遗传和食源性肥胖增加肠道肿瘤发生的双突变体小鼠模型多发性肠瘤X肥胖通过干扰葡萄糖监管和炎症

文摘

我们学习了如何自发或carcinogen-induced肠道肿瘤发生是受遗传或在C57BL / 6 j -食源性肥胖X C57BL / 6 j -老鼠。肥胖诱导的肥胖(ob)的突变地蜡激素——瘦素基因编码,或45%的脂肪饮食。肥胖的影响研究在自发的肠道肿瘤引起的多肠道肿瘤(最小值)的突变腺瘤息肉病杆菌(Apc)基因和肿瘤引起的饮食致癌2-amino-1-methyl-6-phenylimidazo (4, 5 -b]吡啶(PhIP)。F1 ob / ob(纯合突变)小鼠体重(bw)和自发的数量增加和PhIP-induced小肠肿瘤(在老鼠),和ob / wt(杂合的突变)和wt / wt老鼠(野生型纯合子)。45%的脂肪饮食加剧了bw和自发肿瘤数量和10%的脂肪,而不是PhIP-induced肿瘤。除了bw, ob / wt和wt / wt没有显著不同。hyperglucosemia引起的肥胖和胰岛素血症ob / ob老鼠。45%的脂肪饮食进一步增加葡萄糖,但不是胰岛素。炎症被认为是肿瘤坏死因子增加α水平ob / ob老鼠。因此,结果表明干扰葡萄糖调节和炎症机制参与了肥胖和肠道肿瘤发生之间的关系。Ob / Ob小鼠短寿命比Ob / wt和wt / wt老鼠。

1。介绍

肥胖的定义是过量积累脂肪组织。肥胖的速度增加了一倍多在过去的20年里,在大多数经合组织国家(1]。超过一半的成年人超重(体重指数(BMI) 25 - 29.9公斤/ m²)或肥胖(体重指数≥30公斤/米²),约有18%的男女都有肥胖。儿童超重和肥胖的几率也增加;平均报道超重率(包括肥胖)从2001 - 2002年的13%增加到2009年的15%,2010年15岁(以年龄和性别为BMI)截止点(1]。

平行增加超重/肥胖和许多类型的癌症已经观察到世界上大多数国家在过去两到三年。现在癌症死亡的第二大原因在经合组织国家(1]。在挪威,结肠癌是第二个最常见的癌症妇女乳腺癌之后,第三个最常见癌症对于男人来说,前列腺癌和肺癌后(2]。在本文中所描述的实验中,我们检查了肥胖可能如何影响肠道肿瘤发生。

肥胖改变整个生物体的生理机能,因此动物模型被要求研究增加了肥胖的影响。此外,模型集成生活方式和遗传因素在一个模型系统生理上提供一个完整的系统的复杂关系的研究。在目前的工作中,我们研究了肥胖和肠道肿瘤发生之间的关系在double-mutant穿越鼠标模型获得的后代F1肠道肿瘤发生和肥胖的小鼠模型。

完善的模型肠道肿瘤发生、C57BL / 6 j -Apc^{分钟/ +}老鼠,是生殖系无义突变杂合的多肠道肿瘤(最小值)的肿瘤抑制基因腺瘤息肉病杆菌(Apc)导致截断非功能性APC蛋白,因此发展许多自发肠道肿瘤(3,4]。Apc是一个关键的组件在Wingless-related集成网站(Wnt)信号通路5,6]。的最小值鼠标是一个模型遗传疾病家族性腺瘤息肉病(FAP),以及零星的结直肠癌在人类7,8),和发展多个腺瘤在小肠和结肠得多的学位。

的最小值鼠标与C57BL / 6 j -交叉地蜡^{ob / +}鼠标,杂合的肥胖(ob)的突变瘦素(地蜡)基因,它变得肥胖的纯合子突变的时候(ob / ob功能),因此缺乏瘦素激素(9- - - - - -11]。除了肥胖,ob /据报道,ob老鼠表现出食欲过盛,高血糖的瞬态糖尿病综合症,葡萄糖耐受不良,升高血浆胰岛素,subfertility,受损的伤口愈合,并增加从垂体和肾上腺激素的生产,显然他们是觉的和体温过低的12]。瘦素调节食物摄入量和能量消耗,并对免疫功能的影响,包括炎症、繁殖[11,13]。

肥胖是热量摄入与能量消耗之间的失衡造成的,这是由遗传和环境因素的影响。在这项工作中,我们有两个模型用于肥胖。通过研究肥胖诱导的基因ob老鼠,我们可以研究肥胖对肠道肿瘤发生的影响独立于饮食。此外,我们研究了环境因素诱发肥胖,也就是说,食源性肥胖(戴奥),通过给F1小鼠45%的脂肪饮食或饮食控制10%的脂肪作为成年人(从断奶到终止)。

除了影响自发肠道肿瘤引起的遗传变异Apc基因的分钟/ +老鼠,肥胖也检查肿瘤诱导的影响由环境因素(饮食)的肉和鱼,烹调过程中形成的诱变、基因毒性和致癌的杂环胺2-amino-1-methyl-6-phenylimidazo (4, 5 -b]吡啶(PhIP) (14]。以前,我们报道,PhIP增加肠道肿瘤发生在成人C57BL / 6 j -分钟/ +老鼠(15),分钟/ +老鼠更容易PhIP如果暴露新生地(16,17)而不是年轻人15,17]。

在这项工作中,我们研究了肥胖本身作为一个终点,和作为一个因素影响肠道肿瘤发生。肥胖是由遗传基因造成的ob突变或由45%脂肪的饮食环境。我们检查是否genetically-or食源性肥胖增加自发或carcinogen-induced肠道肿瘤发生的最小值Xob老鼠。此外,我们研究了肥胖和肠道肿瘤发生之间的关系的两个假设:干扰血糖调节和增加炎症。此外,我们已经检查了杂合的或纯合的影响ob突变小鼠有或没有突变的长期生存Apc基因。

2。材料和方法

2.1。老鼠

的最小值(多肠道肿瘤)血统繁殖在挪威公共卫生研究所,奥斯陆,挪威,通过交配C57BL / 6 j -Apc^{+ / +}(野生型B6J)女性与C57BL / 6 jApc^{分钟/ +}002020 / J(股票)男性从杰克逊实验室购买(美国我巴尔港)。尽量减少遗传漂变远离杰克逊实验室的殖民地,男女都在我们研究所的种畜定期更换。老鼠的肥胖(ob)的突变瘦素(地蜡)基因,B6.V -地蜡^{ob / +}/ J(000632股),也从杰克逊实验室购买。

2.2。实验小组

总共48个实验组,每组包含在这个实验:6基因型(Apc^{+ / +}X ,Apc^{+ / +}X ,Apc^{+ / +}X地蜡^{ob / ob},Apc^{分钟/ +}X,Apc^{分钟/ +}X ,或Apc^{分钟/ +}X地蜡^{ob / ob})×2性别(女性或男性)×2治疗饮食(0.9%氯化钠或PhIP)×2(脂肪10%或45%的脂肪饮食)。纯合突变体Apc^{分钟/分钟}老鼠死在胚胎阶段(18),而纯合子地蜡^{ob / ob}(ob^−−/)老鼠是可行的9,11]。的最小值突变是通过男性传播,以避免由此产生的肠道腺瘤和贫血可能干扰怀孕女性(3]。小鼠与瘦素缺乏(基因诱导肥胖),也就是说,地蜡^{ob / ob}老鼠,被用来研究肥胖的影响分开饮食的影响。6个基因型之间的组合获得从十字架最小值老鼠和ob老鼠,通过两代人。首先,Apc^{+ / +}X ob^{+ /−}女性和Apc^{分钟/ +}Xob^{+ / +}男性是交叉。然后老鼠实验中组由跨越的Apc^{+ / +}Xob^{+ /−}女性和Apc^{分钟/ +}X ob^{+ /−}男性。将野生型等位基因的(正常,不变异)ob从野生型等位基因的基因Apc基因,贯穿本文的野生型等位基因ob基因是指定“wt”,而野生型等位基因Apc是指定的“+。“三个ob获得的基因型是wt / wt(野生型纯合子),ob / wt(杂合的突变)和ob / ob(纯合突变),和两个Apc获得的基因型是+ / +(野生型纯合子)和最小/ +(杂合的变异)。

繁殖的实验老鼠一直持续到大约11每实验组小鼠获得(与这个模型基于动力分析和经验);然而,为实现这一较高的一些组织最终数字。老鼠的数量()治疗组在文本和在图和表传说,为每一个终点。

2.3。基因分型、住房和终止的老鼠

所有最小值X obF1的后代的基因分型最小值和ob状态由allele-specific聚合酶链反应(PCR)分析。DNA提取~ 2毫米²耳朵穿刺获得的样本个体识别的小鼠断奶,不停地在冰上。样本悬浮在60μL TE-buffer与十二烷基硫酸钠(SDS)(10毫米三pH值7.4,0.1毫米EDTA pH值8.0,0.05% SDS)和10分钟在95°C的环境。然后6整除μ10毫克/毫升蛋白酶K L (Sigma-Aldrich Corp .,圣路易斯,密苏里州,美国)被添加和样本孵化56°C过夜。最后,样本在95°C的环境为10分钟灭活酶和储存在−20°C到PCR扩增。基因分型的PCR反应Apc状态进行了如前所述[19]。为obPCR、PCR反应进行的埃普多夫Mastercycler梯度(股份公司、汉堡、德国)如下。基因组DNA (5μL(1: 100稀释分离DNA)放大10μL反应体积/样品,含有0.9最终引物的浓度μ米以下引物:oIMR1151 (5′tgt CCA AGA TGG ACC AGA CTC-3′)和oIMR1152(5′法GGT CTG gg CAG GGA GCA-3′),购自Eurogentec s.a.(血清、比利时),0.2μM dCTP, dGTP、dTTP dATP (Promega Corp .,麦迪逊,WI,美国),1 x DyNazyme II热开始反应缓冲区(15毫米Tris-HCl (pH值8.2),30毫米氯化钾,2.5毫米毫克^{2 +}5毫米(NH₄)所以₄和0.02%的牛血清白蛋白(BSA))和0.008 U /μL DyNazyme II热态启动DNA聚合酶(从热费希尔科学公司,沃尔瑟姆,妈,美国)。放大条件是10分钟前在94°C 35周期在94°C,持续15秒,30秒64°C和72°C 23秒,紧随其后的是最后一个在72°C扩展为5分钟。PCR扩增后,10μL PCR产品和5μL限制性内切酶混合,在最后15的浓度μ缓冲D, L卷包含0.56 x 0.06毫克/毫升BSA和0.23 U Dde我酶(Promega corp .),孵化12 h。PCR产品可视化通过2.2%的琼脂糖凝胶电泳(Lonza FlashGel系统,Lonza,巴塞尔瑞士)。野生型小鼠(wt / wt)被确定为155个基点PCR产物,杂合的变异老鼠(ob / wt) 155个基点,100个基点和55 bp PCR产品,和纯合突变小鼠(ob / ob)为100个基点,55 bp PCR产物。试剂从Sigma-Aldrich购买公司(圣路易斯,密苏里州,美国),丙烯酰胺(瑞士buch SG)和Promega集团(美国麦迪逊,WI),如果没有规定。

相同性别的同胞被安置到5每笼老鼠Nestpak PET塑料一次性笼子100%阿斯彭4港元床上用品(Datesand有限公司,曼彻斯特,英国)气流印度河流域文明架(Innovive Inc .)、圣地亚哥、钙、美国)。房间里有12 h光/暗周期和控制湿度(%)和温度(20 - 24°C)。水和饲料随意所有的老鼠。

实验的小鼠组终止在11周的时候,出现明显的贫血引起的肿瘤。血液通过心脏穿刺取样麻醉ZRF鸡尾酒(含3.3毫克zolazepam, 3.3毫克tiletamine, 0.5毫克甲苯噻嗪和2.6μ克芬太尼每毫升0.9%氯化钠)为等离子体从Sarstedt Microvette锂肝素管(滑雪、挪威)细胞因子和激素分析。此后,老鼠被颈椎脱位牺牲。

2.4。道德声明

这项研究是严格按照法律法规进行动物实验在挪威。批准的协议是挪威动物研究权威(奈良)(许可证编号1357和4856)。心脏穿刺和颈椎错位ZRF鸡尾酒麻醉下进行,在死后器官解剖。是尽一切努力来减少痛苦。

2.5。饮食致癌物质

2-Amino-1-methyl-6-phenylimidazo (4、5b]吡啶盐酸盐(PhIP-HCl) (CAS no。105650-23-5),猫。不。163 - 15951,纯度> 99%的购买和光化学物质从kouichi GmbH(诺伊斯,德国)。PhIP-HCl溶解在蒸馏水,pH值调整到4.0左右。

2.6。饲养和实验饮食

繁殖配对,以及他们的后代在断奶之前三周的年龄、育种饮食的情况下,2018年全球18%的蛋白质Teklad啮齿动物的饮食从哈伦产业有限公司(美国印第安纳波利斯,)。老鼠繁殖获得繁殖对,不包括在实验小组,有一个标准的维护饮食、SDS 1 (E)从SDS特殊饮食服务(英国埃塞克斯),在断奶之后。

除了genetically-induced肥胖引起的ob突变,我们还研究了食源性肥胖(戴奥)的影响,更在大多数人类肥胖相关条件。大约每隔一窝老鼠实验中组有45%的脂肪饮食或10%的脂肪从断奶饮食,直到终止在11周。为了确保效果观察是由于高脂肪的碳水化合物,而不是减少蛋白质,维生素或矿物质,饮食选择添加脂肪%阿特沃特燃料能源(AFE)和碳水化合物等热量的交换。AFE 45%使用的高脂肪饮食脂肪饮食,代码824053(千卡千卡45%来自脂肪,20%的蛋白质,35%来自碳水化合物,安全4.54千卡/ g),与正常脂肪10% AFE脂肪饮食,代码824050(千卡千卡10%来自脂肪,20%的蛋白质,70%来自碳水化合物,安全3.68千卡/ g),从SDS特殊饮食服务。

2.7。饲料和水的摄入量

自45%的脂肪饮食容易崩溃是不可能可靠地确定采食量,体重提要的笼子里。相反,饲料和水的摄入量是记录在一个选择从每个治疗组小鼠在24 h 9 - 11岁周代谢笼,后习惯了笼子的前一天。尿量测量,尿液和粪便收集供日后使用没有报告。

2.8。肥胖确定曲线下的面积(AUC),终端体重和身体质量指数(BMI)

从断奶体重记录每周3周的年龄在11周终止的年龄Apc^{分钟/ +}和Apc^{+ / +}老鼠。在终止,nasoanal长度记录的计算身体质量指数(BMI),定义为体重除以nasoanal长度的平方(g / cm²)。因为不同的肥胖指标可能会或多或少适合评价与终点如肠道肿瘤发生的关系,我们评估体重数据在三种不同的方式。体重数据进行分析,曲线下的面积(AUC)体重记录从3 - 11周的年龄,计算中使用宏SigmaPlot 12.3 (Systat软件公司,圣何塞、钙、美国),集使用梯形法则曲线下的面积。此外,体重数据进行评估终端体重和终端BMI在11周(数据没有显示)。

2.9。诱导和得分的肠道肿瘤

F1的幼崽最小值X ob十字架都被赋予了一项单一的皮下注射(南)25毫克/公斤bw PhIP在出生后3 - 6天,肥胖对carcinogen-induced肿瘤的影响的评估。单独的窝有0.9%的南卡罗莱纳州注射生理盐水作为得分的车辆控制的自发肿瘤。

大肠和小肠单独取出,冲洗在冰冷的磷酸盐(PBS)和沿纵轴割开。肠道组织然后传播之间的平张滤纸和固定至少48小时前10%中性缓冲福尔马林与0.2%的亚甲蓝染色(Sigma-Aldrich挪威)。数量、直径和定位在小肠和结肠肿瘤被透照进逆光学显微镜的放大×20。连续得分的顺序完成鼠标数字没有意识到他们的治疗。直径肿瘤球目镜格内。沿着肠道肿瘤位置注册在cm的胃。对于每个实验组,肿瘤的发病率(一些小鼠的肿瘤/组的老鼠数量),肿瘤数量(平均数量的肿瘤/鼠标±SD)和肿瘤直径毫米(意思是所有肿瘤小鼠组±SD)计算,分别对小肠和结肠。此外,肿瘤的大小说明了肿瘤大小类的分布曲线(肿瘤直径0.25毫米的间隔)计算平均每个肿瘤大小类的肿瘤数量为每个治疗组。在C57BL / 6 j应变,小肠是肿瘤发生的主要靶器官造成的最小值突变以及PhIP,很少在结肠肿瘤被发现。因此,结肠肿瘤数据没有显示。

2.10。葡萄糖耐量试验(GTT)和Nonfasted血糖测量

葡萄糖耐量试验(GTT)进行选择的各治疗组小鼠年龄6周。这些老鼠被禁食6小时(8 - 9点。下午2 - 3点),并给出了一个腹腔内(i.p)注入每公斤体重2 g D -(+)葡萄糖(Sigma-Aldrich挪威,奥斯陆,挪威)。血液中葡萄糖的隐静脉穿刺获得的测量与一个自由式自由Lite(雅培糖尿病护理Inc .)、阿拉米达、钙、美国)5分钟和15之前,30日,葡萄糖注射液后60 - 120分钟。糖耐量曲线下的面积(AUC)计算从−5到120分钟,SigmaPlot 12.3中使用宏。阅读> 27.8更易/ L时,显示高glucometer,这个值是用于数据分析。这是发现5 2 48%的样品在一个或多个时间点wt / wt, ob / wt和ob / ob小鼠,分别。没有样品葡萄糖读数低于1.1更易glucometer / L和显示低。Nonfasted测量血糖水平也在所有的老鼠在6岁和11周。

2.11。尿葡萄糖测量

与提高血糖浓度情况下,例如,在糖尿病,血糖可能发现尿液中当其在等离子体浓度超过肾阈值。在一些老鼠表现出血糖值高,尿葡萄糖也是衡量尿液试纸条西门子Multistix 8 SG从西门子购买医疗诊断公司。(美国纽约塔)。

2.12。胰岛素和胰岛素样生长因子(igf - 1)分析

胰岛素和胰岛素样生长因子1 (igf - 1)测定在等离子体从小鼠获得牺牲。ELISA试剂盒从MyBioSource Inc .(美国圣地亚哥,CA)是根据制造商的指示使用。光密度(OD)测定在450 nm BioTek标仪(美国Winooski BioTek仪器公司,VT)。每个板上浓度标准曲线计算。所有样本稀释1:5在PBS, pH值7.1。检测极限为0.1 ng / mL胰岛素和igf - 1。

2.13。细胞因子分析

的促炎细胞因子interleukin-1β(il - 1β)、白细胞介素- 6 (il - 6)和肿瘤坏死因子α(肿瘤坏死因子α)测定在等离子体从小鼠获得牺牲。Bead-based免疫测定BD仪珠阵列(CBA),从BD生物科学,CA,圣何塞美国使用根据制造商的指示。数据被收集在BD LSRII流式细胞分析仪(BD生物科学)和分析利用FCAP阵列软件3.0 (BD生物科学)。所有样本稀释1:2测定稀释剂包含在CBA工具包。检测的极限是1.9、1.4和2.8 pg / mL, il - 1β、il - 6和TNFα,分别。

2.14。长期生存的ob老鼠

的影响ob基因型对寿命的检查治疗组Apc^{分钟/ +}和Apc^{+ / +}老鼠,所有三个ob子组,ob / ob, ob / wt和wt / wt,两性。老鼠一直定期观察和安乐死下颈椎脱位时一般健康或生活质量恶化,根据临床观察,身体状况和症状,如体重减轻、脱水或弯腰驼背的姿势。每个基因型的老鼠生存(天)被描述为减少%幸存的老鼠相比,老鼠的数量出现在实验的开始。

2.15。统计分析

每个端点的数据(如体重、血糖水平和肿瘤数字)是在几个层面上评估;首先在老鼠,然后进一步在几层;的年龄,Apc基因型,0.9%氯化钠或PhIP治疗、性别、ob基因型和%脂肪饮食。结果报告的最具体的组合统计上显著差异被发现的这些参数。由于这种复杂性,统计比较不能以一种有意义的方式显示在数据或表1,给数值数据。然而,值的比较给出了文本。所有数据都表示为平均数±标准差,除了细胞因子和胰岛素数据值和单值显示,并使用SigmaPlot 12.3进行分析。学生的以及或Mann-Whitney为非参数秩和检验数据用于测试的生存数据。结肠肿瘤的发病率被费舍尔准确分析测试(双尾概率)。简单和多元线性回归是用来检查体重之间的关系、葡萄糖、胰岛素和细胞因子水平和数量或小肠肿瘤直径。对于所有其他数据,方差分析(方差分析)是使用一个适当的多重比较的过程。当测试单个因素的影响,与Holm-Sidak单向方差分析测试多个比较用于参数数据或克鲁斯卡尔-沃利斯在与方差分析邓恩的多重比较的测试用于非参数数据。当测试两个或三个因素的影响在一起由两位或三方方差分析对数据进行分析,分别与Holm-Sidak测试多个比较。一个< 0.05被认为是具有统计学意义的价值。

3所示。结果

3.1。饲料和水的摄入量

饲料和水摄入代谢被记录在老鼠被关在笼子里24 h。当饲料和水摄入数据被评估为g饲料或毫升水/ g bw /天,没有明显的饲料或水摄入量之间的差异Apc^{分钟/ +}和Apc^{+ / +}老鼠,或0.9%氯化钠- PhIP-treated老鼠。因此,数据池Apc基因型和0.9%氯化钠或PhIP治疗,只对性别分层,ob基因型和%脂肪饮食(表1)。

投料/ g bw是女性比男性高,基于所有老鼠()和子组ob / wt ()和wt / wt ()小鼠,但不是在ob / ob老鼠。更高的饲料摄入量每g bw女性比男性还发现(在前一次实验中19]。

10%的脂肪饮食的老鼠饲料摄入量明显高于45%的脂肪饮食的老鼠()。这也是子组的ob / ob, ob / wt和wt / wt老鼠,暴露于0.9%氯化钠或PhIP (所有的比较)。

ob / ob小鼠显著降低采食量每g bw相比ob / wt和wt / wt小鼠(,对于比较),而ob / wt和wt / wt小鼠没有明显不同。女性另外,结果所有的老鼠一样,而在男性分别,这三个之间的区别ob基因型没有达到意义。每个鼠标采食量明显高于ob / ob老鼠比ob / wt和wt / wt老鼠,但由于极端ob / ob小鼠的体重,摄入低体重的基础上。

投料时相比,摄入千卡/克bw 24小时期间,结果基本上是一样的g / g bw(表1)。

进水/ g bw是女性比男性高,基于所有老鼠(),小鼠的子组中10%的脂肪饮食和45%的脂肪饮食(和、职责),和子群的ob / ob老鼠()(表1)。

10%的脂肪饮食的老鼠进水/ g bw要明显高于45%的脂肪饮食的老鼠()。

ob / ob小鼠明显高于进水/ g bw相比ob / wt和wt / wt小鼠(和、职责),而ob / wt和wt / wt老鼠没有显著不同。在个人层面上,我们发现,很多,但不是全部,ob / ob老鼠有一个更高的水摄入量以及尿量高于ob / wt和wt / wt老鼠,尤其是小鼠血糖高于正常水平。这种情况似乎转瞬即逝。

3.2。肥胖确定曲线下的面积(AUC),终端体重和身体质量指数(BMI)

体重治疗组之间的比较(-18)通过计算曲线下的面积(AUC)从断奶体重发展3终止在每周11(图1)。对于这个终点,从两个数据Apc^{分钟/ +}和Apc^{+ / +}进行了评估。的Apc^{分钟/ +}老鼠比的轻Apc^{+ / +}老鼠()。老鼠没有区别对待0.9%氯化钠或PhIP,基于子组中所有的老鼠和ob / ob, ob / wt、wt / wt老鼠。AUC是基于所有的雄性比雌性老鼠更高(),在子组ob / ob, ob / wt, wt / wt老鼠(,在所有三个比较),在所有三个ob基因型对45%的脂肪饮食和ob / wt和wt / wt脂肪饮食(10%,比较),但不是为ob / ob老鼠10%的脂肪饮食。

AUC显著高于ob / ob老鼠而ob / wt和基于所有老鼠(wt / wt老鼠)(图1在雌性老鼠),(在雄性老鼠)和()分别(值相似的两种基因型比较)。ob / AUC wt小鼠高于基于所有老鼠(wt / wt老鼠在雌性),(),但不是男性,另外,在老鼠身上脂肪饮食(10%),但不是45%的脂肪饮食的老鼠,老鼠,不接受0.9%氯化钠或PhIP,另行规定。

45%的脂肪饮食的老鼠比老鼠重10%的脂肪饮食基于所有老鼠()(图1),在这两个女性和男性ob / ob老鼠(为比较),和男性wt / wt老鼠()。

有明显的相互作用ob基因型和性别(),ob基因型和%脂肪饮食(),ob基因型和0.9%氯化钠或PhIP(治疗)。有显著性别之间的交互,%脂肪饮食和ob基因型(),性别X %脂肪饮食取决于交互ob基因型(所有三个ob基因型)。

除了评估体重AUC,终端体重和终端BMI(数据未显示)也计算进行比较。体重结果非常相同的数据进行评估是否AUC一周3 - 11(图1bw),终端或终端BMI在11周(数据未显示),除了之间没有不同BMI ob / wt和wt / wt老鼠。此外,BMI是ob / ob女性高于男性,而ob / ob男性都比女性体重的AUC和终端体重。

3.3。小肠肿瘤Apc^{分钟/ +}老鼠

所有Apc^{分钟/ +}老鼠(-17年每个实验组),不管ob基因型,%脂肪饮食,或0.9%氯化钠或PhIP治疗,小肠肿瘤(腺瘤),确认100%的发病率小肠肿瘤通常是发现的Apc^{分钟/ +}老鼠(15,16,19]。没有发现肿瘤Apc^{+ / +}老鼠。小肠肿瘤的数量没有明显女性和男性之间的不同Apc^{分钟/ +}老鼠(图2(一个)与2 (b))。没有明显的性别和PhIP治疗之间的相互作用,脂肪饮食或百分比ob基因型的终点。

小肠肿瘤的数量明显高于ob / ob老鼠ob / wt老鼠相比,基于所有老鼠(在PhIP-treated老鼠),(NaCl-treated老鼠)和0.9% (),另外,在ob / ob老鼠与wt / wt小鼠相比,老鼠(在PhIP-treated老鼠),(NaCl-treated老鼠)和0.9% (),分别(图2)。小肠肿瘤的数量没有明显不同的ob / wt老鼠与wt / wt老鼠相比,基于所有老鼠或PhIP-treated或0.9% NaCl-treated老鼠分别。有一个边缘显著的相互作用ob基因型和PhIP治疗()。

45%的脂肪饮食增加了小肠肿瘤的数量与10%的脂肪饮食相比,在所有的老鼠(在vehicle-treated老鼠),(),但不是在PhIP-treated老鼠。%之间有显著交互脂肪饮食和PhIP治疗()。

PhIP增加小肠肿瘤的数量与车辆0.9%生理盐水相比,在所有的老鼠(),在老鼠身上有10%的脂肪饮食()和45%的脂肪饮食()。PhIP的ob / ob小鼠小肠肿瘤(),在ob / wt老鼠()和wt / wt老鼠(),在这两个女性(为所有三个比较)和男性(所有三个比较)ob基因型(图2)。

小肠肿瘤直径0.15 - -4.30毫米。小肠肿瘤大小差异的统计评价实验组之间在以下描述(数据没有显示)。此外,与粒度分布曲线(图中对此进行了阐述3)。基于所有的老鼠,雄性老鼠的小肠肿瘤明显更大的与雌性老鼠(相比)。这是观察到在所有PhIP-exposed老鼠(),也PhIP-treated ob / ob老鼠(子组中),ob / wt老鼠()和wt / wt小鼠(),但不是0.9% NaCl-treated老鼠。雄性比雌性大肿瘤的子群ob / ob小鼠脂肪饮食(10%)和45%的脂肪饮食(),在ob / wt小鼠脂肪饮食(45%),并在wt / wt小鼠脂肪饮食(10%)。

小肠肿瘤的直径明显高于在所有ob / ob老鼠而ob / wt和wt / wt老鼠(为比较),但不是在ob / wt与wt / wt老鼠(图3数据未显示)。

饮食的影响在小肠肿瘤的大小评价说明了性别和粒度分布曲线的女性人物3(一个)和3 (b)。小肠肿瘤的直径没有明显不同小鼠10%的脂肪饮食和45%的脂肪饮食,基于所有老鼠。各子组观察一些统计上的显著差异,但这些差异并不一致的方向对%脂肪饮食和因此可能是由于机会。肿瘤没有显著大45%的脂肪饮食后0.9% NaCl-exposed或PhIP-exposed子组的老鼠。但这是在PhIP-exposed ob / wt和wt / wt老鼠(为比较),但不是PhIP-exposed ob / ob老鼠。女性和男性ob / ob小鼠肿瘤明显缩小后45%的脂肪饮食脂肪饮食(10%为比较),可能表明形成新肿瘤。

PhIP暴露的影响小肠肿瘤的大小是评估与粒度分布曲线说明了男女的男性人物3 (c)和3 (d)。基于所有的老鼠,小肠肿瘤明显增大PhIP曝光相比0.9%氯化钠曝光后()。这也是单独在女性和男性,老鼠和10%的脂肪饮食和45%的脂肪饮食分别(所有的比较)。PhIP曝光后小肠肿瘤明显更大比例为0.9%生理盐水暴露在所有ob / ob老鼠(),在ob / wt小鼠脂肪饮食(10%)和45%的脂肪饮食(在wt / wt老鼠)和45%的脂肪饮食()。在每个性别分开,这也是所有三个的子组ob基因型(所有的比较)。

有显著统计%脂肪饮食之间的相互作用,性别和ob基因型(),PhIP治疗、性别和ob基因型(),PhIP治疗,%脂肪饮食和ob基因型(PhIP治疗和性别之间),(PhIP之间),治疗和%脂肪饮食(),为达此目的。

3.4。结肠肿瘤Apc^{分钟/ +}老鼠

在C57BL / 6 j应变,小肠是肿瘤发生的主要靶器官造成的最小值PhIP突变以及。很少在结肠肿瘤被发现在这个实验中(图4),添加任何额外的洞察力。因此,发病率的数据,数量和规模的结肠肿瘤没有显示。

3.5。本地化的小肠和结肠肿瘤

在老鼠身上考虑到10%的脂肪饮食,大部分小肠肿瘤远端局部的三分之二,也就是说,在小肠中、远端部分,(图4),通常是观察到的Apc^{分钟/ +}鼠标(15,16,19]。ob / ob老鼠,有异常高的小肠肿瘤的近端部分,而在ob / wt和wt / wt老鼠在这一领域有更少的肿瘤。该分布的肿瘤在NaCl-treated 0.9%(图都被观察到4(一))和PhIP-treated(图4 (b))小鼠,在治疗肿瘤的数字都是这个地区高45%的脂肪饮食相比,10%的脂肪的饮食。为数不多的结肠肿瘤目前是本地化主要在中间远端结肠的一部分。

3.6。葡萄糖耐量试验(GTT)和Nonfasted血糖

基于GTT AUC值测试在6周的年龄,AUCApc^{分钟/ +}老鼠比Apc^{+ / +}老鼠,AUC PhIP-treated NaCl-treated老鼠老鼠高于0.9%;然而,这些比较没有达到统计学意义。的数据Apc^{分钟/ +}和Apc^{+ / +}老鼠因此汇集的曲线(图后血糖水平的挑战5)。有5 - 9各实验组小鼠,除了4一组;女性wt / wt小鼠暴露于PhIP和45%的脂肪饮食。GTT,没有显著差异(n)两性之间,但一般倾向基于所有老鼠在男性比女性更高层次,子组之间的不同与女性高于男性ob / ob小鼠(n),和雄性高于雌性ob / wt (老鼠)和wt / wt (n)。

ob / ob小鼠显示血糖下降慢得多比ob / wt和wt / wt老鼠(对于比较)(图5)。这也是在男女分开,在老鼠和45%的脂肪饮食(所有的比较)。ob / wt和wt / wt小鼠没有明显不同。在老鼠身上10%的脂肪饮食,只有区别ob / ob和wt / wt老鼠达到意义()。男性ob / AUC wt老鼠实际上高于ob / ob老鼠都在治疗后0.9%氯化钠和10%的脂肪饮食PhIP(数字5 (b)和5 (d))。

老鼠45%的脂肪饮食后血糖下降较慢的挑战比老鼠脂肪饮食(10%)(图5)。这也是观察组ob / ob老鼠,ob / wt老鼠和wt / wt老鼠(所有的比较)。引人注目的是,ob / ob老鼠45%的脂肪饮食特别是更高,长期血糖水平挑战后,表示严重血糖失调在两性(图5)。

有一个显著的性别和之间的相互作用ob基因型(%之间)和脂肪饮食和ob基因型(GTT)的数据。

根据世卫组织(20.),诊断标准对人类与葡萄糖耐量(IGT) 7.8 - -11.1更易/ L 2 h后口服GTT的75克葡萄糖,和水平高于11.1更易与L证实糖尿病。关于这些水平也有关老鼠,我们发现IGT在2 h时间点GTT的17%和40%,50%和80%,60%和58%,56%和83%,93%和92%,100%和82%,男性和女性的老鼠,在治疗组wt / wt, ob / wt和ob / ob鉴于10%的脂肪的饮食,和wt / wt, ob / wt和ob / ob鉴于45%的脂肪的饮食,分别。糖尿病患者血糖水平在2 h时间点GTT被发现在0%和0%,20%和20%,20%和50%,0%和33%,21%和67%,100%和82%,雌性和雄性老鼠在上面一样的治疗组中,分别。

Nonfasted血糖水平也是衡量所有的老鼠在6岁(-18)和11 (-17)周(数据未显示)。基于所有的老鼠,有较高的血糖水平测量6与11周(周子组之间的),但是这种差异不同。的Apc^{分钟/ +}小鼠血糖水平显著高于Apc^{+ / +}老鼠在11周(),但不是在6周,确认GTT的结果。所有数据的基础上,这是在PhIP-exposed老鼠最为明显(ob / ob小鼠),()。然而,分别在11周,这之间的区别Apc基因型也发现在wt / wt老鼠(),但不是在ob / wt老鼠。

PhIP-treated小鼠血糖水平显著高于0.9% NaCl-treated老鼠()在11周,但不是在星期6,确认GTT的结果。这也是观察小组Apc^{分钟/ +}老鼠(),在老鼠身上有10%的脂肪饮食()和ob / ob老鼠(),但不是子群Apc^{+ / +}老鼠,老鼠在45%的脂肪饮食或ob / wt和wt / wt老鼠。

性别之间的nonfasted血糖数据比较,ob基因型和饮食都在6和11周(数据未显示)在本质上是类似于GTT的数据测试。

3.7。尿葡萄糖

在一些老鼠表现出血糖值高,尿葡萄糖也用尿液试纸条。这些大多是ob / ob老鼠,和15的23 (65%)ob / ob小鼠检查尿液中葡萄糖,而8 23(35%)没有。在ob / ob小鼠尿液中葡萄糖,全都是女性和主要的Apc^{分钟/ +}基因型和45%的脂肪饮食和收到0.9%氯化钠或PhIP。然而,还两个检查女性Apc^{+ / +}老鼠与wt / wtob基因型45%的脂肪饮食暴露于0.9%氯化钠有尿液中葡萄糖。

3.8。胰岛素和igf - 1

胰岛素和igf - 1水平测量等离子体从小鼠获得终止。六个样品从每个实验组进行分析与方差分析,从每个性别三个。igf - 1水平的检测极限以下,0.1 ng / mL,而胰岛素的所有样本中,检测出数据6(一)和6 (b))。ob / ob小鼠胰岛素水平显著高于小鼠ob / wt或基于所有老鼠(wt / wt基因型为比较),以及两者的子组Apc基因型、两性、饮食组和0.9% NaCl-treated老鼠(值< 0.001 - -0.036)。ob / wt和wt / wt小鼠没有明显不同。PhIP-treated老鼠,只有对比ob / ob和wt / wt达到意义()。的Apc^{+ / +}小鼠胰岛素水平高于Apc^{分钟/ +}基于所有老鼠(老鼠)和男性单独的子群()。PhIP-treated小鼠胰岛素水平高于0.9% NaCl-treated老鼠基于所有老鼠()。男性(图6 (b))胰岛素水平高于女性(图6(一)基于所有的老鼠()),的子组Apc^{+ / +}老鼠(),obwt / wt老鼠()。没有明显差异在小鼠胰岛素水平在10%或45%的脂肪饮食。

3.9。细胞因子

的促炎细胞因子il - 1β、il - 6和TNFα测量等离子体从小鼠获得终止。六个样品从每个实验组进行分析与方差分析,从每个性别三个。il - 1的水平β检测极限以下,1.9 pg / mL,在所有样本,而78%和46%的样品检测il - 6和TNF水平了吗α,分别。发现没有明显的统计学差异的il - 6水平之间的任何治疗组(图6 (c))。关于肿瘤坏死因子α,ob / ob小鼠水平显著高于小鼠ob / wt或基于所有老鼠(wt / wt基因型都比较),而ob / wt和wt / wt(图没有显著不同6 (d))。肿瘤坏死因子的显著性差异α水平之间的小鼠ob / ob基因型和ob / wt或wt / wt基因型的小鼠给予45%的脂肪饮食(,老鼠都比较),但不是10%的脂肪饮食。我们发现在肿瘤坏死因子没有显著差异α水平之间的小鼠暴露于0.9%氯化钠或PhIP(图6 (d))。

3.10。体重之间的相关性和葡萄糖、胰岛素和细胞因子水平

之间的关联强度的三个不同的端点用于体重,另一端点检测在这个实验中被简单线性回归(表评估2)。确定系数()表达的%比可以解释因变量的变化由独立变量。的百分比变化nonfasted测量血糖水平在6周,可以解释为46 - 57%的体重数据,测量血糖水平在11周是33 - 43%,和胰岛素水平是32 - 48%,这取决于参数用于体重(所有的比较)。肿瘤坏死因子的变化的百分比α水平可以解释为AUC和终端体重约为20% (和、职责),而对于BMI这种关联并不显著。

3.11。体重之间的相关性、葡萄糖、胰岛素和细胞因子水平和肠道肿瘤发生

之间的关联强度的体重,另一端点检测在这个实验中,数量和直径的小肠肿瘤被简单线性回归(表评估3)。体重评估从星期3到11和nonfasted AUC血糖水平在星期6和11可以解释11%,12%,和18%的小肠肿瘤的数量的变化,分别是(所有三个变量)。当评估小肠肿瘤的所有三个体重参数和血糖6和11周与多元线性回归,协会为体重显著AUC,终端bw和血糖在11周(为所有三个变量),解释31%的变异肿瘤数量。

协会发现的简单线性回归与小肠肿瘤直径和肿瘤坏死因子α、体重评估从星期3到11和nonfasted AUC血糖水平在星期6和11周,分别为31%,14%,9%和8%,(,除了肿瘤坏死因子α与)(表3)。当评估小肠肿瘤直径与所有三个体重参数和血糖6和11周与多元线性回归,该协会是体重和AUC显著终端bw (这两个变量),解释21%的肿瘤直径的变化。

3.12。长期生存的ob老鼠

考试的影响ob基因型在寿命上,治疗组Apc^{分钟/ +}和Apc^{+ / +}老鼠的所有三个ob基因型和两性都进行定期观察直到安乐死(每个实验组-35)。生存的基因型的老鼠被描述为减少%幸存的老鼠相比,老鼠的数量目前的实验(图7)。这三个的寿命是很短Apc^{分钟/ +}Xob基因型,因为他们的肠道肿瘤引起贫血和其他并发症导致提前终止,相比Apc^{+ / +}Xob基因型(为所有三个比较)。三个之间没有明显差异ob基因型的Apc^{分钟/ +}或Apc^{+ / +}基因型与单向方差分析测试时。然而,当测试学生的以及,或者Mann-Whitney等级和正常测试失败,测试数据Apc^{+ / +}ob / ob老鼠的寿命都很短Apc^{+ / +}(wt / wt和ob / wt老鼠对于比较),而Apc^{+ / +}ob / wt和wt / wt小鼠没有明显不同。

4所示。讨论

在这个实验中,我们研究了肥胖本身作为一个终点,和作为一个因素影响肠道肿瘤发生。肥胖是基因引起的,也就是说,由继承ob突变的地蜡基因或环境因素造成的,45%的脂肪的饮食,因为在11周的年龄从断奶到终止。我们已经检查了肥胖的影响在两个自发肠道肿瘤由遗传引起的最小值突变的Apc基因,在肿瘤诱导诱变和致癌物杂环胺PhIP在煮熟的肉类和鱼类。

4.1。Genetically-Induced肥胖

在这个实验中,我们在三个不同的方法:评估肥胖体重开发利用断奶的AUC计算在3周终止在11周的时代,作为终端BMI体重和终端。这样做是由于肥胖的各种指标,如BMI、腰围和腰臀比,waist-height-ratio或者身体脂肪的百分比,已发现或多或少地与人类密切相关的研究终点,因此或多或少适合肥胖的指标。所有这三个研究体重参数给或多或少相同的实验小组(图之间的区别1数据未显示),除了之间没有不同BMI ob / wt和wt / wt老鼠。此外,BMI是ob / ob女性高于男性,而ob / ob男性都比女性体重的AUC和终端体重。

纯合子小鼠ob突变的地蜡激素——瘦素基因有缺陷。这些ob / ob老鼠明显重于ob / wt和wt / wt,独立于体重参数(图1数据未显示),反映出的必要性瘦素激素维持正常体重。但是,当我们测量24小时的采食量,ob / ob小鼠有显著降低摄入克饲料或千卡/克bw ob / wt和wt / wt老鼠(,对于比较),而ob / wt和wt / wt老鼠没有显著差异(表1)。已经提出ob / ob老鼠发胖,因为食欲过盛的12];然而,我们的数据表明,他们变得肥胖,尽管吃更少的克食物和更少的卡路里每克体重。据饲养员[信息12),ob / ob小鼠获得多余的重量和存款过多的脂肪,即使限制饮食足够瘦老鼠体重正常维护。然而,低水平的身体活动可能也会导致肥胖ob / ob老鼠,因为瘦素参与调节能量消耗(11,13),我们观察到ob / ob老鼠更少的体力活动比ob / wt和wt / wt老鼠。

4.2。食源性肥胖(戴奥)

除了genetically-induced肥胖引起的ob突变,我们还研究了食源性肥胖的影响(戴奥),作为一个环境因素,更在大多数人类肥胖相关条件。45%的脂肪饮食显著增加肥胖,体重评价这三个参数,与10%的脂肪控制饮食相比,基于所有的老鼠,在两种性别,而且在大多数子组的老鼠,除了体重并没有显著的AUC女性wt / wt的子群的老鼠和ob / wt老鼠两性(图1数据未显示)。

戴奥已经被定义为一个体重超过两个标准差以上的平均体重低脂饮食的老鼠(21]。ob / ob老鼠实验小组,除了女性Apc^{分钟/ +}X ob / ob小鼠给予45%的脂肪饮食和PhIP,履行严格的定义,基于终端bw(数据未显示)。为Apc^{分钟/ +}X ob / wt或wt / wt,两性,鉴于0.9%氯化钠或PhIP,意味着在所有八组体重略低于定义戴奥,而为Apc^{+ / +}X ob / wt或wt / wt,两性,鉴于0.9%氯化钠或PhIP, 5 8实验群体满足这个定义。除了女性和男性Apc^{+ / +}X ob / wt鉴于0.9%的氯化钠和45%的脂肪,和男性Apc^{+ / +}X wt / wt PhIP和45%的脂肪饮食,体重略低可以用这一事实来解释Apc^{分钟/ +}老鼠通常体重低于Apc^{+ / +}因为他们的自发肠道肿瘤,影响进一步与PhIP [19]。

老鼠似乎吃固定数量的卡路里。因此,老鼠摄入高脂肪的饮食会降低食品测量g饲料相比,老鼠低脂饮食。在这个实验中,45%的脂肪饮食的老鼠确实g饲料摄入量显著低于控制10%的脂肪饮食的老鼠体重的基础上(表1)。可以预见,45%脂肪的摄入量减少,直到达成相同的卡路里摄入量的10%的脂肪的饮食,但千卡/克每天的摄入量也显著降低小鼠的45%的脂肪饮食(表1)。因此,观察到的差异在小鼠体重10%的脂肪和45%的脂肪的饮食似乎也受饮食的类型(即影响。较高含量的脂肪、碳水化合物)和/或费用可能减少活动的老鼠重45%的脂肪饮食。体重增加是极端ob / ob老鼠鉴于45%的脂肪的饮食,和他们的身体活动水平明显降低。

ob / ob老鼠45%的脂肪饮食还显示瞬时糖尿病的症状,比如水摄入量和尿量增加,尿液中葡萄糖,也被饲养员12]。不过,没有迹象显示ob / ob小鼠的体温过低的比ob / wt和wt / wt老鼠,描述(12]。他们似乎能应付常规温度(20 - 24°C)。

微阵列数据的最近的一篇论文描述一个方法在C57BL / 6 j小鼠高脂戴奥发现调节基因与脂肪酸合成、炎症、信号转导和转运蛋白,能源体内平衡22]。衰减与甾醇生物合成有关的基因,胰岛素敏感性和氧化应激。过氧物酶体扩散者激活受体(PPAR)γ似乎是一个中央肥胖基因,与脂质代谢和炎症基因交互。

4.3。肠道肿瘤发生

在Apc^{分钟/ +}在C57BL / 6 j小鼠背景、小肠、结肠,而是是主要的靶器官,我们因此限制我们的讨论小肠肿瘤。在我们的研究中,纯合子突变ob基因,导致激素缺乏瘦素在ob / ob老鼠,自发的数量显著增加肠道肿瘤和PhIP-induced肿瘤的数量Apc^{分钟/ +}小鼠与正常小鼠相比(wt / wt)或降低(ob / wt)瘦素水平(图2)。肿瘤数量没有显著不同ob / wt和wt / wt老鼠。45%的脂肪饮食的数量进一步增加基于所有小鼠小肠肿瘤,0.9% NaCl-treated老鼠,即自发肿瘤。PhIP曝光后,45%的脂肪饮食没有增加肿瘤数据进一步基于所有的老鼠,和响应之间的不同基因型和性别(图2)。

女性和男性有相同数量的小肠肿瘤(图2),但是肿瘤在男性比女性明显增大,基于所有老鼠(),在许多的子组(数据未显示),表明更高的男性易感因素影响肿瘤的生长。流行病学证据表明风险更高的男性比女性大肠癌(23,24]。

ob / ob老鼠,有异常高的数字向近端小肠,小肠肿瘤的进一步增加45%的脂肪饮食(图4)。它可以推测这是由于是否增加胆汁酸的分泌进入小肠区造成的高脂肪饮食,一直认为导致肠癌(25]。

目前的数据显示肥胖之间的关系(图一致1数据未显示)和小肠肿瘤(图的数量2),都是增加ob / ob老鼠相比ob / wt和wt / wt老鼠,和自发肿瘤进一步增加45%的脂肪饮食。同样的模式也观察到nonfasted血糖水平(数据没有显示)。体重评估从星期3 - 11,AUC和血糖水平在星期6和11周,显示最严重的小肠肿瘤的11%,分别为12%和18% (所有值)(表3)。

在先前的研究中,发现了类似的结果在我们的研究跨越不同突变的老鼠Apc基因(Apc^{1638 n / +})C57BLKS -mLep^{db / db}老鼠,瘦素受体基因的突变(Ob-Rb)导致肥胖和糖尿病26]。在6个月的年龄,这些老鼠增加了数量的小肠肿瘤,肿瘤在胃里,盲肠和结肠,,没有见过的Apc^{1638 n / +}鼠标。在另一项研究中,交叉的后代一样的分钟/ +鼠标是我们使用(C57BL / 6 j -Apc^{分钟/ +})和C57BL /科-db / db鼠标,也有肥胖和糖尿病,总数量的增加和小肠腺瘤发病率的增加结肠肿瘤在15个月大的时候27]。然而,在这两项研究,戴奥并不包括在内。

对于人类来说,超重或肥胖与风险增加相关,视为增加发病率,死亡率和不良预后对于许多类型的癌症,包括结肠癌(28- - - - - -31日]。身体肥胖,腹部肥胖都被评估为说服增加结直肠癌的风险(32,33]。

4.4。三个主要假设为肥胖和肠道肿瘤发生之间的关系

似乎有许多信号分子和通路通过肥胖可能影响癌症,和相当多的相声和收敛之间的通路,最终以增加细胞增殖,细胞生长和血管生成,肿瘤或减少细胞凋亡,从而晋升或进展。至少三个主要的假说,相互相互关联,存在肥胖和结直肠癌之间的关系(28- - - - - -31日,34):(1)肥胖已被建议通过adipokine水平变化与结肠癌有关释放局部或全身的脂肪组织,如增加脂联素瘦素和/或减少,(2)干扰血糖调节观察血清葡萄糖水平增加,胰岛素和igf - 1和胰岛素抵抗导致核扩散和减少细胞凋亡增加,最终导致癌症,(3)或肥胖是一种慢性低度炎症状态的脂肪组织释放大量的促炎细胞因子,如肿瘤坏死因子α、il - 6和il - 1β,影响癌症。此外,类固醇激素,如雌激素和雄激素可能涉及,但他们在结肠癌作用是有争议的。

关于第一个假设adipokine水平变化的肥胖和结肠癌之间的联系,我们调查的影响瘦素通过使用leptin-deficient老鼠。小肠肿瘤的直径明显高于在所有ob / ob老鼠而ob / wt和wt / wt老鼠(对于比较)(图3数据未显示);因此,肥胖增加了肿瘤大小尽管缺乏瘦素刺激,ob / ob老鼠。而不是ob / ob鼠标,在人类的特点是不常见的肥胖瘦素的缺乏,而是由血浆瘦素水平升高与脂肪量和体重指数,代表一种瘦素抵抗(35,36]。

然而,致病的作用增加了瘦素在结肠癌症是有争议和矛盾的数据。瘦素及其受体的失调可能导致结肠癌通过影响肿瘤细胞的生长和增殖信号通路的激活,包括JAK / STAT pi3激酶/ AKT,和/或MAP激酶(37]。瘦素刺激人类结肠癌细胞的增殖在体外在大鼠结肠(38)和提升人类结肠癌细胞系的能动性和侵入(39),但其余或抑制效应对经济增长的人类癌症细胞从各种其他器官在体外(40]。瘦素减少异常的墓穴的发展焦点(ACF)在大鼠结肠粘膜癌前病变,由致癌物诱导azoxymethane(急性中耳炎)[41),发现瘦素不的催化剂开发的ACF冒号ob / ob和db / db老鼠42]。其他人发现,瘦素作为结直肠肿瘤的生长因子与小鼠的急性中耳炎(启动后43]。

在我们的实验中,膳食脂肪不影响肿瘤的生长,因为小肠肿瘤的直径没有明显提高小鼠45%的脂肪饮食与10%的脂肪饮食相比,基于所有老鼠。一些统计上显著的差异观察在不同的子组,但差异不一致的方向对%脂肪饮食。然而,女性和男性都ob / ob小鼠肿瘤明显缩小后45%的脂肪饮食脂肪饮食(10%为比较),可能表明形成新的肿瘤(数据3(一个)和3 (b)数据未显示)。它可以推测lipotoxic游离脂肪酸45%的脂肪(28,44,45),和/或随后的肥胖(46),引起氧化应激和活性氧的积累(ROS),这可能会导致DNA损伤和肠道肿瘤起始。基因参与脂类代谢,磷脂酶A2,磷脂酶Cɛ和磷脂酶D,调节肠道肿瘤数字显示Wnt信号通路相互作用[47- - - - - -49]。然而,争议存在关于饮食动物脂肪等之间的关系和人类结肠癌(50]。这可能是其他因素比脂肪的饮食,如血红素铁肉或致癌物质由烹饪的肉,或总能量,对结肠癌也重要。

的第二个假说表明干扰血糖调节可能会导致增加扩散和减少细胞凋亡,最终导致癌症。在我们使用GTT葡萄糖调节的动态评估,ob / ob小鼠显示出比ob /血糖下降得慢wt和wt / wt老鼠(对于比较)(图5)。nonfasted血糖水平也明显高于ob / ob老鼠相比ob / wt和wt / wt小鼠6和11周(所有比较)(数据未显示),而没有区别ob / wt和wt / wt老鼠,遵循同样的模式基因诱导性肥胖。

老鼠45%的脂肪饮食后血糖下降较慢的挑战比老鼠GTT脂肪饮食(10%)(图5)。这也是观察组ob / ob老鼠,ob / wt老鼠和wt / wt老鼠(所有的比较)。GTT的AUC显著大ob / ob老鼠45%的脂肪饮食(图5),展示一个明显下降调节血糖的能力。Nonfasted所有小鼠血糖水平也明显高于45%的脂肪饮食相比,10%的脂肪饮食6岁和11周(都比较)(数据没有显示)。

ob / ob小鼠的胰岛素水平明显高于比老鼠ob / wt或wt / wt基因型,基于所有老鼠(,对于比较)(数字6(一)和6 (b))。ob / wt和wt / wt小鼠没有明显不同。没有明显差异在小鼠胰岛素水平在10%或45%的脂肪饮食。然而,脂肪饮食胰岛素水平的影响进行解释时应特别谨慎,因为数量少,样本,特别是从老鼠10%的脂肪饮食。

超重和肥胖可能导致继发性变化如高血糖、高胰岛素血症和胰岛素抵抗和2型糖尿病,这可能导致癌症的发展(34,51,52]。高胰岛素血症可提高合成胰岛素样生长因子1 (IGF - 1)和生物利用度,降低IGF结合蛋白(IGFBP) [53,54]。人们认为macrophage-related在白色脂肪组织炎症活动(窟)可能导致obesity-induced胰岛素抵抗[55,56]。瘦素可以影响胰岛素和葡萄糖代谢57]。研究表明,一个缺乏瘦素信号和肥胖等可能导致胰岛素抵抗,降低瘦素信号中部可以严重影响肥胖小鼠的葡萄糖代谢58]。

全面提高葡萄糖按年龄20周和6周报道野生型C57BL / 6 j小鼠(59)不明确观察到我们的老鼠,因为血糖水平变化的基因型;在11周和6周明显高于ob / wt老鼠(但无意义的)或在同一方向Apc^{分钟/ +}老鼠和wt / wt老鼠,而高水平被认为在第6周与周11Apc^{+ / +}老鼠()和ob / ob老鼠()。因此,基因型,以及脂肪饮食和/或PhIP治疗,这些结果的影响。

我们观察到更高层次的男性ob / wt nonfasted血糖和wt / wt小鼠相比之下,女性在6岁和11周(数据没有显示)。GTT的都能看到相同的趋势。这种性别差异是按照引用的血糖值在野生型C57BL / 6 j小鼠获得6点和20周的年龄59]。然而,与正常野生型老鼠,女性ob / ob小鼠血糖水平高于男性。

的Apc^{分钟/ +}老鼠nonfasted血糖水平显著高于Apc^{+ / +}老鼠在11周()(数据未显示)。这并非由于较高的采食量因为在饲料摄入量之间没有明显差异Apc^{分钟/ +}和Apc^{+ / +}老鼠(表1),体重较低Apc^{分钟/ +}老鼠比Apc^{+ / +}小鼠体重为所有三个分数(图1数据未显示)。一个可能的解释是,APC参与调节肠道上皮细胞葡萄糖运输的Apc^{分钟/ +}小鼠活动增加的电致葡萄糖载体(SGLT1)相比Apc^{+ / +}老鼠(60]。Apc是一个组件的Wnt信号通路5,6]。因此,其他有趣的可能性之间的关系Apc和血糖水平来自Wnt信号途径的数据显示,这是作为一个重要的调制器的脂肪细胞的分化61年,62年),也会影响内分泌胰腺发育和调节成熟β包括胰岛素分泌细胞功能,生存和增殖,从而可能参与糖尿病的发病机制63年]。组件的Wnt信号通路可能参与决定容易戴奥(64年]。

血糖水平的变化的百分比在6周,可以解释为46 - 57%的体重数据,在11周是33 - 43%,这取决于参数用于体重(,比较(表)2)。胰岛素水平的变化的百分比,可以解释为体重数据是32 - 48%,这取决于参数用于体重(,比较(表)2)。体重因此似乎有中度影响血糖调节。

总的来说,体重的增加(图1)和增加,长期血糖水平(图5)关联的数量的增加小肠肿瘤(图2)。

在流行病学研究中,升高胰岛素和葡萄糖与大肠癌的风险增加有关腺瘤和正常直肠粘膜细胞凋亡的减少,表明胰岛素可能在adenoma-carcinoma序列的早期采取行动促进结直肠腺瘤的发展通过减少细胞凋亡(65年]。然而,高的食物的饮食,增加餐后胰岛素水平没有增加结直肠癌的风险在一个大型前瞻性流行病学研究(66年]。

在第三个假设、炎症被认为是肥胖和结直肠癌之间的因果联系(28- - - - - -31日,34]。有两种类型的证据表明肥胖作为一种慢性炎症性疾病:肿瘤坏死因子等促炎细胞因子的释放α、il - 6和il - 1β从脂肪组织和巨噬细胞浸润到窟(67年]。在我们的研究中,我们发现了一个更高的TNF水平αob / ob老鼠相比,ob / wt和wt / wt老鼠,基于所有小鼠,小鼠的子群中有45%脂肪的饮食,而不是老鼠10%脂肪的饮食(图6 (d))。饮食在肿瘤坏死因子的影响α进行解释时应特别谨慎,因为数量少,样本老鼠10%的脂肪饮食。体重数据AUC和终端体重可以解释大约20%的肿瘤坏死因子的变化α水平(和职责。)(表2)。小肠肿瘤的数量变化不能解释为TNFα水平,而31%的小肠肿瘤直径的变化可以解释肿瘤坏死因子α水平()(表3)。因此,我们的数据支持,炎症与肥胖和小肠肿瘤的大小。

在食源性肥胖C57BL / 6小鼠(60%的脂肪饮食),增加TNF的表达在结肠α被发现,煽动改变几个组件的Wnt信号通路导致肿瘤转换(68年]。在模型中肿瘤引起的急性中耳炎和葡聚糖硫酸酯钠(DSS)在精益(C57BL6 / J)和ob / ob老鼠,结果表明,当涉及TNF的途径α被抑制,肿瘤数量和增殖和凋亡概要文件在瘦老鼠回到水平观察(69年]。通过观察炎症与肿瘤发生的时间序列分钟/ +老鼠,发现增加了炎性细胞因子肿瘤坏死因子mRNA的表达α、il - 6、il - 1β和单核细胞化学引诱物蛋白1 (MCP-1)发生在年龄12周与肿瘤数量快速增长同时,肿瘤,一般来说,总体数量和丰富的大型肿瘤与炎症细胞因子的反应呈正相关(70年]。老鼠缺乏肿瘤坏死因子α由于目标零突变是防止胰岛素抵抗引起的戴奥或者ob / ob基因突变71年]。然而,最近的一次回顾和荟萃分析流行病学研究没有发现大肠癌和肿瘤坏死因子之间的关联α和il - 6 (72年]。

我们发现在肿瘤坏死因子没有显著差异α水平之间的小鼠暴露于0.9%氯化钠或PhIP(图6 (d))。老鼠,这是表明炎症没有先于或伴随肿瘤出现前的病变结肠的感应PhIP [73年]。

4.5。杂合的ob基因突变的影响

在我们的实验中,ob / wt老鼠明显重于wt / wt小鼠体重时评估AUC(图1)和终端bw(数据未显示),但不可以作为终端BMI(数据未显示)。然而,采食量(表1(图),号码2(图)和大小3数据未显示),小肠肿瘤,GTT结果(图5),nonfasted血糖水平(数据没有显示)、胰岛素(数字6(一)和6 (b))和肿瘤坏死因子α(图6 (d))水平没有显著不同ob / wt和wt / wt老鼠。显然,的杂合的状态ob突变小鼠能够增加体重,但不够严重影响其他端点,包括肠道癌症。

其他研究人员也表示,ob / wt小鼠部分显示纯合子表型的ob / ob老鼠,大约33%减少血浆瘦素水平调整后脂肪量和增加24%的身体脂肪百分比调整年龄和性别(74年]。ob / ob的纯合子的条件也发现在人类和特点是瘦素水平很低,严重肥胖(75年]。这种基因条件太少见,占最近的肥胖流行病。它更有可能共同人类肥胖的大多数情况下是由几家基因位点等位基因的杂合性与微妙的影响基因表达和功能,而不是单个基因的主要功能的破坏。然而,人类杂合的ob也有瘦素水平较低和体脂百分比增加相对于野生型的亲戚(76年]。

4.6。生存

在我们的实验中,Apc^{分钟/ +}老鼠的运行周期减少,由于贫血或其他并发症,如直肠脱垂,自发的肠道肿瘤诱导的突变造成的Apc基因(图7)。在这些老鼠的寿命有限,因为他们的肿瘤,ob / ob基因型并不影响生存。然而,在Apc^{+ / +}老鼠能活出他们的自然寿命,ob / ob小鼠明显更短的生命而ob / wt和wt / wt老鼠(图7)。之间的寿命没有显著不同Apc^{+ / +}ob / wt和wt / wt老鼠在我们的实验中,由其他人也报道,尽管增加体重和减少瘦素水平(74年]。

5。结论

我们学习了肥胖诱导基因通过ob突变,通过45%的脂肪饮食和表明,高脂肪饮食严重加剧了遗传性肥胖。在老鼠genetically-induced肥胖和暴露于45%的脂肪饮食,自发的肠道肿瘤发生增加。致癌物质——(PhIP)诱导肠道肿瘤发生没有进一步增加了45%的脂肪的饮食。Hyperglucosemia和胰岛素血症,表明干扰葡萄糖调节,增加肿瘤坏死因子和炎症α水平,与肥胖相关的被发现,暗示这些尽可能机制参与了肥胖和肠道肿瘤发生之间的关系。genetically-induced肥胖ob / ob老鼠的寿命减少。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

确认

这项工作是在挪威研究委员会的支持下,项目没有。196112 / H10 (h . t .非政府组织和I.-L。Steffensen)。作者感谢海格Hjertholm,语气拉斯穆森和Hildegunn达尔优秀基因分型结果与PCR技术援助与老鼠,实际工作和Ase Eikeset Else-Carin Groeng寻求帮助CBA和ELISA检测。维克多Labay Ong是感谢帮助照看鼠标。

引用

1. 经济合作与发展组织(OECD),健康一眼2013年,经济合作与发展组织指标经合组织,2013年,http://www.oecd.org/els/health systems/health - -一个一眼- 2013. - pdf。
2. 癌症登记处的挪威,2012年挪威癌症。癌症的发生率、死亡率在挪威生存和流行癌症登记处的挪威,奥斯陆,挪威,2014,http://www.kreftregisteret.no/Global/Cancer%20in%20Norway/2012/CIN_2012.pdf。
3. A . r .莫泽h·c·皮托管,w . f .鸽子,“这种显性突变,诱发多种肠道肿瘤的老鼠,”科学,卷247,不。4940年,第324 - 322页,1990年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. L.-K。苏,k .从事b Vogelstein et al .,“多肠道肿瘤引起的小鼠相同器官中APC基因突变,”科学,卷256,不。5057年,第670 - 668页,1992年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. b·m·鲍曼和j . z字段,“一个APC: WNT counter-current-like机制调节细胞分裂的人类结肠隐窝轴:一种机制,解释了APC突变诱导增殖异常驱动结肠癌发展,”在肿瘤领域卷,3篇文章ID 244, 2013。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. 美国纳尔逊和i . s . Nathke”的交互和功能腺瘤息肉病杆菌(APC)蛋白质乍一看,“《细胞科学,卷126,不。4、873 - 877年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. e·r·费伦•“结直肠癌的分子遗传学,”病理学的年度回顾:疾病的机制》第六卷,第507 - 479页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. s . Al-Sohaily a . Biankin r .梁m . Kohonen-Corish和j . Warusavitarne“在结直肠癌分子途径,”胃肠病学和肝脏病学杂志》上,27卷,不。9日,第1431 - 1423页,2012年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. a . m .英格尔斯·m·m·迪基,g·d·斯奈尔”肥胖,一个新的突变家鼠,”《华尔街日报》的遗传第41卷。。12日,第318 - 317页,1950年。视图:谷歌学术搜索
10. y, r . Proenca m·马费伊·m·巴龙l·利奥波德和j·m·弗里德曼”鼠标的定位克隆肥胖人类基因及其同系物,”自然,卷372,不。6505年,第432 - 425页,1994年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. f . f . Chehab j .秋和s . Ogus”使用动物模型解剖瘦素的生物学,”最近在激素的研究进展59卷,第266 - 245页,2004年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. 杰克逊实验室,JAX - 000632 B6.Cg-Lep老鼠数据库^ob/ J,2014岁的杰克逊实验室http://jaxmice.jax.org/strain/000632.html。
13. j·m·弗里德曼和j·l·Halaas“瘦素和体重在哺乳动物的规定,“自然,卷395,不。6704年,第770 - 763页,1998年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. h·a·j·Schut和e . g . Snyderwine DNA加合物的杂环胺食物诱变剂:对突变和致癌作用的影响,“致癌作用,20卷,不。3、353 - 368年,1999页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. I.-L。Steffensen, j·e·鲍尔森,t . j . Eide和j·亚历山大,“2-Amino-1-methyl-6-phenylimidazo (4, 5 -b]吡啶肿瘤的数量增加,囊性隐窝和异常的地穴焦点在多个肠道肿瘤的老鼠,”致癌作用,18卷,不。5,1049 - 1054年,1997页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. j . e . Paulsen I.-L。Steffensen,。Andreassen、r . Vikse和j·亚历山大,“新生儿接触食品诱变剂2-amino-1-methyl-6-phenylimidazo (4、5 b)吡啶通过母乳或直接在多个肠道肿瘤小鼠诱发肠道肿瘤,”致癌作用,20卷,不。7,1277 - 1282年,1999页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. I.-L。Steffensen, h·A·j·Schut j . e . Paulsen。Andreassen, j .亚历山大“肠道肿瘤发生在多个肠道肿瘤食品诱变剂诱发小鼠2-amino-1-methyl-6-phenylimidazo (4, 5 -b]吡啶:围产期易感性,地区差异,与DNA加合物和关联,”癌症研究,卷61,不。24日,第8696 - 8689页,2001年。视图:谷歌学术搜索
18. a . r .莫泽a。r .鞋匠,c . s .康纳利et al .,“纯合性最小值等位基因的Apc鼠标发展导致破坏原肠胚形成之前,“发展动态,卷203,不。4、422 - 433年,1995页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. h . t .非政府组织,r . b . Hetland a . Sabaredzovic l . s . Haug I.-L。Steffensen。”在子宫内接触perfluorooctanoate (PFOA)或perfluorooctane磺酸盐(卵圆孔未闭)没有增加体重或肠道肿瘤发生在多个肠道肿瘤(最小值/ +)老鼠。”环境研究卷,132年,第263 - 251页,2014年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. 世界卫生组织,定义和诊断糖尿病和中间高血糖:世卫组织/ IDF的咨询报告2006年,瑞士日内瓦,http://whqlibdoc.who.int/publications/2006/9241594934_eng.pdf。
21. k . El-Haschimi h·莱纳特,“瘦素抵抗为什么瘦素在肥胖工作失败,”实验和临床内分泌和糖尿病,卷111,不。1,2 - 7日,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. e . Kim S.-W e . j . Kim。搜索引擎优化,C.-G。户珥,r·a·麦格雷戈和M.-S。崔”方法之间的蛋白质网络调节肥胖肥胖验证候选基因的白色脂肪组织中脂肪食源性肥胖C57BL / 6 j小鼠,”食品科学与营养的关键评论,54卷,不。7,910 - 923年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. Laake,图恩,r·塞尔曼牌s Tretli m . l . Slattery和m . b . Veierød“前瞻性研究的身体质量指数、体重变化,和近端和远端结肠癌症的风险,”癌症流行病学生物标记与预防》上,19卷,不。6,1511 - 1522年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. z利未,j·d·卡克,m . Barchana et al .,“测量体重指数在青春期和结直肠癌的发病率在110万年一群男性,”癌症流行病学生物标记与预防》上,20卷,不。12日,第2531 - 2524页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. h . Ajouz d Mukherji, a . Shamseddine“次级胆汁酸:结肠癌的underrecognized原因,“世界肿瘤外科杂志》上,12卷,不。1,第164条,2014。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. c . Gravaghi j . Bo k . m . d . LaPerle et al .,“肥胖增强胃肠道肿瘤发生Apc突变的老鼠。”国际肥胖期刊,32卷,不。11日,第1719 - 1716页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. k·哈塔,m .日本久保田公司m .清水et al .,“C57Bl /科-db / db-Apc^{分钟/ +}老鼠表现出肠道肿瘤的发生率增加。”国际分子科学杂志》上,12卷,不。11日,第8145 - 8133页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. m . j . Khandekar p·科恩,b . m . Spiegelman“肥胖、癌症的分子机制发展”自然评论癌症,11卷,不。12日,第895 - 886页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. p . l . Prieto-Hontoria p . Perez-Matute m . Fernandez-Galilea m·布斯托斯j·a·马丁内斯和m . j . Moreno-Aliaga“肥胖相关功能失调的脂肪组织在癌症中的作用:分子营养的方法,”Biochimica et Biophysica学报,卷1807,不。6,664 - 678年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. c·r·古费d .风扇,p·辛格(manmohan Singh)和e·a·墨菲,“肥胖与结直肠癌:最近见解的生物机制,“当前的临床营养与代谢护理,16卷,不。5,595 - 600年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. s·d·赫斯特,“肥胖、能量平衡和癌症:机械的角度来看,“在营养和癌症进展,美国Panico诉Zappia g . l . Russo a . Budillon f . d . Ragione, Eds。卷,159癌症治疗和研究页21-33 Springer,柏林,德国,2014年。视图:谷歌学术搜索
32. 世界癌症研究基金会和美国癌症研究所食物、营养、身体活动与癌症的预防:全球视角世界癌症研究基金会和美国癌症研究所,华盛顿特区,美国,2007年,http://www.dietandcancerreport.org/cancer_resource_center/downloads/Second_Expert_Report_full.pdf。
33. 世界癌症研究基金会和美国癌症研究所持续更新项目报告。食物、营养、体育锻炼,预防大肠癌世界癌症研究基金会和美国癌症研究所,华盛顿特区,美国,2011年,癌症- 2011 report.pdf http://www.dietandcancerreport.org/cancer_resource_center/downloads/cu/colorectal。
34. 发病和j·e·h·Kwon 2”,调节炎症和胰岛素抵抗,“内分泌学前沿第71条,卷。4日,2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. c·h·荣格和M.-S。金,“中央瘦素抵抗肥胖的分子机制”,档案调药的研究,36卷,不。2、201 - 207年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
36. y周和l·鲁伊“瘦素信号和瘦素抵抗,”前沿的医学,7卷,不。2、207 - 222年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
37. 美国Uddin, a·r·侯赛因o . s .汗和k . s . Al-Kuraya“特异表达瘦素和瘦素受体的表达在结直肠致癌作用,”肿瘤生物学,35卷,不。2、871 - 879年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
38. t . Uesaka z . Liu, h .渡边和n .加藤”高脂肪饮食提高结肠细胞增殖和致癌作用提高血清中瘦素在大鼠”国际肿瘤学杂志,19卷,不。5,1009 - 1014年,2001页。视图:谷歌学术搜索
39. t·贾菲和b·施瓦兹”,瘦素促进运动性和人类结肠癌细胞侵袭性通过激活多种信号转导途径,”国际癌症杂志》上,卷123,不。11日,第2556 - 2543页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
40. l . Vona-Davis p . Somasundar a . k . Yu和d·w·麦克费登”微分瘦素对癌症的影响在体外”,外科手术研究期刊》的研究,卷113,不。1、50 - 55,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
41. t . Aparicio s Guilmeau h . Goiot et al .,“瘦素减少最初的癌前病变的发展azoxymethane诱导的大鼠结肠粘膜,”胃肠病学,卷126,不。2、499 - 510年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
42. k . n . Ealey s, m . c·阿彻,“发展异常的地穴冒号的焦点ob / ob和db / db老鼠:证据表明瘦素不是一个启动子,“分子致癌作用卷,47号9日,第677 - 667页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
43. 细野豪志(h . Endo k . t .中山教授et al .,“瘦素作为生长因子对结直肠肿瘤在小鼠结肠肿瘤起始阶段后续致癌作用,”肠道,60卷,不。10日,1363 - 1371年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
44. j . Garbarino和s . l . Sturley lipotoxicity饱和脂肪:新的视角,”当前的临床营养与代谢护理,12卷,不。2、110 - 116年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
45. h . j . Renaud j.y.崔,h, c·d·克拉森,“饮食的影响在脂类代谢相关基因的表达,氧化应激,炎症在鼠标liver-insights肝脂肪变性的机制,”《公共科学图书馆•综合》,9卷,不。2篇文章ID e88584 2014。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
46. h·k·文森特·k·e·英纳斯和k·r·文森特“氧化应激和潜在的干预措施来减少氧化应激在超重和肥胖,”糖尿病、肥胖和新陈代谢,9卷,不。6,813 - 839年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
47. a·j·m·沃森和r·n·杜布瓦”,脂质代谢和APC:大肠癌的预防,”《柳叶刀》,卷349,不。9050年,第445 - 444页,1997年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
48. h . m . Li Edamatsu r .北泽俊美,北泽俊美,t . Kataoka磷脂酶和m .李。$C\epsilon$促进肠道肿瘤发生的Apc^{分钟/ +}通过增强小鼠的炎症和血管生成。”致癌作用,30卷,不。8,1424 - 1432年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
49. d . w . Kang K.-Y。崔,D . s . Min”磷脂酶D符合Wnt信号:一个新的癌症治疗的目标,“癌症研究,卷71,不。2、293 - 297年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
50. w·c·威利•“膳食脂肪摄入与癌症风险:一项有争议的和有益的故事,“在癌症生物学研讨会,8卷,不。4、245 - 253年,1998页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
51. i . f . Godsland”,胰岛素抵抗和高胰岛素血症在发展和癌症的进展,”临床科学,卷118,不。5,315 - 332年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
52. 撒母耳和g . v . t .辛宜佳,“胰岛素抵抗的机制:常见的线程和失落的环节,”细胞,卷148,不。5,852 - 871年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
53. m . Pollak“胰岛素和胰岛素样生长因子在肿瘤信号,”自然评论癌症,8卷,不。12日,第928 - 915页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
54. j .高,y s . Chang b . Jallal和j . Viner”目标的胰岛素样生长因子轴小说在肿瘤治疗学的发展,“癌症研究,卷72,不。1、3 - 12,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
55. h .徐g·t·巴恩斯,杨问:et al .,“慢性炎症在脂肪中扮演着关键角色在肥胖相关胰岛素抵抗的发展,“《临床研究杂志》上,卷112,不。12日,第1830 - 1821页,2003年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
56. s e . Shoelson l .写到,a . Naaz“肥胖、炎症和胰岛素抵抗,”胃肠病学,卷132,不。6,2169 - 2180年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
57. m . Amitani a .川h . Amitani, a .农业“瘦素的作用insulin-glucose轴的控制”神经科学前沿第五十一条,卷。7日,2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
58. a . m . van den Hoek, b . Teusink, p . j . Voshol l . m . Havekes j . a .罗梅恩h·特,“瘦素缺乏症本身规定身体成分和胰岛素的行动在ob / ob老鼠,”神经内分泌学杂志》,20卷,不。1,第127 - 120页,2008。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
59. x周和g·k·汉森”,性别和年龄对血清生化参考范围的影响在C57BL / 6 j小鼠,”比较医学,54卷,不。2、176 - 178年,2004页。视图:谷歌学术搜索
60. r . Rexhepaj生搬硬套,美国顾et al .,“肿瘤抑制基因腺瘤息肉病杆菌会使肠道运输,”弗鲁格Archiv-European生理学杂志》上,卷461,不。5,527 - 536年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
61. s e·罗斯,n . Hemati k . Longo et al .,“Wnt信号抑制脂肪形成,”科学,卷289,不。5481年,第953 - 950页,2000年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
62. c·n·班尼特,s·e·罗斯,k . Longo et al .,“Wnt信号在脂肪生成,调节”《生物化学》杂志上,卷277,不。34岁,30998 - 31004年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
63. h . j .混乱和r . n . Kulkarni Wnt信号:相关性β细胞生物学和糖尿病。”在《内分泌学和新陈代谢趋势,19卷,不。10日,349 - 355年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
64. r . a . Koza l . Nikonova j·霍根et al .,“基因表达的变化预示着食源性肥胖基因相同的老鼠,”公共科学图书馆遗传学,卷2,不。5篇文章e81 2006。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
65. t . o . Keku·k·隆德j . Galanko j·g·西蒙斯,j . t .伍斯利r·s·桑德勒,“胰岛素抵抗、细胞凋亡和结直肠腺瘤的风险,”癌症流行病学,生物标记与预防》上,14卷,不。9日,第2081 - 2076页,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
66. y包,k . Nimptsch j . a . Meyerhardt et al .,“饮食胰岛素负载,饮食胰岛素指数和结肠直肠癌,”癌症流行病学,生物标记与预防》上,19卷,不。12日,第3026 - 3020页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
67. r . Cancello k·克莱门特,“肥胖是一种炎症性疾病吗?慢性炎症的作用和人类白色脂肪组织巨噬细胞浸润,”问卷:一个国际妇产科杂志》上,卷113,不。10日,1141 - 1147年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
68. z . Liu r·s·布鲁克斯·e·d·Ciappio et al .,“食源性肥胖提高结肠肿瘤坏死因子-α在小鼠和伴随着Wnt信号的激活:肥胖相关结直肠癌的机制。”营养生物化学杂志》上,23卷,不。10日,1207 - 1213年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
69. m·b·s·弗洛雷斯,g . z罗查,d . m . Damas-Souza et al .,“Obesity-induced增加肿瘤坏死因子-α导致小鼠结肠癌的发展。”胃肠病学,卷143,不。3、741 - 753年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
70. j·m·戴维斯,j·l·麦克莱伦j·l·施泰纳et al .,“肠道炎性细胞因子反应的肿瘤发生的关系Apc^{分钟/ +}老鼠。”细胞因子卷,57号1,第119 - 113页,2012。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
71. k . t . Uysal s . m . Wiesbrock m·w·马里诺和g·s·格”,防止obesity-induced胰岛素抵抗小鼠缺乏TNF -α功能”,自然,卷389,不。6651年,第614 - 610页,1997年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
72. r·k·乔希和美国。李,“肥胖相关的发病和结肠直肠癌:回顾和荟萃分析,“亚洲太平洋癌症预防杂志》上,15卷,不。1,第405 - 397页,2014。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
73. d . Kuhnel f . Taugner b . Scholtka p·斯坦伯格,炎症不先于或伴随的感应的结肠肿瘤出现前的病变2-amino-1-methyl-6-phenylimidazo (4, 5 -bpyridine-fed老鼠。”档案的毒理学,卷83,不。8,763 - 768年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
74. w·k·钟,k . Belfi m . Chua et al .,“杂合性地蜡^ob或Lepr^db影响身体成分和瘦素在成年小鼠体内平衡,”美国Physiology-Regulatory综合和比较生理学杂志》上,卷274,不。4,R985-R990, 1998页。视图:谷歌学术搜索
75. c·t·蒙塔古,i s Farooqi j·p·怀特黑德et al .,“先天性缺乏瘦素与严重的人类早发性肥胖,”自然,卷387,不。6636年,第908 - 903页,1997年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
76. i s Farooqi j·m·基奥Kamath s . et al .,“偏瘦素缺乏,人类肥胖。”自然,卷414,不。6859年,34-35,2001页。视图:谷歌学术搜索

版权

版权©2015公顷Thi非政府组织et al。这是一个开放的分布式下文章知识共享归属许可,它允许无限制的使用、分配和复制在任何媒介,提供最初的工作是正确引用。