回顾性研究中使用真皮Micrografts富含血小板纤维蛋白的重修的大规模和慢性全层烧伤

文摘

大量燃烧的覆盖率仍然代表了一个巨大的挑战,即使一些策略迄今为止可以处理这种情况。在这项研究中,我们描述了使用富含血小板纤维蛋白的结合和micrograft喷涂皮肤为了增加患者的移植细胞的产生。我们共有五个病人,其中两个是影响巨大的燃烧和三个慢性烧伤的伤口。简而言之,自体micrografts Rigenera获得的技术使用一种叫Rigeneracons我医疗设备。micrografts被结合脉冲重复频率和喷洒Spraypen伤口床上。之前应用脉冲重复频率/ micrograft喷涂皮肤,伤口床上布满了一个Integra®真皮模板,和伤口都穿着带有抗菌敷料层的应用直接在硅层。当硅胶层真皮模板开始分离的迹象,伤口被认为是准备嫁接。在所有情况下,我们观察到一个快速和完整的皮肤移植物平均7 - 10天后由脉冲重复频率/ micrograft喷涂皮肤治疗。特别是两个患者大量燃烧快速reepithelialization报道,和三个慢性烧伤患者的伤口,两人没有皮肤移植手术之前,已经在一个星期内完成伤口愈合。总之,结果显示在这项研究表明,脉冲重复频率的使用/ micrograft喷涂的皮肤是一种很有前途的方法管理的烧伤或慢性烧伤伤口。

1。介绍

大量燃烧(即的报道。,more than 40% TBSA) is a challenge. As about 80% of the skin can be used as possible donor sites, the area to be grafted in massive burns often exceeds the available donor skin. A number of strategies are available to deal with this situation. Reharvesting from previously used donor sites is possible but requires a regeneration period of 2-3 weeks. Wide meshing (a ratio of 1 : 4 or more) and the MEEK technique have been proposed to make better use of available skin but also require time for reepithelialization of the interstices between the grafted areas, during which time these areas need to be protected from dehydration and microbial colonization. Cultured epithelial grafts also take about 3 weeks to be cultured, and although recently an affordable technique has been developed [1),长期的结果依旧贫穷。常见的所有这些策略是完全覆盖烧伤的伤口需要时间,这期间病人烧伤伤口感染的危险,败血症和死亡。在我们的环境中,尸体的皮肤很少提供,艾滋病毒/艾滋病的高排除使用羊膜作为一个敷衍了事。喷涂皮肤细胞(暂停上皮细胞)是另一种对这些病人(2,3]。尽管最初细胞培养介质被喷洒在皮肤上之前,最近一项新技术被描述使用新鲜的表皮/真皮细胞悬浮,是喷在收获后立即(4,5]。喷涂电池的使用的一个问题是,当细胞悬浮在一个低粘度的解决方案如生理盐水,他们往往是分布不均在表面接枝,虽然可能是一个重大的贪污损失,当细胞浮起的伤口中,最终在毛巾上。有些喷涂细胞与纤维蛋白结合起来解决这些问题(6,7]。

我们最近开发了一种技术结合自体micrografts的富含血小板纤维蛋白和喷在伤口床上,为了提高移植细胞的产生。尽管可以使用喷涂作为唯一的皮肤覆盖,到目前为止我们已经使用该技术结合其他嫁接技术,如宽啮合使用比率3:1或6:1或温柔的人技术,按照燃烧区域的扩展需要覆盖和可用的皮肤。解决方案是首先喷在伤口上的应用移植之前,紧随其后的是第二层的解决方案。喷雾也应用于施主能级,这是进一步以通常的方式进行管理。光压缩绷带被用来保护移植领域。综述了所有移植领域在评估移植术后4 - 5天。

自体micrografts包含可行的祖细胞来源于真皮层是通过使用Rigeneracons Rigenera技术设备(人类的脑电波,意大利),生物组织粉碎机设计组织切成小micrografts随后注入或喷洒到所需的区域。这项技术最初用于治疗骨骼缺陷矫正手术(8,9),但迹象随后被扩展到整形手术,尤其是管理脱发和慢性小伤口10- - - - - -12]。

这两种方法的结合,脉冲重复频率,micrografts喷在伤口床,有其他潜在的优势,与富含血小板纤维蛋白(大量的生长因子,营养发展中上皮细胞),让我们探索其使用另一组患者在燃烧单元构成一个问题,特别是在资源有限的情况下。慢性烧伤伤口是可怜的烧伤护理的结果,即深度烧伤不切除,但焦痂是单独的在病房。这个过程可能要花费3至8周,最后的伤口粘在伤口愈合的炎症阶段,有非常高的蛋白酶,如基质金属蛋白酶,被微生物经常大量殖民窝藏在生物膜13]。这样的伤口的特点是上皮形成逮捕和overgranulation,有时一群深红色可以观察到伤口发炎组织/皮肤界面。这样的伤口移植失败率很高,在最坏的情况,伤口恶化捐助网站的观察,这可能会变成全层伤口。这些伤口是贫穷的标志烧伤护理,在资源缺乏的环境中往往是后期相关推荐或资源不足及时带病人去剧院的皮肤覆盖的过程。这些伤口的治疗是很困难的,需要长时间的伤口床准备嫁接可以尝试。

在本文中,我们描述了联合使用自体micrografts富含血小板纤维蛋白(脉冲)来治疗连续五个病人受到烧伤的影响。

2。患者和方法

2.1。道德

伦理批准使用创伤/燃烧的数据库被授予UKZN-BREC伦理委员会(类是207/09)批准。从医院获得伦理批准micrograft治疗人类医学研究伦理委员会,和所有患者知情同意前参与这个过程。

2.2。包含/排除标准

入选标准如下:年龄在18岁至55岁之间。,TBSA between 6 and 55% deep partial to full thickness with or without inhalational injury requiring split skin graft, and patients with open wounds not older than 2 months. The exclusion criteria were the following: patient younger than 17 and older than 55, wounds older than 2 months, TBSA less than 5% and more than 55%, and ventilated patient with septicaemia. A total of 12 patients were screened, and five patients were selected for the study.

2.3。病人

我们倒退分析患者的记录编码脉冲/ micrograft喷涂皮肤期间2017年12月至2018年2月。他们的报道在表的临床特征1。都是男人22岁和46年。损伤机制是一个火焰燃烧在4和盐酸酸烧伤病人在第五。%回溯燃烧范围从12%到47%,平均为22.5%。

大多数严重烧伤患者的伤口位于躯干、腹部、颈部,脸,和大多数人有过接触的潜在postescharotomy骨结构。创面一个可行的实现时,大面积伤口,包括那些涉及躯干、腹部、颈部和那些涉及一个暴露的骨头(胫骨),然后覆盖着一个Integra®真皮模板(巴洛克、南非)。伤口是穿着一层抗菌敷料(Acticoat®纳米晶体银酱,史密斯和侄子)应用直接在硅层,后跟一个nonocclusive穿在剩下的四个病人和负压伤口治疗病人连续10天。当硅胶层真皮模板开始分离的迹象,伤口被认为是准备嫁接和剧院。所有程序上执行病人之前PRF / micrograft喷雾应用程序显示在表1。

2.4。方法

在这项研究中使用的方法包括以下两种技术的结合:富含血小板纤维蛋白(脉冲)和micrograft喷涂的皮肤。总结在图的步骤1和详细的下面。

2.5。富含血小板纤维蛋白(脉冲)

Vivostat®(Vivostat A / S, Lillerød、丹麦)技术(14]生产5毫升的富含血小板纤维蛋白从120毫升的病人的血液,柠檬酸添加保持液态,通过超速离心法25分钟。血液需要手术开始前,作为手术产生的创伤将血小板网站,减少血液中血小板浓度(15]。激活纤维蛋白凝固不需要富含血小板血浆凝血酶的添加,但仅仅是通过添加一个碱性缓冲(16]。在120毫升的病人的血液不能提供,我们使用库存生产PRF全血。剩余的血液可以输血(回)到病人。离心液,浓缩血小板组成的聚合纤维蛋白,然后转移到应用设备(Spraypen),脉冲重复频率的喷雾细水雾在伤口上。最初设计用于外科手术的止血剂,以减少手术后的泄漏,已经成功用于肾17和胸外科18]。它被引入燃烧手术帮助止血生产其他福利,如更好的移植物固定和更高的贪污。

2.6。Micrograft喷涂皮肤

Micrografts获得使用Rigeneracons医疗设备如前所述[12]。短暂,供区是由轻轻去除表皮层顶部使用Versajet®hydrodissector直到到达出血真皮组织。随后,一层薄薄的皮肤使用戴维斯®生皮节收获,获得样本的0.2毫米(0.008英寸)和4×2厘米²大小。其目的是获得epidermal-dermal结的细胞(19]。这个示例的真皮然后用手术刀切刀片成小块(1到2毫米宽)和插入Rigeneracons装置机械解集。这提供了5毫升的真皮micrograft暂停,然后转移到一个注射器中提供Vivostat®工具。然后该注射器放在Vivostat®交付单位与脉冲重复频率的包含5毫升注射器的解决方案。当添加到Vivostat®交付系统,立即两溶液混合,同时喷在伤口上使用Spraypen床。

3所示。结果

在第一个病人,嫁接区域暴露在术后第五天观察一个完美的嫁接到neodermis依从性和可见的新皮肤形成网状的地区一个完整的7天reepithelialization植皮后(数字2 (c)- - - - - -2 (e))。我们在剩下的伤口执行同样的步骤6和8周后。两者之间的延迟手术并发症引起的气管造口术在常规换药困难插管的剧院,这是进一步复杂化的肺炎双边胸腔积液。病人出院后的总长度保持15周。

在第二个病人受到化学攻击燃烧,我们观察到一个好的附着力的贪污与新的皮肤伤口床连接形成可见的网状贪污。过程是重复21天之后在胸部和腹壁相似的结果。小额外的伤口在下肢和脚嫁接入学一个月后。病人出院后与一个完全愈合的伤口总住院14周。

在第三个病人,在第一次换药术后4天,嫁接地区被发现是完全愈合,干燥和只穿着水奶油(图3)。捐赠地区(喷洒相同的组合)完全愈合时第一次暴露在6天相机会后病人于术后第8天日出院后13天的单位。

第四病人,当暴露在第五天移植的皮肤,皮肤移植成活率100%。捐赠地区被发现是完全reepithelialized 6天收获。病人在入院出院20天后完全愈合的伤口。

在第五病人,嫁接和捐赠地区暴露在术后7天。的捐赠地区被发现完全愈合,贪污接管嫁接的地区。病人出院基地医院5周后进入我们的单位。临床结果的摘要报告在表2。

4所示。讨论

富含血小板血浆(PRP)的使用和暂停了上皮细胞的策略已经成为医疗设备的烧伤外科医生(20.- - - - - -22]。PRP等离子体与血小板浓度高于基线,通过离心分离患者的血液,后上层清液被抽走(15]。血小板通常集中3 - 5次这个方法,虽然没有标准化的过程(20.]。立即在应用之前,解决方案是由添加牛凝血酶激活。当注入组织或喷在伤口表面,活化的PRP立即形成纤维蛋白凝块(类似于纤维蛋白胶)导致止血和移植物的固定伤口床。哈金et al。5),格兰特et al。23],Mittermayr et al。6演示了在猪使用纤维蛋白胶的研究,尽管其他人没能证明有利于移植成活率的影响(7]。后者研究,然而,批评,因为只有小的伤口被使用,而且使用的调料并不代表什么是通常用于大规模燃烧(16]。尽管最初作为替代角膜和神经纤维蛋白胶的维修,当PRP成为商用在1990年代,适应症迅速扩大到包括对组织愈合的有利影响,再生和细胞增殖。然而,PRP有几个缺点,至少是需要添加牛凝血酶的合成风险等危及生命的凝血障碍和过敏反应22]。这导致血小板的第二代产品的开发,其中富含血小板纤维蛋白的主要代表。脉冲重复频率已经被证明是有效的PRP,同时避免副作用。

血小板源的优势产品,如脉冲重复频率对纤维蛋白封闭剂,的确,thrombocytes的存在。长期以来人们一直认为血小板有许多更多的功能比他们的角色在凝固24,25]。血小板在病原体监测和控制中发挥核心作用,以及在伤口愈合。激活后,血小板释放超过300种不同的蛋白质,包括凝血因子、趋化因子、炎性因子、和30多个不同的生长因子,蛋白酶和蛋白酶抑制剂。此外,血小板能够调节炎症和愈合过程通过细胞间直接接触。它们包含microbiocidal蛋白质和已被证明吞噬病毒和细菌。许多生长因子产生的血小板鼓励乘法以及血管生成种子细胞提供营养。血小板释放的细胞粘附分子,如纤连蛋白和vitronectin,增进上皮细胞和血管细胞的迁移26]。它也表明,表皮的纤维蛋白链可以作为一个模板迁移(7]。Agren et al。14使用Vivostat]表明,脉冲重复频率,获得技术,包含3.9倍的血小板基线血液,水平的提高转化生长因子-β1、血小板源生长factor-AB基本成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子。MMP-9水平相对较低139倍。PRP的有利影响伤口愈合在体外由西安et al。27由法律)和在小鼠研究中et al。28]。似乎PRP浓度的影响,较高的浓度促进炎症和胶原沉积和低浓度提高伤口改造(27]。一个荟萃分析得出结论,PRP的应用加速伤口的愈合,特别是慢性伤口的11]。然而,a-theoretical-side效应可能导致激烈的炎症反应引起的血小板水平增加,即。,增加长期的伤疤29日]。文特尔自己等人证明,PRP在全层伤口没有好处。他们解释这个没有上皮细胞(“基质”)全层燃烧(26]。

此外,等离子体包含上皮细胞的营养营养血管前期间建立了自己。

表皮细胞悬浊液的使用(“喷涂皮肤”)在烧伤病人被称为“惯例没有同意协议”标志的使用,使用技术,调料,第一个伤口的时间复习,和结果的措施(21]。原则上,使用两种技术。在培养的表皮细胞悬浊液酶分离的细胞,它们带进悬架和孵化至少21天,允许乘法。然后喷在伤口上悬挂床上或注入伤口边缘。角化细胞悬浮的解决方案不同生理盐水,乳酸溶液,透明质酸矩阵,纤维蛋白。缺点的培养表皮细胞悬浮液由文化引起的长时间拖延,高感染,高成本和培养细胞悬浊液只包含角化细胞(30.]。长期脆弱的新皮肤也证明了一个问题31日]。无教养的表皮细胞悬浊液包含所有类型的皮肤细胞,包括角质细胞、成纤维细胞,黑色素细胞、朗格汉斯细胞,因此应该提供更好的长期成果(4]。木等。19]分析了细胞群与刚获得®,发现细胞总数的75.5%人口是可行的,包括 角化细胞, 成纤维细胞, 黑色素细胞。可能发生分离的皮肤细胞酶(®刚)或机械(Rigenera®)。没有比较研究可用来指示哪些方法优越。理论的Rigenera®方法可能是角质细胞和纤维母细胞保持联系,作为细胞间接触角化细胞增殖所需的成纤维细胞被认为是(27]。

赵et al。4]报道经验的系统回顾与喷涂在慢性伤口皮肤,包括5研究和61伤口。44(72%)经历过(附近)完全愈合的观察期。43例患者管理无教养的悬架,一个好的结果在30 (70%)。医疗技术咨询委员会的英国国家临床优化研究所(NICE) (3)发表评论的使用刚®管理急性烧伤。审查包括共有817名患者在3从国会发表的研究以及数目不详抽象(重叠的研究不能排除在外)。的817名患者中,384年出版获得上皮细胞悬液。两项研究发现,时间愈合或患者总住院天数短上皮细胞悬液(32),而在其余的研究没有发现统计上的显著差异。Gravante et al。2]还发现术后疼痛和发展没有明显的统计学差异的挛缩月随访患者相比传统的皮肤移植。

我们报告5例中,我们使用脉冲重复频率和micrograft中止治疗烧伤的伤口。前两个患者大,深度烧伤,覆盖40%以上的身体表面,在这两种情况下“第四度”(扩展到皮下组织,在这两种情况下渗透通过肋间肌的前筋膜)。病人都承认我们的外伤重症监护病房通风的吸入损伤有关。都经历了早期烧伤伤口全切除,紧随其后的是应用程序的一个真皮替代两个主要原因。在早期阶段,真皮矩阵结合覆盖聚氨酯薄膜提供了low-colonized,环境潮湿的伤口,让伤口愈合的伤口进入扩散阶段和灶neovasculature进真皮的胶原基质模板。最后这个阶段,这部电影将升空,标志着伤口现在准备接收一个贪污。在这一点上,广泛的病人送回到剧院间隔植皮(广泛的网状贪污或温柔的人通过使用技术),辅以PRF和喷涂micrografts。使用喷涂的上皮细胞在Integra®真皮模板在猪模型描述了木等。33),尽管这些作者使用一个单程的过程,人类没有报告。

在资源有限的环境中,相当数量的患者称为迟到,有时经过一段时期的许多个月周边医院。时这种情况可能导致烧伤中心床位不足来管理所有排水区烧伤患者,在手术区域医院缺乏资源和人力管理烧伤。(即燃烧,被称为晚。,more than a month post injury) have invariably full thickness, either because the depth of the wound was underestimated on initial assessment or the wound has progressed because of the heavy contamination with bacteria that inevitably occurs in chronic burn wounds. Such burns are characterized by biofilms and high concentrations of natural proteinases, such as matrix metalloproteinases (MMPs), which lock the healing process in the inflammatory stage. Split skin grafts will often fail on such wounds, and this may be associated with progression of the donor sites to full-thickness wounds, eventually leaving a larger area to cover than before the attempted skin graft. Two of the three patients in our series had failed skin grafts before the index procedure. We currently treat these wounds with Prontosan® in combination with either nanocrystalline silver or honey-based dressings in an attempt to break down biofilms and decrease the bioburden and with topical steroids to reduce MMPs and other inflammatory mediators. This usually results in a graftable wound bed in 1-2 weeks, when the patient is taken to theatre. The three patients described underwent this regimen of wound bed preparation and were taken to theatre when the surgeon deemed the wounds ready for grafting. They were then covered with widely meshed graft and PRF/spray-on micrografts, each one with excellent results.

尽管我们最初认为是第一个使用这种组合对于人类来说,我们已经遇到来自伯明翰的一份报告中,英国类似的协议,但使用上皮细胞技术准备,刚被用来覆盖面积15%的全层烧回来(16]。病人曾经历了五个移植,与移植物失功显著相关。第六,富含血小板纤维蛋白和暂停上皮细胞(加工使用刚®技术)应用使用Vivostat®系统。7天,有优秀的贪污。

作为一个小回顾评估,本研究也有一些局限性。在两个巨大的烧伤,患者虽然贪污是优秀的和持续的,在病人住院时间仍比预期更长的时间从一天/ %回溯燔规则,应用于我们的病人平均在以前的流行病学研究(34]。短期随访期间不允许长期的评估结果,这可能是由血小板管理不利影响伤口如上所述。病人的技术被用于管理与reepithelialization逮捕受到慢性伤口多模式治疗,其中很少的组件已经被科学调查。然而,我们认为,脉冲重复频率的结果/ micrograft喷涂皮肤足够承诺保证建立一个随机试验和设置。

5。结论

使用micrograft悬挂在富含血小板纤维蛋白。两个巨大的烧伤患者受到广泛的啮合经历快速reepithelialization,然而是不翻译更短的住院。其中三个慢性烧伤患者的伤口,两个没有皮肤移植手术之前,已经在一个星期内完成伤口愈合。进一步调查的形式正确执行随机试验是十分必要的。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的结果包括在本文中。

信息披露

这个手稿的结果提出了作为一个国际会议在伤口护理的海报,组织修复和再生医学。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

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