目前干细胞软骨再生的治疗策略

文摘

动关节的关节软骨破坏的过程是渐进的,不可逆转的。这种破坏是极其困难的管理和使研究人员,临床医师和病人。患者经常服用药物来控制他们的疼痛。手术通常是执行当疼痛变得无法控制或关节功能完全失败。有一个未满足的治疗软骨缺损临床需要再生策略没有手术由于缺少合适的再生策略。临床医生和科学家们试图解决这个使用干细胞,具有再生各种组织的潜能。干细胞治疗软骨可能是一个理想的目标,因为它有一个出了名的差再生潜力。在本文中,我们描述的过去,现在和未来战略再生软骨的病人。具体地说,本文比较了外科再生技术(微裂缝)和细胞疗法、细胞疗法和没有脚手架,并与非聚合和聚集细胞疗法。我们也回顾chondrogenic潜在的细胞根据他们的起源,包括自体软骨细胞、间充质干细胞,诱导多能干细胞。

1。介绍

关节软骨是一种透明衬里的关节面骨结束。它缓冲外部影响,减少骨骼之间的摩擦,使光滑和无痛的联合运动。在软骨和软骨细胞细胞类型是唯一的居民占关节软骨的1 - 5%。这些细胞产生胶原蛋白,蛋白聚糖,透明质酸,细胞外基质(ECM)成分,构成软骨的力学性能1,2]。

软骨损伤的特点是渐进破坏关节软骨,无血管的结缔组织的再生能力较差。关节软骨的损伤会导致疼痛,肿胀,有限的活动范围由于其内在疗愈能力有限。它可以由病理变化造成的创伤,老化、遗传因素和炎症。肥大软骨细胞和滑膜膜软骨退化,慢性关节炎和系统性炎症也会发生,导致不同程度的chondrocytosis,软骨细胞的生长(3]。

已经几次再生关节软骨。治疗取决于病人的状况和软骨损伤的程度。在完整的软骨变性,全关节置换是唯一的选择4]。微裂缝和自体软骨细胞移植(ACI)提出了作为部分软骨病变的手术选择。中间的软骨变性患者严重程度,组织工程方法成为一种手段比微裂缝或ACI更有效地恢复软骨。

机械、生物和化学支架可以减轻与细胞治疗相关的缺点,如集成到宿主组织不足,不准确的细胞,和健康的软骨变性。scaffold-based方法开发更好的软骨病变填充自体软骨细胞。软骨细胞在3 d环境中传播时,更少的发生去分化和更多的透明软骨形式(5]。hyaline-like软骨的发展提高了透明质酸含有自体软骨细胞支架植入到缺陷网站(6,7]。然而,尽管努力使用生物反应器模拟体内环境,外生机械,与相同的属性和生化刺激,组织健康的软骨没有生成(4]。此外,(即有限数量的主要细胞。,chondrocytes) reduces the effectiveness of this treatment. Consequently, stem cell-based methods have been developed to avoid the disadvantages associated with primary chondrocyte therapy.

骨的各种类型的干细胞,骨髓来源干细胞(bmsc)和脂肪干细胞(对asc)有很多优势临床应用由于其chondrogenic潜力(8- - - - - -14]。更容易分离和增殖bmsc对asc和比原发性软骨细胞。这些干细胞能够分化成骨头和软骨,从而再生软骨体外和体内14- - - - - -19]。然而,很难获得大量的bmsc对asc和通过离体培养,因为广泛扩张可以改变他们的表型(20.- - - - - -23]。此外,bmsc的产量和分化能力下降与年龄和致病条件(14,24,25]。由于这些原因,软骨再生新的细胞来源是必要的。

在这方面,诱导多能干细胞(万能),可无限增殖和大量生产,感兴趣的。人类(hiPSCs)的细胞则是多能,类似于胚胎干细胞(ESCs),但没有相关的伦理问题。hiPSCs可以生产没有将基因整合到基因组并能分化成软骨细胞体外(14,26]。此外,大量的hiPSC图书馆准备从捐赠者,纯合子的人类白细胞抗原(HLA),建立了。从理论上讲,一个相对较少的这些HLA-homozygous hiPSC线将覆盖大部分的人口。

在这里,我们总结的缺点和结果不同的软骨再生策略和描述各种尝试治疗软骨缺损。此外,本文讨论了干细胞工程修复软骨,关注hiPSCs。最后,未来使用hiPSCs软骨再生。

2。关节软骨

关节软骨是一种弹性结缔组织,覆盖在动关节骨骼的末端。它是由和软骨细胞组成。在开发期间,骨骼组织(包括软骨)来自中胚层胚芽层。间充质组织来源于中胚层分化为软骨细胞。软骨细胞产生ECM蛋白质,富含蛋白聚糖。积累的ECM蛋白质表面润滑,这意味着它可以传输负载没有摩擦27]。关节软骨与各种复杂的组成细胞和ECM网络。软骨细胞的特点,关节软骨中唯一的细胞类型,根据他们的不同位置。软骨细胞位于关节软骨表面产生lubricin,蛋白质特定润滑表面的表面区域(28]。软骨细胞在中间区域合成大量aggrecan [29日]。在更深的地区,大多数软骨细胞处于静息状态和合成蛋白聚糖。大多数合成蛋白质noncollagenous;因此,II型胶原周转率相对较低。这种蛋白的半衰期为117年,除非它被损坏(30.]。

有三个主要类型的软骨:弹性软骨,纤维软骨,透明软骨。在膝关节关节软骨是透明软骨组成。的平滑度和灵活性之间中间透明软骨的弹性软骨和纤维软骨。在透明软骨生成损伤后,scar-like组织(纤维软骨)形式。几乎是不可能透明软骨修复缺陷通过透明软骨再生。此外,无血管的关节软骨,alymphatic, aneural。血管的缺乏限制了其再生能力。封锁的血管密度ECM阻碍营养物质运送到受损的软骨。软骨细胞得到营养物质通过ECM扩散。低比例的软骨细胞(1 - 5%)也阻碍了恢复受损的软骨(1]。

OA老化有关,是最常见的关节炎和在全世界影响数以百万计的人。疼痛通常是导致关节(关节软骨的退化31日]。即使是最小的损伤会影响整个软骨组织在损伤的进展。这种软骨代谢失衡造成的损害(32]。分解代谢和合成代谢因素之间的不平衡导致软骨退化(32]。病理改变包括软骨退化、骨赘形成和炎症。软骨变性是由纯粹的压力所产生的机械力在关节表面。这种刺激静软骨细胞的增殖,增加其生产的ECM蛋白质和ECM-degrading酶(33]。disintegrin和血小板反应蛋白图案的金属蛋白酶、胶原酶、基质金属蛋白酶降解胶原蛋白II和软骨基质中蛋白聚糖(2,34]。这一连串事件降解透明软骨,最终被纤维母细胞所取代。因此,透明软骨被纤维软骨,导致僵硬和额外的疼痛。各种策略开发治疗受损的软骨和讨论综述(图1)。一个重大的挑战是防止软骨损伤和再生透明软骨。

3所示。目前修复软骨再生的方法

3.1。微裂缝

微创手术创造了小骨头骨折在底层。这些骨折导致受损的关节软骨愈合反应通过释放bmsc [35]。骨髓“血块”可以坚定地坚持粗糙表面的断裂的骨头36,37]。这可以促进关节软骨的愈合与纤维组织或hyaline-like软骨。许多研究报告的结果,微裂缝(36,38- - - - - -43]。在90年代末,英国宇航系统公司等人发现II型胶原在骨折部位46温和OA患者在手术后1年44]。然而,研究报告的好坏参半的结果在短期,中期,长期(45- - - - - -47]。病人的数量和质量的bmsc被认为影响了这种方法的有效性。此外,术后康复治疗被认为是手术本身一样重要。组织形成的微裂缝开始成熟后在手术后8周48]。米勒等人报道,病人持续被动运动(CPM)治疗了微裂缝后更好的恢复。他们得出的结论是,应该执行CPM治疗8周后这个过程(49]。基于这项研究,CPM 6 - 8小时每天建议病人在接受微创手术(50]。然而,随机细胞分化诱导微裂缝往往会导致纤维软骨的形成,这是提高成绩不如hyaline-like软骨(44,51]。没有透明软骨的机械刚度,18 - 24个月后再生组织可能恶化,骨刺可能开发由于渗透的软骨下骨在25 - 50%的病例4,52]。此外,微裂缝不太有效的恢复大病变(> 3厘米²)[53]。尽管有这些缺点,美国食品和药物管理局(FDA)和许多医生相信微裂缝是一个很好的选择为软骨复苏(54,55]。

3.2。ACI和Matrix-Induced ACI

ACI是最有前途的一个程序长期软骨再生(53,56- - - - - -60]。这种方法涉及到获取软骨从low-weight-bearing联合通过打孔切片的一部分。孤立的软骨保持酶消化分离软骨细胞。这些软骨细胞体外扩大,移植到软骨缺陷,并与骨膜瓣密封膜。不同于微裂缝,ACI软骨缺损的治疗是有效的(> 3厘米²)。ACI公司取得了良好的临床和功能结果在持续超过10年的长期研究61年- - - - - -63年]。此外,因为这个过程使用病人自己的细胞,避免潜在的免疫并发症(64年,65年]。Matrix-induced自体软骨细胞移植(》)是一种ACI的改进版本。与ACI》涉及的文化自体软骨细胞在I型或III型胶原膜植入前(66年,67年]。这样就避免了需要与水密缝合关闭缺陷(66年]。它还有助于保持关节软骨细胞的特点在关节内软骨细胞的长期培养和防止泄漏(68年,69年]。然而,ACI和》都包含两个侵入性程序,即收获软骨细胞并移植回病人。肥大的皮瓣(也是一个问题53]。猪等替代膜,膜胶原蛋白和透明质酸的混合物组成的支架,已使用;然而,他们可以增加免疫反应(6,70年,71年]。这些程序的有效性也限制了低收获软骨软骨细胞的数量。事实上,软骨细胞占不到5%的软骨组织(60]。因此,这些细胞必须扩大体外。然而,作为一个单层培养的软骨细胞去分化。软骨细胞失去chondrogenic特征在一个单层,开始表达成纤维细胞标记如胶原蛋白类型。因此,使用这样的自体软骨细胞可能是纤维软骨的组织再生(26,72年]。

4所示。方法来改善软骨形成

4.1。支架

软骨形成被认为需要一个三维(3 d)环境。在开发期间,软骨形成是一个复杂的过程受各种生长因子和机械因素。支架通常用于促进体外组织工程软骨形成(73年,74年]。关节软骨细胞和间充质干细胞(msc)是最常用的细胞在软骨组织工程75年- - - - - -77年]。的结构、机械和支架的生化特性可以提高细胞生存和分化。脚手架的类型(即。,natural or synthetic) is also important [78年- - - - - -81年]。天然可降解聚合物包括多糖、分布和蛋白质,而合成可生物降解聚合物包括poly-lactic酸,poly-glycolic酸,poly-lactic-co-glycolic酸(PLGA) [82年]。支架理想情况下应该吸收或可生物降解和支持软骨形成。在创建一个脚手架时,应努力确保它促进细胞迁移。此外,孔隙结构,弹性,表面能参数,分子移动,化学功能,pH值,应该考虑和降解的支架,以及任何炎症反应可能引起83年]。3 d支架比二维(2 d)支架软骨再生。的确,3 d结构支持细胞聚集,模拟体内环境,改善细胞通讯和ECM生产(84年,85年]。然而,支架也有缺点。软骨细胞去分化、细胞死亡和细胞已报告泄漏scaffold-based软骨形成。此外,一个不合适的细胞分布,可怜的分化,不足与宿主组织集成使用支架与细胞移植相关的常见问题(78年,86年,87年]。提出了例如,PLGA支架结构支持软骨形成(88年]。虽然这些支架的治疗取得了有前景的结果全厚度与bmsc体内软骨缺陷,他们的治疗效果是由于疏水性PLGA有限。正在努力改善细胞附件功能,和分化,以及支架本身(89年- - - - - -91年]。

4.2。Scaffold-Free 3 d文化:颗粒和Micromass文化

软骨形成低效率在一个二维单层比在3 d文化系统(92年]。传统单层培养软骨细胞的去分化软骨工程是一个重要问题。在这样一个系统中,软骨细胞失去原始的特征,获得成纤维细胞的形态,和分泌胶原蛋白I型,而非胶原蛋白II型或aggrecan [93年,94年]。然而,这些变化是相反的肉瘤,软骨细胞成为支流(95年]。支架的出现之前,scaffold-free三维培养系统通常是用于软骨形成。这些系统模仿前软骨凝结在发展中肢芽,让细胞相互作用在软骨发育[一样96年- - - - - -99年]。细胞密度显著影响chondrogenic分化(One hundred.]。球文化和micromass文化仍然是最广泛使用的方法用于软骨细胞治疗和研究。颗粒生长板软骨细胞的文化最初是用作体外软骨矿化模型(101年,102年]。后来的研究用这个系统来研究生长因子对软骨细胞表型的影响,ECM蛋白质的性质,和软骨细胞的生物能学(103年- - - - - -106年]。软骨形成和透明软骨工程的早期研究表明,颗粒文化支持使用msc在体外软骨形成或软骨细胞生长因子的存在。在颗粒细胞分化文化类似于本机关节软骨的分布、密度、和矩阵组成,没有细胞表型变化或支架的援助93年,97年]。Micromass文化是第一次做鸡肢芽msc和最近被用于软骨形成。一些研究声称,软骨形成更高效micromass文化比颗粒文化。胶原蛋白类型和X chondrogenic细胞的调节在较大的颗粒。细胞被困在中部地区往往未分化和坏死107年- - - - - -109年]。尽管micromass文化支持高效的软骨形成,其他研究表明,颗粒文化更适合临床使用,因为数量有限的软骨细胞生成通过micromass文化和去分化的倾向(110年]。更高的细胞的数量需要生成一个cartilage-like构建没有人造支架或矩阵(111年,112年]。球文化和micromass文化流行的方法使用各种类型的细胞体外软骨形成。

5。成人干细胞软骨形成

5.1。伴着

msc可以很容易地收集来自各种组织;然而,他们通常从人类骨髓分离(图2)[113年- - - - - -115年]。首次提出骨髓基质细胞分化为间充质细胞,包括脂肪细胞和成骨细胞,通过这一过程被称为mesengenesis在80年代末,这些细胞被名为“bmsc的结果。“这个过程使用各种在体外实验研究。此外,bmsc已经被用来治疗一些疾病116年- - - - - -121年]。在创伤后OA模型中,注入自体bmsc改善关节软骨的再生表现出关节变性和骨赘的形成。虽然自体软骨细胞终末分化,bmsc可以分化成各种细胞类型(例如,成纤维细胞和软骨细胞)内接头(122年]。注入的bmsc也可能引起免疫调节作用。然而,bmsc的multipotency是用于组织工程软骨再生。经过几次试验和单层文化,聚集的bmsc,暴露出组合培养基培养接受chondrogenic分化(25,97年,123年- - - - - -125年]。bmsc /自体软骨细胞的一个重要的优势是,他们更容易扩大体外。体外chondrogenic bmsc的分化已被广泛研究。治疗与纤维母细胞生长因子2 (FGF2)增强了这些细胞的增殖和chondrogenic潜力(126年,127年]。FGF2-treated bmsc演示增强扩张(增加3500倍与参与bmsc),蛋白聚糖的积累增加,胶原蛋白类型的差别,对这些基因的表达。然而,bmsc也有几个缺点。病人可以在骨髓收获体验痛苦,体积小的骨髓,收益率低数量的bmsc [128年]。~ 1500 - 3000 fibroblast-forming殖民地获得从1毫升的人类骨髓,它已经表明,骨髓活检大于2毫升明显受到外周血(129年]。体外扩张需要获得足够数量的bmsc临床使用,特别是在老年患者和那些将有几个bmsc130年]。类似于软骨细胞,大多数成人干细胞(例如,bmsc)展览减少潜在增殖和降低分化后4 - 6段(20.,131年]。Dexheimer等人报道,更快的bmsc与扩散形成较大的颗粒,减少凋亡细胞,和更高的表达蛋白聚糖和胶原蛋白II型(132年]。尽管bmsc的优势,培养bmsc的缓慢增殖率和少量的细胞从骨髓必须获得解决。

5.2。对asc

对asc隔离获得间质血管分数(SVF)的脂肪组织。这是细胞颗粒产生lipoaspirate时,抽脂手术的废品,消化与胶原酶等酶(133年]。连续使后,贴壁细胞对asc是收获。对asc和SVFs治疗的潜力。微创收获过程对asc和更高的产量和SVFs导致这些细胞被认为是bmsc的替代品。总共1×10⁷5×10⁸通常从300毫升lipoaspirate也和他们的生存能力是> 90%134年- - - - - -137年]。这个收益率高于骨髓吸入物、和对asc也据说容易文化、繁殖快,可以培养时间变得衰老(134年,135年,138年- - - - - -140年]。乔等人研究了关节内注射的治疗效果对asc软骨再生在早期阶段临床试验(141年]。而对asc改善软骨再生,大量研究报道,对asc可以分化成软骨(142年- - - - - -144年]。有人建议,对asc chondrogenic潜力大于软骨细胞。的确,对asc可以维持他们chondrogenic潜力超过15章节,长于软骨细胞(145年- - - - - -147年]。然而,另一项研究报道,对asc再生软骨不如bmsc有效(148年]。Diekman等人证实,bmsc表示COL2A1水平高于对asc和合成更多的ECM在海藻酸培养珠子和支架(149年]。冬天等人表明对asc chondroinductive环境不敏感,他们的区别不太完整的bmsc文化[2周后148年]。软骨形成的bmsc比对asc的3 d系统。然而,基因表达aggrecan在bmsc对asc在高于BMP6的存在,虽然表情chondrogenic标记bmsc的是高于对asc TGF的存在β。哈米德等人建议对asc通道4(之前应该有区别150年]。此外,在这个研究中,表达式chondrogenic标记高度调节1周,但减少周2和3。另一方面,基因表达的X型胶原在星期3,高度不受监管的肥大的说明。Chondrogenic感应只有1星期后突出的区别,即使对asc之前使用通道4。

5.3。使用成人干细胞软骨再生

手术诱导软骨损伤动物模型,关节内注射标记bmsc促进软骨组织再生与对照组相比。这个结果是可能的,尽管相对较低的检测标记bmsc的软骨再生的网站(151年]。此外,当注射bmsc在猪模型中,软骨再生效果也显示(152年]。

黑色等的研究评估的临床影响派生msc在安慰剂对照试验表明,本地的运动范围显著改善单一注射后关节内的脂肪msc (153年]。

mono-iodoacetate-induced鼠模型中,使用关节内的bmsc允许动物分布明显更大的重量通过肢体的影响。尽管这个功能增强,没有统计显著差异出现在治疗和对照组之间。此外,软骨和软骨下骨病理学观察和滑膜炎症与BMSC注射治疗组(154年,155年]。阶段I和II试验对asc使用治疗骨关节炎(OA) MRI显示软骨再生的证据141年]。组织学评价胶原蛋白II型显示透明软骨再生注射后1亿年msc为单个关节,其次是6个月的随访。

观察到积极的临床结果的基础上利用msc与关节镜技术,看到等人发表了一篇随机对照试验,包括使用外周血msc与关节镜微创/ microdrilling软骨的病变(156年]。因此,组织学分析和核磁共振评价表明,软骨修复的质量明显改善参与者收到了msc。另一项研究报告了随机临床试验评估msc关节镜部分医疗半月板切除术后的疗效[157年]。研究显示改善临床结果与对照组相比也显示证据半月板再生的体积。尽管临床研究显示不一致的结果,关节内注射的好处msc对asc或改善药物治疗被证明是通过各种研究。

6。万能的软骨形成

6.1。万能

hiPSCs转导小鼠成纤维细胞于2006年首次生成的四个实验因素(Klf4, Oct3/4、原癌基因和Sox2)。2007年,hiPSCs成功由引入KLF4, OCT3/4, SOX2,和原癌基因或SOX2 OCT3/4, NANOG, LIN28人类体细胞(158年,159年]。随着人类的ESCs hiPSCs有相似的特征。然而,尽管hiPSCs可以无限增殖和自我更新,他们没有相关的主要伦理问题复杂化的ESCs的使用。因此,hiPSCs最近强调作为再生医学(另一种细胞源14,160年]。

最初,hiPSCs经常产生皮肤真皮成纤维细胞。然而,需要开刀手术获得这样的细胞。其他目前用于体细胞重编程,如血细胞,尿液细胞和角化细胞更容易获得(161年- - - - - -166年]。脐带血细胞、牙髓干细胞,联合synoviocytes,成体干细胞(例如,对asc和msc)也被成功地重新编程(160年,167年,168年]。尽管早些时候协议使用慢病毒或逆转录病毒转导以促进实验因素的集成,hiPSCs应该产生通过nonintegrating临床使用的方法。仙台病毒、游离向量、小分子、蛋白质、和修改rna通常用来避免集成(169年- - - - - -171年]。hiPSCs现在广泛用于再生医学,药物筛选,甚至“disease-in-a-dish”建模。

胰腺是由小鼠囊胚注入老鼠则缺乏一个胰腺由于Pdx1基因的删除172年]。从理论上讲,可以生成人体器官通过注入hiPSCs猪囊胚;然而,这是复杂的技术问题(26,173年]。此外,iPSC-derived器官的血管形成的宿主动物(26]。这不是一个问题对软骨的一代,因为这个组织是无血管的26]。重组具有多能性的细胞则在移植到免疫缺陷小鼠,它们产生畸胎瘤包含组织的所有三个胚芽层(内胚层、中胚层和外胚层)。Cartilage-like组织中发现畸胎瘤,证明hiPSCs可以接受软骨形成。因此,hiPSCs是一种很有前途的chondrogenic组织工程的细胞来源。

6.2。软骨再生使用hiPSCs

与万能干细胞再生医学的最终目标不仅是产生细胞的兴趣也创建新的组织或器官(26,172年,173年]。畸胎瘤hiPSCs产生包含透明软骨。这表明hiPSCs可以分化成人类软骨和软骨细胞(26]。之前hiPSCs的出现,试图诱导软骨形成的人类的ESCs通过三个方法:coculture关节软骨细胞,诱导MSC-like细胞,和直接转换26,174年- - - - - -182年]。

协议用于诱导chondrogenic分化hiPSCs大多来自这些方法(表1)。使用最广泛的方法诱发MSC-like细胞hiPSCs(图3)。有几个协议获得这些祖细胞,可大致分为两种类型:(1)单层培养和(2)胚状体的身体(EB)的形成。后者是更常用,因为它涉及通过已定义过程中胚层诱导。在早期的研究中,梅德韦杰夫等人试图诱导软骨形成的hiPSCs来源于胎儿从人类胚胎神经干细胞183年]。软骨细胞产生这些hiPSCs展出软骨细胞的特征。从这些hiPSCs EBs生成,和媒体被chondrogenic分化培养基所取代。ECM的表达蛋白质,如胶原蛋白II型和早期chondrogenic标记Sox9随后被检测到。2012年,朱镕基等人也感应chondrogenic EBs的分化。小山等人提出了一个更明确的协议2012年hiPSCs体外软骨形成(184年]。在EBs通常用于分化成三胚层细胞系,他们提出了一个新的协议间叶细胞祖细胞谱系分化。EBs生成和生长在gelatin-coated板块为1周,之后mesenchymal-like细胞或细胞产物”从这些EBs发芽。结果细胞有相似的特点,msc、如CD44的表达,CD90、CD73和CD105。作者报道,1 - 2×10⁴细胞/厘米²是理想的密度增殖。结果细胞分离、细胞团被移除过滤器,chondrogenic分化诱导。Chondrogenic颗粒产生hiPSC-derived间叶细胞祖细胞有软骨形态和包含空白。ESCs hiPSCs和人类都成功地分化向chondrogenic沿袭使用这个协议。我们组还证实成功chondrogenic分化绳血液hiPSCs通过这种方法(14,185年]。2012年,Diekman等人提出一种不同的方法对软骨形成186年]。他们孤立的细胞表达胶原蛋白II型与绿色荧光蛋白(GFP)标记和诱导软骨形成。小山的类似研究et al ., chondrogenic分化并不直接引起的。hiPSCs首次predifferentiated chondrogenic血统micromass文化,然后这些细胞被分离和聚合颗粒文化。丸GFP +细胞产生更大、更多的糖胺聚糖ECM蛋白质比GFP−细胞。作者得出的结论是,这个协议增强了chondrogenic工程组织的性质和可能有一种方法来消除未分化的细胞,这可能有助于移植hiPSCs的未来。然而,协议使用EBs是耗时和被认为产生异构的人口由于细胞数量的变化和EB的大小(175年]。一些研究人员试图区分hiPSCs直接通过micromass EBs或颗粒文化使用特定的媒介,一个覆盖矩阵,或支线层(187年- - - - - -189年]。然而,这些方法影响相关的信号通路。因此,一种快速、廉价、高效的协议是未来所需的应用程序。

6.3。软骨再生使用hiPSCs OA的动物模型

chondrogenic细胞的治疗能力来源于hiPSCs最近在几个动物模型研究。2014年,柯等人通过EB文化和使用海藻酸诱导chondrogenic分化珠子(16]。在EBs细胞分离和转移到micromass chondrogenic分化媒介文化。生成的chondrogenic丸或海藻酸水凝胶植入骨软骨缺损上创建免疫缺陷鼠的膝沟。12周后,缺陷满心光滑和公司组织,而对照组有粗糙表面或没有纤维组织。组织学分析也证明了修复蛋白聚糖的叛逃的地区。然而,作者报道,矩阵的形成是由于外源的万能干细胞植入不足,尽管hiPSCs植入的持久性和免疫缺陷鼠的使用。

2015年,生成Nejadnik等人chondrogenic丸ASC-derived hiPSCs [131年]。他们诱导分化为间充质通过单层培养血统,因为他们觉得EB文化给了不一致的结果。确认的质量iPSC-derived间充质细胞,hiPSC-derived msc和hiPSC-derived chondrogenic细胞分化21天播种到聚乙二醇和硫酸软骨素methacrylate-based脚手架。颗粒骨软骨缺损被植入一个裸大鼠股骨的生成和评估通过串行成像为6周。磁共振成像显示,植入没有形成畸胎瘤,还发现含水量降低,增加ECM的形成,表明成功的移植。此外,体内细胞扩张和支架最终被降解。组织学证实移植hiPSC-derived msc和chondrogenic颗粒缺陷,所展示的阿尔新蓝和II型胶原染色。Chondrogenic球矩阵表达高水平的蛋白质;然而,hiPSC-derived msc也促进了再生。

软骨细胞来源于hiPSCs被植入非手术味精碘乙酸- (MIA)诱导软骨受损的大鼠模型。朱等人产生chondrogenic颗粒通过EB文化和诱导细胞产物(190年]。而不是用子弹射击结果细胞,他们在媒体chondrogenic分化培养他们。在这些条件下,发芽结果细胞被认为是软骨细胞。此后,作者注入500μL细胞悬液(1×10⁶细胞/毫升)的联合使用米娅诱导损伤后1周。15周后,大鼠膝关节被microcomputed断层扫描成像,通过组织学分析。比hiPSCs hiPSC-derived软骨细胞有一个更好的再生能力。组织学分析显示,注射hiPSC-derived软骨细胞软骨表面局部和增加蛋白聚糖的水平。增生的软骨细胞也被检测到,这表明软骨被修复。作者得出结论,关节功能提高;然而,大鼠关节仍然显示运动障碍,没有完全修复,表明干细胞注射可以改善关节修复,但只在早期阶段的破坏。

2015年,山下先生等人植入hiPSC-derived chondrogenic细胞成更大的动物。软骨结节生成的单层hiPSCs [191年]。这些结节最终分开盘的底部,并转移到培养皿在悬浮培养和维护了42天。结节没有形成肿瘤,当皮下植入重度联合免疫缺陷(SCID)小鼠。软骨微粒维持28天SCID鼠植入骨软骨缺损。修复缺陷的确认在移植后4周,胶原蛋白II型的高表达。ECM的表达蛋白在结节保持更高的42天比维持28天。来确定人类细胞迁移到其他器官或淋巴结,作者研究了人类的表情β肌动蛋白。这不是在其他器官中发现,多能性标记并不表示在结节分化21天或更长时间。最后,结节被植入软骨缺陷mini-pigs重27.0 - -30.5公斤,与免疫抑制剂环孢霉素治疗。移植后1个月的结节是可行的。Chondrogenic结节表达人类波形蛋白和关节软骨与主机集成。作者的结论是,结节heavy-weight-bearing条件下甚至可以修复软骨缺损。

综上所述,这些结果表明潜在的hiPSC-derived软骨关节软骨再生颗粒。早期阶段动物试验正在进行,结果将有助于这个过程转化为未来的临床应用。

7所示。结论和未来的角度

软骨损伤关节破坏,引起疼痛,身体残疾,和发病率。然而,软骨的无血管的特性和较低的有丝分裂活动限制其内在的再生能力。虽然生物制剂可能缓慢软骨退化,促进软骨修复的最佳治疗尚未定义。

细胞治疗正在成为软骨再生的一种手段。分考虑之一是使用前细胞的稳定性。卢比奥和他的同事们询问当地的安全派生msc在2005年通过一项有争议的研究(192年]。bmsc免疫缺陷小鼠植入时,自发的干细胞突变和恶性肿瘤出现了。后被撤销证据后,研究表明,恶性细胞系特征与污染有关,但不是用msc (192年]。在类似的情况下,进一步研究长期培养的bmsc(恶性转变的证据)是基于同样的理由,(193年,194年]。重要的是,目前的临床试验表明,MSC治疗是安全的。安全已经证明通过最近的系统回顾和荟萃分析的共有1012名参与者接受血管内MSC治疗各种临床症状,包括缺血性中风、克罗恩病、心肌病、缺血性心脏病(155年,195年]。对于hiPSCs,畸胎瘤形成的风险是最大的问题,不容忽视。因此,(即所做的努力。,complete differentiation or purification) to avoid this risk are necessary.

自体软骨细胞和成年干细胞(即。,伴着和对asc) are generally used for cartilage regeneration; however, the low numbers of these cells limit their clinical applications. By contrast, hiPSCs can proliferate indefinitely and support chondrogenesis in vitro and in vivo. Using a defined quality control process and a chondrogenic differentiation protocol, hiPSCs can become the ideal cell source for cartilage engineering.

hiPSCs有几个优势。从理论上说,这些细胞可以从每个个体生成;然而,这并不是经济可行的。从病人在昂贵的准备hiPSCs良好生产规范(GMP)指南196年]。因此,的概念HLA-homozygous hiPSC银行出现了(197年]。据估计,100年HLA-homozygous hiPSC线从每个种族将覆盖大部分的人口198年]。软骨被认为是一个immunoprivileged组织由于其无血管的和alymphatic性质和密集的ECM周围软骨细胞(26]。使用hla hiPSCs可能减少免疫排斥在同种异体移植软骨工程(图4)。抗原,HLA-B, HLA-DR拒绝[密切相关199年,200年]。许多研究人员目前正在为这三个HLA收集细胞纯合类型;然而,进一步的研究是需要改善neocartilage同种异体移植。

目前许多软骨移植过程涉及手术。对膝关节造成进一步的损害可能加剧免疫反应和阻碍经济复苏。因此,开发一个可访问的和非侵入性治疗可能是理想的软骨复苏。各种治疗方法包括一个注射的细胞(如Cartistem)。关节内注射bmsc对asc和被调查作为一种手段来治疗OA (201年- - - - - -208年]。朱等人证明hiPSC-derived软骨细胞也可能是临床适用的非侵入性程序。然而,软骨细胞3 d展示更好的生存能力和功能的条件。此外,细胞的特性更好的球状体比2 d系统(209年]。具体来说,细胞球状体有更高的生存能力和容易极化210年]。此外,scaffold-free的使用避免了球状体的植入支架相关的生物相容性问题。这种方法可以提高组织再生在临床的设置。可以自发地相互融合,从而增加球状体的大小(209年]。研究人员目前丸1 - 5×10⁵细胞生长因子的存在(98年,110年,211年- - - - - -214年]。巴布尔等人称为聚合“macropellets”和报道,这样大的球状体(1 - 2毫米)的特点是再分化,不同数量的ECM沉积在整个颗粒(215年]。使用microwell技术,他们生成测量193±20“研究”μm。这些小颗粒产生更高水平的ECM蛋白质,这被认为是与增加细胞与周围环境的联系。综上所述,我们认为,关节内注射最小化chondrogenic颗粒或球体是理想的再生受损软骨(图5)。

hiPSCs再生软骨的潜力还没有被研究在临床前或临床研究(216年]。然而,使用hiPSCs软骨的研究可以促进他们的应用程序在其他领域,包括组织工程、药物筛选、建模软骨或骨相关的各种疾病。有定义的协议(例如,统一EB一代,定义细胞产物的生产,和增强chondrogenic分化),它可能会产生球状体的hiPSCs欣然接受chondrogenic分化(图6)。此外,xeno-free组件的使用,GMP实践,和其他质量控制方法,例如清除致瘤的细胞,需要临床使用。这些过程可能允许生产动物部分流细胞从hiPSCs tumorigenecity较低。组织工程的高成本也可以降低使用homozygous-HLA hiPSCs需要最小的生物和化学治疗。总之,hiPSCs可能在软骨再生开辟一个新时代。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

这项工作是由韩国医疗技术研发的资助项目,省卫生、福利和家庭事务,大韩民国(HI16C2177和HI16C2438)。

引用

1. a . m . Bhosale j·b·理查森,“关节软骨:结构、损伤和审查管理”英国医学公告,卷87,不。1,第95 - 77页,2008。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. m·h·李·r·肖,j·b·李和朱问:“再生软骨修复治疗骨关节炎的方法,”骨关节炎和软骨,25卷,不。10日,1577 - 1587年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. t人民行动党和a . Korb-Pap软骨损伤骨关节炎和类风湿性arthritis-two不平等的兄弟姐妹,”自然评论风湿病学,11卷,不。10日,606 - 615年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. e·a·Makris a . h . Gomoll k . n . Malizos j . c . Hu和k . a . Athanasiou”修复关节软骨组织工程技术,“自然评论风湿病学,11卷,不。1,还是,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. m·m·j·卡洛·j·埃曼·m·m·e·Coolsen et al .,“再分化的人类关节软骨细胞肉瘤:比较2 d和3 d的文化,“骨关节炎和软骨,20卷,不。10日,1170 - 1178年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. m . Marcacci m . Berruto d Brocchetta et al .,“关节软骨工程Hyalograft®C:三年的临床结果,“临床骨科和相关研究卷,435年,第105 - 96页,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. e .今敏g .变动m . Berruto et al .,“在高层男性足球运动员:关节软骨治疗的前瞻性对比研究关节镜代自体软骨细胞移植与微裂缝,“美国运动医学杂志》上,39卷,不。12日,第2557 - 2549页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. y张成泽、h·荣格和j . h .榉”Chondrogenic脂肪中提取干细胞的分化诱导离心重力,”《可视化实验,120卷,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. j·m·加西亚l . Mendonca r·黑雁m . Abud c . Regatieri,想一想b迪尼斯那样不知满足、“干细胞治疗视网膜疾病,”世界干细胞》杂志上,7卷,不。1,第164 - 160页,2015。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. j . j . El-Jawhari y . m . El-Sherbiny e·a·琼斯和d . McGonagle“间充质干细胞、自身免疫和风湿性关节炎。”QJM,卷107,不。7,505 - 514年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. p·k·古普塔,a . k . Das a . Chullikana和a . s . Majumdar“间充质干细胞在骨关节炎软骨修复。”干细胞研究与治疗,3卷,不。4,p。2012。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. a . m . Mozid m . Holstensson t Choudhury et al .,“临床可行性研究发现骨髓干细胞移植后血管生成在慢性缺血性心力衰竭,”核医学通讯,35卷,不。8,839 - 848年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. s . a . Fisher s . j . Brunskill c . Doree a . Mathur d·p·塔戈特和e . Martin-Rendon“干细胞治疗慢性缺血性心脏病和充血性心力衰竭,”Cochrane系统评价的数据库CD007888条,卷。4日,2014年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. y, y . a . Rim s·m·荣格和j·h·居,“脐带血细胞衍生细胞则作为一种新的候选chondrogenic分化和软骨再生,”干细胞研究与治疗,8卷,不。1,p。2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. m . l . de Vries-van Melle, m . s . Tihaya n .散步流言et al .,“Chondrogenic分化人类骨骨髓来源的间充质干细胞在模拟骨软骨环境依赖于水凝胶,”欧洲细胞和材料27卷,第123 - 112页,2014年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. j . y . Ko, k金,美国公园,和g . i . Im”体外软骨形成和体内骨软骨缺损修复人类诱导多能干细胞”生物材料,35卷,不。11日,第3581 - 3571页,2014年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. s . Wakitani k .并且绕着圆圈圈打转,t .山本m .齐藤n .村田和m . Yoneda“人类自体文化扩大了骨髓间充质细胞移植修复软骨缺损的骨关节炎的膝盖,“骨关节炎和软骨,10卷,不。3、199 - 206年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. h . Nejadnik j . h .回族e·p·冯Choong b . c . Tai和e·h·李,“自体骨骨髓来源间充质干细胞和自体软骨细胞移植:一项观察性队列研究,“美国运动医学杂志》上,38卷,不。6,1110 - 1116年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. r .四开,m .极端r . Cancedda et al .,“骨缺损的修复使用自体骨髓基质细胞,”《新英格兰医学杂志》上,卷344,不。5,385 - 386年,2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. l . a . Solchaga k . Penick v . m . Goldberg ai Caplan, j . f .翻滚,“纤维母细胞生长因子2增强扩散和延迟损失chondrogenic人类成人从骨髓间充质干细胞的潜力,”组织工程部分,16卷,不。3、1009 - 1019年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. m·a·巴克斯特,r·f·韦恩Jowitt、j . e .幽灵l . j .费尔贝恩和Bellantuono,“端粒长度的研究揭示了快速老化的人类骨髓基质细胞体外扩张后,“干细胞,22卷,不。5,675 - 682年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. w·瓦格纳,p .喇叭,m . Castoldi et al .,“复制的间充质干细胞的衰老:连续和组织过程中,“《公共科学图书馆•综合》,3卷,不。5篇文章e2213 2008。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. z, x, y元et al .,”效应的细胞培养使用壳聚糖膜在间充质干细胞具备干细胞标记基因,”分子医学报告,7卷,不。6,1945 - 1949年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. t . y . Li Liu n . van Halm-Lutterodt j.y. Chen问:苏,和y海,“血液细胞重编程为诱导多能干细胞软骨修复作为一种新的细胞来源,”干细胞研究与治疗,7卷,不。1,p。31日2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. m . f . Pittenger a . m .麦凯s c·贝克et al .,“Multilineage成年人类间充质干细胞的潜力。”科学,卷284,不。5411年,第147 - 143页,1999年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. n . Tsumaki m·冈田克也和a .山下式”“诱导多能性”细胞技术和软骨再生,”骨卷。70年,48-54,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. Bedi a·j·索菲亚福克斯,a和s, a .竞技”关节软骨的基础科学:结构、组成、功能,“体育健康:多学科的方法,1卷,不。6,461 - 468年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. g·w·格林,x Banquy, d . w . Lee d·d·劳里说,j . Yu和j . n . Israelachvili”自适应控制的机械润滑机制中发现关节关节,“美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷108,不。13日,5255 - 5259年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. m·b·戈德林“软骨形成,软骨细胞分化,在健康和骨关节炎和关节软骨代谢,”治疗肌肉骨骼疾病的发展,4卷,不。4、269 - 285年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. n . Verzijl j . DeGroot s r·索普et al .,“胶原蛋白流失率对积累先进的糖化的影响最终产品,”《生物化学》杂志上,卷275,不。50岁,39027 - 39031年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. j . a . Buckwalter和h . j . Mankin关节软骨退行性变和骨关节炎、修复、再生,移植,”教学课程讲座47卷,第504 - 487页,1998年。视图:谷歌学术搜索
32. b·艾布拉姆森和m . Attur“骨关节炎的科学认识,发展”关节炎研究和治疗,11卷,不。3,p。227年,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. m·b·戈德林和k . b . Marcu软骨内稳态在健康和风湿性疾病,”关节炎研究和治疗,11卷,不。3,p。224年,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. l . Troeberg h .打乱阵脚,“蛋白酶参与在骨关节炎软骨基质降解,”Biochimica et Biophysica学报(BBA)——蛋白质和蛋白质组学,卷1824,不。1,第145 - 133页,2012。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. j·j·李,s·j·李,t·j·李,t·h·Yoon和c·h·崔”结果微裂缝的焦点全层关节软骨缺损的骨关节炎的膝盖和伴随的内侧半月板的眼泪,“膝盖手术和相关研究,25卷,不。2、71 - 76年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
36. j . r . Steadman w . g . Rodkey和j·j·罗德里戈,“微裂缝:手术技术和康复治疗软骨的缺陷,“临床骨科和相关研究卷。391年,S362-S369, 2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
37. 萨斯伍德·d·d·傅强恩j . t .牛津l . et al .,“早期软骨修复软骨下骨微裂缝后,事件”临床骨科和相关研究卷,407年,第227 - 215页,2003年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
38. g . Knutsen l . Engebretsen t . c . Ludvigsen et al .,“自体软骨细胞移植与微裂缝在膝盖:一项随机试验,”《骨与关节外科杂志》上卷,86年。3、455 - 464年,2004页。视图:谷歌学术搜索
39. a . s . Levy j . Lohnes斯卡利,m . LeCroy和w·加勒特”的膝盖软骨的分层足球运动员。”美国运动医学杂志》上,24卷,不。5,634 - 639年,1996页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
40. k .米萨福r . j .威廉三世,r·f·沃伦et al .,“微创技术治疗膝盖关节软骨损伤。前瞻性队列研究”,《骨与关节外科杂志》上,卷87,不。9日,第1920 - 1911页,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
41. h·h·Passler”微创治疗软骨检测。”Zentralblatt毛皮Chirurgie,卷125,不。6,500 - 504年,2000页。视图:谷歌学术搜索
42. j . r . Steadman k·k·布里格斯,j·j·罗德里戈·m . s . Kocher t·j·吉尔和w·g . Rodkey”结果创伤性膝关节软骨的缺陷:微裂缝的平均11年随访,”关节镜检查,19卷,不。5,477 - 484年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
43. j . r . Steadman b s Miller s g·卡拉斯k·k·布里格斯,t·f·施莱格尔和r . j .霍金斯,”微创技术治疗全层软骨的损伤膝盖的国家橄榄球联盟的球员,”《华尔街日报》的膝盖手术,16卷,不。2、83 - 86年,2003页。视图:谷歌学术搜索
44. d . k . Bae k h . Yoon和s . j .歌曲,“软骨愈合在骨关节炎的膝盖微裂缝后,“关节镜检查,22卷,不。4、367 - 374年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
45. g . Knutsen j . o . Drogset l . Engebretsen et al .,“随机多中心试验比较自体软骨细胞移植与微裂缝:长期随访在14到15年,“《骨与关节外科杂志》上,卷98,不。16,1332 - 1339年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
46. e . Solheim j . Hegna e . Inderhaug j .Øyen t·哈莱姆和t链,“结果在10 - 14年后微创治疗关节软骨缺损的膝盖,“膝盖手术,运动创伤学,关节镜检查,24卷,不。5,1587 - 1593年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
47. d·j·查斯克和j·s·基恩”,分析当前的迹象的微裂缝在髋关节软骨的病变,“美国运动医学杂志》上,44卷,不。12日,第3076 - 3070页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
48. d . d .傅强恩s Morisset c·p·Ho w . g . Rodkey j . r . Steadman和c . w . Mcllwraith“钙化软骨对软骨的缺陷的愈合的影响对微裂缝马,”美国运动医学杂志》上,34卷,不。11日,第1831 - 1824页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
49. b s Miller j . r . Steadman k·k·布里格斯,j·j·罗德里戈,和w·g . Rodkey”病人满意度和结果退行性膝关节微裂缝后,“《华尔街日报》的膝盖手术,17卷,不。1 - 17,2004页。视图:谷歌学术搜索
50. j . r . Steadman w . g . Rodkey和k·k·布里格斯,“微裂缝:其发展的历史和经验的外科医生,”软骨,1卷,不。2、78 - 86年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
51. p c . Kreuz m . r . Steinwachs c Erggelet et al .,“结果经过微裂缝的全层软骨的缺陷在不同的隔间的膝盖,“骨关节炎和软骨,14卷,不。11日,第1125 - 1119页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
52. k·米萨福,t·麦克亚当斯,r . j·威廉姆斯,p . c . Kreuz和b·r·曼德尔鲍姆”临床疗效的微裂缝为膝盖关节软骨修复技术:一个以证据为基础的系统分析,“美国运动医学杂志》上,37卷,不。10日,2053 - 2063年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
53. l·彼得森t·米纳斯m . Brittberg a·尼尔森e . Sjogren-Jansson和a .林达尔“自体软骨细胞移植后2到9的结果的膝盖,“临床骨科和相关研究卷,374年,第234 - 212页,2000年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
54. d . Goyal s Keyhani e·h·李和j .惠普回族“以证据为基础的微裂缝技术现状:I和II级的系统回顾研究,“关节镜检查卷,29号9日,第1588 - 1579页,2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
55. r·开瑞a . Gudaitėt Mickevičius et al .,“骨软骨自体移植的比较、微裂缝或清创技术在关节软骨病变与前交叉韧带损伤:3年随访的前瞻性研究,“关节镜检查卷,29号1,第97 - 89页,2013。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
56. ai Vasara, m . t . Nieminen j . s . Jurvelin l·彼得森a林达尔和Kiviranta,“压痕硬度修复组织的自体软骨细胞移植后,“临床骨科和相关研究卷,433年,第242 - 233页,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
57. b . j .罐头i w·考尔t高桥et al .,“自体软骨细胞移植在膝关节:先生在1年随访影像学和组织学特征,“放射学,卷234,不。2、501 - 508年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
58. l·彼得森m . Brittberg Kiviranta, e . l . Akerlund和a .林达尔”自体软骨细胞移植。生物力学和长期耐久性。”美国运动医学杂志》上,30卷,不。1到12,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
59. m . Brittberg a林达尔答:尼尔森,c·欧胜o .法甲和l·彼得森”治疗深膝盖软骨缺损自体软骨细胞移植,”《新英格兰医学杂志》上,卷331,不。14日,第895 - 889页,1994年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
60. s . Giovannini j . Diaz-Romero t . Aigner p•海尼·Mainil-Varlet和d . Nesic”Micromass培养人类关节软骨细胞和骨髓间充质干细胞研究稳定neocartilage组织体外形成,”欧洲细胞和材料,20卷,第259 - 245页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
61. l·彼得森h . s . Vasiliadis m . Brittberg和a .林达尔“自体软骨细胞植入:长期随访,”美国运动医学杂志》上,38卷,不。6,1117 - 1124年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
62. t·米纳斯,a·冯·Keudell t·布莱恩特和a . h . Gomoll”约翰Insall奖:至少10年的研究结果自体软骨细胞移植,”临床骨科和相关研究,卷472,不。1,41-51,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
63. o . a . Behery j·d·哈里斯,j . m .圆锥形石垒,r . a . Siston和d . c . Flanigan”影响因素的结果自体软骨细胞移植:系统回顾,“《华尔街日报》的膝盖手术,26卷,不。3、203 - 211年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
64. d·b·f·纱丽j . Vanlauwe j .维克多et al。”治疗膝关节骨软骨缺损:软骨细胞植入特点导致更好的临床结果在36个月在随机试验中微裂缝相比,“美国运动医学杂志》上,37卷,补充1,10 - 19,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
65. d·b·f·纱丽j . Vanlauwe j .维克多et al。”为特征的软骨细胞移植的结果更好的结构修复治疗骨软骨缺损的膝盖在一个随机对照试验和微裂缝,“美国运动医学杂志》上,36卷,不。2、235 - 246年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
66. d . Enea s Cecconi a . Busilacchi s Manzotti r . Gesuita和a . Gigante”Matrix-induced自体软骨细胞移植(》)在膝盖上,“膝盖手术,运动创伤学,关节镜检查,20卷,不。5,862 - 869年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
67. a . Gigante c . Bevilacqua m .清唱,s . Manzotti f·格列柯,“工程关节软骨:支架对细胞表型和扩散的影响,“材料科学杂志:材料在医学,14卷,不。8,713 - 716年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
68. p . Cherubino f·a·葛拉·Bulgheroni和m . Ronga“自体软骨细胞移植使用双层胶原膜:初步报告,“矫形外科杂志》,11卷,不。1,10 - 15,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
69. e . Basad b . Ishaque g·巴赫曼,h . Sturz和j . Steinmeyer”Matrix-induced自体软骨细胞移植与微裂缝在膝盖软骨缺损的治疗:2年的随机研究,“膝盖手术,运动创伤学,关节镜检查,18卷,不。4、519 - 527年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
70. c·r·古丁w·巴特利特,g .宾利j·A·斯金纳r·卡林顿和A·弗拉纳根,”一个前瞻性随机研究比较两种技术的自体软骨细胞移植骨软骨缺损的膝盖:骨膜覆盖与I / III型胶原蛋白,”我的膝盖,13卷,不。3、203 - 210年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
71. a . h . Gomoll c . Probst j . Farr b·j·科尔和t·米纳斯”使用一种I / III双层胶原膜减少再次手术率肥大症状后自体软骨细胞移植,”美国运动医学杂志》上,37卷,补充1、20、2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
72. 罗伯茨,j .家务l . j . Sandell e·h·埃文斯和j·b·理查森“免疫组织化学研究胶原蛋白类型I和II及胶原花絮在人类软骨修复组织自体软骨细胞移植后,“我的膝盖,16卷,不。5,398 - 404年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
73. r . Cancedda b Dozin、p . Giannoni和r .四开,“组织工程和细胞治疗软骨和骨,“矩阵生物学,22卷,不。1,第91 - 81页,2003。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
74. 人工智能卡普兰和v . m . Goldberg,”的原则组织工程骨的再生组织,”临床骨科和相关研究卷。367年,S12-S16, 1999页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
75. t·米纳斯和美国Nehrer”,当前治疗关节软骨缺损的概念,“整形外科,20卷,不。6,525 - 538年,1997页。视图:谷歌学术搜索
76. r . s .老爷、g·博兰和r . Tuli“成人间充质干细胞和细胞组织工程”,关节炎研究和治疗,5卷,不。1,32-45,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
77. ai Caplan,间充质干细胞,骨科研究期刊》的研究,9卷,不。5,641 - 650年,1991页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
78. 诉Rai, m . f . Dilisio n e·迪茨和d . k . Agrawal”最近在软骨修复策略:系统性回顾的脚手架发展和组织工程”《生物医学材料研究的一部分,卷105,不。8,2343 - 2354年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
79. h·h·Ceylan k Bilsel: Buyukpinarbasili et al .,“软骨的治疗可以改善后微裂缝吗?脂肪细胞组织衍生的干细胞疗法的效果,”我的膝盖,23卷,不。3、442 - 449年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
80. y y s . Kim j . Choi d s Suh et al .,“间充质干细胞移植在骨关节炎的膝盖:纤维蛋白胶支架有效吗?”美国运动医学杂志》上,43卷,不。1,第185 - 176页,2015。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
81. y中川,t . Muneta k Otabe et al .,“软骨来源于骨髓间充质干细胞表达lubricin体外和体内,”《公共科学图书馆•综合》,11卷,不。2篇文章e0148777 2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
82. Rezwan k,问:陈z, j·j·布莱克和a . r . Boccaccini“生物降解和生物活性的多孔聚合物/无机复合骨组织工程支架,”生物材料,27卷,不。18日,第3431 - 3413页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
83. a . Thiem m .阿訇,c . Große-Siestrup和r . Zehbe Gelatin-poly面向(lactic-co-glycolic酸)支架的孔隙通道体系结构——从在体外来在活的有机体内测试”,材料科学与工程:C卷,62年,第595 - 585页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
84. c·h·刘,j . Liu Qi et al .,“热敏的羧甲基甲壳素可注射原位形成水凝胶三维细胞培养,“Acta Biomaterialia,35卷,第237 - 228页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
85. 陈x z Izadifar, w . Kulyk”战略工程支架设计和制造的关节软骨修复,”功能性生物材料杂志,3卷,不。4、799 - 838年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
86. m . ter Huurne, r . Schelbergen r .蜚蠊et al .,“抗炎和chondroprotective效果intraarticular注射脂肪中提取干细胞的实验性骨关节炎,“关节炎与风湿病,卷64,不。11日,第3613 - 3604页,2012年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
87. r . y . Tam t . Fuehrmann n . Mitrousis和m . s . Shoichet“再生治疗中枢神经系统疾病:生物材料的方法,”神经精神药理学,39卷,不。1,第188 - 169页,2014。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
88. 服部k . Uematsu k . y . Ishimoto et al .,“软骨再生使用间充质干细胞和一个三维poly-lactic-glycolic酸(PLGA)脚手架,”生物材料,26卷,不。20日,第4279 - 4273页,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
89. j . j . Yoon y s, j·h·金和t . g .公园,“表面固定的半乳糖脂族生物可降解聚合物对肝细胞文化,”生物技术和生物工程,卷78,不。1、1 - 10,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
90. g . e .公园,m·a·帕蒂森k .公园,t·j·韦伯斯特,加速软骨细胞功能NaOH-treated PLGA支架上,“生物材料,26卷,不。16,3075 - 3082年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
91. m . Morille k . Toupet c . n . Montero-Menei c·乔根森和d·诺尔”PLGA-based微载体诱导间充质干细胞在骨关节炎软骨形成,刺激软骨修复,”生物材料卷。88年,60 - 69、2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
92. g·r·埃里克森j . m .平衡台d·m·富兰克林·h·e·大米、h·阿瓦德和f . Guilak”Chondrogenic潜在的脂肪tissue-derived基质细胞在体外和体内,”生物化学和生物物理研究通信,卷290,不。2、763 - 769年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
93. z, j . m . McCaffery r·g·s·斯宾塞和c a . Francomano“透明软骨由软骨细胞团文化:组织学、免疫组织化学及超微结构分析与软骨移植组织相比,“解剖学杂志,卷205,不。3、229 - 237年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
94. m·施纳贝尔s Marlovits g . Eckhoff et al .,“Dedifferentiation-associated形态学和基因表达的变化在人类主要关节软骨细胞在细胞培养中,“骨关节炎和软骨,10卷,不。1,第70 - 62页,2002。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
95. g . Schulze-Tanzil de Souza p, h . Villegas Castrejon et al .,“再分化肉瘤人类软骨细胞在高密度文化中,“细胞和组织的研究,卷308,不。3、371 - 379年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
96. d . m . Bradham和w·e·霍顿Jr .)“从关节软骨细胞生长因子调节体内软骨形成,”临床骨科和相关研究卷,352年,第249 - 239页,1998年。视图:谷歌学术搜索
97. b·约翰斯通t . m .郝林ai Caplan, v . m . Goldberg和j .柳,“骨骨髓来源间充质祖细胞体外软骨形成,”实验细胞研究,卷238,不。1,第272 - 265页,1998。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
98. n Banu和t .土屋,”明显不同的透明质酸和软骨素一micromass人类关节软骨细胞的分化和三维蜂窝旋转文化,”《生物医学材料研究的一部分卷,80年。2、257 - 267年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
99. m . s .拉赫曼和t .土屋”,增强chondrogenic人类关节软骨细胞分化的生物可降解聚合物,”组织工程,7卷,不。6,781 - 790年,2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
100. t . a .赢k . Chappell-Afonso j·l·约翰逊et al .,“增强人类关节软骨细胞的增殖和分化时播种在海藻酸体外的细胞密度低,“骨科研究期刊》的研究,18卷,不。6,882 - 890年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
101. 加藤y、m . Iwamoto t .小池百合子,f·铃木和y Takano”终端分化和钙化兔软骨细胞培养生长在离心管:监管通过转化生长因子β和血清因素,”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷85,不。24日,第9556 - 9552页,1988年。视图:谷歌学术搜索
102. c . Farquharson和c·c·怀特黑德,”奇克分化和矿化的软骨细胞保持在一个高细胞密度文化:一个模型为软骨内骨化,”体外细胞与发育生物学,动物没有,卷。31日。4、288 - 294年,1995页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
103. r·d·格拉夫·e·r·Lazarowski a·j·贝恩斯,和通用汽车李,“ATP释放机械加载猪chondrons在小球文化中,“关节炎与风湿病,43卷,不。7,1571 - 1579年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
104. l . j .裘槎,a·克劳福德,p .诉哈顿,r·g·g·拉塞尔和d . j .做男管家,“细胞外ATP和UTP刺激软骨蛋白多糖和胶原蛋白积累在牛关节软骨细胞颗粒文化中,“Biochimica et Biophysica学报(BBA)——疾病的分子基础,卷1502,不。2、297 - 306年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
105. c·m·拉尔森s . s .凯利公元布莱克伍德,a·j·贝恩斯,和通用汽车李,“保留本地软骨细胞pericellular矩阵导致显著提高矩阵生产,”矩阵生物学,21卷,不。4、349 - 359年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
106. m·c·斯图尔特k·m·桑德斯n . Burton-Wurster和j·n·麦克劳德,“表型稳定的关节软骨细胞体外:文化模式的影响,骨形成蛋白2和血清的补充,“骨和矿物质研究杂志》上,15卷,不。1,第174 - 166页,2000。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
107. w·h·柯,p . Wang Yu et al .,“推导、鉴定和基因修改的猕猴猴间充质干细胞,”分化,卷77,不。3、256 - 262年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
108. w·Kafienah s Mistry s c·迪金森t·j·西姆斯看起来这次事件和,和a . p .荷兰人”三维使用成人干细胞软骨组织工程骨关节炎患者,”关节炎与风湿病卷,56号1,第187 - 177页,2007。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
109. m·b·穆勒和r . s .老爷”的功能描述肥大在人类间充质干细胞软骨形成,”关节炎与风湿病,卷。58岁的没有。5,1377 - 1388年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
110. r . s .皮重d·霍华德,j . c .磅,h·罗奇,和r . o . c . Oreffo”组织工程软骨generation-micromass和三维文化策略使用人类软骨细胞和连续细胞系,”生物化学和生物物理研究通信,卷333,不。2、609 - 621年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
111. 公元默多克,l·m·格雷迪·m·p·阿布莱特t . Katopodi r . s .草地和t . e . Hardingham”Chondrogenic人类骨髓干细胞的分化transwell文化:代scaffold-free软骨,”干细胞,25卷,不。11日,第2796 - 2786页,2007年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
112. ·伯恩斯坦m .董d花篮,m . Gelinsky k·冈瑟和s . Fickert“小球文化抒发优越chondrogenic比alginate-based系统再分化,“生物技术进展,25卷,不。4、1146 - 1152年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
113. a . eric j。j Minguell, p . Conget“间充质干细胞,实验生物学和医学,卷226,不。6,507 - 520年,2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
114. a . j . Friedenstein“成纤维细胞的前体细胞,”细胞学的国际评论47卷,第359 - 327页,1976年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
115. 洛杉矶Solchaga、k . j . Penick和j . f .翻滚”Chondrogenic骨骨髓来源间充质干细胞的分化:提示和技巧,“分子生物学方法卷,698年,第278 - 253页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
116. n公园,y . a . Rim h·荣格et al .,“Etanercept-synthesising间充质干细胞有效改善胶原诱导关节炎,“科学报告第39593条,卷。7日,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
117. j.y. Lim d . b . Ryu李,g .公园和c k . Min”间充质干细胞(msc)减弱皮肤sclerodermatous移植物抗宿主病(Scl-GVHD)通过抑制免疫细胞浸润在老鼠模型中,“《皮肤病学研究杂志》上,卷137,不。9日,第1904 - 1895页,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
118. a . Athanerey p . k .智利,a . Kumar“间充质干细胞在下肢静脉溃疡:一个醉人的疗法,”杂志组织的生存能力,26卷,不。3、216 - 223年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
119. a . m . Roushandeh m . Bahadori和m . h . Roudkenar“间充质干细胞疗法作为肾脏损伤的新视野,”档案的医学研究,48卷,不。2、133 - 146年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
120. m·g .卢z . Chen郑,y . Liu“间充质干细胞液治疗肝脏疾病的新策略,”实验与分子医学卷,49号6篇文章e346 2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
121. r .马尔东c . m . Jofre l . Tobar和j·j . Minguell“间充质干细胞疗法治疗髋关节骨关节炎,“时尚杂志保存手术,4卷,不。2、159 - 163年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
122. c . c .威尔·m·t·Houdek a·贝尔法和r . j .塞拉”间充质干细胞治疗骨关节炎:目前的观点,“干细胞和克隆:进展和应用程序,8卷,第124 - 117页,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
123. j .柳,t . s . Barthel k西村et al .,“人类的chondrogenic潜力从骨髓间叶细胞祖细胞,”《骨与关节外科杂志》上,卷80,不。12日,第1757 - 1745页,1998年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
124. s h·李,n . Lumelsky l、j·m·奥尔巴赫和r·d·麦凯”有效代中脑和后脑神经元从小鼠胚胎干细胞,”自然生物技术,18卷,不。6,675 - 679年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
125. a . m .麦凯s c·贝克,j . m . Murphy f·p·巴里,c . o .奇切斯特和m . f . Pittenger”Chondrogenic分化培养人类的间充质干细胞从骨髓,“组织工程,4卷,不。4、415 - 428年,1998页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
126. y坂口,漫画家关谷神奇,k . Yagishita, t . Muneta”比较人类干细胞来源于多种间充质组织:优越的滑膜细胞来源,”关节炎与风湿病,52卷,不。8,2521 - 2529年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
127. l . a . Solchaga k . Penick j·d·波特v . m . Goldberg ai Caplan, j . f .翻滚,“FGF-2提高的有丝分裂和chondrogenic势成人骨骨髓来源间充质干细胞,”细胞生理学杂志,卷203,不。2、398 - 409年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
128. m·洛克,j·温莎和p·r·邓巴”人类脂肪中提取干细胞:隔离、表征和应用在手术,”澳新银行(ANZ)外科杂志》,卷79,不。4、235 - 244年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
129. m . Galotto g . Berisso l .参与et al .,“间质损害后果的高剂量化疗/放疗在骨髓移植受者,”实验血液学,27卷,不。9日,第1466 - 1460页,1999年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
130. b .强力,c . Barreau p Bourin et al .,“人类脂肪tissue-derived成人干细胞的免疫调节效应:与骨髓间充质干细胞,”英国血液学杂志》,卷129,不。1,第129 - 118页,2005。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
131. h . Nejadnik s Diecke o . d . Lenkov et al .,“改进方法chondrogenic人类诱导多能干细胞的分化,“干细胞的评论和报道,11卷,不。2、242 - 253年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
132. 诉Dexheimer、美国弗兰克和w·里希特,“扩散作为一个要求人类间充质干细胞的体外软骨形成,”干细胞与发展,21卷,不。12日,第2169 - 2160页,2012年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
133. 诉Feisst、美国Meidinger和m . b .洛克,”从基础研究到临床应用:使用人类脂肪中提取干细胞,”干细胞和克隆:进展和应用程序,8卷,第162 - 149页,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
134. k·麦金托什,j·b·米切尔s Zvonic et al .,“Immunophenotype人类脂肪细胞:颞stromal-associated和茎细胞相关标志物的变化,“干细胞,24卷,不。2、376 - 385年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
135. p·a·祖克m·朱h .美津浓et al .,“Multilineage从人类脂肪组织细胞:细胞疗法,”组织工程,7卷,不。2、211 - 228年,2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
136. l·欧斯特b·德夫林s . j .促进et al。”产生的人类从吸脂吸入物、脂肪中提取成人干细胞”Cytotherapy》第六卷,没有。1、7 - 14,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
137. a·c·Boquest a . Shahdadfar j . e . Brinchmann p .阿胶,“隔离间质干细胞从人类脂肪组织,”分子生物学方法卷。325年,35-46,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
138. s . Kern h .为j . Stoeve h .悬疑类和k . Bieback”的比较分析从骨髓间充质干细胞,脐带血,或脂肪组织,”干细胞,24卷,不。5,1294 - 1301年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
139. 即漫画家关谷神奇,b·l·拉尔森j . r .史密斯,r . Pochampally J.-G。崔,d . j . Prockop”扩张的人类成体干细胞从骨髓基质条件收益率最大化的早期祖细胞和评估他们的质量,”干细胞,20卷,不。6,530 - 541年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
140. b·萨默及g .解决“当前概念脂肪移植物的生存:组织学吸气脂肪组织和审查的文学,”皮肤外科,26卷,不。12日,第1166 - 1159页,2000年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
141. w·h·c·h·乔y . g . Lee Shin et al .,“关节内注射间充质干细胞治疗膝骨关节炎:一个概念验证临床试验,”干细胞,32卷,不。5,1254 - 1266年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
142. j . m .平衡台和f . Guilak脂肪中提取成人干细胞:隔离、表征和分化潜能,”Cytotherapy,5卷,不。5,362 - 369年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
143. m .问:韦翰g·r·埃里克森j . m .平衡台t·p·维尔和f . Guilak”多功能基质细胞来源于infrapatellar脂肪垫的膝盖,“临床骨科和相关研究卷,412年,第212 - 196页,2003年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
144. p·a·祖克m·朱p Ashjian et al .,“人类脂肪组织是一个多功能干细胞的来源,”细胞的分子生物学,13卷,不。12日,第4295 - 4279页,2002年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
145. r . Kasir v . n . Vernekar和c t . Laurencin“再生工程使用脂肪中提取干细胞软骨,”再生工程和转化医学,1卷,不。1 - 4,42-49,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
146. 黄j . i . p . a·祖克n·f·琼斯et al .,“Chondrogenic multipotential细胞从人类脂肪组织的潜力,”整形外科,卷113,不。2、585 - 594年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
147. 答:英语、e·A·琼斯,d . Corscadden et al .,“比较评估软骨和关节脂肪垫作为自体的细胞的潜在来源治疗膝骨关节炎的发展,“风湿病学,46卷,不。11日,第1683 - 1676页,2007年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
148. 答:冬天,布莱特,d . Parsch et al .,“Cartilage-like基因表达在人类干细胞分化:球状体比较骨骨髓来源和脂肪tissue-derived基质细胞,”关节炎与风湿病,48卷,不。2、418 - 429年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
149. b . o . Diekman c·r·罗兰·d·p·列侬ai Caplan, f . Guilak,“软骨形成脂肪组织的成体干细胞和骨髓:诱导生长因子和cartilage-derived矩阵,”组织工程部分,16卷,不。2、523 - 533年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
150. a . a·哈米德·r·b·h·Idrus a . b . Saim s Sathappan和k·h·蔡”表征chondrogenic人类脂肪干细胞和表达的基因在软骨分化的诱导,“诊所,卷67,不。2、99 - 106年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
151. j . m . Murphy d·j·芬克e·b·亨泽尔和f·p·巴里,“干细胞疗法在山羊的骨关节炎模型”关节炎与风湿病,48卷,不。12日,第3474 - 3464页,2003年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
152. k·b·l·李,j .惠普回族i c .歌曲,l . Ardany和e·h·李,“注射间充质干细胞治疗大软骨defects-a猪模型,”干细胞,25卷,不。11日,第2971 - 2964页,2007年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
153. l . l .黑色,j·盖纳,c·亚当斯et al .,“影响intraarticular注射自体脂肪间充质干细胞和再生细胞在骨关节炎临床症状的慢性肘关节的狗,”兽医治疗,9卷,不。3、192 - 200年,2008页。视图:谷歌学术搜索
154. g . m . van Buul m . Siebelt m . j . c . Leijs et al .,“间充质干细胞减少疼痛但不退行性变化mono-iodoacetate骨关节炎大鼠模型,”骨科研究期刊》的研究,32卷,不。9日,第1174 - 1167页,2014年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
155. j . Freitag d·贝茨·r·博伊德et al .,“间充质干细胞疗法治疗骨关节炎:修复途径,安全性和有效性审查,”BMC肌肉骨骼疾病,17卷,不。1,p。230年,2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
156. 刘贤,澳新银行(Anz), c . Siew-Yoke Jee et al .,“关节软骨再生与自体外周血干细胞与透明质酸:一个随机对照试验,”关节镜检查卷,29号4、684 - 694年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
157. c t Vangsness Jr . j . Farr II, j·博伊德·d·t·Dellaero c·r·米尔斯和m . LeRoux-Williams“成年人类间充质干细胞通过关节内注射到膝盖以下部分内侧半月板切除术:一项随机、双盲、对照研究,“《骨与关节外科杂志》上,卷96,不。2、90 - 98年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
158. k .高桥k .田边m . Ohnuki et al .,“诱导多能干细胞从成人人类成纤维细胞因素,定义”细胞,卷131,不。5,861 - 872年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
159. m·a·j . Yu Vodyanik, k Smuga-Otto et al .,“诱导多功能干细胞来源于人类体细胞,”科学,卷318,不。5858年,第1920 - 1917页,2007年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
160. h . y . j . Lee Kim易et al .,“一代的特异诱导多能干细胞从类风湿性关节炎和骨关节炎患者,”关节炎研究和治疗,16卷,不。1,文章R41, 2014。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
161. 周t . c . Benda s Duzinger et al .,“从尿液代诱导多能干细胞,”美国肾脏病学会杂志》上,22卷,不。7,1221 - 1228年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
162. 黄懿慧Loh, Agarwal, et al ., i . h .公园”一代的诱导多能干细胞从人类血液,“血,卷113,不。22日,第5479 - 5476页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
163. t . Aasen莱雅,m . j . Barrero et al .,“高效、快速的从人类角质细胞,诱导多能干细胞”自然生物技术,26卷,不。11日,第1284 - 1276页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
164. y . a . Rim y南,j . h .居“诱导多能干细胞生成使用仙台病毒从血液细胞,离心,”《可视化实验,118卷,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
165. y . a . Rim:公园,y,和j·h·居”一代的诱导多功能干细胞的使用呈synoviocytes隔绝关节的风湿性关节炎患者,”《可视化实验,116卷,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
166. y, y . a . Rim h .咦,n .公园,s . h .公园和j·h·居,“人类诱导多能干细胞的生成血细胞:一个有效的协议使用串行电镀的重新编程细胞离心,”干细胞国际卷,2016篇文章ID 1329459、9页,2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
167. x(音)h .秦,c, r . s .老爷,美国史,和g·t·j·黄”“诱导多能性”细胞重新编程从人类mesenchymal-like牙科组织的干细胞/祖细胞来源,”干细胞与发展,19卷,不。4、469 - 480年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
168. m . Karow c·l·查韦斯,a . p . Farruggio et al .,“位点专一战略创建高效诱导多能干细胞与质粒DNA,”干细胞卷,29号11日,第1704 - 1696页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
169. m . Stadtfeld m . Nagaya j . Utikal g .堰和k . Hochedlinger“诱导多能干细胞生成没有病毒集成,”科学,卷322,不。5903年,第949 - 945页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
170. l·沃伦·p·d·诺斯t Ahfeldt et al .,“高效重组多能性和定向分化的人类细胞合成改性mRNA,”细胞干细胞,7卷,不。5,618 - 630年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
171. j . y . h, s . Wu Joo et al .,“代使用重组蛋白诱导多能干细胞,”细胞干细胞,4卷,不。5,381 - 384年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
172. 小林t, t .山口,s . Hamanaka et al .,“代鼠胰腺鼠标的种间囊胚注入多能干细胞,”细胞,卷142,不。5,787 - 799年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
173. o . Gafni l·温伯格,a·a·f·曼苏尔et al .,“推导小说人类基态天真的多能干细胞,”自然,卷504,不。7479年,第286 - 282页,2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
174. w . s . (e·h·李郭x m . et al .,“软骨修复使用透明质酸hydrogel-encapsulated人类胚胎干细胞chondrogenic细胞,”生物材料没有,卷。31日。27日,6968 - 6980年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
175. t .中川郑胜耀Lee和a . h . Reddi”从人类胚胎干细胞没有胚状体诱导软骨形成身体形成骨形态形成蛋白7和转化生长因子β1,“关节炎与风湿病,60卷,不。12日,第3692 - 3686页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
176. n . Bigdeli c . Karlsson r . Strehl s Concaro j . Hyllner和a .林达尔”Coculture人类胚胎干细胞和人工关节软骨细胞导致显著改变表型和改进chondrogenic分化,“干细胞,27卷,不。8,1812 - 1821年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
177. Hwang n s, s . Varghese, j . Elisseeff”推导chondrogenically-committed细胞从人类胚胎细胞的软骨组织再生,”《公共科学图书馆•综合》,3卷,不。6篇文章e2498 2008。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
178. e . j . Koay通用b Hoben, k . a . Athanasiou”与chondrogenically分化人类胚胎干细胞组织工程,“干细胞,25卷,不。9日,第2190 - 2183页,2007年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
179. t . Barberi l·m·威利斯n . d . Socci和l .、“派生人类胚胎干细胞的多能间充质前体,”《公共科学图书馆·医学》杂志上,卷2,不。6篇文章e161 2005。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
180. r . a . Oldershaw m·a·巴克斯特·e·t·劳et al .,“定向分化人类胚胎干细胞向软骨细胞,”自然生物技术,28卷,不。11日,第1194 - 1187页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
181. a .大桶r·c·贝耳俾n击发弹et al .,“Chondrogenic分化人类胚胎干细胞的微环境的影响,”组织工程,12卷,不。6,1687 - 1697年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
182. h . y .呗,g . a . Chen g·h·毛,t·r·歌,x和y王”三个步骤推导从人类胚胎干细胞的软骨组织2 d-3d顺序文化体外和进一步海藻酸/ PLGA支架植入体内,”《生物医学材料研究的一部分卷,94年。2、539 - 546年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
183. s . p .梅德韦杰夫大肠诉Grigor 'eva,人工智能舍甫琴科et al .,“人类诱导多能干细胞来源于胎儿神经干细胞成功进行定向分化成软骨,”干细胞与发展,20卷,不。6,1099 - 1112年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
184. n .小山m .三浦k中et al .,“人类诱导多能干细胞分化成chondrogenic通过代间叶细胞祖细胞谱系,”干细胞与发展,22卷,不。1,第113 - 102页,2013。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
185. y, y . a . Rim和j . h .榉”Chondrogenic颗粒形成从绳血液诱导多能干细胞,”《可视化实验,124卷,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
186. b . o . Diekman n . Christoforou v p·威拉德et al .,“软骨组织工程使用诱导多能干细胞分化和纯化,”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷109,不。47岁,19172 - 19177年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
187. b . Saitta j . Passarini d Sareen et al .,“Patient-derived骨骼发育不良诱导多能干细胞显示异常chondrogenic标记表达和调控BMP2和TGFβ1”,干细胞与发展,23卷,不。13日,1464 - 1478年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
188. m·d·菲利普斯s a“库兹涅佐夫”:Cherman et al .,“人类诱导多能干细胞定向分化向骨和软骨:体外和体内试验,”干细胞转化医学,3卷,不。7,867 - 878年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
189. l . g . Villa-Diaz s e .布朗,y刘et al .,“派生人类间充质干细胞的诱导多能干细胞培养合成基质,”干细胞,30卷,不。6,1174 - 1181年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
190. 朱y,吴x, y梁et al .,“修复软骨缺损在骨关节炎大鼠诱导多功能干细胞软骨细胞,”BMC生物技术,16卷,不。1,p。78年,2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
191. a .山下式m .盛冈y Yahara et al .,“代scaffoldless透明软骨组织人类万能”干细胞的报道,4卷,不。3、404 - 418年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
192. d·卢比奥j . Garcia-Castro m . c .马丁et al .,“自发的成人干细胞转变,”癌症研究,卷65,不。8,3035 - 3039年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
193. a . Torsvik g . v . Rosland a·斯文森主持et al .,“自发的人类间充质干细胞恶性转化反映了交叉污染:把研究领域正轨——信,”癌症研究,卷70,不。15日,第6396 - 6393页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
194. g . v . Rosland a·斯文森主持a Torsvik et al .,“长期文化来源于人类的骨骼间充质干细胞经常发生自发的恶性转化”癌症研究,卷69,不。13日,5331 - 5339年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
195. m·m·拉鲁·l·麦金太尔,c . Pugliese et al .,“细胞疗法的安全性与间充质基质细胞(SafeCell):系统回顾和荟萃分析的临床试验,”《公共科学图书馆•综合》,7卷,不。10篇文章e47559 2012。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
196. m·特纳,莱斯利,n . g .马丁et al。”向全球发展的诱导多功能干细胞库,”细胞干细胞,13卷,不。4、382 - 384年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
197. y y . a . Rim:公园,南et al .,“最近的国家银行项目进展纯合子HLA-typed诱导多能干细胞在韩国,“组织工程和再生医学杂志》上,2017年,页1 - 6。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
198. p . a . Gourraud l . Gilson m·吉拉德和m . Peschanski“人类白细胞抗原匹配的角色发展的多民族“haplobank“诱导性多功能干细胞系。”干细胞,30卷,不。2、180 - 186年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
199. j . Kurtzberg诉k·普拉萨德,s . l .卡特et al .,“脐带血移植研究的结果(COBLT):临床结果的无关供者脐血移植在儿科血液恶性肿瘤患者,”血,卷112,不。10日,4318 - 4327年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
200. c·j·泰勒,孔雀,a·n·乔杜里·j·a·布拉德利和e·m·博尔顿”生成iPSC银行基于已知的抗原匹配组织移植供体和受体HLA类型”细胞干细胞,11卷,不。2、147 - 152年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
201. c . j . Centeno d .会j . Kisiday c . Keohan m·弗里曼和d . Karli”增加膝盖软骨的退行性关节疾病使用经皮植入自体间充质干细胞,”痛苦的医生,11卷,不。3、343 - 353年,2008页。视图:谷歌学术搜索
202. f . Davatchi b s Abdollahi m . Mohyeddin f . Shahram和b(间充质干细胞治疗膝骨关节炎。初步报告的四个病人风湿性疾病的国际期刊,14卷,不。2、211 - 215年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
203. m . Emadedin n . Aghdami l . Taghiyar et al .,“关节内注射自体间充质干细胞在六个膝骨关节炎患者,”伊朗的医学档案,15卷,不。7,422 - 428年,2012页。视图:谷歌学术搜索
204. l·奥罗斯科,a . Munar r .太阳系et al .,“与自体间充质干细胞治疗膝骨关节炎:一个试点研究,“移植,卷95,不。12日,第1541 - 1535页,2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
205. h . s . Varma b Dadarya, a . Vidyarthi“膝盖osteo-arthritis管理的新途径——干细胞,”印度医学协会杂志》上,卷108,不。9日,第585 - 583页,2010年。视图:谷歌学术搜索
206. y . g . Koh和y . j . Choi Infrapatellar pad-derived脂肪间充质干细胞治疗膝关节骨关节炎,“我的膝盖,19卷,不。6,902 - 907年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
207. y . g . Koh s . b .乔o . r . Kwon et al .,“间充质干细胞注射改善膝关节骨关节炎的症状,”关节镜检查卷,29号4、748 - 755年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
208. j . Pak“再生人的骨头的臀部和人类软骨坏死与自体干细胞adipose-tissue-derived膝骨关节炎:一个案例系列中,“《医学案例报告,5卷,不。1,p。296年,2011。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
209. m . w . Laschke m·d·门格尔,“生命是3 d:提高球面函数组织工程,“生物技术的发展趋势,35卷,不。2、133 - 144年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
210. sncf的h . d . Burckel、大肠Josset和g . Noel”三维细胞培养:体内一个突破,”国际分子科学杂志》上,16卷,不。12日,第5527 - 5517页,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
211. a·j·戈德堡,d . a . Lee d·l·巴德·g·本特利,“自体软骨细胞移植。TGF -文化β包含介质提高reexpression chondrocytic表现型的通道人类软骨细胞在小球文化中,“《骨和关节手术,卷87,不。1,第134 - 128页,2005。视图:谷歌学术搜索
212. n . d . Hsieh-Bonassera i, j·k·林et al .,“从骨关节炎软骨软骨细胞:细胞的扩张和再分化为人类软骨组织工程,“组织工程部分,15卷,不。11日,第3523 - 3513页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
213. h . Imabayashi t·森美国Gojo et al .,“再分化肉瘤,软骨细胞和软骨形成的人类骨髓基质细胞通过chondrosphere形成由大规模cDNA表达分析分析,“实验细胞研究,卷288,不。1,~,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
214. t . Tallheden c . Karlsson a Brunner et al .,“基因表达在人类关节软骨细胞的再分化,“骨关节炎和软骨,12卷,不。7,525 - 535年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
215. b . k .巴布尔,p . Ghanavi, p . Levett et al .,”之间的相互作用软骨细胞再分化颗粒大小和氧浓度,”《公共科学图书馆•综合》,8卷,不。第三条e58865, 2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
216. r . m . Guzzo诉斯坎伦,桑杰,r·h·徐和h . Drissi”建立人类细胞特定类型“诱导多能性”细胞,增强chondrogenic潜力,”干细胞的评论和报道,10卷,不。6,820 - 829年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

版权

版权©2018 Yoojun南等。这是一个开放的分布式下文章知识共享归属许可,它允许无限制的使用、分配和复制在任何媒介,提供最初的工作是正确引用。