文摘
瞬时受体潜在草酸类型1 (TRPV1)在动脉粥样硬化的发病机制是至关重要的;然而它的角色和巨噬细胞泡沫细胞形成的潜在机制仍不清楚。在这里,我们显示增加TRPV1的表达领域的泡沫状巨噬细胞在动脉粥样硬化的主动脉载脂蛋白E-deficient老鼠。老鼠从骨髓巨噬细胞的接触氧化低密度脂蛋白(oxLDL)调节TRPV1的表达。此外,oxLDL激活TRPV1和引起钙(Ca2 +)涌入,药理TRPV1拮抗剂capsazepine废除。此外,oxLDL-induced巨噬细胞被TRPV1受体激动剂改善脂质积累,但加剧了TRPV1拮抗剂。TRPV1受体激动剂治疗并不影响oxLDL的内部化,但促进胆固醇流出通过上调流出磷酸腺苷磁带(ABC)转运蛋白ABCA1 ABCG1。此外,upregulation ABC转运蛋白是主要通过肝X受体α——(LXRα-)相关的转录调节。此外,肿瘤坏死因子-α全身炎症反应减轻了TRPV1受体激动剂但TRPV1拮抗剂和LXR加剧α巨噬细胞的核。我们的数据表明,LXRα扮演关键的角色TRPV1-activation-conferred保护oxLDL-induced脂质积累和TNF -α全身炎症巨噬细胞。
1。介绍
动脉粥样硬化的并发症是死亡的主要原因在西方社会。动脉粥样硬化开始循环胆固醇水平增加,涉及到几个事件导致慢性血管炎(1,2]。动脉粥样硬化的发生和发展很大程度上依赖于巨噬细胞泡沫细胞的功能,局部动脉壁内积累和释放各种细胞因子和趋化因子诱导炎症(2- - - - - -4]。泡沫细胞的形成主要源于控制改性低密度脂蛋白(LDL)的巨噬细胞,导致过剩lipoprotein-derived细胞内脂质积累和归纳的促炎介质(3,4]。细胞脂质水平的泡沫细胞动态受巨噬细胞清道夫受体(SRs)和胆固醇流出转运蛋白。氧化低密度脂蛋白(oxLDL)内化的巨噬细胞是由几种类型的SRs,包括SR-A和CD36。相反,胆固醇流出是由SR-BI和磷酸腺苷磁带(ABC)转运蛋白如ABCA1和ABCG1 [5- - - - - -10]。越来越多的证据表明,预防泡沫细胞的形成可以阻止动脉粥样硬化的发展11- - - - - -13),但大部分仍有待探索。
瞬时受体电位(TRP)草酸类型1 (TRPV1),一个ligand-gated非选择性阳离子通道,主要表现在主要疼痛的感觉神经元(14,15]。神经元激活TRPV1的热量,质子,内源性脂质分子和氧化刺激(14- - - - - -19)和外源性受体激动剂如evodiamine(吴茱萸的活性成分)和辣椒素(辣椒)的活性成分16,20.]。激活TRPV1允许钙(Ca2 +)条目,从而导致细胞内钙水平升高2 +并作为Ca2 +信号引起反应神经元(14,15]。
TRPV1表达在某些类型的nonneuronal细胞如上皮和内皮细胞和调节他们的一些病理生理功能(21- - - - - -24]。新出现的证据表明,TRPV1可能是一个重要的传感器和心血管体内平衡的调节器和抵抗某些心血管疾病如高血压、内皮功能障碍和中风25,26]。最近,我们报道,删除TRPV1载脂蛋白E-deficient老鼠(ApoE粥样硬化病变恶化−−/atherosclerosis-prone小鼠模型),所以TRPV1在动脉粥样化形成可能有作用27]。然而,TRPV1的表达在巨噬细胞仍不清楚在巨噬细胞泡沫细胞及其功能意义在很大程度上仍是个未知数。
在这项研究中,我们旨在解决TRPV1在巨噬细胞的病理生理功能泡沫细胞。我们首先检查TRPV1的表达在巨噬细胞和小鼠动脉粥样硬化病变的分布,然后,调查2 TRPV1受体激动剂的治疗效果,evodiamine,放松管制的辣椒素,脂质代谢和炎症巨噬细胞。最后,我们探讨了分子机制赋予的保护TRPV1受体激动剂在巨噬细胞。
2。材料和方法
2.1。试剂
capsazepine Evodiamine,人类的低密度脂蛋白,辣椒素,载脂蛋白AI (apoAI)、高密度脂蛋白(HDL), EGTA,油红O,和鼠标抗体α微管蛋白来自Sigma-Aldrich(圣路易斯,密苏里州,美国)。老鼠抗体TRPV1是从Abnova(桃园、台湾)。兔子ABCG1的抗体,CD36,组蛋白H1,山羊SR-A抗体,控制小干扰RNA (siRNA),和LXRα可以阻止来自圣克鲁斯生物技术(圣克鲁斯、钙、美国)。鼠标ABCA1的抗体,α肌动蛋白、抗体和兔SR-BI LXRα,F4/80来自Abcam(美国Cambridge, MA)。巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)、肿瘤坏死因子α(肿瘤坏死因子α),从研发系统和ELISA试剂盒(明尼阿波利斯,美国)。Dil-labeled oxLDL来自生物医学技术(美国马斯托顿)。NBD-cholesterol从开曼群岛和T0901317化学(美国安阿伯市MI)。Fluo-8 Ca2 +化验设备是从ABD BioQuest (CA桑尼维尔,美国)。胆固醇和甘油三酯测定包来自草毒死(Crumlin,有限公司安特里姆,英国)。
2.2。老鼠
调查符合指南的护理和使用实验动物由美国国家卫生研究院(NIH出版85号- 23,1996年修订),和所有的动物实验动物保健和使用委员会批准的国立阳明大学。野生型(WT) C57BL / 6小鼠从全国实验动物中心,购买国家科学委员会(台北)
2.3。细胞培养
从骨髓巨噬细胞(BMDMs)准备描述(28]。简单地说,WT老鼠被有限公司2曝光,从股骨和单核细胞被Percoll收获(1.073克/厘米3密度梯度离心法。细胞被播种在最低必不可少的媒介α(MEMα)补充50 ng / mL MCSF, 10%胎牛血清(的边后卫)和青霉素(100 U /毫升)/链霉素(100 g / mL)在37°C 5 d。鼠标macrophage-like J774。A1细胞(生物资源收集与研究中心;新竹、台湾)RPMI 1640培养基培养补充10%的边后卫,青霉素(100 U /毫升),和链霉素(100μg / mL)。
2.4。低密度脂蛋白修改
低密度脂蛋白是CuSO暴露4(5μmol / L) 24小时在37°C和铜2 +那么,被广泛的透析。修改的程度是决定通过测量硫代巴比土acid-reactive物质(TBARs)。OxLDL包含大约30 - 60 nmol TBARs定义为丙二醛每毫克当量LDL蛋白质用于实验。
2.5。免疫印迹分析
BMDMs与PBS冲洗,然后,细胞溶解在免疫沉淀反应裂解缓冲(50更易L三pH值7.5,5更易/ L EDTA, 300更易/ L氯化钠,特里同x - 100 1%, 1更易与L phenylmethylsulfonyl氟化物,10μg / mL亮抑酶肽和10μg / mL抑肽酶)。整除(50μg)的细胞溶解产物8% sds - page分离。转移膜后,样本与初级抗体免疫印迹,然后,辣根peroxidase-conjugated二级抗体。乐队是揭示了使用酶联化学发光检测设备(美国珀金埃尔默,沃尔瑟姆,MA),和密度是由使用量化ImageQuant 5.2(美国医疗生物科技、费城、PA)。
2.6。测量(Ca2 +]水平
Ca2 +分析了根据制造商的协议(ABD BioQuest,桑尼维尔,美国)。简单地说,BMDMs被播种在24-well盘子和增长了24小时。细胞被洗和Fluo-8 NE dye-loading解决方案增加了在室温下1小时。介质被替换为新的介质包含测试化合物。荧光测定的荧光测定术(分子器件、桑尼维尔,美国)490海里励磁和525海里排放。
2.7。油红O染色
细胞与4%多聚甲醛固定,然后沾油红o . 0.5%苏木精是用来对比染色。
2.8。Dil-OxLDL绑定化验
Dil-oxLDL,用绿色荧光标记,用来测量oxLDL绑定SRs的巨噬细胞29日]。简而言之,BMDMs evodiamine浓度或辣椒素治疗24 h,然后,孵化与Dil-labeled oxLDL (10μ为一个额外的4 g / mL)在4°C h。与磷酸盐(PBS)清洗后,细胞溶解产物分析荧光测定术(分子器件、桑尼维尔,美国)在540 nm兴奋和590海里排放。
2.9。胆固醇流出化验
BMDMs evodiamine浓度或辣椒素治疗,疗程12 h,然后,进行平衡与NBD-cholesterol (1μg / mL)额外6 h。NBD-cholesterol-labeled细胞用PBS和MEM的孵化α6 h apoAI (10μ克/毫升)或高密度脂蛋白(50μg / mL)。Fluorescence-labeled胆固醇从细胞中释放被使用multilabel计数器测量(美国PerkinElmer沃尔瑟姆,MA)在485 nm兴奋和535海里排放。胆固醇流出被表示为荧光比例在中相对于总荧光(细胞和介质)。
2.10。制备的核提取物
核提取准备的描述(30.]。BMDMs细胞溶解在10毫米消息灵通的pH值7.9,氯化钾10毫米,1.5毫米MgCl2,0.5%诺乃清洁剂p 40 1μ10 g / mL亮抑酶肽,μg / mL抑肽酶,1毫米phenylmethylsulfonyl氟化物。核是颗粒状的5000 g 5分钟在4°C,以及由此产生的上层清液作为胞质分数。原子核在裂解resuspended缓冲区,剪切15秒的微探针声波降解法,和孵化冰5分钟。在12000 g离心5分钟后在4°C,上层清液收集核提取。
2.11。染色质免疫沉淀反应(芯片)
芯片分析进行描述(12]。BMDMs MEM培养α有或没有预处理evodiamine (0.5μ米)或辣椒素(10μ米)6 h和固定的甲醛在室温下15分钟。细胞细胞溶解和用后,染色质的解决方案是稀释和兔子anti-LXR一夜之间,细胞被孵化αAb或兔免疫球蛋白在4°C。Immunocomplexes与鲑鱼精子DNA /蛋白质沉淀琼脂糖和离心收集的。细胞被洗后,染色质DNA被筛选了,纯化,进行PCR分析。染色质的1%的解决方案是使用作为输入控制。鼠标ABCA1基因启动子包含LXR绑定元素放大通过PCR引物序列如下:5′cca CGT GCT TTC TGC TGA GT-3′, 5′TGC公司治理文化广汽标签TTC CTT TT-3′。PCR产品解决2%的琼脂糖凝胶,溴化乙锭染色可视化。
2.12。瞬时转染和荧光素酶记者分析
细胞的转染质粒phABCA1(-928)卢克,记者质粒与LXR人类ABCA1启动子α响应元素(LXRE 3′-AAACTGGC TATCATTGGA GACGCG-5′)或phABCA1-DR4 m-Luc,记者与突变质粒LXRE (3′-AAACACAC TATCATT手枪通过使用TurboFect GACGCG-5′)。pGL3-renilla质粒作为转染cotransfected控制。转染24小时后,细胞治疗evodiamine(500海里),辣椒素(10μ米),或T0901317 (10μ米),一个LXR受体激动剂,另一个24小时。细胞被细胞溶解卢克和renilla活性测定。
2.13。小干扰RNA转染
巨噬细胞与控制或LXR转染α核与使用TurboFect 24小时然后evodiamine或辣椒素处理另一个24小时前进一步的实验。
2.14。炎性细胞因子的测定
促炎细胞因子的水平,包括单核细胞化学引诱物蛋白1 (MCP-1)、白细胞介素- 6 (il - 6)和巨噬细胞炎性protein-2 (MIP-2),在培养基用ELISA试剂盒的使用。
2.15。统计分析
结果提出了均值±SD从5独立的实验。Mann-Whitney测试是用来比较两个独立的团体。克鲁斯卡尔-沃利斯检验后面跟着Bonferroni因果分析被用来占多个测试。SPSS v20.0 (SPSS Inc .,芝加哥,IL)是用于分析。被认为具有统计显著性差异。
3所示。结果
3.1。TRPV1的表达在巨噬细胞和动脉粥样硬化病变
研究可能的TRPV1在动脉粥样化形成中的作用,我们首先研究TRPV1的表达在动脉粥样硬化病变。TRPV1的蛋白质水平显著高于载脂蛋白e−−/比野生型小鼠主动脉(图1(一))。除了在主动脉ECs TRPV1的表达,免疫组织化学染色TRPV1展示了积极的信号主要局限于地区ApoE的巨噬细胞在动脉粥样硬化病变−−/老鼠(图1 (b))。因为神经元可以激活TRPV1几个氧化刺激和脂质(14,18,19,24),我们接下来检查oxLDL TRPV1的表达在巨噬细胞的影响。治疗BMDMs 50μg / mL oxLDL长达24小时时间增加TRPV1的表达(图1 (c)早在治疗后3小时或24 h。因此,TRPV1可能在动脉粥样硬化的发展起着重要的作用。
(一)
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(c)
3.2。在BMDMs OxLDL移植并激活TRPV1
我们下一个调查的刺激效果oxLDL BMDMs TRPV1的频道活动。为了应对oxLDL,细胞内的钙水平2 +([Ca2 +]在BMDMs),反映了Ca的强度2 +敏感Fluo-8荧光,迅速达到30秒,稍微降低了1分钟,再逐渐增加到峰值4 h(图2(一个))。重要的是,增加oxLDL-induced (Ca2 +]水平在30秒和4 h poststimulation阻止通过预处理capsazepine (TRPV1拮抗剂)(数据2 (b)和2 (c))。然后我们检查特异性capsazepine,发现接触BMDMs evodiamine或辣椒素(Ca (TRPV1受体激动剂)也增加2 +]在30秒级别,这由capsazepine预处理(图被废除2 (d))。
(一)
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(d)
3.3。激活TRPV1受体激动剂抑制脂质积累的巨噬细胞泡沫细胞
然后我们确定的功能意义TRPV1在BMDMs泡沫细胞的形成。预处理与evodiamine或辣椒素oxLDL-induced脂质积累减少,所显示的油红O染色(图3(一个))和细胞水平的胆固醇和甘油三酯(数字3 (b)和3 (c))。相比之下,capsazepine治疗增强oxLDL-induced脂质积累(数字3(一个)- - - - - -3 (c))。因此,激活TRPV1受体激动剂可能防止泡沫细胞的形成。
(一)
(b)
(c)
3.4。激活TRPV1受体激动剂的增强胆固醇流出不改变OxLDL内化
然后我们阐明TRPV1受体激动剂的效果在oxLDL内化和胆固醇流出。与TRPV1受体激动剂预处理BMDMs evodiamine (0.5μ米)或辣椒素(10μ米)没有改变胆固醇绑定但剂量依赖性增加了apoAI——或者HDL-dependent胆固醇流出(数字4(一)- - - - - -4 (c))。SR-A, CD36 SR-BI, ABCA1 ABCG1在形成泡沫细胞胆固醇体内平衡的关键角色(5- - - - - -10]。因此,我们划定TRPV1受体激动剂在衰减脂质积累的机制通过检查这些受体和转运蛋白表达的改变。巨噬细胞治疗evodiamine或辣椒素显示ABCA1蛋白水平的增加和ABCG1 SR-A蛋白质含量没有变化,CD36和SR-BI(数字5(一个)和5 (b))。因此,TRPV1激活抑制细胞内脂质积累可能是因为增加反向-胆固醇转运体(RCT)胆固醇流出的依赖而不是抑制SR-mediated oxLDL在巨噬细胞摄取。
(一)
(b)
(c)
(一)
(b)
3.5。LXRα介导的抑制效应TRPV1受体激动剂对泡沫细胞的形成
地址是否LXRα参与TRPV1-agonist-induced ABCA1的表达和ABCG1,我们检查了LXR核蛋白质水平α在evodiamine——或者capsaicin-treated巨噬细胞。Evodiamine、辣椒素或T0901317 (LXRα受体激动剂)治疗增加了LXR核水平α(图6(一)LXR)和增强的绑定α在ABCA1 LXRE启动子(图6 (b))。此外,探索LXR的转录调控α在evodiamine-treated巨噬细胞,我们执行LXR激活化验通过使转染phABCA1 (-928) luc或phABCA1-DR4 m-Luc LXRE(记者与突变质粒),其次是evodiamine或辣椒素治疗。与对照组相比,治疗evodiamine,辣椒素,或T0901317积极控制显著增加了启动子的活性phABCA1(-928)卢克(图6 (c))。phABCA1-Luc相比,phABCA1-DR4 m-Luc显示钝化与evodiamine感应,辣椒素,或T0901317治疗(图6 (c))。此外,与LXR转染αsiRNA LXR的蛋白表达减少α废除了mRNA ABCA1的表达和引起ABCG1 evodiamine或辣椒素(数字7(一)和7 (b))。此外,核抑制LXR激活废除evodiamine或辣椒素的有益作用apoAI——或者HDL-dependent胆固醇流出(图7 (c))。这些结果表明LXR的至关重要的作用α激活evodiamine——或者capsaicin-regulated ABCA1基因表达和ABCG1,这可能有助于抑制影响巨噬细胞的转化受体激动剂的泡沫细胞。
(一)
(b)
(c)
(一)
(b)
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3.6。击倒的LXRα肿瘤坏死因子-废除TRPV1 Activation-Conferred保护α全身炎症反应
肿瘤坏死因子-α是一个关键proatherogenic中介对动脉粥样硬化病变的进展(31日]。我们下一个检查TRPV1受体激动剂的影响TNF -α在巨噬细胞全身炎症反应。肿瘤坏死因子-α增加生产MCP-1、il - 6, MIP-2 BMDMs明显减毒通过预处理2 TRPV1受体激动剂;此外,预处理capsazepine加剧了TNF -α全身的生产MCP-1和il - 6但不是MIP-2(图8(一个))。此外,evodiamine或辣椒素抑制肿瘤坏死因子-α增加全身MCP-1、il - 6和MIP-2生产被核抑制LXR逆转α激活(图8 (b))。这些结果表明,LXRα需要激活巨噬细胞中TRPV1受体激动剂的抗炎作用。
(一)
(b)
4所示。讨论
这里激活TRPV1的新效应特征及其潜在的分子机制抑制oxLDL或TNF -α全身的放松管制的巨噬细胞脂质代谢和炎症。我们首先验证TRPV1的表达在动脉粥样硬化主动脉和macrophage-foam细胞的特定区域。的积累macrophage-derived泡沫细胞内膜和随后从这些细胞释放炎性细胞因子2关键步骤在动脉粥样硬化的发生和发展1- - - - - -4]。这个细胞定位意味着TRPV1的可能作用在调节这些细胞的病理生理功能。因此我们使用一个在体外模型来研究TRPV1 macrophage-foam细胞的作用。孵化与evodiamine或辣椒素,TRPV1受体激动剂,减轻oxLDL-induced脂质积累和TNF -α在BMDMs全身炎症,所以TRPV1的功能与macrophage-foam细胞的脂质代谢和炎症反应。有趣的是,TRPV1受体激动剂的保护作用可能是由于LXR的激活α。我们的在体外数据表明,TRPV1在维护有小说影响脂质稳态和巨噬细胞的炎症反应。
然后我们研究的分子机制的有益功能激活TRPV1在本实验的巨噬细胞,利用细胞培养模型。oxLDL治疗,最重要的调制器在动脉粥样硬化的发展,增加BMDMs TRPV1通道活动,就是明证TRPV1-mediated增加(Ca2 +]水平剖面类似于诱发TRPV1受体激动剂。此外,oxLDL-induced泡沫细胞形成,通过增加细胞的胆固醇和甘油三酯水平,抑制了TRPV1受体激动剂,但加剧了TRPV1拮抗剂。清除细胞外钙2 +通过EGTA加剧oxLDL-induced脂质积累和废除TRPV1受体激动剂的保护作用BMDMs(数据未显示),同意先前的研究,(Ca的增加2 +]水平由oxLDL可能发挥关键作用的形成macrophage-foam细胞(32]。因此,激活TRPV1 / Ca2 +信号可以抑制泡沫细胞的形成在体外。
SR-dependent oxLDL吸收和RCT-mediated胆固醇流出2关键在macrophage-foam细胞的胞内脂质稳态调节机制(5- - - - - -10]。了多方面的证据表明,SRs表达降低或升高相关的函数在巨噬细胞导致减少沉积的胆固醇在巨噬细胞12,30.,33]。有趣的是,TRPV1受体激动剂治疗并没有改变绑定Dil-oxLDL SRs或SR-A的蛋白表达,CD36, SR-BI BMDMs但促进胆固醇流出。此外,TRPV1受体激动剂治疗调节ABCA1和ABCG1,两个主要类型的ABC转运蛋白负责从macrophage-foam细胞apoAI和HDL胆固醇流出,分别。ABCA1的关键作用和ABCG1在维持胆固醇在巨噬细胞内稳态定义良好的(34,35]。损失或损害的功能ABCA1 ABCG1在人类或啮齿动物实验导致高脂血症,过多的胆固醇积累在外围组织,和压倒性的炎症反应34,36]。因此,我们在体外结果强烈支持,TRPV1-mediated抑制泡沫细胞的形成完全是由于增加RCT-dependent胆固醇流出,这是与以往的研究一致,细胞因子或flavonoid-induced upregulation ABCA1或ABCG1有助于减轻脂质积累在泡沫细胞(11- - - - - -13]。的详细机制激活TRPV1导致upregulation ABC转运蛋白还不清楚。然而,[Ca的增加2 +]其他干预措施可能诱发的水平调节ABC转运蛋白的表达在巨噬细胞37]。
此外,我们表明,TRPV1 agonist-induced upregulation ABCA1和ABCG1伴随着LXR核水平的增加α和它的DNA结合的能力。这个概念进一步推广活动支持发现TRPV1-agonist-induced增加被转染的废除LXRE突变(phABCA1-DR4 m-Luc)。抑制LXRα激活的siRNA减少TRPV1-agonist-mediated upregulation ABCA1 ABCG1。因此,LXRα介导的转录调控可能需要感应ABCA1和ABCG1表达的TRPV1受体激动剂。尽管我们发现TRPV1活动的惟一途径,TRPV1受体激动剂影响胆固醇流出的详细分子机制值得进一步调查。在抑制LXR功能分析α激活TRPV1受体激动剂的抑制作用在细胞内脂质积累被废除。LXRα可能需要的TRPV1 activation-induced ABCA1基因表达和ABCG1,这可能有助于抑制巨噬细胞泡沫细胞的转变在体外。除了LXRα介导的转录调控,越来越多的证据表明,ABCA1也受转录后的修改(38,39]。例如,钙调蛋白也能防止蛋白降解的ABCA1与calmodulin-binding互动主题(1244年至1257年在ABCA1蛋白氨基酸),这是附近害虫序列(1283 - 1306个氨基酸),从而防止绑定calpain ABCA1,导致ABCA1降解的抑制38]。然而,转录后的调控是否从事TRPV1 agonist-mediated upregulation ABCA1保持进一步的调查。
新出现的证据表明,除了对胆固醇代谢的作用,还ABCA1函数作为一个关键调制器调节炎症反应(39,40]。丹吉尔疾病患者和ABCA1基因突变或小鼠功能消融ABCA1表现出不规则的炎症反应(41- - - - - -43]。此外,越来越多的证据表明,ABCA1的表达和活动期间受损的炎症在活的有机体内(44,45]。促炎细胞因子治疗或脂多糖(LPS)减少ABCA1的表达及其相关函数在各种类型的细胞(44,45]。更重要的是,病毒或者细菌感染减少LXR的表达α和它的目标基因,包括ABCA1 [46]。此外,LXR激活α其配体可以抑制促炎介质包括LPS-induced产生TNF -αMCP-1, il - 6, MIP-2巨噬细胞(46- - - - - -48]。我们发现,肿瘤坏死因子-α全身MCP-1生产和抑制了il - 6与TRPV1受体激动剂治疗但TRPV1拮抗剂的增强。siRNA LXR击倒的α表达废除TNF - TRPV1受体激动剂的抗炎效果α对待BMDMs。激活TRPV1受体激动剂的同时抑制巨噬细胞的炎症反应在体外,既可以解释TRPV1在减少动脉粥样硬化损伤的保护作用在活的有机体内(49- - - - - -51]。可以想象,LXR的抗炎特性α可能发挥关键作用反向胆固醇运输和免疫之间的串扰。然而,详细的分子机制这个交互需要进一步调查。
TRPV1最初发现主要表达疼痛的感觉神经元和探测刺激的扮演着重要的角色,炎症,氧化物质躯体和内脏传入14,15]。然而,越来越多的证据表明,TRPV1在几种类型的non-neuronal细胞中表达,包括巨噬细胞(52),内皮细胞(ECs) [27],preadipocytes [53,54)和极其调节功能。最近,收敛的证据支持一个TRPV1作为重要生理作用积分器在心血管系统的功能和心血管疾病(25,27,55]。例如,由辣椒素激活TRPV1增加内皮没有合酶的活性(以挪士),促进血管舒张,从而降低实验性高血压大鼠的血压(25]。另外,我们之前报道,激活TRPV1 evodiamine或辣椒素引起Ca2 +端依赖PI3 K / Akt / CaMKII / AMPK信号,从而导致以挪士激活ECs (27,56]。,失活的TRPV1加速发展的代谢疾病如高血压、动脉硬化、肥胖、脂肪肝、而TRPV1受体激动剂激活防止这些代谢疾病25,55,57,58]。我们之前的研究表明,长期治疗的载脂蛋白e−−/与TRPV1受体激动剂evodiamine缓解高脂血症小鼠系统性炎症、肝微小脂肪和动脉粥样硬化59]。此外,我们最近的数据表明,慢性治疗evodiamine调节肝水平的LDLR, ABCG5 ABCG8, CYP7A1 ApoE−−/老鼠,这可能促进胆汁酸合成和粪便排泄。有趣的是,激活LXRα会使胆固醇排泄增加LDLR的转录调控,ABCG5 ABCG8, CYP7A1肝(60]。这些证据表明TRPV1在脂类代谢的潜在作用。这个概念是由我们的研究结果证实,激活TRPV1的evodiamine增加(Ca2 +]水平,这激活了LXRα信号通路,导致upregulation ABCA1 ABCG1,最终减少macrophage-foam细胞的脂质积累。,虽然目标细胞evodiamine还没有被确认,我们的研究表明,合作的多个生理途径在不同类型的细胞中可能需要的有利影响TRPV1受体激动剂治疗代谢紊乱。
5。结论
最后,我们将演示一种新的保护功能的TRPV1在巨噬细胞,即激活TRPV1受体激动剂可以抑制oxLDL-induced放松管制的脂质代谢和炎症在体外通过增加LXRα激活,从而导致促进胆固醇流出和衰减的炎症反应。我们的发现可能有助于发展中新的药理靶点治疗atherosclerosis-related心血管疾病。
利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
作者的贡献
进锋赵和Li-Chieh Ching同样导致了这项工作。
确认
作者感谢劳拉·斯梅尔帮助语言编辑。本研究支持由国家科学委员会(nsc - 99 - 2320 - b - 010 - 017 - my3 nsc - 101 - 2628 - b - 010 - 001 - my2), VGHUST联合研究计划,祖文萃基金会(VGHUST 101 -七国集团(g7) - 5 - 3和VGHUST 102 -七国集团(g7) - 5 - 2), Cheng-Hsin总医院(101 f195cy05和102 f218c07),教育部,一流大学的目标计划,台湾。