化学成分和挥发油的分离龙牙草一卷。及其抗菌和抗疟原虫活动

抽象

龙牙草是深绿色的多年生植物并覆盖有软毛和具有略微芳香气味。本属龙牙在中国，希腊和欧洲国家的传统药物已被使用。它主要用作止血，用于脾虚一剂强心剂，并为腹泻的收敛剂。仙鹤草是分割被子植物的一部分;类是由顺序罗萨莱斯，蔷薇科表示的属，龙牙. 蔷薇科或粉红鳗鱼科是最大的开花植物科之一，约有100属3000种。蔷薇科植物在全球几乎所有有花植物生长的地区都很常见，但它们大多集中在北半球的温带和亚热带地区。乙醇提取物的植物化学研究A.草导致4个黄酮衍生物（山萘酚-3-糖苷的隔离，槲皮素-3-O-α-arabinofuranosyl-β-D-吡喃半乳糖苷，3-O-山奈酚2,3-二-O-乙酰基-4-O-（顺式 - 对 - 香豆酰基）-6-O-（反式 - 对 - 香豆酰基） -β-D-glucosopyranoside，和儿茶素）蔗糖一起。所有的提取物，级分和分离化合物用于抗微生物和抗疟原虫活性测试。我们还研究了从地上部分的精油的化学成分A.草。从地上部分的挥发油成分A.草在哈萨克斯坦野生生长条件使用蒸汽蒸馏的方法获得。从植物的地上部分提取的精油用气相色谱 - 质谱分析，并发现其达到100％主要成分为β-赛莱宁（36.370%），α-panasinsene（21.720％），十六烷酸（7.839％），和1,2-壬二烯（6.199％）。无论是提取物，也没有分离的化合物显示出抗微生物和抗疟原虫活性。

1.简介

亚洲仙鹤草（龙牙草一卷。）is a perennial herb reaching a height of up to 140 cm, rhizomatous, erect stem, densely dressed, like leaf stalks, long, stiff hairs with an admixture of shorter and softer hairs. The leaves are green above, below grayish-green, broken-pinnate, from top to bottom slightly pubescent, velvety-pubescent with a mixture of small pieces of iron. The flowers are yellow, collected in spike-shaped inflorescences. The fruits are drooping; the upper surface of the fruit is convex, with spines arranged in several rows, of which the outer spines are shorter than the inner ones.A.草含有丰富的多糖和苷生长在中亚地区，广泛用于民间药物预防和治疗疾病，胃肠道相连，血压高，并作为免疫增强剂，涩。它生长在山上，水沟，花园，路边的山坡上，和桦木林的边缘，核桃林。它开花6 - 7月。的植物化学物质的组合物龙牙属包括主要在3.1-10.8％的范围内多糖高达20％和丹宁[1]。在哈萨克斯坦，A.草发现提取物具有抗氧化活性[2]。遇到等离子体GR活性和红细胞GP活性的四氧嘧啶诱导的增加的抑制[3]。在此属植物的精油成分上一页调查A.耶夫帕托里亚，A.草据报道，野生叶中含有石竹烯、石竹烯氧化物、腐殖质和E-法尼烯，栽培叶油中含有α蒎烯，β石竹烯，E-β法呢烯和茴香醛被发现[4，五]。然而，这是从该植物精油成分的第一份报告。在延续我们之前的哈萨克斯坦药用植物精油成分[工作6]，我们有兴趣继续工作A.草. 1982年首次从A.草在日本和中国传统上用作止泻，止血，和抗寄生虫药的植物。Agrimoniin是药用植物，其经常在输注，煎剂，或酊剂的形式经口施用的组分。它也存在于日常食用的食品，如草莓和覆盆子。它是由人的肠道菌群代谢成具有证明抗炎和抗癌一系列低分子量urolithins的体内和体外生物活性。Agrimoniin是属于蔷薇科，自古以来已被用于传统医药治疗各种疾病的植物的重要组成部分。由于一系列的详细描述非常有趣的活动，agrimoniin是其治疗效果[全探索有吸引力的研究候选人7]。

2。材料和方法

2.1。植物材料

与种子的地上部分龙牙草于2018年6月从哈萨克斯坦土耳其斯坦地区的Kaskasu村采集，并由N.G.Gemejiyeva博士（哈萨克斯坦共和国教育和科学部科学委员会植物与植物引进研究所）鉴定。一个代金券标本（编号01-08/3）保存在哈萨克斯坦阿拉木图植物园研究所的标本室。植物材料在25°C的室温下干燥，并提供通风。干燥后，使用实验室的IKA M20磨机将原料切碎至3-4 mm。

2.2。隔离

The chopped plant material (0.850 kg) was air-dried at room temperature. Plant material was first defatted using hexane and then extraction was by percolation in 96% ethanol (4 L) for 24 h to obtain ethanol extract (36.926 g). The ethanol extract was adsorbed in celite on a Silica gel column and eluted with solvent system (EtOAc : DCM : MeOH : H₂O (10 : 6 : 4 : 1), 100% MeOH, and 10% MeOH : H₂O、 所有组分均采用薄层色谱法（TLC）进行监测，并合并成10个主要组分。将主要组分1（8.534 g）吸附于二氧化硅（8.00 g）中，置于硅胶柱中，用DCM ： MeOH混合物以增加极性的方式洗脱，得到4个亚组分。将亚组分1（0.5 g）装入Sephadex LH-20柱，用10%MeOH ： DCM洗脱。收集了15个组分，其中14个组分被鉴定为3-O-山苍子醇2,3-二-O-乙酰基-4-O-（顺-p-香豆素基）-6-O-（反-p-香豆素基）-β-D-glucosopyranoside）。Subfraction 4 (1.258 g) was loaded onto a Sephadex LH-20 column and eluted with MeOH and 16 subfractions were collected. Subfraction 9 was identified as kaempferol-3-glycoside; subfraction 11 was identified as catechin. Main fraction 4 (1.2891 g) was loaded onto a Sephadex LH-20 column and eluted with MeOH; yielded nine subfractions were collected. Subfraction 5 was identified as quercetin-3-O-α-arabinofuranosyl-β-D-吡喃半乳糖苷。Main fraction 7 (1.00 g) was loaded onto a Sephadex LH-20 column and eluted with MeOH; yielded seven subfractions were collected and subfractions 2 and 4 were identified as fructose and glucose, respectively. A Bruker mode AMX 500 NMR and 400 NMR spectrometer operating and a standard pulse system collected¹H和¹³C NMR光谱。The instrument ran at 500 and 400 MHz in¹H和12五to 100 MHz in¹³C，和DMSO-d₆和CD₃OD作为溶剂。

2.3。抗菌和抗疟原虫活动

的提取物和分离的化合物进行了筛选使用由[报告的方法的抗菌和抗疟原虫活性8，9]。

2.4。获得精油

To extract an essential oil, plant material was chopped into small pieces (3-4 mm). Chopped plant material (535.36 g) was subjected to steam-distillation using 1 L of deionized water on true steam distiller with a 1 L capacity for 2.5 hours. Essential oil transferred to GS vial by using 0.5 ml of pentane. The oil yields based on dry weight of samples were 0.1–1.5%. The collected essential oil was analyzed by GC-MS-FID on an Agilent 7890A GC system inert XL MSD with triple-axis detector and Agilent 7693 autosampler. GC was equipped with a DB-5 fused silica capillary column (30 m × 0.25 mm, film thickness of 0.25 mm). The injector temperature was 240°C and the column temperature was initiated at 60°C, increased at 3°C/min to 240°C, and held for 5 min. The carrier gas was He and the injection volume was 5 μL（不分流）。该MS条件为50-550质量范围 M / Z，filament delay of 3.50 min. The MS conditions were mass range of 50–550 M / Z，filament delay of 3.50 min. The oil components were identified by comparing their mass spectra with the NIST Library as well as with authentic compounds. This was confirmed by comparison of their retention indices with those of authentic compounds as well as with data published in the literature.

3.结果与讨论

对乙醇提取物植物化学研究龙牙草导致4个黄酮衍生物的分离。所有的分离的化合物被鉴定通过如下分析其光谱数据分析：3-O-山奈酚2,3-二-O-乙酰基-4-O-（顺式 - 对 - 香豆酰基）-6-O-（反式对-coumaroyl） -β-D-glucosopyranoside（1），槲皮素-3-O-α-arabinofuranosyl-β-D吡喃半乳糖苷（2），山奈酚-3-糖苷（3），儿茶素（4），以及蔗糖（五）（参见表1-五和它们的NMR谱在补充材料附图给出1-19）。

所有的提取物，级分和分离化合物用于抗微生物和抗疟原虫活性测试。提取物及分离物均未出现显著活动（见表6和7）。

该油组分通过比较NIST库它们的质谱，以及与真实化合物鉴定。这是通过与那些真实化合物的它们的保留指数的比较，以及与在文献中公开的数据证实[14]。

鉴定的化合物，它们的保留指数，以及它们的百分组成总结在表8。所述成分根据其在DB-5柱洗脱的顺序排列。基于样品的干重的油产率分别为0.003-0.004％（W / W）。油的主要成分被认为是β-selinene（36.4％），α-panasinsene（21.7％），棕榈酸（7.8％），1,2-壬二烯（6.2％），壬醛（4.2％），大根香叶烯A（2.5％），和β-愈创木酚（2.4%）。

4。结论

综上所述，在硅胶上进行乙醇提取物的色谱纯化，得到五种化合物：3-O-2,3-山奈酚二-O-乙酰基-4-O-（顺式 - 对 - 香豆酰基）-6-O-（反式对香豆酰基） -β-D-glucosopyranoside（1），槲皮素-3-O-α-arabinofuranosyl-β-D吡喃半乳糖苷（2），山奈酚-3-糖苷（3），儿茶素（4），以及蔗糖（五）。化合物1和2从这种植物报道是第一次。抗菌和抗疟原虫活性筛选结果没有显示出任何积极的结果。我们发现的主要成分龙牙草精油的AREβ-selinene（36.4％），α-panasinsene（21.7％），棕榈酸（7.8％），1,2-壬二烯（6.2％），壬醛（4.2％），大根香叶烯A（2.5％），和β-愈创木酚（2.4%）。

数据可用性

用于支持该研究结果的数据包括在项目之内。

利益冲突

作者宣称，有兴趣就本文发表任何冲突。

致谢

作者是哈萨克斯坦政府和国家中心的天然产物的研究，密西西比大学的财政支持，在由美国农业部农业研究服务中心的具体合作协议没有参与表示感谢。58-6060-6-015。作者要感谢博士。查尔斯L.坎特雷尔和绿色所罗门USDA-ARS-NPURU为GC-MS结果。

补充材料

图1：¹的1 H NMR光谱3-O-山奈酚2,3-二-O-乙酰基-4-O-（顺式 - 对 - 香豆酰基）-6-O-（反式 - 对 - 香豆酰基） -β-D-glucosopyranoside。图2：¹³的C NMR谱3-O-山奈酚2,3-二-O-乙酰基-4-O-（顺式 - 对 - 香豆酰基）-6-O-（反式 - 对 - 香豆酰基） -β-D-葡萄糖苷吡喃糖苷。图3:3-O-山奈酚2,3-di-O-乙酰基-4-O-（顺-p-香豆素）-6-O-（反-p-香豆素）的EPT 135光谱-β-D-glucosopyranoside。图4：HSQC谱3-O-山奈酚2,3-二-O-乙酰基-4-O-（顺式 - 对 - 香豆酰基）-6-O-（反式 - 对 - 香豆酰基） -β-D-glucosopyranoside。图5：HMBC谱3-O-山奈酚2,3-二-O-乙酰基-4-O-（顺式 - 对 - 香豆酰基）-6-O-（反式 - 对 - 香豆酰基） -β-D-glucosopyranoside。图6：COSY谱3-O-山奈酚2,3-二-O-乙酰基-4-O-（顺式 - 对 - 香豆酰基）-6-O-（反式 - 对 - 香豆酰基） -β-D-glucosopyranoside。图7：¹的1 H NMR光谱槲皮素-3-O-α-arabinofuranosyl-β-D-吡喃半乳糖苷。图8：¹³的C NMR谱槲皮素-3-O-α-arabinofuranosyl-β-D-吡喃半乳糖苷。图9：DEPT 135频谱的槲皮素-3-O-α-arabinofuranosyl-β-D-吡喃半乳糖苷。图10：光谱HSQC槲皮素-3-O-α-arabinofuranosyl-β-D-吡喃半乳糖苷。图11：的HMBC谱槲皮素-3-O-α-arabinofuranosyl-β-D-吡喃半乳糖苷。图12：¹山奈黄素-3-糖苷的1 H NMR光谱。图13：¹³山奈酚-3-糖苷的C NMR谱。图14：DEPT 135山奈酚谱-3糖苷的。图15：山萘酚-3-糖苷的HSQC谱。图16：山萘酚-3-糖苷的HMBC谱。图17：¹儿茶素的1 H NMR光谱。图18：¹³儿茶素的C NMR谱。图19：DEPT 135光谱儿茶素。（补充材料）

工具书类

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版权

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