的心脏保护作用（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸：细胞凋亡的抑制心肌细胞

抽象的

背景．尽管许多研究已经完成，以阐明心脏衰竭，有效的药物治疗急性心肌梗死（MI）后保护心脏组织的心脏衰竭有关的收缩功能严重丧失的分子机制还有待开发。方法．我们研究了(Z.)-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸，一种在心力衰竭大鼠模型中具有强抗氧化和抗凋亡活性的新化合物(Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸在MI以不同剂量（15,30和60mg / kg）后6周全身递送至大鼠。通过血液动力学测量评估心功能。使用RT-PCR和Western印迹测量促炎细胞因子，细胞凋亡相关分子，凋亡相关分子和不良间隙的标记。结果．治疗(Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸显着改善心脏功能，特别是通过增加 ．同时，促炎细胞因子的表达TNF-α.和IL-1β与MI组相比，治疗组中明显减少。此外， （Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸酸处理的组织显示的由于促进降低Bax的表达，胱天蛋白酶-3，和caspase-9和增加的Bcl-2，这是在部分的表达的Akt磷酸化。结论．这些数据表明（Z.-2-乙酰氧基-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酸对心力衰竭模型大鼠心脏损伤具有有效的心脏保护作用，这至少部分是通过抑制炎症和细胞凋亡反应介导的。

1.介绍

收缩功能严重丧失是终末期心力衰竭的主要特征。对终末期心力衰竭患者心肌的病理分析表明心肌细胞丢失、纤维化和心肌细胞肥大[1.］.集体证据现在表明心肌中的缺陷是心力衰竭的主要原因。因此，最近的研究重点是鉴定可以防止MI后心脏损伤的化学试剂。Caspase-9似乎在细胞凋亡中发挥着重要作用。Caspase-9的活化可以通过切割其他胱天蛋白酶，例如Caspase-3来引发蛋白水分解级联，这是进行细胞死亡计划的效果2.,3.］.同时，蛋白激酶（AKT），在抗凋亡存活途径中的关键效应物，可以灭活糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）通过磷酸化，从而阻断Caspase-3激活[4.］.此外，与凋亡的Bcl-2家族促存活成员失衡起着心肌细胞和心脏衰竭[凋亡中起主要作用5.,6.］.

此外，来自动物和人类研究的最新证据表明，炎症细胞因子和心肌细胞氧化应激的增加与心肌梗死后的不良预后相关，并可能在心力衰竭的发病机制和进展中起关键作用。事实上，据报道，心肌细胞死亡会引发急性炎症反应，导致趋化因子和细胞因子的产生以及巨噬细胞的募集，从而导致白细胞浸润梗死区[7.–10］.此外，我们也知道，心肌缺血损伤后，TNF-等细胞因子α.和IL-6也被释放，这些分子可以促进心脏组织中的细胞死亡信号级联[11］.综上所述，这些发现表明，抑制心肌细胞凋亡和减少心肌组织中的炎症反应可能防止心肌丧失，从而减少与心衰相关的不良影响。

在本研究中，我们评估了（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸在心脏衰竭大鼠模型。（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸是具有两个酚羟基基团的化合物。据报道，咖啡酸苯乙酯，其中也有两个酚羟基，具有抗病毒，抗炎，抗氧化，和免疫调节性质，除了作为NF-的有效和特异性抑制剂κ..B激活(12–17］.

在我们之前的一项研究中，我们证明(Z.)-2-乙酰氧基-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酸通过阻断氧化应激和凋亡介导对缺氧诱导的细胞损伤的有效保护作用[18］.这些调查结果鼓励我们调查管理局的假设（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸可以调节局部心肌炎症，抑制心肌细胞凋亡，衰减不良心室重塑，随后改善MI后慢性心力衰竭的心脏表现。

2.方法

2.1。实验心力衰竭和施用（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸

在目前的研究中使用的大鼠由复旦大学实验动物中心提供。Adult male Sprague-Dawley rats weighing 230-250 g (8-10 w) were used for the study. The animals were housed with a 12 h light-12 h dark cycle and had free access to standard pellet food and water throughout the experiment. All of the experiments were approved by the local ethics committee of Fudan University.

对于实验，将成年雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为五组：假手术组，Mi组和MI，具有药物治疗组（15,30和60mg / kg）。将药物溶于DMSO（二甲基亚砜）中。每天曾经在手术一次后6周注射该药物。假手术组和MI组仅根据动物重量注射DMSO。在诱导MI之前，在麻醉下通过7％氯水合物（60mg / kg I.p.）的麻醉，将动物用啮齿动物呼吸机（DHX-150，中国）提高和人工通风。用5-0缝合线连接左前期下降冠状动脉，左侧心房阑尾下方1-2毫米[19］.手术后六周，在测量血液动力学参数后，切除代表每组的大鼠的心脏并用PBS洗涤。将整个LV储存在-80°C。

2.2。心功能血流动力学测量评估

左心室压力被经由通过右颈动脉插入，并连接到压力换能器充满盐水的导管测量。将插管插入到左心室以监测左心室收缩压（LVSP）和左心室舒张末期压（LVEDP），以及以测量左心室压力上升率的最大上升速率（ )．

2.3。酶活性测定

手术后六周，将大鼠的全血离心（3000 r / min，10分钟，4°C）以获得血清。在血清中测量血清中丙二醛（MDA），过氧化氢酶（猫），过氧化物歧化酶（GSH），谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）和谷胱甘肽S转移酶（GST）的抗氧化剂酶活性。通过根据制造商的说明（南京南京市南京江城生物技术研究所），通过使用市售的套件来测量MDA，CAT，SOD，GSH，GSH-PX和GST水平。

通过将1ml标准剂加入标准管来测量MDA活性。接下来，将1ml绝对乙醇加入到坯料中。然后，将1ml样品加入样品管和对照管中。管长期摇动。然后，将3ml试剂2加入到所有管中，然后将1ml试剂3加入到标准管，空白管和样品管中。接下来，向对照管中加入1ml 50％冰醋酸。将管混合并用塑料包装覆盖。在塑料包装中制造一个小孔。将管在95℃温育40分钟并在流水中冷却。试管在3000到4000转的转速下离心10分钟。 The absorbance of the supernatant was measured using a plate reader at 532 nm.

通过首先制备阳性对照管和样品管来测量猫活性。然后，将0.1ml血清加入到样品管中，并将1.0mL试剂1和0.1ml试剂2保持在37℃，加入到每个管中。将它们在37℃下在振荡器上孵育，精确1分钟。之后，将1.0ml试剂3和0.1ml试剂4加入到所有管中。然后，向阳性对照管中加入0.1ml血清。最后，使用板读数器在405nm处读取吸光度。

To measure GSH activity, the preparation of the sample was as follows: 0.5 ml of the sample and the buffer of reagent 1 were mixed and centrifuged at 3000 to 4000 rpm for 10 minutes. Then, 1 ml of the sample supernatant was added to sample tubes, while 1.0 ml of reagent 1 and 1.0 ml of standard 20 μ.将Mol / L水性GSH加入到坯料管和阳性对照管中。然后，向每个管中加入1.25ml试剂2，0.25ml试剂3和0.05ml试剂4。使用板读数器在420nm读取吸光度。

SOD活性测定如下：0.5 1.0毫升的样品和缓冲液 混合ml试剂1；与此同时，0.5 毫升水和1.0毫升缓冲液 混合ml试剂1作为阳性对照。然后，0.1 将ml试剂2、3和4添加到样品管和阳性对照管中。然后，将所有试管在37°C下培养40分钟。2 将ml显色剂添加到每个试管中。最后，所有试管在室温下放置15分钟。吸光度读数为550 nm使用平板阅读器。

首先在对照管和样管中加入0.2 ml 1 mmol/l GSH水溶液，测定GSH- px活性。然后将0.1 ml的样品加入样管中。所有试管和试剂1在37°C保存5分钟。然后，每根试管中加入0.1 ml试剂1。所有试管在37°C孵育5分钟。每根试管中加入2毫升试剂2，在对照试管中加入0.1毫升样品。试管在3000到4000转的转速下离心10分钟。从对照管和样管中取出1毫升上清转移到与旧管标记相同的新管中。同时，在空白管中加入1 ml谷胱甘肽标准缓冲液和1 ml水溶液20μ.摩尔/升GSH加入到标准管。Then, 1 ml of reagent 3, 0.25 ml of reagent 4, and 0.05 ml of reagent 5 were added to all of the tubes. The plate was covered and incubated on a shaker for 15 minutes at room temperature. Finally, the absorbance was read at 412 nm using a plate reader.

GST activity was measured by first adding 0.3 ml of aqueous 1 mmol/l GSH to the control tubes and the sample tubes. Then, 0.1 ml of the sample was added to the sample tubes. The tubes were mixed and incubated at 37°C for 30 minutes. Then, 2 ml of reagent 2 was added to all the tubes. Next, 0.1 ml of the sample was added to the control tubes. The tubes were centrifuged at 3000 to 4000 rpm for 10 minutes. One milliliter of the supernatant from the control tubes and the sample tubes was transferred to new tubes labeled the same as the old tubes. Then, 2 ml of the GSH buffer and 2 ml of aqueous 20 μ.摩尔/升GSH加入到空白管和标准管。Finally, 2 ml of reagent 3 and 0.5 ml of reagent 4 were added to all the tubes. The tubes were incubated for 15 minutes at room temperature, and the absorbance was read at 412 nm using a plate reader.

2.4. 逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）

通过使用如前所述的Trizol（Invitrogen，Carlsbad，Ca）从心肌细胞中分离总RNA。通过测量260nm处的吸光度来确定RNA浓度。通过根据制造商推荐的协议使用Primescript™第1链CDNA合成试剂盒进行逆转录（RT）。RT-PCR引物由中国上海桑龙生物工程技术和服务有限公司，中国综合合成。用于扩增的引物如下合成：TNF-α.前进5. -ATGAGCACGGAAAGCATGATCCGA-3 ,5反转 -ccaaagtagacctgcccgactc-3 ;il - 1β前进5. -ATGGCAACTGTCCCTGAACTCAACT-3 ,5反转 -caggacaggtatagattcaacccctt-3 ;BCL-2前进5 -cgggagaacagggtatga-3 ,5反转 -CAGGCTGGAAGGAGAAGAT-3 ;Bax Forward 5. -gcagggaggatggctgggggaga-3 ,5反转 -TcCAGACAAGCAGCCCGCTCACG-3 ;caspase-3向前5 -CTGGACTGCGGTATTGAG-3 ,5反转 -GGGTGCGGTAGAGTAAGC-3 ;TGF -β前进5. -cgcaacaacgcaatctatg-3. ,5反转 -AGCCCTGTATTCCGTCTCC-3 ;胶原1前进5 -cataaagggtcatcgtggct-3. ,5反转 -TGTTCTCAATCTTGCTGGCTCA-3 ;和GAPDH前进5 -TTCAACGGCACAGTCAAGG-3 ,5反转 -cggcatgtcagatccacaa-3 ．PCR产物在1.5%琼脂糖凝胶中进行电泳分析。使用Bio-Rad iQ5系统（Bio-Rad Laboratories，CA，USA）拍摄并量化每个条带的强度，作为目标基因与GAPDH的比率。

2.5。Western印迹分析

冷冻LV样品在裂解缓冲液中机械地分散。将裂解物在4℃下以10,000 r / min离心10分钟，收集上清液。使用增强的BCA蛋白质测定试剂盒（BeyoTime Biotechnology，Haimen，China）量化蛋白质浓度。测定蛋白质浓度后，30-50 μ.g蛋白经SDS-PAGE分离，电泳转移到PVDF膜上，用1%脱脂牛奶在4°C TBS中封闭过夜。将印迹与抗Bcl-2、Bax、Akt和p-Akt的一抗在室温下孵育2 h，洗涤，然后与适当的过氧化物酶偶联的二抗孵育。Bcl-2、Bax、Akt和磷酸化Akt抗体以及与过氧化物酶结合的山羊抗兔IgG分别来自Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA和Cell Signaling technology, Inc.。使用ECL检测试剂按照制造商的协议对免疫复合物进行可视化。采用Western blotting检测系统(Alpha Innotech，美国)进行密度分析。分析每个样品的条带强度，并将蛋白表达归一化到GAPDH。

2.6。统计分析

数据显示为 ．使用SPSS版本15.0进行统计分析。使用单向ANOVA确定组之间的差异以进行重复措施。价值 被认为是统计学意义的。

结果

3．1.（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸改善心功能

合成路线(Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸如前所述在我们的实验室中详细描述[18］.

桌子1.列出的影响（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸对MI后6个星期大鼠生理和血液动力学参数。与假手术组相比，MI组显著呈现增加的LV舒张末期压力（LVEDP），此外，降低的左心室收缩压（LVSP）和最大速率 ．在MI集团， 作为心肌收缩力的指标与假手术组相比显著降低。In addition, in the 15 mg/kg (Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸 - 治疗组，的显著改善 被观测到 （ )．这些数据表示（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸在较低浓度下促进心脏功能。

３．２．(存在剂量依赖的相关性Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸防止氧化应激失败的心脏

抗氧化效应（Z.-2-乙酰氧基-3-(3,4-二羟基苯基)-丙烯酸与血清中CAT、SOD、GSH- px活性和GSH水平以及左心室中CAT、SOD-1和GPx蛋白水平升高有关(图)1（a）–1（e）)．另一方面， （Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸处理以剂量依赖的方式降低了血清MDA的水平（图1（f）)．此外， （Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸也增加了总的抗氧化能力，并在平行以剂量依赖的方式降低血清和左心室中的脂质过氧化作用水平。在GSH含量（Z.)-2-acetoxy-3-(3,4-dihydroxyphenyl) acrylic acid treatment (15, 30, and 60 mg/kg) group was lower than that in the control group ( )．经三种不同浓度(Z.)-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸处理后，治疗组的GSH水平高于MI组( )．的浓度越高(Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸（15,30和60mg / kg），GSH浓度越高。此外，治疗组的GSH-PX和GST的水平高于MI组。第三，与MI组相比，治疗组中，许多额外酶的水平也显着不同。治疗组的猫水平明显高于模型组（ )．同样，SOD水平类似CAT水平。最后，治疗组HF大鼠在MDA含量较MI组中检测到的降低。对于GSH，GSH-Px活性，CAT，SOD和MDA的治疗后值的所有暗示（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸得保护从衰竭心脏的抗氧化作用的能力。

３．３．（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸在失败的心中衰减炎症细胞因子表达

（Z.通过RT-PCR分析梗死周围区促炎基因的表达水平，评价心肌梗死前后-2-乙酰氧基-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酸的表达。在心肌梗死组，TNF-上调α.与假手术组相比，观察到的mRNA水平。这种效应被部分地通过反相（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸处理，尤其是15mg / kg剂量（图2（a）)．同样，IL-1显著增加β在MI组中检测到mRNA表达，其通过用（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸为15mg / kg剂量（图2（b）)．这些数据建议（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸是炎症过程的有效抑制剂。

3.4。（Z.)-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸减少衰竭心脏的心肌细胞凋亡并增加Akt磷酸化

我们接下来确定了（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸心肌细胞凋亡。我们测量了蛋白质和几个细胞凋亡相关分子的mRNA表达水平在梗死周围区域。RT-PCR结果显示，Bcl-2蛋白表达水平的MI组和（在升高Z.与假手术组相比， - 2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸处理基团。（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸治疗导致治疗组中Bcl-2的mRNA中的显著增加与MI组比较（图3（a）)．相反，促凋亡分子Bax，Caspase-3和Caspase-9的mRNA水平显着降低（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸处理组与MI组相比（图图3（b）)．Western印迹分析证实了RT-PCR结果。实际上，在（含量）中检测到BCL-2蛋白水平的显着增加和群蛋白水平降低（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸处理组与MI组相比（图3（a）和图3（b）)．此外，这些变化似乎与MI中AKT的磷酸化增加有关（Z.)-2-乙酰氧基-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酸处理的动物。

westernblot分析显示6周后心肌梗死动物的心脏中Akt被激活。在(Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸处理基团，与MI组比较观察到Akt的磷酸化的显着增加（图4.)．该研究的组合结果表明，AKT激活介导凋亡相关分子的表达。

3.5。（Z.)-2-乙酰氧基-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酸减少不良心室重构

心肌梗死6周后，通过检测TGF-表达水平检测胶原沉积β而在非梗死区Ⅰ型胶原mRNA的表达。RT-PCR表明，TGF-β和I型胶原mRNA的表达MI组显著上调。（Z.)-2-乙酰氧基-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酸处理可降低这两个分子的表达，但差异无统计学意义(图5.)．

4.讨论

我们的数据表明治疗（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸改善心脏功能，特别是通过增加 ,慢性心力衰竭患者左心室功能的重要标志物。在15、30和60的剂量中 mg/kg，使用最低剂量（15 mg/kg）的保护效果最好。虽然剂量低于15 未使用mg/kg，目前的结果表明(Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸在较低剂量下可提供更好的益处。因此，要确定的最佳剂量遗迹。

心肌梗死的病理机制是多因素的。以往的研究表明，产生大量的活性氧;研究也证实缺血后大量氧自由基的产生是心肌细胞损伤的主要机制之一。我们的结果表明(Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸可以降低LDH的泄漏率，降低MDA的产生，抑制凋亡相关的因素的表达，并显示出良好的心肌保护。那些内源性抗氧化酶，SOD和过氧化氢酶可以解毒反应性氧物质，从而从氧化损伤中拯救细胞。（Z.-2-乙酰氧基-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酸与炎症因子表达的衰减和心肌细胞凋亡的抑制有关。TNF-的表达α.和IL-1β基因显著减少。众所周知，炎症反应和细胞因子释放在心肌梗死后的心脏损伤中起着积极的作用[20.,21］.大量报告表明，促炎细胞因子的表达与心力衰竭程度直接相关，与生存率反比[20.,22］.实际上，从几种动物研究和一些临床试验中获得的结果表明抑制炎症细胞因子可能改善心脏能表现[23］.有趣的是，Kurrelmeyer等人的研究。证明，具有敲除TNF受体的转基因小鼠表明急性冠状动脉闭塞诱导的细胞凋亡增加，表明保护性TNF-α.在心肌中的影响[24］.但是，TNF的保护作用α.在心力衰竭模型仍然不清楚。在我们的研究中，治疗（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸显着改善 ,将其与TNF-α的基因表达水平的降低α.和IL-1β．它可以想到（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸在MI后在心脏修复中起着有益作用，通过显着降低碎片心肌中的炎症反应。

除了有效的抗炎作用，的保护作用（Z.添加)-2-乙酰氧基-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酸，通过促进Akt磷酸化和调节凋亡相关分子基因表达抑制细胞凋亡。细胞毒性细胞因子和组织损伤因子是细胞凋亡的两大诱导因子。细胞毒性细胞因子通过与受体结合诱导细胞凋亡。这些受体的激活导致caspase-8的激活，然后激活其他caspase以及Bcl-2家族的促凋亡成员。活化的caspase-8导致细胞色素c从线粒体释放到细胞质，从而激活caspase-3，导致细胞不可避免的死亡[25］.在末期心力衰竭期间，包括人，绵羊和兔子的多种物种的心脏组织中，在心脏组织中报道了Caspase-3的激活。26]. 一些研究已经证明了抑制半胱天冬酶预防心力衰竭的可行性。IDN-1965是一种小分子非肽半胱天冬酶抑制剂，可抑制广泛的半胱天冬酶，并被证明能有效抑制细胞因子诱导的细胞凋亡和肝损伤，为开发抗心力衰竭药物奠定了新的基础[27］.在我们的研究中，治疗（Z.)-2-乙酰氧基-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酸降低了caspase-3和caspase-9的mRNA表达水平，表明(Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸可以是有效的胱天蛋白酶抑制剂。

众所周知，Bcl-2家族中促凋亡与促存活成员的失衡在各种细胞类型的凋亡中起着重要作用[28］.促存活因子Bcl-xL的和Bcl-2已在患有终末期心脏衰竭和在培养的心肌细胞在暴露于细胞毒性的细胞因子[观察29–31］.促凋亡因子Bax也在慢性压力超载兔心脏模型的培养心室中被发现[32］.虽然未发现BAX基因表达在失败的人体中被改变，但有很多证据支持BCL-2家族在细胞凋亡中的作用。例如，Bcl-2或Bcl-XL的过表达阻止线粒体膜渗透率转变和细胞色素C的释放释放[33］.我们的研究表明，Bcl-2和Bax的基因表达MI组手术六周后增加。（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸处理显着降低了BAX基因表达，进一步改善了BCL-2的mRNA表达，其与改善的心脏功能相关。AKT是细胞凋亡才能途径的关键调节剂。增加AKT / GSK-3β磷酸化在促进细胞存活方面发挥着重要作用。AKT inactivates GSK-3β然后块细胞色素c释放和caspase-3的活化。我们的研究结果表明：（Z.）-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸与MI组中未处理的动物相比增加了磷酸化的AKT水平，进一步表明（Z.)-2-乙酰氧基-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酸通过抑制心肌细胞凋亡获得。

心室重构是心脏衰竭的又一特点。许多研究表明，如果不能防止心肌细胞凋亡和促炎细胞因子参与介导心肌细胞肥大和心室重构的抑制。我们的研究表明与治疗（Z.)-2-乙酰氧基-3-（3,4-二羟基苯基）丙烯酸降低TGF-β和I型胶原基因表达，这不是我们预期的结果。这种现象可能与动物种类、动物或样本量的差异有关。我们的下一个研究将进一步证实(Z.)-2-乙酰氧基-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酸在其他动物模型，如小鼠、兔子或猪模型。

5.结论

本研究表明（Z.)-2-乙酰氧基-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酸治疗可通过优先调节局部炎症反应和抑制心肌细胞凋亡来治疗mi后心衰，降低TNF-证实了这一点α.，IL-1βcaspase-3和capase-9表达水平。此外，该治疗通过调节Akt促生存途径改善预后。综上所述，这些结果表明(Z.)-2-乙酰氧基-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酸可能是一种有效的化学剂，可用于保护衰竭的心脏(图6.)．

数据可用性

心脏参数改变数据，增强的过氧化氢酶（CAT），超氧化物歧化酶（SOD），谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）和血清中谷胱甘肽（GSH）的水平，左心室的信号的谷胱甘肽（GSH）水平用于支持本研究的调查结果可根据要求提供。

利益冲突

作者没有利益冲突。

致谢

基金资助:国家自然科学基金项目(No. 81872864)。

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