通过钙质和姜黄素的牙科牙髓干细胞的早期成骨分化刺激

抽象的

姜黄素是从姜黄根茎中提取的一种天然酚类物质，具有保骨功效。骨化三醇是一种有效的激素，调节骨重建和矿物质稳态和免疫反应。间充质干细胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)存在于大多数口腔组织中，类似于骨髓源性MSCs。在本研究中，我们研究了姜黄素和骨化三醇联合或单独治疗对牙髓干细胞(DPSCs)早期成骨分化的影响。早期成骨分化通过基因表达水平进行评估和证实alp.及其活动。姜黄素单独，结合钙二醇，增加AlP活性和骨赘特异性mRNA表达alp.DPSCs在成骨培养基中培养。单独骨化三醇比与姜黄素结合更能增加酶的活性。这些研究结果表明，姜黄素可以诱导DPSC的早期成骨分化，如钙质，作为骨质发生的有效兴奋剂。

1.介绍

草药补救措施为现代药物的生产提供了基础[1- - - - - -3.］．姜黄素是天然多酚疏水产品，从姜黄的根茎中提取。它具有各种药用性能，包括抗氧化和抗炎，抗菌，抗真菌，抗病毒和抗血管生成，抗癌和抗炎症性[4- - - - - -11］．

姜黄素对肥胖症，骨解，骨质疏松症和骨肉瘤的有利性质据报道，干细胞的分化具有重要作用[12］．许多研究表明，姜黄素可用于增加骨质矿物密度和骨微体系结构的增强，降低由于卵巢切除术引起的骨质破坏，抑制骨质疏松症和骨关节炎[13- - - - - -18］．这些结果表明，姜黄素可以通过抑制或诱导骨细胞分化来强制骨重塑[6，19］．

MSC是在再生处理中使用的主要类型的细胞之一，骨髓或脂肪组织是萃取的主要部位。与诸如维生素D3和骨形态发生蛋白（BMPS）和骨生长蛋白的各种因素相互作用的多能干细胞形成诸如骨骼和脂肪和软骨等宽组织，以维持身体成分平衡[20.］．

另一种从牙髓组织中分离出来的间充质干细胞是DPSC。这些多能细胞可以分化成不同的细胞类型，如成骨细胞、成牙本质细胞、成纤维细胞、成软骨细胞、神经母细胞、脂肪细胞和成肌细胞[21- - - - - -23］．DPSC是MSC的替代来源，可用于再生和组织工程过程，以治疗由于先天性畸形和肿瘤，创伤和年龄相关骨质疏松症的各种骨缺损[24，25］．

与特定生物材料相关的口腔来源干细胞目前被用于许多组织工程过程[26- - - - - -28］．

有报道称，在机械破坏、降解和侵蚀的作用下，DPSCs可分化为成牙本质样细胞并形成牙本质。

研究表明，在受到破坏、降解和机械侵蚀的情况下，DPSCs可分化为成牙本质样细胞，形成牙本质。事实上，各种研究表明，机械应力可以影响DPSC的行为[29，30.］．由DPSCs衍生的成牙细胞样细胞的分化和形成依赖于环境信号转导，包括物理和化学刺激物[29，31］．

作为一种脂溶性Secosteroid的维生素D对于改善钙，磷酸盐，镁，锌和铁的吸收是重要的。一组维生素D3代谢物调节骨质稳态和重塑。最活跃的维生素D3形式是钙二醇，其在身体的生理学中具有关键作用，包括促进正常骨生长和改善神经肌肉和免疫应答。钙二醇最重要的作用是维持影响骨骼健康的钙磷的平衡，对钙化也至关重要[32- - - - - -34］．

骨化三醇诱导人间充质干细胞成骨分化。这个过程可以通过增加ALP活性或骨钙素（OCN）基因表达水平[35］．

考虑的非常重要的效应骨化三醇在骨化和刺激干细胞向成骨和姜黄素作为一个有用的和广泛使用的影响植物衍生物及其影响在间充质干细胞成骨的刺激,在这项研究中,我们决定评估姜黄素的影响,骨化三醇,并结合它们对DPSCs早期成骨分化的影响。

2.材料和方法

2．1．材料制备

为了制备骨化三醇(1,25-二羟基维生素D3)和姜黄素溶液，将骨化三醇粉末(Rocaltrol™，罗氏，曼海姆，德国)溶解在乙醇中(1μ克/μl）和姜黄素（Sigma-Aldrich，Steinheim，Germany）的粉末溶解在DMSO（10 μ克/μl)。

2．2．细胞培养

伊朗Shaid Beheshti医学科学大学从阻生智齿中提取出人类DPSCs。细胞在添加10%胎牛血清(FBS)和1%链霉素/青霉素的DMEM中培养，5% CO孵育₂在37°C。

2．3.细胞活力和增殖试验

在本研究中，用于评估姜黄素和钙聚合物对生存性和DPSC的增殖的影响，从MTT测定中使用。将细胞培养在96孔板（5000个细胞/孔）中，并用姜黄素处理，含有0.5,1,2.5,5,10和15的浓度溶解在DMSO中 μM，在1 2 3和7天的时间。同时对浓度为1、2.5、5、10、25、50和100的骨化三醇进行实验μM.姜黄素(0.5,1,2.5,5)联合应用的可行性评价μm）在孵育7天后进行钙质（10nm）。治疗时间后，进行洗涤并孵育200 μl MTT溶液(0.5 mg/ml)， 37℃避光4小时。在此时间后，提取上述溶液200μ每孔加入l DMSO，放在摇床上摇15分钟。然后，通过平板阅读器读取570 nm处的吸光度，并通过比较对照组(在没有姜黄素和骨化三醇的情况下生长的细胞)来评估活细胞的百分比。所有测试都在三次重复中执行。对于姜黄素(0.5,1,2.5,5)的组合进行MTT实验μM）和钙硅（10nm），选定了两种的适当浓度（浓度没有毒性效应但具有增殖作用）。

２.４.人DPSCs成骨分化诱导

人体DPSCS暴露于骨质发生分化培养基：α-MEM培养基中添加100iu /ml青霉素，100μG / mL链霉素，10nm地塞米松和0.2mM钠L-抗血糖-2-磷酸，10毫米β-甘油磷酸，10%胎牛血清(Gibco, Grand Island, NY)。分化培养基每3天更新一次。

姜黄素（0.5. μM)和骨化三醇(10 nM)单独或联合加入分化培养基中。第7天测定ALP基因表达量和活性。

2．5．RT实时聚合酶链反应

我们使用RiboEx试剂(GeneAll，韩国)在指定的时间间隔提取细胞总RNA。根据制造商的协议，通过反转录(Solis Biodyne, Tartu，爱沙尼亚)从提取的rna中获得cdna。

为了进行实时荧光定量PCR，我们使用了SYBR Green染料检测技术(Solis BioDyne，爱沙尼亚)，复制样本，并连续稀释对照cDNA，创建每个基因表达的标准曲线。

所利用的特定引物包括:alp.转发:5 -GACCCTTGACCCCCCACAAT-3 ，反向:5 -GCTCGTACTGCATGTCCCCT-3和GAPDH转发:5 -AGCCACATCGCTCAGACAC-3 ，反向:5 -GCCCAATACGACCAAATCC-3 ．

用的表达式对结果进行归一化GAPDH．

2.6。ALP活动试验

治疗7天后，提取在成骨介质下生长的细胞并重新悬浮于250 μL为培养上清;然后，用超声波破碎机细胞破裂。离心后取细胞上清，用专用检测试剂盒(南京建城生物技术研究所，南京)和分光光度计(Bio-Rad, Hercules, CA)测定ALP活性，波长为520 nm。相对碱性磷酸酶活性归一化为蛋白质浓度。

3.结果

采用MTT增殖实验分析姜黄素处理后DPSC的活性。(图1(一)）．在培养24、48和72小时后，低浓度(0.5和1μ米)( ），它们之间没有显着差异。然而，细胞活力高浓度（5,10和15）显着降低 μ米)( ）．

此外，我们用辛酸化合物分析了DPSC活力（图1 (b)）．与骨化三醇共孵育24、48、72小时和7 d后，10 nM ( ）．然而，在所有浓度下，细胞活力均未显著降低( ）．

MTT测定的结果以评价姜黄素和钙质的细胞毒性7天显示，这两种物质的组合为0.5和1 μ姜黄素和10nM钙质的M对纸浆干细胞没有毒性作用，但导致这些细胞的增长增加（图2）．换句话说，10nm钙质的组合和0.5和1 μM姜黄素对DPSCs有增殖作用( ）．此外，在7天内的DPSCS暴露于10nm钙质和5 μM姜黄素对DPSCs有毒性作用。

结果alp.在暴露于0.5的DPSC上的基因表达 μM姜黄素、10 nM骨化三醇及它们联用7 d后均表现出明显升高alp.基因表达与对照组相比( ）(图3.）．

用0.5μM姜黄素、10 nM骨化三醇联合用药7 d后，与对照组相比，ALP活性显著升高( ）(图4）．

4。讨论

DPSCS用于组织工程和骨再生，这在骨质疏松症方面取得了成功。研究表明，DPSCS增强骨再生在体外和在活的有机体内，然而，基于dpsc的大体积骨形成治疗仍在研究中[36］．有必要找到一种方法来重新设置DPSC的能力，以广泛的临床应用。有证据表明姜黄素和骨化三醇可能在干细胞矿化中发挥作用，因此本研究为增加分化和诱导DPSC矿化提供了新的策略[37- - - - - -39］．

本研究结果表明，骨化三醇在所有浓度和测试时间下对DPSCs均无毒性作用(100 nM浓度下72小时除外)。这些结果也表明骨化三醇可引起DPSCs的生长和增殖。维生素D是骨代谢和发育的重要调节剂，参与钙稳态，并显著增加牙槽骨可吸收区域的骨形成。维生素D可增强正畸治疗后支持牙组织的修复。此外，维生素D的活性形式已被证明在骨组织中发挥着非常重要的作用，因为它既可以诱导骨形成和重吸收，也可以调节成骨细胞和破骨细胞中的骨转换[40］．维生素D受体的加入直接影响成骨细胞，但这些影响取决于治疗的剂量、时间和成骨细胞的来源。维生素D主要促进人成骨细胞的矿化和分化[41］．

Ji等研究了骨化三醇诱导人牙周韧带来源干细胞成骨分化的活性。结果显示，与对照组相比，在不同浓度(0.01、1和10 nm)作用24、48和72小时后，细胞增殖没有发生降低[42］．Wang等人研究了骨化三醇(0.01和0.02 nm)对成骨细胞7 - 14天的影响，报告成骨细胞存活率显著增加[43］．

与另一项使用MC3T3-E1细胞的研究相反，如维生素d处理的成骨细胞显示增殖率增加。然而，与细胞分化相关的标记物的表达也增加了[44］．最近的发现与我们研究中获得的结果一致，因为在本研究中，添加钙质的添加不抑制细胞生长和增殖。因此，维生素D的作用直接依赖于剂量并导致干细胞的骨质发生分化。然而，根据环境条件，细胞的浓度和类型也可能导致细胞增殖的显着变化。

本研究通过MTT法检测姜黄素对DPSCs的细胞毒性，发现姜黄素低浓度(0.5和1)作用24、48和72小时对DPSCs无毒性作用，但浓度为5、10和15时对DPSCs无毒性作用μ姜黄素对牙髓干细胞有毒性作用。姜黄素可能通过调节氧化应激参数，如氧反应物种和抗氧化基因的表达，以时间和剂量依赖的方式发挥细胞毒性作用。本研究结果还表明，0.5μM姜黄素和10 nM骨化三醇处理7 d后对牙髓干细胞无毒性作用，但可促进牙髓干细胞的生长。但与此同时，DPSCs暴露和姜黄素浓度增加至5μM显示毒性作用。从结果中得到的适当剂量和时间被用来测量alp.基因表达和活性。虽然目前还没有针对DPSC分化的单一特异性标记物，但通过多个标记物的表达来研究分化过程。评估分化是通过评估几个特定基因的表达来进行的。据报道，DPSCs可表达典型的成骨细胞标志物，包括ALP、骨桥蛋白(OPN)和I型胶原蛋白(Col I)，并可在成骨细胞样细胞中产生矿物基质[45］．然而，ALP是一种更为普遍的蛋白质，它参与骨形成和细胞外基质矿化。

大量研究表明，该物质是早期检测成骨分化的标志，其中ALP基因和蛋白的表达在骨分化中大大增加，因此与矿化活动显著相关。刺激2天后，ALP mRNA水平与成骨分化过程平行升高。此外，ALP是一种外酶，在矿物分化过程中参与矿物磷酸盐的释放，因此是骨转换的重要标志[46］．因此，在该研究中，研究了用姜黄素和钙硅酸钠处理的DPSC中ALP酶的基因和活性。本研究的结果表明alp.用0.5治疗DPSC的基因表达和活性 μM姜黄素，10nM胆固醇，与对照组相比，7天内的组合显示出显着增加（ ）．

研究表明姜黄素能促进干细胞的成骨分化。这些结果通过检测基因表达或ALP活性水平得到证实。Son等在C3H10T1/2间充质干细胞中检测姜黄素的细胞毒性和成骨标志物的表达，发现姜黄素增加了间充质干细胞的表达alp.和OCN基因，随后分化为C3H10T1/2细胞。姜黄素还对内质网造成轻度应激，如成骨细胞中BMP2的功能[47］．虽然已经研究了姜黄素诱导的成骨细胞的分化，但在分子水平下没有其机制的报告。

单独骨化三醇比与姜黄素结合更能增加酶的活性。这些研究结果表明，姜黄素可以诱导DPSC的早期成骨分化，如钙质，作为骨质发生的有效兴奋剂。

本研究存在一些局限性，我们没有评估其他成骨或牙源性标记物的表达，如DSPP、ON、RUNX2和OCN，因为评估它们需要较长的治疗时间(21天)，但我们只能治疗细胞一周。另一个限制包括缺乏体内实验;因此，未来通过动物模型进行更多的研究是必要的。

结论

AlP活性的增加和姜黄素和钙质显示的ALP表达的上调表明它们有利于DPSC分化的潜力。然而，不评估其他成骨或幼儿发生标记物的表达，因此需要进一步研究以证实它们对骨酮/牙种外分化的影响。

由于姜黄素和骨化三醇对DPSCs中ALP活性和基因表达的积极影响，这些材料可以作为支架材料的成分在骨和牙组织工程中作为一种选择。此外，姜黄素是一种有效的草药成分，价格低廉，可作为骨化三醇的替代品来刺激骨骼。它还可以用于设计用于增加骨化的材料，如引导骨再生(GBR)。

姜黄素单独或联合骨化三醇可提高ALP活性和成骨细胞特异性mRNA的表达alp.当DPSCs在成骨培养基中培养时，(2)单独骨化三醇比姜黄素更能增加酶活性，(3)这些结果表明，姜黄素可以像骨化三醇一样诱导DPSCs早期成骨分化，是一种有效的成骨刺激剂，(4)更多在体外和在活的有机体内需要研究以确认它们对骨蛋白酶/幼儿区分化的影响。

数据可用性

可根据要求提供复制这些结果所需的原始/处理数据。

伦理批准

本研究得到了大不里士医学大学伦理委员会的批准(IR.TBZMED.REC.1398.342)。

的利益冲突

作家宣布没有利益冲突。

致谢

这是一项基于标题的论文的研究，其中有一个“钙钙和姜黄素对牙髓干细胞的分化”，论文数量：62100，由塔德里兹大学研究（录像机）的副校长资助医学科学（TUOMS）。

参考文献

1. P. A. De Smet，《草药疗法》新英格兰医学杂志，第347卷，第2期。25，页2046-2056,2002。查看：出版商的网站|谷歌学术
2. N. Samadi, P. Ghanbari, M. Mohseni等人，“联合疗法增加了多西他赛、长春碱和他莫昔芬在癌细胞中的疗效，”癌症研究与治疗杂志，第10卷，第5期。3，pp。715-721,2014。查看：出版商的网站|谷歌学术
3. M. Mohseni, N. Samadi, P. Ghanbari等人，“多西他赛和长春碱联合治疗可分解p -糖蛋白介导的化疗耐药，”伊朗基础医学科学杂志， 2016年第19卷。查看：谷歌学术
4. D. Thaloor, A. K. Singh, G. S. Sidhu, P. V. Prasad, H. K. Kleinman，和R. K. Maheshwari，“姜黄素抑制人脐静脉内皮细胞的血管生成分化”，细胞生长与分化，卷。9，pp。305-312,1998。查看：谷歌学术
5. H. Hatcher, R. Planalp, J. Cho, F. M. Torti, S. V. Torti，《姜黄素:从古代医学到目前的临床试验》，细胞与分子生命科学，卷。65，不。11，PP。1631-1652,2008。查看：出版商的网站|谷歌学术
6. S. Sharifi, S. Zununi Vahed, E. Ahmadian et al， "干细胞治疗:姜黄素起作用"植物疗法的研究第33卷第3期11, pp. 2927-2937, 2019。查看：出版商的网站|谷歌学术
7. M.A.Ghavimi，R. Negahdari，A. Bani Shahabadi等，“使用静电纺丝技术的骨组织工程制备和研究淀粉/胶原/聚己内酯纳米纤维支架，”欧亚化学通讯，第2卷，122-127页，2020。查看：谷歌学术
8. M.A.Ghavimi，A. B. Shahabadi，S. Jarolmasjed，M. Y.Memar，S. M. Dizaj和S. Sharifi，“含有阿司匹林负载的PLGA纳米颗粒的纳米纤维不对称胶原/姜黄素膜被引导骨再生”，“科学报告，第10卷，第5期。1, pp. 18200 - 18215,2020。查看：出版商的网站|谷歌学术
9. R. Negahdari, S. Sharifi, M. A. Ghavimi等人，“姜黄素纳米晶体的生产、物理化学评估和对植入装置细菌负载的抗菌效果的体外评估，”应用科学，第10卷，第5期。23，p。8356,2020。查看：出版商的网站|谷歌学术
10. S. Sharifi，N.Fathi，M. Y.Memar等，“姜黄素纳米型抗微生物活性：新趋势和未来的观点”，植物疗法的研究第34卷第3期第8页，1926-1946,2020。查看：出版商的网站|谷歌学术
11. R. Negahdari, M. A. Ghavimi, A. Barzegar等，“纳米姜黄素在植入装置内的抗菌效果:体外研究，”牙科临床和实验研究，第7卷，第5期2，第163-169页，2021年。查看：出版商的网站|谷歌学术
12. K. V. pedada, K. V. pedada, S. K. Shukla, a . Mishra, V. Verma，“姜黄素在常见肌肉骨骼疾病中的作用:当前实验室、转化和临床数据综述”，骨科手术，第7卷，第5期3, pp. 222-231, 2015。查看：出版商的网站|谷歌学术
13. 硕士。杨,郭宏源。王,p。Yan等人，“姜黄素改善APP/PS1转基因小鼠的骨微结构并提高矿物质密度，”植物医学里第18卷第2期2-3, pp. 205-213, 2011。查看：出版商的网站|谷歌学术
14. 华盛顿特区。曹,H.-S。荣格,K.-T。Kim, Y. Jeon, j.k。唱,黄永发。“大剂量姜黄素在切除卵巢的大鼠身上的治疗优势”韩国神经外科学会杂志第54卷第5期6，第461-466页，2013。查看：出版商的网站|谷歌学术
15. J. W.每日，M.杨和S. Park，“姜黄提取物和姜黄素用于减轻关节炎的症状的疗效：随机临床试验的系统审查和荟萃分析”医药食品杂志第19卷第2期8，第717-729页，2016。查看：出版商的网站|谷歌学术
16. a . Riva, S. Togni, L. Giacomelli等，“姜黄素补充剂对低骨密度无症状受试者的影响:一项为期24周的初步补充研究，”欧洲医学和药理学科学评论，卷。21，不。7，pp。1684-1689,2017。查看：谷歌学术
17. M. Hatefi, M. R. H. Ahmadi, A. Rahmani, M. M. Dastjerdi和K. Asadollahi，“姜黄素对脊髓损伤患者骨丢失和骨转换生化标志物的影响”，世界神经外科，卷。114，PP。E785-E791,2018。查看：出版商的网站|谷歌学术
18. F. Khanizadeh, A. Rahmani, K. Asadollahi和M. R. H. Ahmadi，“姜黄素和阿仑膦酸盐联合治疗可调节骨转换标记物并提高绝经后骨质疏松妇女的骨密度，”内分泌学和代谢档案第62期4, pp. 438-445, 2018。查看：出版商的网站|谷歌学术
19. S. Sharifi, F. A. Moghaddam, A. Abedi等人，“植物化学物质对间充质干细胞成骨分化的影响”生物膜第46卷，第46期6, pp. 874-893, 2020。查看：出版商的网站|谷歌学术
20. A. Andrzejewska, B. Lukomska, M. Janowski，《简明综述:间充质干细胞:从根到促进》，干细胞，第37卷，第2期7，第855-864页，2019。查看：出版商的网站|谷歌学术
21. K.Janebodin，O.V.Horst，N.Ieronimakis等，“来自新生儿小鼠牙髓牙髓的神经嵴衍生干细胞的分离与表征”《公共科学图书馆•综合》，第6卷，第2期第11条e27526, 2011。查看：出版商的网站|谷歌学术
22. I. D'Alimonte，E. Nargi，A.Lannutti等，“腺苷A₁受体刺激通过WNT信号增强人牙髓来源间充质干细胞的成骨分化。干细胞研究，第11卷，第5期。1，pp。611-624,2013。查看：出版商的网站|谷歌学术
23. P. Hilkens, P. Gervois, Y. Fanton等，“分离方法对人类牙髓干细胞特性和多系分化潜能的影响”，细胞与组织研究，卷。353，没有。1，pp。65-78,2013。查看：出版商的网站|谷歌学术
24. G. Feng, K. Zheng, D. Song等，“SIRT1参与TNF-α- 通过wnt /通过wnt /的α-β连环蛋白信号。”体外细胞和发育生物学-动物，卷。52，不。10，pp。1001-1011,2016。查看：出版商的网站|谷歌学术
25. M. Alipour, M. Aghazadeh, A. Akbarzadeh, Z. Vafajoo, Z. Aghazadeh，和V. Raeisdasteh homaabad，“在PCL-PEG-PCL/沸石纳米纤维支架上的人牙髓干细胞成骨分化”，人造细胞，纳米医生和生物技术，第47卷，第47期。1，第3431-3437页，2019。查看：出版商的网站|谷歌学术
26. M. Marelli，G.Falisi，A.ApiCella等，“牙髓干细胞的行为”不同类型的创新型介孔和纳米多孔硅支架，具有不同官能化的表面，“生物调节和体内平衡剂杂志，第29卷，第2期4, pp. 991-997, 2015。查看：谷歌学术
27. A. Ballini, A. Boccaccio, R. Saini, P. Van Pham, M. Tatullo，“再生医学中牙源性干细胞及其分泌和与生物支架/生物材料的相互作用:从体外研究到转化应用”，干细胞国际文章编号6975251,3页，2017。查看：出版商的网站|谷歌学术
28. M. Tatullo, G. Spagnuolo, B. Codispoti等，“基于pla的矿物掺杂支架植入人类根尖周囊肿来源的MSCs:牙科再生愈合的一个有前途的工具，”材料， 2019年第12卷。查看：出版商的网站|谷歌学术
29. M. Marrelli, B. Codispoti, R. M. Shelton et al，“牙髓干细胞机械反应性:机械刺激对牙髓干细胞行为的影响”，生理学的前沿2018年，第9卷，第1685页。查看：出版商的网站|谷歌学术
30. M. Samiei, Z. Aghazadeh, E. D. Abdolahinia, A. Vahdati, S. Daneshvar, and A. Noghani，“电磁场对牙髓干细胞存活率和增殖率的影响”，Acta Odontologica Scandinavica，卷。78，没有。7，pp。494-500,2020。查看：出版商的网站|谷歌学术
31. M.Tatullo，M. Marelli，G.Falisi等，“组织培养板的机械影响和细胞外基质对间充质干细胞的行为：局部回顾”国际免疫病理学和药理学杂志，第29卷，第2期1，pp。3-8,2016。查看：出版商的网站|谷歌学术
32. N. Z. Mostafa, R. Fitzsimmons, P. W. Major等，“地塞米松、维生素D3、碱性成纤维细胞生长因子和骨形态发生蛋白-2培养人间充质干细胞的成骨分化，”结缔组织的研究，卷。53，不。2，pp。117-131,2012。查看：出版商的网站|谷歌学术
33. A. Gil, J. Plaza-Diaz, M. D. Mesa，《维生素D:经典与新奇行为》，营养和代谢年鉴，卷。72，没有。2，pp。87-95,2018。查看：出版商的网站|谷歌学术
34. N. Fathi, E. ahmadan, S. Shahi等，“维生素D和维生素D受体(VDR)在口腔癌中的作用”，Biomedicine和药物治疗，卷。109，pp。391-401,2019。查看：出版商的网站|谷歌学术
35. K. M. Curtis, K. K. Aenlle, B. A. Roos，和G. A. Howard，“24r, 25-二羟基维生素D3促进人类间充质干细胞的成骨分化，”分子内分泌第28卷第2期5, pp. 644-658, 2014。查看：出版商的网站|谷歌学术
36. 金青，袁凯，林伟，牛灿，马仁，黄志明，“牙髓和脂肪组织间充质干细胞对骨再生潜能的比较特性”，人造细胞，纳米医生和生物技术，第47卷，第47期。1，pp。1577-1584,2019。查看：出版商的网站|谷歌学术
37. “姜黄素增加大鼠间充质干细胞成骨细胞分化，但抑制脂肪细胞分化，”生药学杂志，第8卷，第2期31, pp. 202 - 208,2012。查看：出版商的网站|谷歌学术
38. V. V. Pande, K. C. Chousalkar, M. S. Bhanugopan, J. C. Quinn， "骨化三醇(1,25-(OH))的超级药理学水平"₂D_3.)在体外进行成骨分化的鸡间充质干细胞中，以菌株依赖的方式抑制矿物质沉积并减少细胞增殖。”家禽科学，第94卷，第94期11, pp. 2784-2796, 2015。查看：出版商的网站|谷歌学术
39. h。洪，A.洪，c . c。Wang等人，“骨化三醇在培养的人牙周组织细胞中具有与维生素C相当的矿化诱导作用。”美国翻译研究杂志， 2019年第11卷。查看：谷歌学术
40. M. K. Collins和P. M. Sinclair，“局部使用维生素D来增加正畸牙齿移动的速度，”美国矫正剂和牙科骨科杂志，第94卷，第94期4、第4页。查看：出版商的网站|谷歌学术
41. M. Van Driel，M. Koedam，C. J. Buurman等，“证据表明这是1α， 25-二羟基维生素D3和24-羟基维生素D3可增强人成骨细胞的分化和矿化，”细胞生物化学杂志，卷。99，没有。3，pp。922-935,2006。查看：出版商的网站|谷歌学术
42. 季勇，张鹏，邢永强等，“1α， 25-二羟基维生素D3对人牙周韧带干细胞成骨分化及其调控机制的影响，”国际分子医学杂志号，第43卷。1，页167-176,2019。查看：出版商的网站|谷歌学术
43. D. Wang, J. Song，和H. Ma，“关于成骨细胞对维生素D3及其代谢物反应的体外实验研究”，药理学，第101卷，第1期。5-6，页225-235,2018。查看：出版商的网站|谷歌学术
44. H.-S。金，M.郑，d - k。金,W.-P。李,S.-J。Yu, B.-O。Kim，“1,25 -二羟基维生素D3对MC3T3-E1成骨样细胞分化的影响”牙周与种植科学杂志，第48卷，第48期1，第34-46页，2018。查看：出版商的网站|谷歌学术
45. F. Paduano, M. Marrelli, L. J. White, K. M. Shakesheff, M. Tatullo，“脱细胞骨细胞外基质和I型胶原的水凝胶支架上人类牙髓干细胞的牙源性分化”，《公共科学图书馆•综合》，第11卷，第5期。2、article e0148225, 2016。查看：出版商的网站|谷歌学术
46. I. Mortada和R. Mortada，《牙髓干细胞与成骨:更新》，Cytotechnology，第70卷，第2期5, pp. 1479-1486, 2018。查看：出版商的网站|谷歌学术
47. 纳米比亚。儿子,E.-J。金,W.-G。Jang，“姜黄素通过温和内质网应激(如成骨细胞上的BMP2)诱导成骨细胞分化，”生命科学，卷。193，第34-39,2018。查看：出版商的网站|谷歌学术

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