埃塞俄比亚南部卡法地区三个地区成年蜜蜂主要寄生虫病的研究

摘要

背景和方法．为了有效的养蜂，需要定期和及时地控制危及蜜蜂生活和威胁其产品的所有因素，因此在Kaffa地区的三个地区(Bonga、Chena和Gimbo)进行了横断面研究，以评估主要蜜蜂疾病的流行情况。根据提供蜜蜂样本的能力和养蜂场的可及性，从每个kebele中选择15个运营养蜂场的384只蜜蜂样本。每个区选取不同养蜂场的128个蜂群;其中，有209个过渡蜂巢，74个传统蜂巢和101个现代蜂巢。结果．在384个样本中，小蜂房甲虫的总体流行率蜜蜂微孢子虫，以及变形虫(Malpighamoeba mellificae)疾病发生率分别为39%、45.3%和40.3%。确定这三种疾病的总体流行率，有统计学意义( ）整体流行的变化n . api疾病与变形虫(M. Mellificae.)蜂群类型与农业生态之间的疾病。结论．研究表明n . api，M. Mellificae.和小蜂巢甲虫是影响研究区域蜜蜂的主要寄生虫。为了对与埃塞俄比亚当地蜜蜂相关的蜜蜂疾病和害虫进行分类和描述，需要进行一些现场诊断调查和实验室研究工作。

1.介绍

埃塞俄比亚气候广阔，开花植物独特，是非常适合养蜂的国家之一。为此，该国通过长期的养蜂实践维持了大量蜂群。该国每年维持约1000万个蜂群，每年生产53000吨蜂蜜，因此共有23.5吨蜂蜜%占非洲蜂蜜产量和世界蜂蜜产量的2.35%[1］.这使得该国排名第一^圣在非洲大陆和10个国家^th在这个世界上。埃塞俄比亚蜂蜡产量约4300吨，位居非洲第一、世界第四[2- - - - - -4］.同一资料来源还指出，约有180万农民从事养蜂活动，现代或箱式蜂箱的年产量可达50公斤蜂蜜[5］.

养蜂业在过去几年里经历了一场至关重要的革命。蜂蜜作为食物的重要性，对工业用蜜蜂产品的需求，以及通过蜜蜂授粉而增加的高效农业作物产量，都引起了蜜蜂和蜜蜂产品的位置、来源和移动的变化。因此，蜜蜂疾病和害虫的传播和引入带来了新的威胁，这些疾病和害虫进入了以前不知道的地区。蜜蜂疾病、害虫和捕食者的世界分布对养蜂人来说是非常重要的。这是因为一旦在蜂群中发生，它们会导致蜂群的部分或全部损失，其中大多数传播非常迅速，很难治疗[6］.

蜜蜂的基本和有价值的贡献取决于蜜蜂的健康人口[7］.蜜蜂健康是近年来养蜂研究中最重要的课题之一[8］.这主要与最近在世界许多地区出现的蜂群大量流失有关[8，9]以及蜜蜂到寄生螨的脆弱性，真菌，原生动物、病毒和细菌[10]这些病原体和寄生虫会对蜜蜂的健康及其提供的服务产生有害影响，进而导致严重的经济损失[2，10］.

像所有其他生物一样，蜜蜂也会受到有害疾病和害虫的侵扰。因此，定期进行调查和认识流行疾病状况是保护蜂群及其产品免受有害疾病和害虫侵害的关键步骤[11，12].成年蜜蜂、重复使用受污染的蜂房、养蜂人、养蜂设备、喂养受感染的蜂蜜和花粉可将蜜蜂疾病从一个蜂群传播到另一个蜂群[13- - - - - -15］.

埃塞俄比亚的农业生态不仅有利于蜜蜂，也有利于与蜜蜂生活相互作用的各种蜜蜂害虫和捕食者[16］.据报道，埃塞俄比亚最常见的蜜蜂疾病和害虫是蜜蜂微孢子虫和梅利菲卡马尔皮格哈莫巴酒店［17，18]；小蜂房甲虫(Aethina tumida莫里;鞘翅目:蚋科)已被普遍牵连;然而，关于病虫害的规模和分布的证据仍然没有得到很好的探讨[19，20.］.蜜蜂疾病和害虫的严重性在蜂群、蜂房、地区和天气条件之间确实存在差异[21］.

微体病是由一种叫做n . api据悉，这种病毒会感染成年蜜蜂的肠道，导致成年蜜蜂比健康蜜蜂早死22 ~ 44%，从而削弱蜂群。n . api对蜜蜂，殖民地发展，女王性能和蜂蜜生产产生不利影响[22］.1989年通过初步实验室诊断在Holeta Bee研究中心（HBRC）的初步实验室诊断（HBRC）的初步实验室诊断，于1989年报道了这种疾病的存在[18］.

阿米巴变形虫病是蜜蜂的一种疾病，由一种叫做阿米巴变形虫的单细胞寄生虫引起m . mellificae。这种寄生虫会影响蜜蜂的马氏管，并缩短它们的生命周期[22］.在一起n . api，于一九八九年报告有变形虫病存在[18］.然而，1998年对其年度周期的研究确定了其在当地蜜蜂中的全年存在[23］.此外，从2008年到2010年进行的全国范围的诊断调查确定并位于该国大多数地方的蜜蜂的Amoeba病[23，24］.

在非洲，小甲虫一般不受重视，很长一段时间被认为是一种小害虫。因此，在它广泛存在的大多数地方，关于它对养蜂业的影响的研究进展甚微。这种情况给了这种害虫足够的时间在非洲大陆广泛传播，并导致养蜂产量的不确定下降。鉴于这一事实，小型蜂房甲虫对埃塞俄比亚蜂群和蜂产品的现实影响尚未被调查，尽管它长期分布在该国的不同地区。此外，当局并没有采取任何措施来管理这种害虫，以尽量减少它对本港养蜂业的影响[25］.

成虫和幼虫都可能是严重的害虫，会削弱蜜蜂群体或蜂蜜超级。甲虫会大量繁殖；它们的幼虫会钻过蜂巢吃蜂巢，破坏储存的蜂蜜，最终破坏受感染的蜂群或导致它们逃走。甲虫还会在蜂蜜中排便，导致蜂蜜发酵，从而导致h奥尼的梳子用完了[8，26］.在埃塞俄比亚，甲虫在2000年在全国南部和东南部地区检测到，包括Teltele，Konso，Moyale，Segen，Moga和Key Afer区[27]随后的研究表明，这些害虫广泛分布在该国的玉米和咖啡种植区[17，24］.

在研究区域，对每一种经济上重要的蜜蜂病虫害的识别和严重程度还没有很好的文献记录。检测蜜蜂健康问题的发生和分布是防止其有害影响的关键步骤。因此，本研究旨在生成Bonga地区(包括南部民族、民族和人民地区Kaffa区Gimbo和Chena站点)蜂群的一些常见疾病的基线数据。这项研究是在卡法地区的三个地区进行的，以评估主要蜜蜂疾病的流行情况。

2.材料和方法

2.1。研究区域

这项研究于2018年10月至2019年3月在南部民族、民族和人民区卡法区的Bonga区开展，以确定诸如此类的蜜蜂疾病的流行情况小孢子虫属（N. API.)变形虫(M. Mellificae.）疾病和害虫如小蜂巢甲虫。面积的平坦变化范围为800至3300 m.a.s.l.并分为局部鉴定为Dega，Woyina-dega和Kola的三个主要农生区，这些地区分别与高地，米德兰和低地相媲美。Bonga分别位于7°16'n和36°14'e的纬度和经度。它周围环绕着Gimbo Woreda，该地区接受了高降雨的地区，每年的降雨量从低地的1500毫米处于最高升高的低至2,000毫米。其年平均气温范围为12.4°C至26.8°C。面积10000平方公里的Kaffa区具有巨大的牲畜资源;即921,964牛，479,120羊，241,256张山羊，79,438匹马，10,870骡子，148,626个蜜蜂殖民地，2,226驴[28，29］.

2．2．研究设计

2018年12月至2019年3月，在Kaffa区三个区开展了一项横断面研究，以不同的养蜂方式管理蜂群，调查蜜蜂主要寄生性疾病的流行情况。通过对蜂群的观察和采集，鉴定了引起蜜蜂疾病的病原菌。诊断通过结合临床和寄生虫学研究得到确认。

2．3.取样方法及样本量测定

采用多级级采样程序来选择蜜蜂菌落。在第一阶段，根据养蜂业的潜力，选择了三个行政区（Bonga，Chena和Gimbo），选择了有目的的抽样。在第二阶段，来自邦卡的三个城市Kebeles和来自Gimbo和Chena区的两个乡村Kayikela和夸脱，以其相对养蜂潜力和代表高地，米德兰和低地农业生物选择。在第三阶段，使用简单的随机抽样技术来选择来自每个地区的128个蜂菌落，共384个蜜蜂菌落。由于在该地区未完成此类研究，因此预期的患病率和绝对精度分别设定为50％和5％。基于此，根据Thrusfield确定样本大小[30.]，如下所示：其中n是否需要样本量，pexp是预期患病率，以及d是理想的绝对精度。

通过使用50％的预期患病率，在5％的绝对精度下具有95％的置信区间，估计普遍所需的荨麻疹数量为384。

２.４.研究方法

一个蜂巢被认为是一个样本单位。蜂巢和农业生态学的类型被认为是解释变量(风险因素)，并测试它们是否对蜜蜂疾病和害虫的发生有影响。蜂房分为传统蜂房、过渡蜂房和现代蜂房。考虑了三个海拔类别:高地(> 2400米)、中部(1800 - 2400米)和海拔以下的低地(< 1800米)[31］.

2.4.1。数据收集技巧

为了根据蜜蜂的活动期检查上述病虫害的感染率，在主要的蜂蜜流通季节（11月至2月）只采集了一次样本。根据对临床症状的观察，例如蜂箱中的腹泻，通过大口漏斗或直接在通用瓶中将蜜蜂从梳子上刷下，取出成年蜜蜂，并将蜜蜂保存在70%乙醇中，并进行相应标记。样本被送到邦加农业研究中心兽医实验室。通过蜂箱检查确定了研究区域内小型蜂箱甲虫的发生情况。小型蜂巢甲虫侵扰的存在(答:tumida)通过其成虫、群体检测方法进行鉴定，如Neumann等[32］.

2.4.2。寄生虫学调查与种类鉴定

对一种影响成年蜜蜂腹部内容物的原生动物制剂引起的微孢子虫和变形虫病进行了检查；这两种疾病的取样和诊断技术几乎相同[33］.因此，按照Fries等人制定的程序[34]，从蜂巢入口采集30-60只成年蜜蜂作为样本。样本在70%的酒精中采集，直到实验室分析。每个样本的蜜蜂腹部都用剪刀剪开。切开的腹部放置在一个含有5-10毫升自来水的臼中，直到用杵形成一个均匀的悬浮液。研钵和舂杵在再次使用前已彻底清洗。将悬浮液循环置于经灭菌的载玻片上，用盖玻片覆盖。悬浮液在40倍显微镜下观察微孢子体孢子和阿米巴包囊的存在。

2.5.数据分析

将数据录入Microsoft Excel并编码，然后转入STATA软件第13版(STATA Corporation, College Station, USA)进行统计分析。采用卡方检验评估危险因素与蜜蜂主要寄生虫病流行率的相关性。统计学显著性设为值小于0.05。

3.结果

３．１．流行率n . api和相关的危险因素

目前的调查显示，艾滋病的总体流行率n . api在邦加区占45.3% (图1和2，补充文件）的流行情况n . api（67.96％）在高地，（39.84％）Midland，并记录了低地的（28.12％）。这些农业生态系统之间存在显著的统计学差异( ).总的流行率n . api在三种类型的蜂箱之间有显著差异( ),传统蜂巢类型的患病率高于现代蜂巢类型和过渡蜂巢类型n . api在传统蜂箱中观察到（63.5%），其次是过渡蜂箱（43.54）（表1）1).

3.2.阿米巴的流行(M. Mellificae.)及相关危险因素

在目前的研究中，阿米巴的总体流行率(M. Mellificae.） (图1和2(补充文件)疾病占40.3%。结果表明，蜜蜂变形虫(M. Mellificae.)疾病在传统蜂房（51%）中较高，其次是过渡蜂房（41.62%）和现代蜂房（29.7%）。此外，观察到这些蜂房之间的统计显著差异( ).目前的结果也表明Amoeba（M. Mellificae.)病害在高原地区(57%)多于低地(37.5%)和中部农业生态地区(29.6%)。此外，这些农业生态系统之间存在显著的统计学差异( ）（表2).

3.3.小型蜂房甲虫的流行率和相关风险因素

小甲虫的整体流行率(图3和4，补充档案)的比例为39.06%。在本研究中，传统蜂箱受侵害最多(54%)，其次是过渡蜂箱(36.84%)，而现代蜂箱受侵害最少(32.67%)。不同类型的荨麻疹有显著差异( ).对于小型蜂房甲虫的流行，在农业生态学方面也存在显著差异( ).低地受影响较大（占50.7%），其次是中部农业生态（37.5%）和高地（28.9%）（表1）3.).

4.讨论

在目前的研究中，大多数小孢子虫(n . api)疾病被发现是健康的，在他们的职责中是活跃的。贝扎比报告了同样的结果[35]在埃塞俄比亚中部高地[23］.这可能是由于它的低水平的孢子载量或增加了飞行的排便由于季节或卫生的蜜蜂的特点。然而，影响n . api温带气候对养蜂业经济的影响是巨大的，但养蜂人经常低估它[36］.这种疾病通常被称为“沉默的杀手”[37，因为没有明显的症状，因此这种疾病往往不被注意到。它阻碍蜂群发育，影响授粉和蜂蜜生产，导致蜂王更替[38，蜜蜂寿命减少[39］.由Yucel和Dogaroglu在土耳其进行的实验[40)证明n . api如果是未经处理的蜂群，可能会对蜂群性能产生非常有害的影响。

鼻息肉的总体患病率(n . api)患病率为45.3%，与Yohannes等人的研究结果一致[41]世卫组织报告说，阿姆哈拉地区的鼻息肉病患病率为47%，但略高于阿姆萨鲁和德萨莱根报告的患病率[23]世卫组织报告说，在南方国家、民族和人民地区，40.5%的抽样蜂群感染了疟疾N. API。此外，我们的发现低于Begna和Kebede在亚的斯亚贝巴进行的其他研究[6报告了53.3%的患病率。41在奥罗米亚有58%，在贝尼桑古尔-古穆兹有60%。这种变化可能是由于采样季节或地理区域的湿度差异造成的。这也可能是由于蜜蜂种族的卫生行为差异造成的。

总体流行水平n . api高原(67.96%)、中部(39.84%)和低地(28.12%)。这些农业生态系统之间存在显著的统计学差异( ).这与Godifey的观点不一致[42]世卫组织报告说，在提格雷地区，高地、米德兰和低地的总体患病率分别为50%、31.6%和3.2%。这可能是由于温度和湿度的影响，影响了疾病的传播n . api目前的发现与Nega等人的发现一致[43他说，湿度和降雨量的增加限制了蜜蜂飞出去清洁，这反过来又增加了疾病在成员之间的传播和自身感染。

总的流行率n . api蜂箱之间存在显著差异( ),传统蜂巢类型的患病率高于现代蜂巢类型和过渡蜂巢类型n . api在传统蜂巢(63.5%)和过渡蜂巢(43.54)中观察到。此外，现代蜂巢受影响最小(35.6%)。

这一结果与Begna和Kebede的研究结果不一致[6)谁说n . api现代养蜂系统(72.2%)比传统养蜂系统(41.3%)和过渡养蜂系统(35.3%)更普遍。这种差异可能与蜂箱的放置和框架的改变等管理措施的差异有关。此外，传统的蜂箱很难控制蜜蜂的病虫害。因此，它们容易受到害虫和疾病的影响。

贝扎比[35]报告变形虫(M. Mellificae.)疾病全年在全国大部分地区广泛分布和查明。在我们的研究中，384个蜂群被评估了是否存在变形虫病。阿米巴原虫病的总流行率为41.4% (n = 159）.目前的研究结果低于该国不同地区先前的研究结果，例如奥罗米亚地区的患病率为88%，阿姆哈拉地区为95%，Benishangul Gumuz地区为60%[41］.

这可能是由于季节性变化，因为自上次研究发生在12月和2月的季节性研究以来，Amoeba感染受到季节变化的影响。结果表明M. Mellificae.病原体全年均有发生。此外，在这些蜂箱之间观察到统计上的显著差异( ).目前的结果与Begna和Kebede的发现不一致[6报告了阿米巴原虫的流行情况(M. Mellificae.现代养蜂系统(88.9%)比传统系统(61.9%)和过渡系统(47.1%)高。这可能是由于管理实践的差异，例如，更换旧梳子，设备的处理，和使用传统的控制方法。结果还表明，阿米巴原虫(M. Mellificae.)疾病在高地（57%）比低地（37.5%）更常见，中部农业生态系统受到的影响最小（29.6%）。

此外，这些农业生态系统之间存在显著的统计学差异( ）这与Begna和Kebede的研究报告不一致[6阿米巴病在高原、中部和低地的患病率分别为85%、52.3%和50%。这可能是由于不同地理位置的天气情况不同。根据目前的研究结果，小蜂甲虫的患病率为39%。这与对我国南部和西南部16个地区的427个蜂群进行的研究结果一致，其中6个地区和43个蜂群对小蜂房甲虫呈阳性反应，发病率从21%到66% [17］.

在这项研究中，54%的传统蜂巢感染了小型蜂巢甲虫，其次是过渡蜂巢36.84%，而现代蜂巢受影响最小（32.67%）。不同类型的蜂巢之间存在显著差异( ).这可能是因为传统的蜂箱更容易受到小蜂箱甲虫的影响，因为这些蜂箱很容易藏匿害虫；此外，与改进的移动式框架式蜂箱不同，传统蜂箱更难操纵以控制病虫害。

对于小型蜂房甲虫的流行，在农业生态学方面也存在显著差异( ).低地受影响较大（占50.7%），其次是中部农业生态（37.5%）和高地（28.9%）。研究地区发病率变化的原因可能归因于不同的因素，如生态变异性、季节和管理方面。

由于这些疾病对蜂巢产品和蜂群发育有如此负面的影响，并且在研究区域内很常见，因此建议采用快速控制和预防机制，并将传统控制措施引入现代养蜂业，反之亦然。在产品质量方面，成功也需要这些措施由于时间限制，建议对蜜蜂病虫害的季节分布和大小及其经济影响进行更多的研究，同时对各种类型的组织进行长期的群体监测。社区或养蜂人协会扩展政府或非政府养蜂工作人员都需要参与一些项目，例如提高对蜜蜂疾病及其管理和预防方法的认识。总体而言，养蜂方法已经改变。除此之外，研究区是养蜂的最佳场所之一，因为种类繁多开花植物。

5.结论

蜂巢和农生生物区的类型被鉴定为存在成人蜂疾病的危险因素，例如n . api和变形虫(M. Mellificae.)，以及研究区的害虫小甲虫。研究发现，传统蜂巢下的蜜蜂受病虫害的影响更大，其次是过渡蜂巢和现代蜂巢。在农业生态方面，受影响最大的是高原农业生态n . api研究发现，生活在低地农业生态地区的蜜蜂患这种疾病的几率较低。不同的流行程度n . api，变形虫(M. Mellificae.)，并在不同研究地点、农业生态区、蜂房间和蜂巢类型间观察到小型蜂房甲虫。为了分类和描述与埃塞俄比亚当地蜜蜂有关的蜜蜂疾病和害虫，需要进行若干实地诊断调查和实验室研究工作。

数据可用性

资料将根据通讯作者的要求提供。

的利益冲突

所有作者均声明没有利益冲突。

作者的贡献

SS、TD、HF、MM参与数据收集和稿件撰写，HF参与数据分析、稿件撰写和稿件编辑。所有作者都同意最终提交手稿。

致谢

作者感谢Asrat Arke博士和Muluken Zeleke先生在数据收集和实验室工作期间提供的无价和无保留的援助和材料。作者对Bonga农业研究所(BARI)和Kaffa区畜牧和渔业办公室提供的关于养蜂潜力的相关信息表示深深的感谢。

补充材料

显示在卡法区三个地区的研究中发现的不同寄生物种的数字。（补充材料）

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