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答:希腊,m . Ragucci r·里m . Prota n . Cocchia g . Fatone m·曼奇尼a . Brunetti l . Meomartino, ”无创性超声监测的胚胎和胎儿发育钦奇利亚lanigera预测妊娠年龄:这个物种作为小说的初步评估人类怀孕的动物模型”,对比媒体& # x26;分子成像, 卷。2019年, 文章的ID6319476, 9 页面, 2019年。 https://doi.org/10.1155/2019/6319476
无创性超声监测的胚胎和胎儿发育钦奇利亚lanigera预测妊娠年龄:这个物种作为小说的初步评估人类怀孕的动物模型
答:希腊
,1,2,3
m . Ragucci,2
r·里,2
m . Prota,4
n Cocchia,4
g . Fatone,4
m·曼奇尼,2
答:Brunetti,1
和
l . Meomartino3
1先进的生物医学科学系,那不勒斯大学的费德里科•II, 80131年那不勒斯,意大利
2那不勒斯Biostructure Bioimaging研究所,中国北车,80131年,意大利
3跨部门的兽医中心放射学,那不勒斯大学的费德里科•II, 80137年那不勒斯,意大利
4兽医和动物生产,那不勒斯大学费德里科•II, 80137年那不勒斯,意大利
文摘
超声波是一种无创性胎儿发育的常规方法,允许实时监控在子宫内确定胎龄和检测先天性畸形和多胎妊娠。到目前为止,发育生物学的钦奇利亚lanigera尚未为特征。这个物种被发现进行胎座式,长妊娠,胎儿的维度与人类相似。本研究的目的是评估使用高频超声(hfu)和临床超声(美国)预测孕龄栗鼠和评估的可能性这个物种作为一种新的动物模型研究人类怀孕。在这项研究中,35岁的怀孕雌兽和共有74个胚胎和胎儿监测。钦奇利亚几乎所有科目的超声检查是可行的。钦奇利亚可以监控胚胎与胚胎hfu天15 - 60 (E)和我们从E15 E115由于胎儿维度。胎盘可以可视化和测量从E15 hfu,但不是和我们在一起,直到E30。E30的心跳检测,可以测量胎儿生物识别技术。在怀孕的后期,胃,眼睛,眼镜变得可见。我们的研究证明了使用这两种技术的重要性,同时监测胚胎和胎儿发育获得全面和详细视图的所有结构和识别任何畸形处于初期阶段。 Pregnancy in chinchillas can be confirmed as early as the 15th天postmating,超声和妊娠年龄相关变化。胎儿和胎盘生长的定量测量在这项研究中可能是有用的在建立一个数据库进行比较与人类胎儿的超声波。我们推测,钦奇利亚在未来,可以作为一个动物模型在研究人类怀孕。
1。介绍
发育生物学的驯化的长尾钦奇利亚lanigera,南美的物种,不是很透彻了。最近,它已被证明,胎盘和胎儿的新陈代谢和胎盘血管栗鼠非常类似于人类的1,2]。钦奇利亚的胎盘的haemomonochorial迷宫一样的类型,因此类似于人类绒毛haemomonochorial胎盘,证明这个物种适合人类产科研究和胎盘和胎儿功能研究3- - - - - -5]。女性通常双胞胎妊娠后(范围:1 - 6幼崽)∼112天(范围:105 - 115天)和生每年2 - 3窝,导致相对比其他啮齿动物更少的后代6]。钦奇利亚的生殖生理学hystricomorph myomorphic啮齿动物的不同于一般用于生物医学研究。同时,钦奇利亚有一个长妊娠期和发情周期相对于其他啮齿动物;例如,妊娠期豚鼠的范围从59到72天,老鼠从21到23天,老鼠从19到21天的7- - - - - -10]。漫长的孕育和减少每个妊娠的胎儿数量允许更好的可视化的胚胎,再纵向监测,胎盘和胎儿器官的更详细的分析。此外,新生儿钦奇利亚的重量相对较高(50 - 70 g)相比,成人钦奇利亚的重量或其他啮齿动物模型,有利于仪器超声检查(8]。
超声成像技术的选择分析胚胎和胎儿在子宫内形成11- - - - - -15]。直到几十年前,结构性表现型是基于宏观检查和组织学技术只允许静态结构的后期分析。随后,可用不同的成像方法已经成为研究小动物,如超声、磁共振成像(MRI),光学成像和共焦活组织镜检查(2,16- - - - - -18]。超声的能力获得纵向数据实时无创、能力分析几乎所有器官的形态,并且能够对大多数的结构进行定量测量了这种成像方式在医学成像领域的特别有利。常规超声使用的频率范围,从2到15 MHz,空间分辨率为200 - 500μm;这些系统已成为明显的局限性在几项研究在老鼠胚胎发育,尤其是在形态发生阶段(11]。技术进步的发展也导致高频超声(hfu),实现显微分辨率,因此是最好的成像技术监测小动物的胚胎发育。hfu系统使用频率越高,40 - 100 MHz,空间分辨率约为30μm;因此,它们可用于成像发展过程中出现微小的有机体(11,13]。
以前,我们的研究小组使用hfu监测小鼠胚胎和胎儿发育。我们评估表型的变化参数在怀孕期间和评估胎儿生理参数的主要器官发展建立一个数据库的正常结构和功能参数鼠标发展(12,13]。钦奇利亚由于胚胎的维度,它是不可能监控整个怀孕hfu(除了一些特定的参数),但有必要使用传统的超声波在怀孕的晚期。直到今天,没有发表报告的使用超声波监测栗鼠的胎儿发育。我们的研究的目的是获得新知识的栗鼠的生殖生理学根据妊娠与人类的相似之处和评估这个物种是否可能用于产科生物医学研究。
2。材料和方法
这项研究是钦奇利亚所有者和育种者的同意。道德间隙(50380 - 2018)动物实验伦理委员会的那不勒斯大学的费德里科•II。
健康怀孕的栗鼠跨部门放射中心分析了那不勒斯大学的费德里科•二世和拉普拉塔育种中心Cupello (CH),意大利。
我们把妊娠分为四个阶段:早期(T1)从胚胎天(E) E15 E30,早期阶段(T2) E31 E46,中间阶段(T3) E47 E70,和高级阶段(T4) E71 E115。监视的女性的怀孕阶段是由去年的出生日期。钦奇利亚,以及豚鼠,开始一个新的发情12-48 h出生后(6]。从这个日期,我们认为一段大约115天的妊娠;在分娩,这两个概念的有效时间和回顾性确诊怀孕的阶段。
2.1。超声成像
超声(美国)考试都是由一个有经验的兽医超声波检查仪清醒主题轻轻克制以避免任何可能的怀孕女性压力。我们监控35怀孕女性平均年龄为3.5岁。其中,15人在第二耦合,10个在第一,10第三。用于本研究的动物进行了三分法的骨盆和腹部没有镇静钦奇利亚是必要的,因为是一种温顺的动物。所有测量是由相同的超声波检查仪,以确保一致性在调查期间。在每一个怀孕的女性,2 - 3胚胎成像。胎儿ultrasonographically评估的数量与实际数量的胎儿在分娩,传达给我们的育种家和主人。获得美国整个研究的结果后,妊娠被划分为四个阶段,以纵向分析了相同的形态学参数。钦奇利亚每个监控与我们在一段时间内从E15 E115,总共四个我们考试对于每个钦奇利亚。我们进行每两周怀孕之初,在T1和T2,大约每40天,在T3和T4,避免过度压力的动物。 The exact day of pregnancy, in which US was performed, was retrospectively determined only after the delivery date, which was communicated to us by the breeders and the owners.
在T1阶段,我们使用高频超声波系统,Vevo 770 (Visualsonics、加拿大),配备了40 MHz高分辨率的线性转换器(焦距6毫米,深度渗透5 - 15毫米,决议30 - 40毫米轴向,横向和70 - 90毫米)。在另一个阶段,我们使用我们设备(Esaote MyLab 30日,费伦泽)配有12 MHz线性探针。得到了一系列的测量:纵向和横向直径的妊娠囊和胎盘T1的直径和厚度。T2、T3和T4,我们测量孕囊的大小、胎盘的直径和厚度,crown-rump长度(CRL)。此外,我们测量了头直径(HD),身体直径(BD) occipital-snout长度(OSL)、心率(HR);股骨长度(FL)和胃测量从T3和眼睛在T3和镜头直径测量。
2.2。统计分析
连续变量平均值±标准偏差报告。单变量分析每个变量和胚胎天之间使用斯皮尔曼等级相关的执行(Rs)。线性回归分析是用来评估胚胎变量和妊娠时间之间的关系。一个值< 0.05被认为是具有统计学意义。统计分析使用MedCalc 18.2.1软件(比利时奥斯坦德)。
3所示。结果
3.1。超声发现
超声检查是可行的钦奇利亚在所有科目。每个超声检查持续了大约10分钟。这两种技术,hfu和美国,能够诊断怀孕。然而,并非所有的胎儿结构可以用这两种技术。在第一阶段(T1),我们发现74个胚胎,但在交货,这个数字减少35栗鼠有效地交付了67只。考虑到35岁怀孕的女性,怀孕损失为11%。因为它是不可能获得每个参数的测量在每个超声检查,我们报道了胎儿的确切数字,每个参数测量(表1)。
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艾凡:胚胎;BPM:每分钟跳动。 |
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钦奇利亚可以监控胚胎从E15 hfu E60和我们从E15 E115。这是由于增加胎儿维度,不允许与hfu几个胎儿结构的精确测量。分析胎儿的assessability结构取决于他们的尺寸和厚度:胎盘为100%,高清为82%,CRL是57%,股骨是26%。我们总结了评估结构/妊娠阶段,采用超声波技术在桌上2。
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在T1, E15 E30,可以可视化妊娠囊hfu和我们。然而,胎盘直径和厚度是可视化和测量只有hfu因为胎盘在这个阶段还没有圆盘的形状。在非常早期的阶段,它也可以识别和测量妊娠囊和区分原始节点(图1)。
(一)
(b)
T2,从E30 E46,胎盘直径和胎盘的厚度是可视化。从E30,可以测量CRL hfu和我们(图2),从E38 BD也可衡量的。所有这些参数都是更好的可视化与hfu T2。OSL,尤其可以从E40可视化和测量,因为在这个胎龄,头变得良好定义的。
(一)
(b)
(c)
(d)
E30的心跳与hfu首次检测到,和可以想象在E46神经管(图完成3)。
(一)
(b)
从E55,可以检测到胃,眼睛,眼镜(图4)。
(一)
(b)
(c)
(d)
在E66股骨变得清晰可见和可衡量的,因为增加了矿化(图5(一个))。在先进的怀孕阶段T4 (E75-E115),再也不可能测量CRL由于胎儿维度,骨矿化明显,眼睛和眼镜的尺寸是大约相同的新生儿(图5)。
(一)
(b)
(c)
从一开始的中间阶段T3 (E47-E70),可以监控栗鼠只与我们由于胎儿的成长维度结构。然而,我们能够使用hfu测量前后的,直到E115 laterolateral透镜直径。hfu在这个阶段的妊娠(E60)也是有用的可视化心脏室间隔和量化人力资源到怀孕。
3.2。统计分析
总结前两个阶段的最重要的结果(T1和T2),胎盘直径的增加从0.8厘米到1.6厘米(大约2倍)和胎盘的厚度从0.4增加到1.21厘米(约三倍)。一块直径的分析和胎盘的厚度,测量纵向四个阶段,提出了在图6。
(一)
(b)
妊娠囊的纵向尺寸从1.17增加到2.39厘米(2倍),直到E49。CRL,高清,BD逐渐增加(CRL: 0.7至2.7,4倍;高清:0.25至0.65,5倍;双相障碍:0.85 - 1.9厘米,大约2倍)到怀孕结束(数字2和3)。参数的精确测量从怀孕的第一天到最后的报道在表3。
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所有结构测量,除了股骨长度,与孕龄显著相关。相关分析的结果被发表在表4。
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基于期间可以同时测量上述变量,测量他们的胚胎被安置在回归分析三组:第1组中变量之间的可衡量的时间T1 T3(即。,妊娠囊直径和胎盘直径和厚度);第二组包括变量之间的可衡量的时间T2与T3(即。、胎盘直径和厚度、CRL,高清,BD, OSL,和人力资源);组3包括变量可测时间T2 T4之间(即。、胎盘直径和厚度、BD、OSL,高清,人力资源)。使用这种分析,三种模型预测得到了孕龄(表5)。
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模型1使用胎盘厚度预测孕龄T1和T3。模型2使用人力资源和CRL来预测妊娠年龄从T2与T3。最后,模型3使用HD和人力资源预测妊娠年龄从T2 T4。 |
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4所示。讨论
我们对胚胎和胎儿的发展c . lanigera使用一种超声技术,我们预测胎龄与超声参数的分析。
超声是一种非侵入性的方法,提供了一个纵向,实时和详细的形态学评价胎儿体内。此外,我们是快速和便宜比其他成像方式在筛查新生儿缺陷。我们进行一个纵向、定性和钦奇利亚的形态学评价胚胎从E15参数使用hfu和美国怀孕的最后一天。作为人类产科,我们分析了不同的形态学参数有用的预测胎儿的胎龄(CRL或人力资源等)和其他类似高清,OSL,或BD,胚胎解剖测量大小,胎盘的位置,和结构,用于预测异常未出生的孩子。超声考试所有科目是可行的,即使受试者醒了。执行我们考试时遇到的主要困难与钦奇利亚的解剖,拥有高度发达的盲肠,有时会阻碍一些眼前的利益结构。此外,栗鼠有一个大的胎儿的头,特别是在怀孕的最后一部分,当矿化先进,可以阻碍胎儿的其他解剖结构的可视化。最后,我们是一个主观的技术,操作人员的专业知识和能力是非常重要的。在进一步的研究中,这将是有用的比较我们评估由两个或两个以上的运营商来评估可靠性、敏感性和特异性的方法。
自从动物检查在本研究中被饲养或拥有宠物,我们必须清醒上执行考试科目。钦奇利亚的这种情况下,上述解剖特征有限的一些解剖结构的分析。然而,在怀孕期间的形态学数据我们得到不同的参数是一致的和可再生的在同一妊娠阶段,并没有任何女性显示压力期间或之后我们考试的迹象。所有受试者完成怀孕虽然有些胎儿被重吸收。研究在老鼠在全身麻醉下进行更详细;然而,麻醉剂的使用往往会影响新生儿的后代,从而扰乱可能与人类相比超声波发现(19]。
我们的目的是为了保护幼崽的福祉和胎儿和演示的noninvasiveness和可行性超声检查,也可以进行清醒的科目。在我们的研究中,一些观察天错过了因为我们只有四个执行检查/钦奇利亚(从E15 E115)。这样做是为了避免过度强调怀孕的女性。也限制在我们的研究中,在115天,我们前两个执行分析在第一个115天,大约每2周,然后大约每40天之后,我们凭借一些时间点的观察。这是由于困难到达繁育中心,同时也因为使用的栗鼠研究被驯化动物和实验动物。因此,我们调整了我们的研究适合的可用性育种中心和所有者。
我们使用一个最佳回归系数来分析哪些参数可以预测每个胎龄。基于我们的研究结果,在T1-T3胎盘的厚度,人力资源,和在T2-T3 CRL, HD和HR T2-T4可以用来预测钦奇利亚的孕龄胎儿。然而,一些参数,如股骨长度,用于预测胎龄在人类怀孕,需要进一步评估增加诡辩。此外,其他参数可能需要更好地预测妊娠年龄。出于这个原因,它是非常有用的一个精确的胚胎和胎儿发育的生理的形态学参数数据库钦奇利亚怀孕期间,即使分裂阶段,而不是在天,为了诊断病理条件下可能发生。
自1947年以来,动物模型的效率研究人类怀孕的疾病调查。即使在今天一个适当的模型来研究人类妊娠尚未发现(20.]。最近的一项研究表明,动物围产期学,动物模型的使用并没有给出足够的数学与人类妊娠早产(相关性21]。选择合适的动物模型在人类妇产科是一个挑战,因为有几个方面需要考虑。妊娠期间,胎儿的数量为每个怀孕,和胎盘的形态都是重要的参数来评估和胎座式比较时胎儿的啮齿动物和人类之间的形态。其他方面,不应低估是动物的管理成本,减轻动物的住房,立法(2010/63 /欧盟指令),调节一个物种的使用,而不是另一个作为生物医学研究的动物模型。
钦奇利亚可能更适合作为人类的动物模型比豚鼠和其他啮齿动物产科,因为怀孕的长期(105 - 115天)(22- - - - - -24]。女钦奇利亚的堪比人类haemomonochorial胎盘,胎盘形成合胞体滋养层只有一层,与其他啮齿动物(2]。此外,钦奇利亚幼仔发育完全,覆盖着的头发,已经开发了视觉和听觉,能在出生后几个小时。这些特征使钦奇利亚开发类似于人类,有子宫内的发展超过myomorphic啮齿动物和兔子。最后,减少后代的数量(1 - 6,平均每个妊娠1或2幼崽)促进监测胎儿与我们相同,避免错误由于许多胎儿的存在在一个怀孕和允许更高的空间分辨率和灵敏度使用成像技术。之间的不整合数据的数量我们检查和胎儿沟通的所有者和育种者的数量可能是由于胎儿再吸收,通常发生在这个物种(25]。
5。结论
总之,我们只持续几分钟,栗鼠耐受性良好,已被证明是一个合适的动物模型研究人类怀孕和生物医学研究(25]。我们的研究提供了重要的数据,允许该部门的妊娠期四个阶段。这是特别相关的栗鼠因为发情常常是沉默,不允许检测交配的准确时间;与超声波,可以建立准确的怀孕阶段的形态学测量的可靠性。该研究的不足之处是,我们只分析每个钦奇利亚四倍在整个怀孕,导致一些纵向观察被错过了。进一步的研究将由我们组获得了所有的形态学测量,将覆盖整个钦奇利亚的怀孕。
数据可用性
超声波数据用于支持本研究的结果包括在本文中。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突有关的出版。
确认
作者要感谢Francesco Tolomeo先生和Umberto摩纳哥拉普拉塔繁育中心的协作在这项研究。作者还要感谢Editage (http: \ \ www.editage.com)英语编辑。这项研究是由跨部门兽医中心放射学和先进的生物医学科学,那不勒斯大学费德里科•II。
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