ret阴性甲状腺髓样癌的BRAF V600E突变

摘要

我们报告零星甲状腺髓样癌的妇女的情况。基因组分析发现，她的肿瘤不包含任何常见受潮湿腐烂但确实孕育了aBRAFV600E突变。在MTC患者中，只有另一个证实的BRAF V600E突变的例子被报道。我们得出结论，这是普遍的BRAF突变可能独立驱动人类副滤泡C细胞的肿瘤转化。

1.介绍

髓样甲状腺癌(MTC)占美国所有新发甲状腺癌的1-2% [1]。大约20%的MTC具有遗传模式，通常是由生殖系突变引起的受潮湿腐烂基因。其余的MTCs是非家族性的，其中50%为体细胞性的受潮湿腐烂突变。患者体细胞受潮湿腐烂与无a突变的MTC相比，突变(最常见的是p.M918T)的总生存时间更短受潮湿腐烂突变(2]。较少见的散发性MTC不存在a受潮湿腐烂突变，但与拉要么碱性基因重排。一般来说，BRAF点突变已被发现在非-中缺失受潮湿腐烂-mutated MTC标本[3.]。

2.病例报告

我们报告一个66岁的非裔美国女性，偶然发现一个1.3厘米的甲状腺结节。细针穿刺活检显示MTC细胞学特征，降钙素染色呈阳性(CT)。没有甲状腺癌或其他内分泌肿瘤的家族史。血清CT 75 pmol/L升高，血清CEA正常。血液DNA分析为阴性受潮湿腐烂外显子5、8、10、11和13-16的种系突变。甲状腺全切除术和颈部中央淋巴结清扫后的病理分析显示MTC为1.8 cm(图)1(一))多灶性，甲状腺外扩张，10个淋巴结中有6个有MTC。肿瘤被微解剖，并通过下一代测序分析50个最常见的致癌基因突变，包括受潮湿腐烂和拉基因。唯一检测到的异常是aBRAFp。V600E突变(图1 (b))。a的存在BRAFp。V600E突变被另一个检测平台确认(图)1 (c))。的BRAFp。在两种检测平台上均以低等位基因频率(5-10%)在该患者肿瘤中检测到V600E，可能反映了肿瘤异质性和组织样本的低肿瘤负荷。颈部和胸部的影像学检查和肝脏的MRI对转移性疾病均为阴性。甲状腺切除术后一个月，血清降钙素为70.1 pmol/L。在2年的随访中，她仍然无症状，血清CT水平为26.3 pmol/L, CEA为2 mcg/L，检查或影像学均无疾病的临床证据。

(一)

(b)

(c)

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图1

(a)甲状腺肿瘤h&e放大100倍(左)和200倍(右)的组织切片。组织显示固体片状和巢状细胞被透明化的纤维血管间质分隔。细胞间散布均匀的非细胞性、嗜酸性、细胞外基质，与淀粉样蛋白一致(实心黄色箭头)。有大量散在的钙化(蓝色实心箭头)。细胞学上，肿瘤细胞呈纺锤形、浆状或多面体状，胞核圆形至卵圆形，有点彩，核染色质细小而均匀，呈盐、胡椒状，胞浆中可见粉红色颗粒状。这些结果与甲状腺髓样癌的诊断一致。(b)集成基因组查看器中突变序列的代表性显示BRAF由下一代测序分析检测。图中显示了这个核苷酸位置(1799)的单独测序读数。A(绿色)到T(红色)核苷酸取代(变异等位基因频率，10.3%)导致在密码子600 of的氨基酸取代(谷氨酸对缬氨酸)BRAF。(c)出席BRAFp。通过Sequenom仪器(Agena Biosciences)的多路PCR和单碱基延伸质谱分析确认V600E突变。质量(x-轴)及强度(y设在)BRAF显示峰值。蓝色箭头表示通配型BRAF峰，且红色箭头表示突变体BRAF高峰。T到核苷酸取代显示结果氨基酸取代(谷氨酸对缬氨酸)在密码子600BRAF。

3.材料和方法

在标准的病理评估中，肿瘤组织的形态特征与甲状腺髓样癌的诊断相一致(图)1(一))。在甲状腺标本的其他部分没有组织学证据显示为乳头状甲状腺癌(PTC)，包括在MTC内没有PTC的混合。此外，切除的淋巴结中没有任何组织学证据显示有PTC。肿瘤组织的体细胞突变分析使用50基因下一代测序分析(Ion AmpliSeq tumor Hotspot v2, Life Technologies)和单碱基扩展的单核苷酸变异基因分型，然后使用质谱分析(Oncocarta Panel和Sequenom, Agena Biosciences)。该案例的报告得到了休斯敦卫理公会机构审查委员会(IRB # 1014-0216)的批准。

4.讨论

在散发性MTC病例中，绝大多数分析体细胞突变的研究继续表明，突变不是受潮湿腐烂和拉仍然非常罕见或不存在。我们的病人组织学上是典型的MTC，没有并发的PTC，但意外地有aBRAFp。V600E突变，通常只与PTC相关。只有另一份报告证实了韩国一名MTC患者存在V600E突变[4]。一份来自希腊的令人瞩目的报告发现，68%的MTC病例都有aBRAFp。V600E突变(5]。这种极不典型的结果尚未得到证实，某些方法细节可能导致了假阳性结果[4]。然而，许多其他研究人员[6- - - - - -8]没有发现任何BRAF成百上千的点突变受潮湿腐烂和非受潮湿腐烂突变的矿渣MTC的病例。一个MTC病例被发现有一个独特的融合PARP12（外显子1-9）和BRAF(外显子11-18)，产生推定的致癌基因[9]。B-Raf是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，是MTC中经常被激活的RET/Raf/MEK/ERK通路中的关键元素。我们罕见的发现表明功能的增加BRAF在a缺失的情况下，点突变可能通过MEK/ERK途径驱动人旁滴C细胞的恶性转化受潮湿腐烂突变。然而，存在这样的可能性BRAF点突变，这是存在的低等位基因频率，可能无法在这种情况下的致病或“驱动器”的突变。

利益冲突

作者声明没有利益冲突。

致谢

这项工作得到了美国医疗保险和医疗补助服务中心的支持;休斯顿卫理公会医院;卡伦基金会学者基金;以及西方石油学者基金。

参考

1. 王建民，“甲状腺髓样癌的临床表现”，中华民国医学研究所硕士论文甲状腺癌:临床管理的综合指南L. Wartofsky, D. Van Nostrand, Eds。,pp. 853–864, Springer Science + Business Media, LLC, New York, NY, USA, 3rd edition, 2016.视图:谷歌学术搜索
2. 吴宏基，吴永泰，吴永泰，“RET和RAS突变在散发性甲状腺髓样癌中的临床意义:一项荟萃分析，”Endocrine-Related癌症第25卷，no。2018年第633-641页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. M. Xing, V. Vasko, G. Tallini等，“不同甲状腺肿瘤的BRAFT1796A转位突变，”临床内分泌与代谢杂志卷。89，没有。3，第1365-1368，2004年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. U.卓，W. J.噢，J.S。Bae等人，“在韩语甲状腺癌患者少见BRAF突变的临床病理特征，”杂志韩国医学科学第29卷，no。8，第1054-1060页，2014。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. “BRAF和K-RAS基因在希腊乳头状和髓样甲状腺癌群中的突变”，M. Bouka, a . C. Lazaris, G. Nasioulas，和M. Gazouli，“BRAF和K-RAS基因在希腊乳头状和髓样甲状腺癌群中的突变”，抗癌的研究，第28卷，第305-308页，2008。视图:谷歌学术搜索
6. 陈明，“在甲状腺髓样癌中RET、HRAS、KRAS、NRAS、BRAF、AKT1和CTNNB1的突变筛选”。抗癌的研究卷。31，第4179-4183，2011。视图:谷歌学术搜索
7. F. P. Nascimento的，M. G.卡多佐，S. C. Lindsey等人，“在患者甲状腺髓样癌BRAF，CDKN2A / p16和PI3KCA体细胞突变的分析，”分子医学报告第13卷，no。2, 1653-1660页，2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. P. Vanden Borre, A. B. Schrock, P. M. Anderson等人，"小儿、青少年和年轻成人甲状腺癌具有频繁和多样化的靶向性基因组改变，包括激酶融合，"肿瘤学家卷。22，没有。3，第255-263，2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. K. Kasaian, S. M. Wiseman, B. a . Walker等，“甲状腺髓样癌伴发融合”，分子的案例研究第2卷第1期2、文章编号a000729, 2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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