表达PD-L1的树突状细胞在急性HSV-1感染期间有助于病毒性抗性

抽象的

抑制受体程序性死亡1 (PD-1)及其配体(PD-L1/PD-L2)被认为在慢性病毒感染期间的免疫监测中发挥作用。受体/配体对在急性感染期间的作用尚不清楚。为了确定PD-L1和PD-L2在急性眼部单纯疱疹病毒1型(HSV-1)感染中的作用，给HSV-1感染的小鼠注射PD-L1或PD-L2中和抗体，评估病毒负荷和宿主细胞免疫应答。抗PD-L1处理小鼠的角膜和三叉神经节(TG)中病毒滴度升高，这与表达cd80的树突状细胞(PD-L1)数量减少相对应⁺树突状细胞和hsv -1特异性CD8⁺排水（下颌）淋巴结（MLN）内的T细胞。相比之下，抗PD-L2处理对病毒复制或MLN群体的变化没有影响。值得注意的是，来自抗PD-L1处理的小鼠的CD11C富含MLN细胞的分析显示出功能性损害。这些研究表明，在急性HSV-1感染期间，表达PD-L1表达的树突状细胞对于抗病毒防御是重要的。

1.介绍

对微生物病原体的炎症反应可能对宿主具有不利影响，特别是在诸如眼睛的脆弱位点。在眼睛的前段内的真菌，细菌和病毒感染可能导致白细胞的显着渗透，以及角膜中的血管生成（淋巴结和血管生成）[1那2］．单纯疱疹病毒类型1（HSV-1）是α疱疹病毒家族的神经侵蚀成员，以及一种感染60-90％的成人全球人群的常见人群[3.］．HSV-1感染可能对视力具有破坏性后果，因为对来自感官神经节中发现的储层的潜伏病毒的潜在病毒（即，三叉神经节[Tg]）的潜伏免疫反应的潜在免疫反应的结果具有稳健的免疫反应[4.］．活化开始于被感染神经元中溶解的病毒复制周期的恢复。感染性病毒粒子沿着三叉神经纤维通过轴突的顺行运输到达上皮细胞表面。三叉神经为嘴唇、鼻子和眼睛提供感觉;因此，每个部位在激活后都容易受到感染。

潜伏的HSV-1再活化导致角膜基质层反复炎症和瘢痕形成，最终发展为疱疹性基质角膜炎(HSK) [1那5.］．虽然有一些白细胞亚群有助于组织病理学，CD4⁺Th1细胞在干扰素-的产生中起着关键作用γ.(IFN -γ.）[1那5.］．因此，控制对HSV-1的免疫反应的炎症性是为了保护视轴的理想结果。

已经显示有许多候选分子和途径，以有助于组织病理学。一种这样的途径是PD-1：PD-L信号通路，导致T细胞耗尽的阴性调节途径。编程死亡1（PD-1）是在活化的T细胞上发现的细胞表面抑制受体。在静息T细胞，B细胞，巨噬细胞和树突细胞上发现编程死亡配体1（PD-L1），而编程死亡配体2（PD-L2）的表达仅限于巨噬细胞，树突细胞和活化的T细胞[6.-8.］．T细胞耗尽包括IL-2产生的损失和增殖和杀伤能力的降低[9.］．PD-1：PD-L信号在维持外周细胞耐受性和诱导的调节性T细胞的产生中也发挥着重要作用[10.那11.］．PD-1：PD-L发信号在慢性病毒感染等慢性病毒感染等中，也已经广泛研究了LCMV，HIV和HCV [12.-14.］．在LCMV或HIV感染期间，通过阻断PD-1：PD-L信号降低T细胞耗尽显着降低了病毒载荷[12.那13.］．在慢性病毒感染期间，许多因素可导致t细胞衰竭，包括抗原暴露水平、CD4 t细胞帮助的可用性和抗原提呈细胞(APC)数量的变化[13.］．此外，APC表面表面表达的变化可以显着改变T细胞效应函数和病毒感染过程[14.］．

随后用HSV-1的眼部感染后，PD-1表达在角膜和排水淋巴结中的CD4 T细胞上上调[15.］．类似地，PD-L1上调两种组织中的巨噬细胞[15.］．研究还表明，阻断PD-1: HSV-1期间的PD-L信号通过增加分泌IFN-的hsv特异性CD4 T细胞的增殖来增强病理γ.[15.］．最近的研究表明潜伏型HSV-1水平与PD-1表达之间存在相关性[16.那17.］．然而，没有研究评估PD-1: PD-L信号在急性HSV-1感染期间的影响。为了解决这个问题，我们比较了hsv -1感染的小鼠，给它们注射了PD-L1和PD-L2的中和抗体，从病毒在感染组织中的复制、宿主在角膜、TG和引流淋巴结内的表型和功能上的细胞免疫反应、以及对t细胞活化关键的细胞内信号分子的特性分析。本研究结果表明，PD-L1在HSV-1感染过程中具有独特的作用，其中PD-1阻断:PD-L1信号通路降低树突状细胞的活化，导致病毒载量增加。

2.材料和方法

2.1。病毒和小鼠

C57BL/6J小鼠来自Jackson实验室，并在Dean McGee眼科研究所保存。HSV糖蛋白- b - (gB-)特异性t细胞受体转基因小鼠从Francis Carbone博士(墨尔本大学)获得，并在Dean McGee眼科研究所保存。动物治疗符合国家卫生研究院实验室动物护理和使用指南。所有程序都得到了俄克拉荷马大学健康科学中心和迪恩麦吉眼科研究所动物和护理使用委员会的批准。HSV-1(菌株McKrae)的生长和维持如前所述[18.］．

2.2。HSV-1感染和中和抗体治疗

雄性和雌性C57BL/6小鼠(6 - 10周龄)分别腹腔注射xylazine (6.6 mg/kg)和氯胺酮(100 mg/kg)麻醉，然后用25 5/8号针划伤角膜。然后涂抹泪膜，角膜局部接种1 / 3的1000个HSV-1斑块形成单位(PFU)μ.L RPMI-1640培养基。在感染后的第2、4和6天，给小鼠注射200μ.G通过I.P中和PD-1，PD-L1，PD-L2或同种型对照（IgG）的抗体。注射。从Bioxcell获得中和抗体和大鼠IgG。HSV-1病毒滴度在指定的组织中有时测定P.I.通过如前所述的斑块测定[19.］．

2.3。流式细胞仪

一种t the indicated time p.i., mice were exsanguinated and the cornea, draining (mandibular) lymph node (MLN), and TG were removed, processed, labeled with Abs, and analyzed using a Coulter Epics XL flow cytometer (Beckman coulter) with the absolute number of cells residing in the indicated tissue determined as previously described [20.］．以下ABS用于鉴定细胞群体;抗CD3（1742），抗CD4（RM4-5），抗CD8α.（53-6.7），抗NK1.1（PK136），抗CD45（30-F11），抗F4 / 80（MCA497FA），抗GR1（RB6-8C5），抗CD11C（HL3），抗-B220（RA3-6B2）。对于四聚染色，用HSV肽GB标记细胞_{498 - 505}（Ssiefarl） - 特异性主要的组织相容性复合体（MHC四聚体实验室，贝勒医学院），抗CD8和抗CD45。对于T，还评估了MLN和角膜样品的单细胞悬浮液_reg使用商业套件（eBiosciences）的细胞。

2.4。悬架阵列

在表明时间P.I.，角膜，Tg和MLN从放入的小鼠中除去并测定检测CXCL1，CCL2，CCL5和IFN-γ.使用悬架阵列系统（BIO-RAD）。

2.5。埃莉莎

在指示的时间P.I.，从放血的小鼠中除去TG和角膜并置于500 L在冰上含有蛋白酶抑制剂混合物（Calbiochem）的1x PBS。在用组织造织（Fisher Scientific）均质化之后，通过离心澄清匀浆1分钟。根据制造商的说明书（Quantikine免疫测定; R和D系统）由ELISA确定CXCL10水平。

2.6。MLN T细胞共培养

评估用抗PD-L1，抗PD-L2或对照IgG，CD11C处理的HSV-1感染小鼠的MLN T细胞功能⁺从未处理的c57bl /6小鼠脾脏中使用MACS珠粒和柱(Miltenyi Biotec)纯化细胞。将10万个cd11c丰富的细胞接种到96孔的圆底平板上，在多重感染(MOI)为5时，用紫外线灭活的HSV-1脉冲2小时。培养后，从cd11c富集细胞和单细胞悬液中除去培养基加入来自用抗PD-L1，抗PD-L2或对照IgG处理的HSV-1感染小鼠的MLN细胞。将培养物在37℃下孵育6天，5％CO₂和95％的湿度。孵育后，除去上清液并测定IL-2，IL-10和IFN-悬浮阵列（BIO-RAD）的水平。使用从用抗PD-L1，抗PD-L2或对照IgG处理的HSV-1感染的小鼠与MLN细胞一起使用的非脉冲CD11C富集的细胞测定细胞因子产生水平。从相应的UV失活的HSV-1脉冲样品中减去细胞因子产生的背景水平。

2.7。MLN CD11C细胞共培育

评估MLN CD11c⁺CELL功能，CD11C⁺使用MAC珠粒和柱（Miltenyi Biotec）富含用抗PD-L1，抗PD-L2或对照IgG处理的HSV-1感染的小鼠MLN的细胞。CD11C富集的MLN细胞（将细胞/孔）接种到96孔圆底板中，并在5的MOI下用UV灭活的HSV-1处理2小时。孵育后，将培养基从MLN细胞中除去，加入来自HSV GB特异性T细胞受体转基因小鼠的脾细胞。将培养物在37℃，5％CO孵育3天₂和95％的湿度。孵育后，除去上清液并测定IL-2，IL-10和IFN-悬浮阵列（BIO-RAD）的水平。使用来自用抗PD-L1，抗PD-L2或对照IgG处理的HSV-1感染的小鼠的非脉冲CD11C富集细胞测定细胞因子产生水平，从未从未感染的C57BL / 6小鼠与MLN细胞一起获得。从相应的UV失活的HSV-1脉冲样品中减去细胞因子产生的背景水平。IL-2，IL-10的平均背景水平为9.3 pg / ml，对于IL-10，347.8 pg / ml，用于IFN-γ.。

2.8。统计数据

统计模块棱镜用于执行未配对的双尾学生- 用Tukey的差异和分析差异（ANOVA）-测试。所有错误栏代表手段的标准误差。一种值<0.05被认为是显着的同学对照对抗PD-1-，抗PD-L1-或抗PD-L2处理的小鼠的比较。

结果

3.1。抗PD-L1抗体处理增加了HSV-1病毒载量

为了评估HSV-1感染期间PD-1：PD-L信号的影响，C57BL / 6小鼠用HSV-1感染，然后用抗PD-L1，抗PD-L2处理，防PD-1处理或同种型控制IgG。在7天，P.I.，通过斑块测定除去角膜和Tg，用于传染病毒的传染性病毒。与抗PD-L2或同种型对照治疗的小鼠相比，在抗PD-L1抗体处理的小鼠的角膜和Tg中显着升高了病毒滴度（图1)．通过比较，与对照处理或抗PD-L2处理的动物相比，在抗PD-1抗体处理的小鼠的角膜和Tg中回收的HSV-1水平没有差异（图1)．

3．2．PD-L1和PD-L2中和抗体治疗对MLN白细胞亚群的影响

为了阐明使用中和性PD-L1抗体增加HSV-1病毒滴度的机制，我们首先使用流式细胞术研究了HSV-1感染、抗PD-L1-、抗pd - l2 -或对照igg处理的小鼠MLN中白细胞亚群的可能变化。如预期的那样，但之前从未有报道过，用PD-L1中和抗体治疗感染小鼠后，显著降低了表达PD-L1的CD11c⁺MLN中的细胞（图2（b）)，显著增加表达pd - l2的CD11c的数量⁺树突状细胞(图2 (c))．发现用PD-L2中和抗体处理的动物具有显着较少的PD-L2表达CD11C⁺树突状细胞(图2 (c))，但表达pd - l1的树突状细胞数量没有明显变化(图2（b）)．兴趣，有一个CD11C的损失⁺细胞表达CD80⁺在用抗PD-L1处理但不抗PD-L2抗体或同种型对照（图2（a）)．但是，CD11C的数量没有区别⁺与对照处理的小鼠相比，在抗PD-L2抗体处理的小鼠MLN中表达CD80的树突状细胞（图2（a）)．而CD86是一种共鸣分子，也是由活化的树突细胞表达的，MLN CD11c的数量⁺表达CD86响应于HSV-1的细胞低，因此，不追求CD86表达的测量。

由于驱动T细胞克隆扩增的主要共刺激分子缺失，我们接下来研究了与病毒监测相关的效应免疫细胞。用抗pd - l1或抗pd - l2抗体治疗hsv -1感染的小鼠，并没有改变CD4的扩张⁺或cd8⁺t细胞群居住在MLN(数据未显示)。此外，CD4的数量没有变化⁺ （CD3.⁺CD4.⁺Foxp3.⁺）MLN中的细胞比较对照治疗的抗PD-L1和抗PD-L2抗体处理的小鼠（图3(一个))．但是，HSV-1 GB特异性（TET）显着减少了⁺），CD8⁺t细胞数量(图3 (b)和3 (c))．抗PD-L2抗体治疗还抑制了HSV-1 GB特异性的数量（Tet⁺），CD8⁺t细胞数量，但损失不显著(图3 (b)和3 (c))．还应该注意到，用抗pd - l1抗体治疗HSV-1感染的小鼠，CD4的数量显著增加⁺PD1⁺MLN内的T细胞，但对PD1没有影响⁺CD8上的表达⁺T细胞（图3 (d)和3 (e))．

3.3。抗PD-L1或抗PD-L2治疗后TG和角膜的白细胞谱

由于抗pd - l1抗体治疗后，hsv -1感染的小鼠在引流淋巴结的白细胞亚群中表现出选择性的变化，并且在眼部感染后的角膜和TG中拥有明显更多的病毒，我们评估了受感染组织中的白细胞亚群，作为一种将病毒载量与白细胞浸润变化联系起来的手段。TG白细胞亚群分析包括NK细胞(CD3^-NK1.1.⁺），CD4 T细胞（CD3⁺CD4.⁺），CD8 T细胞（CD3⁺CD8.⁺），HSV-1 GB特异性CD8 T细胞（TET⁺CD8.⁺），血浆骨质特性细胞（CD11c⁺B220⁺），常规树突细胞（CD11c⁺B220^-），活化巨噬细胞（F4 / 80⁺GR1.⁺)和中性粒细胞(F4/80^-GR1.⁺)显示没有显著差异(数据未显示)。与上述结果相似，分析CD4 T细胞(CD3⁺CD4.⁺），CD8 T细胞（CD3⁺CD8.⁺)和HSV-1 gb特异性CD8 T细胞(Tet⁺CD8.⁺)在不同治疗组之间没有显著差异(数据未显示)。CD4的数量⁺PD1⁺同时检测了HSV-1感染小鼠角膜的T细胞，在不同治疗组之间没有观察到显著差异(数据未显示)。

3．4．抗pd - l1或抗pd - l2治疗后TG和角膜的细胞因子水平

感染部位的细胞因子和趋化因子显着影响了先天和适应性免疫反应。关于眼部HSV-1感染，IFN-γ.， CCL2, CCL5, CXCL1和CXCL10已被发现在角膜和TG中表达，并被认为是通过招募效应免疫细胞直接或间接清除病原体的工具[21.］．因此，我们研究了角膜和Tg中的这些分析物，因为另一种方法是解释抗PD-L1抗体处理的小鼠与对照和抗PD-L2抗体处理基团的病毒载量的差异。抗病毒细胞因子IFN的水平 -γ.没有发现各组处理动物的TG有差异(图4(一))．在类似的显示器中，还发现趋化因子CCl2，CCl5和CXCL1水平在各种处理的小鼠组的TG中始终如一地表达（图4 (b)-4 (d))．然而，CXCL10在抗PD-L1处理的小鼠的Tg中显着升高（图4 (e))．干扰素的比较,γ.不同抗体治疗组角膜的CCL2、CCL5、CXCL1和CXCL10水平无差异(数据未显示)。

3.5。PD-1封锁后MLN T细胞和树突细胞的功能能力：PD-L信号

由于白细胞浸润到感染组织中可能不能反映细胞在抗原应答方面的状态，因此我们评估了来自hsv -1感染小鼠的T细胞的功能能力，分别用抗pd - l1、抗pd - l2或同型对照IgG处理。由于角膜和TG中T细胞的数量较低，因此不可能在每个动物的基础上准确地测量它们的状态。因此，从感染小鼠中分离出MLN，制成单细胞悬液。来自同型对照、抗pd - l1或抗pd - l2抗体处理小鼠的淋巴结细胞，然后与来自未处理、未感染小鼠脾脏的cd11c富集细胞共培养。cd11c富集的细胞在培养前用uv灭活的HSV-1致敏。培养6 d后，收集培养细胞上清液，悬浮阵列法检测细胞因子含量。结果显示，来自抗体处理的小鼠组的MLN T细胞在产生IL-2、IL-10和IFN-方面与抗原脉冲树突状细胞反应相似γ.（数据未显示）。由于数据表明在T细胞的水平下未发现缺乏症，因此研究了抗原呈现的效率。来自用抗PD-L1，抗PD-L2或同种型对照IgG处理的HSV-1感染小鼠的CD11C的MLN细胞与UV灭活的HSV-1脉冲，并通过来自Naive HSV-1 GB的脾细胞与脾细胞一起培养特异性T细胞受体转基因小鼠。孵育3天后，收集上清液并测定细胞因子含量。如图所示5 (c)，HSV GB特异性T细胞IL-2产生的显着降低。同样地，当与来自抗PD-L2抗体处理的小鼠一起温育时，也减少了来自HSV GB特异性T细胞的IL-2的水平，但这种水平没有意义（图5 (c))．相比之下，几乎等同于IL-10和IFN-γ.在HSV GB特异性T细胞的上清液中被发现与来自所有治疗组的肽脉冲树突细胞刺激的小鼠（图5(一个)和5 (b))．在HSV GB特异性转基因T细胞中发现这种稳健的反应有些令人惊讶的是，相对于IFN-γ.和IL-10生产，两种细胞因子通常驱动相反的t_H回复。

4。讨论

在这项研究中，我们报道了在急性HSV-1感染期间使用PD-L1抗体显著增加角膜中的病毒载量和TG，与表达PD-L1的树突状细胞的丢失和CD11c表达抗原的能力减弱相关⁺细胞。在慢性LCMV感染期间，发现抗体抗体的小鼠PD-1：PD-L1信号传导的小鼠改善CD8的效应功能⁺T细胞和减少病毒滴度[22.］．通过抗PD-L1抗体处理阻断PD-1途径的治疗效果在HIV感染期间进一步举例说明，其中抗体处理增强了HIV特异性CTL增殖和细胞因子生产[23.］．它可能预防PD-1：PD-L1相互作用衰减T细胞耗尽并有助于CD8⁺慢性LCMV感染中证明的T细胞恢复[24.］．然而，PD-L1的表达可以在不同的水平上影响适应性免疫反应。

增加了_reg细胞可以损害效应T细胞，并作为结果，导致病毒载量的增加。然而，急性HSV-1感染期间的抗pd - l1治疗并没有改变T_regMLN中发现的细胞抗pd - l1抗体也没有改变MLN中t细胞群或NK细胞的扩增。然而，共刺激分子CD80在CD11c上显著下调⁺用中和PD-L1抗体处理的小鼠的细胞。由于抗PD-L2抗体的等效剂量和治疗方案对CD11C没有这种作用⁺MLN内的细胞。CD80表达缺失与HSV-1 gb特异性CD8数量显著减少相关⁺MLN内的T细胞。最近的一项研究表明，树突细胞的耗尽或CD80 / 86信号传导的阻断导致病毒特异性CD8减少⁺感染流感期间的T细胞和受损的病毒清除[25.］．还建议通过CD80 / CD86没有CD28信号传导可以通过T细胞抑制自分泌IL-2分泌。此外，重组IL-2治疗CD80^−−/CD86.^−−/小鼠恢复了效应CD8 T细胞的扩增[25.］．以上结果表明，中和PD-L1可能通过下调CD80/CD86等共刺激分子来破坏适当的抗原提呈。

而我们发现抗原细胞毒性T细胞的数量减少的引流淋巴结anti-PD-L1 antibody-treated老鼠,这样的损失并不是翻译类似数量的1型单纯疱疹病毒的感染组织内gB-specific TG的CD8 T细胞恢复所有HSV-1-infected antibody-treated组。因此，假设效应细胞的功能而不是细胞的绝对数量可能受到损害，从而无法有效监测病毒的复制和传播。由于从感染组织中恢复的细胞数量较少，我们研究了从引流淋巴结(MLN)中获得的T细胞。因为PD-1在CD4上表达增强⁺驻留在抗PD-L1抗体处理的小鼠的MLN中的T细胞和PD-1表达先前已与抑制抗病毒免疫相关[26.]，预期效应功能的固有缺陷似乎是一个合理的研究目标。使用一个系统在体外通过共培养，我们能够从受感染的抗体治疗的小鼠中评估MLN t细胞的功能。分析显示，来自HSV-1感染、抗pd - l1或抗pd - l2抗体处理的小鼠的T细胞能够产生IL-2、IL-10和IFN-类似于来自同种型抗体对照治疗的小鼠的T细胞。该结果与Jun等人观察到的结果相反。，其中从抗PD-L1抗体处理的小鼠中分离的MLN T细胞脉冲用UV - 失活的HSV-1产生的两倍 -γ.作为来自对照小鼠的细胞[15.］．前一项研究之间的差异[15.[目前的研究包括使用HSV抗性C57BL / 6小鼠（对于目前的研究），与BALB / C相比，病毒（McKrae与RE）的菌株用于感染小鼠，以及抗PD-的过程L1 antibody treatment (days 2, 4 and 6 p.i. in the present study versus the day before and 2 days p.i. in the previous study). Moreover, our study validated the loss of PD-L1 expressing dendritic cells, whereas the study by Jun et al. did not. In a reciprocal fashion, we found CD11c-enriched cells from the MLN of anti-PD-L1 antibody-treated mice were deficient in their ability to stimulate HSV gB-specific CD8⁺IL-2的T细胞生产。这种观察与抗原特异性CD8的克隆扩增的降低一致⁺在抗PD-L1抗体处理的小鼠的MLN中的T细胞。然而，结果与抗原呈现中的全局功能损失不一致，因为大量IFN-γ.响应于HSV脉冲APC，通过HSV GB特异性T细胞产生IL-10。最近据报道了IL-2水平以补充或增强免疫应答，包括抗病毒活动[27.］．然而，IL-2生产的变化如何促进存在研究中的病毒间隙目前不清楚。

最近关于HSV-1眼部感染和PD-L1的研究主要集中在疱疹性基质角膜炎(HSK)、PD-L1的表达以及对潜伏期的影响[15.-17.那25.那26.］．初步研究显示PD-1表达在CD4上上调⁺引流LN中的T细胞体内封锁PD-1：PD-L1信号传导增强型HSK [15.］．最近的研究专注于T细胞耗尽和HSV-1潜伏期。弗兰克等人的研究。透露了CD4⁺急性HSV-1感染期间的t细胞消融改变了HSV-1潜伏期的维持，并导致HSV-1特异性CD8的产生⁺T细胞功能妥协[28.］．这种t细胞群体也表现出PD-1表达水平的增加[28.］．但是，CD4之后的PD-1：PD-L1信号传输⁺T-Cell消融恢复了HSV-1特定CD8的功能能力⁺T细胞(28.］．进一步研究研究HSV-1潜伏期揭示了眼病，潜伏期的严重程度，PD-1在感染小鼠中的表达之间存在强烈的相关性[16.那17.那29.］．最近，已经描述了对HSV-1 LAT（潜伏相关的转录物）的直接作用，其中LAT表达上调神经元衍生细胞上的PD-L1表达，进一步促进T细胞耗尽的环境[30.］．这些研究表明PD-1：PD-L1信号传导在HSV-1感染期间介导T细胞耗尽和潜伏期。然而，直到现在迄今为止在急性HSV-1感染期间研究了PD-1：PD-L1信号传导的影响。向当前知识库添加关于PD-1的知识基础：PD-L1信号传导和慢性病毒感染进一步突出了该信号传导途径的多方面性质。

致谢

作者要感谢郑敏的专业技术支持，以及与Chris Conrady和Todd Wuest进行的深思熟虑的讨论。这项工作由美国国立卫生研究院资助，EY021238，给D. Carr。额外的支持包括P20 RR017703，一项不受限制的预防失明研究赠款，以及向D. Carr颁发的OUHSC长老会健康基金会主席教授奖。资助机构对这项研究的任何部分都没有影响。

参考

1. D. J.J.Carr，P.Härle和B.M.Gebhardt，“对眼疱病毒1型感染的免疫应答”，“实验生物学和医学，卷。226，没有。5，pp。353-366,2001。视图:谷歌学术
2. T. R.Wuest和D.J.J.Carr，“VEGF-A通过HSV-1感染细胞的表达驱动角膜淋巴管生成”实验医学杂志(第207卷第66期)1，第101-115页，2010。视图:出版商网站|谷歌学术
3. J. S. Smith和N.J.罗宾逊，“具有单纯疱疹病毒的疱疹病毒类型的年龄特异性患病率为2和1：全球评论”中国传染病杂志， vol. 186，增编1,pp. S3-S28, 2002。视图:出版商网站|谷歌学术
4. R. J. Whitley和B. Roizman，“单纯疱疹病毒感染”，《柳叶刀》，卷。357，没有。9267，PP。1513-1518,2001。视图:出版商网站|谷歌学术
5. S. Wickham和D. J. J. Carr，“分子拟态与旁观者激活:疱疹性间质角膜炎”自身免疫，第37卷，no。5，页393-397,2004。视图:出版商网站|谷歌学术
6. n . Messal N.-E。Serriari, S. Pastor, J. A. Nunès和D. Olive，“PD-L2在激活的人类T细胞上表达并调节它们的功能，”分子免疫学，卷。48，没有。15-16，pp。2214-2219，2011。视图:出版商网站|谷歌学术
7. Y. Latchman，C. R. Wood，T.Chernova等，“PD-L2是PD-1的第二个配体，并抑制T细胞激活”自然免疫学，第2卷，第2卷。3, 261-268页，2001。视图:出版商网站|谷歌学术
8. S. Y. Tseng，M.Otsuji，K.Gorski等，“B7-DC，一种新的树突细胞分子，具有有效的T细胞的性刺激性质”，实验医学杂志第193卷，第4期。7，第839-846页，2001。视图:出版商网站|谷歌学术
9. E. J. Wherry，“T细胞疲惫，”自然免疫学，卷。12，pp。492-499，2011。视图:谷歌学术
10. M. E.Keir，S. C. Liang，I. Guleria等，“PD-L1的组织表达介导外周T细胞耐受性”实验医学杂志，卷。203，没有。4，pp。883-895,2006。视图:出版商网站|谷歌学术
11. L. M. Francisco, V. H. Salinas, K. E. Brown等人，“PD-L1调节诱导调节性T细胞的发育、维持和功能，”实验医学杂志第206卷，第2期。13, 3015-3029页，2009。视图:出版商网站|谷歌学术
12. S. D. Blackburn，H. Shin，W. N. Hained等，“CD8的CoreGulation⁺慢性病毒感染过程中多重抑制性受体导致的T细胞衰竭自然免疫学，卷。10，不。1，pp。29-37,2009。视图:出版商网站|谷歌学术
13. G. J.Freeman，E. J. Wherry，R. Ahmed和A. H. Sharpe，通过PD-1-PD-1配体封闭式重新发明耗尽的HIV特异性T细胞，“实验医学杂志，卷。203，没有。10，pp。2223-2227,2006。视图:出版商网站|谷歌学术
14. D. Trabattoni, M. Saresella, M. Biasin等人，“B7-H1在HIV感染中表达上调，是疾病进展的一种新的替代标记，”血液，卷。101，没有。7，pp。2514-2520,2003。视图:出版商网站|谷歌学术
15. H. Jun，S.K.Seo，H. Y.Jeong等，“B7-H1（CD274）抑制了引入疱疹基质角膜炎（HSK）的发育，”费用字母，第579卷，no。27, pp. 6259-6264, 2005。视图:出版商网站|谷歌学术
16. S. J. Allen, K. R. Mott, M. Zandian和H. Ghiasi，“在1型单纯疱疹病毒感染的小鼠中，用不同的病毒抗原进行免疫可以改变T细胞衰竭和潜伏期的模式，”病毒学杂志第84卷，第2期。23，页12315-12324,2010。视图:出版商网站|谷歌学术
17. K.R. Mott，C.J.Bresee，S.J.Allen，L.Benmohamed，S.L.Wechsler和H.Ghiasi，单纯疱疹病毒类型1潜水级别与角膜疤痕和CD8疲惫的严重程度相关⁺潜伏感染小鼠三叉神经节中的T细胞病毒学杂志，卷。83，没有。5，pp。2246-2254,2009。视图:出版商网站|谷歌学术
18. W. P. Halford, B. M. Gebhardt和D. J. J. Carr，“单纯疱疹病毒1型复活的机制”，病毒学杂志第70卷，没有。8，第5051-5060页，1996。视图:谷歌学术
19. B. A.Austin，W.P. Halford，B.R.R.G.Inariams和D.J.J.Carr，“寡核苷酸合成酶/蛋白激酶r途径和αβ.TCR.⁺腺病毒载体IFN-需要T细胞γ.角膜中单纯疱疹病毒-1的抑制"免疫学杂志第178卷第2期8, pp. 5166-5172, 2007。视图:谷歌学术
20. T. R. Wuest和D. J. Carr，“CXCL10缺陷导致的CXCR3信号失调损害了对单纯疱疹病毒1感染的抗病毒应答，”免疫学杂志，卷。181年，没有。11，PP。7985-7993，2008。视图:谷歌学术
21. T. R. Wuest和D. J.J.Carr，“趋化因子在单纯疱疹病毒-1感染期间的作用”，生物科学的边疆，卷。13，不。13，pp。4862-4872，2008。视图:出版商网站|谷歌学术
22. D. L. Barber，E. J. Wherry，D.Masopust等，“慢性病毒感染期间耗尽的CD8 T细胞中的恢复功能”，自然，卷。439，没有。7077，PP。682-687，2006。视图:出版商网站|谷歌学术
23. D. E. Kaufmann和B. D. Walker，“HIV感染中的PD-1和CTLA-4抑制协同信号通路及其治疗干预的潜力，”免疫学杂志，卷。182年，没有。10，pp。5891-5897，2009。视图:出版商网站|谷歌学术
24. S. D. Blackburn，A.Crawford，H. Shin，A. Polley，G. J.Freeman和E. J. Wherry，慢性病毒感染期间PD-1和PD-L1表达的组织特异性差异：对CD8 T细胞疲惫的影响，“病毒学杂志第84卷，第2期。4，pp。2078-2089，2010。视图:出版商网站|谷歌学术
25. D. V. dolfi，P.A.Duttagaupa，A.C.Boesteanu等，“树突状细胞和CD28共刺激需要维持病毒特定的CD8⁺体内效应期的T细胞反应免疫学杂志(第186卷第66期)第8页，4599-4608页，2011。视图:出版商网站|谷歌学术
26. Y.Iwai，S.Terawaki，M. Ikegawa，T.Ohazaki和T. Honjo，PD-1抑制肝脏效应相的抗病毒免疫力，“实验医学杂志，卷。198，否。1，pp。39-50，2003。视图:出版商网站|谷歌学术
27. M. J. Molloy，W.张和E. J. usherwood，“切削缘：IL-2免疫复合物作为持续病毒感染的治疗”，“免疫学杂志，卷。182年，没有。8，pp。4512-4515，2009。视图:出版商网站|谷歌学术
28. G. M. Frank, A. J. Lepisto, M. L. Freeman, B. S. Sheridan, T. L. Cherpes, R. L. Hendricks，“早期CD4⁺T细胞有助于防止部分CD8⁺T细胞衰竭促进单纯疱疹病毒1潜伏期的维持免疫学杂志，卷。184年，没有。1，pp。277-286,2010。视图:出版商网站|谷歌学术
29. S. J. Allen，P. Hamrah，D. Gate等，“Lat在CD8增加的角色⁺Tigleminal Ganglia的小鼠疲惫的小鼠潜伏的单纯疱疹病毒1，“病毒学杂志，卷。85，没有。9，PP。4184-4197，2011。视图:出版商网站|谷歌学术
30. A. A. Chentoufi，E. Kritzer，M.V.Tran等，“Simplex病毒1潜伏期相关的转录物促进了特定病毒的CD8功能耗尽⁺在潜在感染的三叉神经节中的T细胞：一种新的免疫逃避机制，“病毒学杂志，卷。85，没有。17，pp。9127-9138，2011。视图:出版商网站|谷歌学术

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