一项多中心研究:利用Micrografts全层创伤后皮肤缺损的重建Limbs-A整个创新概念的再生手术

文摘

皮肤移植的手术技术常用的整形外科手术的四肢,为了修复皮肤损失,以及修复的供区皮瓣移植后和覆盖皮肤的替代品。不可避免的副作用,这种技术包括无美感的伤疤。为了达到创伤后的愈合溃疡的组织再生,避免过度的疤痕,一个新的创新技术的基础上,应用自体micrografts Rigenera获得的技术,据报道。这种技术被高度可行的能够诱导组织修复皮肤micrografts 80微米大小的通过机械解集的方法。的特定的细胞群micrografts包括祖细胞,这与细胞外基质(ECM)的片段和生长因子得到了病人的自身组织发起再生提高伤口愈合过程的生物过程。我们使用这种技术在70例外伤性伤口上下肢体的特点是广泛的皮肤和软组织物质的损失。在所有情况下,我们使用皮肤micrografts应用Rigenera协议,实现在伤口愈合69例完整的一段35 - 84天。对于每个病人,重建结果评估每周评估这项技术的功效和任何引起并发症。视觉模拟量表(血管)管理评估疼痛的数量感到micrografts”应用程序中,而我们评估后疤痕根据温哥华规模和伤口创面预后根据分数。我们因此能够证明Rigenera过程非常有效地刺激皮肤再生,同时减少结果疤痕。

1。介绍

复杂损伤的四肢,引起皮肤和软组织的沉重和损失,经常发生由于常见的损伤,国内外在起作用。手术治疗的目的是形态和功能重建,使受伤肢体的形状的恢复,同时,重建正常防护怀揣和敏感肌肤的特定属性给四肢主要功能:步态能力和把握能力。不幸的是,一个专门组织的再生(即。、皮肤)需要恢复整个组织的层次结构。通常,当伤害造成很大损失的皮肤和软组织,暴露骨折,为了实现一个功能重建,使用自由皮瓣是可取的1- - - - - -3),而一个有用的选项是用真皮覆盖伤口模板(4,5]。然而,在执行所有这些技术,从大腿和臀部皮肤移植采取直接修复损伤(或皮瓣的施主能级)总是必要的,以及使用真皮替代移植后,往往造成难看的疤痕在皮肤移植的供体和受体的网站。

为了避免无美感的伤疤,认为这种技术不可避免的副作用,并允许在同一时间组织再生的受伤的网站,一个新的创新技术应用的基础上获得的自体micrografts Rigenera®技术,能够诱导皮肤组织修复高度可行的micrografts通过机械解集方法(6- - - - - -8),最近被报道。一小块皮肤/结缔组织可以改善组织修复复杂的伤口(9- - - - - -11)或肥厚性疤痕12]。起初,micrograft技术应用于颌骨的手术micrografts来源于人类牙髓或骨膜被用于牙周再生,萎缩性上颌骨的骨再生,牙槽保护(13- - - - - -16]。在过去的几年里,micrograft技术在整形外科的应用micrografts来源于软骨被用于治疗骨软骨病变的鼻子17脂肪组织)和浓缩从人类lipoaspirates [18]。

基于这些考虑,这项观察性研究的目的是评估的有效性micrografts治疗创伤后皮肤缺损。出于这个原因,我们使用这种方法治疗四肢创伤后的伤口,与优秀的结果的临床结果和示范的再生能力,该方法通过组织特征(7]。

2。患者和方法

2.1。病人

从2015年到2017年2月在四个意大利整形单元,我们治疗的70名患者,38岁女性和32的男性平均年龄53岁(范围34 - 74年),受到慢性创伤后腿部溃疡应用Rigenera协议。所有患者签署书面同意参与根据《赫尔辛基宣言》。伦理委员会批准了这项研究(协议n.2017 - 0274或)。临床试验研究中发现的https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT04030832。24例患有慢性创伤后骨暴露通过溃疡或手术伤口裂开平均骨暴露面2厘米²,12个病人患有肌腱暴露通过慢性创伤后溃疡或手术伤口裂开。在三种情况下,我们结合使用Rigenera过程与Integra®真皮再生模板。其中的一个病人,Rigenera协议是用于治疗的施主能级自由皮瓣应用Rigenera®biocomplex在neoderma由Integra®。创伤和Rigenera治疗之间的平均时间是7周(范围最近几周)(表1)。所有患者知情同意在研究方案提供符合伦理指南1975年赫尔辛基宣言。主要诊断和早期手术程序表列出导致伤口裂开1。我们也报道了相关疾病影响病人。平均1年随访后,伤口闭合的评估完成。

2.2。外科手术

所有病例在这项研究中治疗手术后通过Rigenera协议或酶溃疡的清创术和伤口感染后决议调查文化考试。的Rigenera®技术基于Rigenera机器的使用和Rigeneracons(人类脑电波,意大利都灵),生物粉碎机能够分解人类结缔组织的小块,选择特定的细胞群包括祖细胞,细胞大小的基础上。这些祖细胞与细胞外基质(ECM)的片段和衍生生长因子开始组织,创建自体micrografts准备使用,它可以应用于受伤部位单独或结合不同的生物支架,如胶原蛋白。这个协议包含不同的步骤:(1)皮肤组织样本的集合 从一个隐藏站点对收件人供体(膨胀比1:10)(图1(一))(每个皮肤样本分为片段约2毫米²每一个);(2)碎片是定位在两个分开的一次性胶囊,低于螺旋叶片的旋转系统,放在过滤器放置在底部的胶囊(解集的组织两分钟Rigeneracons通过添加3毫升无菌生理盐水)(图1 (b));(3)收集2.5毫升的自体micrografts崩溃后获得无菌溶液(图1 (c)从每个胶囊);(4)注入2.5毫升micrograft解决方案在一个马胶原蛋白海绵来创建一个再生biocomplex(图1 (d));(5)注入2.5毫升micrograft解决方案的网站伤perilesional biocomplex入渗的特点和位置的溃疡照顾的种子表面海绵与伤口接触层(数据1 (e)和1 (f));和(6)辅助药物通过石蜡计领带(图1 (g))。

在我们的病人,我们收集的小块组织的腹股沟局部麻醉后褶皱。应用micrografts后,所有患者接受6天口服青霉素治疗。我们执行第一个敷料后4天没有石蜡规移除和第二个酱与石蜡计3天之后变化和接受病人每周控制评估伤口愈合的进展。处理网站完全愈合后,水分油轻轻应用,一个月后,病人开始组织按摩和后续访问被推迟了一个月的时间。

2.3。临床、疼痛,伤疤评估

为每一个病人,表面的伤口在4至7天,每周完成治疗已经测量和每个伤口评估收缩。表面被跟踪后伤口边缘在电脑与数码照片。伤口收缩是衡量计算机平面几何,表达的百分比减少最初的伤口面积。在每个后续访问,我们记录的副作用和并发症,视觉模拟量表(血管)进行评估后的痛苦micrografts”应用程序。脉管的痛苦实际上是由被申请人self-completed问是谁将一条直线垂直于脉管线代表其疼痛强度的点。由被申请人表示数量的记录,和分数范围从0到10,0表示疼痛缺席和10剧烈的疼痛19]。功能和审美的结果评估使用VSS(温哥华规模20.](身高、柔软、血管化和疤痕的色素)和伤口床上得分21)(愈合时间、焦痂,肉芽组织,渗出物,皮炎,纤维化和伤口床)两个月(T0)和reepithelialisation后12个月(T1)。

2.4。统计分析

应用Shapiro-Wilk测试显示数据没有正态分布;因此,所有统计分析显示进行了非参数方法。调查的有效性Rigenera®技术,总VSS和WBS得分之间的绝对差异T0和T1计算,以及相应的值及其95%置信区间中值(95% CI)。中间值然后比较使用Wilcoxon符号秩检验。此外,T0和T1之间的百分比变化计算出每一项的VSS和WBS规模,和每个项目的两个尺度差异T0和T1调查通过对弗里德曼的测试。

所有数据进行统计分析使用一个单向方差分析测试。统计学意义的门槛设置值< 0.05。重复性表示为标准偏差计算测量数据使用SPSS 16.0软件之间的区别(美国SPSS Inc .,芝加哥,IL)进行评估。

3所示。结果

70名患者承认我们的整形单位参加本研究。随访90%达到了1年。病人6号被研究开发史蒂文斯—约翰逊综合征后政府的第二个抗生素。平均年龄53岁(范围34 - 74年),26人(37%)和44岁的妇女(63%)。百分之一百的伤口位于下肢。病人和伤口描述如表所示1。软组织缺损的起源是开放骨折24例(34%)和全层皮肤伤口与肌腱暴露在12例(17%)。此外,Rigenera协议结合使用Integra®真皮再生3例(4%)。损伤机制包括创伤在大多数情况下(45%)和伤口裂开(26%)和代谢溃疡(26%),其余病例。创伤和Rigenera治疗之间的平均时间是7周(范围最近几周)。在所有其他的患者中,我们观察到,平均而言,一个完整的溃疡的愈合骨或肌腱micrografts覆盖在48天后”应用程序中,与一系列变量35 - 84天。在所有情况下,micrografts应用只有一次;没有发现副作用或并发症。数字7,8和14,micrografts相关Integra®。在7和8的情形下,它采用二级敷料; in these patients, the complete healing was achieved without a secondary surgical procedure of skin grafting. In case 14, the micrografts were put over the dermal substitute 30 days after its engraftments in order to achieve complete reepithelialisation without the secondary procedure of skin graft. In these three cases, wound healing was obtained after, respectively, 35, 42, and 35 days. At day 0, surfaces of every wound were about 14 cm²(范围7-28厘米²)。在第七天,意思是表面11.6厘米²(平均数标准误差在±2.3厘米²)。在第14天,意思是表面9.3厘米²(平均数标准误差在±1.6厘米²)。在21天,意思是表面4.5厘米²(平均数标准误差在±2.1厘米²)。在48天,意思是表面0厘米²(平均数标准误差在±1.3厘米²)(图2(一个))。此外,我们观察到完全关闭后收缩的伤口。伤口收缩明显不同于20%在48天(平均数标准误差为4%, )40%在60天(平均数标准误差为3.4%, )(图2 (b))。平均术前血管得分是6 (4 ~ 9);与此同时,意思是脉管的分数在第一个后续访问3(从2到5)(表2(a))。温哥华疤痕量表(VSS)被用来评估功能和审美特征的病变后两个月(T0)和12个月(T1)后续如表所示2(b)。无统计差异在性别、年龄、基础疾病,和缺陷的大小。VSS中值是2(从0到4)。T1的VSS分数显示显著减少后续控制访问( )。WBS平均值为15.4。WBS分数显示显著减少在T1后续控制访问( )(表2(c))。结果关于单项VSS和WBS总结在表2。分数显示显著减少在T1(12个月)随访控制访问( ):中位数温哥华总分下降了12单位(-85.7%)和血管中位数的分数下降了9单位(-90%),中位数WBS(数字增加了158%3(一个)- - - - - -3 (c))。VSS和脉管分数降低了12个月的随访后,最大的减少被观察到的高度,柔软和色素沉着。疤痕都是柔软的,正常的高度和一个正常的色素沉着。T0和T1的唯一区别是血管化和高度。WBS得分增加了12个月后随访,治疗最大的增加被观察到边缘,渗出物量,和深度/肉芽组织。我们使用这种技术对70例下肢慢性伤口的,特点是广泛的皮肤和软组织物质的损失。特别是,更快速和完整的reepithelialisation关于其他先进酱以前利用治疗四肢创伤的伤口已经被观察到,与优秀的结果(数据4- - - - - -7)。

4所示。讨论

皮肤移植是重建手术的手术技术常用的四肢,为了修复皮肤直接损失,以及修复的供区皮瓣移植后和覆盖皮肤的替代品。不可避免的副作用,这种技术包括无美感的伤疤。自体组织移植产生非常明显的伤疤,无法刺激组织再生,因为血液循环的中断导致了广泛的内细胞死亡。这个问题相关的流行疤痕皮肤再生的创伤伤口和更明显的管理受慢性病的病人谁是高度暴露的风险导致延迟愈合受伤的组织病理炎症状态和慢性伤口22]。研究人员正在试图找到方法能够减少伤口愈合后疤痕,同时刺激组织再生,通过组织工程方法。组织工程的目的是通过结合使用生物材料和组织再生生物介质如干细胞和生长因子,以提供新的工具,用于再生医学(23,24]。人体组织的修复和再生是特别困难的在骨骼重建大骨缺陷造成的创伤,感染,或骨骼异常,考虑到骨再生能力下降,随着年龄增长,大幅上涨,全球人口老龄化越来越需要确定创新方法(25]。可以使用许多方法在组织再生的正常过程受损或简单的不足,如嫁接包括自体、同种异体,异种移植,和生物材料的替代品26]。嫁接的安全程序,自体移植是比那些同源或异种移植,虽然它阻止免疫反应和感染,这种方法是有限的,由于额外的手术病人的施主能级和不适。此外,自体移植,细胞生存能力大大减少收集后从供体血管中断通过手术减少喂养的细胞。的Rigenera®技术代表了一个新方法对人类受伤的组织再生,使用这种技术时,病人的供体和受体校准和高度可行的micrografts包含祖细胞能诱导间充质干细胞标记阳性组织修复(7,11]。体外数据特征上有报道,micrografts显示一个间质表型,为典型的阳性标记如CD73 CD90、CD105, CD117和显示他们的能力在骨细胞分化,软骨细胞、脂肪细胞在合适的实验条件(13,31日]。此外,这些micrografts的临床疗效已经证明在术后和创伤后伤口的愈合9- - - - - -11,27和病理性疤痕12]。特别是,更快速和完整的reepithelialisation关于其他先进酱以前利用治疗四肢创伤的伤口已经被观察到,与优秀的结果的临床疗效和展示该方法的再生能力7,8]。小嫁接的概念被西塞罗帕克的构想,是基于证据表明多次植皮扩大能够治愈伤口的速度比original-sized移植(28]。因此,实现良好的嫁接性能的最佳方法是通过增加表面积的贪污导致更快的细胞迁移到伤口,减少贪污本身的细胞死亡。从那时起,micrograft概念应用于许多程序(29日,30.]。

Rigenera技术不同于其中任何一个,因为它可以生成一个悬挂的微米大小的移植(micrografts)应用的帮助下一个注射器。的平均大小Rigenera-obtained micrografts是80μ米,非常小于其他技术可以在市场或文学作品中描述。最后,在执行解集,这种技术只允许一组较小的细胞也表达间充质干细胞标记,称为干细胞的或祖细胞,这是占了一个强大的再生效果(13,31日]。我们已经使用了这种技术在70例下肢慢性伤口,以广泛的皮肤和软组织物质的损失。一些慢性病患者受到严重皮肤血管化较差。在所有情况下,我们使用皮肤micrografts应用Rigenera协议,实现在伤口愈合69例完整的一段35 - 84天。伤口愈合与临床和组织学特征是完成reepithelialisation维修发生的证据通过组织再生和低的疤痕在受伤部位(7,8]。micrografts的再生功效可能来自小颗粒的存在特点是大量自体移植表面,导致一个最佳的细胞生存能力和完整性,对于小细胞的营养需求。尤其是小块的机械解集人体结缔组织产生自体micrografts暂停80μ米大小,准备使用,可以应用于受伤部位单独或结合不同的生物支架,如胶原蛋白和透明质酸。的特定的细胞群micrografts包括祖细胞,这与细胞外基质(ECM)的片段和衍生生长因子开始组织启动生物过程的细胞增殖和分化提高伤口愈合过程。这个“micrograft理论”可以解释的重建结果治疗受伤的肢体运用自体micrografts获得的Rigenera®技术。

5。结论

所获得的自体micrografts Rigenera®技术是一个创新的协议,它引入了一个全新的概念在再生手术,允许修复严重创伤伤口的四肢reepithelialisation完成。令人印象深刻的临床结果结合组织特性的实验室测试表明,这种技术是能够刺激皮肤再生,可能它是目前唯一一个能够确保创伤性损伤的治疗通过真正的再生过程。此外,生产所需的最少的皮肤与Rigeneracons micrografts宽创伤伤口防止疤痕的修复通常由传统技术施主能级。

无疑,这种创新的技术不仅仅是一个新技术在再生手术。但是一个全新的概念

数据可用性

使用的数据来支持本研究的结果包括在本文中。

的利益冲突

作者都没有利益冲突。

确认

作者要感谢博士Marialuisa De Francesco统计专家,统计局大学的米兰,米兰,意大利,提供良好的技术支持。

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