脂肪间充质干细胞软骨组织工程的使用:需要一个快速隔离程序

文摘

间充质干细胞(msc)显示承诺对他们在软骨组织工程中使用。msc可以获得许多不同组织来源。其中,脂肪组织可以提供丰富的脂肪来源间充质干细胞(ADMSCs)。infrapatellar脂肪垫(奖学金)是一种很有前途的ADMSCs来源产生软骨血统。细胞隔离协议日期是耗时和遵循保守的方法,依靠长潜伏期的24 - 48小时。ADMSC隔离技术的不同类型用于软骨修复将审查和比较的角度发展快速一步隔离协议可以应用于外科手术的上下文中。

1。介绍

软骨组织工程已成为一个主要的研究兴趣在过去的几十年里,主要是由于本机人类软骨无法自我修复(1,2]。没有可靠的长期联合保护管理选择早发性关节炎继发于软骨缺陷,这可能导致关节置换(关节成形术)和相关的短期和长期风险和后遗症3,4]。纤维软骨形成的长期生存能力的主要障碍是目前临床使用方法和联合函数是有害的5,6]。

钻石的概念(74)体现了主要支撑组织工程策略,即细胞,支架,生长因子/细胞因子和环境刺激。

本文将特别关注ADMSC隔离技术和效率对驾驶软骨形成。

目前软骨组织工程隔离程序在体外和实验室。这些主要是复杂的两步过程也引发伦理问题对人体组织文化在实验室设置(8]。

将这些技术转化为临床需要一个快速的发展,无菌,一步法技术,可以适应一天手术时间。到目前为止,快速隔离骨骨髓来源msc (9,10和他们的治疗潜力研究11),但一个重要的障碍一直采用低数量的干细胞在实验室需要一段时间的细胞扩张。只有一个发表的研究评估快速隔离协议(< 30分钟)从腹部lipoaspirate ADMSCs12),但即使是这种技术依赖于塑料坚持至少24小时。

2。脂肪间充质干细胞

ADMSCs有能力分化为中胚层组织血统,也就是说,骨骼、软骨、肌肉、脂肪(6,13- - - - - -16]。他们被纳入许多不同scaffold-based系统和一个既定的角色在软骨组织工程17,18]。

最初,骨髓(BM)是最常用的msc的来源。像ADMSCs BM-derived msc在本质上是多功能的,可以生产组织的中胚层的血统(19]。可以收获自体组织,不构成伦理、肿瘤发生的,或由多能干细胞免疫原性风险。使用BM的缺点包括低组织体积和低细胞体积(13,20.,21]。BM-derived msc具有可比性(22),如果不差,在尊重chondrogenic潜在ADMSCs[相比22,23]。这些因素,除了微创组织收割技术,使脂肪组织一个更可取的来源。

3所示。组织来源和获取技术

ADMSCs可以获得来自不同来源和不同的技术。的两个主要来源是腹部脂肪和infrapatellar脂肪垫(奖学金)。技术和协议ADMSC收获和隔离不同根据不同实验室组。腹部脂肪可以通过腹壁整形术是从皮下组织或关节镜检查。

奖学金项目(图1(一))是一种新兴的msc来源软骨组织工程(24,25]。奖学金可以伺机收获(图1(一))在常规外科手术如膝关节置换术(数字1 (b)和1 (c))或关节镜(数字1 (d)和1 (e)),已知chondrogenic潜力高(26]。虽然有更少的脂肪体积的奖学金与腹部脂肪相比,chondrogenic可能已被证明在ADMSCs来自更高的奖学金项目(27,28]。靠近国际奖学金的膝关节可能占更高的潜力。

这些结果可能为未来铺平道路新颖先进的微创关节镜或纯脂肪垫的技术收获而不是投机取巧的收获,更好的是,可能建立一个单步使用干细胞技术手术修复技术。

4所示。细胞分离过程

获得干细胞群需要几个连续的步骤,包括收获、机械故障、化学分解,净化,和塑料的依从性。这些步骤之后,重要的是具备干细胞细胞计数和特征及其潜在的与适当的调查。

细胞扩张中扮演着关键角色,允许足够的细胞数量所需的体外研究。然而,当考虑一个原位一步对软骨的再生过程缺陷,初始细胞收获数字需要足够的修复大小不等的病变。需要大约一百万个细胞1厘米³病变(29日]。因此,研究细胞数量/组织单位收获将是至关重要的。最近,细胞聚集了增加增殖能力。这可能是由于直接接触和信息,不允许更好的细胞内交流(30.- - - - - -32]。现在将重要研究聚合细胞需要修复的数量大小不等病变;如果少于一百万细胞需要每1厘米³病变,这可能证明是一个重大突破。

步骤和各自的时间表当使用标准协议如下所示(图2)。与来源,当前技术> 1小时细胞隔离和随后要求孵化长达24小时至48小时之内允许塑料依从性(33]。这是被证明是一个漫长的过程,不是一个大问题,如果只应用于体外研究。

4.1。收获

腹部脂肪可以收获内窥镜或通过腹壁整形术没有显著差异在细胞结构和细胞的数量产生每单位体积(34]。两花最小的程序时间< 20分钟;然而,预期腹壁整形术过程可能需要更长时间。比较文学中最小。两项研究显示,类似形态的细胞是从内窥镜(抽脂)和腹壁整形术(切除)技术;然而,孤立的细胞表型出现不足和描述在这两项研究[35- - - - - -37]。

Infrapatellar脂肪垫(奖学金)可以收获伺机通过关节镜和关节成形术。虽然组织收割技术只需要的最小程序时间< 20分钟,整个关节成形术手术可能需要2个小时。此外,孤立ADMSCs从奖学金项目已被证明有更高chondrogenic潜力相比,细胞从骨髓中分离(26)和腹部脂肪组织(27),使他们优越的来源。

4.2。机械故障

腹部脂肪通过吸脂lipoaspirate形式获得收获,不需要任何进一步的机械故障。奖学金项目组织需要通过手术刀从纤维分离的脂肪垫,需要大约10分钟(38]。

4.3。化学分解

一旦脂肪颗粒被孤立的两个来源,胶原酶添加到允许的化学分解组织样本。而许多胶原酶可用于ADMSC隔离(表1),1型胶原酶是首选代理隔离之前chondrogenic血统归纳。研究显示使用1型胶原酶0.2% 10分钟的化学/酶分解可以获得间质血管分数(39]。增加使用胶原酶消化时间> 30分钟可以减少可行的脂肪细胞的数量(40]。加入胰蛋白酶纯胶原酶允许最大消化(41]。进一步的研究才能找到最优类型和胶原酶的浓度,使快速,有效,高效的AMDSCs崩溃。

胶原酶的加入后,样品孵化和激动一个旋转平台(≥100转每分钟)。在孵化平台,化学和机械风潮发生轻微表现为协同作用。

4.4。净化

净化是指物质的分离,没有要求产品的去除,过滤。机械和化学故障后,样品经过一个通用离心10分钟的步34,38]。接下来,移除上层清液,球是用磷酸盐缓冲溶液无菌过滤之前100年μm过滤器。另一轮的离心5分钟后,上层清液被丢弃和剩下的球然后resuspended 5毫升的红细胞裂解缓冲(28)10分钟前通过无菌过滤40μm过滤器(38]。最后5分钟轮离心分离后,得到的上层清液中删除,留下一个细胞颗粒。据报道,这个总净化过程需要25到50分钟。Postpurification resuspended在细胞培养基,然后计算之前被镀在烧瓶。

4.5。塑料的依从性

一旦细胞是镀在适当的烧瓶基于细胞计数,他们通常是孵化24 - 48小时。细胞对塑料是识别的关键步骤和孤立细胞具有干细胞的特征。独立的细胞被丢弃。在这个阶段,附加的细胞可以扩展和通道或冻结在液态氮,供以后使用。这塑料坚持一步需要至少24小时的潜伏期。细胞采用分子标记选择排序(流排序)是一种替代塑料坚持对隔离一个纯ADMSC人口(57]。这种方法的缺点是确切的时间要求和缺乏表型ADMSCs的描述。

4.6。表型

根据国际社会的细胞治疗(58,59),必须满足三个标准MSC表型:坚持塑料、适当的表面抗原,和表达多能干细胞分化的潜能。

塑料的依从性是所有MSC组的特征属性60,61年]。此外,可以观察到典型的形态学和集落形成在显微镜下见图3。

确认表型的细胞分离msc,比表面抗原通过immunophenotyping测试,可以通过流式细胞术(46]。msc一般表达(≥95%)CD73, CD90、CD105,而缺乏表达(≤2%)的CD 11 b, CD14、CD34、CD45、CD79a [47]。

然而,准确的描述仍在发展57,62年),应该使用和表面表现型与其他标准来帮助最佳识别MSC。

生物,msc应该显示三行分化潜能:成骨细胞,脂肪细胞,内层58]。多功能潜力可以被分化成各种血统证明使用不同的感应路径(16),可以测试染色和qPCR(表2)。

5。快速隔离程序在文学

在过去的十年中,一些商用酶和非酶的脂肪组织细胞隔离系统(63年,64年)取得了无菌处理和高收益率的细胞。然而,这些系统只隔离间质血管分数(SVF),这意味着一个塑料坚持一步仍然需要纯ADMSC隔离。

一个尝试快速出版协议使用腹部lipoaspirates实现了SVF隔离在30分钟内(12]。2.5×10⁵ADMSCs孤立使用30分钟的方法相比,2.0×10⁶从标准的方法。最后一步的塑料坚持分离纯ADMSC人口仍然需要进一步孵化24 - 48小时之内。此外,ADMSCs产生的数量相比减少了近10倍的标准程序。

纯粹的非酶的分解方法与搅拌机混合和声波降解法被用来获得一个SVF在25分钟内(65年]。平均2.6×10⁵SVF细胞被隔离,导致很低的平均水平为2.4×10⁴ADMSCs。尽管SVF隔离是快速,一夜之间(> 24小时)塑料坚持再次仍然需要获得一个纯ADMSC人口。

很明显的这两种方法得到的细胞,可能由于毒性的方法。此外,只有一个SVF迅速隔离而不是一个纯ADMSC人口,仍然需要> 24小时。

SVF单独的使用,不使用纯ADMSC人口,可能是另一种治疗选择。如前所述,由于上级chondrogenic潜在ADMSCs孤立的奖学金(27,28],SVF人口从腹部脂肪应该尝试之前相比奖学金SVF直接一步治疗选择。然而,缺乏信息的联系在一个SVF由于分散ADMSCs将导致劣质软骨修复由于减少旁分泌刺激(30.]。

6。我们在哪里可以节省时间?

有三个程序步骤,时间可以得救。这些是下面讨论并在图表示4。

6.1。机械故障

最初的机械故障可通过添加进一步提高机械搅拌通过摇晃,涡流,并可能增加无菌固体材料在化学分解作用帮助组织的分解。商业无菌珠子已经使用在抽脂包帮助乳化组织(66年]。如果这种材料被使用,他们需要sterilisable无毒和显示一个一致的和可预测的影响组织分解基于形态学和体重。这些因素将需要适当的调查之前纳入隔离技术。这些风险的更有力的方法是细胞损伤和死亡;因此,这将是重要的细胞生存能力评估等研究。

虽然目前只需要清廉分钟打破组织根据源,更有力的崩溃之前的组织,尤其是奖学金项目组织,可能有助于减少所需的总时间后续步骤的化学分解。

6.2。化学分解

报告的化学分解显示不同时间10分钟崩溃的组织成一个SVF [39]。更高浓度的胶原酶和胰蛋白酶的允许最大击穿,而高转速旋转平台上的使用可以使协同崩溃。再一次,细胞毒性的可能性需要调查(40]。

6.3。塑料的依从性

塑料坚持形式的主要障碍(至少24小时)的时间。一种新的快速技术需要建立在这一步,因为这时间不是临床可行的。

最近文献报道的高亲和力关节祖细胞(APC)纤连蛋白,研究显示APC坚持fibronectin-coated井在20分钟67年]。虽然缺乏清晰定义的标记,这些装甲运兵车,也称为chondrogenic祖细胞,显示干细胞潜力和相似甚至更分化的ADMSCs形式(68年]。

这是一个重大的发现支持使用fibronectin-coated井或板隔离ADMSCs如果可以通过immunophenotyping证明干细胞是附加选择性涂层。

7所示。结论和未来的临床适用性

快速ADMSC隔离技术是必要的单步执行,组织工程学的外科修复软骨组织。迄今文献表明IFP-harvested ADMSCs chondrogenic中最有前途的潜力。如果一个过程可以隔离ADMSCs使用方法等,在图中描述4,然后将细胞整合到一个矩阵,使用手持生物植入到一个缺陷(69年- - - - - -71年)可能为一个单步术中软骨修复技术。当利用白天的优势最小切口手术,如关节镜检查,可能有重要的临床结果和医疗成本上涨。

软骨修复的未来是光明的。通过加快细胞隔离技术,一个主要的障碍是可以克服的,翻译一个临床nonlaboratory-based程序,缩短手术时间,为患者更快恢复,一个较小的卫生保健系统的负担。年轻的病人现在可以希望一个简单的、低风险的治疗选择,艾滋病预防骨关节炎的发病。

缩写

msc:	间充质干细胞
ADMSCs:	脂肪间充质干细胞
奖学金:	Infrapatellar脂肪垫
BM:	骨髓
SVF:	间质血管分数
APC:	关节的祖细胞。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

引用

1. j . e .全k . Schrobback d . w . Hutmacher t·j·克莱恩,“动态压缩提高人类纬向软骨细胞的生物合成的骨关节炎患者,”骨关节炎和软骨,20卷,不。8,906 - 915年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. a . p .打浆机、s c·迪金森和w·Kafienah“干细胞和软骨发展:复杂性的一个简单的组织,”干细胞,28卷,不。11日,第1996 - 1992页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. o . Robertsson a . Stefansdottir l . Lidgren, j . Ranstam”长期死亡率增加小于55岁的病人经历了膝盖替代骨关节炎,“《骨和关节手术,卷89 - b,没有。5,599 - 603年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. j . Julin e . Jamsen t . Puolakka y . t . Konttinen和t带“年轻的风险增加假体失败初次全膝关节置换术后早期骨关节炎,“Acta Orthopaedica,卷81,不。4、413 - 419年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. 传唤者(卡迪夫研究所组织工程和维修),卡迪夫生物科学学院博物馆大道、加的夫、CF10 3,威尔士,英国、美国n .瑞德曼s f·奥德菲尔德和c·w·阿彻,“当前的关节软骨修复策略,”欧洲细胞与材料卷。9日,23-32,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. 邦内尔,m . Flaat c . Gagliardi b·帕特尔和c . Ripoll“脂肪中提取干细胞:隔离、扩张和分化,“方法,45卷,不。2、115 - 120年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. p . v . Giannoudis、t·a·艾因霍恩和d·马什”骨折愈合:钻石概念”,受伤卷,38 S3-S6, 2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. m . l .老爹大肠卢卡雷利,s . Guidi et al .,“体外扩大临床应用间充质基质细胞最低质量要求,“干细胞与发展,24卷,不。6,677 - 685年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. k . Beitzel m·b·麦卡锡m p Cote et al .,“快速隔离人类干细胞(连接祖细胞)的远端股骨在膝盖关节镜手术,”关节镜检查,28卷,不。1,第84 - 74页,2012。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. 公元Mazzocca m·b·r·麦卡锡,d . m . Chowaniec m·p·古德r . a . Arciero和h . Drissi”快速隔离人类干细胞(结缔组织祖细胞)近端肱骨肌腱套在关节镜手术,”美国运动医学杂志》上,38卷,不。7,1438 - 1447年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. b,凡塔齐尼g .米兰球迷,大肠卢卡雷利et al .,“快速方法获得间充质干细胞从骨髓送气音和血小板,”组织工程和再生医学杂志》上,8卷,不。6,483 - 492年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. m·p·弗朗西斯·p·c·萨克斯l·w·爱尔摩和s e·霍尔特”分离脂肪间充质干细胞从lipoaspirate血液和盐水分数,”器官发生》第六卷,没有。1,11 - 14,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. p·a·祖克m·朱h .美津浓et al .,“Multilineage从人类脂肪组织细胞:细胞疗法,”组织工程,7卷,不。2、211 - 228年,2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. a·j·贝克尔、e·a·麦克洛克和j . e .直到“细胞学的脾脏殖民地的克隆性质来源于小鼠骨髓细胞移植,”自然,卷197,不。4866年,第454 - 452页,1963年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. a . j . Friedenstein美国f . Deriglasova n n Kulagina et al .,“成纤维细胞的前体不同人群的造血细胞体外集落试验方法,检测到的”实验血液学,卷2,不。2、83 - 92年,1974页。视图:谷歌学术搜索
16. m . f . Pittenger a . m .麦凯s c·贝克et al .,“Multilineage成年人类间充质干细胞的潜力。”科学,卷284,不。5411年,第147 - 143页,1999年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. t . Rada r·l·里斯和m·e·戈麦斯,“脂肪tissue-derived干细胞及其应用在骨和软骨组织工程,“组织工程B部分:评论,15卷,不。2、113 - 125年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. f·韦罗内西,m . Maglio m . Tschon n . n . Aldini和m·菲尼”为软骨组织工程脂肪间充质干细胞:最先进的在体内研究中,“《生物医学材料研究的一部分,卷102,不。7,2448 - 2466年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. g .盛”,间充质干细胞的发育基础/基质细胞(msc),“BMC发育生物学,15卷,不。1,p。2015。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. M.-C。Kastrinaki, i Andreakou, p . Charbord, h·a·Papadaki“孤立的人类骨髓间充质干细胞使用不同的膜标记:殖民地的比较/克隆效率,分化潜能,和分子,”C:组织工程部分的方法,14卷,不。4、333 - 339年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. m . c . Ronziere大肠毕雷矿泉水,f . Mallein-Gerin和a . m . Freyria”Chondrogenic潜力的骨髓和脂肪tissue-derived成年人类间充质干细胞,”生物医学材料与工程,20卷,不。3、145 - 158年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. m . Strioga s Viswanathan a . Darinskas o . Slaby和员工j . Michalek”相同或不相同的吗?比较脂肪tissue-derived与骨骨髓来源间充质干细胞和间质细胞,”干细胞与发展,21卷,不。14日,第2752 - 2724页,2012年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. y张成泽,y . g . Koh y . j . Choi et al .,”表征的脂肪tissue-derived基质血管分数为临床应用软骨再生,”体外细胞和发育生物学。动物,51卷,不。2、142 - 150年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. j·l·Dragoo b . Samimi m .朱et al .,“使用干细胞组织工程软骨和骨骼从人类infrapatellar脂肪垫,”《骨与关节外科,英国体积,卷85 - b,没有。5,740 - 747年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. c·t·巴克利t . Vinardell s·d·索普et al .,“功能性质的软骨组织工程infrapatellar pad-derived脂肪间充质干细胞,”生物力学杂志,43卷,不。5,920 - 926年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. p·辛德:汗,l . Biant和b . Peault”Infrapatellar脂肪垫的血管周的干细胞再生医学与chondrogenic增加潜力,”干细胞转化医学》第六卷,没有。1,第87 - 77页,2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. 名,a . Colombini d . Stanco l . de Girolamo诉桑松,m·莫雷蒂,“Donor-matched间充质干细胞骨关节炎的膝盖infrapatellar和皮下脂肪组织的捐助者显示微分chondrogenic和成骨的承诺,“欧洲细胞与材料27卷,第311 - 298页,2014年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. r . Felimban k, k . Traianedes et al .,“分化的干细胞从人类infrapatellar脂肪垫:特征的细胞进行软骨形成,”组织工程部分,20卷,不。15 - 16岁,2213 - 2223年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. a·辛格s c·高尔k·k·古普塔et al .,“干细胞在骨关节炎的作用:兔子的实验研究”骨与关节的研究,3卷,不。2,32-37,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. 曾经,s m .林a . t .研究会会长,公元Laflin,和m . s . Detamore“干细胞在水凝胶聚合形式加强软骨形成,”《公共科学图书馆•综合》,10卷,不。12篇文章e0141479 2015。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. 通用货车Buul,大肠光秃,p . k . Bos et al .,“间充质干细胞分泌因子抑制炎症过程在短期骨关节炎滑膜和软骨外植体培养,“骨关节炎和软骨,20卷,不。10日,1186 - 1196年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. 即Linero o .查,“间充质干细胞旁分泌效应来源于人类脂肪组织在骨再生,”《公共科学图书馆•综合》,9卷,不。9篇文章e107001 2014。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. 美国美国国家工程院、i Bordeianu a . t . Stăncioiu和n . Antohi“人类脂肪中提取干细胞:定义、隔离、组织工程的应用,”罗马尼亚的形态和胚胎学杂志》上,54卷,不。4、919 - 924年,2013页。视图:谷歌学术搜索
34. 施耐德,m·昂格尔·m·范Griensven和e . r . Balmayor”从吸脂手术,切除脂肪脂肪间充质干细胞再生医学是可行的,”欧洲医学研究杂志》上,22卷,不。1,p。2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. h·巴瑟m . Najar g . Raicevic et al .,“隔离和表征人类间充质基质细胞的亚种群:比较骨髓和脂肪组织,”干细胞与发展,24卷,不。18日,第2157 - 2142页,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
36. h·埃托奥,h .日本须贺,d .松本et al .,”表征的结构和蜂窝组件的吸气和切除脂肪组织,”整形外科,卷124,不。4、1087 - 1097年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
37. m·修梅克m . Bucco t Chlapanidas et al .,“Nonexpanded间充质干细胞再生医学:收益率从脂肪组织,间质血管分数”C:组织工程部分的方法,16卷,不。6,1515 - 1521年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
38. p . Tangchitphisut n . Srikaew s Numhom et al .,“Infrapatellar脂肪垫:另一种脂肪间充质干细胞的来源,”关节炎卷,2016篇文章ID 4019873, 10页,2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
39. a . m .罗德里格斯,d . Pisani c a Dechesne et al .,“多能干细胞的移植细胞群从人类脂肪组织诱发肌营养不良蛋白表达在免疫活性的mdx鼠标,“《实验医学杂志》上,卷201,不。9日,第1405 - 1397页,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
40. 美国水手,s . c . Tannan y曹,s·m·皮尔斯和林刘贤美,“微分处理时间和持续时间的影响在人类和小鼠胶原酶消化脂肪移植,”整形外科,卷136,不。2,页189 e - 199 e, 2015。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
41. s·k·威廉姆斯,s·麦肯尼和b . e .贾雷尔、“胶原酶为脂肪组织消化很多选择和净化,”细胞移植,4卷,不。3、281 - 289年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
42. n . c . Cheng t y谢长廷,h . s .赖和t·h·年轻,“高glucose-induced活性氧生成促进具备干细胞在人类脂肪干细胞,”Cytotherapy,18卷,不。3、371 - 383年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
43. 安m . s . Choudhery m . Badowski a缪伊斯,和d·t·哈里斯,“温和的热应力的影响在人类间充质基质细胞的增殖和分化能力,”Cytotherapy,17卷,不。4、359 - 368年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
44. l . Satish j . m . Krill-Burger p h·盖洛et al .,”表达的分析人类脂肪干细胞在体外分化为脂肪细胞谱系中,“BMC医学基因组学,8卷,不。1,p。41岁,2015。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
45. k .木下光男s Kuno h . Ishimine et al .,“治疗潜在的脂肪SSEA-3-positive缪斯细胞治疗糖尿病皮肤溃疡,”干细胞转化医学,4卷,不。2、146 - 155年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
46. s . h . Al-Saqi m . Saliem s Asikainen et al .,“体外无血清培养系统定义媒体扩大脂肪间充质干细胞,”Cytotherapy,16卷,不。7,915 - 926年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
47. e . Koellensperger n . Bollinger诉Dexheimer f . Gramley g . Germann和Leimer,“选择正确的类型的血清人类脂肪tissue-derived干细胞的不同应用程序:影响增殖和分化的能力,”Cytotherapy,16卷,不。6,789 - 799年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
48. m . Najar r·m·罗德里格斯k Buyl et al .,“人类脂肪tissue-derived干细胞的增殖和表型特征:比较聚蔗糖梯度离心和红细胞裂解缓冲处理净化方法,”Cytotherapy,16卷,不。9日,第1228 - 1220页,2014年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
49. 诉Cervelli m·g·肖利p异教徒et al .,“富含血小板血浆大大强化insulin-induced脂肪形成的人类脂肪中提取干细胞通过分化丝氨酸/苏氨酸激酶Akt-dependent机制,促进临床脂肪移植维护,”干细胞转化医学,1卷,不。3、206 - 220年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
50. 吴,z -纳哈斯,k . a . Kimmerling g . d . Rosson和j·h·Elisseeff”注射脂肪软组织重建矩阵”,整形外科,卷129,不。6,1247 - 1257年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
51. x f·杨,x, j . et al .,“高效隔离和系统的人体脂肪间充质干细胞鉴定,“生物医学科学杂志,18卷,不。1,59页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
52. 吴x, z . e . g . Yu弗洛伊德Y.-D。c . Halvorsen和j . m .平衡台”,从lipoaspirates隔离人体脂肪中提取干细胞。”分子生物学方法卷。702年,17-27,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
53. a . j . h . Tan绢,j·p·鲁宾,c·r·楚和k·g·马拉,“小说multiarm PEG-based用于组织工程的水凝胶,”《生物医学材料研究的一部分卷,92年。3、979 - 987年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
54. g . e .热爱旅行,s·j·福斯特,吴x et al .,“人类脂肪中提取干细胞的细胞因子:血管生成,造血,和炎性因子,”细胞生理学杂志,卷212,不。3、702 - 709年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
55. e . s .全h . y .歌曲,m . r . Kim et al .,“Sphingosylphosphorylcholine诱发人类脂肪tissue-derived扩散间充质干细胞通过激活物”脂质研究期刊》的研究卷,47号3、653 - 664年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
56. r . Devireddy s Thirumala, j .平衡台“脂肪派生passage-4成人干细胞的细胞反应冻结压力,”生物力学工程杂志,卷127,不。7,1081 - 1086年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
57. 美国d . Wankhade m .沈r . Kolhe和s . Fulzele“进步在脂肪中提取干细胞隔离、表征和应用再生组织工程”干细胞国际卷,2016篇文章ID 3206807、9页,2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
58. m . Dominici k·勒布朗,穆勒et al .,“最低限度标准定义多功能间充质基质细胞。被国际社会公认为细胞治疗位置声明。”Cytotherapy,8卷,不。4、315 - 317年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
59. m . Krampera j·阿斯y Shi, k .挞l . Sensebe和MSC委员会国际社会的细胞治疗(ISCT),“多功能国际社会间充质基质细胞的免疫学特性细胞治疗(ISCT)提议,“Cytotherapy,15卷,不。9日,第1061 - 1054页,2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
60. 特区犁头、r类c . m . DiGirolamo和d . j . Prockop”文化的回收干细胞迅速扩张plastic-adherent从人类骨髓细胞,”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷97,不。7,3213 - 3218年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
61. 江y, b . n . Jahagirdar r·l·莱因哈特et al .,”来自成人骨髓间充质干细胞的多能性,”自然,卷418,不。6893年,41-49,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
62. f·萨巴蒂,l . Petecchia m . Tavian v . j . de Villeroche g·a·罗西和d . Brouty-Boye“人类支气管成纤维细胞表现出一种间充质干细胞表型和multilineage分化潜力,”实验室调查,卷85,不。8,962 - 971年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
63. e .表层构造c . Steffenhagen c·威廉姆斯,c·加布里埃尔·h·Redl和s . Wolbank“脂肪tissue-derived细胞:酶和non-enzymatic隔离系统当前状态的艺术,“细胞再生,4卷,不。1,p。4:7 2015。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
64. e . Raposio f . Simonacci, r . e .佩罗塔,“脂肪中提取干细胞:对比两种方法临床应用的隔离,”《医学和手术,20卷,第91 - 87页,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
65. m·A·Amirkhani r·穆赫辛尼经常m . Soleimani A . Shoae-Hassani和m . A . Nilforoushzadeh”基于声波降解法快速制备方法间质血管分数和间充质干细胞从脂肪组织,”Bioimpacts》第六卷,没有。2、99 - 104年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
66. 2018年2月,http://www.lipogems.eu/lipoaspiration-procedure.html。
67. g . p . Dowthwaite j . c .主教,s . n .瑞德曼et al .,“关节软骨表面包含一个祖细胞群,”《细胞科学,卷117,不。6,889 - 897年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
68. 江y和r . s .老爷,“起源和骨关节炎软骨干细胞/祖细胞的功能,“自然评论风湿病学,11卷,不。4、206 - 212年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
69. c . Di贝拉,a . Fosang d . m . Donati g·g·华莱士和p . f . m . Choong)“3 d生物打印软骨的整形外科医生:阅读字里行间,”前沿手术,2卷,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
70. c·d·奥康奈尔c . Di贝拉·汤普森et al .,“发展Biopen:手持设备外科印刷的脂肪干细胞软骨的伤口,“生物制造,8卷,不。1,2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
71. s . Duchi c . Onofrillo c·d·奥康奈尔et al .,“手持同轴生物打印:应用原位外科软骨修复,”科学报告,7卷,不。1,p。5837年,2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

版权

版权©2018年萨姆·l·弗朗西斯et al。这是一个开放的分布式下文章知识共享归属许可,它允许无限制的使用、分配和复制在任何媒介,提供最初的工作是正确引用。