文摘
激活天真的CD4+T细胞导致的发展几个不同的效应Th细胞的子集,包括Th2细胞在过敏性炎症和蠕虫感染发挥关键作用。交换- 70适配器的T细胞(百叶),也称为Def6或后备,是小gtpase鸟嘌呤核苷酸交换因子,调节CD4细胞+通过控制Ca T细胞炎症反应2 +/ NFAT信号。在这项研究中,我们发现了一本小说或者板条的拼接对碘氧基苯甲醚,名叫SLAT2,缺乏的地区编码外显子2 - 7Def6基因。SLAT2是有选择地表达分化Th2细胞体外刺激的第二轮后,而不是分化Th1, Th17、调节性T (Treg)细胞。功能化验显示,SLAT2与板条增强T细胞受体的能力——(TCR)介导的激活NFAT il - 4和生产,但不能提高TCR-induced ICAM-1附着力。异位表达SLAT2或板条Jurkat T细胞导致截然不同的表达形式的丝状伪足,即分别短期和长期利率。这些结果说明调制SLAT2或板条蛋白表达可以扮演关键角色在生产和肌动蛋白重组细胞因子在炎症免疫反应。
1。介绍
细胞因子在炎症免疫反应在当地环境中,天真的CD4细胞+T细胞分化成不同的血统包括辅助T 1 (Th1), Th2, Th17,调节性T细胞(Treg) (1]。TCR-derived信号和细胞因子环境现场的炎症免疫反应中扮演重要角色的命运决定子集,和几个TCR-proximal信号中间体可以调节分化(Th子集2]。每个Th细胞子集表示一组独特的转录因子和细胞因子产生的特点2),Th2细胞是由主控制转录因子,GATA3。分化Th2细胞分泌il - 4、IL-5 IL-13,在炎症性哮喘和特异反应性是重要的,在炎症和构成防御细胞外的病原体。然而,小信息存在关于TCR-proximal信号事件的分化Th2子集。
我们以前孤立和TCR-regulated信号蛋白特征称为交换- 70适配器的T细胞(百叶)3)编码的Def6基因,发现它与交换分享相同- 70,这是参与B和肥大细胞激活(4- - - - - -6),主要表达在细胞和胸腺细胞。板条,也称为Def6 [7)或后备8),显示一个鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)活动Cdc42和Rac1小gtpase [9- - - - - -14]。人类同族体板条,称为IRF-4-binding蛋白质(IBP),是由另一组独立隔离(8]。结构、板条包含一个Ca N末端,开始2 +绑定类ef - hand域(15),一个immunoreceptor tyrosine-based激活主题——(ITAM)像序列,磷脂酰肌醇3,4,5-trisphosphate-binding pleckstrin同源性(PH)域3),和一个催化双同源性(DH)域9- - - - - -14,16]。我们之前的研究Def6有缺陷的小鼠显示板条的关键选择调节器TCR-coupled Ca2 +积极/ NFAT信号通路,控制CD4细胞+Th细胞激活和分化,理由是它的发展的重要作用T cell-dependent炎症性疾病,如过敏性肺部炎症(17实验性自身免疫性脑脊髓炎]和[18]。
可变剪接是一个关键机制,调节基因表达的转录后的水平。大量的基因表现出显著变化在同种型表达式炎症免疫反应,包括几个实例中,可变剪接Th细胞功能变化是已知的影响(19]。微分pre-mRNA拼接生成结构和功能多样性导致各种生理过程如Th细胞分化成不同的血统。
在这项研究中,我们报告的识别和描述小说或者板条的拼接对碘氧基苯甲醚,名叫SLAT2,缺乏的地区编码外显子2 - 7Def6基因。SLAT2蛋白表达在体外分化Th2细胞经过两轮的刺激,而不是分化Th1, Th17, Treg细胞。类似于板条,SLAT2增强TCR-mediated激活NFAT和il - 4的生产,但与板条(16)不需要TCR-induced粘附细胞间粘附molecule-1 (ICAM-1)。异位表达SLAT2或板条Jurkat T细胞导致截然不同的表达形式的丝状伪足,即分别短期和长期利率。因此,SLAT2分化Th2细胞似乎表现出不同的生物属性与板条相比。微分表达式SLAT2或板条蛋白可能因此扮演关键角色在生产和肌动蛋白重组细胞因子在炎症免疫反应,导致改变这些监管机构的功能活动。
2。材料和方法
2.1。老鼠
OT-II TCR-transgenic老鼠(杰克逊实验室,巴尔港,我)和C57BL / 6 n (B6)小鼠(Kyudo、传奇、日本)购买和保持在特定的无菌条件下动物设施的福冈牙科学院。6至8-week-old老鼠在所有实验中使用。按照指南的所有实验动物实验伦理委员会的福冈牙科学院。
2.2。细胞培养和激励
CD4+T细胞是由磁从淋巴结和脾脏细胞纯化排序使用Dynabeads鼠标CD4接着用DETACHaBEAD小鼠CD4(从英杰公司)。从B6小鼠脾抗原递呈细胞(apc)由消耗的T细胞通过使用CD90.2微鼠标(Miltenyi研究)与丝裂霉素C治疗前使用。CD4+T细胞(5×105每)从OT-II或B6小鼠培养与T cell-depleted 24-well板,丝裂霉素C-treated B6脾细胞(5×106每口井)总量的2毫升的1μg / mL卵白蛋白肽或1μg / mL anti-CD3抗体(Ab) (145 - 2 - c11;双相障碍),分别。Th1细胞培养的10μg / mL anti-IL-4 Ab (b11 11日;BD)和重组小鼠白介素10 U /毫升(Peprotech)。Th2细胞是由添加10μg / mL anti-IL-12 Ab (C17.8;双相障碍),10μg / mL anti-IFNγAb (XMG1.2;双相障碍)和100 U /毫升重组小鼠il - 4 (Peprotech)。Th17或Treg细胞分化的人类TGF - 2 ng / mL重组β1(研发系统)和20 ng / mL重组小鼠il - 6 (Peprotech),或在人类TGF - 2 ng / mL重组β1和2 ng / mL重组小鼠(Peprotech) - 2,分别。5天后,差异化的T细胞亚群(1×106每口井)清洗和重振使用1μg / mL anti-CD3 Ab - + 1μg / mL anti-CD28 Ab (37.51;BD)涂层板。
2.3。克隆的基因编码SLAT2
CD4+从B6小鼠T细胞培养Th2-inducing条件下然后重新刺激plate-bound anti-CD3 Ab (1μg / mL)和anti-CD28 Ab (1μg / mL) 2天。细胞收获和总RNA被隔离使用RNeasy工具包(试剂盒)。RNA reverse-transcribed成互补脱氧核糖核酸的低聚糖(dT)启动上标III逆转录酶(表达载体)。执行rt - pcr引物5′-ATGGCCCTGCGCAAGGAGCT-3′, 5′-CTAATTCCCTGGTGCTGGAT-3′和放大的片段~ 750 bp被克隆到pGEM-T简单向量(Promega)。
2.4。质粒结构
板条cDNA克隆成pEF-Myc-HisA向量(空向量),导致pEF-SLAT-Myc质粒,如前面描述的(3]。SLAT2 cDNA克隆到EcoRI和NotI网站pEF-Myc-HisA向量,pEF-SLAT2-Myc质粒。DNA片段编码的标记抗原决定基(DYKDDDDK)克隆到XhoI和XbaI网站pcDNA4 / V5His-A,导致pcDNA-FLAG质粒。板条和SLAT2互补dna扩增并克隆到菌进行基因萨利·和NotI网站pcDNA-FLAG,融合与国旗标签帧3′末端,产生质粒pcDNA-SLAT-FLAG pcDNA-SLAT2-FLAG,分别。扩增增强型绿色荧光蛋白(eGFP)菌进行基因克隆到NheI和萨利·的网站导致质粒pSI-EGFP pSI向量。DNA片段编码SLAT-FLAG和SLAT2-FLAG扩增从菌进行基因质粒pcDNA-SLAT-FLAG pcDNA-SLAT2-FLAG,分别克隆到萨利·和NotIpSI-EGFP遗址,原生质pSI-EGFP-SLAT-FLAG pSI-EGFP-SLAT2-FLAG,分别。板条cDNA克隆成逆转录病毒向量pMIG,导致pMIG-SLAT质粒,如前所述3]。SLAT2 cDNA克隆到BglIIpMIG向量的网站,导致质粒pMIG-SLAT2。
2.5。细胞转染和免疫印迹分析
SV40 T大antigen-transfected人类T细胞白血病Jurkat (Jurkat-TAg)在对数生长阶段被电穿孔转染与质粒dna使用NEPA21超级Electroporator (NEPAGENE、日本)。板条和SLAT2蛋白质的检测样本11% sds - page分离,转移到PVDF膜和免疫印迹anti-SLAT抗血清准备描述(3),anti-Myc Ab (9 e10汽油;σ),anti-GFP Ab (sc - 9996;圣克鲁斯生物技术),或者anti-actin Ab (sc - 1616;圣克鲁斯生物技术)。板条的信号强度和使用ImageJ SLAT2量化相对于肌动蛋白控制软件。
2.6。荧光素酶报告实验
与NFAT-luciferase Jurkat-TAg细胞转染质粒+一个β牛乳糖(β加)记者所描述的质粒20.,21]。与磷酸盐(PBS)洗两次后,转染细胞细胞溶解于100年μL(裂解缓冲(pH值7.8,0.5% Triton x - 100, 1毫米德勤,KPO和100毫米4在室温下)10分钟。溶菌产物是离心机(12000×g) 10分钟在4°C。离心后,20μ与50 L的上层清液添加μL(荧光素酶测定底物(Promega)。荧光素酶活性决定光度计(GloMax 20/20单管光度计,Promega)。每组cotransfected荧光素酶活动的规范化β加记者活动。
2.7。逆转录病毒转导和细胞内细胞因子染色
逆转录病毒转导进行描述(22]。短暂,Th2细胞分化Th2-inducing条件下通过与T cell-depleted文化,丝裂霉素C-treated B6脾细胞(5×106)在1μg / mL anti-CD3 5天。质粒(10μg)使用X-tremeGENE 9 DNA转染到Platinum-E包装细胞转染试剂(罗氏)。逆转录病毒上清液收获转染48 h后,补充了4 ng / mL重组小鼠(Peprotech)和5 - 2μg / mL聚凝胺(Sigma-Aldrich),并用来感染的差异化Th2细胞刺激与plate-coated anti-CD3 + cd28单克隆抗体(mab) (1μ每g / mL) 18 h后消耗的死细胞Lympholyte-M (Cedarlane)。离心后1 h (800×g,室温),盘子被孵化8 h在32°C和16 h在37°C。两个额外的逆转录病毒感染进行每日的间隔。一天后最后逆转录病毒感染(第四天),il - 4生产细胞通过细胞内细胞因子染色(ICS)进行了分析。ICS进行描述(3]。简而言之,Th2细胞是重振plate-bound anti-CD3 + cd28马伯(1μ每g / mL) 8 h在10μg / mL brefeldin (Sigma-Aldrich)期间的最后2 h文化。刺激细胞固定在3.7%多聚甲醛在室温下和光)(kouichi 10分钟。固定细胞与PBS permeabilized含有0.5%牛血清白蛋白(BSA) + 0.5%皂苷(Sigma-Aldrich)和沾PE-conjugated anti-IL-4 Ab (11 b11;BD) 30分钟。洗后两次与含有0.5% BSA和0.5%皂素的PBS,染色细胞进行了分析使用FACSCalibur (BD)。数据分析与FlowJo软件。
2.8。附着力试验
粘附ICAM-1进行描述(16)与轻微的修改。简单地说,5μg / mL山羊anti-human-IgG (Fc) Ab(杰克逊ImmunoResearch)固定板涂有1μg / mL的重组融合蛋白(Fc-ICAM-1)鼠标ICAM-1和人类IgG1 Fc片段(研发系统)在一夜之间在4°C。涂板被封锁在PBS 1% BSA在室温下1 h。转染细胞被标记为2.5μM Calcein-AM (DOJINDO) 30分钟在37°C Phenol-Red-free汉克斯平衡盐溶液,洗两次,孵化(1×105)Fc-ICAM-1-coated盘子,在没有或10的存在μg / mL anti-CD3 Ab (OKT3;Biolegend)。获得特定的附着力表示为一个百分比的输出荧光除以输入荧光。
2.9。共焦显微镜
转染Jurkat-TAg细胞被放在poly-L-lysine-coated盖玻片有或没有2μg / mL anti-CD3 Ab (OKT3;Biolegend) 30分钟在37°C,固定在4%多聚甲醛在室温下10分钟,染色和Alexa萤石546 phalloidin(热费希尔科学)和4′,6′-diamidino-2-phenylindole (DAPI)在室温下(DOJINDO) 40分钟。捕获的图像LSM710共焦激光扫描显微镜(德国卡尔蔡司)100 x / 1.40石油DIC的目标。
2.10。统计分析
统计分析是由使用双尾学生的t以及。
3所示。结果
3.1。小说板条拼接变异的识别
检查板条的表达在Th2分化、B6天真的CD4细胞+Th2-inducing条件下体外T细胞被激活。免疫印迹分析使用一个anti-SLAT Ab透露一个意想不到的小尺寸SLAT-related分化Th2细胞分子,而不是分化Th1细胞,两天之后第二轮体外刺激(图1(一))。为了更好的描述这个基因产物,我们执行一个rt - pcr cDNA源自Th2细胞两天后第二轮刺激使用引物设计放大整个板条开放阅读框(ORF)。这导致放大~ 750 bp的产品显示经过短暂的(10)扩展反应,那时PCR产品对应全长板条cDNA并不明显(图1 (b))。~ 750 bp PCR产品subcloned排序,揭示先前报道Def6羊痘疮,外显子和外显子1 2 - 7日缺席直接拼接外显子8没有转移。这可能ORF编码一个成熟肽由257个氨基酸组成。免疫印迹分析显示,Jurkat-TAg细胞转染或者拼接板条cDNA表达,正如预期的那样,一个蛋白质分子质量的~ 35 kDa,指定为SLAT2,主要分化Th2细胞后第二轮刺激。相比之下,SLAT-transfected细胞表达的蛋白质~ 75 kDa(图1 (c))。残留33 - 257板条的DH领域完全相同。板条的主要结构和SLAT2图所示1 (d)。
(一)
(b)
(c)
(d)
3.2。SLAT2的表达和调控
确定SLAT2蛋白质的动力学表达式,B6天真的CD4细胞+T细胞分化Th2——或者Th1-inducing条件下重振在第五天与plate-coated anti-CD3 + cd28马伯中性文化条件下(图2(一个))。之前引发刺激(0),SLAT2不是Th2或Th1细胞表达,板条Th2表达的时候,但不是在Th1细胞(或少得多)。重要的是,引发刺激导致大量upregulation SLAT2 Th2细胞蛋白表达在2天,但不是在Th1细胞。这个upregulation持续4天下降了6天。相比之下,upregulation翻板2天没有被观察到,但很明显在Th2细胞4和6天。评估SLAT2和板条的表达特异性抗原刺激的条件下,我们获得了天真的CD4细胞+T细胞从OT-II TCR-transgenic老鼠,它表达一个OVA-specific细胞,培养细胞与低剂量的卵子肽和脾装甲运兵车B6小鼠Th2——或者Th1-inducing条件下。类似于B6 Th细胞,SLAT2并不表示在最初一轮卵巢刺激(数据未显示)。然而,第二轮刺激后,SLAT2是诱导的表达一天之内达到最大2天,没有发现SLAT2后(图0.5天的刺激2 (b))。接下来,我们检查了其它子集的SLAT2分化的表达Th细胞,也就是说,Th17 Treg细胞。SLAT2重振Th2细胞中观察到,而不是分化Th1, Th17或Treg细胞(图2 (c))。相比之下,板条表达所有子集的分化细胞。这些结果表明,SLAT2的表达在分化和重新刺激T细胞是独一无二的Th2子集。
(一)
(b)
(c)
3.3。SLAT2增强TCR-Induced NFAT活动和il - 4的表达
板条促进Th1、Th2通过控制NFAT活化的CD4细胞分化+T细胞(17)和增强TCR-induced NFAT活动(11]。理解SLAT2的函数,我们检查的影响异位SLAT2与板条表情TCR-induced NFAT-luciferase记者Jurkat-TAg细胞基因的激活。类似板条,正如前面所示11NFAT活动),SLAT2诱导剂量依赖性增加相对于空vector-transfected细胞(图3(一个))。因此,SLAT2可以提高TCR-induced NFAT的活动,就像板条。接下来,我们决定是否额外SLAT2表达增强SLAT-mediated NFAT TCR刺激下活动。重要的是,SLAT2累加效应结合板条了TCR-induced NFAT活动(图3 (b))。这些结果表明,激活TCR-induced NFAT增强Jurkat SLAT2和/或板条的T细胞。
(一)
(b)
(c)
(d)
NFAT激活促进Th2细胞中il - 4的表达(23,24]。探索SLAT2能否调节生产il - 4,我们生成一个逆转录病毒SLAT2表达载体(图3 (c)),它被用于感染分化Th2细胞,导致转导效率25% - -45%(数据没有显示)。我们曾表明,分化Th2细胞的转导板条增加IL-4-producing细胞GFP的分数+人口(3]。重要的是,在同等条件下SLAT2 IL-4-producing细胞的比例增加,这是,从il - 4 ~ 39% ~ 55%+细胞(图3 (d)的分数),即使板条最低限度提高IL-4-producing细胞~ 39% ~ 43%(图3 (d))。这些结果表明,SLAT2增加IL-4-producing细胞分化Th2细胞的水平。
3.4。不需要SLAT2 ICAM-1 TCR-Induced粘连
板条促进T细胞通过白细胞ICAM-1 TCR-induced附着力的关联antigen-1 (LFA-1)激活16]。探索SLAT2的作用在调节LFA-1函数识别后,我们检查了异位的影响SLAT2表情ICAM-1 TCR-mediated粘连。SLAT-transfected Jurkat-TAg细胞显示增加TCR-induced粘附ICAM-1相对于控制转染子,正如前面所示(16]。相比之下,SLAT2没有影响TCR-induced粘附ICAM-1(图4(a))。因此,与板条,SLAT2似乎并不提高TCR-induced粘附ICAM-1在T细胞。这些结果表明,SLAT2可能功能的方式不同于板条在TCR-mediated T细胞激活。
3.5。SLAT2定位在细胞质和诱发短的丝状伪足
众所周知,板条梁质膜和广泛传播在整个细胞质COS-7细胞(10,13,25]。确定的细胞分布SLAT2, GFP-tagged SLAT2或板条表达Alexa萤石546 -标记phalloidin Jurkat-TAg细胞。细胞内蛋白质的位置是由共焦显微镜。GFP-SLAT发现colocalize与f -肌动蛋白在质膜上有或没有细胞刺激,此外,空vector-transfected细胞相比,GFP-SLAT表达导致一个明显长丝状伪足的形成在Jurkat如果T细胞,T细胞和anti-CD3刺激引起了进一步增加(图4(b),中间面板)。相比之下,GFP-SLAT2本地化与f -肌动蛋白在细胞质中,但没有colocalize附近的等离子体膜。此外,GFP-SLAT2主要诱发短的丝状伪足形成Jurkat T细胞缺乏或细胞刺激(图的存在4(b),右面板)。在控制细胞,观察微弱的短的丝状伪足的形成在某些GFP-transfected Jurkat-TAg细胞。定量的丝状伪足的形成转染T细胞(图4(c))显示异位GFP-SLAT2蛋白质增加短的丝状伪足形成TCR-stimulated细胞(在GFP-SLAT-transfected细胞和在GFP-SLAT2-transfected细胞;)。SLAT2相比,GFP-SLAT优先介导长丝状伪足的形成(在GFP-SLAT-transfected细胞和在GFP-SLAT2-transfected细胞;)。这些结果表明,不同于板条,SLAT2表达增强短的丝状伪足形成的长丝状伪足刺激T细胞。
4所示。讨论
可变剪接是一个重要的机制,控制基因表达和蛋白质的增加多样性从一个主记录。在免疫系统、可变剪接允许大型复杂蛋白质组从数量有限的基因在炎症免疫调节网络。实际上,最近的几个著名的可变剪接的例子,CD4细胞+T cell-expressed mucosa-associated淋巴组织蛋白1 (MALT1) [26]和Foxp3 [27),已经被证明是调节T细胞反应抗原(19]。在目前的研究中,我们发现了一个新的或者拼接产品,称为SLAT2,小鼠Def6基因分化Th2细胞后第二轮刺激。SLAT2信使rna拼接生成的外显子2 - 7日,导致部分删除2 +绑定类ef - hand ITAM-like序列的完整的删除和PH值域,生成正确的阅读框和翻译产品包含c端DH域。的选择性和瞬态upregulation SLAT2诱导分化Th2细胞的细胞引发刺激表明SLAT2可能在Th2-mediated免疫反应中发挥作用,例如,过敏性肺部炎症。
NFAT, T细胞激活的主要监管机构,对il - 4生产和Th2细胞分化[至关重要23,24]。越来越多的证据表明,板条,主要表现在T细胞,扮演重要的角色在TCR-mediated信号连接肌动蛋白细胞骨架重组和Ca Cdc42激活2 +-NFAT信号通路,因此在炎症(Th细胞分化11,12,17,28]。我们最近的研究表明,氨基类ef - hand域和PH值域的板条与肌醇1,4,5-triphosphate受体1型,这对于TCR-mediated Ca互动是很重要的2 +-NFAT信号(15]。有趣的是,SLAT2仍然拥有的能力提高NFAT激活,和coexpression SLAT2与板条导致进一步增强TCR-induced NFAT激活尽管SLAT2缺乏ITAM-like序列和PH值的域,以前所示为Ca2 +-NFAT信号板条的函数(11]。此外,共焦显微镜分析表明,SLAT2没有把等离子体膜上细胞的刺激。因此,我们建议胞质SLAT2可以提高Ca2 +-NFAT信号以不同的方式从板条或它可以分析在这种途径板条。我们也提供了证据表明,异位SLAT2表达il - 4的生产,提高差异化Th2细胞。因此,NFAT激活诱导的增强SLAT2可以解释SLAT2-transduced Th2细胞的il - 4的表达增加。
SLAT2表达式是暂时性的,选择性地调节分化Th2细胞一天之内第二次细胞刺激,达到最大的两天之后,并拒绝的第六天,虽然upregulation SLAT2没有观察到在第一次刺激。SLAT2因此表达Th细胞分化在相对较晚的阶段,这表明它可能不会有助于早期Th2细胞分化本身,但可能的功能效应阶段Th2细胞的功能。分化Th2细胞转录Il4早在一天后TCR引发刺激(数据未显示),当SLAT2已经大幅调节。进一步的工作应该旨在定义的精确机制调节增强il - 4的表达在分化SLAT2 Th2细胞,包括体内,在炎症。
SLAT2中,并未观察到板条的一些功能,其中包括粘附ICAM-1反映LFA-1激活,在Jurkat T细胞和长丝状伪足的形成。板条通过互动参与TCR-induced附着力的PH值与Rap1 GTPase域,这是需要T细胞粘附ICAM-1 [16]。因此,PH值的删除域SLAT2可能解释了SLAT2无法促进ICAM-1附着力。因此,功能SLAT2似乎不同于那些TCR-mediated板条的激活。板条表达和功能不仅在Th细胞还在其他类型的细胞,如巨噬细胞(29日,30.),破骨细胞(31日),和癌症细胞(32- - - - - -35]。因此,这将是有趣的,以确定SLAT2表达和功能在这些其他类型的细胞。
Cdc42ρ家族的成员的小gtpase胞质蛋白形式。Cdc42蛋白之间的循环作为分子开关的功能活性和GTP-bound活跃状态,并招募了膜其GDP在哪里兑换三磷酸鸟苷通过与已知几个gef的行动反应对ρ家庭gtpase [36]。双家族蛋白质,具有催化DH域后跟PH域,构成最大的子群Rho-specific gef,其次是奉献者的胞质分裂(码头)的家庭,其成员拥有一个码头同源区域2 (DHR2)而不是一个DH域。最小的子群交换- 70亚科包括交换- 70和板条,含有DH-like域但DH和DHR2域。其中一些ρgef,这是,变风量空调22),β照片(37(双亚科),DOCK8 [38(码头亚科),板条(3,9- - - - - -14,39- - - - - -42](交换- 70亚科),参与细胞信号和Th细胞分化和调解Cdc42 GEF活动。板条DH-like域拥有TCR-mediated,等离子体membrane-residing GEF活动向Cdc42控制肌动蛋白细胞骨架动力学和导致长丝状伪足的形成10]。此外,TCR-induced酪氨酸磷酸化的ITAM-like序列需要板条的易位质膜和免疫突触11]。SLAT2我们观察到缺乏膜定位,这与减少长丝状伪足形成SLAT2-transfected SLAT-transfected相比,T细胞细胞。相反,SLAT2增加短的形成,而不是长丝状伪足TCR-stimulated细胞。因此,两个板条的微分定位和功能蛋白,可能,他们的反应性的差异对Cdc42可能发挥重要的作用在调节丝状伪足的形成的炎症免疫反应。
5。结论
总的来说,我们的研究结果表明,可变剪接的板条可以表现出生物活性差TCR-mediated刺激和调节SLAT2或板条蛋白表达可以扮演关键角色在生产和肌动蛋白重组细胞因子在炎症免疫反应,从而改变了这些监管机构的功能活动。精确的理解机制SLAT2调节TCR-mediated信号和Th2细胞功能等待着未来的研究。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突有关的出版。
确认
这部分工作是支持日本促进社会科学KAKENHI(批准号。16 j09588玛丽桥本,26293393,16 k15792 Yoshihiko田中,26670822);双叶电子纪念基金会,诺华基金会(日本)促进科学,阿斯特拉研究基础代谢紊乱,SENSHIN医学研究基金会和武田科学基金会(Yoshihiko Tanaka);和国家卫生研究院(格兰特AI068320暗嫩奥特曼)。作者感谢m .松本k . i Nakayama和y井有用的评论,这部分工作在医学研究所的合作研究项目计划Bioregulation,九州大学。