文摘
酒精性肝病(ALD)的特点是提高肝脂质积累(脂肪变性)和炎症增加促炎细胞因子的表达。两种细胞因子,interleukin-1β(il - 1β)和地震,需要激活caspase-1通过nod样受体(NLR)家族的成员。这些NLRs形成一个激活的inflammasome病原体和信号通过当地发布的组织损伤或死亡。NLR家庭pyrin域包含3 (Nlrp3)和NLR家庭卡域包含蛋白4 (Nlrc4)研究了最低限度的角色“肾上腺脑白质退化症”的发展。用小鼠基因靶向删除Nlrp3 (Nlrp3−−/)和Nlrc4 (Nlrc4−−/),我们分析了应对慢性饮酒。我们发现Nlrp3−−/高的老鼠更严重的肝损伤血浆丙氨酸转氨酶(ALT)水平,增加激活的地震,和减少IL-1B激活。相比之下,Nlrc4−−/酒精诱发肝损伤小鼠类似C57BL / 6 j小鼠(B6)相比,但大大降低il - 1的激活β。这表明Nlrp3和Nlrc4 inflammasomes激活il - 1β并通过微分方式caspase-1地震。我们得出这样的结论:Nlrp3 inflammasome在饮酒导致的肝损伤过程中被保护。
1。介绍
酒精性肝病(ALD)代表各种临床和形态变化,包括脂肪变性、炎症和坏死(酒精性肝炎)进行性纤维化(酒精性肝硬变)[1]。大多数慢性酗酒者表现出脂肪变性的特点是大量的微小脂肪含量比microvesicular脂肪。此外,肝细胞气球样变性与混合小叶炎症明显(2,3]。ALD患者也有升高的血清浓度的丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST),这是肝损伤的证据。疾病的严重程度并不总是与酒精消费的数量。事实上,大多数长期酗酒者开发脂肪变性,但只有20 - 30%的患者发展为肝炎、和不到10%会发展为肝硬化4- - - - - -6]。
激活免疫系统的退化的发病机理中起着至关重要的作用。目前的当前假设ethanol-induced肝损伤提出乙醇导致肠道细菌泄漏产品。此外,慢性乙醇暴露导致的增加改变了空肠的微生物革兰氏阴性细菌。这些改变导致增加循环脂多糖(LPS)在酗酒者(革兰氏阴性细菌7]。
综合人类免疫反应一直被分为两个分支:先天和适应性(或获得)免疫力。先天免疫系统负责初始任务的识别和消除潜在危险的微生物。先天免疫系统的一个关键特性是能够区分微生物通过识别的守恒的微生物结构称为“病原体”相关的分子模式(pamp)有限合伙人、肽聚糖,鞭毛蛋白和微生物核酸(8]。
pamp的识别是通过膜结合toll样受体(通常)和胞质核苷酸寡聚化域受体(NLRs) [9]。哺乳动物NLR > 20个成员组成的家庭,包含一个c端富亮氨酸重复域,中央nucleotide-binding纳赫特域和n端结构域蛋白质间交互作用组成的半胱天冬酶激活和招聘域或pyrin域(10]。这些蛋白质促进multiprotein复合物的组装,称为inflammasomes,要求还存在炎症的激活。在传感pamp, NLR形式复杂的效应分子,procaspase-1有或没有一个适配器的贡献凋亡分子speck-like card包含蛋白质(ASC) [11- - - - - -13]。组装inflammasome复杂导致乳沟caspase-1 procaspase-1其活性形式。一旦激活,caspase-1促进il - 1的蛋白水解成熟和激活β、地震和caspase-7 IL-33以及失活(9)调解pyroptosis或细胞死亡14]。
Nlrp3 Nlrc4最NLR分子特征。Nlrp3控制caspase-1等一系列刺激反应的激活ATP,造孔毒素,或尿酸晶体(15- - - - - -17]。Nlrc4重要caspase-1激活的巨噬细胞感染等致病菌肠道沙门氏菌服务器沙门氏菌感染(沙门氏菌),嗜肺性军团菌(军团菌),铜绿假单胞菌(假单胞菌)[18- - - - - -23]。然而这些NLR分子的作用在ALD已经调查了最低限度的发展。肾上腺白质退化症患者(因为激活促炎细胞因子的增加24),我们假设删除inflammasome将防止开发制程。在本文中,我们分析了Nlrp3的作用,发展的Nlrc4 ALD使用Lieber-DeCarli ethanol-containing饮食模式B6,,老鼠。
2。实验程序
2.1。畜牧业
(艾米·g . Hise博士慷慨的礼物)(慷慨的礼物Gabriel博士Nunez)老鼠维持在凯斯西储大学。所有小鼠C57BL / 6 j (B6)背景。控制B6小鼠来自杰克逊实验室但一直在凯斯西储大学培育和维护/ 8代。老鼠在microisolator笼子12小时光:12小时黑暗周期。所有老鼠都在3 - 4周的年龄和提高断奶LabDiet 5010号autoclavable啮齿动物食物(LabDiet,里士满)随意直到研究启动。
2.2。乙醇喂养饮食研究和乙醇填喂法
8到10周前女性B6,,老鼠要么Lieber-DeCarli ethanol-containing饮食(EtOH-Fed)或pair-fed控制饮食(pair-fed) (Dyets Inc .,伯利恒,PA)。小鼠随机分为ethanol-fed pair-fed组然后适应控制液体饮食2天。ethanol-fed组被允许自由进入ethanol-containing饮食随着乙醇浓度:1%(卷/卷),2%为2天,然后4%的乙醇7 d,最后5%的乙醇为2周。慢性酒精的研究中,我们测量的体积ethanol-containing饮食消费日报和美联储控制老鼠pair-fed饮食isocalorically代替麦芽糖糊精乙醇在整个喂养时期。测量血清乙醇浓度,血从尾静脉2小时到喂养周期。结束的时候喂养试验,小鼠牺牲和血液通过心脏穿刺收集。等离子体是孤立使用Microtainer血浆分离器管(Becton Dickinson,富兰克林湖,新泽西)。管理对急性乙醇,乙醇间隙率是使用分光光度酶测定(25]。雌性老鼠服用口服填喂法乙醇的乙醇的乙醇(5克/公斤体重)中描述(25,26]。(50 uL)的血液标本从尾静脉(在30分钟后注射)和血清是孤立的。血清加入2毫升3%高氯酸和离心机在1000×10分钟。得到的上层清液被用来确定血清乙醇浓度使用乙醇脱氢酶酶测定(中描述25]。雌性老鼠被用于这项研究,因为他们更容易饮酒导致的肝损伤,显著提高患肝硬化的风险对于任何给定水平的酒精摄入量(27]。
2.3。肝甘油三酯,血浆丙氨酸转氨酶(ALT)的活动
对于测量肝脏甘油三酯,我们皂化100 - 200毫克的肝脏与同等体积重量的3 M KOH / 65%的乙醇被所罗门和Flatt [28]。我们测量甘油浓度对甘油标准使用商用甘油三酯甘油磷酸氧化酶(GPO)试剂组(黑科学,林肯公园,MI)如前所述在[29日]。我们测量丙氨酸转氨酶(ALT)使用商用酶测定工具包(Sigma-Aldrich、圣路易斯、钼)按照制造商的方向。
2.4。肝脏组织学和炎症的分数
编码Formalin-fixed组织石蜡包埋,切片,苏木精和伊红染色。组织学检查在一个由我们经验丰富的病理学家(盲评则刘,医学博士解剖病理学,克利夫兰诊所,克利夫兰,哦)对非酒精性脂肪肝组织学评分系统30.]。脂肪变性和炎症的分数范围从0到3 0在正常范围内,3是最严重的。
2.5。实时定量逆转录聚合酶链反应(实时存在)
总RNA从30毫克的肝脏被隔离的RNeasy迷你包(试剂盒,瓦伦西亚,CA)和合成总RNA的长串cDNA从500 ng使用六聚体随机引物和MMTV逆转录酶(应用生物系统公司,培育城市,CA)。实时存在分析使用圆心EvaGreen SYBR qPCR试剂(MidSci、圣路易斯、钼)Chromo4周期计(MJ研究/ Bio-Rad大力神,CA)中使用特定的引物序列(见补充表1补充在网上补充材料http://dx.doi.org/10.1155/2013/751374)。数据规范化使用比较Ct方法规范化18 s rRNA。随负载变化ΔΔCT值是通过减去控制从实验ΔCTΔCT值。ΔΔCT值转换为褶皱差异相比,控制通过提高2的ΔΔCT次方(31日- - - - - -33]。
2.6。肿瘤坏死因子-α,il - 1β,地震- ELISA
肿瘤坏死因子-的浓度α在肝脏被评估使用酶联免疫吸附试验(ELISA)绑定测定肝匀浆蛋白来源于pair-fed和乙醇治疗小鼠的饲养研究如前所述[34]。肿瘤坏死因子-αELISA进行根据制造商的指示(BioLegend,圣地亚哥,CA)。肿瘤坏死因子-的浓度α由肝脏重量用于蛋白质均化规范化。等离子体与pair-fed和ethanol-fed动物被用来衡量il - 1β(研发系统、明尼阿波利斯、MN)和地震(Affymetrix eBioscience,圣地亚哥,CA)的ELISA根据制造商的指示。
2.7。蛋白质分离和免疫印迹
蛋白质分离和免疫印迹分析从肝脏样本如前所述34]。膜是孵化与CYP2E1抗体(1:10000;菲茨杰拉德行业国际康科德,MA), P-STAT (1: 5000;Abcam、剑桥、MA)和总STAT3 (1: 5000;细胞信号技术,丹弗斯,马)。免疫反应性的蛋白被发现使用西方SuperSignal Pico化学发光底物工具包(热科学,罗克福德,IL)和免疫反应性的乐队的密度测量通过扫描测密度术(犹他州UN-SCAN-IT凝胶软件、奥瑞姆)。膜被剥夺了使用审查缓冲溶液(Amresco,梭伦,哦)和归一化加载不同使用热休克同源- 70 (HSC70) (1: 16000;圣克鲁斯生物技术、圣克鲁斯,CA)如前所述34]。
2.8。Caspase-3/7活动
Caspase-3/7活动在肝脏被评估使用ELISA绑定从蛋白质来自ethanol-fed小鼠肝匀浆测定喂养的完成研究。执行的分析是根据制造商的指示(Promega,麦迪逊,WI)和归一化了匀浆蛋白浓度。
2.9。羟脯氨酸测定
肝脏羟脯氨酸含量测定(如前所述)(35]。短暂、肝组织均质在磷酸缓冲盐,然后水解4小时0.5毫升的12 N盐酸在120°C。部分水解物(5 ul)与柠檬酸混合/醋酸缓冲(238毫米柠檬酸、1.2%冰醋酸,532毫米醋酸钠、氢氧化钠和85毫米)。Chloramine-T试剂(100 uL)添加(0.282 g Chloramine-T 16毫升/醋酸钠缓冲,2毫升正丙醇,和2毫升ddH2O)在室温下和孵化为30分钟。埃利希试剂(100 uL) (2.5 g p-dimethylaminobenzaldehyde添加到9.3毫升正丙醇、3.9毫升的70%高氯酸)添加和30分钟在65°C的环境。然后吸光度是测量在560 nm和使用商用羟脯氨酸标准曲线生成的股票(Sigma-Aldrich、圣路易斯、钼)。
2.10。统计分析
报告的值的含义平均数标准误差(SEM)。与学生的数据进行了分析以及使用GraphPad棱镜(GraphPad软件,圣地亚哥CA)。
3所示。结果
3.1。Nlrp酒精诱发肝损伤小鼠更容易
我们测试了女性B6的易感性,,后饮酒导致的肝损伤小鼠慢性管理Lieber-DeCarli ethanol-containing饮食。没有发现差异在日常食物摄取的菌株(表1)。确保各种菌株代谢乙醇以类似的方式,血清乙醇浓度测定2小时到喂养周期。小鼠减少等离子体乙醇浓度(0.5倍与B6 ethanol-containing饮食的老鼠相比),小鼠显示出类似的等离子B6小鼠相比,乙醇浓度增加(表1)。确认小鼠代谢乙醇以类似的方式到另一株,B6,,小鼠急性乙醇填喂法和血从尾静脉三十分钟后(补充数据,图1)。血液酒精含量测定,发现菌株之间的相似,因此,菌株代谢乙醇以类似的方式。
肝损伤为特征,增加肝甘油三酯和增加血浆ALT后乙醇消费相比pair-fed控制以及组织学分析脂肪变性和炎症(36]。ethanol-diet研究结束时,肝脏部分)染色(图进行了分析1)。所有菌株与乙醇喂养有脂滴的积累。肝甘油三酯的浓度测定,发现生化反应在ethanol-fed老鼠每增加(图的老鼠2(一个))。组织学分析从每个应变表明,在肝脂肪变性的部分脂肪变性的小鼠更大的非酒精性脂肪肝活动得分pair-fed动物然而有着相似的得分B6利DeCarli ethanol-containing饮食(图2 (c))。相比之下,鼠非酒精性脂肪肝活动最低得分后脂肪变性乙醇喂养相比,B6和老鼠。检查炎症,病理学家分析了染色肝部分得分他们使用非酒精性脂肪肝活动评分(30.]。B6和外观有轻微的炎症老鼠和老鼠更大的非酒精性脂肪肝活动得分炎症(图2 (c))。的老鼠,另一方面,非酒精性脂肪肝活动得分最高炎症(图2 (c))。进一步分析肝损伤血浆alt测定。肝损伤是明显的在所有的老鼠,因为他们表现出血浆ALT浓度增加。然而,老鼠数量增加最多的alt(3.0折)对其pair-fed控制和B6小鼠类似增加他们pair-fed控制(2.2倍和2.3倍,分别地。)(图2 (b))。这些数据表明,老鼠与更大的血浆ALT饮酒导致的肝损伤,增加老鼠有更多B6小鼠相比,饮酒后炎症。
(一)
(b)
(c)
因为乙醇消费诱发CYP2E1表达和活动(37),我们测量了感应CYP2E1的免疫印迹分析。所有菌株CYP2E1表达增加与乙醇喂养(6.2倍、7.5倍和3.7倍/ pair-fed B6和控制老鼠和老鼠,职责。)(图3)。所产生的氧化应激增加CYP2E1促进酒精肝病和肝纤维化38]。在老鼠身上,很难引起弗兰克只肝纤维化有4周的酒精喂养。确定删除Nlrp3或已知Nlrc4影响组件在肝纤维化的发展,我们测量αsma mRNA和羟脯氨酸表达式。的αsma mRNA在B6和诱导与酒精喂养老鼠。然而,在老鼠的基底表达αsma信使rna是更大的和乙醇喂养导致镇压αsma mRNA(图4)。使用羟脯氨酸测定肝脏羟脯氨酸含量测定。B6和老鼠有一个增加羟脯氨酸与乙醇喂养,而老鼠有钝化感应羟脯氨酸(图4 (b))。羟脯氨酸值测量图4以前的研究相比非常低的老鼠,弗兰克纤维化(~ 18毫克/ g蛋白羟脯氨酸治疗后用乙醇、四氯化碳)(39]。
(一)
(b)
已建议居民肝巨噬细胞的激活,枯氏细胞,有关键作用与酒精肝病相关的炎症(ALD)分泌TNF -α以及其他细胞因子(7,40]。除了趋化因子、单核细胞化学引诱物蛋白1 (MCP-1)也有助于饮酒导致的脂肪肝可能PPAR -差别通过对这些基因α和目标脂肪酸代谢基因(41]。因为肿瘤坏死因子-α和MCP-1影响“肾上腺脑白质退化症”的发展,我们测量肝肿瘤坏死因子-α和MCP-1 B6,,老鼠(图5)。B6小鼠肿瘤坏死因子-增加α与乙醇消费,但两者和没有增加TNF -α对酒精的反应。的B6小鼠钝化水平相似pair-fed老鼠B6小鼠高水平相似ethanol-fed老鼠。MCP-1表达式,B6小鼠诱导MCP-1乙醇喂养和水平老鼠有一个大幅增加的趋化因子与乙醇喂养(图5 (b))。然而,有水平类似B6小鼠ethanol-fed MCP-1 pair-fed和ethanol-fed老鼠。
(一)
(b)
il - 1β是一个有效的促炎细胞因子,ALD患者升高(24,42]。确定是否有赔偿删除NLR分子,我们测量Nlrp3, Nlrc4, Naip5 mRNA在B6和基因敲除小鼠。在和老鼠,另NLR inflammasome mRNA的成员是减少(图6)。Naip5的传感器组件Nlrc4 inflammasome专门识别和结合等致病细菌的鞭毛蛋白军团菌或沙门氏菌(43]。Naip5信使rna被发现在减少和老鼠。这表明Nlrp3表达式是不补偿的损失Nlrc4基因表达老鼠和Nlrc4表达式不是补偿损失Nlrp3基因表达老鼠。
确定的结果删除Nlrp3或Nlrc4生产促炎细胞因子il - 1的基因β的地震,我们测量了这些细胞因子的活性形式ELISA(图7)。il - 1β在美联储B6小鼠乙醇诱导,但它大大减少了吗老鼠。地震在美联储B6小鼠乙醇诱导,并大大增加老鼠,而地震了老鼠。这表明Nlrp3可能扮演更重要的角色在激活il - 1β,而Nlrc4可能发挥更重要作用的地震的激活。
Caspase-3激活凋亡细胞的内在和外在(死亡配体)通过(线粒体)途径44]。自小鼠血清ALT升高,我们测量caspase-3/7活动(图8)。老鼠增加了2倍caspase-3/7活动建议增加细胞凋亡在pair-fed和乙醇喂养。细胞死亡也可以减少肝脏再生的结果。对肝脏再生,枯氏细胞释放肿瘤坏死因子-α和il - 6然后激活STAT3磷酸化和启动肝细胞再生45]。我们测量在B6 STAT3磷酸化,,pair-fed和ethanol-fed老鼠(图9)。的老鼠没有增加的磷酸化STAT3与乙醇喂养降低了的磷酸化STAT3与B6小鼠相比,表明肝脏再生途径也可能在这些基因敲除小鼠受损。
4所示。讨论
以前的工作研究了Nlrp3和另一个成员的角色NLR inflammasome家庭,Nlrp6,在非酒精性脂肪肝病(NAFLD) [46]。使用各种老鼠缺乏Nlrp3基因,基因,ACC地震(),和caspase-1(半胱天冬酶-)inflammasome的角色了。老鼠被喂食蛋氨酸饮食胆碱不足(MCDD)诱导纳什。调查人员发现Nlrp6和Nlrp3 inflammasomes及其下游目标地震-调节MCDD-induced肝损伤的发展。因为inflammasomes也可以作为传感器和监管者的结肠微生物群(47),Mejia等人分析了肠道微生物群的影响发展的纳什使用这些转基因菌株。抗生素治疗相关的肠道微生物群与环丙沙星和甲硝哒唑废除与纳什的发展活动老鼠。除了公共住宅或前4周喂养小鼠与野生型老鼠MCDD饮食微生物群从一个压力转移到其他导致更严重的肝损伤在野生型小鼠相比,单独住野生型小鼠(46]。然而并不是所有NLR缺陷小鼠肝损伤在同一的方式开发。Henao-Mejia et al。46]也cohoused和小鼠与野生型老鼠,但这些菌株没有改变与MCDD肝脏疾病的严重程度。这表明Nlrp3的潜在作用和Nlrp6 inflammasomes改变肠道microbiotica可能反过来改变非酒精性诱导肝损伤的发展。
我们以前报道,发展的遗传贡献酒精性脂肪肝(灰)和非酒精性脂肪肝炎(纳什)是独一无二的48)和多因素疾病。在退化,有限合伙人来自肠道微生物区系一直得到广泛的研究作为一个关键炎症诱导物与酒精相关的条件。酒精刺激有限合伙人易位在肠道通过一系列机制,与肝脏疾病和酗酒者有显著升高循环有限合伙人(49]。在老鼠利DeCarli ethanol-containing饮食、饮酒导致的肝损伤与增加血浆内毒素(LPS)和肝脂质过氧化作用。治疗一个中和蛋白显著抑制内毒素,饮酒导致的海拔血浆内毒素肝脂质过氧化,抑制tnf生产(50]。这些研究表明肠道microbiotica的重要性和肠道通透性生产有限合伙人在等离子体乙醇消费。
在当前的研究中,我们分析的作用两个NLR inflammasomes, Nlrp3和Nlrc4“肾上腺脑白质退化症”的发展。最近的研究调查了il - 1信号至关重要的“肾上腺脑白质退化症”(51)使用半胱天冬酶-,或il - 1受体基因敲除小鼠()。下游信号损失导致酒精诱发肝脏炎症的衰减,脂肪变性,破坏51]。制程的地震在发展中的作用研究结合上下文中的乙醇和燃烧伤害的侮辱。在老鼠身上,合并后的侮辱导致免疫反应的抑制宿主抵抗力下降和增强对感染的易感性(52,53]。然而,Nlrp3的角色和Nlrc4 inflammasomes ALD的发展尚未完全阐明。
因为先前的研究表明,caspase-1介导il - 1的激活βALD所需,我们假设删除Nlrp3或Nlrc4将防止ALD基因。然而,小鼠类似饮酒导致的损伤与B6小鼠相比,B6小鼠相比有更严重的饮酒导致的肝损伤(图2 (b))。在老鼠,失去Nlrp3 inflammasome降低il - 1的活跃β但活跃的地震的数量显著增加。这一结果与先前发表的研究表明,不同的地震不是美联储B6小鼠乙醇诱导的(51]。我们的结果可能不同,因为B6小鼠使用在我们的研究中动物被饲养在一个殖民地凯斯西储大学八代,导致近交菌株来自杰克逊实验室的略有不同。另一种可能性是,Petrasek等人发起了乙醇喂养研究6-8-week-old雌性老鼠,当我们开始喂养研究10-12-week-old成年雌性老鼠。此外,Henao-Mejia et al。46)表明,Nlrp3 inflammasome但不是Nlrc4 inflammasome影响肠道微生物群进而调制与MCDD纳什的发展。这也可以是一种机制,通过这种机制与饮酒小鼠肝损伤增加,而老鼠也有类似的伤害B6小鼠在我们的研究中。老鼠可能增加泄漏的有限合伙人肠道可能由于改变了微生物群,会影响肝损伤的程度。还需要进一步的研究来完全理解的角色Nlrp3 inflammasome及其对肠道微生物群的影响与酒精喂食。
可能地震的增加有助于提高退化老鼠呢?Finotto等人分析了地震-转基因小鼠表达地震-张cd启动子的控制下(T细胞和B细胞的表达)54]。转基因小鼠肝细胞凋亡增加了自发激活相关的Fas死亡通路(54]。结合地震高亲和力IL-18R导致核转录因子κβ(NFκβ)激活通过骨髓分化主要响应88 (MyD88)和肿瘤坏死因子-α我和随后的磷酸化κβ通过我κβ激酶(IKK-1和IKK-2)。地震还引发NK细胞活性和FasL的表达自然杀伤细胞(NK) [55,56]。在我们的研究中,我们建议Nlrp3 il - 1的在生产中发挥着关键作用β和损失的Nlrp3 inflammasome增加肝细胞凋亡可能通过FasL介导机制。
的减少il - 1β也可能影响细胞的生存。之前的研究表明,积极的il - 1β但不是地震-乙醇喂养后诱导小鼠(51]。缺乏il - 1的吗β有助于增加“肾上腺脑白质退化症”老鼠呢?il - 1β被认为调解诱导的炎症行动促炎基因的表达(如il - 6)、招聘网站的免疫细胞损伤(肝脏)和调制浸润细胞免疫效应的行为(57]。促炎细胞因子,il - 1β,产生重要影响的表达促炎主要由激活胞内信号通路基因涉及NF -κβ和p38增殖蛋白激酶(MAPK) [58,59]。转录因子NF -κβ时不活跃与抑制蛋白质吗κβ。细胞因子激活,我κβ退化和NF -κβ把原子核(60]。两种NF -κB和p38 MAPK参与基因的表达调控的编码E-selectin,血管细胞粘附molecule-1 (VCAM-1)、细胞间粘附分子1 (ICAM-1)、IL - 6、IL - 8和环氧合酶(COX) 2 (61年- - - - - -63年]。当白介素受体结合,gp130是化学活性和同事Janus激酶(激酶)和木菠萝的磷酸化和gp130发生。这种受体激酶复杂然后新兵和磷酸化细胞质STAT3。一旦磷酸化STAT3形成二聚体,把核开始扮演重要角色的许多基因转录诱导急性期反应,促进肝细胞生存和肝再生(64年]。在目前的研究中我们发现钝化的磷酸化STAT3在Nlrp3乙醇反应−−/老鼠(图9)。除了caspase-3/7的数量急剧增加小鼠由于失去Nlrp3(图8)。因此,我们得出这样的结论:Nlrp3 inflammasome有助于激活JAK / STAT3通路,可以促进肝脏再生。但是还需要进一步的研究来完全理解的机制增加ethanol-induced肝损伤老鼠。
因为Nlrp3和Nlrc4 inflammasomes激活caspase-1并产生il - 1β地震,这些途径可以nonredundant角色吗?如上所述,每个人都有自己的催化剂和活化剂Nlrc4谱较窄,主要是鞭毛蛋白。在一项研究中,被感染的骨髓中巨噬细胞伯克举办(革兰氏阴性细菌),激活的差异inflammasomes和活跃的il - 1β和地震被发现(65年]。使用B6,,,,老鼠,Ceballos-Olvera等人发现Nlrc4有助于il - 1β生产在感染的早期阶段。这是重要的早期感应pyroptosis,将限制细菌生长。Nlrp3不规范pyroptosis和主要控制il - 1β分泌。最重要的是他们发现il - 1β和地震-参加高水平的肺感染的老鼠b .举办鼻内。相比之下,和小鼠il - 1β在感染后产生(65年]。这个特征决定了什么?在这个研究中,作者建议Nlrc4可以形成两种截然不同的Nlrc4 inflammasomes,一个Nlrc4 inflammasome包含ASC和调节il - 1β生产和其他缺乏ASC这将激活caspase-1并启动pyroptosis [65年,66年]。最后NLR的家人,简要的家庭,已经被证明确定特异性的Nlrc4活化剂(67年]。例如,激活Nlrc4 inflammasome细菌PrgJ从沙门氏菌沙门氏菌感染需要Naip2,激活Nlrc4的鞭毛蛋白L。瞭解需要Naip5 [67年]。在目前的研究中,我们发现小鼠减少形成活跃的il - 1β增加活跃的地震的形成。在老鼠,相反的被发现。小鼠il - 1更活跃的地震但不活跃β。这些数据支持了假设每个inflammasome il - 1可以优先生产活跃β或地震增加监管发展的ALD的复杂性。
5。结论
总之,我们目前的证据表明Nlrp3 inflammasome在饮酒导致的肝损伤过程中被保护。在这项研究中提出的数据分析整个肝匀浆,但肝脏是由几个细胞(肝细胞、枯氏细胞、NK细胞、内皮细胞、肝星状细胞)。因为先前的研究显示Nlrp3的重要性和ASC肝星状细胞在肝纤维化的发展(68年),未来的研究将确定的角色Nlrp3 inflammasome特定细胞类型的“肾上腺脑白质退化症”的发展。
利益冲突
作者宣称没有利益冲突有关的出版。
作者的贡献
David a . DeSantis和Chih-wei Ko了同样的工作。
确认
这项工作是由国家酒精滥用与酒精中毒研究所(NIAA)授予P20 AA017837 (LEN和CMC)和NIH代谢训练格兰特T32——DK007319(爸爸)。