文摘

涉及肺转移性癌是一种常见的外科病理学标本中遇到。这些转移可能有不同的形态,架构模式,可能模仿原发性肺腺癌,尤其是intra-alveolar (lepidic)模式的传播可能模拟主肺支气管肺泡癌(原位腺癌)。我们报告的情况下,转移性胰腺癌,形态模仿的肺支气管肺泡癌,肿瘤已独家intra-alveolar模式的传播和有一个immunophenotype noninformative网站的起源(细胞角蛋白7 +,细胞角蛋白20−TTF-1−)。在本例中,我们使用KRAS基因突变分析支持,所代表的肺癌转移性胰脏癌,他们都拥有相同的密码子12 KRAS突变。我们表明,这个方法可能是一个有用的方法来证明网站原产地转移carcinoma-particularly如果标准形态学和免疫组织化学分析是不确定的。

1。介绍

肺是一个频繁的网站转移和主要癌。许多不同的模式转移到肺部描述:结节/质量,通过淋巴癌症,肿瘤栓子,支气管增长,intra-alveolar (lepidic)传播。intra-alveolar扩散的肿瘤细胞取代肺泡衬里,模仿支气管肺泡癌(原位腺癌)。从胃肠道癌转移,包括胰腺,已知一个intra-alveolar传播模式(1,2]。免疫组织化学研究通常有助于区分这些实体。例如,如果肿瘤表达甲状腺转录因子- 1 (TTF-1)这是强有力的证据表明,肿瘤是一个肺主。然而,在许多情况下免疫组织化学可能不是那么有用,特别是当遇到一个与粘液腺癌分化TTF-1负面。在此设置、形态学和免疫组织化学可能没有明确的和临床相关性往往依靠的区别。

突变涉及克里斯汀•鼠肉瘤病毒致癌基因相同器官(喀斯特)基因存在于绝大多数的胰腺腺癌(超过90%)和不经常在肺腺癌(15 - 30%)3- - - - - -6]。在本文中,我们使用的识别KRAS突变的分子签名肺转移性胰腺癌,从而表明,这种技术可以用来识别网站转移癌的起源。

2。病例报告

一位60岁男性冠状动脉疾病的病史,腹主动脉瘤,60 pack-year吸烟史发达无痛性黄疸前一年的评估。他的CA 19.9升高2770 U /毫升(参考区间0-25 U /毫升)。计算机断层扫描(CT)的胸部,腹部和骨盆显示3.0厘米质量涉及的胰腺与主胰管扩张有关。多个小结节在肺部指出,最初是觉得代表肺炎;抗生素管理。一个月后表现为他的胰腺癌患者接受剖腹手术质量。肺部病变在CT扫描保存和患者进行CT引导下肺活检。

3所示。材料和方法

3.1。组织学和免疫组织化学

标准的苏木精和伊红())的彩色部分病理标本检查。在我们医院进行了免疫组织化学研究实验室。其中包括甲状腺转录因子- 1 (TTF-1 8 g7g3/1克隆,细胞品牌,Rocklin、钙、美国)、细胞角蛋白7 (OV-TL克隆、Dako Carpinteria, CA,美国),和细胞角蛋白20 (K520.8克隆、Dako Carpinteria, CA,美国)。疣状Ventana基准XT上执行(美国亚利桑那州图森市Ventana医疗系统)使用标准的程序/制造商的指示。用苏木精复染色。

3.2。DNA提取、PCR扩增

手动解剖肿瘤含有超过50%的地区进行formalin-fixed,石蜡包埋(FFPE)块。根据制造商的协议执行DNA提取(Trimgen WAXFREE石蜡DNA提取工具,火花,医学博士,美国)。聚合酶链反应(PCR)是9700年GeneAmp PCR系统上执行。引物用于放大KRAS基因密码子12生物素标记了PCR引物5′-biotin-TGACTGAATATAAACTTGTGGTAGTTG-3′和反向引物5′-TCGTCCACAAAATGATTCTGAA-3′。引物序列12 p1: 5′gca CTC TTG有条件现金援助ACG CCA C, 12 p2: 5′gca CTC TTG有条件现金援助ACG CCA,和13 p2: 5′gca CTC TTG有条件现金援助ACG。PCR程序如下:95°C 5分钟;95°C 20秒钟,58°C,保持30秒钟,72°C,保持20秒钟;40周期,72°C 5分钟。

3.3。通过焦磷酸测序获得的KRAS突变的检测

20 uL固定化在链霉亲和素生物素化的PCR产物的涂敷的琼脂糖珠(链霉亲和素琼脂糖高性能、通用电气医疗集团,皮斯卡塔韦,新泽西,美国)。混合物在室温下旋转在1300 rpm的10分钟,然后珠子含有PCR产品清洗,变性,洗。测序引物退火单链DNA片段。序列反应和检测由Pyrosequencer ID(美国试剂盒,瓦伦西亚,CA)。结果报告为突变与野生型的百分比。

4所示。结果

4.1。病理结果

术中评估惠普尔切除了一个3.0厘米质量的胰腺头部严重缠绕在胆管。微观部分从中度到低分化肿瘤显示胰腺腺癌。肿瘤细胞显示这两个定义良好的腺形成和其他领域更薄片状的增长。区域淋巴结有转移癌。涉及胰腺腺癌的免疫组织化学染色显示强烈的表达细胞角蛋白7。

的微观部分肺活检显示分化良好型的nonmucinous涉及肺腺癌与intra-alveolar (lepidic)传播(图1(一))。肿瘤细胞深染立方与深高的柱状沿肺泡壁嗜酸性胞浆的安排。坏死是不存在。Angiolymphatic入侵肿瘤没有见过。肺肿瘤与胰腺肿瘤的分化良好区域;然而大部分的胰腺肿瘤低分化。肺肿瘤染色与细胞角蛋白7(图1 (b)),但不利于细胞角蛋白20和TTF-1。独自在形态学和免疫组织化学的理由我们不能明确区分转移性胰腺癌和nonmucinous bronchioalveolar癌。

4.2。焦磷酸测序/分子研究

焦磷酸测序KRAS基因的密码子12和13透露,胰脏癌和肺癌存在一个相同的密码子12 c。35 G > T (Gly12Val) KRAS突变。在这个临床和病理情况下,相同的KRAS突变的存在在胰腺和肺被认为是支持涉及肺转移性胰腺癌。

5。讨论

k是一种蛋白质编码的KRAS基因GTPase活性,参与细胞的信号转导和行为的下游表皮生长因子受体(EGFR)。重要的是细胞生长和分化。如果KRAS基因突变,致癌的RAS激活信号。KRAS突变是肿瘤发生的重要事件之一的癌不同器官包括胰腺、结肠、肺(3,7,8]。

最常见的肿瘤有KRAS突变是胰腺腺癌出现在90%以上的情况下(3]。在一项研究中,结果表明,原发性胰脏癌及其相应的转移携带相同KRAS突变(3]。密码子12是最常见的网站在胰腺癌KRAS基因突变与大多数c。35 G > T (Gly12Val)突变3]。KRAS突变的比例远远低于在肺腺癌(15 - 30%)的特定突变出现在这种情况下c。35 G > T (Gly12Val)代表的一个子集KRAS突变肺癌(4- - - - - -6]。许多研究表明,KRAS突变比nonmucinous粘液中常见bronchioalveolar癌,特别是吸烟者(9,10]。

它已经表明,转移性肿瘤的焦点应该有相同的KRAS突变为原来的原发肿瘤(7]。然而,转移病变可能会显示没有出现在主的新突变。结直肠腺癌在一项研究中,不同的突变的频率(喀斯特,BRAF,国家管制当局方面,PIK3CA)被发现显著变化的位置转移(肺、脑和肝脏)7]。分析突变的小学和转移显示一致性在88%的病例97例(86)对所有4基因分析。不和谐的情况下,9 11例突变,在场只有在转移焦点。

肺是一个常见的癌转移。描述了几种模式的转移到肺:离散结节,通过淋巴癌症,肿瘤栓子,intra-alveolar lepidic传播模式。intra-alveolar模式是最难以区分主肺动脉carcinoma-principally bronchioalveolar癌(原位腺癌)。众所周知,从胃肠道转移往往会表现出一个intra-alveolar传播(1,2]。这可以创建一个重要诊断困境。

区分原发性肺腺癌和转移癌并不总是直截了当,和额外的免疫组织化学研究是很有帮助的。最有用的免疫组织化学染色区分胃肠道癌和肺癌TTF-1,细胞角蛋白,细胞角蛋白20日CDX2, villin [11- - - - - -14]。TTF-1是积极的在绝大多数常规肺腺癌包括nonmucinous bronchioalveolar型癌(BAC)。然而,在粘液BAC只有21%是阳性TTF-1 [15]。肺和上消化道(胃、胰腺)经常表达细胞角蛋白7虽然大肠癌癌不太可能是正的。细胞角蛋白20表达在大多数大肠癌癌,在上消化道癌较少。的表达细胞角蛋白20在传统原发性肺腺癌是罕见,然而,大多数粘液BAC表达细胞角蛋白20 (11]。转录因子CDX2是可靠的肠道分化标记连同villin的表达。原发性肺腺癌中然而,CDX2和一般少villin表现与粘液性原发性肺腺癌特别是分化(16,17]。尽管有这些标记,在许多情况下,它可能很难明确区分主要从转移癌,特别是那些有粘液性分化。

在本文中,我们表明,突变分析喀斯特可以使用原产地诊断更加明确地确定网站的转移性癌这个实例肺转移性胰腺癌。使用KRAS突变分析来支持网站的转移性肿瘤起源以前没有报道。p53突变的突变分析被用于研究的转移性癌的肺原发部位不能被识别。通过对比p53突变在已知原发肿瘤在场,p53突变分析可以正确分类七九肿瘤的肺是未知的如果这代表一个原发肿瘤和转移(18]。用类似的方法基本上等人曾经p53突变分析表明多个肺肿瘤患者存在肺癌和转移性乳腺癌(19]。

以来的大部分胰腺腺癌与KRAS突变相关联的模式转移到肺的胰脏癌经常模仿bronchioalveolar癌,我们觉得KRAS突变分析可以明确确定网站是一个有用的助手。这个方法是有利的,它可以很容易地用于FFPE组织样本。

此方法的一个缺点是,转移性肿瘤可能港口不存在突变的原发肿瘤(7]。同时,理论治疗可以减少肿瘤内的变化或选择特定的肿瘤细胞克隆拥有不同的突变比出现在原发肿瘤。理想情况下,使用KRAS突变分析如果突变是最有帮助的互斥肺腺癌,但还存在一种可能性,病人可能开发港口相同的KRAS突变的两个截然不同的初选。这种方法比较传统的形态学和免疫组织化学可以提供额外的支持级别肿瘤是转移癌。另一个缺点是同时拥有肿瘤组织的要求从原发肿瘤和转移的比较。这种方法应该小心使用如果分子测试只是在执行组织怀疑是转移性的来源。

6。结论

我们证明的突变分析喀斯特原产地可以有助于确定网站的转移癌的肺的形态学和免疫组织化学结果并不明确。进一步研究一系列更大的情况下可以帮助来验证这种方法。

承认

本文提出了海报在美国病理学家的2012大学(CAP)会议在圣地亚哥,加州,美国。