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Punam Jeswal Dhiraj KumargydF4y2Ba,gydF4y2Ba ”gydF4y2BaMycobiota和自然的黄曲霉毒素、赭曲霉毒素A和印度香料经质橘霉素/ MSgydF4y2Ba”,gydF4y2Ba国际微生物学杂志gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 卷。gydF4y2Ba2015年gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 文章的IDgydF4y2Ba242486年gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 8gydF4y2Ba 页面gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 2015年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba https://doi.org/10.1155/2015/242486gydF4y2Ba
Mycobiota和自然的黄曲霉毒素、赭曲霉毒素A和印度香料经质橘霉素/ MSgydF4y2Ba
文摘gydF4y2Ba
九种不同的印度香料(红辣椒、黑胡椒、姜黄、香菜、孜然、茴香、香菜、胡芦巴、和干姜)通常栽培和高度在印度进行分析用于自然发生的产毒素的真菌区系和黄曲霉毒素(AFs),赭曲霉毒素A (OTA),和橘霉素(卡通)污染。gydF4y2Ba黄曲霉gydF4y2Ba和gydF4y2Ba黑曲霉gydF4y2Ba是最优势种隔绝所有类型的香料。红辣椒样本高度受黄曲霉毒素污染(85.4%),其次是干姜(77.7%)。56%gydF4y2Ba黄曲霉gydF4y2Ba从红辣椒和45%gydF4y2Ba曲霉属真菌ochraceusgydF4y2Ba黑胡椒的产毒素的产生黄曲霉毒素和赭曲霉毒素A,分别。定性检测和定量检测真菌毒素的香料,ELISA分析进一步证实了质/女士。gydF4y2Ba青霉菌citrinumgydF4y2Ba橘霉素生产红辣椒、黑胡椒、香菜、孜然、胡芦巴、和干姜样品。AFs的最高金额被发现在红辣椒(219.6 ng / g),在线旅行社在黑胡椒粉(154.1 ng / g),和卡通在干姜样品(85.1 ng / g)。这项研究的结果表明,香料是敏感的基质增长进一步mycotoxigenic真菌和霉菌毒素的生产。这是第一次报告的自然发生橘霉素的黑胡椒和干姜来自印度。gydF4y2Ba
1。介绍gydF4y2Ba
香料是全世界种植但印度是世界上最大的生产国和出口国(gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。红辣椒、黑胡椒、姜黄、香菜、孜然、茴香、香菜、胡芦巴、干姜在印度菜常用的香料。他们提供香味、颜色和风味食品和一般用作开胃菜提高食欲。他们是草药,来自不同地区的植物,富含抗氧化剂。这些香料也有一些药用价值和广泛应用在阿育吠陀医学gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)和家庭治疗。gydF4y2Ba
真菌毒素是真菌的有毒次生代谢物生产各种消耗品基质。最常见的真菌香料产生真菌毒素属于gydF4y2Ba曲霉属真菌gydF4y2Ba,gydF4y2Ba青霉菌gydF4y2Ba,gydF4y2Ba镰刀菌素gydF4y2Ba属。一些物种属都可能产生不同的真菌毒素如黄曲霉毒素、赭曲霉素和橘霉素。黄曲霉毒素从某些种类的天然次生代谢物gydF4y2Ba曲霉属真菌gydF4y2Ba和他们是致癌的gydF4y2Ba3gydF4y2Ba]。在线旅行社和卡通也由某些种类的生产gydF4y2Ba曲霉属真菌gydF4y2Ba和gydF4y2Ba青霉菌gydF4y2Ba。OTA其肾毒性肝毒素的,卡通和共存的这两种真菌毒素引起肝肾致癌作用[gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,gydF4y2Ba5gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
霉菌毒素污染尤其是黄曲霉毒素污染谷物,豆类,籽油和农产品是众所周知的,但零碎的报告是关于真菌区系和真菌毒素污染来自印度的香料和不同的世界的一部分。然而这些报告主要局限于黄曲霉毒素和赭曲霉毒素A污染(gydF4y2Ba6gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。这是第一次报告的卡通黑胡椒,孜然、胡芦巴、和干姜从比哈尔邦。gydF4y2Ba
本研究进行了评估协会产毒素的真菌区系香料和霉菌毒素生产潜力。AFs的自然污染,OTA,卡通也检查了这些香料。已经观察到,红辣椒、黑胡椒、香菜、胡芦巴、和干姜样本高度容易AFs, OTA,卡通污染。gydF4y2Ba
2。材料和方法gydF4y2Ba
2.1。抽样gydF4y2Ba
九种不同的印度香料组成(55的红辣椒样品,42黑胡椒,35姜黄,30香菜,28孜然,25茴香,25香菜,35胡芦巴,和36干姜)样本。共311个样本收集不同的香料从当地市场不同地区的农村和城市地区的比哈尔邦(状态)。100通用的每个样本一直到无菌的棕色信封和储存在4°C逮捕任何霉菌毒素形成之前的分析。gydF4y2Ba
2.2。真菌的筛选gydF4y2Ba
被随机放置在样品刚做好的PDA(马铃薯葡萄糖琼脂),标准吸墨纸纸和孵化gydF4y2Ba°C为7天,每天检查。所有盘子都检查通过肉眼观察和双目立体显微镜计数和记录。真菌菌落的形态类型包含PDA媒体文化在文化管。鉴定真菌进行了形态特征和分类方案之后的麻仁[gydF4y2Ba9gydF4y2Ba)属gydF4y2Ba曲霉属真菌gydF4y2Ba,皮特gydF4y2Ba10gydF4y2Ba]gydF4y2Ba青霉菌gydF4y2Ba、莱斯利和SummerellgydF4y2Ba11gydF4y2Ba]gydF4y2Ba镰刀菌素gydF4y2Ba和Crous et al。gydF4y2Ba12gydF4y2Ba为其他属)。gydF4y2Ba
2.3。评估产毒素的真菌的潜力gydF4y2Ba
答:flavusgydF4y2Ba,gydF4y2Ba答:寄生gydF4y2Ba,gydF4y2Ba答:ochraceusgydF4y2Ba,gydF4y2Ba答:terreusgydF4y2Ba,gydF4y2Bap . citrinumgydF4y2Ba,gydF4y2Bap . verrucosumgydF4y2Ba是众所周知的产毒素的真菌产生黄曲霉毒素、赭曲霉毒素A,橘霉素(gydF4y2Ba13gydF4y2Ba),他们检查了真菌毒素的生产潜力。孤立的真菌的悬浮液是准备使用标准0.5麦克法兰在生理盐水,每毫升的盐水包含10gydF4y2Ba6gydF4y2Ba孢子(gydF4y2Ba14gydF4y2Ba]。在所有情况下50gydF4y2BaμgydF4y2BaL(每个暂停接种在媒体25毫升的刚做好的汤(SMKY媒体对黄曲霉毒素和是的媒体赭曲霉毒素A和橘霉素)和孵化gydF4y2Ba°C了10天。当发生剧烈增长的真菌中筛选与绘画纸1号纸和培养滤液与10毫升氯仿提取。卡通,文化过滤与1 n盐酸酸化,随后降低pH值;那么它与氯仿提取。氯仿提取是干燥和蒸发残渣溶解在1毫升氯仿和定性和定量估计真菌毒素的真菌生产潜力是由Diener和戴维斯的方法gydF4y2Ba15gydF4y2Ba]对黄曲霉毒素的生产潜力gydF4y2Ba曲霉属真菌gydF4y2Ba物种。方法Schwenk et al。gydF4y2Ba16gydF4y2Ba和戴维斯et al。gydF4y2Ba17gydF4y2Ba]随访对卡通和OTA真菌区系的生产潜力,分别。gydF4y2Ba
2.4。定性和定量评估ELISA的真菌毒素gydF4y2Ba
自然发生的AFs、在线旅行社和卡通香料样品中分析了酶联免疫吸附测定(ELISA)。样本检查AgraQuant总黄曲霉毒素(COKAQ1000)总AFs和AgraQuant赭曲霉素(COKAQ2000)的OTA罗默实验室(表演)和RIDASCREEN快速橘霉素的测定(6302)卡通。总AFs的定性和定量评估,在线旅行社和卡通,20 gm磨样本和100毫升70%的甲醇和进一步混合3分钟。上层清液的解决方案被过滤和收集。通过清理列4毫升的提取是转移;然后AFs, OTA,卡通是与特定的ELISA试剂盒检测和光学密度记录了ELISA读者使用450 nm滤波器与微分滤波器630海里。最小检测量的酶联免疫试剂盒AFs 4 ng / g, 2 ng / g的OTA, 15 ng / g卡通用品的制造商(如前所述)。标准曲线制备与ELISA试剂盒提供的标准溶液。样本的光学密度与光密度的标准和解释结果确定。gydF4y2Ba
2.5。确认由质/女士gydF4y2Ba
正样本进一步证实了质/使用安捷伦Poroshell 120 EC C18女士,gydF4y2Bamm列。10通用磨样本与40毫升的混合提取解决方案包含乙腈:水(40:10,v / v)和涡大力5分钟,进一步动摇了轻轻一45分钟。解决方案是透过0.2gydF4y2BaμgydF4y2Ba尼龙注射器过滤器。2毫升的滤液被流N和干好gydF4y2Ba2gydF4y2Ba气体进一步1毫升的重组方案的乙腈:水(10:40,v / v)添加到样本准备质/ MS分析。0.5gydF4y2BaμgydF4y2BaL(样本注入质/ MS的流动相(安捷伦6410)包含5毫米醋酸铵0.1%的甲酸和甲醇(gydF4y2Ba18gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
2.6。统计分析gydF4y2Ba
分析了所有的样品一式三份。发病率是记录为均值计算百分比从样本的数量分析镀一式三份。方差分析测试来确定意思的差异进行单向方差分析使用SPSS 12.0版女士/ Windows (SPSS, Inc .,芝加哥,IL)。gydF4y2Ba
3所示。结果和讨论gydF4y2Ba
3.1。Mycobiotic协会gydF4y2Ba
在我们的研究中,普遍存在的真菌区系与香料;共22个物种属于7个不同的真菌属(表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba曲霉属真菌gydF4y2Ba从所有香料样品而分离gydF4y2Ba青霉菌gydF4y2Ba都只局限于红辣椒、黑胡椒、姜黄、孜然、芫荽蒿子胡芦巴和干姜样品(图gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba答:flavusgydF4y2Ba污染在红辣椒(32.3)最高,其次为黑胡椒粉(28.3)和干姜(21.6),香菜最低(8.0)样本。本研究揭示了广泛的真菌污染的香料gydF4y2Ba答:flavusgydF4y2Ba是最主要的真菌物种在所有真菌(图gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。最近Rawat et al。gydF4y2Ba19gydF4y2Ba)也报道一些真菌从存储药用植物样品。Bokhari [gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba)也报道gydF4y2Ba答:flavusgydF4y2Ba和gydF4y2Ba答:尼日尔gydF4y2Ba污染从黑胡椒和绿色小豆蔻样本沙特阿拉伯。此外,从表的结果gydF4y2Ba1gydF4y2Ba还透露,一些真菌只局限于特定的香料。gydF4y2Ba答:alternatagydF4y2Ba,gydF4y2Ba答:日本酱油gydF4y2Ba,gydF4y2Bac . globosumgydF4y2Ba而物种只局限于红辣椒样品gydF4y2Bap . citrinumgydF4y2Ba和gydF4y2Ba答:ochraceusgydF4y2Ba在场所有香料除了茴香和香菜,分别。是可能的,一些特定的营养素或精油在这些香料可以影响特定的真菌和霉菌毒素进一步生产的增长。一些先前的报告关于抑制性的影响可用一些香料在真菌和霉菌毒素产量的增长gydF4y2Ba21gydF4y2Ba,gydF4y2Ba22gydF4y2Ba]。还观察到,红辣椒,黑胡椒粉,干姜受到底物的增长gydF4y2Ba答:尼日尔gydF4y2Ba,gydF4y2Ba答:flavusgydF4y2Ba,gydF4y2Bap . citrinumgydF4y2Ba,gydF4y2Bap . verrucosumgydF4y2Ba,gydF4y2Baf . moniliformegydF4y2Ba而胡荽、姜黄、孜然、茴香和胡芦巴温和抵抗。gydF4y2Ba
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红辣椒,gydF4y2BabgydF4y2Ba黑胡椒粉,gydF4y2BacgydF4y2Ba姜黄、gydF4y2BadgydF4y2Ba香菜,gydF4y2BaegydF4y2Ba孜然,gydF4y2BafgydF4y2Ba茴香、gydF4y2BaggydF4y2Ba香菜,gydF4y2BahgydF4y2Ba胡芦巴,gydF4y2Ba我gydF4y2Ba干姜。gydF4y2Ba |
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(一)gydF4y2Ba
(b)gydF4y2Ba
(c)gydF4y2Ba
(d)gydF4y2Ba
(e)gydF4y2Ba
3.2。有毒的潜力的孤立的真菌gydF4y2Ba
黄曲霉毒素、赭曲霉毒素A和橘霉素的生产潜力gydF4y2Ba答:flavusgydF4y2Ba,gydF4y2Ba答:寄生gydF4y2Ba,gydF4y2Ba答:ochraceusgydF4y2Ba,gydF4y2Ba答:terreusgydF4y2Ba,gydF4y2Bap . citrinumgydF4y2Ba,gydF4y2Bap . verrucosumgydF4y2Ba从香料分离样本检查(表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。产毒素的gydF4y2Ba答:flavusgydF4y2Ba被孤立的香料。56%的隔离gydF4y2Ba答:flavusgydF4y2Ba从红辣椒样品33.6剧毒和产生黄曲霉毒素gydF4y2BaμgydF4y2Bag / L而产生的黄曲霉毒素gydF4y2Ba答:寄生gydF4y2Ba不太可能比gydF4y2Ba答:flavusgydF4y2Ba。gydF4y2Ba答:ochraceusgydF4y2Ba和gydF4y2Bap . verrucosumgydF4y2Ba生产在线旅行社从所有香料,除了孜然。卡通才产生的gydF4y2Bap . citrinumgydF4y2Ba,18.5gydF4y2BaμgydF4y2Bag / L和只是局限于红辣椒、黑胡椒、香菜、孜然、胡芦巴、和干姜样品而没有隔离的gydF4y2Ba答:terreusgydF4y2Ba产毒素的被发现。gydF4y2Ba
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比例的产毒素的真菌的分离。gydF4y2Ba |
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3.3。自然发生的真菌毒素香料gydF4y2Ba
AFs(空军基地gydF4y2Ba1gydF4y2Ba、空军基地gydF4y2Ba2gydF4y2Ba,二自由度陀螺仪gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,二自由度陀螺仪gydF4y2Ba2gydF4y2Ba),在线旅行社和卡通是从不同的香料(检测数据gydF4y2Ba3gydF4y2Ba和gydF4y2Ba4gydF4y2Ba)。所有9种香料样品进行了分析,观察到一些样本,只有污染黄曲霉毒素BgydF4y2Ba1gydF4y2Ba或BgydF4y2Ba1gydF4y2BaBgydF4y2Ba2gydF4y2Ba或GgydF4y2Ba1gydF4y2Ba或GgydF4y2Ba1gydF4y2BaGgydF4y2Ba2gydF4y2Ba和一些积极的BgydF4y2Ba1gydF4y2BaBgydF4y2Ba2gydF4y2BaGgydF4y2Ba1gydF4y2BaGgydF4y2Ba2gydF4y2Ba而在线旅行社和卡通也从这些样本被发现(表gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。47岁的55个样本的红辣椒被黄曲霉毒素污染的31样品是积极的空军基地gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。早些时候Golge et al。gydF4y2Ba23gydF4y2Ba)也报道了黄曲霉毒素的水平在商业上使用土耳其红辣椒。卡通污染非常干姜中观察到而没有样品姜黄、茴香、香菜卡通污染。OTA发现从所有不同的香料,除了孜然。法泽卡斯et al。gydF4y2Ba24gydF4y2Ba)也报道了空军基地gydF4y2Ba1gydF4y2Ba、空军基地gydF4y2Ba2gydF4y2Ba,二自由度陀螺仪gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,二自由度陀螺仪gydF4y2Ba2gydF4y2Ba从匈牙利,OTA污染的香料。已经观察到卡通污染主要局限于干姜、红辣椒,香菜,黑胡椒样本。这些样本是高度污染的gydF4y2Bap . citrinumgydF4y2Ba或gydF4y2Bap . verrucosumgydF4y2Ba或者两者都是,他们生产卡通衬底。所以,可以干姜、红辣椒,香菜,黑胡椒易感gydF4y2Bap . citrinumgydF4y2Ba和gydF4y2Bap . verrucosumgydF4y2Ba增长和进一步的霉菌毒素作品。gydF4y2Ba
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自然发生的AFs,在线旅行社,在香料和卡通表所示gydF4y2Ba4gydF4y2Ba。香料都是污染的AFs相比,发现金额最大的在线旅行社和卡通除了茴香。AFs的最高数量记录在红辣椒样品(219.6 ng / g)和在线旅行社污染最大的黑胡椒粉(154.1 ng / g)。贾利利和Jinap早些时候gydF4y2Ba25gydF4y2Ba)报道,65%的辣椒样品被污染的AFs水平的范围0.2 - -79.7 ng / g和81.25%的样本积极OTA的范围0.2 - -101.2 ng / g。Ozbey和卡巴科gydF4y2Ba26gydF4y2Ba)也报道30.4% AFs污染和17.4%的OTA污染黑椒粉。在目前的调查,只有30%的香菜样本积极在线旅行社和孜然样本中没有一个是积极的。这可能是由于的孜然精油(cuminaldehyde)抑制了OTA产生真菌的生长(gydF4y2Ba答:ochraceusgydF4y2Ba和gydF4y2Bap . verrucosumgydF4y2Ba)和在线旅行社生产。早些时候,华et al。gydF4y2Ba27gydF4y2Ba)报道,精油肉桂抑制的增长gydF4y2Ba答:ochraceusgydF4y2Ba和赭曲霉毒素A的生产。费雷拉et al。gydF4y2Ba28gydF4y2Ba)报道,姜黄的生长有抑制作用gydF4y2Ba答:flavusgydF4y2Ba和霉菌毒素生产但在我们报告68.5%的姜黄AFs污染,57.1%是OTA污染的检测量163.8 ng / g和125 ng / g,分别(图gydF4y2Ba5gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
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数量的样品进行了分析,gydF4y2BabgydF4y2Ba没有检测到,gydF4y2BacgydF4y2Ba最低可检测水平的酶联免疫试剂盒(4 ng / g AFs, 2为OTA ng / g,卡通15 ng / g),gydF4y2BadgydF4y2Ba变异系数,gydF4y2BaegydF4y2Ba百分比污染。gydF4y2Ba |
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4所示。结论gydF4y2Ba
目前的研究的基础上,它可能会得出结论,红辣椒,黑胡椒粉,干姜敏感真菌生长的基质和随后的真菌毒素。9种香料都是污染的AFs。这是第一次报告的卡通污染黑胡椒,孜然、胡芦巴、比哈尔邦和干姜(印度)。红辣椒、黑胡椒和干姜是最受污染的AFs的香料,OTA,卡通在高浓度。茴香、香菜和孜然香料可以被认为是有点抵抗mycotoxigenic真菌和霉菌毒素污染。这还需要进一步的研究来隔离活性成分或这些香料的精油,它起着至关重要的作用在产毒素的真菌的生长和毒素进一步生产。是非常重要的在加工、搬运、运输、存储系统和修改以减少有害真菌毒素的生产香料。gydF4y2Ba
利益冲突gydF4y2Ba
作者宣称没有利益冲突。gydF4y2Ba
确认gydF4y2Ba
作者感谢教授(博士)Nandji Kumar,前总理Magadh大学菩提伽耶,和校长,a . n学院巴特那,印度比哈尔邦提供实验室设备。他们也感谢安东尼奥Logerico博士研究的领导者,意大利,提供产毒素的真菌菌株和斯派克分析实验室有限,印度(CIN。U74220DL1998PLC092698) LS-MS / MS分析样本。gydF4y2Ba
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