调制的脂肪间充质干细胞/基质细胞转录组的g - csf的刺激

文摘

间充质干细胞/基质细胞(msc)展览multidifferentiation潜力,平行的免疫调节和营养特性,使其可行的选择工具,用于治疗退行性疾病,同种异体移植物排斥反应、自身免疫性疾病、组织再生。MSC可以调制功能属性暴露他们inflammatory-stimulating微环境(即。启动)在治疗前使用。粒细胞集落刺激因子(g - csf)是一种细胞因子在免疫反应中扮演关键角色,造血作用调制通过直接影响造血祖细胞的增殖、存活和动员。尽管msc支持造血的既定角色,g - csf对msc生物学的影响没有进行过彻底的探索。这项研究表明,g - csf也直接作用于脂肪msc (ADSCs),调节他们的功能。在此,芯片转录组分析表明,g - csf的刺激在体外导致调制各种信号通路包括那些与透明质酸(HA)的新陈代谢,细胞动员ADSCs赋予一个概要文件,介导细胞内在的方式在一定程度上减少CD44表达与HA synthesis-related基因。总的来说,这些数据表明直接调节g - csf对ADSC的影响函数,可能会改变他们的治疗能力,因此未来临床协议的设计。

1。介绍

间充质干细胞/基质细胞(msc)出现了近年来作为潜在的治疗工具,用于各种临床条件(1,2]。这是基于重要的特性,比如multidifferentiation潜力,调节能力强适应性和先天免疫反应,诱导营养的影响(例如,血管生成,促有丝分裂的、凋亡和antifibrotic),和低免疫原性,允许同种异体治疗政权(3,4]。msc的脂肪组织构成丰富的储层,容易通过微创手术。脂肪msc (ADSCs)表现出频率明显高于其他来源,如“标准”骨髓(BM) [5,6]。msc开始被认可的能力感知周围的分子环境(7,8),随后与广泛的反应反应涉及的旁分泌分泌可溶性和microvesicle-packaged分子包括生长因子、细胞因子,microrna [9,10]。重要的是,这些反应可以得罪,促炎和抗炎瀑布源于类型1和2 MSC表型转变,分别由特定的刺激分子环境(7,8]。

粒细胞集落刺激因子(g - csf)是一种细胞因子,其表达引起的炎症刺激包括il - 1βIL-17, TNF -α,有限合伙人11]。它的影响主要是面向对增加骨的生产和动员骨髓来源的嗜中性粒细胞身份响应(12,13]。g - csf对其生物效应通过绑定同源受体G-CSFR (CD114),表示在一些细胞类型包括造血干细胞(公司),前体和成熟的中性粒细胞,骨髓细胞,内皮细胞,placenta-derived细胞,神经元,胚珠,心肌细胞(14]。至于msc,村上等人最近证明ADSCs表达CD114 ( ),这成为调节 当细胞被动员在活的有机体内与g - csf (15]。结果CD114 / g - csf复杂信号通过多种细胞内分子途径包括Jak-STAT, Ras / MAPK PI3K,和PKB / AKT瀑布,调制各种生物过程包括分化、迁移、和生存15,16]。

由于一个高效granulocyte-mobilizing效果,重组人g - csf (rhG-CSF)现在临床上广泛使用在各种条件如因化疗和骨髓嗜中性白血球减少症治疗造血干细胞移植和在艾滋病毒感染17,18]。最近,它已被测试作为一种替代和/或支持msc研究缺血性条件包括心肌和脑的19,20.)对中枢神经系统的退化条件(21]。不同rhG-CSF配方目前批准的推出为其临床使用白细胞生成素(Neupogen)。IOR®leukoCIM就是其中之一,类似的安全性和药效学和药代动力学资料证明在活的有机体内(22]。

除了已知的g - csf对公司的影响和目前临床使用,我们所知,没有描述关于潜在的g - csf对msc特别是ADSCs活动功能。在目前的研究中,我们表明,两种不同配方的rhG-CSF在体外ADSCs转录组的调节效应,诱导细胞增殖相关信号通路的激活,动员、分化、和二次免疫反应。

2。材料和方法

2.1。隔离和文化人类脂肪Tissue-Derived msc (ADSCs)

医院的机构伦理委员会Militar波哥大中央批准这项研究(2013 - 049),与所有样品(3独立,消除识别信息,健康的捐赠者,年龄35岁,37岁和39)下获得书面知情同意。脂肪组织(~ 40 g)来自最小的腹部lipoaspirate手术,分离、培养,ADSCs根据以下协议。短暂,脂肪组织是用相同量的杜尔贝科的磷酸盐(DPBS)和细胞外基质(ECM)与I型胶原酶消化0.075% (Invitrogen-Gibco) 37°C为30分钟。酶活性是低糖中和后杜尔贝科修改鹰的介质(LG-DMEM;Sigma-Aldrich)含10%胎牛血清(的边后卫;Invitrogen-Gibco)和100 U /毫升青霉素和链霉素(PS;Invitrogen-Gibco)。样本然后离心机和T25培养瓶中的细胞颗粒被播种LG-DMEM含有10%的边后卫和100 U /毫升PS。这些细胞被孵化在湿润的气氛中在37°C公司为5%₂每3到4天,媒介改变直到附着纤维母细胞融合达到了70%。细胞被胰蛋白酶(0.05%)然后通过两次消化、播种密度的5000细胞/厘米²最后作为通道2。细胞数量和生存能力的时候通过台盼蓝和7-aminoactinomycin D测定(7 aad)方法,分别。

2.2。描述的msc Immunophenotypic分析

人类抗体抗原CD34 (PE)、CD45 (FITC)、CD105 (PerCP) CD73 (PE)和CD90 (FITC)从正欲获得。总共 细胞/毫升细胞在0.2毫升resuspended DPBS孵化和异硫氰酸荧光素(FITC),藻红蛋白(PE),或peridinin叶绿素——(PerCP)共轭抗体在室温下为30分钟。细胞的荧光强度是评价通过流式细胞术(流式细胞仪第二章;正欲),数据使用流式细胞仪分析了天后软件(正)。

2.3。成骨分化ADSCs的潜力

细胞被镀的密度 细胞/在6-well盘子LG-DMEM包含10%的边后卫,允许坚持一夜之间,包含10%的边后卫和1%,取而代之的是LG-DMEM PS和补充0.1毫米地塞米松(干细胞技术),10毫米b-glycerol磷酸(干细胞技术),和100毫米ascorbate-2-phosphate(干细胞技术)。每3天中被改变。程度天后,成骨细胞分化是由碱性磷酸酶和冯Kossa染色。

2.4。治疗与rhG-CSF ADSCs

的最佳剂量rhG-CSF配方(Innovator-Neupogen(罗氏)和Biosimilar-IOR®leukoCIM(δ实验室)]对ADSCs使用7 aad细胞染色可行性评估,通过流式细胞术分析。ADSCS ( )从3独立捐助者培养LG-DMEM含有20%的边后卫,1% PS,和rhG-CSF(100和200 ng / ml的配方)48小时,与样本0,8、24、48小时内进行分析。根据结果数据,后续实验200 ng / ml和类似的评估时间点。这些实验包括流式细胞术评价(如上所述)的CD44 (FITC)来评估一个迁移表型,连同CD90证明一般MSC表型稳定与rhG-CSF配方。

高通量/转录组分析, ADSCs培养LG-DMEM中含20%的边后卫,1% PS, 200 ng / ml的rhG-CSF配方6小时。个别井然后收获同时RNA提取。

2.5。RNA分离和微阵列分析

控制和刺激ADSCs收集治疗0.05% trypsin-EDTA,从颗粒状细胞和细胞总RNA提取和纯化使用Quick-RNA™MiniPrep (Zymo研究)根据制造商的协议。RNA质量取决于OD 260/280的比例,随着量化NanoDrop分光光度计(热科学)。

微阵列基因表达分析,2μg的总RNA ADSCs rhG-CSF配方或贴上Cy3治疗,而未经处理的同行贴上Cy5(用作引用)为他们的进一步杂交安捷伦SurePrint G3人类通用电气v2 8 x60k微阵列(美国安捷伦科技,帕洛阿尔托,CA),利用RNA来自相应的细胞事先rhG-CSF治疗(贴上Cy5)作为参考。RNA是获得和处理3独立捐助者(生物一式三份),运行在复制(技术副本)。杂交步骤进行根据安捷伦使用Genepix 4000 b协议和图像扫描芯片扫描仪(轴突仪器,福斯特城、钙、美国)。图像分析和初始质量控制进行使用安捷伦v10.2特征提取软件。原始数据集已经提交给地理(GSE139352)。我们使用了Limma Bioconductor方案背景调整,在和数组之间的归一化23]。识别显著,或表达下调基因在杂化样本,我们采用看到下面成了等级产品的测试(值< 0.05; )(24]。

2.6。生物信息学分析

统计分析完成MultiExperiment查看器软件(4.9兆电子伏)(25]。一般基因的数量和身份的影响在这两个模型测定维恩映射。与InnateDB功能富集分析(https://www.innatedb.com/index.jsp),REVIGO (http://revigo.irb.hr/),Cytoscape软件(https://cytoscape.org)。

3所示。结果

3.1。ADSCs隔离和表征

处理脂肪组织产生ADSCs与呈外观和文化表现出纤维母细胞克隆形成单位(CFU-F)典型的MSC。流仪分析表明,ADSCs来自捐赠者都是典型的MSC阳性标记,如CD73 CD90,和CD105,而负造血CD34、CD45标记(图1(一))。扩大ADSCs表现出保守可能分化成成骨细胞(图1 (b)),这表明人口都是由多功能MSC。

3.2。g - csf对ADSC可行性和表型的影响

7 aad可行性分析表明,两种剂型的rhG-CSF(在剂量政权)没有毒性ADSCs 48小时,证明整个刺激细胞存活率在97%和98%之间(图1 (c))。基于这些信息,我们200 ng / ml用于后续实验。重要的是,CD90并不影响g - csf治疗,维持在94%和96%之间(图表现1 (d)),从而证明一个表型稳定的ADSCs刺激。

3.3。ADSCs g - csf对CD44的表达的影响

与CD90、流式细胞仪分析显示,CD44在ADSC显著减少rhG-CSF刺激整个治疗期间,和早在8小时。CD44经验减少从45% ~ 85%(基线)~ rhG-CSF ( ),而控制细胞有轻微,但不会显著减少~ 75%(图1 (e))。

3.4。g - csf对ADSC基因表达谱的影响在体外和普通生物处理

本研究的主要目标是识别常见的调制通路在生物仿制和创新者ADSC的g - csf。基因表达芯片分析进行孤立的细胞样本来自同一个人( ),经过6个小时的治疗与生物仿制或创新者g - csf和相应的未经处理的样品作为控制。首先,我们进行一个评估相关的基因表达谱生物仿制和创新者g - csf治疗,找出最具代表性的差异表达为每个药物记录。第二,我们比较了生物仿制和创新者g - csf基因表达特征,找出这两种药物的常用调制记录。第三,功能富集分析检测G-CSF-modulated ADSC的途径。

统计分析显示458一般差异表达记录在生物仿制和创新者g - csf ( ; )。458年的记录中,152 upmodulated和306在g - csf downmodulated记录治疗(数字2(一个)和2 (b))。最常见的过表达在g - csf的治疗记录CDKN1C,CYP1B1,SLC40A1,HTR2B,DEPTOR,最常见的downexpressedNEFM,PODXL,KRT34,IL33,KRTAP2-3。功能富集分析一般管制记录显示生物处理与先天免疫反应有关,分化,PI3K和MAPK信号通路(值< 0.001)以及细胞迁移和细胞粘附(值< 0.001)(图2 (c)和补充表1和2)。

相关的常见的调制生物处理rhG-CSF ADSCs治疗可以分为两组:(i)上游事件g - csf的治疗包括MAPK信号之间的串扰,JAK-STAT和Wnt信号和河马通路相关的增殖和细胞分化和(2)下游效应包括调节肌动蛋白细胞骨架和细胞动员(图3)。

我们选择的基因转录因子ADSC细胞周期调控中发挥关键作用:HDAC2和CCND1 ( )和JAK-STAT通路CCND1 STAT1 ( )。这些转录因子被发现显著调节rhG-CSF-treated细胞。这一发现可能是因为ADSCs直接转录激活药物。

4所示。讨论

结果在这项研究中,首先描述体外刺激的影响工作6小时的g - csf ADSC转录组,证明两个g - csf(创新和生物仿制)调节ADSC细胞中基因表达的签名相同。一个有趣的事实是,生物仿制药的开发和制造越来越多,有一个极大的兴趣在不断发展的分析方法,可用于高效、有效地描述生物仿制药品。转录组分析包括基因表达的研究通过信使rna在细胞的水平暴露治疗与控制测试,它提供了洞察的生物通路在细胞内的或不活动。因此,分析基因表达可能是一个工具来评估生物仿制药物的生物等效性。

生物信息学和数据挖掘分析表明G-SCF诱发upmodulation和downmodulation在几个信号通路相关基因。功能分析表明,充实相关的信号通路与细胞的新陈代谢,激活通常(先天免疫),感应PI3K-Akt信号通路的激活NFkB和地图路径(先天免疫),与过程相关的基因的差别,对这些细胞迁移,ECM重塑和造血血统。这些数据很重要,因为它们有可能加深这种药物的关系和影响ADSC细胞当病人接受治疗的协议与g - csf的刺激。

我们的研究结果的讨论将集中在g - csf后ADSCs刺激可能迁移的可能性,作为他们的造血干细胞(公司)。这是由于监管和多向性的信号通路之间的交互和特定细胞转录组的监管机构确定。

许多免疫细胞CD44分子表达和祖细胞(即。造血干细胞/祖cells-HSPCs)。参与多个生物过程表现出双重角色在细胞增殖、粘附和信号分子(26]。CD44有记录活动诱导免疫细胞和祖细胞的动员和迁移和骨髓(27和炎症网站和淋巴结28,29日),维护期间循环炎症(30.]。而CD44表达在ADSCs记录(31日),只来源于MSC的骨头已经证明是引起炎症和g - csf (32]。

我们显示转录组和流仪结果后刺激CD44 G-SCF显著减少,生物有趣的结果给予其透明质酸(HA)与多种配体包括互动,一个高度表达间充质细胞的分子不同的起源33]。CD44活动建立在公司规定(34]。CD44 /公顷绑定通过细胞因子/趋化因子促进细胞粘附,静止,耐缺氧在公司35]。在公司与小鼠的研究表明,使用anti-CD44抗体与变更相关的“自导”BM和脾36]。相比之下,研究CD44 KO小鼠(淘汰赛)在这个过程中没有缺陷37];然而,减少被发现在BM骨髓祖细胞的输出循环(27]。在人类中,据报道,g - csf管理局似乎导致更快的动员CD34 +公司(38,39]。此外,在这两个差别这动员与对这些CD44和CD31天连续静脉管理3到5,以外周血CD34 + (40]。

的基础上建立了机制涉及CD44的支持减少公司的动员,我们假设它可以带来类似的迁移作用与g - csf ADSCs刺激后。事实上,转录组数据支持这一假说。我们的结果显示一个相伴的表达式HAS1和HAS2、负责基因合成透明质酸(HA)的内表面质膜(41]。因此,减少CD44可能的协同效应,HAS1和HAS2可能导致减少的生产和/或活动哈,负面影响其活动作为一个ECM配体锚固ADSCs。

5。结论

在结论中,g - csf影响转录组ADSCs调制各种途径包括的与透明质酸的新陈代谢,赋予细胞动员的一个概要文件(图4)。总的来说,我们所知,这是第一次ADSC迁徙能力与g - csf刺激和专门通过CD44的减少。这可能会改变ADSC治疗能力,因此未来临床协议的设计,例如,通过刺激前用g - csf /许可管理。

数据可用性

原始数据集用于支持这项研究的结果已经存入基因表达综合与标识符GSE139352 (GEO)存储库。

附加分

突出了。创新者和为g - csf诱导ADSCs同类转录组的反应。g - csf对细胞迁移反应主要是通过改变透明质酸(HA)代谢通路。g - csf会使CD44和HAS1 / HAS2基因。g - csf减少CD44表达在ADSCs文化随着时间的推移。

的利益冲突

Luz m . Avila-Portillo拥有地位的科学主任干细胞药物Regenerativa / CryoHoldco在波哥大,哥伦比亚。迭戈科雷亚宣称他是一个支付顾问Lipogems美国LLC,他参与的科学顾问委员会RegenMed, LLC。

确认

作者感谢Veronica Fernandez博士回顾本文和Taisha Almenares,戴安娜罗哈斯,马里亚纳Grajales, Jenniffer阿维拉贡献的手稿。Luz m . Avila-Portillo想感谢医院Militar中央(波哥大,哥伦比亚),而迭戈科雷亚表示他感谢现金家族基金会和DRI基金会的持续支持。

补充材料

两个表都出现显著富集的分子途径和调节(补充表1)和表达下调(补充表2)与g - csf基因在ADSCs体外刺激。(补充材料)

引用

1. w x y . Wang Chen曹,y,“可塑性的间充质干细胞免疫调节:病理和治疗的影响,“自然免疫学,15卷,不。11日,第1016 - 1009页,2014年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. d . g . Phinney和j·阿斯“制造业间充质基质细胞的临床应用:良好生产规范的调查在美国学术中心,“Cytotherapy,21卷,不。7,782 - 792年,2019页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. 人工智能卡普兰和d·科雷亚MSC:受伤药店,“细胞干细胞,9卷,不。1,11 - 15号,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. j . a . Ankrum j . f . Ong和j·m·卡普,“间充质干细胞:免疫逃避,不免疫的特权,”自然生物技术,32卷,不。3、252 - 260年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. p·a·祖克m·朱h .美津浓et al .,“Multilineage从人类脂肪组织细胞:细胞疗法,”组织工程,7卷,不。2、211 - 228年,2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. p·a·祖克m·朱p Ashjian et al .,“人类脂肪组织是一个多功能干细胞的来源,”细胞的分子生物学,13卷,不。12日,第4295 - 4279页,2002年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. r·s·沃特曼s . l . Tomchuck汉高皮膜,s . l . A . m .贝当古,“间充质干细胞(MSC)的新范式:极化炎性MSC1或免疫抑制MSC2表型,”《公共科学图书馆•综合》,5卷,不。4、2010。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. m·e·贝尔纳多和w·e·Fibbe间充质基质细胞:传感器和转换器的炎症,”细胞干细胞,13卷,不。4、392 - 402年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. 美国Kourembanas g·r·威利斯,s . a . Mitsialis”exosome-based疗法:隔离、异质性和定制效力,”心血管医学前沿,4卷,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. k . l . Cheng,吴,m .崔和t .徐”专注于间充质干细胞液:机遇和挑战在颗粒治疗,”干细胞国际卷,2017篇文章ID 6305295, 10页,2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. l . Hareng t·哈,“诱导和调节内源性粒细胞集落刺激因子的形成,“生物化学,卷383,不。10日,1501 - 1517年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. m .佼佼者g . Manz t宫本茂,k .明石和i . l . Weissman“人类潜在的隔离单独使用常见的髓系祖细胞,”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷99,不。18日,第11877 - 11872页,2002年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. p . f . Bussolino j . m . Wang Defilippi et al .,“粒细胞,granulocyte-macrophage-colony刺激因素诱发人类内皮细胞迁移和增殖,”自然,卷337,不。6206年,第473 - 471页,1989年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. a . Larsen t·戴维斯b·m·柯蒂斯et al .,“表达克隆人类粒细胞集落刺激因子受体:结构性马赛克hematopoietin受体,免疫球蛋白,纤连蛋白域,“《实验医学杂志》上,卷172,不。6,1559 - 1570年,1990页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. m .村上y Hayashi, k . Iohara y些,y Hirose,和m .中岛美嘉”营养效果和再生潜力的动员骨髓间充质干细胞和脂肪组织替代细胞来源纸浆/牙质再生,”细胞移植,24卷,不。9日,第1765 - 1753页,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. a . Yoshikawa h .村上,经营着,“不同的信号转导的tyrosine-containing域粒细胞集落刺激因子受体,”在EMBO杂志,14卷,不。21日,第5296 - 5288页,1995年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. k . Welte“g - csf:白细胞生成素,lenograstim和仿生物药品,”生物治疗专家意见,14卷,不。7,983 - 993年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. 大肠Zanet, m . Michieli Tirelli,“艾滋病毒阳性患者的自体干细胞移植影响复发/部分回应淋巴瘤:这样吧,”专家审查的血液学,9卷,不。7,617 - 619年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. b·佩纳m .笑声美国杰特et al .,“可注射水凝胶对心脏组织工程,“大分子生物科学,18卷,不。6、2018。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. i d·佩纳和c . v . Borlongan”翻译g - csf作为辅助疗法干细胞移植中风,”平移中风研究》第六卷,没有。6,421 - 429年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. p . j . h . Wu f·乔,x y太阳et al .,“评估和应用捐助者原发性中枢神经系统肿瘤,”临床移植,33卷,不。10日,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. a . Licollari k .谜语,s . r .泰勒,n .一同出席和g·t·博尔格”的安全性和biosimilarity ior®LeukoCIM Neupogen®相比;基于毒性、药效学和药代动力学研究Sprague-Dawley老鼠,”制药科学杂志》,卷106,不。6,1475 - 1481年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. r .灵,p . Armengaud a Amtmann, p . Herzyk”产品:一个简单,但强大,新方法检测不同调控基因微阵列实验复制,”2月的信,卷573,不。1 - 3、83 - 92年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. ai赛义德,诉Sharov, j .白色et al .,“TM4:免费,开源系统微阵列数据管理和分析,“生物学技术,34卷,不。2、374 - 378年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. m .萧述三、l . c . j . Dorssers和g . Jenster”维恩映射:集群基于数量不等的微阵列数据的共病的差异表达基因,”生物信息学,19卷,不。16,2065 - 2071年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. d . Kothapalli j .鲜花,t·徐e .纯和r·k·Assoian“微分激活ERK和Rac调和透明质酸和CD44的增殖和anti-proliferative效果,”《生物化学》杂志上,卷283,不。46岁,31823 - 31829年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. a .阿维格多·p . Goichberg s Shivtiel et al .,“CD44和透明质酸配合SDF-1贩卖的人类骨髓CD34 +干细胞/祖细胞,”血,卷103,不。8,2981 - 2989年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. b·j·g . Baaten C.-R。李,l·m·布拉德利”多方面的调节T细胞CD44。”生物交流与综合,3卷,不。6,508 - 512年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. m .全线a . b .他b邵et al .,“生理CD44的贡献作为配位体E-selectin炎症t细胞招聘期间,“美国病理学杂志》上,卷178,不。5,2437 - 2446年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. h ., a .如果起重机,r·道森和j .运营“关键但CD62L不同角色和CD44在引导血液单核细胞贩运体内炎症,”血,卷112,不。4、1166 - 1174年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. a . Mildmay-White和w·汗”,在脂肪中提取干细胞细胞表面标记:系统回顾,“目前干细胞研究和治疗,12卷,不。6,484 - 492年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. 瞿b . y .楚,朱f . et al .,“粒细胞集落刺激因子增强骨髓间充质干细胞移植的治疗效果与实验性急性胰腺炎大鼠,”Oncotarget,8卷,不。13日,21305 - 21314年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. l . y . w .布吉尼翁k . Peyrollier e·吉拉德·a·布莱曼,“Hyaluronan-CD44交互神经Wiskott-Aldrich综合症蛋白质(N-WASP)促进肌动蛋白聚合和ErbB2激活导致β-连环蛋白核易位,转录老年病和细胞在卵巢肿瘤细胞迁移,”《生物化学》杂志上,卷282,不。2、1265 - 1280年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. h .曹郑胜耀Heazlewood,威廉姆斯b . et al .,“CD44在胎儿和成人造血干细胞的规定,“Haematologica,卷101,不。1,26-37,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. s . Misra p .日诉c Hascall et al .,“Hyaluronan-CD44交互作为癌症治疗的潜在目标,“2月期刊,卷278,不。9日,第1443 - 1429页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
36. 者r . m . Lemoli l .卡塔尼亚、美国Talarico et al .,“动员骨骨髓来源造血和内皮干细胞原位肝移植和肝切除后,“干细胞,24卷,不。12日,第2825 - 2817页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
37. c . Protin f . Abravanel l . Alric et al .,”利巴韦林Ibrutinib-Exposed慢性E型肝炎病毒感染的患者,”开放论坛传染病》第六卷,没有。9日,第4923 - 4917页,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
38. n . j·菲尔波特r·l·普鲁j·c·w·马什·e·c·戈登·史密斯,应承担和f·m·吉布森“G-CSF-mobilized CD34 +外周血干细胞凋亡明显低于如果外周血CD34 +细胞:g - csf作为生存因素的作用,“英国血液学杂志》,卷97,不。1,第152 - 146页,2003。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
39. m . Machaczka h . Hagglund大肠避免et al .,“g - csf动员外周血干细胞采集健康献血者:同种异体移植的产量影响因素的分析,“临床Apheresis杂志,32卷,不。6,384 - 391年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
40. s . a . Im s . Lee e . s . Yoo et al .,“动员CD34(+)细胞动力学与调制CD44和CD31表达连续静脉执政期间的g - csf在正常捐助者,”干细胞,18卷,不。4、281 - 286年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
41. b . a . Baggenstoss e·n·哈里斯,j·l·沃什伯恩a·p·梅迪纳l .阮和p h·魏盖尔”透明质酸合成酶控制合成率和透明质酸产品尺寸是独立的功能不同的突变影响守恒的串联B-X7-B主题,“糖生物学,27卷,不。2、154 - 164年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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