在活的有机体内抗氧化活性的诺丽果汁Deacetylasperulosidic酸

文摘

Deacetylasperulosidic酸(DAA)是一个主要的植物化学成分组成的Morinda citrifolia(诺丽果汁)水果。诺丽果汁汁已经证明了抗氧化活性在活的有机体内在人体试验。评估的作用DAA抗氧化活性,Wistar鼠喂养0(对照组),15日30或60毫克/公斤体重/天7天。后来,血清丙二醛含量和超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶测定并比较组间的活动。剂量依赖性降低丙二醛明显以及超氧化物歧化酶活动的增加存在剂量依赖的相关性。DAA摄取血清谷胱甘肽过氧化物酶活性没有影响。这些结果表明,DAA有助于抗氧化活性的诺丽果汁汁通过增加超氧化物歧化酶活性。与DAA剂量增加,丙二醛浓度下降,尽管缺乏谷胱甘肽peroxidase-inducing活动,也表明DAA可能增加过氧化氢酶活性。之前报道,诺丽果汁汁增加过氧化氢酶活性在活的有机体内但需要更多的研究来证实DAA对过氧化氢酶的影响。即便如此,目前发现做解释可能的作用机制的抗氧化特性的诺丽果汁汁中探测到人体临床试验。

1。介绍

Morinda citrifolia通常被称为诺丽果汁,一棵小树被用作食品和药品的传统来源在整个热带地区(1,2]。各种潜在的健康益处已经报道了诺丽果汁(3]。这些包括免疫调节(4,5)和抗氧化活性在体外和在活的有机体内(6- - - - - -8]。诺丽果汁汁被发现的抗氧化活性增加耐力运动员(9]。在人类临床试验涉及重吸烟者,食用诺丽果汁汁导致降低血浆超氧化物阴离子自由基的浓度(SAR)和脂质氢过氧化物10]。此外,食用诺丽果汁汁也减少了脂质水平peroxidation-derived淋巴细胞DNA加合物的重度吸烟者(11]。

在活的有机体内研究表明诺丽果汁汁增加超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)酶活性12]。超氧化物阴离子自由基(SAR)是一个主要的细胞活性氧生成,可能通过酶和非酶的过程或可能来自外生的来源,包括香烟(13]。SOD催化歧化作用的SAR过氧化氢和氧(14]。GPx能够减少免费过氧化氢水(15]。GPx也减少脂质氢过氧化物,以及防止自由基攻击细胞膜中多不饱和脂肪酸(16]。因此,诺丽果汁汁的影响这两个酶可能至少有两个主要的抗氧化剂的作用机理通过它保护淋巴细胞DNA和降低血浆浓度的烟草烟雾诱发自由基和过氧化物。

诺丽果汁的水果的化学研究表明,环烯醚萜苷是主要的植物化学的成分,与deacetylasperulosidic酸(DAA)组成环烯醚萜苷的大部分内容(17]。DAA anticlastogenic活动,抑制诱导中国仓鼠卵巢细胞和小鼠染色体畸变(18]。DAA据报道,抑制肿瘤坏死因子-α的释放从培养小鼠腹腔巨噬细胞和抑制低密度脂蛋白氧化19,20.]。DAA也阻止4-nitroquinoline 1-oxide (4 nqo)诱导的DNA损伤在体外(21]。4 nqo暴露会导致过氧化物的形成,过氧化氢,和羟基自由基,导致生产大量8-hydroxydeoxyguanosine、DNA氧化的产物在哺乳动物和细菌细胞22,23]。DAA治疗减少4 nqo基因毒性98.96%,表明环烯醚萜苷负责诺丽果汁汁在吸烟者的DNA保护作用。

与抗氧化活性的诺丽果汁汁和其主要的潜在生物活性的植物化学成分组成部分,当前研究调查DAA SOD、GPx活动的作用在活的有机体内。

2。材料和方法

2.1。测试材料

Deacetylasperulosidic酸(DAA)获得了从成都Biopurify植物化学物质有限公司(中国成都)。DAA的纯度为98%,和身份证实了高效液相色谱法(24]。DAA MeOH-H溶解₂O(1: 1)浓度为0.2毫克/毫升。分离的标准进行HC-C18列(25厘米×4.6毫米;5μm,安捷伦科技,圣克拉拉、钙、美国)水域2690分离模块(水公司,米尔福德,妈,美国),发现水域2489 UV / Vis探测器在235海里。DAA筛选了在0.8毫升/分钟的流量与两个移动阶段:MeCN (a)和(B) 0.1%的甲酸H₂O (v / v)。洗脱梯度与100% B 5分钟,35分钟30%和70% B, B 12分钟95%和5%,然后用100% B . 8分钟的保留时间和吸光度光谱比较反对的DAA标准。

2.2。动物和治疗

在这项研究中,40 Wistar鼠(男性和女性,180 - 200 g)得到的实验动物中心,军事医学科学院(北京),没有批准。scxk -军- 2009 - 003。照顾动物和实验程序符合伦理和制度动物福利天津医科大学的指导方针。适应后,老鼠被随机分为4组,每组10(5男5女)。每组提供饲料和水随意。DAA溶解在盐水,每只动物填喂法为7天1毫升/ 200克体重(bw)的四种治疗方法之一,根据小组任务。生理盐水治疗(控制),DAA 15毫克/公斤bw(低剂量),DAA 30毫克/公斤bw(中剂量),和DAA 60毫克/公斤(高剂量)。个体动物体重和投料记录在天1,4,7。第八天,老鼠麻醉和0.5毫升血液从轨道窦中删除。全血在3000转离心10分钟在低速离心机(模型bfx5 - 320, Baiyang离心机厂,Liulizhuang,河北,中国)。结果血清化验留存。

2.3。抗氧化酶活性测定和丙二醛测定

使用一个商业生物测定设备(南京建成生物工程研究所,中国),提高血清SOD活性是化验。超氧化物歧化酶活性测定利用水溶性染料的生产(WST-1甲瓒)从四唑盐(WST-1)的SAR (25]。磷酸盐反应混合物,黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶孵化在37°C的样本,空白,SOD标准和WST-1。反应,生成SAR从黄嘌呤和氧气。SOD催化SAR的歧化作用,从而减少用于氧化WST-1 WST-1甲瓒。样本结果相比对SOD标准曲线后吸光度是阅读在450 nm标(时代微型板块分光光度计、BioTek Winooski, VT,美国)。SOD活性是由计算WST-1甲瓒抑制率和表达在U /毫升。

GPx活动与商用血清样本还确定生物测定设备(南京建成生物工程研究所,中国)。GPx活性测定通过确定降低血清中谷胱甘肽。吸光度样品、空白和标准在412 nm标(时代微型板块分光光度计、BioTek Winooski, VT,美国)。酶活性被表示为U /毫升。

丙二醛(MDA)浓度化验商业生物测定设备(南京建成生物工程研究所,中国)。MDA根据常见的比色法检测样品的反应和1,3,3,3 tetra-ethoxypropane标准与硫代巴比土酸95°C水浴40分钟。每个样品的吸光度和标准为532 nm(时代微型板块分光光度计、BioTek Winooski, VT,美国)。结果测定标准曲线和表达为nmol /毫升。

2.4。统计分析

基本总结统计(意思是,范围,和标准偏差)计算。组间差异与学生的测量以及,巴特利特的方差齐性检验。

3所示。结果与讨论

重量和采食量率不同群体比较表1和2。所有组经历了适当的体重增加7天期间(26),没有任何组织之间的区别。没有社会团体内部的变化意味着采食量。没有投料组天1和4之间的区别。低,中剂量组在7天饲料摄入量略低于对照组,但这些都是在健康Wistar鼠(预期的数量27]。没有显著差异之间的采食量控制和高剂量组。

DAA摄入量的影响在MDA浓度和抗氧化酶活动总结表3。同时意味着低剂量组血清MDA含量低于对照组,差异并不显著。然而,有一个趋势,降低血清MDA含量增加DAA剂量。中、高剂量组的血清MDA明显低于那些在控制。近似百分比减少意味着血清MDA的中、高剂量组,分别为22.6%和19.7相比,对照组。

意味着血清SOD活性与DAA倾向于增加剂量。而SOD活性在低剂量组比几乎是10%控制,只是略微的显著差异()。另一方面,SOD活动观察中、高剂量组均明显大于对照组。中、高剂量动物经历,分别平均增加11.3 ()和13.0% ()血清中SOD活性。与SOD、GPx活动不会受到DAA摄入的剂量评估。

当摄入DAA具有明显的抗氧化活性。DAA在SOD活性的影响有助于解释至少有一个机制诺丽果汁汁降低等离子体SAR在重度吸烟者。SAR对MDA的最终形成的活性羟基自由基形成通过过渡金属离子的还原SAR或退化产生的过氧亚硝基反应之间的SAR和一氧化氮28]。因此,特区歧化作用的增加H₂O₂和氧气会降低MDA的形成可用的数量。这表明一种DAA减少脂质过氧化反应,以降低MDA含量,增加SOD活性。这是进一步证明观察DNA保护作用的诺丽果汁汁在重度吸烟者,因为MDA与DNA碱基反应容易形成脂质peroxidation-derived DNA加合物(11,29日]。

本研究的一个非常有趣的观察DAA无力GPx活性增加。增加SOD活性下降导致SAR浓度。但SOD活性的结果是增加了H₂O₂。H₂O₂反过来,会导致氧化损伤,如果不进一步代谢成活性化合物。提高H₂O₂被发现通过脂质过氧化(MDA浓度增加30.]。但MDA降低在我们的研究中,尽管GPx活性不受影响。因此,另一个途径必须参与的控制H₂O₂的水平。过氧化氢酶是另一种抗氧化剂酶促进降解的H₂O₂成水和氧气31日]。因此,它可能是过氧化氢酶活性增加了DAA。这可能是进一步得到事实的支持Morinda citrifolia叶子包含DAA [17lymphoma-bearing老鼠)和过氧化氢酶活性增加美联储的原油m . citrifolia叶提取物(32]。此外,水提物的m . citrifolia叶片过氧化氢酶活性增加hyperlipidemic老鼠(33]。其他环烯醚萜苷也被报道提高过氧化氢酶活性(34),这是一个与这类相关的生物活性化合物。

这个实验的结果表明,DAA施加抗氧化剂通过增加SOD活性的影响。这种效应可能是负责任的,至少在某种程度上,诺丽果汁汁抗氧化特性的人体试验和演示在活的有机体内。的在体外抗氧化活性的DAA 4 nqo也可能通过SOD激活介导,如所涉及的微生物表达这种酶(35]。然而,DAA似乎并不增加GPx活动本身,至少在本研究的条件。正如前面所讨论的那样,诺丽果汁汁GPx活性增加在活的有机体内。尽管DAA诺丽果汁的主要成分果汁,水果还包含其他几个在小环烯醚萜苷浓度(17,36,37]。马钱子苷、环烯醚萜结构类似于epi-dihydrocornin在诺丽果汁的水果、GPx表达增加大鼠系膜细胞已经接触到先进的糖化终端产品(38]。所以,很可能另一个环烯醚萜化合物在诺丽果汁,除了DAA,负责GPx活性增加。也有可能,一些植物化学的成分之间的相互作用导致血清GPx增加。

4所示。结论

的在活的有机体内抗氧化活性的DAA已经证明通过口服Wistar鼠7天。趋势明显,存在剂量依赖的相关性显著降低血清MDA和SOD活性增加的一篇在30和60毫克/公斤体重。然而,DAA没有增加血清GPx活性。由于血清MDA拒绝增加剂量,可能DAA引发过氧化氢酶活性。然而,需要进一步的研究来证实这一点。动物体重、采食量,连同以前的DAA毒性试验中,不提供任何毒性的迹象。当前研究的结果表明,DAA负责,至少部分的抗氧化活动中观察到人体试验。虽然可能DAA对SOD活性的影响可以解释诺丽果汁汁重度吸烟者的影响,结果还表明,诺丽果汁汁对GPx活性的影响在活的有机体内与DAA无关。诱导GPx可能是因为另一个环烯醚萜苷或植物化学的成分的组合。

承认

这项研究由Morinda Inc .财务支持,制造商诺丽果汁汁。

引用

1. j·f·莫顿,“远洋诺丽果汁,或印度桑(Morinda citrifolia茜草科)和它的一些“五彩缤纷”亲戚,”经济植物学,46卷,不。3、241 - 256年,1992页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. b . j .西方,c·j·延森j . Westendorf (l . d .白色,“诺丽果汁的安全审查,”食品科学杂志,卷71,不。8日,R100-R106, 2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. b . j . m . y . Wang, c . j . Jensen et al。”Morinda citrifolia(诺丽果汁):一个文献综述和诺丽果汁研究的最新进展,“Pharmacologica学报,23卷,不。12日,第1141 - 1127页,2002年。视图:谷歌学术搜索
4. a . Hirazumi和大肠Furusawa“免疫调节polysaccharide-rich物质的果汁Morinda citrifolia与抗肿瘤活性(诺丽果汁),”植物疗法的研究,13卷,不。5,380 - 387年,1999页。视图:谷歌学术搜索
5. b·j·a·k·巴鲁,a . h . Kim西方,邓,j . Jensen和l .白”的影响Morinda citrifolial .(诺丽果汁)对免疫系统:其分子机制的行动。”民族药物学杂志,卷115,不。3、502 - 506年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. z Mohd-Zin, a·哈米德和a·奥斯曼”抗氧化活性提取物Mengkudu (Morinda citrifolial .)根、水果和叶子。”食品化学,卷78,不。2、227 - 231年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. b . n . Su公元Pawlus, h·荣格w·j·凯勒,j·l·麦克劳克林,公元Kinghorn”的果实的化学成分Morinda citrifolia(诺丽果汁)及其抗氧化活性,《天然产物,卷68,不。4、592 - 595年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. m . y . Wang和c·苏“癌症预防的效果Morinda citrifolia(诺丽果汁),“纽约科学院上卷,952年,第168 - 161页,2001年。视图:谷歌学术搜索
9. a·k·巴鲁,r·d·Seifulla, b . j .西方。”Morinda citrifolial,(noni) improves athlete endurance: its mechanisms of action,”药用植物研究杂志》上,卷2,不。7,154 - 158年,2008页。视图:谷歌学术搜索
10. l . m . y . Wang, m . n . Lutfiyya e·亨利诉Weidenbacher-Hoper, g·安德森。”Morinda citrifolia(诺丽果汁)降低癌症的风险在当前吸烟者减少芳香DNA加合物,”营养和癌症,卷61,不。5,634 - 639年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. c·j·l·m . y . Wang Peng Jensen s邓和b . j .西方,“诺丽果汁汁可以减少脂质peroxidation-derived DNA加合物在重度吸烟者,”食品科学与营养,1卷,不。2、141 - 149年,2013页。视图:谷歌学术搜索
12. l . n . j。j, l . y . Wang Ou et al .,“诺丽果汁汁抗氧化活性的研究评估在活的有机体内”,食品工业科技,32卷,不。7,392 - 393年,2011页。视图:谷歌学术搜索
13. a . Valavanidis t Vlachogianni, k . Fiotakis“烟草烟雾:活性氧和稳定自由基氧化损伤机制,与其他粒子能呼吸的致癌作用和协同效应,”国际环境研究和公共卫生杂志》上》第六卷,没有。2、445 - 462年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. Fridovich,“氧自由基的生物,”科学,卷201,不。4359年,第880 - 875页,1978年。视图:谷歌学术搜索
15. g·c·米尔斯,”血红蛋白分解代谢。谷胱甘肽过氧化物酶,一种红细胞酶保护血红蛋白的氧化分解,“《生物化学》杂志上,卷229,不。1,第197 - 189页,1957。视图:谷歌学术搜索
16. p·b·麦科伊·d·d·吉布森,k . l .方和k·r·Hornbrook“谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响在生物膜脂质过氧化作用,”Biochimica et Biophysica学报,卷431,不。3、459 - 468年,1976页。视图:谷歌学术搜索
17. o . Potterat r·冯·费尔·w·Dalsgaard和m .汉堡”HPLC-MS TLC标记的识别和量化的各种成分在诺丽果汁的水果粉和商业noni-derived产品,”农业与食品化学杂志》上,55卷,不。18日,第7494 - 7489页,2007年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. 中村t、y Nakazawa s Onizuka et al .,“Antimutagenicity Tochu茶(水提物的杜仲叶子):1。的clastogen-suppressing影响Tochu茶在CHO细胞和老鼠,”突变的研究,卷388,不。1,7-20,1997页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. b, d, y罗,和陈x”,三个新的抗肿瘤蒽醌苷Lasianthus acuminatissimus稳定。”化学和制药公告,54卷,不。3、297 - 300年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. h·j·d·h·Kim Lee y . j .哦,et al .,“环烯醚萜苷隔绝Oldenlandia diffusa抑制参与。”档案调药的研究,28卷,不。10日,1156 - 1160年,2005页。视图:谷歌学术搜索
21. b . j .西方、美国邓和c·j·延森,“诺丽果汁的营养和植物化学的分析处理泥”,食品研究国际,44卷,不。7,2295 - 2301年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. 竹内y Arima、c . Nishigori t . et al .,“4-Nitroquinoline 1-oxide形式8-hydroxydeoxyguanosine人类成纤维细胞通过活性氧,”毒物学的科学,卷91,不。2、382 - 392年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. t Nunoshiba和b . Demple”强大的细胞内氧化应激产生的致癌物质4 - nitroquinoline-N-oxide,”癌症研究,53卷,不。14日,第3252 - 3250页,1993年。视图:谷歌学术搜索
24. 邓,b . j .西方,a . k .巴鲁,和c·j·詹森”,决心和比较分析主要环烯醚萜苷的不同部分和栽培的来源Morinda citrifolia”,植物化学的分析,22卷,不。1、26 - 30日,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. A . v . Peskin和c . c . Winterbourn”超氧化物歧化酶的微量滴定板试验使用水溶性四唑盐(WST-1)”我们共同Chimica学报,卷293,不。1 - 2、157 - 166年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. A·h·普伦”的参数分析增长CFHB(威)老鼠,”解剖学杂志,卷121,不。2、371 - 383年,1976页。视图:谷歌学术搜索
27. f . Nistiar o . Racz a Lukacinova et al .,“年龄依赖一些生理生化参数的雄性Wistar鼠在受控的环境中,“环境科学与健康杂志》上卷,47号9日,第1233 - 1224页,2012年。视图:谷歌学术搜索
28. n .霍格v . m . Darley-Usmar m·t·威尔逊和美国蒙,”同时生成的羟基自由基的生产超氧化物和一氧化氮,”生物化学杂志,卷281,不。2、419 - 424年,1992页。视图:谷歌学术搜索
29. l . j . Marnett“脂质peroxidation-DNA损坏由丙二醛,”突变的研究,卷424,不。1 - 2、83 - 95年,1999页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. n Kokita和a . Hara”,异丙酚变弱氢peroxide-induced机械隔离大鼠心脏和代谢紊乱,”麻醉学,卷84,不。1,第127 - 117页,1996。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. p . Chelikani即成立,p·c·罗文“过氧化氢酶之间的结构和性质的多样性,”细胞和分子生命科学,卷61,不。2、192 - 208年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. t . Anitha和s .莫汉达斯·“抗氧化活性Morinda citrifolialymphoma-bearing老鼠。”古代科学的生活,26卷,不。1 - 2、85 - 88年,2006页。视图:谷歌学术搜索
33. g . c . Chinta诉Mullinti k . Prashanthi d·苏b . Pushpa-kumari和d . Ranganayakulu”的水提物的抗氧化活性Morinda citrifolia树叶triton wr - 1339诱导hyperlipidemic老鼠”药物的发明今天,卷2,不。1、1 - 4,2010页。视图:谷歌学术搜索
34. i m .学校“环烯醚萜苷的生物活性,抗炎药物化学和Anti-Allergy代理》第六卷,没有。4、307 - 314年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. 美国Iuchi l·维纳,“大肠杆菌的细胞和分子生理学适应有氧环境,”生物化学杂志,卷120,不。6,1055 - 1063年,1996页。视图:谷歌学术搜索
36. a . g . Liu预示,W.-Y。妈,美国唱,C.-T。Ho和z盾,“两个小说苷的水果Morinda citrifolia(诺丽果汁)抑制AP-1 transactivation和细胞转型鼠标表皮JB6细胞系,”癌症研究,卷61,不。15日,第5756 - 5749页,2001年。视图:谷歌学术搜索
37. b . n . Su公元Pawlus, h·荣格w·j·凯勒,j·l·麦克劳克林,公元Kinghorn”的果实的化学成分Morinda citrifolia(诺丽果汁)及其抗氧化活性,《天然产物,卷68,不。4、592 - 595年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
38. y . h .徐j .沈h . Liu, h·李和m .魏”Morroniside和从山茱萸提取的马钱子苷对大鼠系膜细胞增殖有保护作用接触到先进的糖化终端产品通过防止氧化应激,”加拿大生理学和药理学杂志》上,卷84,不。12日,第1273 - 1267页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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