研究文章
一个新颖的方法,实时、连续的,荧光技术分析Anti-DNA抗体酶活动系统性红斑狼疮
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不连续测量低聚糖的水解18-mer DNAse我,狼疮病人,和正常捐赠anti-ssDNA抗体通过紫外分光光度法。* 5′6-fam-atatagcgcT-DQ1-3′18-mer水解探针与DNAse孵化我或anti-ssDNA抗体纯化狼疮病人或正常健康的捐赠者血清。紫外分光光度法分析表明改变A260阅读3小时后表明水解狼疮anti-poly - (dT) ssDNA抗体。(正常健康donor-derived anti-poly) - dT ssDNA抗体不显示水解活动。没有变化的复制包含缓冲区只有那些包含基板在整个试验。端点通过单向方差分析比较分析水解活动显示之间的显著差异活动的抗体纯化狼疮患者和正常的捐助者(= 5465.06,)。(一)测定DNAse我和狼疮anti-ssDNA抗体的水解能力调查通过紫外分光光度法。DNAse反应高峰大约15分钟后,在30分钟内完成。活动开始于0.03小时,在0.2小时达到顶峰,然后消退在0.5小时,远远快于DNA水解anti-ssDNA抗体从系统性红斑狼疮患者血清分离。(b)的比较纯化狼疮和正常anti-ssDNA抗体的水解能力调查通过紫外分光光度法。Anti-ssDNA抗体分离出正常的捐赠者没有演示水解活动;然而,anti-ssDNA抗体与系统性红斑狼疮患者展示乳沟能力在3小时孵化时间点。这些结果是一致的在所有样本进行了分析。*正常个体对系统性红斑狼疮患者。