文摘
烹饪和前体(SKPs)是成人干细胞自我更新和多功能分化来源。尽管啮齿动物SKPs已经详细讨论了在大量的研究中,人类SKPs(培训)很少报道。了解培训的潜在生物学性质和可能的机制有重要意义对再生医学尤其是临床应用,如人为来源更适合临床移植。发现培训衍生品,如神经和中胚层的后代,都在体外和在活的有机体内函数没有任何遗传的修改使培训成为一个可信赖的、安全的和可访问资源细胞疗法。在这里,我们提供培训的概述,描述他们的特点、发放和利基市场,潜在的应用。比较传统和创新文化的方法用于培训。此外,我们讨论的挑战和未来的角度对培训领域。本文,我们希望指出当前阶段的培训和强调的问题仍然在这个领域。
1。介绍
干细胞(SCs)是一种细胞自我更新和multilineage分化能力。越来越多的研究表明SCs体细胞组织的存在,包括骨髓、脂肪组织和皮肤(1,2]。皮肤特别吸引研究人员由于其多样化的优势。一个成人皮肤的平均面积是1.75米2(3为研究和移植),提供足够的资源。此外,皮肤是一个复杂的组织中含有各种SCs [4),如表皮SCs、真皮SCs和头发follicle-derived SCs,使它适合再生医学。此外,烹饪和SCs容易用最小的入侵,更少的痛苦,和快速恢复。
烹饪和前体(SKPs),首先描述了托马等人(2001年5),是一种新颖的SCs真皮。SKPs成长为浮动球体,悬浮无血清培养基补充碱性纤维母细胞生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF),类似于neurosphere,它们可以自我更新,multilineage分化能力。激动人心的是,SKPs显示神经SCs表达巢蛋白的特点和生成神经后代,因此成为再生医学竞争SCs,特别是在神经学领域。啮齿动物SKPs被广泛大量的文献中讨论。尽管与人类分享一些属性SKPs(培训)5,6),啮齿动物的是不恰当的模拟培训在活的有机体内和在体外由于物种差异。向临床应用,它对生物属性和特征是至关重要的在活的有机体内培训的特点。在评估中,我们的目标是提供关于培训代表信息关于他们的生物学、应用潜力,挑战,基于工作报告和观点。
2。培训是什么?
2.1。培训的概念
培训是一种自我更新和multipotential前体人口从人类真皮(6]。以类似的方式对神经SCs,培训表达neural-related蛋白质和生成神经后代。一旦暴露在某些环境中,培训可以为所有三个主要微生物层。虽然培训以神经SCs-like属性,他们在神经SCs有很多优势。一方面,隔离手术是神经SCs的要求高,而培训获得最小的入侵,因为它们是位于皮肤表面上。另一方面,神经SCs的产量是有限的组织供应,而皮肤覆盖全身的一个较大的器官,为培训提供了丰富的来源。培训和真皮间充质SCs都来自皮肤。然而,他们是不同的特征。首先,从真皮间充质SCs截然不同,培训发展和扩大的球体中包含bFGF, EGF, B27,神经SCs条件优化,而真皮间充质SCs与血清培养的附着条件。其次,真皮间充质SCs大多用于皮肤疾病如皮肤萎缩或修复(7,8]。尽管先前的研究已经表明,SKPs能够延缓衰老的(9,10),培训的最有前途的方面是他们可以提供一个可访问的可能性,丰富,多功能源脊髓损伤等神经系统疾病。
在这里,我们提供了一个比较当前干细胞与潜在应用领域的神经系统疾病(表1)。
2.2。培训的资料
培训是首次报道表达巢蛋白、纤连蛋白和波形蛋白(5,6]。类似的研究在其他实验室重复后,标记表达培训被报道是不同的在不同的组。目前,没有特定的标记识别培训,大大防止培训净化和进一步鉴定。我们总结了报告表达标记表的培训2。培训从黑色素细胞和造血的SCs表型不同,他们对酪氨酸酶[不利6],c - kit [18],CD34 (19]。然而,这是值得注意的,最近的一些研究表明,不同的解剖区域的培训显示不同的表达谱和水平20.,21]。重要的是要意识到培训培养浮动球体异构,组成细胞的多样性。据Etxaniz et al .,我的分组人口生成受体(正常)关系+CD56+dermospheres从培训,保留神经的能力属于许旺细胞谱系的成人真皮(22]。这些神经源性细胞来源于许旺细胞去分化专业雪旺细胞的外围神经末梢在皮肤上而不是居民前体细胞。终端雪旺细胞也可以像真正的真皮干细胞。Gresset et al。23)和Iribar et al。24]还透露在成人干细胞的数量的存在神经嵴细胞在皮肤上,也可以培养为浮动球体。一般来说,这些结果表明,球从浮动文化实际上是一个复杂的混合不同的细胞,包括干细胞前体,和终末分化细胞,目前还不清楚到什么程度的多样性影响的生物技术应用培训。也没有标记区分从其他细胞纯化培训目前可用。
2.3。分化的培训
2.3.1。神经发生
培训是特别有吸引力的神经发生。当培养neurobasal中补充与神经营养因子如神经生长因子、脑源性神经营养因子,和NT-3培训进行了连续变化和展出neuron-like形态和表达神经标记βIII-tubulin [6]。这些神经元在本质上主要是外围p75NTR表达,周围神经元的标记。现在是报道,甚至有些hSKPs-derived神经元表达了成熟的中心神经元标记K+cl+转运蛋白KCC2 [30.]。Cocultured主要小鼠神经胶质,hSKPs-derived神经元产生动作电位。有些神经元甚至提出synapsin和生成的突触活动的突触标记(30.]。当暴露在海马astrocyte-derived信号,这些神经元也可能产生压敏电阻器钙瞬变(31日]。除了神经元,培训可以分化成胶质细胞的雪旺细胞6和星形胶质细胞32]。至于神经胶质细胞分化,neurobasal介质条件下含N2补充,forskolin, heregulinβ,我们可以观察到双相形态表达S100人口β和/或p75NTR和/或CNPase和/或神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP) [6]。这些hSKPs-derived雪旺细胞能诱导髓鞘形成和表达myelin-related蛋白质coculturing时的胚胎大鼠背根神经节神经元在体外(33]。表3显示了神经发生的详细协议。
2.3.2。其他血统
其他培训的外胚层的分化也被报道。培训都能产生色素的黑色素细胞的存在和endothelin-3 SCs因素。这样的黑色素细胞迁移从真皮表皮和可以分别位于表皮基底层的(35]。培训的分化为角膜内皮细胞(个cec上)是通过coculturing B4G12细胞。这些hSKPs-derived个cec上提出了多边形形态和表达了角膜内皮Na的主要标志+/ K+atp酶(36]。
中胚层细胞类型呢?培训multi-inducting条件下导致脂肪细胞(6),成骨细胞(37),软骨细胞(38),和其他细胞类型(25]。脂肪生成是通过脂质堆积在细胞质中确定和表达的脂肪形成的标记。评估骨钙沉积,提高碱性磷酸酶(ALP)活性水平,和成骨的蛋白质或基因的高表达。软骨形成是衡量形成cartilage-like micromasses,出现硫酸粘多糖含量、和cartilage-related蛋白质或基因的检测。至于平滑肌细胞的形成,这也证实了表达特定的标记。我们总结了具有代表性的中胚层分化方法的培训表4。
培训已扩展到内皮细胞的分化。Mehrabi和他的同事们成功地分化培训glucose-responsive,胰岛素生产集群(39]。当暴露于肝原性的因素和细胞因子,培训可以穿过血统边境并生成hepatocyte-like细胞(40]。的分化能力培训是比预期更多的塑料,和培训的综合功能应该在未来的实验探索。
3所示。培训产生和定位在哪里?
3.1。培训的起源
培训是基于假设的初始隔离的皮肤包含细胞神经源性属性。培训的能力来生成神经元和胶质细胞都证实了这个假设。然而,尽管培训似乎类似于他们的文化行为和神经神经SCs表型,他们也像纤连蛋白表达中胚层的标记,也表达了对他们的发展起源的问题。
神经嵴造成各种各样的组织,包括不同的皮肤细胞(41];主流概念认为培训是内源性神经嵴前兆出现的皮肤在胚胎发生和持续到成年16,18]。下列证据支持的假设是:首先,当镀单细胞分离直接从包皮样本和附着,这些皮肤细胞能够产生神经元,神经胶质细胞,平滑肌细胞没有任何使和扩张6]。其次,培训基因表达的分析还透露,他们表达了各种各样的神经crest-associated转录因子包括Pax3、蜗牛、蛞蝓(6]。第三,研究啮齿动物提供更详细的证据。像费尔南德斯等人所描述的那样。,移植SKPs能够遵循宿主神经嵴迁徙途径。此外,SKPs Wnt1-Cre / R26R转基因老鼠,有选择地表示记者转基因细胞起源于波峰,报道转基因表达的18]。
另一种可能性是,培训代表一个异构球体包含终末分化神经嵴细胞。在某些条件下,生长因子,培训经验丰富的真皮崩溃过程,允许他们外围细胞去分化和获得multipotency。例如,它最近报道,神经源性属性保留专门培训的p75NTR的子群+CD56+雪旺细胞谱系的球体,呈现特征,导致许旺细胞去分化。这样的在体外重组过程中涉及的规定Sox2的表达水平22]。黄等人的早期研究表明,多功能神经嵴细胞终端从皮肤也显示自我更新能力,可以种植在浮动范围和扩大文化。此外,在躯干皮肤,球体呈现神经嵴干细胞的性能局限于神经胶质和黑素细胞谱系,而不是间充质来源(42]。另一个最近的两项研究提供了进一步的证据支持,神经性潜在发现球体文化是归因于许旺细胞谱系的神经嵴人口而不是真皮多能干细胞前体(23,24]。在一起,这些数据对假设培训是否反映了内生前体与多功能潜力,随着神经血统建议来自neural-derived雪旺细胞。因此,由于冲突的证据,这是目前还不清楚如果培训可能引起神经衍生品(33,43]。显然,培训的确切起因仍有待观察。
3.2。利基市场的培训
从历史上看,培训最初描述来自成人头皮,表明人类头皮包含SKPs,但其精确的利基尚未确定。为了解决这个问题,费尔南德斯和他的同事在2004年进行了进一步的研究,表明头发和胡须毛囊真皮乳头的利基市场的啮齿动物SKPs [18]。培训可能共享相同的地区啮齿动物的。基于这一假设,狩猎等人microdissected成年人类皮肤的真皮乳头特别和获得sphere-forming细胞(26]。虽然最初的细胞播种数量较低,没有惊喜,更多的球体和更好的扩张被观察到在microdissected真皮乳头样本真皮乳头整个皮肤形成鲜明对比。fate-mapping方法结合丰富papillasphere代表明毛囊真皮乳头,构成适合培训。
生田斗真等人质疑他们的之前的概念,皮肤毛囊可能不是唯一的利基市场的培训收获球体从新生儿包皮,不含毛囊的组织。foreskin-derived领域表达了类似的标记从头皮培训和生成三个胚层后代(6),提高问题:无毛皮肤取出培训来自哪里?德国学者利用流式细胞仪技术获得一个纯nonfollicular人口培训。他们发现培训居住在真皮乳头层和真皮血管周的地区代表这些细胞的利基。这些细胞是cd146和没有形态或功能差异与卵泡同行(脂肪形成的和成骨分化)(20.]。然而,Etxaniz et al。证明这些CD146+血管周围细胞未能产生神经后代存在的条件(22]。
最近,培训成功分离出真皮纤维母细胞文化,表明真皮基质可能是培训的另一个领域。Wenzle等人进行的一项研究开发的真皮纤维母细胞球形细胞培养患者Hutchinson-Gilford早衰症综合征(25]。特别是,在这项研究中,研究人员采用低温作为应力筛选培训驻留在真皮成纤维细胞。这些高温细胞显示相似的特征作为主要的培训。此外,在最近的研究中,他们进行酸性压力真皮成纤维细胞之前培训隔离,得到了一个类似的发现44]。然而,在另一组,他们直接从precultured孤立培训单层成纤维细胞的正常和病变的成人真皮没有任何压力34]。这样fibroblast-derived培训差条件下也导致脂质积累、钙化和S100β或βIII-tubulin表达式。
目前,负责培训的精确定位仍然不明。多个领域似乎有助于培训代(图1)。然而,它应该承认,绝大多数有资格自己是“培训”是目前被认为“终末分化细胞的去分化。例如,成熟的雪旺细胞来源于皮肤可能会发生去分化并显示SKP-like特征响应分离和培养条件45,46]。因此,这部小说的定义领域的培训可能代表这些终末分化细胞的位置而不是烹饪和多功能的前兆。
4所示。培训怎么走吗?
4.1。培训的隔离和扩张
培训可以收获两毛和人类皮肤无毛。当前协议分离单个细胞需要酶消化和机械磨碎(图2(一个))[47]。通常,一个人类新生儿包皮示例将产生大约107细胞只有0.01%到0.001%的总培训(27]。培训是高度相关的细胞密度的增长和培养条件2,28]。一般来说,细胞密度越低,其增长越慢。然而,密度高于25000细胞/毫升可能导致细胞聚合,而不是增殖集群。至于培养条件,有必要增加培训的介质条件培养液上清液从最后一段。推荐的媒介促使培训扩张使新鲜培养基组成的50%,50%的条件培养基,而保存的条件培养基应无菌过滤产品使用前(4]。
(一)
(b)
培训产生的年龄可能是一个重要因素。一项研究收集foreskin-derived培训从102年健康受试者从8个月到85岁,发现随着年龄的增长sphere-forming潜在的负相关。样本对象超过50岁失去sphere-forming能力。培训从年轻受试者dermospheres规模更大、更好的分化潜能从老人的48]。然而,这显然是知道,老年人皮肤变得萎缩,这是相对非细胞,无血管的,和更少的紧张。毛囊的密度也经过的随着年龄的增长逐步减少49]。因此,减少损耗可能归因于培训领域的真皮岁而不是spherogenic样本的差异从不同的年龄。Yoshikawa等人成功而另一个研究孤立的培训从所有年龄段,甚至在个人从70年到78年的历史21),这些数据冲突年龄对培训的效果和供体的年龄是否与细胞产生相当大的兴趣。解剖位置是另一个因素。加戈等人分析了培训的推导和表型的包皮,头皮,胸部和腹部。结果证明,所有地区可以生产培训尽管从包皮更高的收益率。然而,scalp-derived培训p75NTR阳性和foreskin-derived培训是为阴性versican [48]。Yoshikawa等人支持这个结果,但他们认为,面部皮肤产生更多的培训和展示高分化能力转化为神经和中胚层细胞比树干或肢体皮肤(21]。有趣的是,最近的一项研究Kwon等人相比,组织工程结构的可变性不同解剖位置和观察到的独特构造形成的特征。当使用一个工程软骨作为模型,构造形成的包皮和腹部烹饪培训显示类似的机械性能在植入后仍可比在活的有机体内文化,而乳房烹饪和结构的机械测试,尽管所有组织都是生物相容性(50]。在一起,这些数据表明,进一步应用培训应该考虑的解剖位置。
4.2。建立培训的新方法
目前的方法建立培训有很多缺点。首先,只有少数成千上万的培训可以从传统的协议,获得显著限制进一步的临床应用。其次,整个过程生成培训是复杂和耗时。通常,隔离过程至少需要一天,整个扩张需要一到三个星期。第三,培训期间坚持塑料容易孵化而过早依从性将大大减少培训的收益。
传统上,培训是培养在传统的二维(2 d)环境中,这是不合适的模仿在活的有机体内细胞环境。因此,三维(3 d)支架模仿自然利用体内利基成长培训。王等人的形态相比,房地产增长,标准的基因表达,分化潜能培训生长在常规悬浮条件和不同的3 d水凝胶。所有的3 d水凝胶可以支持培训增长,而透明质酸的抗酸支架促进培训扩散高度和保留他们的特点51]。3 d condition-derived培训显示延迟衰老在长期的文化在体外,这对于大多数体细胞SCs是一种常见的缺点。另一项研究调查了培训以及不同nanofibrous支架的生物属性。播种后支架,所有培训扩展过程和纳米纤维的表面逐渐覆盖。这些培训保持活力和增殖,促进细胞外基质的生产和硫酸化葡糖氨基葡聚糖nanofibrous支架(52]。搅拌悬浮生物反应器也已报道促进培训收益。培训在搅拌条件下高于静态文化扩张,尤其是60 rpm的速度(28]。
由于培训以类似于神经SCs,可以扩大neurospheres或附着层,一些研究试图在单层膜生长培训。在2004年早些时候,Joannides等人研究了在有丝分裂原种植培训附件条件血清紧随其后。顺序改变文化可以增加细胞扩张,同时保留诱导神经电位(31日]。之后,两个独立的团体试图孤立多功能培训从初级单层成纤维细胞培养34,37,44),如图2 (b)。球从这个转移方法也显示SKP财产。目前,研究种子的真皮细胞serum-supplemented文化,然后转移到强化了生长因子血清附着条件。增加培训的永久贴壁培养不会改变他们的蛋白表达和微分电位(53]。然而,的身份monolayer-derived培训仍然模棱两可。学者们提出这些细胞真皮间充质SCs而不是传统的培训(54),因为真皮间充质SCs也以自我更新能力和神经源性潜力(55,56]。感应培训的诱导性多功能SCs)的细胞则是另一个热点。Sugiyama-Nakagiri等。首先培养的人类细胞则与重组的大脑和SB431542抑制剂苯丙酸诺龙/节点和转化生长因子- (TGF)β信号,然后转移到SKP中包含CHIR99021 WNT信号激活。作者有效诱导培训与感应率超过97%,则和iPSC-derived培训培训的基因和蛋白质表达特征以及分化成脂肪细胞,成骨细胞和雪旺细胞55]。然而,优化培训协议的隔离和分化成潜在的临床应用仍是一个具有挑战性的先决条件达到临床翻译。
5。可能的机制来调节培训具备干细胞
许多文章注意到培训中逐渐失去了SCs属性长期扩张。刘等人。发现了一个急剧下降的一种蛋白激酶隔离和通道过程中培训活动(56]。一种蛋白激酶,也被称为蛋白激酶B,是磷脂酰肌醇的下游信号3-kinase——(PI3K) Akt通路(PI3K-Akt)。PI3K-Akt通路中发挥着关键作用在控制细胞增殖,迁移,生存,和静止,特别是神经SCs [57]。自从建立了培训表现出类似的属性作为神经SCs,刘等人关注PI3K-Akt通路作为候选人维护培训功能。进一步证实了假说,作者被这个途径与几个抑制剂发现培训衰老增加,自我更新因此下降。相反,提高培训的PI3K-Akt途径改善自我更新和减轻他们的衰老56]。详细了解可能的机制,刘等人继续研究。他们做了一个依赖于时间的微阵列分析培训培养在体外,发现衰老的基因模式培训是不同于典型的衰老。随后的调查指出p15基因细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂INK4b和p27KIP1可能参与培训衰老。接下来的上游信号的分析提出一种蛋白激酶和Forkhead盒O3 (FOXO3)活动减退导致培训衰老。Akt激活和堵塞FOXO3 p15INK4b,p27KIP1逆转老化条件的培训和促进培训扩散。因此,本研究主动提出Akt-FOXO3—p15的角色INK4b/ p27KIP1在调节培训的行为(58]。
6。治疗潜在的培训
伟大的可塑性由培训表明其潜在应用细胞治疗一些疾病,虽然矛盾的证据表明,一些提议的潜力可能归因于体外扩张的条件。
作为一个必要的转化应用,但是,它是必不可少的检查的生物安全和immunocompatibility培训和证明培训代表一个安全的来源。使用G-banding设置,培训的核型显示保持正常状态甚至使15个月后(6]。至于immunocompatibility,考克等人说明培训表示HLA-ABC分子而不是HLA-DR,这表明它们免疫原性很差。当暴露于炎性刺激immunophenotype培训也没有改变,表明即使在炎症条件,培训可以被视为一个源免疫原性较差。此外,低免疫原性,培训具有免疫抑制功能。事实上,培训可以下调表达的淋巴细胞costimulatory分子刺激T细胞和抑制同种异体激活的激活和增生外周血单核细胞在活的有机体内和在体外。被移植到严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠,培训大大受损的移植物抗宿主反应,并允许更长的生存时间(19]。因此,培训免疫原性很差,可能会调整同种异体免疫反应。地窖接触和分泌的可溶性抑制因素免疫调制过程。然而,勒等。提出了啮齿动物SKPs通过Nf1的损失,是NF1-associated真皮纤维神经瘤的细胞起源(59]。支持这一假说,另一个人Iribar等人的研究发现许旺细胞前体CDH19标志和许旺细胞去分化标记Sox2显著调节纤维瘤的诊断病人。他们断定,雪旺细胞的去分化发挥了作用在人类真皮纤维神经瘤发展,同时提出了肉瘤雪旺细胞形成培训(60]。作为一个整体,需要进一步研究以阐明清楚的理解生物安全培训,尽管大多数研究认为培训是“安全的嫁接来源。”
神经电位由培训在活的有机体内建议他们可能是细胞治疗神经系统疾病。在两个月后把培训中侧右心室SCID小鼠,这些细胞迁移到额叶皮层、纹状体和海马。在主机皮质纹状体水平和他们生成的细胞与神经细胞表型。额叶皮质,最积累是donor-derived星形胶质细胞。这些细胞有效地纳入白质区域邻近血管的主机和扩展过程的额叶皮质。没有donor-derived寡树突胶质细胞被发现在宿主的大脑32]。这是首先报道,培训不仅生存下来,而且可能分化移植后,为其进一步应用提供了坚实的基础。2014年,克劳斯等人直接将hSKPs-induced雪旺细胞移植到当地的SCID小鼠坐骨神经髓鞘脱失。四天后,发现许多人类细胞可以沿着轴突移植地区的一些调整。在移植后30天,一些人类细胞表达S100显示β和对齐的髓鞘,符合髓鞘许旺细胞表型(33]。培训的另一项研究支持,移植到老鼠颤抖的大脑可能导致髓紧凑,一种物质被认为是没有颤抖小鼠中枢神经系统的,暗示功能许旺细胞移植后的一代61年]。因此,培训是一种有前途的治疗脊髓损伤(SCI)。SCI的病理生理学是逐渐丧失引起的神经元,轴突,一级或二级损伤后胶质细胞的过程。巨结肠疾病的另一个潜在的应用程序,一个共同的neurocristopathy疾病在人类新生儿由于不完整的殖民肠神经节细胞。培训能够分化成肠神经元和神经胶质。一个来自体内的肠道外植体化验显示鼠标SKPs,分化成Ret殖民k−−/ kaganglionic后肠(62年]。尽管这项研究没有调查培训功能体外外植体,它更有可能的是,类似的现象可以预期在人类。
沈等人发现培训可以生成功能个cec上在活的有机体内和治疗角膜内皮功能障碍。通过注入这些hSKPs-derived个cec上兔子和猴子角膜内皮功能障碍模型,角膜的厚度显著减少,角膜的透明度大大提高治疗组。在注射后第七天,角膜变得清晰透明。共焦显微镜图片还显示,角膜后弹力层是由hSKPs-derived个cec上的多边形形状(36]。除了外胚层的细胞类型,培训也可以生成skeletogenic细胞,促进骨修复(38),分化成脂肪细胞,软骨细胞,肝细胞、胰腺细胞和其他细胞。
尽管越来越多的证据说明培训性质的实验室,没有培训的临床试验报告到目前为止据官方网站(临床试验https://clinicaltrials.gov/),没有研究已经报道了人类。因此,更多的工作需要做些培训之前转化为临床实践。最多的利益,进一步研究的可能性,使用功能衍生品如雪旺细胞和神经元细胞治疗临床疾病在人类和修复策略。
7所示。挑战和未来的角度
虽然再生医学培训都非常适合,因为他们的丰富来源,容易获取,和多能——他们仍然远离“现成”的产品因为一些问题仍然未得到解决。首先,文化培训大量的优化方法和简单的程序尚未建立。尽管一些创新的协议已经提出了加强培训,这些协议还远没有广泛应用。其次,在调查进展甚微的性质培训在活的有机体内在体内,其长期行为仍然是未知的。充分认识生物安全与效率,应该进行更多的研究。第三,培训是异构的球体组成不同的细胞使其净化的必要性,因为它仍然是未知的异质性是否会影响临床应用培训功能。最后,在调节培训功能的可能机制并不彻底。然而,理解底层机制是进一步临床应用更重要。在不久的将来,培训可能成为细胞治疗各种疾病的支柱。
缩写
| SCs: | 干细胞 |
| SKPs: | 烹饪和前体 |
| bFGF: | 碱性纤维母细胞生长因子 |
| 表皮生长因子: | 表皮生长因子 |
| 培训: | 人类皮肤取出前体 |
| 正常:关系 | 生成受体 |
| HLA: | 人类白细胞抗原 |
| GFAP: | 胶质原纤维酸性蛋白 |
| 个cec上: | 角膜内皮细胞 |
| 高山: | 碱性磷酸酶 |
| 2 d: | 二维 |
| 3 d: | 三维 |
| 则: | 诱导多能干细胞 |
| TGF: | 转化生长因子 |
| FOXO3: | Forkhead盒O3 |
| SCID: | 严重联合免疫缺陷 |
| 科学: | 脊髓损伤 |
| αSMA: | α平滑肌肌动蛋白 |
| DMEM: | 杜尔贝科鹰介质的修改 |
| IBMX: | 3-Isobutyl-1-methylxanthine |
| 的边后卫: | 胎牛血清 |
| SMC: | 平滑肌细胞 |
| PDGF: | 血小板源生长因子。 |
的利益冲突
作者没有利益冲突声明。
作者的贡献
戴俄文和魏华同样这项工作。
确认
这项工作是由中国国家自然科学基金(没有。81673084)和四川省科学基金会(没有。2015 sz0061)。资金来源都没有参与研究设计;在收集、分析和解释数据;在报告的写作;在决定提交出版的文章。