通过使用一个(WI38)与人类成纤维细胞系或没有可拆卸的气道高反应性。特别是,击倒显示降低气道高反应性的成纤维细胞活性TGF的水平β1而控制细胞。此外,这些细胞气道高反应性和可拆卸的表现出非凡的减少p-Smad2/3的水平。这些发现表明,AhR可能是一个积极监管机构的蟑螂allergen-induced TGFβ1人类成纤维细胞信号。我们的发现似乎矛盾的几个先前的研究表明气道高反应性的负面作用的起始食物过敏反应(40,41),TGF监管β1分泌,LTBP1表达式(11,32,42]。例如,尽管AhR受体激动剂,已被证实能扰乱TGFβ1信号通过抑制核易位TGF Smad2/3/4和块β1-induced myofibroblast分化和细胞外基质生产(34]。相比之下,其他一些研究表明,气道高反应性本构TGF活动积极控制β1、TGFβ2,LTBP-1恶性神经胶质瘤细胞(43]。因此,我们推测,可能有显著的复杂性TGF气道高反应性机制的监管β1信号与其他coregulation多个通路。
之间的显著相关性一直观察myofibroblasts和牙龈纤维化的程度在哮喘患者的气道20.),和成纤维细胞被认为是主要参与者通过分化成myofibroblasts可能控制哮喘的发展牙龈纤维化。此外,TGF -β1建议招募成纤维细胞在哮喘气道(23]。我们因此调查是否控制气道高反应性接触蟑螂过敏原后成纤维细胞分化。我们发现,虽然没有明显的变化αsma表达(myofibroblasts标记)为成纤维细胞与气道高反应性,没有击倒在基础水平和24小时,抑制成纤维细胞的分化与CRE AhR拆装的成纤维细胞中观察到治疗72小时。这是进一步证实了显示减少αsma表达在转录水平。有趣的是,显著减少成纤维细胞增殖也指出在72小时(数据未显示)。因此,我们第一次,说明可能气道高反应性控制蟑螂allergen-induced纤维母细胞分化,在控制牙龈纤维化和气道重塑是至关重要的。
气道高反应性机制的探索可能的潜在调制allergen-induced TGFβ1信号,我们调查了LTBP1,控制TGF已被证明是至关重要的β1活动[31日]。AhR已被证明Ltbp-1转录调节的机制涉及招聘CREB1等辅活化因子和辅阻遏物如HDAC2 Ltbp-1启动子(44]。我们猜测可能LTBP-1转录调节气道高反应性,控制基因表达,随后激活TGFβ1信号[32]。事实上,增加LTBP1观察治疗后与TCDD最高水平的表达在早期时间点(4小时)。相比之下,LTBP-2表达减少,LTBP-3和4在治疗后保持不变,TCDD(数据未显示)。最重要的是,TGF调节气道高反应性活跃β1释放明显阻塞LTBP-1时撞倒了。这项研究结果支持了我们最初的假设LTBP-1介导TGF气道高反应性控制是至关重要的β1分泌。虽然机制不清楚活动TGF有关的规定β1×LTBP-1,研究表明,LTBP-1有助于TGF-beta1激活,可能通过一个过程涉及细胞外蛋白酶活动(31日]。然而,我们发现在人类成纤维细胞显示激活的AhR途径可以增加LTBP-1表达式,但相比之下,研究在主- / -小鼠气道高反应性的小鼠胚胎成纤维细胞也显示增加表达LTBP1 TGF和更高水平的活跃β1 (32]。到目前为止,研究差异的原因从人类和小鼠成纤维细胞有或没有击倒气道高反应性在很大程度上是未知的,这将是主题感兴趣的追求未来。
综上所述,该研究提供了证据的气道高反应性的贡献机制调节蟑螂allergen-induced TGF激活β1。特别是,研究和TGF气道高反应性之间的相互作用β1途径可以更好的帮助我们了解有关环境的潜在机制调节allergen-induced免疫反应的化学物接触。如图7气道高反应性,我们提出一个模型的作用在调节环境化学物质和TGF allergen-induced激活β1信号(部分修改的基础上,本文由Starsichova et al . 2012年)(35]。短暂,上皮细胞受到反复接触环境化学物质和活动TGF过敏原可以释放β1,这在很大程度上是由LTBP-1控制。另一方面,环境气道高反应性化学物质结合,导致其激活,中扮演重要角色的控制LTBP-1转录,TGF激活β1信号,随后的控制细胞增殖,分化和气道重塑。这些研究提供了重要的基础进一步详细调查之间的交互和TGF气道高反应性β1信号在环境化学物质和过敏原诱导炎症和修理/改造在哮喘。
缩写
| CRE: | 蟑螂提取 |
| :气道高反应性 | 芳基碳氢化合物受体(AhR) |
| TCDD: | 2、3、7 8-Tetrachlorodibenzo-p-dioxin |
| TGFβ: | 转化生长因子β |
| cyp1a1: | 细胞色素P450,家庭1,B亚科 |
| cyp1b1: | 细胞色素P450,家庭1,B亚科 |
| LTBP-1: | 潜在的TGFβ结合蛋白1 (LTBP-1) |
| αsma: | α光滑的肌肉肌动蛋白。 |
利益冲突
作者宣称没有利益冲突有关的出版。
确认
这项研究得到了美国国立卫生研究院(NIH),资助1 r21ai088406和RO1ES021739。作者感谢梁燕她优秀的技术援助。