生长介质的pH值的影响Aeropyrum pernixArchaeosomes的结构性能和流动性

文摘

pH值的影响(6.0;7.0;8.0)的生长介质Aeropyrum pernixK1的结构组织和流动性archaeosomes准备从polar-lipid甲醇分数(PLMF)调查使用荧光各向异性和电子顺磁共振(EPR)谱。荧光各向异性的亲脂性的fluorofore 1 6-diphenyl-1 3 5-hexatriene和实证相关时间的自旋探针methylester 5-doxylpalmitate显示逐步增加温度变化的博士观察了类似的效果使用trimethylammonium-6-diphenyl-1, 3, 5-hexatriene,虽然温度变化小得多。稳态荧光各向异性和获得的经验相关时间直接从EPR谱本身并没有提供详细的结构信息,计算机模拟的EPR谱进行分析。这一分析表明,archaeosome膜组成的异构和几个地区spin-probe运动不同的模式在温度低于70°C。在更高的温度,这些膜变得更加均匀,可以描述只有一个光谱分量。这两种方法都表明,生长介质的pH值答:pernix不显著影响膜流动性的平均水平。这些结果符合TLC分析孤立的脂质,显示PLMF隔绝之间无显著差异答:pernix生长在介质具有不同的pH值。

1。介绍

古生菌生物体的第三域,他们有细胞结构和组件,明显不同于细菌和真核生物。甘油醚脂质是主要功能,区分古生菌的成员从细菌和真核生物1]。在细菌和真核生物相比,膜磷脂酰基链的ester-linked到sn-glycerol-3-phosphate支架,古细菌脂质组成的支柱sn-glycerol-1-phosphate,类异戊二烯组连接通过醚联系(2- - - - - -7]。

Aeropyrum pernixK1绝对是第一个有氧,hyperthermophilic archaeon是孤立的从肋硫气热发泄在日本(8]。的极性脂质答:pernixK1完全由C_25日,25-archaeol (3-di-sesterpanyl -sn甘油),C_25日,25-archetidyl (glucosyl)肌醇(AGI)占91摩尔%,和C_25日,25-archetidylinositol (AI)占其余9摩尔%(图1)。膜等组成的C_25日,25二醚脂质厚度比20%组成的四醚C_20、20archaeal-based脂质(9]。

图1

O sn _25日,25 O sn O α _25日,25 新型的结构公式2日—- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -sesterpanyl -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -glycerol-1-phospho-myo-inositol (C- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -archetidylinositol)(上图:AI)和2,新型双-- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -sesterpanyl -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -glycerol-1-phospho-1′- (2′- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -D-glucosyl)肌醇(C- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -archetidyl (glucosyl)肌醇)(底:AGI)。

在过去的五年中,我们调查了一些环境因素的影响膜的结构属性答:pernix体内利用电子顺磁共振(EPR)和荧光发射光谱法10]。这些研究包括pH值和温度的影响在双分子层的理化性质archaeosomes准备从polar-lipid甲醇分数(PLMF)隔绝答:pernix细胞生长在pH值7.0,92°C的混合脂质体准备从混合物PLMF和1,2-dipalmitoyl -sn-glycero-3-phosphoholine (DPPC)在不同的比率11- - - - - -13]。主要的结论基于我们的差示扫描量热法(DSC)是archaeosomes不显示凝胶液体结晶相变温度范围从0到100°C (11]。

通过这些调查答:pernix体内,我们已经表明,生长培养基pH影响最初的增长率和细胞密度(14]。pH值低于7.0还比不上pH值8.0,并没有增长答:pernix在pH值5.0。使用EPR和荧光发射测量,改变自旋探针的分布和监控他们的动态特征。这些变化反映了膜域结构随温度的变化,和他们是不同的答:pernix在pH值6.0比pH值7.0和8.0 (10]。Macalady和同事(2004)(15)建议core-lipid成分之间有很强的相关性和最优生长介质的pH值。

在目前的研究中,我们扩展EPR和荧光发射光谱法探讨生长介质的pH值的影响(6.0;7.0;8.0)的理化性能双层archaeosomes准备从这PLMF答:pernix。

2。材料和方法

2.1。的增长答:pernixK1

答:pernixK1从日本购买的微生物(9820号;Wako-shi、日本)。培养基组成(每升):34.0 g海洋肉汤2216 (Difco Becton,迪金森& Co .,富兰克林湖,新泽西,美国),5.0 g Trypticase胨(Becton, Dickinson和公司、火花、美国),1.0克酵母提取物(Becton, Dickinson和公司、火花、美国)和1.0 g Na₂年代₂O₃•5 h₂美国圣路易斯O (Sigma-Aldrich)。使用的缓冲系统是20毫米MES [2 - (N-morpholino) ethanesulfonic酸;记述有机物、Geel、比利时)的增长在pH值6.0,和20毫米玫瑰[4 - (2-hydroxyethyl) 1-piperazineethanesulfonic酸;Sigma-Aldrich化学GmbH, Steinheim,德国)的增长在酸碱7.0和8.0。的答:pernix细胞生长在800毫升1000毫升厚壁的烧瓶内生长介质,磁搅拌热板和强制曝气(0.5 L·分钟⁻¹在92°C,如前所述14]。

2.2。脂类的分离和纯化

由大约91%的PLMF AGI通讯社和9% AI(平均分子量为1181.42 g·摩尔⁻¹从lyophilised)准备答:pernix如前所述(细胞11]。脂类是分次使用吸附色谱法和薄层色谱分析用氯仿/甲醇/醋酸/水(85/30/15/5)溶剂。分析是由0.04毫克PLMF隔绝答:pernix生长在不同博士TLC板开发,喷洒20% H₂所以₄。脂质斑点可视化通过加热在180°C 20分钟9]。薄层色谱板进行分析使用3.5.3 JustTLC软件(版本。http://www.sweday.com/),两个脂质组件的强度比进行了比较。PLMF隔绝之间没有差异一个。pernix生长在培养基不同pH值观察(图2)。

图2

答:pernix _{25日,25 25日,25} TLC PLMF从的结果生长在不同的pH值为标志。人工智能和美国国际集团代表C- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -archetidylinositol和C分别-archetidyl (glucosyl)肌醇。

甲醇分数含有极性脂质(PMLF)是用于进一步分析。这种脂类解决方案被缓慢蒸发干下恒流干氮,其次是真空蒸发的溶剂残留。

2.3。制备Archaeosomes

适当的权重干PLMF都溶解在氯仿和转移到玻璃圆底烧瓶,溶剂蒸发的减压(mbar 17日)。的脂质干电影被水化水缓冲的解决方案。如上所示,以下20毫米缓冲区的解决方案是使用:MES对pH值6.0和消息灵通的pH值7.0和8.0。的最终浓度脂质是10毫克·毫升⁻¹。Multilamellar囊泡(mlv)是由涡流的脂质停赛10分钟。mlv被进一步转化为小单膜囊泡(suv) 30分钟声波降解法与10 s开关周期50%幅度Vibracell超声粉碎机VCX 750(美国纽镇超音速和材料)。分离后的残骸suv sonification,样品离心10分钟14.000 rpm(埃普多夫离心机5415 c)。

2.4。荧光各向异性测量

荧光各向异性测量1,6-diphenyl-1 3 5-hexatriene(衰变时)和trimethylammonium-6-phenyl-1, 3, 5-hexatriene (TMA-DPH)(图3)PLMF archaeosomes进行在一个10 mm-path-length试管使用卡里Eclipse荧光分光光度计(瓦里安,Mulgrave,澳大利亚),在温度范围从20°C到90°C,和pH值的范围从6.0到8.0在相关缓冲区的解决方案。瓦里安autopolarizers被使用,狭缝宽度的名义带通5 nm激发和发射。在这里,十μL衰变时或者TMA-DPH (Sigma-Aldrich化学GmbH, Steinheim,德国)在二甲亚砜(默克公司,达姆施塔特,德国)添加到2.5毫升100μM方案从PLMF suv的准备答:pernix在相关的缓冲区,达到最终浓度为0.5μ1.0 M衰变时,μM TMA-DPH。衰变时和TMA-DPH荧光各向异性测量激发波长358 nm,面向与激发偏振器在垂直位置,而垂直和水平极化发射光的组件通过单色仪记录探测器在410海里。的发射荧光衰变时和TMA-DPH水溶液是微不足道的。各向异性()是计算使用仪器的内置软件(1): 在那里,和分别是平行和垂直发射强度。g因子的值的比例(垂直的敏感性检测系统()和横向偏振光()分别为每个样品测定。

图3

结构公式1,6-diphenyl-1 3 5-hexatriene(衰变时),trimethylammonium-6-phenyl-1, 3, 5-hexatriene (TMA-DPH)和methylester 5-doxyl软脂酸(MeFASL (10, 3)]。

lipid-order参数从各向异性计算使用的解析表达式(2)[16]: 在哪里荧光各向异性的衰变时没有任何旋转运动的调查。的理论价值衰变时是0.4,而实验值躺在0.362和0.394之间(16]。在我们的计算中,实验的价值和衰变时和TMA-DPH DPPC在5°C,分别。

2.5。电子顺磁共振测量

EPR的测量,PLMF suv的methylester spin-labelled 5-doxyl软脂酸(MeFASL(10, 3)](图3),EPR谱记录力量ESP 300 x波段光谱仪(力量Analytische Messtechnik, Rheinstein,德国)。MeFASL(10, 3)亲脂性的探针被选膜由于其温和的稳定和相对高分辨率能力为当地膜分类和动态。溶解在磷脂双分子层与硝基氧集团位于上部的层。

MeFASL(10, 3)电影干墙上的玻璃管,50μL 10毫克·毫升⁻¹PLMF suv在相关的缓冲区添加,和样本漩涡,持续15分钟。这是专为最后的摩尔比率MeFASL(10, 3):脂质(1):250。样品被转移到毛细管(75毫米;Euroglas、斯洛文尼亚),EPR谱记录使用以下参数:中心,332吨;扫描范围,10吨;微波功率20.05千瓦;微波频率,9.32 GHz;调制频率、100千赫;调制振幅,0.2吨;温度范围; 5°C to 95°C. Each spectrum was the average of 10 scans, to improve the signal-to-noise ratio. From the EPR spectra, the mean empirical correlation time计算使用(3)[17]:

线宽( ;在中场位置(mT)和高度)和轨迹()线路从EPR谱(图获得6);是一个常数典型的自旋探针,是什么太⁻¹3 MeFASL(10日)(17]。

2.6。电子顺磁共振谱的计算机模拟

为更精确的描述膜的特点,计算机模拟的EPR谱线的形状进行使用EPRSIM计划(JanezŠtrancar, 1996 - 2003,http://www2.ijs.si/ ~ jstrancar / software.htm)。一般来说,描述的EPR谱旋转标签,使用随机刘维尔方程(18- - - - - -20.]。然而,在膜系统与脂肪酸自旋探针标记,当地的旋转运动对EPR的时间尺度。建模的光谱被限制在生理温度因此简化运动快速起动的政权。因为其他地方(讨论的基本方法已经21,22),这里只是总结。模型考虑到膜是异构的,并且是由几个不同地区流动特征。因此,EPR谱是由几个光谱成分,反映了不同的模式限制旋转运动的自旋探针分子膜在不同的环境中。每个光谱组件是由一组光谱参数描述,定义了线的形状。这些是订单参数(),旋转相关时间(),线宽调整()和极性调整电磁张量的因素和(和、职责)。的描述了磷脂烷基链的定向排列顺序在膜领域,为完美有序的连锁店和各向同性排列的链。膜域更流体的特点是一个更小的。的描述了烷基链的动态运动,与由于没有解决氢superhyperfine交互,和来自其他顺磁性杂质(如氧气、外部磁场)非均质性。的和极性修正因素来自于环境的极性的自旋探针硝基氧组(和下面的更多的极地环境和大的疏水区域的1)。这些参数,旁边的线形状EPR谱定义为每个光谱的相对比例组件(),它描述了自旋探针与特定的相对数量动态模式,这取决于分布的自旋探针之间的共存域具有不同的流动性特点。的分区MeFASL(10, 3)被发现不同类型的域之间的近似等于胆固醇/磷脂囊泡(23),我们假设是有效的也为这些PLMF脂质体。

应该强调,自旋探针的横向运动缓慢的时间尺度EPR谱(24]。因此,EPR谱描述只有最近的环境的属性的自旋探针纳米规模。所有的地区自旋探针的膜具有类似模式运动导致同一个光谱分量。因此,每个光谱分量反映了某种类型的膜的流动性特征nanodomain(维数海里)(25]。

获得最适合的calculated-to-experimental光谱、随机和以人群为基础的遗传算法和单纯形的优化方法结合到进化优化方法(HEO),它不需要特殊的起点和没有用户干预26]。为了得到一个合理的描述仍然定义谱组件在应用优化之前的数量。要解决这个问题多道HEO优化一起使用新开发的幽灵凝结过程。根据这个方法,200年独立HEO每个EPR谱模拟运行应用,考虑到四种不同的自旋探针动态模式(23光谱参数),在分辨率极限的EPR硝基氧实验。从这些只运行参数的设置,对应于最适合。200年获得的所有参数的最佳设置优化评价根据适合的善(过滤器),根据相似性最适合的参数值(密度滤光片)。最适合的参数提出了通过三个二维截面图使用四谱参数:参数、旋转相关时间,谱线增宽和极性校正因子(- - - - - -,- - - - - -,- - - - - -)。组的解决方案,代表自旋探针的动态模式特别是周围和这可能对应于不同的膜区域,既可以解决图形在鬼鬼图或数值凝结。起始值谱组件的参数定义使用的平均参数取自幽灵图(27]。从这些情节的信息动态模式,定义了, , ,在不同的膜区域可以获得。这样,自旋探针动态模式的变化在不同的膜区域,由于膜之间的相互作用与生物活性化合物,由于温度、pH值、和膜成分的变化,可以研究。

3所示。结果与讨论

3.1。荧光各向异性测量

荧光探针已经广泛应用于生物膜的结构和动态的研究(28]。他们的物理属性是影响物理化学探针的微环境的变化。两种探针研究膜性能衰变时,其阳离子TMA-DPH导数。由于衰变时是一个疏水探针,纳入内部无极的核心在不同的位置沿膜,而极性基团地区lipid-water TMA-DPH保持稳定的接口与烃链进入膜的脂质膜的一部分。徐和伦敦(29日]表明,各向异性值最高的凝胶状态,liquid-disordered最低状态,中间liquid-ordered州。衰变时,TMA-DPH依赖程度的分子膜链和包装可以与订单相关参数。流动性可以定义为相互的脂质参数(30.]。

秩序的水平组成的suv PLMF隔绝答:pernix在pH值6.0,pH值7.0,pH值8.0和测量在同一小灵通或pH值7.0计算各向异性测量衰变时(数据4(一)和4 (b))和TMA-DPH(数字5(一个)和5 (b)),分别。无显著差异的顺序参数archaeosomes观察的生长介质无关答:pernix细胞或测量pH值的测试温度范围。订单参数取决于应用衰变时这些archaeosomes稳步随温度增加而降低,这表明在膜流动性逐渐增加(数据4(一)和4 (b))。以前,我们也显示通过应用DSC,范围从0°C到100°C, archaeosomes不接受gel-to-liquid晶体相变(11]。订单的初始值参数衰变时20°C: pH值6.0,;pH值7.0,;pH值8.0,。同样的,我们没有发现显著差异的顺序参数取决于应用TMA-DPH archaeosomes不管增长或测量pH值。有序参数的初始值TMA-DPH衰变时相比,在古细菌脂质在相同的温度和pH值更高:pH值6.0,;pH值7.0,;pH值8.0,。另一个观察,应该强调的是,改变参数的顺序由TMA-DPH温度敏感(数据5(一个)和5 (b))。这也许不足为奇,因为TMA-DPH阳离子探针位于lipid-water界面膜和archaeosomes (SUV)电动电势−50 mV (11]。archaeosomes电动电势(爱)是与pH值没有改变pH值的范围从5.0到10.0 (11]。很可能在研究了pH值的范围从6.0到8.0的电动电势SUV archaeosomes也没有改变,这与没有观察到的变化与pH值TMA-DPH各向异性。

(一)

(b)

(一)
(b)

图4

答:pernix 的温度依赖性的PLMF lipid-order参数生长在培养基和不同的pH值(■pH值6.0;○pH值7.0;ΔpH值8.0)决定通过测量衰变时的各向异性。线表示非线性曲线拟合的数据点。(一)pH值测量样本是一样的生长介质的pH值;在pH值为7.0 (b)进行了实验。

(一)

(b)

(一)
(b)

图5

答:pernix 的温度依赖性的脂质参数PLMF的秩序生长在培养基和不同的pH值(■pH值6.0;○pH值7.0;ΔpH值8.0)决定通过测量TMA-DPH的各向异性。线表示非线性曲线拟合的数据点。(一)pH值测量样本是一样的生长介质的pH值;在pH值为7.0 (b)进行了实验。

图6

答:pernix 代表EPR谱MeFASL(10, 3)膜的SUV archaeosomes pH值7.0准备从PLMF孤立在pH值为7.0。

我们没有确定任何显著差异在两个荧光探针的行为不管生长介质的pH值答:pernix表明,脂质成分是研究不改变pH值范围的增长(pH值从6.0到8.0)或在测量pH值从6.0到8.0不等。这句话得到了TLC PLMF的结果答:pernix生长在不同的小灵通(图2)。两个主要的脂质成分之间的比例答:pernix膜C_25日,25-archetidylinositol (AI)和C_25日,25-archetidyl (glucosyl)肌醇(AGI)在增长pH值6.0和7.0:人工智能和美国国际集团和增长的pH值8.0:人工智能和美国国际集团。

3.2。电子顺磁共振测量

经验相关的MeFASL(10, 3)在这些脂质体PLMF隔绝的准备答:pernix直接从EPR谱测量(图6)。这些与温度逐渐下降,没有显示显著差异对生长介质的pH值(图7)。实证相关时间平均反映磷脂烷基链的顺序和动态spin-probe硝基氧组周围和逆与膜流动性。数据关联与荧光各向异性测量衰变时纳入archaeosomes,这表明,膜流动性随温度增加,但平均来说它不依赖生长介质的pH值。类似的结果也出现在archaeosomes组成的双相四醚脂质(31日]。

(一)

(b)

(一)
(b)

图7

答:pernix 3 依赖于温度的经验关联时间()MeFASL (10, 3) SUV archaeosomes准备从PLMF油脂分离生长在培养基和不同的pH值(■pH值6.0;○pH值7.0;ΔpH值8.0)和测量在同一小灵通在pH值为7.0 (a)和(b)。实证相关时间直接从EPR谱计算根据方程()。

获得更详细的信息可能影响膜结构特点上的不同的生长介质的pH值和温度变化,电子顺磁共振光谱进行了计算机模拟。在温度低于70°C,好符合实验光谱得到考虑,至少有三个光谱的光谱是由组件。这表明archaeosome膜组成的异构和spin-probe运动的几个地区有不同的模式。所有的地区相同的膜流动性特征描述由一个光谱分量。相应的EPR参数确定自旋探针的动态模式,无论其位置的膜。较小的区域相同的物理特性不能区别几大地区。这也意味着EPR不一定直接反映薄膜的宏观性质或大型膜领域,但也反映了膜纳米规模的上层建筑。自旋探针观察到的三个动态模式可能是由于双组分膜的脂质成分(AI和AGI)。此外,一些磷脂或垂直运动的动态波动膜内的自旋探针可以检测到一个特定的自旋探针的动态模式。这些动态模式可以改变如果膜受到一些外部扰动或如果膜成分发生了变化。 At higher temperatures, the membranes become more homogeneous and can be described by only one spectral component. The changes in the order parameters of the different membrane regions and their proportions with temperature are shown in the form of bubble diagrams in Figure8的维度,每个符号代表自旋探针的比例在相应的膜区域。随着温度增加,订单参数最有序的区域减少,其比例减少和消失的温度55°C和65°C之间的地区。不要求地区的比例增加而增加温度,和70°C以上这些保持不变。计算订单参数样本种植在不同的酸度和以7.0计算的范围的不确定性。

(一)

(b)

(一)
(b)

图8

答:pernix 依赖于温度的参数(3)和比例的MeFASL(10日)在膜区域的SUV archaeosomes从PLMF做好准备生长在pH值6.0(黑色圆圈)和7.0(灰色圆圈)(a),在pH值7.0(灰色圆圈)和8.0 (b)(黑眼圈)。直径的符号显示每个区域的比例。D1、D2和D3表示最高的区域,中间值和最低参数,分别。实验在pH值7.0。

荧光测量获得的参数(数字4和5),通过计算机模拟得到的EPR谱(图8)不能直接而自三个探针(图3),它的明显区别在于其形状和尺寸导致周围不同的扰动和显示器的属性在不同深度膜。衰变时是高度疏水性和反映了属性的无极的核心在不同的位置沿膜,TMA-DPH锚定在water-lipid接口,而MeFASL(10, 3)与硝基氧集团5日C原子(计数甲酯集团)显示器属性上磷脂层的一部分,但也表现出一些膜内的平移运动。除了通过荧光偏振测量平均订单参数膜,而计算机模拟的EPR谱顺序参数是杰出的旋转速度和反映环境均在较低温度下自旋探针,这可能是由于膜之间的异质性分布产生的膜的AI和AGI通讯社但也可以结果的波动或垂直运动的自旋探针在双分子层中,这似乎是受温度的影响。

4所示。结论

荧光各向异性测量衰变时和TMA-DPH这里除了EPR谱显示稳定减少参数的顺序的热点脂质随着温度增加,无论古生菌的pH值的增长或测量博士这表明膜流动性逐渐增加在所有这些样本,尽管没有显著差异的影响答:pernix生长培养基博士TMA-DPH靠近water-lipid界面显示相比更少的温度依赖性的衰变时或者MeFASL (10, 3)。更详细的分析使用EPR谱的计算机模拟显示膜异质性在温度低于55°C,消失在更高的温度。但EPR谱的参数计算archaeosomes从PLMF获得答:pernix生长在不同的酸度和以7.0的范围仍在计算的不确定性。通过TLC分析结果支持孤立的脂质,显示PLMF隔绝之间没有显著差异答:pernix生长在介质具有不同的小灵通。

总而言之,目前的数据表明,细胞生长pH值对膜性能没有影响被检查。前面的在活的有机体内研究[14)表明,细胞生长随介质极性脂质以来博士这种差异很有趣答:pernixK1完全由C_25日,25-archeaol,这并没有改变经济增长的pH值根据我们的资料。以前,我们已经报道的最大细胞密度答:pernix增长pH值7.0和8.0条件相似,而获得了最大的细胞密度明显降低pH值在6.0和5.0没有增长的pH值(14]。很可能在小灵通低于6.0中性的膜答:pernixC组成的_25日,25-archaeol成为质子渗透性,渗透率不是由脂质成分。

确认

作者想表达他们的感谢斯洛文尼亚的金融支持研究机构通过p4 - 0121研究计划和j2 - 3639项目。答:Ota部分是由欧盟的欧洲社会基金。

引用

1. c·r·伍斯o . Kandler, m . l . Wheelis”对生物体的自然系统:建议域古生菌,细菌和真核生物,“美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷87,不。12日,第4579 - 4576页,1990年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. 答:a . h . Pakchung p·j·l·辛普森和r·科德”地球上的生命。极端微生物继续目标职位。”环境化学,3卷,不。2、77 - 93年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. p . j . Pereto洛佩斯-加西亚,d . Moreira”祖传的脂质膜生物合成和早期进化,”生化科学趋势卷,29号9日,第477 - 469页,2004年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. n . p . Ulrih d Gmajner, p . Raspor”结构和物理化学性质的极性脂质嗜热古菌”应用微生物学和生物技术,卷84,不。2、249 - 260年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. y四郎和h . Morii醚脂质结构研究的最新进展古生菌包括比较和生理方面,“生物科学、生物技术和生物化学,卷69,不。11日,第2034 - 2019页,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. y四郎和h . Morii ether-type极性脂类的生物合成古生菌和进化方面的考虑,”微生物学和分子生物学的评论,卷71,不。1,第120 - 97页,2007。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. a . Cambacorta a . Trincone b . Nicolaus l .喇嘛和m . De罗莎“古生菌的脂质,独特的特性”系统和应用微生物学,16卷,不。4、518 - 527年,1994页。视图:谷歌学术搜索
8. y Sako:野村田等。,”Aeropyrum pernix将军11月,11月sp.,小说有氧hyperthermophilic archaeon温度的速度增长${\mathrm{One\; hundred.}}^{°}\text{C}$”,国际期刊的细菌学,46卷,不。4、1070 - 1077年,1996页。视图:谷歌学术搜索
9. h . Morii h .八木h . Akutsu:野村证券(Nomura) y Sako,和y郎,“小说phosphoglycolipid archaetidyl (glucosyl)肌醇的两个sesterterpanyl链有氧hyperthermophilic archaeon Aeropyrum pernix K1,”Biochimica et Biophysica学报,卷1436,不。3、426 - 436年,1999页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. n . p . Ulrih Adamlje, m . Nemec和m .Šentjurc“温度-和pH-induced结构性变化的膜hyperthermophilic archaeon Aeropyrum pernix K1,”膜生物学》杂志上,卷219,不。1 - 3、1 - 8,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. d . Gmajner Ota, m .Šentjurc, n . p . Ulrih”这件二醚的稳定性,25岁的脂质体hyperthermophilic archaeon Aeropyrum pernix K1,”化学和物理的脂质,卷164,不。3、236 - 245年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. d . Gmajner和n . p . Ulrih”正温的阶段的行为混合脂质体的热点二醚和传统二元酸酯脂质,”热分析和量热法杂志》上,卷106,不。1,第260 - 255页,2011。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. d . Gmajner p . a . Grabnar m . t .Žnidaričj .Štrus m .Šentjurc和n . p . Ulrih脂质体结构特征由二醚热点脂质和dipalmitoyl-L -α磷脂酰胆碱”,生物物理化学,卷158,不。2 - 3、150 - 156年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. Milek, b . Cigićm . Skrt g . Kaletunc和n . p . Ulrih“优化发展的hyperthermophilic archaeon Aeropyrum pernix规模小批量的,”加拿大《微生物学,51卷,不。9日,第809 - 805页,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. j·l·Macalady m . m . Vestling d . Baumler n . Boekelheide c·w·卡斯帕·j·f·班菲尔德,“能源spp Tetraether-linked膜层:酸,生存的关键”极端微生物,8卷,不。5,411 - 419年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. h . Pottel w·范德梅尔,w . Herreman”订单参数之间的相关性和稳态荧光各向异性的6-diphenyl-1, 3, 5-hexatriene和膜流动性的评估,“Biochimica et Biophysica学报,卷730,不。2、181 - 186年,1983页。视图:谷歌学术搜索
17. l . Coderch j . Fonollosa m . De啤梨,j . Estelrich a . De La Maza和j·l·Parra EPR“胆固醇对脂质体流动性的影响。与经皮吸收的关系。”《控释,卷68,不。1,第95 - 85页,2000。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. d·e·Budil l . Sanghyuk s Saxena和j·h·释放,“Nonlinear-least-squares慢动作EPR谱分析在一和二维使用修改后的levenberg-marquardt算法,”磁Resonance-Series杂志》上,卷120,不。2、155 - 189年,1996页。视图:谷歌学术搜索
19. b·罗宾逊h . Thomann a·贝丝和l·r·道尔顿”磁共振现象:理论考虑,”EPR生物系统和先进的电子顺磁共振研究,l·r·道尔顿Ed,页11 - 110,CRC出版社,波卡拉顿,佛罗里达州,美国,1985年。视图:谷歌学术搜索
20. d·j·施奈德和j . h .释放”计算慢动态磁共振光谱:用户指南,”生物核磁共振:自旋标记,理论和应用程序l . j .柏林和j·鲁本,Eds。,pp. 1–76, Plenum Press, New York, NY, USA, 1989.视图:谷歌学术搜索
21. j .Štrancar m .Šentjurc和m . Schara”快速和准确地描述生物膜由硝基氧EPR谱模拟”磁共振杂志,卷142,不。2、254 - 265年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. h·辛德勒和j . Seelig EPR谱旋转标签在脂质影响。”化学物理学报卷,59号4、1841 - 1850年,1973页。视图:谷歌学术搜索
23. z Arsov和j .Štrancar”之间的自旋探针测定分配系数不同的脂质膜阶段,“《化学信息和建模,45卷,不。6,1662 - 1671年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. m·e·约翰逊·d·a·伯克d . Blankschtein d·e·戈兰高地,r·k . Jain和r·s·兰格”横向扩散的小人类角质层和模型化合物的脂质双分子层系统,”生物物理期刊,卷71,不。5,2656 - 2668年,1996页。视图:谷歌学术搜索
25. j .Štrancar t Koklič,z . Arsov“软横向非均质性在生物膜的照片”,膜生物学》杂志上,卷196,不。2、135 - 146年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. b . Filipič和j .Štrancar”与遗传算法优化EPR谱参数”,应用软计算,1卷,不。1,第90 - 83页,2001。视图:谷歌学术搜索
27. j .Štrancar t . Kokličz Arsov, b . Filipičd . Stopar和m . a . Hemminga“旋转标签EPR-based表征生物系统的复杂性,《化学信息和建模,45卷,不。2、394 - 406年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. j . r . Lakowitz荧光光谱原理,Kluwer学术/充气,纽约,纽约,美国,第二版,1999年版。
29. x徐和e .伦敦”的影响甾醇结构对膜脂质领域揭示如何诱导脂质胆固醇域形成,”生物化学,39卷,不。5,843 - 849年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. j·g . Kuhry p . Fonteneau g . Duportail c . Maechling和g . Laustriat”TMA-DPH:适合特定的荧光偏振探测等离子体膜流动性研究完整的活细胞,”细胞生物物理学,5卷,不。2、129 - 140年,1983页。视图:谷歌学术搜索
31. r . Bartucci a . Gambacorta a . Gliozzi d·马什和l . Sportelli“双四醚脂质:链的灵活性和膜极性梯度从spin-label电子自旋共振”生物化学,44卷,不。45岁,15017 - 15023年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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