HLA-G二聚体在肾同种异体移植物生存期的延长中

摘要

人白细胞抗原g (HLA-G)有助于实体器官/组织移植中同种异体移植物的接受。大多数研究已经确定，可溶性HLA-G亚型可在移植患者的血清/血浆中系统检测到，这些移植患者发生急性和/或慢性异体组织/器官排斥反应的次数明显减少。目前HLA-G及其特异性受体相互作用的模型将其解释为单体形式的功能。然而，近年来，新的数据显示，HLA-G能够形成二硫键连接的二聚体，具有较高的优先结合和功能活性。有关可溶性HLA-G二聚体在临床病理条件中的作用的数据有限。我们在这里描述可溶性HLA-G二聚体在肾移植患者的存在。我们的研究表明，血浆中高水平的HLA-G二聚体和单核细胞中HLA-G膜结合形式的表达增加与同种异体肾移植存活的延长有关。我们还确定可溶性HLA-G二聚体的存在与较低水平的促炎细胞因子有关，这表明HLA-G二聚体在控制伴随的炎症状态方面具有潜在作用。

1.介绍

人类白细胞抗原g (HLA-G)是一种参与建立和维持母体对半异基因胎儿组织耐受性的天然分子[1- - - - - -6]．妊娠期间HLA-G的表达减少已被认为是预坦克敏的贡献因素和多重流产的因素[7- - - - - -11.]．此外，已在胰腺、成人胸腺细胞和干细胞以及肿瘤、移植、HIV感染和炎症等病理条件中发现HLA-G表达[12.- - - - - -27.]．HLA-G结合多种受体，包括ILT2、ILT4和KIR2DL4受体，抑制骨髓单核细胞、树突状细胞、T细胞、B细胞和NK细胞的免疫反应[5，28.- - - - - -35.]．除膜结合的形式（HLA-G1，-G2，-G3和-G4）外，HLA-G还通过几种可溶性同种型（SHLA-G1，-G5，-G6和-G7）呈现两种机制：替代剪接和蛋白水解释放，已知由金属蛋白酶介导的[36.，37.]．在几种生理和病理条件下确定显着高水平的SHLA-g，包括与更高的妊娠和植入率的关联[8]．已确定高水平的sHLA-G与几种疾病的临床表现相关，如风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、哮喘和HIV感染。在血液系统恶性肿瘤和实体肿瘤患者中，包括急性白血病、淋巴瘤、慢性淋巴白血病、黑色素瘤、乳腺癌、胶质瘤、肾癌和肺癌患者中，sHLA-G水平的升高与疾病进展相关[25.，38.]．最近的研究表明，sHLA-G分子参与了器官/组织移植患者同种异体移植存活的延长[39.- - - - - -41.]．在大多数研究中，血浆/血清HLA-G水平均采用ELISA法测定。然而，HLA-G特异性ELISA有局限性，不能区分HLA-G的单体或二聚体亚型。新的数据显示，HLA-G二硫联二聚体配合物对免疫抑制受体有较高的优先结合，诱导有效的免疫抑制受体信号，并具有较强的功能活性[32.，42.- - - - - -45.]．有限的数据可用于HLA-G二聚体在临床病理条件下的作用。出色的问题是在器官移植患者中是否形成这些HLA-G二聚体，其功能可能在同种异体移植物存活中的延长。在这里，我们报告了肾移植患者的SHLA-G二聚体分析。首先，我们确定与患有慢性排斥肾移植的患者的患者没有排斥患者，SHA-G二聚体的水平显着更高。高水平的SHLA-G二聚体也与来自没有肾移植的患者的患者的单核细胞的膜结合形式的膜结合形式的表达增加。

HLA-G还能够通过抑制免疫细胞来产生促炎分子来降低炎症反应。这些分子的潜在候选者之一包括基质金属蛋白酶（MMP）。在几种人类疾病中观察到MMP的表达增加，包括癌症和自身免疫疾病，表明这些酶在免疫力，炎症反应和修复机制中的累积。MMP-9和MMP-2特别能够通过细胞因子/趋化因子作用调节炎症反应。在这里，我们证明，肾移植患者的高水平SHLA-G二聚体与抑制发作的肾脏移植患者与MMP-9的血浆水平降低有关。我们还确定与较低水平的促炎细胞因子相关的SHLA-G二聚体的水平增加，表明SHLA-G二聚体在控制伴随炎症状态方面的潜在作用。从这些发现中，SHLA-G二聚体可用作控制抑制和人肾分配植物的炎症状态的潜在标志物。

2。材料和方法

2．1.病人

我们招募了肾移植受者，其中50人无排斥反应(NR)， 17人有慢性排斥反应(CR)。通过肌酐水平评估肾功能和排斥反应，并通过活检进行验证。表格1描述患者人口的临床和人口统计学特征。两类的肾脏受体在性别，年龄和种族方面都有类似的分布。供体源（生物或死亡）的分布，冷缺血时间，肾功能衰竭的主要原因，每组受者之间的免疫抑制治疗没有统计学不同。CR患者的平均肌酐水平明显高于NR患者．该议定书由格鲁吉亚居民大学的人力保证委员会批准，并从研究中获取书面知情同意书。

２.２.从全血中分离人血浆、PBMCs和红细胞

从患者获得血液样品并在EDTA管中收集。将等分试样血浆储存在-80℃。使用组织Dockaque 1077（Sigma-Aldrich，St.Louis，Mo，USA）梯度离心，从Buffy涂层中分离出PBMC和红细胞。将等分试样的PBMC储存在液氮中。将等分试样的红细胞储存在-80℃。

２.３.Zymography

血浆样品总蛋白采用Bradford法(Bio-Rad, Richmond, CA, USA)测定。将稀释后(1:50)的血浆样品装入10%的明胶凝胶中，在100恒压下进行电泳。用2.5% Triton-X洗涤凝胶两次20分钟，然后在37°C酶学显像缓冲液(Bio-Rad)中孵育过夜。第二天，用考马斯亮蓝染料(Bio-Rad)对凝胶染色3小时，然后用脱色液脱色45分钟，以观察条带。凝胶在水中过夜再水合，然后使用美国国立卫生研究院开发的ImageJ程序进行扫描和分析。

2.4。免疫沉淀前的血浆中白蛋白和IgG的耗尽

通过制造商的方案之后使用Proteoprep免疫亲和蛋白聚胺和IgG耗尽试剂盒（Sigma-Aldrich）实现可能干扰来自血浆免疫沉积HLA-G的免疫沉淀的不需要蛋白质。

2．5．用免疫沉淀和Western Blot方法检测HLA-G单体和二聚体

100年μL耗尽血浆与100μL冷RIPA缓冲液，冰上孵育15分钟。20μ将L蛋白G珠浆料加入到等离子体裂解物中，然后在4℃下温育60分钟，并以10,000g离心10分钟。2 μ将L的MEM-G / 9 mAb（Santa Cruz Biotechnology，达拉斯，TX，USA）加入上清液中，并将混合物在4℃温育过夜。孵育后，50 μ将L蛋白G珠浆料加入到等离子体裂解物中，在4℃下孵育1小时，并以10,000g离心30秒。50. μ加入Laemmli样品缓冲液的L。样品在还原和非还原条件下运行。混合物95℃变性5分钟，10000 g离心5分钟。将上清液装入凝胶上进行电泳。30μ将L免疫沉淀的血浆在10％运行的凝胶和5％堆叠凝胶上分离并转移至PVDF膜。膜被5％BSA封闭并与MEM-G / 9初级MAb一起温育，然后用山羊抗小鼠IgG-HRP二次AB（Santa Cruz Biotechnology）。化学发光HRP缀合检测试剂用于检测。通过使用imagej软件的扫描膜的密度分析来确定涂料蛋白的定量。

2.6。细胞因子和趋化因子分析

根据制造商的建议，使用多分析物Elisarray Kits（Qiagen，Valencia，CA）测量细胞因子和趋化因子血浆水平。阵列试剂盒设计用于同时检测多达12个促炎细胞因子和趋化因子（IL1α，il1.β，IL2，IL4，IL6，IL8，IL10，IL12，IL17a，IFNγ,肿瘤坏死因子α，GM-CSF）。

2.7。流式细胞术

两组患者(NR和CR)的PBMCs均用human TruStain FcX (Fc受体阻断液;BioLegend, San Diego, CA, USA)，并使用针对CD3, CD4, CD8, CD14, CD19和HLA-G的荧光偶联人类特异性单克隆抗体进行染色。所有单克隆抗体均购自BD Biosciences (San Jose, CA, USA)或BioLegend。使用FACSCanto流式细胞仪(BD, Franklin Lakes, NJ, USA)进行细胞检测，使用FlowJo软件(Tree Star Inc, Ashland, OR, USA)或Cell Quest软件(BD Biosciences)分析数据。一些结果用特异性抗体与无关的同型匹配抗体相比获得的阳性细胞的百分比来表示。

2.8。统计分析

使用NCSS (NCSS LLC, Kaysville, Utah, USA)和GraphPad (GraphPad Inc.， La Jolla, CA, USA)软件包进行统计分析。正态性和连续数值数据使用Kolmogorov-Smirnoff单样本检验，比较使用Student的测试或由Mann-Whitney在适当的时候进行测试。这值≤0.05被认为是统计学意义的。

结果

3．1.非排斥肾移植患者血浆中sHLA-G1/HLA-G5单体和二聚体水平升高

在这项研究中，我们评估了非排斥(NR)和慢性排斥(CR)同种异体肾移植患者中sHLA-G1和HLA-G5亚型的单体和二聚体水平。对患者血浆进行免疫沉淀和Western blot分析，发现两条条带;一个对应的预期分子量为39 kDa，这代表了sHLA-G单体，一个大约是它的两倍(sHLA-G二聚体)(图1(一)）.以转染hla - g5的人淋巴母细胞721.221细胞上清作为阳性对照。NR和CR患者血浆中均检测到两种形式的sHLA-G，且各组之间的sHLA-G水平存在较大差异。但总sHLA-G水平显著升高与CR肾移植患者相比，NR（图1 (b)）.此外，与Cr组相比，NR组的Shla-g的单体形式的单体形式水平略高（图1 (c)）.我们确定Shla-g的二聚体形式在两组患者的血浆中占主导地位。此外，SHLA-G的二聚体形式的水平显着升高在NR患者组（图1 (d)）.这些数据表明SHLA-g的二聚体形式存在并占肾移植患者的血浆中的占主导地位。

３．２．非排斥肾移植患者单核细胞HLA-G1膜结合形式表达增加

已知SHLA-G蛋白可以通过两种机制产生：替代剪接和蛋白水解释放，其被金属蛋白酶介导。为了确定膜结合形式的HLA-G1脱落到血浆患者中SHLA-G分子库中的潜在贡献，分析了HLA-G1对外周单核细胞和T和B细胞的细胞表面的表达两组患者。NR和CR患者的HLA-G1阳性T细胞和B细胞的数量没有显着差异（图2(一个)和2（d）和数据未显示）。总之，在两组患者中，HLA-G1阳性细胞代表T和B细胞的小部分（总量的2-6％）。正如预期的那样，NR和CR患者外周血中的大多数HLA-G1阳性细胞在单核细胞的群体中确定（图2(一个)，2（b）,2（c））.但是，HLA-G1阳性单核细胞的数量显着升高在NR患者中，但不在CR患者中（图2（e））.这些数据显示HLA-G1对来自NR患者的单核细胞的表达可能对那些患者的SHLA-G单体和二聚体形式的升高的血浆水平具有显着贡献。

３．３．NR和CR肾移植患者血浆MMP-2和MMP-9的分析

由于SHLA-G的生产机制之一包括通过金属蛋白酶脱落HLA-G1的膜结合形式，因为MMPS发挥这种酶的关键作用，我们研究了MMP-2和MMP-9的水平在肾移植患者的血浆中。移植患者的酶谱分析显示，在68kDa和90kDa处存在两个带，分别对应于MMP-2和MMP-9（图3（a））.如图所示3（a），两组患者血浆中均含有大量的MMP-2和MMP-9, NR和CR患者血浆中MMP-2和MMP-9水平无显著差异(图)3 (c)和3 (d)）.然而，在CR肾移植患者中观察到MMP-9水平升高的趋势(图)3 (d)）.由于NR组和CR组患者的血浆中都含有sHLA-G，这一数据进一步支持了MMPs可能通过脱落细胞膜结合的HLA-G1分子而在贡献总sHLA-G中发挥作用的可能性。

由于HLA-G、MMP-2和MMP-9都通过调节细胞因子和趋化因子参与炎症反应的调控，而炎症反应是异体移植排斥或存活的关键阶段，我们接下来测定了肾移植患者中促炎细胞因子的水平。

3.4。促炎细胞因子IL-1水平增加β、IL-2和IL-6在肾移植慢性排斥反应患者血浆中的表达

因此，我们研究了促炎细胞因子的血浆水平是否与NR和CR肾移植患者之间不同。为此目的，我们使用了多分析物ELISARRAY试剂盒，旨在同时评估12种促炎细胞因子和趋化因子的水平（IL1α，il1.β，IL2，IL4，IL6，IL8，IL10，IL12，IL17a，IFNγ,肿瘤坏死因子α，GM-CSF）。NR和CR患者中的细胞因子水平有相当大的变异，特别是对于IL-1α，IL-4，IL-12和IFN-γ(图4）.然而，CR肾移植患者的促炎细胞因子IL-2水平显著升高,il - 1和IL-6(图4）.此外，CR患者IL-17A水平升高。这些数据支持我们的观察，即sHLA-G二聚体形式与肾移植患者炎症反应的控制有关。

4.讨论

HLA-G是涉及胎儿半丙烯组织的母体耐受的建立和维持的天然分子。HLA-G与几种免疫细胞抑制剂，例如ILT2，ILT3和ILT4结合，以初估骨髓细胞，T细胞，B细胞和NK细胞的免疫应答。与经典HLA I类分子不同，有限的多态性，限制组织表达和相对限制的肽呈现使HLA-G成为独特的分子。最近，已经发现了HLA-G的另一种不寻常的特征：其能够在溶液和细胞表面中形成二硫化二聚体形式。与大多数其他MHC I类分子不同，HLA-G具有位于细胞外域中的位置42和147中的两个自由半胱氨酸残基α1,α分别为2。HLA-G分子重折叠体外通过分子间的Cys42-Cys42二硫键形成二硫键连接的二聚体[46.]．人293 T细胞表达的可溶性HLA-G5分子也可形成二硫联二聚体和额外的低聚体形式，可降低细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)上CD8表达水平[47.]．抑制信号传导的效率取决于多种因素，包括配体的稳定性、亲和性及其合适的结构取向，这些因素显著影响到与靶向抑制受体的亲和和信号传导。游离半胱氨酸的突变研究表明，HLA-G二聚体比单体更有效地抑制NK杀伤，并提高ILT2信号转导的效率[32.，42.，43.，48.]．包括我们实验室在内的多个小组的实验数据表明，HLA-G二聚体在与人ILT2和ILT4以及小鼠pir - b抑制受体结扎时，具有更高的亲和性和适当的结构定向，可诱导有效的抑制信号[32.，44.，45.]．这使得HLA-G二聚体成为几种病理条件下调节炎症和同种异体免疫反应的最强大的配体形式，包括延长同种异体肾移植存活或移植接受时间。许多研究已被设计用于测定各种疾病患者的血浆或血清中的sHLA-G。在自然流产、自身免疫性疾病、实体器官移植和各种恶性肿瘤中测定了sHLA-G水平。在几乎所有的研究中，sHLA-G的定量分析均采用ELISA法。不幸的是，现有的sHLA-G ELISA只确定了sHLA-G蛋白的总量，包括单体和二聚体形式。由于二聚体是sHLA-G最强大的形式，因此分析健康和疾病条件下的sHLA-G二聚体水平非常关键。迄今为止，还没有研究表明HLA-G二硫联同型二聚体是否存在于肾移植患者的血浆中。在这里，我们发现肾移植患者的血浆中存在sHLA-G二聚体。与慢性排斥反应患者相比，无排斥反应患者的sHLA-G二聚体水平显著升高，表明sHLA-G二聚体与同种异体肾移植存活的延长有关。 In support of that, similar levels of expression and percent of immune inhibitory receptor ILT2- and ILT4-positive cells has been determined on monocytes and T and B cells in both groups of patients (data not shown). This clinical finding is in agreement with our previous study using animal models demonstrating that HLA-G dimers prolong the survival of allogeneic skin transplants in ILT transgenic mice ([32.，49.，50.和未发表的数据)。在未来，确定sHLA-G1和sHLA-G5二聚体在sHLA-G总量中的百分比将是重要的。然而，迄今为止，没有数据表明sHLA-G1和sHLA-G5二聚体具有不同的结合和/或诱导抑制性受体信号传导的效率。我们的研究结果显示，NR患者hla - g1阳性单核细胞数量显著增加，说明未发生排斥反应的患者血浆中sHLA-G1二聚体占总水平的比例可能有所升高。最近，Rizzo等人[37.]在721.221 -g转染的细胞系，JEG3细胞系和IL-10处理的PBMC中，MMP-2和HLA-G1脱落的有效链接来自五个健康供体的IL-10处理的PBMC体外实验。但是，Shla-g1的脱落过程和尤其是二聚体体内而在病理情况下，包括肾移植患者，可能会受到多种因素的影响，需要进一步的调查。

sHLA-G二聚体的抗炎作用代表了这种形式的HLA-G的一个新发现。最近由Kuroki等人发表的数据[45.展示在胶原诱导的关节炎的动物模型中，与单体相比，PiR-B受体相互作用，PiR-B受体显着表现出显着更高的抗炎作用。迄今为止，在临床应用中SHLA-G二聚体的抗炎作用没有任何数据。在此证明，肾移植患者没有排斥事件的SHLA-G二聚体水平增加与促炎细胞因子IL-2，IL-1的显着较低水平有关。β和IL-6。对控制炎症反应的SHLA-G二聚体的机制非常重要。SHLA-G二聚体的抗炎作用打开了一种新的策略，以产生具有最小副作用的有用药剂以控制炎症反应。

总之，我们的研究表明，sHLA-G二聚体与肾移植患者更好的生存和炎症反应的控制有关。因此，sHLA-G二聚体可能是控制人类同种免疫和炎症反应的潜在生物标志物。

利益冲突

提交人声明没有潜在的利益冲突。

致谢

作者感谢Walidah Walker在数据收集方面的帮助。他们感谢Rhea-Beth Markowitz博士进行讨论和帮助。这项工作得到了Carlos和Marguerite Mason Trust的支持。

参考文献

1. N. Rouas-Freiss，R. M.-B。Gonçalves，C. Menier，J. Dayasset和E. D.Carosella，“直接证据支持HLA-G在保护胎儿免受母体子宫自然杀伤细胞分解中的作用”，“美国国家科学院的诉讼程序，第94卷，第94期21, pp. 11520-11525, 1997。视图:出版商网站|谷歌学术
2. M. Ponte, C. Cantoni, R. Biassoni等人，“妊娠期感知HLA-G1分子的抑制受体:蜕膜相关的自然杀伤细胞表达LIR-1和CD94/NKG2A，并获得p49，一种HLA-G1特异性受体，”美国国家科学院的诉讼程序，卷。96，没有。10，pp。5674-5679，1999。视图:谷歌学术
3. E. D. Carosella，P. Moreau，J.Le Maoult，M. Le Discorde，J.Dayset和N. Rouas-Freiss，“HLA-G分子：从母体胎儿耐受性，”免疫学进步，第81卷，199-252页，2003年。视图:出版商网站|谷歌学术
4. J. S. Hunt，M.G.Petroff，R.H. Mcintire和C. Ober，“Hla-G和怀孕免疫耐受性”美国实验生物学学会联合会杂志第19卷第2期7，pp。681-693,2005。视图:出版商网站|谷歌学术
5. R. Apps, L. Gardner和A. Moffett，《对HLA-G的批判性审视》，免疫学趋势，卷。29，不。7，pp。313-321,2008。视图:出版商网站|谷歌学术
6. E. D. carolsella, B. Favier, N. Rouas-Freiss, P. Moreau，和J. Lemaoult，“超越日益复杂的免疫调节HLA-G分子，”血液号，第111卷10, pp. 4862-4870, 2008。视图:出版商网站|谷歌学术
7. P. Moreau, L. Contu, F. Alba等人，"HLA-G.人体胎盘中的基因多态性：G * 0106等位基因与预坦克敏和流产的可能协会，“生物的繁殖，卷。79，没有。3，PP。459-467，2008。视图:出版商网站|谷歌学术
8. R. Rizzo, A. S. Andersen, M. R. Lassen等，“妊娠早期和晚期孕妇血浆中可溶性人白细胞抗原- g亚型”，美国生殖免疫学杂志第62期5，页320 - 338,2009。视图:出版商网站|谷歌学术
9. M.H.Rarsen，M.Bzorek，M.B.Pard等人，“人白细胞抗原-G在雄性生殖系统和精髓等离子体中”，人类生殖的分子，卷。17，不。12，pp。727-738，2011年。视图:出版商网站|谷歌学术
10. M. Dahl和T.V.F.HVIID，“人白细胞抗原类IB分子在妊娠成功和早期妊娠损失”人类繁殖更新，卷。18，不。1，pp。92-109，2012。视图:出版商网站|谷歌学术
11. D. A. Loisel, C. Billstrand, K. Murray等人，“母性HLA-G.1597ΔC突变与预普利坦斯预痫增加的风险增加，并在非洲裔美国女性怀孕期间减少了HLA-G表达，“人类生殖的分子第19卷第2期3, pp. 144-152, 2013。视图:出版商网站|谷歌学术
12. E. D. CaroSella，P. Moreau，S. Aractingi和N. Rouas-Freiss，“HLA-G：反对炎症性侵略的盾牌”免疫学趋势第22卷第2期10，页553-555,2001。视图:出版商网站|谷歌学术
13. V.Cirulli，J. Zalatan，M. Mcmaster等，“胰岛的班级HLA曲目包括非分类类IB抗原HLA-G，”糖尿病，卷。55，不。5，pp。1214-1222，2006。视图:出版商网站|谷歌学术
14. L. Crisa, M. T. McMaster, J. K. Ishii, S. J. Fisher，和D. R. Salomon，“胸腺上皮细胞亚群与胎儿滋养层细胞共享Ib类HLA-G分子表达的鉴定”，实验医学杂志第186期2，第289-298页，1997。视图:出版商网站|谷歌学术
15. F.Morandi，L.Raffaghello，G.Bianchi等，“人间充质干细胞在HLA级I限制的T细胞反对病毒或肿瘤相关抗原的免疫原性”，“干细胞第26卷第2期5，pp。1275-1287，2008。视图:出版商网站|谷歌学术
16. O. Baricordi, M. Stignani, L. Melchiorri, R. Rizzo，《HLA-G与炎症性疾病》，炎症和过敏药物靶点，第7卷，第5期2，pp。67-74,2008。视图:出版商网站|谷歌学术
17. P.Schütt，V. Rebmann，D.Brandhorst等人，“多种骨髓瘤患者中可溶性人白细胞Antutgen-I，ICTP和Rankl分子的临床意义”人类免疫学，第69卷，第2期2，第79-87页，2008。视图:出版商网站|谷歌学术
18. A. Verloes, H. van de Velde, J. LeMaoult et al.，“HLA-G在人类胚胎干细胞和植入前胚胎中的表达”，免疫学杂志第186期4，PP。2663-2671,2011。视图:出版商网站|谷歌学术
19. R.Rizzo，M.Vercammen，H.Van de Velde，P.A. Horn和V. Rebmann，“HLA-G表达在胚胎，滋养细胞和胚胎干细胞中的重要性”，细胞和分子生命科学第68卷第2期3，pp。341-352，2011。视图:出版商网站|谷歌学术
20. L. Amiot, S. Ferrone, H. Grosse-Wilde，和B. Seliger，“癌症中HLA-G的生物学:治疗干预的候选分子?”细胞和分子生命科学第68卷第2期3, pp. 417-431, 2011。视图:出版商网站|谷歌学术
21. S. Agaugué， E. D. carolsella和N. Rouas-Freiss，“HLA-G在肿瘤逃逸中的作用，通过骨髓源性抑制细胞的扩张和有利于Th2与Th1/Th17的细胞动力学平衡，”血液，第117卷，第117号26, pp. 7021-7031, 2011。视图:出版商网站|谷歌学术
22. S. Zilberman，C.Schenowitz，S.Agaugue等，“HLA-G1和HLA-G5活性二聚体存在于恶性细胞和积液中：肿瘤微环境的影响”欧洲免疫学杂志，第42卷，第2期6, pp. 1599-1608, 2012。视图:出版商网站|谷歌学术
23. A. Naji，C. Menier，G. Maki，E. D.Carosella和N.Rouas-Freiss，“肿瘤B细胞生长受HLA-G / ILT2相互作用损害，”白血病第26卷第2期8，第1889-1892页，2012。视图:出版商网站|谷歌学术
24. F. Morandi, P. Scaruffi, F. Gallo等，“骨髓浸润的人神经母细胞瘤细胞表达高水平的钙保护素和HLA-g蛋白，”普罗斯一体，第7卷，第5期1, article e29922, 2012。视图:出版商网站|谷歌学术
25. G. Curigliano, C. Criscitiello, L. Gelao，和A. golddhirsch，“分子途径:人类白细胞抗原G (HLA-G)”，临床癌症研究第19卷第2期20, pp. 5564-5571, 2013。视图:出版商网站|谷歌学术
26. V. Pistoia，F.Morandi，G. Bianchi，A.Pezzolo，I.Prigione和L. Raffaghello，神经母细胞瘤的免疫抑制微环境，“在肿瘤领域，卷。3，第167,2013条。视图:出版商网站|谷歌学术
27. I. J. Wastowski，R.T. Simoes，L. Yaghi等，“人白细胞抗原-G经常在胶质母细胞瘤中表达，并且可以诱导体外5-aza-2 ' -脱氧胞苷和干扰素-γ治疗方法:来自多中心研究的结果。美国病理学杂志，卷。182年，没有。2，pp。540-552,2013。视图:出版商网站|谷歌学术
28. S. Liang，B.Baibakov和A. Horuzsko，HLA-g通过PiR-B免疫抑制剂受体抑制鼠树突细胞的功能，“欧洲免疫学杂志，第32卷，第2期9、2002年第2418-2426页。视图:出版商网站|谷歌学术
29. S. Liang和A. Horuzsko，“通过对HLA-g的免疫抑制作用接合来调动树突细胞耐受性，”人类免疫学号，第64卷。11，PP。1025-1032，2003。视图:出版商网站|谷歌学术
30. J. LeMaoult, K. Zafaranloo, C. le Banff, and E. D. carsella，“HLA-G上调抗原呈递细胞、NK细胞和T细胞中的ILT2, ILT3, ILT4和KIR2DL4，”美国实验生物学学会联合会杂志第19卷第2期6，页662-664,2005。视图:出版商网站|谷歌学术
31. A. Horuzsko，“HLA-G对树突状细胞的耐受性，”欧洲免疫学杂志，卷。35，不。4，pp。1133-1142，2005。视图:出版商网站|谷歌学术
32. S. Liang, V. Ristich, H. Arase, J. Dausset, E. D. carrosella, and A. Horuzsko，“通过HLA-G和ILT4调节树突细胞分化需要IL-6-STAT3信号通路”，美国国家科学院的诉讼程序，卷。105，没有。24，pp。8357-8362,2008。视图:出版商网站|谷歌学术
33. W.张，梁，J.Wu和A. Horuzsko，“人类抑制受体免疫球蛋白样转录物2放大了促进同种异体移植物的长期存活的CD11b + Gr1 +骨髓衍生的抑制细胞”移植，卷。86，没有。8，pp。1125-1134,2008。视图:出版商网站|谷歌学术
34. C. Li，B.L.Houser，M.L.Nicotra和J.L.Strominger，“HLA-G同源蛇诱导的细胞因子分泌物通过HLA-G受体对人蜕膜巨噬细胞和自然杀伤细胞，”美国国家科学院的诉讼程序，卷。106，没有。14，pp。5767-5772，2009。视图:出版商网站|谷歌学术
35. S. Rajagopalan和E. O. Long，“Kir2DL₄（光盘_15.8d): HLA-G激活受体。免疫学中的边疆，卷。3，第258,2012,2012。视图:出版商网站|谷歌学术
36. I. Zidi, C. Guillard, C. Marcou等人，“肿瘤细胞HLA-G1蛋白水解的增加:一个由NF-控制的调节途径κB诱导者，“细胞和分子生命科学，卷。63，否。22，pp。2669-2681,2006。视图:出版商网站|谷歌学术
37. R. Rizzo, A. Trentini, D. Bortolotti等，“基质金属蛋白酶- (MMP-2)通过细胞表面蛋白水解脱落产生可溶性HLA-G1”，分子和细胞生物化学，卷。381，没有。1-2，pp。243-2255,2013。视图:出版商网站|谷歌学术
38. P.Schütt，B.Schütt，M.Witala等，“肺癌患者中可溶性人白细胞抗原和总人白细胞抗原类分子的预后相关性”人类免疫学，第71卷，第71期5，页489-495,2010。视图:出版商网站|谷歌学术
39. J. Qiu, P. I. Terasaki, J. Miller, K. Mizutani, J. Cai, and E. D. carsella，“可溶性HLA-G表达与肾移植接受，”美国移植杂志，卷。6，不。9，pp。2152-2156,2006。视图:出版商网站|谷歌学术
40. S.Le Rond，C.Azéma，I. Krawice-Rayanne等，“支持通过诱导免疫抑制/调节T细胞，”支持HLA-G5在同种异体移植接受中的作用“的证据免疫学杂志，卷。176，不。5，pp。3266-3276，2006。视图:谷歌学术
41. J. Luque，M. I. Torres，M. D.Aumeree等，“心脏移植中可溶性HLA-G：它们与拒绝发作和免疫抑制治疗的关系，”人类免疫学，卷。67，没有。4-5，pp。257-263,2006。视图:出版商网站|谷歌学术
42. T. Gonen-Gross，H. Achdout，R.Gazit等，细胞表面上的HLA-G蛋白的复合物对白细胞IG样受体-1功能很重要，“免疫学杂志(第171卷)3，页1343-1351,2003。视图:谷歌学术
43. M.Shiroishi，K.Kuroki，L.Rasubala等人，“白细胞IG样受体B2（LILRB2 / LIR2 / ILT4 / CD85D）的非核实MHC分子HLA-G的结构基础（LILRB2 / LIR2 / CD85D）”，“美国国家科学院的诉讼程序号，第103卷。44, pp. 16412-16417, 2006。视图:出版商网站|谷歌学术
44. M. Shiroishi, K. Kuroki, T. Ose等，“高效白细胞g样受体信号传导和二硫化物连接HLA-G二聚体的晶体结构”，生物化学杂志，卷。281，不。15，pp。10439-10447，2006。视图:出版商网站|谷歌学术
45. K. Kuroki, K. Hirose, Y. Okabe等，“二硫化物关联HLA-G二聚体在胶原诱导关节炎小鼠中的长期免疫抑制作用，”人类免疫学第74卷第1期4, pp. 433-438, 2013。视图:出版商网站|谷歌学术
46. J. E. Boyson，R.Erskine，M.C.C.WITMAN等人，“二硫键介导的HLA-G对细胞表面的二聚化”，美国国家科学院的诉讼程序，第99卷，第5期。25，页16180 - 16185,2002。视图:出版商网站|谷歌学术
47. P. J. Morales, J. L. Pace, J. S. Platt等人，“HLA-G2亚型胎盘细胞表达仅限于侵袭性滋养细胞表型。”免疫学杂志(第171卷)11，第6215-6224页，2003。视图:谷歌学术
48. T. Gonen-Gross，R. Gazit，H. Achdout等，“细胞表面上的HLA-G蛋白质的特殊组织”人类免疫学号，第64卷。第11页，第1011-1016页，2003。视图:出版商网站|谷歌学术
49. K. Y. Howyin，M. Loustau，J.Wu等，“HLA-G同种型的多端结构通过差异结合到LILRB受体”，“细胞和分子生命科学，第69卷，第2期23, pp. 4041-4049, 2012。视图:出版商网站|谷歌学术
50. J.Lemaoult，M. Daouya，J.Wu，M. Loutsau，A. Horuzsko和E. D.Carosella，“合成HLA-G蛋白，用于移植治疗用途”美国实验生物学学会联合会杂志，卷。27，不。9，pp。3643-3651,2013。视图:出版商网站|谷歌学术

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