微生物质量评估冷冻鱼和鱼类加工材料从孟加拉国

文摘

本研究旨在面向出口的微生物分析冷冻鱼,即犹太人鱼、舌鳎鱼、墨鱼、丝带鱼,鱼,女王和鱼处理水和冰从一个视图的公共卫生安全和国际贸易。微生物分析包括可行的有氧总数的测定标准平板计数法和枚举总大肠菌群和粪大肠杆菌群的最可能的数量方法。特定的病原体如鱼沙门氏菌种虫害和霍乱弧菌也被调查。下面的TVAC样本估计cfu / g而总大肠菌群和粪大肠杆菌群数低于100或然数/ g和10或然数/ g,分别满足可接受的限制规定国际微生物食品规范委员会。水和冰的微生物分析也符合规范cfu / mL,和总大肠菌群和粪大肠杆菌群数低于限制或然数的检测方法。特定的病原体如鱼沙门氏菌sp.和霍乱弧菌没有被发现在所有的样品调查。从这项研究中,可以得出结论,研究冷冻鱼类有资格出口的目的,也为人类食用安全。

1。介绍

鱼和渔业产品不仅营养同样重要的重要,但在全球贸易外汇收入来源的国家(1]。渔业和水产养殖部门已经成为第二重要的贡献者在孟加拉国出口收入,提供全国国内生产总值3.74%左右,出口收入的2.7%,22.23%在农业部门2]。由于广泛的全球市场,包括美国、英国、日本、比利时、荷兰、泰国、德国、中国、法国、加拿大、西班牙和意大利的出口冷冻鱼,干鱼,盐和脱水的鱼从孟加拉国逐日增加。尽管有129条鱼加工业在孟加拉国,只有62株欧盟的批准。所以它是非常重要的保持冷冻鱼的质量的验收在国际贸易以及避免消费者的健康问题。

出口收入的鱼是十分关注的,因为他们的高营养价值,如蛋白质含量高,很少或根本没有碳水化合物和脂肪的价值。但鱼可能污染在不同阶段的运输、装卸、加工。这种污染可能相关的原材料、人员,通过泄漏和处理工具,如叉车,昆虫,害虫的停泊处。此外,海鲜可以成为污染在存储和处理(3,4]。污染可能是由于食源性病原体在水生环境中自然存在,如弧菌spp。,或者来源于污水等污染水沙门氏菌spp。5]。食用被污染的鱼可能对消费者造成感染或中毒。

霍乱弧菌负责shellfish-related疾病高居第三,noncholera之后弧菌种虫害和诺沃克病毒(6]。产毒素的Ol(流行生物型)感染与丰富的相关联,腹泻,而艾non-Ol生物型(O139除外)感染导致败血症和轻度胃肠炎。相比弧菌spp的发生率沙门氏菌由于海鲜消费仍低于感染沙门氏菌病与其他食物有关。然而,检测沙门氏菌种虫害在海鲜不能跳过负责大部分的食源性疾病或胃肠炎表现为腹泻、腹部痉挛、呕吐、恶心、发烧。根据疾病控制和预防中心,沙门氏菌细菌性食源性疾病的主要原因是造成约140万nontyphoidal疾病,15000人住院,有400人死亡(每年在美国7]。

水和冰的质量也是一个重要因素质量好的鱼,因为水和冰用于鱼处理可能会污染整个加工厂。欧盟建议孟加拉国政府实施危害分析关键控制点(HACCP)处理的冷冻鱼(8]。所以重要的是要找到鱼的质量我们消费以及冷冻鱼的出口。

因此,本研究进行了探讨海洋冻鱼的微生物质量提高食品安全问题和促进国际贸易。这项研究还调查了水和冰的微生物质量,因为这些因素与鱼的处理和保护密切相关。

2。材料和方法

2.1。研究区域

这项研究是在“Munir鱼保护者泰姬酒店有限公司”位于港口城市孟加拉国的吉大港。研究从2011年6月到2014年2月。在研究期间,可行的有氧总数,大肠菌群与类型大肠菌群的总数量,存在致病菌(即沙门氏菌种虫害和霍乱弧菌从冷冻鱼类)的公共卫生意义(储存温度−20°C)如犹太人鱼(Argyrosomus hololepidotus)、舌鳎鱼(Cynoglossus broadhursti)、墨鱼(乌贼officinalis),丝带鱼(Lepturacanthus savala),女王鱼(Scomberoides commersonnianus),冰和水处理过程中使用的样本调查。所有的冷冻鱼推和organoleptically足够好进一步进行细菌学上的分析。抽样是每年三个月的时间间隔,即6月、10月和2月。研究期间,一式三份样品为每个鱼类以及冰和水独立样本进行了分析。

2.2。化学物质和媒体

纯和分析年级化学物质从BDH化学品有限公司购买,英格兰;德国默克公司;和Siga化工有限公司、美国、在整个研究包括媒体准备使用。所有的媒体和媒体成分使用牛肉膏、蛋白胨等整个研究总经理从沙劳打电话,能够允西班牙。

大肠菌群与类型大肠菌群的枚举的,十二烷基胰蛋白示肉汤(LTB)和2%的绿色胆汁肉汤(BGLBB)使用,分别。亚硫酸铋琼脂(BSA)和木糖赖氨酸脱氧胆酸盐(XLD)琼脂用于检测沙门氏菌种虫害而硫代硫酸盐柠檬酸胆汁盐(tcb)琼脂和纤维二糖、多粘菌素、粘菌素(CPC)是用于检测霍乱弧菌。

2.3。鱼样品制备

所有的玻璃器皿消毒(121°C, 15 psi, 20分钟)之前使用。一式三份鱼样本(每个约25 g)分别测量每个鱼类型的分析天平(模型:ML204/01,梅特勒-托利多,瑞士)在无菌状态,然后溶解到约225毫升缓冲蛋白胨水(BPW)和混合(30 - 60秒)消毒搅拌器机(8]。每个鱼样本分别混合和均质。

2.4。水和冰集合

水(即WS₁,WS₂,WS₃)和冰(即是₁,是₂,是₃)收集1升消毒容器从不同的位置。收集到的样本被保存在冰箱(4°C),当分析延迟超过3小时。

2.5。枚举的TVAC鱼、水和冰

可行的总需氧细菌的鱼、水和冰被标准平板计数枚举(SPC)方法(9]。枚举TVAC,连续稀释的样本进行了10⁻⁵与9毫升无菌0.1%蛋白胨水稀释,从每个稀释的整除1毫升无菌涌入复制无菌培养皿,和无菌融化(约40到45°C)平皿计数琼脂是倒,clockwise-anticlockwise旋转,允许固化,最后倒在37°C的孵化24 - 48小时。

孵化后,盘子有间隔的殖民地(30 - 300)被用于计算和殖民地被菌落计数器计数(英国斯图亚特科学)。可行的有氧总数计算每毫升或g乘以平均每个板的菌落数的倒数稀释和表达为集落形成单位(cfu)每毫升或每克样品(10]。

2.6。枚举的总大肠杆菌群的鱼

最可能的数量(或然数)方法用于定量评估对大肠杆菌(11]。连续稀释的样品准备如前所述。九个试管包含9毫升十二烷基胰蛋白示肉汤(LTB)倒达勒姆的管消毒。三个试管注射1毫升10⁻¹稀释,另三个试管接种10⁻²稀释,剩下的三个试管接种10⁻³稀释。接种管在37°48小时孵化。试管的阳性结果(达勒姆天然气生产的管)统计和记录为假定为大肠菌群阳性。

2.7。枚举类型大肠菌群(假定大肠杆菌测试)的鱼

大约一个铂环量从每个气体积极LTB接种到消毒BGLBB试管,试管消毒10毫升胰蛋白胨肉汤,然后孵化48小时。孵化后,天然气生产记录和2 - 3滴科瓦奇试剂添加到每个积极的管子。胰蛋白胨培养基中积极吲哚反应产生了樱桃红颜色表示的存在大肠杆菌。积极的天然气生产管记录和结果比较使用最有可能的数字(或然数)图表来确定总粪大肠杆菌群数(大肠杆菌)每克12]。

2.8。枚举总大肠菌群和粪大肠杆菌群的水和冰

约50毫升的水被接种50毫升的消毒LTB(双重力量)在一个大型试管而约10毫升的水是在试管中包含5毫升无菌接种LTB(双强度)和1毫升的水也接种试管包含5毫升无菌LTB(单个力量)在每个试管。所有的测试管包含反向杜伦的管。在37°C孵化24 - 48小时后,积极的结果记录表明大肠杆菌群总数(或然数/ 100毫升)。大约一个铂环量的气体正管在BGLBB倒达勒姆的接种管消毒胰蛋白胨汤然后孵化24 - 48小时。孵化后,2 - 3滴科瓦奇试剂添加到胰蛋白胨肉汤和樱桃红色表示总类型大肠菌群/ 100毫升。总大肠菌群和粪大肠杆菌群的冰也列举类似的样品。

2.9。检测沙门氏菌spp。

沙门氏菌种虫害检测后,安德鲁斯和Hammack[描述的过程13]。约25 g样本溶解在大约225毫升的消毒缓冲蛋白胨水(BPW),混合,孵化37°C 16 - 20个小时。约10毫升的孵化BPW文化被选择性地富集到100毫升消毒亚硒酸盐胱氨酸肉汤又孵化24 - 48小时的37°C。孵化后,1铂环量剂的选择性富集培养飞跑到preincubated BSA和XLD琼脂板。典型的沙门氏菌种虫害产生粉红色殖民地有或没有黑色中心XLD琼脂和棕色,灰色,或者黑色殖民地BSA琼脂。然后怀疑殖民地被确定文化、形态学、生化特征,即TSI(三糖铁),脲酶试验、MR-VP测试,氧化酶试验,柠檬酸测试,发酵的碳水化合物(葡萄糖、蔗糖、阿拉伯糖、甘露糖、甘露醇和肌醇),和脱羧酶(赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸)的分类指导Bergey限定的细菌学手册,8日ed。14]。所有文化给生化反应经凝集试验沙门氏菌多价(O)体抗血清15]。

2.10。检测霍乱弧菌

霍乱弧菌被Kaysner之后发现过程描述和安吉洛16]。约25 g样本与225毫升混合消毒碱性蛋白胨水在37°C (APW)和孵化了16个小时。然后从APW 1铂环量剂文化是有preincubated tcb和共产党琼脂板和孵化37°24小时。典型的殖民地霍乱弧菌在tcb琼脂是一双硕大的,黄色,光滑而共产党琼脂他们很小,光滑,不透明,绿色,紫色的颜色。然后怀疑殖民地被确定文化、形态学、生化特征,即氧化酶试验,发酵的碳水化合物(葡萄糖、蔗糖、阿拉伯糖、甘露糖、甘露醇和肌醇),和脱羧酶测试(赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸)的分类指导Bergey限定的细菌学手册,8日ed。14]。最后,霍乱弧菌经凝集试验用多价吗霍乱弧菌(O)抗血清15]。

3所示。结果与讨论

鱼类和海产品占有重要地位的食品部分世界人口的一大部分17]。在孟加拉国,鱼和渔业产品出口获得了显著地位外汇的收入在过去的几年里。因此,维护适当的产品质量被认为是至关重要的实现所期望的在这个产品的全球贸易的成功。

犹太人鱼(答:hololepidotus),女王鱼(美国commersonnianus)、舌鳎鱼(c . broadhursti),丝带鱼(l . savala)和墨鱼(美国officinalis)是最常见的海洋鱼类从孟加拉国出口。最大的微生物限度的TVAC把好质量的产品从坏质量5×10⁵cfu / g (18]。研究样本的TVAC范围从2.8×10⁵4.9×10⁵cfu / g低于最大可接受的极限。所有样品的每种类型的鱼满足指定的可接受的极限ICMSF指出高质量的冷冻鱼。

图1显示所有冷冻鱼的TVAC样本被观察到的密度总需氧细菌检测舌鳎鱼样本相对高于所有的鱼类而细菌数最低的是观察样品的犹太人的鱼。大量的细菌随时间逐渐减少的鱼类样本中所有的鱼类。这可能是由于无菌加工和处理,适当的抽样,训练有素的人员,提高了储存条件,增加了保护意识。

可接受的大肠菌群(TC)和类型大肠菌群的总额的限制(FC)对新鲜和冷冻鱼< 100或然数/ g和< 10或然数/ g,分别18]。TC的存在是污水污染的指标,也可能发生在运输和处理等不同的处理步骤。此外,造成的污染也可以用水洗或结冰19]。排泄物污染的更准确的指标是粪大肠杆菌群大肠杆菌(20.]。可以有利于降低大肠杆菌群数指出在处理过程中安全措施的有效性和处理(21]。在目前的研究中,总大肠杆菌群数范围从5或然数/ g 28或然数/ g和粪大肠杆菌群数从3或然数8.3或然数/ g / g。数据2和3显示最高的大肠菌群与类型大肠菌群的数量的细菌舌鳎鱼而最低的计数是观察样品的犹太人鱼,分别。我们的研究显示,所有的样品都在规定范围内,表明样本来自无污染的水和食物处理器和整个加工处理程序保持无菌的条件。

水和冰的最重要的因素是处理出口的鱼。这两个因素有助于确定和维护的标准冻鱼的质量。数据4和5显示了水和冰的TVAC样本,分别在研究期间。发现TVAC水样和冰样本范围从3到18 cfu /毫升。显著减少水和冰的TVAC样本观察时间。总大肠菌群和粪大肠杆菌群数对样品没有被发现。因此,我们的研究显示,所有的测试样本符合推荐ICMSF指定的限制,也就是说,TVAC < 20 cfu /毫升,大肠杆菌群和粪大肠杆菌群数低于限制或然数的检测方法。这可能是由于水和冰的先进的和改进设备净化、治疗和处理。

海鲜感染是由各种各样的细菌,病毒和寄生虫。根据疾病预防和控制中心(CDC),在1973年到2006年,188年爆发的seafood-associated感染,导致4020人患病、161人住院,和11人死亡,据报道的食源性疾病疫情监测系统。大多数这些seafood-associated爆发(143(76.1%))是由于细菌;40(21.3%)爆发病毒病原学;和5(2.6%)有一个寄生虫引起。根据这份报告,弧菌最常报道的原因seafood-associated暴发产毒素的哪里霍乱弧菌导致没有死亡和non-O1 3和10疾病暴发,non-O139霍乱弧菌4和12疾病暴发造成没有死亡,而沙门氏菌负责18爆发,374人患病,28日在研究期间住院(22]。

最近美国疾病控制与预防中心报道说,大约有62人被感染沙门氏菌乙型副伤寒变体酒石酸L(+)(+)(原名沙门氏菌Java)从美国11个州相关消费的冷冻生金枪鱼。感染表现为腹泻、发烧和腹部绞痛后12 - 72小时暴露没有副伤寒、伤寒肠热病或伤寒(23]。

虽然在孟加拉国,食源性疾病与新鲜的或冷冻海鲜消费尚未追踪或数据在这个问题上仍然缺乏。在这种背景下,微生物分析冷冻鱼和渔业产品的似乎是一个重要的问题。这种类型的研究产生科学信息这将有助于在未来防治疫情相关的海鲜消费。根据国际微生物学协会社会的规则,新鲜和冷冻鱼应具备弧菌种虫害,也不沙门氏菌spp。优质的冷冻样本调查所有这些病原微生物的样品是免费的。

细菌生长在冷冻鱼的主要原因之一是食物变质或污染的鱼。因此,冷冻鱼的微生物分析样本和鱼类加工材料(水和冰)作为鱼质量测定的指标。目前的研究报道,所有的鱼样品连同材料满足ICMSF建议的标准水平表明,无菌和适当的卫生条件得到妥善维护所有步骤如感染、着陆、运输、加工、处理和保存。

4所示。结论

虽然海鲜是健康饮食的一部分,它的消费不是风险。全球持续seafood-associated感染疫情呈现现有的控制策略问题。了解病原微生物、海鲜与疾病相关的商品,和机制适合的污染控制是必要的预防seafood-associated感染疫情。协调努力从政府部门和私营行业迫切需要与联邦机构在这个上下文。需要使用pathogen-specific常规监测系统技术来避免任何未来的暴发。然而,目前的研究显示,微生物研究冷冻鱼类和鱼类加工材料的质量(冰和水)在指定ICMSF的极限。因此可以得出结论,这些鱼是正确处理对待无菌水和冰,最后,保持在良好的存储条件。因此,研究冷冻鱼足够合格的出口以及人类消费从细菌的观点。的存在病毒、寄生虫、可行但nonculturable致病菌(VBNC)状态,和生化参数如组胺在冷冻鱼产品风险可能是一个问题是本研究的局限性。ICMSF之外,为了遵守更严格的土著输出国的质量标准,必须考虑这些质量参数。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

承认

作者感谢当局的“泰姬姆尼尔鱼保护者有限公司”吉大港,孟加拉国,提供他们的设施和指导。

引用

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