文摘
良性前列腺增生(BPH)是一种常见的疾病,影响老年人的各种并发症。本研究评估伊朗传统草药的影响“Atrifil Oshagh口香糖”在雄性Wistar鼠前列腺肥大。Atrifil结合了三种药用植物:兰officinalis Gaertn、榄仁树属chebula Retz、榄仁树属bellerica Retz“提取,Oshagh口香糖是Dorema ammoniacumd . Dono口香糖。在这项研究中,30个雄性Wistar鼠被分为5组:正常控制、疾病、非那雄胺和提取与300和600毫克/公斤。hydroalcoholic的提取是一个组合Atrifil提取和Oshagh口香糖。所有组收到肌内睾酮enanthate诱导前列腺肥大除了正常对照组。28日天,前列腺腺体分离。观察组织病理学变化。此外,前列腺特异性抗原(PSA)和前列腺重量测定。绑定倾向的非那雄胺,equol等提取槲皮素和黄酮类化合物,芸香苷和山柰酚5α还原酶,雌激素受体α和β,estrogen-related受体γ使用在网上对接方法进行评估。组织病理学评价、生化参数,结果表明PSA水平显著抑制积累和发展的良性前列腺增生治疗组与提取(600毫克/公斤 )。此外,分子对接表明,芦丁有高亲和力结合受体5α还原酶,雌激素受体β,estrogen-related受体γ甚至比非那雄胺,和平均,槲皮素对所有这些受体有较高的亲和力。最后,它可以得出Atrifil和Oshagh口香糖是有效预防前列腺肥大。
1。介绍
良性前列腺增生(BPH)是一种慢性andrological疾病,男性患病率高。其患病率大约有60%的人年龄在50到60岁,和它增加到70%的男性在第六十年的生活。良性前列腺增生,前列腺腺体的良性的增长、与男性尿道梗阻(1- - - - - -5]。这可以影响生活质量,患者可能患有复杂的问题,如尿潴留,尿频,尿路感染,膀胱结石6- - - - - -12]。涉及到许多因素,这可能导致这种疾病如性激素不平衡状况,特别是雄激素及其代谢物,老化,和饮食的生活方式。
研究人员报道,生活方式也是一个重要因素在良性前列腺增生;例如,每天有氧运动可以减少胰岛素,胰岛素样生长因子I,血浆雌二醇/睾酮比水平,尤其是加上低脂和高纤维的方案组成的全谷类,水果和蔬菜(13]。此外,他们证实前列腺肥大和高血压的关系,肥胖和糖尿病之类的代谢疾病14- - - - - -16]。
雄激素不是直接与良性前列腺增生,但过多的雄激素激素可以观察到这一现象17,18]。雄激素与芳香化酶转化为雌激素和二氢睾酮的酶和5α分别还原酶。随着年龄的增加,这些酶的激活。由于睾丸激素水平的下降和增加其代谢物和雌激素对前列腺细胞增殖的作用,得到良性前列腺增生的风险增加(19,20.]。
二氢睾酮的机理是它结合自身雄激素受体和信号的促有丝分裂的转录因子上皮和基质细胞(21]。这一事件发生在结合这两个给定的荷尔蒙的影响因素(19,22]。
衰老,前列腺肌肉组织的纤维化,削弱在BPH起到关键的作用。流体产生的前列腺腺中积累的削弱前列腺肌肉。这种积累会导致组织损伤,与胶原纤维组织填充受损区域。胶原纤维替代组织减少正常组织的功能。腺的功能障碍会导致更多的液体积累。综上所述,异常渐进式肌肉组织纤维化和流体的循环积累引起良性前列腺增生的主要代理(23,24]。
Atrifil提取和Oshagh口香糖(AO)的组合三种药用水果:兰officinalis Gaertn(从Phyllanthaceae家庭),榄仁树属chebula Retz(从使君子科家庭)和榄仁树属bellericaRetz(从使君子科家庭)的口香糖Dorema ammoniacumd .(从伞形科的家庭)。兰officinalis(大肠officinalis)富含维生素C,黄酮类、单宁、萜类化合物和生物碱,这导致各种生理活动(25,26]。大肠officinalis提取物抗氧化活性反对饮酒导致的氧化损伤在大鼠肝微粒体(27]。它有助于对arsenic-induced胸腺细胞凋亡在小鼠抗凋亡功能(28]。大肠officinalis提取物有抗炎作用在动物模型中急性炎症和慢性炎症条件下(29日]。同时,大肠officinalis在2型糖尿病(糖尿病作用30.),它显示在去氧皮质酮抗高血压效果乙酸salt-induced高血压动物模型(31日)和宫颈癌细胞显示,抗癌功效31日,32]。
榄仁树属bellerica Retz从使君子科家族是植物,果实卵形体形状和灰色在颜色深棕色。它包含固定油以及酚酯称为hexahydroxydiphenic酸酯等也常用药用arjungenin bellericagenin a和B榄仁树属bellerica Retz水果(33,34]。
它有抗氧化和抗菌效果因其多酚组合,止痛剂由于其TNF -激活效应α抑制(35]。Atrifil阻止DNA被自由基破坏具有抗癌作用。这是证明Atrifil可以减少血液中血脂水平以β-酶抑制(36]。
榄仁树属chebula Retz包含几个组件(如单宁、黄酮、植物固醇,氨基酸,果糖,树脂、固定油,酚醛含量高(37),其水果有大量不同的焦棓酸(可水解的)类型单宁(单宁含量高达32%)没食子酸等chebulic酸,punicalagin chebulanin, corilagin, neochebulinic酸,鞣花酸,chebulagic酸(38,39]。其他植物化学物质,如蒽醌类、乙二酸、番泻叶甙、4、2、4 chebulyl-d-glucopyranose萜品烯、松油醇也被报道存在在这个工厂40,41]。此外,常用药用及其苷被隔绝t . chebula茎皮(42]。这种植物的果实的民族植物学的用途是排尿困难和保留的尿液,在肾脏结石(也有用43]。研究显示表明榄仁树属chebula提取物具有抑制前列腺癌细胞的生长,影响雄激素受体介导转录调节(44,45]。
Dorema ammoniacum d不原产于伊朗中部和东部[42]。植物包含几个组件,比如免费的水杨酸,ammoresinol, doremin, doremine, ammodoremin,油压树胶脂(46- - - - - -48]。口香糖也用于伊朗传统医学和印度传统医学治疗一些并发症如呼吸道疾病、祛痰剂、兴奋剂和抗痉挛药,肠胃不适,泌尿道问题[49- - - - - -52]。
因此,这三个组合提取酚和类黄酮含量最高的伊朗传统医学所拥有巨大的潜力来治疗并发症(52]。尽管这些现象的许多努力寻找解决方案,成本效益管理治疗BPH的仍然是一个尚未解决的问题。本研究的目的是评估的结合Atrifil提取和Oshagh口香糖:伊朗传统医学高含量的酚类和黄酮类成分的抗氧化剂对预防前列腺肥大,导致氧化应激。
2。材料和方法
2.1。制备HydroalcoholicAtrifil提取和Oshagh口香糖
的成果兰officinalis Gaertn、榄仁树属bellerica Retz,榄仁树属chebula Retz的口香糖Dorema ammoniacum d不从杂货店买纱丽,马赞达兰、伊朗,通过系统化的草药医生。他们干的干燥机和地面用网筛80。250克水果的一部分兰officinalis Gaertn、榄仁树属bellerica Retz,榄仁树属chebula Retz被浸渍提取70%乙醇室温3天,和提取干真空下旋转蒸发器冷冻干燥机。然后,它是保存在一个紧容器,放入冰箱。3 g的每个提取和3 g的口香糖结合,溶解在同质化的最低数量的生理盐水,这组合名叫“AO。”
2.2。类黄酮、总酚含量的测定
铝氯比色法用于测量类黄酮(53],Folin-Ciocalteu分析方法被用来测量每个工厂的总酚含量,分别和分光光度计仪器是用于读取吸光度54,55]。
2.3。液相色谱质谱
的Atrifil提取和Oshagh根据Herbani口香糖LC / MS进行了方法(56]。为了这个目的,一个安捷伦6100系列LC / MS系统(美国安捷伦科技,圣克拉拉,CA)和一个光电二极管阵列检测器被设定为257海里。150毫米×3.0毫米,3.5μ米水域XTerra女士与对称C18(5μ米,使用20×3.9毫米)。(1)水的流动相是由0.1% (v / v)甲酸和(2)乙腈0.1% (v / v)甲酸使用梯度溶剂系统的10 - 90% (v / v)(2) 26分钟。温度是35°C,流速为0.3毫升/分钟。
质谱仪是直接加入到LC系统没有流分裂和惠普59987用一个电喷射接口模型。喷雾压力、温度的干燥气体(N2)和气体流速5.5×105Pa 300°C,分别和40毫升/分钟。
2.4。动物和实验设计
八周大的雄性Wistar鼠(200 - 250 g)购买实验动物研究所的马赞达兰大学医学和保持在标准实验室条件下(半天光/暗周期22±3°C)。动物权利被尊重,研究过程是按照动物权利保护协会道德准则红外原则(MAZUMS.REC.1398.2740)。
30雄性老鼠被分成五个组,每个包含六大鼠在每一个笼子里,组1(正常组)没有收到任何东西,组2(疾病组)治疗只是25毫克/公斤的肌内睾酮enanthate玉米油,组3(标准医学组)治疗25毫克/公斤的IM注射的TE和接收10毫克/公斤的非那雄胺填喂法,和组4和5是处理25毫克/公斤的IM注射TE,分别获得300毫克/公斤和600毫克/公斤AO提取填喂法在28天(一天一次的剂量睾酮enanthate选择和非那雄胺是基于相关的文章,考虑动物的重量(57])。
2.5。体重和前列腺重量
最初的身体重量和最终的重量和前列腺重量测定动物麻醉后的我。p注入ketamine-xylazine混合剂量为0.15毫升/ 100毫克体重的实验。前列腺重量比体重计算前列腺指数如下:
2.6。参数评估
在实验的最后,前列腺是收集并分析了集团的前列腺腺体的一半氧化应激生物化学参数包括丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和蛋白质羰基化合物。
2.7。丙二醛(MDA)
根据Satoh丙二醛(MDA)测量方法(58,59]。样品的反应与硫代巴比土酸(从默克公司)的正丁醇是MDA的基本测量。分光光度法是用于测量样品的吸光度在532海里,并与标准曲线。丁醇作为空白(59,60]。
2.8。谷胱甘肽(GSH)
谷胱甘肽(GSH)测量是由均质化的组织,分离出上层清液,然后用三羟甲基氨基甲烷缓冲液混合0.02%包含0.02 EDTA (pH = 8.9)和0.01 mol / l DTNB (5、5′-dithiobis - (2-nitrobenzoic酸))。吸光度测量在412 nm根据Sedlak和林赛方法(61年,62年]。
2.9。蛋白质羰基化合物
蛋白质羰基化合物测定基于Levine et al .的方法(63年]。肼诱导2之间的反应,4-dinitrophenylhydrazine羰基(DNPH)和。的吸光度测定肼分光光度法在405纳米64年]。
2.10。PSA含量
在实验的最后,收集血液样本直接从心脏麻醉免费评估前列腺特异性抗原(PSA)与前列腺特异性抗原酶联免疫试剂盒(65年]。
2.11。组织病理学检查
10%福尔马林被用于修复前列腺组织。探讨形态学变化,把前列腺样本将在4μ米厚度和苏木精和伊红染色(圆))40 x光显微镜下组织学评价。间质组织的变化大小,上皮细胞,炎症的前列腺组织。对于每一个变化,0到3分数被认为与正常组相比(表1)[66年- - - - - -68年]。
2.12。蛋白质制备
5 ar的晶体结构,ERα,呃β,和犯错ɣ7 bw1 PDB标识,1 r5k 1 x7b, 2世,分别从蛋白质数据库中检索(https://www.rcsb.org)。
酶是保存到可停靠的蛋白质数据银行,部分费用,和原子类型(PDBQT)格式为分子对接做准备。
2.13。配体的准备
自卫队结构非那雄胺(CID 57363), equol 91469 (CID),山柰酚(CID 5280863)、槲皮素(CID 5280343),芦丁(CID 5280805)从PubChem检索数据库(https://www.pubchem.ncbi.nlm.nih.gov)。化合物转化为可使用AutoDock PDBQT格式的工具。
2.14。分子对接
对接的非那雄胺,equol等提取槲皮素和黄酮类化合物,芸香苷和山柰酚5α还原酶,呃α,呃β、广告犯错ɣ在网上对接方法评估使用。为此,PyRx。lnk软件使用和绑定亲和力测定(69年]。
酶和配体被拖进各自列PDBQT的形式,和软件。配体的结合亲和力和酶都被记录下来。分子之间的相互作用的化合物和5α还原酶,雌激素受体α和β,estrogen-relatedγ受体被认为与BIOVIA发现Studio 2020软件。绑定配置文件确定使用可视化工具发现工作室。
2.15。统计分析
结果的数据表示为平均值±标准平均误差(SEM)。组之间的评价结果进行了单向方差分析测试图基紧随其后的测试,以及显著的价值被认为是< 0.05。使用GraphPad棱镜执行统计分析软件(GraphPad软件公司,美国)。
3所示。结果
3.1。酚和类黄酮提取的内容
的类黄酮的提取量榄仁树属chebula Retz,榄仁树属bellerica Retz,和兰officinalis Gaertn使用的标准曲线方程计算槲皮素(y= 0.0069x+ 0.0347,r2= 0.9967)和表达为槲皮素等价物Dorema ammoniacum d不,榄仁树属chebula Retz,榄仁树属bellirica Retz,和兰officinalis Gaertn测量18/24±0/968、158/8±13/241,173/287±/ 159和269/16±6/285(毫克/ 1 g干提取物),分别。
此外,苯酚含量测定使用Folin-Ciocalteu试验方法的标准曲线方程(y= 0.0061x+ 0.0682,r2= 0.9992)和表达为没食子酸的等价物。Dorema ammoniacum d不,榄仁树属chebula Retz,榄仁树属bellerica Retz,和兰officinalis Gaertn测量为13.086±1.845,141/4±92/176,169/75 3±/ 218和257/28±2/129(毫克/ 1 g干提取物),分别。
3.2。质分析Atrifil提取和Oshagh口香糖
质分析已经完成确定的活性化合物Atrifil提取和Oshagh口香糖。结果发现3类黄酮组的活性化合物即槲皮素、常规、山柰酚(表2和图1)。
3.3。前列腺重量和索引
组的前列腺重量与体重正常组相比在这项研究的最后一天。睾酮enanthate(25毫克/公斤)政府在大鼠前列腺指数和体重增加显著( )与正常组相比。非那雄胺组与疾病组明显下降前列腺重量( )(图2)。样品处理AO(300毫克/公斤和600毫克/公斤)(< 0.01 ,分别)前列腺重量减少与睾酮组相比存在剂量依赖的相关性。
3.4。生化参数评价
根据图3结果显示,减少谷胱甘肽( )水平在TE组与对照组相比;然而,AO提取物剂量为300毫克/公斤和600毫克/公斤显示增加谷胱甘肽水平(分别 , , )一样的非那雄胺组。
蛋白质羰基结果显示增加TE组( )和减少非那雄胺和AO提取与剂量的300和600毫克/公斤(分别 , , )相比之下,TE组。
MDA结果表明MDA水平显著增加的脂质过氧化指标TE组( )和减少组织非那雄胺和AO 300和600毫克/公斤(分别 , , )。
3.5。PSA
睾酮组中可以看到,PSA水平升高( )与正常组相比。结果显示有意义的减少PSA含量和AO提取物治疗之间的关系(300和600毫克/公斤)与疾病组( )。非那雄胺组显示类似的效果。非那雄胺之间没有显著差异,AO提取观察剂量为600毫克/公斤(图4)。
3.6。组织病理学检查
根据图5,疾病组表示一个明显的中断在前列腺组织表现为炎症细胞增生,肥大的上皮和基质扩散的进展。这些结果时非常重要 。有意义的减少组合效应(300毫克/公斤)基质扩散的进展,发现了炎症细胞增生,上皮细胞肥大与疾病组(表3)。
明确受益非那雄胺的预防炎症细胞增生,上皮细胞肥大,基质扩散的过程是确定在这个测试( , , ,分别)。
3.7。对接结果
在BPH雌激素发挥重要的作用。Estrogen-related受体γ(犯错γ)降低扩散的速率,降低前列腺癌的进展速度63年- - - - - -65年]。呃α和ERβ(激活转录因子配体)介导雌激素效应。呃α调节膀胱扩大在雄性小鼠睾丸激素处理和17β雌二醇。雌激素和二氢睾酮(DTH)是5的代谢物α还原酶对内源性雄激素的影响(20.]。
受体的亲和力(estrogen-related受体γ,ER-b其中一5α还原酶)在表表示4。最小的结合能与最高的亲和力。在网上学习(表4)表明,芦丁结合能(与受体结合时释放能量)−10.6千卡/摩尔5α还原酶酶与−9.2千卡/摩尔,非那雄胺表现出数据6- - - - - -9,但芦丁需要+ 13.4千卡/摩尔能源绑定到其中一受体。
氨基酸参与H-bond互动5α还原酶和配体是精氨酸,天冬氨酸,丙氨酸,谷氨酸,酪氨酸,异亮氨酸,丙氨酸,丝氨酸。谷氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸、蛋氨酸、苏氨酸从ER-gamma酶参与H-bond与配体相互作用。此外,甘氨酸、组氨酸、酪氨酸、丙氨酸和亮氨酸攻读和谷氨酸、丝氨酸、色氨酸和脯氨酸ER-b酶参与H-bond与配体相互作用。
呃α配体结合域(精神的小黑裙)结构由11所示α螺旋线。附件这种酶包括氢键的类固醇激素/非甾体类配体配位体和疏水相互作用。羟基组雌二醇的位置3和17 A和D环氢连着Glu353, Arg394,水分子和His524。呃β可以债券雌二醇和染料木黄酮羟基氢键的根与受体组氨酸。
研究表明,如果一个特殊的物质往往影响Erα和Erβ作为一个激动剂或相对应该放置在距离交互Glu353活性部位的氨基酸,Arg394, His524,但对于拮抗剂,它不同,只有一个失踪相互作用可以产生相反的效果70年]。评价配体附近的酶的生理行为,配体的亲和力(结合能)受体(数据是很重要的6- - - - - -9)。
4所示。讨论
良性前列腺增生是一种慢性andrological疾病,炎症是一个重要的阶段。频繁的炎症引起的睾丸素在前列腺上皮细胞导致这些细胞的增生。结果增生尿潴留,尿频,尿路感染,膀胱结石71年]。
本研究调查的功效Atrifil提取和Oshagh口香糖。通过注射肌肉注射的TE 28天(25毫克/公斤),前列腺增生是诱导在这段时期,观察在阿克巴里等的研究(10]。
酶是直接参与这些疾病或增加5等疾病的进展α还原酶,estrogen-related受体γ(犯错γ),雌激素受体α和β。雌激素在发展具有重要作用,发展,和前列腺细胞的增殖,组合的对数,对良性前列腺增生(可以有额外的影响20.]。Estrogen-related受体γ(犯错γ),呃β增加积极的雌激素的影响,前列腺,犯错-γ已被证明前列腺癌和乳腺癌细胞系增殖缓慢(72年- - - - - -74年]。呃α和ERβ(激活转录因子配体)介导雌激素效应。外源性雌激素影响前列腺上皮细胞、移行细胞和膀胱纤维母细胞ER的中介α并使扩散。研究表明,呃α调节膀胱扩大在雄性小鼠睾丸激素处理和17β雌二醇,但这种效应尚未观察到ERβ(75年]。
雌激素和二氢睾酮(DTH)是5的代谢物α还原酶对内源性雄激素的影响(20.]。非那雄胺降低血液中的水平潜孔通过减少5的活动α还原酶,减少氧化应激诱导的DHT和保持身体的抗氧化剂76年]。
体外检查表明,无论何时ɣ减少的速度扩散和减缓前列腺癌的进展速度72年- - - - - -74年]。Equol称为类黄酮抗氧化剂和抗炎作用,和它显示活动通过增加曾经的转录活动——前列腺肥大ɣ和抗效应或选择性雄激素调制器活动(77年- - - - - -81年]。
在这项研究中,观察到山柰酚、槲皮素和芦丁有较高的亲和力绑定到5α还原酶和equol,槲皮素和芦丁有较高的亲和力ERβ非那雄胺是无法相比的。此外,这些配体没有所需的资格是受体激动剂(绑定Glu353、Arg394 His524 ER的氨基酸α受体和氢键为ER组氨酸β),由于其高亲和力,他们可能有拮抗作用。
人们进行了无数次研究在BPH 4周期间体内的情况,这是类似于本研究[82年- - - - - -84年]。在他们的研究中,食心等人评估Yukmijihwang-tang功效治疗BPH Wistar鼠。丙酸睾酮是每日治疗大鼠诱发疾病(82年]。睾酮enanthate快速比丙酸睾酮,这种形式的睾丸激素(睾酮enanthate)被用于这项研究。姜黄素是知名代理抗癌药物治疗和许多研究评估这种化合物testosterone-induced良性前列腺增生。大鼠去势后,皮下睾酮治疗的过程。姜黄素抑制前列腺肥大进展(85年]。
使用非那雄胺作为标准治疗良性前列腺增生。研究5和10毫克/公斤的非那雄胺作为标准的医学(85年- - - - - -88年]。在这项研究中,我们使用非那雄胺10毫克/公斤。
Atrifil提取和Oshagh胶树药用水果的组合:榄仁树属chebula Retz(从使君子科家族)榄仁树属bellerica Retz(从使君子科家族)兰officinalis Gaertn(从Phyllanthaceae家庭)Dorema ammoniacum d不(从伞形科家族)口香糖。Oshagh(的口香糖兰officinalis Gaertn)是一个伊朗的传统医学,口香糖通常被用于许多并发症如呼吸道疾病、祛痰剂、兴奋剂和抗痉挛药和泌尿道问题[49- - - - - -51]。
在这项研究中,我们观察到,AO,富含酚类和黄酮类化合物,酚类和黄酮类化合物的已知剖面这种组合公式,没食子酸、鞣花酸、没食子酸甲基酯,槲皮素、芦丁、山柰酚根据文学研究[89年- - - - - -92年]。非那雄胺和equol作为标准物质的亲和力比较槲皮素、芦丁、山柰酚。Equol flavonoid-like结构,显示了重大关联绑定ERβ和ERα,而且,5α还原酶和非那雄胺是5α还原酶抑制剂。因此,本研究调查的影响这个提取基于传统医学和受体结合的亲和力。
在这项研究中,生物标志物检测PSA水平明显下降,前列腺指数,前列腺增生的恶化在提取组相比,疾病组。此外,600毫克/公斤之间没有显著相关性被发现提取和非那雄胺。这一发现表明,提取的疗效剂量为600毫克/公斤是一样的非那雄胺治疗良性前列腺增生。许多研究表明,榄仁树属chebula Retz有抗炎、anti-cell扩散效果和造成这种效果的酚类化合物提取(35,37,93年]。榄仁树属bellerica Retz还显示anti-cell扩散效应(94年,95年]。Dorema ammoniacum d不口香糖显示有抗炎作用通过抑制抗炎介质释放在动物研究96年,97年]。前列腺肥大与炎症、细胞增殖和氧化应激。(98年- - - - - -One hundred.抗氧化剂是免费的激进的食腐动物,抑制细胞损伤和相关疾病。在这项研究中,美国政府的睾丸激素诱发氧化应激在前列腺组织和疾病组中观察到。这是证明PCO和MDA水平的增加和降低了疾病组中谷胱甘肽的水平。此外,这种生物标志物是接近正常范围在300年治疗组和特别是AO提取600毫克/公斤。
由于大量提取类黄酮和酚类化合物,这些化合物的抗氧化能力,抗氧化能力可以提取在处理良性前列腺增生的可能机制。
本研究的目的是确定AO的组合公式对良性前列腺增生的影响。其中一个更重要的发现摆脱这种研究AO提取物可以降低前列腺肥大并发症通过抑制细胞分裂和抗炎作用。此外,类黄酮的提取山柰酚、槲皮素和芦丁显示高亲和力5α还原酶,犯错γ,呃α,和ERβ甚至比非那雄胺,尤其是5α还原酶酶。
5。结论
在老鼠身上AO提取物抑制testosterone-induced增生。由于炎症在良性前列腺增生的作用,这可能是抑制相关的规定通过减少氧化应激炎症反应的基础上大量的酚类和黄酮类化合物。应该提到,由于一些限制,细胞内事件,和细胞信号过程,这是没有完成。它建议评估每个组织酶(5α还原酶,呃α和ERβ无论何时,ɣ)表达在AO提取前列腺中配体的存在。
数据可用性
所有材料包括老鼠,睾丸激素enanthate, PSA ELISA,装备,非那雄胺,和乙醇提取提供马赞达兰大学的医学科学,和马赞达兰大学的数据从实验室获得的医学科学。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。