全身性狼疮红斑狼疮患者的过约 - 抗氧化平衡及其与临床和实验室调查结果的关系

抽象的

目的．本研究旨在评估患有全身狼疮红斑（SLE）患者的促氧化抗氧化平衡（PAB）及其与实验室发现和临床表现的关系。方法．本病例对照研究纳入60例SLE患者和60例健康者。采集血样，分离血清。随后，使用PAB测定每个样品的抗氧化剂平衡值。结果．SLE患者中PAB值的平均值明显高于健康对照（相对 HK,）。此外，在SLE患者中，PAB和红细胞沉降率（ESR）之间存在正显着相关性（那）。此外，患有脱发患者的PAB值，无表情皮疹，口腔溃疡，关节炎和肾炎明显高于这些表现的患者。结论．目前研究的结果表明，SLE患者的PAB平均值明显高，PAB与ESR相关。此外，在SLAPECIA，无斑疹，口腔溃疡，关节炎和肾炎中，在SLE患者中发现了增加的PAB。这些发现表明，PAB的测量可用于显示SLE患者的氧化应激状况。

1.介绍

系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus, SLE)是一种自身免疫性炎症性疾病，可累及人体几乎所有的组织和器官，如肾脏、皮肤、心血管系统、肺、关节、肌肉和神经系统[1］.SLE的特点是临床表现广泛，存在多种自身抗体，主要涉及育龄妇女[2那3.］.该病的病程随缓解期和复发期的不同而不同[4.］.尽管过去几年在对其发病机理的理解上取得了重要进展，但狼疮的确切病因仍不清楚[4.］.环境因素、遗传和激素紊乱是导致该病发展的常见因素[5.］.近年来，已经证明了自由基损伤和氧化应激在SLE患者的发病机制和临床症状中发挥着重要作用[6.］.作为细胞代谢过程的一部分，不断产生自由基和反应性氧物质（ROS）。这些自由基通过由酶和许多非酶抗氧化剂组成的链反应破坏的抗氧化剂防御系统失活[7.］.氧化应激基本上是反应性氧（ROS）和抗氧化剂防御机制的制造之间的不平衡[8.］.自由基产生的增加破坏了氧化还原状态，可以增加各种炎症分子的表达，这可能是炎症和组织损伤的重要原因[9.］.一些研究表明，氧化应激可能是自身免疫性疾病(如系统性红斑狼疮)的风险因素[8.-10.］.SLE患者唾液中也有抗氧化状态受损的报道[11］.

通过各种方法评估氧化应激，其中氧化剂和抗氧化剂分开测量[12-14］.因此，开发了PAB（促氧化抗氧化平衡）方法以同时提供氧化剂和抗氧化剂平衡的快速可靠地检测[15］.据我们所知，没有关于SLE患者的PAB测定的公开报告;因此，目前的研究旨在评估SLE患者的过氧抗氧化平衡及其与实验室结果和临床表现的关系。

2。材料和方法

2.1。参与者

本研究由扎德安医学大学的大学研究伦理委员会（UREC）确认。在这种情况下，对照研究中，60名SLE（54名妇女和6名男子）的患者，平均年龄60名健康个体(54名女性和6名男性)，平均年龄为作为对照组的年份被注册。所有参与者完成了知情同意书。本研究患者符合美国风湿病学院（ACR）标准的SLE。此外，对照组的参与者没有全身疾病，其抗核抗体（ANA）测试是阴性的。

2．2．抽样

从所有受试者收集两毫升的空腹血样。将血液样品立即离心并分离它们的血清，然后在-80℃下储存直至使用。

2.3。化学品

从AppliChem（Darmstadt，德国），从Sigma-Aldrich（St.Louis，Mo）和氢气获得了5,5'-四甲基苯胺（TMB）粉末和氯胺T三水合物，得到过氧化物酶和尿酸。过氧化物和DMSO是从Merck公司（德国达姆施塔特）获得的。

２.４.抗氧化剂-抗氧化平衡(PAB)测定

PAB检测方法与Alamdari等人详细解释的方法一致[16］.简而言之，这是PAB.方法用于确定引体抗氧化平衡价值。

2.4.1。制备解决方案

称量60mg TMB粉末，加入10mL DMSO。制备TMB阳离子如下：20毫升乙酸盐缓冲液[0.05M缓冲液，pH4.5]，400 μL TMB / DMSO和70 μ将L新鲜的氯胺T（100mM）溶液混合并在室温下在黑暗的地方温育2小时;将25 u将过氧酶酶溶液加入到20ml TMB阳离子中，分配到1ml等分试样中，并在-20℃下冷冻;用200℃制备TMB溶液 μL在10ml乙酸盐缓冲液中的TMB / DMSO [0.05M缓冲液，pH = 5.8];为了制备工作溶液，将1mL TMB阳离子加入10mL TMB溶液中，在室温下在黑暗的地方温育2分钟，并新鲜使用。

2.4.2。程序

10. μ我是200 μ取96孔板每孔中加入各样品、标准品或空白，取L的工作液，于37℃避光孵育12 min;在潜伏期结束时，100μ每孔加入2 N HCl;读取450nm处的吸光度对蒸馏水。过氧化氢被认为是不同浓度（0-100％）的标准。在绘制标准曲线之后，根据试验和对照组中的每种样品获得的OD，根据标准曲线计算针对每个未知样品的PAB值。

2.5。数据分析

所有统计分析由SPSS软件版本16进行。数据已被呈现为平均值±SD以及百分比。每组数据显示Kolmogorov-Smirnov（K-S）统计测试的正常分布。使用独立的样本进行测试和对照组之间的比较以及。此外，采用Pearson相关系数检验确定不同因素之间的相关性。

3.结果

桌子1显示与患者和对照组相关的人口统计和实验室数据。数据分析表明，在两个独立组中，RBC，血红蛋白，WBC，血小板，血细胞比容和ESR的手段之间存在统计学差异。

如图所示1，SLE患者中PAB值的平均值（ HK) was higher than the healthy group ( HK) and it was highly significant statistically (）。

此外，表格2显示了患者和对照组的PAB值与实验室检查结果的相关性。在SLE患者中，PAB值与红细胞沉降率(ESR)呈显著正相关(那）。

此外，如表所示3.在没有一些临床表现的SLE患者中，PAB值显着不同，例如脱发（相对那），盘状皮疹（相对那），口服溃疡（相对那），关节炎（相对那）和肾炎（相对那）。PAB值与光敏性之间没有相关性，颧骨皮疹，贫血，血清炎，神经引用，ANA和抗DSDNA表现形式。

4.讨论

Systemic Lupus红斑是一种自身免疫疾病，影响身体中许多不同的组织和器官[1］.该疾病的确切原因不完全已知，但环境因素和遗传和激素紊乱参与SLE的发展[4.］.一些研究表明，抗氧化剂防御系统无法应对氧化应激在SLE的发病机制中起重要作用17那18］.SLE患者氧化应激的增加可导致细胞中蛋白质、脂质和DNA的氧化修饰[19］.因此，本研究的主要目的是评估患有全身狼疮红斑（SLE）患者的过氧化物 - 抗氧化平衡（PAB）及其与实验室发现和临床表现的关系。在这项研究中，我们表明，与对照组和PAB相比，SLE患者的PAB值的增加与ESR相关。此外，在SLAPECIA，无斑疹，口腔溃疡，关节炎和肾炎中，在SLE患者中发现了增加的PAB。张等人。[20.]和摩根等人。[21]显示蛋白氧化标志物与SLE患者慢性损伤相关。这些研究有力地支持氧化应激在SLE发病机制中的作用。此外，Shah等人[22]与对照组相比，SLE患者的脂质醛水平作为脂质过氧化的标志物显着高得多。在最近的研究中，一些酶，即超氧化物歧化酶，过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶的抗氧化活性，并且SLE患者的谷胱甘肽分子的水平显着低于对照。同样，在另一项研究中，作者揭示了SLE患者的丙二醛水平与ESR之间的显着关系[23］.类似地，本研究表明，在SLE患者中PAB值和ESR之间存在显着的正相关性。在一项研究中，评价尿F2-异前烷排泄作为氧化应激的生物标志物，结果表明，这种生物标志物与炎症等一些主要症状之间没有显着相关性[24］.其他地方的研究人员所示的是，从SLE患者获得的血清中抗羟基诺醛和丙二醛的抗体水平与疾病活动具有显着的阳性相关性，因此由SLE疾病活动指数（SLEDAI）确定得分高于6的患者，具有更高的水平提到的抗体[25］.但是，似乎患有非活性疾病的患者也具有高水平的脂催化剂和蛋白质氧化[26］.此外，揭示了氧化剂和抗氧化剂之间的平衡在狼疮患者中受到损害，并且抗氧化剂如维生素E，eicosapentaeno的酸和二十二碳六烯酸的消耗可以有效地减少疾病的症状[27］.还观察到维生素C和E的使用导致脂质过氧化的相当大降低，但在其他评估的氧化应激标记中28］.在本研究中，PAB值评估显示SLE患者的抗氧化-抗氧化平衡明显高于健康对照组。因此，本研究结果表明，PAB法可以作为表征SLE患者氧化应激强度的新方法。因此，在最后一点，我们强烈建议抗氧化剂，作为一种补充疗法，应该总是添加到SLE患者的药物治疗。综上所述，与对照组相比，SLE患者的PAB值增加。SLE伴脱发患者PAB水平较高。PAB与ESR相关。这些发现表明，PAB的测量可用于显示SLE患者的氧化应激状况。

披露

本文摘自Zahedan医科大学硕士论文(注册号2160)。

利益冲突

作者声明他们没有利益冲突。

承认

作者感谢Zahedan副研究事务资助该项目。

参考文献

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