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Mila Janjic, Denitsa Docheva, Olivera tricovic Janjic, Andrea Wichelhaus, Uwe Baumert那 “在体外正畸牙齿移动中力学依赖分子通路的负重细胞模型:系统综述"，干细胞国际那 卷。2018那 文章的ID3208285那 17 页面那 2018． https://doi.org/10.1155/2018/3208285
在体外正畸牙齿移动中力学依赖分子通路的负重细胞模型:系统综述
米拉Janjic
那1
Denitsa Docheva那2
奥利维拉Trickovic Janjic那3.
安德里亚Wichelhaus那1
和
乌维Baumert1
1正畸和颌面整形外科，大学医院，慕尼黑大学，慕尼黑80336，德国系
2实验创伤外科，雷根斯堡大学医学中心创伤外科，93053雷根斯堡，德国
3.Niš大学医学院预防和儿科牙科系，18000 Niš，塞尔维亚
摘要
牙区间充质细胞系的细胞，包括但不限于PDL成纤维细胞、成骨细胞和牙干细胞，在生理(如咀嚼)和非生理/治疗(如正畸牙齿移动)情况下暴露于机械应力。这些不同细胞类型之间紧密而复杂的相互作用导致这些组织对机械应力的生理和非生理适应。目前,不同的体外利用加载模型研究了不同类型的机械加载对这些细胞类型应力适应性的影响。我们根据PRISMA指南进行了一个系统的综述，以识别所有在牙科领域的研究，重点是使用力学生物学体外单轴静态压缩载荷模型。只有研究报告的细胞来自间充质系考虑纳入。本文总结了与力持续时间和力大小相关的基因表达，并利用蛋白-蛋白相互作用网络确定了它们参与的最重要的信号通路。
1.介绍
牙齿矫正术的目的是通过在牙齿表面施加连续的力来移动位置异常的牙齿。这种力刺激周围组织的骨重塑，即牙周韧带(PDL)和牙槽骨，导致牙齿移动方向的骨移除和相反方向的骨对置(图)1)．因此，正畸牙齿移动(OTM)的潜在机制是应用正畸力刺激骨重塑[1］．
(一)
(b)
组织学上，正畸力对牙齿及其周围组织的影响现在已经很清楚，OTM的基本阶段也已经确定[2］．人牙周韧带细胞(Human periodontal ligament cells, hPDLCs)和人成骨细胞(Human osteoblasts, hOBs)被认为是起源于间充质系的两种细胞类型，在OTM中发挥着最主要的作用。与hob细胞不同，hPDLCs细胞主要是成纤维细胞样细胞的混合群体[3.］．其中，间充质干细胞作为PDL自身及牙槽骨再生和再调节的祖细胞来源具有特殊的重要性[4.］．
为了更好地了解OTM过程中的形态学改变，阐明这些细胞类型之间和内部的分子和细胞信号机制是重要的。复杂的在活的有机体内所涉及的组织结构使得研究单个细胞的力感知和细胞通信是不可能的。因此,体外使用从PDL或牙槽骨分离的细胞建立模型，并应用不同类型的力模拟OTM中发现的那些[5.］．这些体外模型用于回答开放性问题，包括但不限于细胞如何感知力，它们如何将机械应力转化为分子信号，以及这些分子信号如何影响这些细胞对特定力的特定反应。
根据最常用的方法对细胞施加机械应力，目前体外加载模型可分为基于基底变形的方法、静压方法、离心方法、流体流动方法、振动方法和重量方法[6.］．同时，人们对从传统的单分子层，二维(2D)体外加载模型为三维(3D)体外加载模型。
体重依赖型剂量体外多年来，加载模型已成功地用于研究静态、压缩、单向力对细胞的影响。在使用2D细胞培养的模型中，细胞在细胞培养皿中预培养(例如，6孔板)。在达到期望的一致性后，细胞进行基于重量的压缩。在大多数情况下，玻片放置在单层细胞的顶部。然后，将一个装满铅颗粒的玻璃圆柱体放置在载玻片的顶部，施加重量。玻璃载玻片用于确保力的均匀分布[7.］．增加或减少玻璃筒中的颗粒数量可以调节压缩力的水平(图)2(一个))．通过对该模型的轻微修改，施加了相同类型的力:一些作者使用了一堆不同高度的玻片(例如，[8.)或不同厚度的玻璃圆盘(例如，[9.)，换掉装有铅颗粒的玻璃筒。这体外加载模型也可用于在3D细胞培养物上应用静态压缩力。在这种情况下，除了将细胞嵌入到3D矩阵中以所描述的方式压缩的3D矩阵之外，使用相同的原理（图2 (b))．杨等人。[6.为此创造了一个术语“基于权重的方法”(WAB)体外模型。要参考这个特定的设置，我们还将在整个发布中使用WAB。
(一)
(b)
本综述的主要目的是通过2D或3D WAB识别所有与正畸领域相关的文章体外加载模型，并提供其使用的详细概述:最常用的加载时间，力的大小，和支架，以及他们的发现，基因表达和物质分泌与力的作用。第二个目标是发现最常见的检测基因，并识别这些研究中大多数识别的基因都涉及的OTM的重要通路，特别是hPDLCs。
2。材料和方法
为了进行本综述，参考了“系统综述和meta分析方案首选报告项目”(PRISMA-P) 2015年声明[10］．
２.１.界定资格准则
入选标准如下:(我)牙科学领域的研究，检验机械应力对牙齿周围组织的影响(2)2D或3D WAB的应用体外加载模型……(3)…在hPDLCs、hOBs或所有人类或动物来源的骨样细胞类型/系上(iv)只有在2017年12月1日之前在PubMed数据库中确认的用英语撰写的研究才会被考虑
2.2。文献检索和研究选择过程
对于使用2D或3D的研究，我们创建了单独的搜索策略体外设置机械电池加载(补充1)．按照这些预定义的搜索策略在PubMed数据库中执行搜索。
在PubMed数据库中识别相关研究后，从每次搜索中下载的记录被导入书目软件EndNote X8 (Clarivate Analytics, Philadelphia, Pennsylvania, USA)。所有记录由两名评审员(MJ和UB)独立检查，按照预先确定的纳入和排除标准(见上文):首先按标题，然后按摘要。如果没有摘要，则获得了该报告的全文。显然不相关的记录被排除在外，所有剩余记录的全文都被获取。在全文评估之后，将生成包含的文章的最终列表。这个过程中的任何分歧都通过与另一个评审作者(DD)的讨论来解决，直到达成共识。全文评估后不符合全部纳入标准的文章不予进一步检查。通过正向和反向参考链接以及特定期刊的手工检索，进一步确定了其他相关研究。没有对纳入的研究进行研究质量评估，因为本文的目的只是提供该领域所有发现的概述。
2．3.数据提取
以下信息是从获得的每项研究的完整长度中提取的:作者、期刊、发表年份和使用的细胞类型。力的大小和持续时间、检测的基因或物质、基因表达或物质分泌的细节只有在它们的反应与机械力刺激直接相关时才被记录。在表格中尽可能使用基因符号。如果基因的身份或变异不确定或不清楚，则使用primer - blast (URL:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/) [11］．如果Western印迹，ELISA，或抑制实验进行了报道，我们尝试验证所述抗体和/或抑制剂的特异性，以确定确切的蛋白质种类（变体）。另外，用于基因/物质表达的评价方法被记录下来。关于所使用的支架数据收集的是应用3D WAB研究体外设置。
研究结果汇总如下表:(1)应用2D WAB的研究体外(2)应用2D WAB对人口腔颌面部原代细胞(hPDLCs、hOBs和人口腔骨髓细胞)进行加载模型研究体外(3)应用3D WAB的研究体外人及非人细胞及细胞系的负荷模型。
２.４.字符串分析
使用2D方法检测的基因和代谢物被总结为两个单独的列表:一个用于hPDLFs，一个用于hOBs和其他人骨来源细胞系。使用STRING数据库(10.5,URL:https://string-db.org/) [12］．从STRING内，KEGG数据库[13]，以确定所涉及的主要途径。只有错误发现率低于1.00的路径E.-05进行了审议。
3.结果
３．１．研究选择过程
数字3.根据PRISMA使用流程图总结了2D和3D搜索的结果。分别对应用2D或3D的研究进行了搜索(补充)1war)体外加载模型。
应用搜索公式对二维WAB进行识别体外负荷研究显示在补充1．PubMed数据库共识别出2284篇摘要(图)3.)．
此外，通过正向和反向参考链接以及对特定期刊的手工检索，共识别出7篇文章。在阅读了所有确定的研究的标题和摘要后，我们排除了2184项研究。其余107篇文章则通过全文阅读进行检查。其中56例符合我们的纳入标准，并纳入进一步分析。其余不符合纳入标准。排除的原因列在附录中1．
将搜索公式应用于三维WAB的识别体外负荷研究显示在补充1．我们在PubMed中总共识别了1038篇文章(图)3.)．另外4篇文章是通过正向和反向参考链接以及对特定期刊的手工搜索发现的。经过初步筛选，筛选出992篇文章，并对50篇文章进行全文阅读。最后，其中17人符合我们的纳入标准。其余的文章被排除在进一步的分析之外。排除的原因在附录中总结1．
所有符合纳入标准的研究被分为三个不同的补充表2总结2 d war体外使用来自orofacial区的人原代细胞加载研究。在补充3.，二维WAB体外发现使用人类非缺乏源细胞和动物细胞和细胞系的加载研究。补充4.3D WAB的总结体外加载的研究。
３.２．在研究中使用的力持续时间和力的大小
3.2.1之上。2 d war在体外加载模型
在这些研究中，压缩力从0.25 g/cm不等2to 5 g/cm2应用于2D培养的细胞。最常用的压缩力为2g /cm2，与研究中使用的细胞类型无关。在大多数研究中，力施加24小时(补充2和3.)．
3.2.2。3D WAB.在体外加载模型
力的持续时间和大小取决于所使用的支架(补充4.)．在大多数研究中，施加由胶原凝胶和聚乳酸共乙醇酸（PLGG）制成的支架。其中一个研究[14]采用亲水性改性聚l -丙交酯(PLLA)基质。采用胶原凝胶支架，受力在0.5 g/cm之间2和9.5克/厘米2；最常用的力为6g /cm2．用力0.5 ~ 72 h。最常用的施力时间为12和24 h。力水平在5到35克/厘米之间2应用于PLGA支架内的细胞。最常用的作用力为25 g/cm2．施用持续时间为3至72小时。使用亲水调制的PLLA矩阵的研究[14施加的力的大小从5到35克/厘米2．施力时间从1天到14天不等。
3．3.研究中使用的细胞类型
3.3.1。2 d war在体外加载模型
从周围组织的齿（补编分离用于这些研究中的四十人原代细胞2): hPDLCs、hOBs和人口腔面骨髓源性细胞(hOBMC)。其余的研究使用了来自人和动物的其他细胞和细胞系:MG63, RAW264.7, ST-2, Saos-2, OCCM-30, MC3T3-E1, C2C12, U2OS，大鼠来源的PDLCs，或骨髓来源的成骨细胞和成骨水泥细胞系hcemsv40(补充3.)．
3.3.2。3D WAB.在体外加载模型
13项研究使用了hPDLCs和人牙龈成纤维细胞(补充4.)．其余两项研究使用非口腔区域或非人类来源的细胞类型和细胞系(补充4.):小鼠MC3T3-E1细胞系和小鼠成骨细胞。
总的来说，最常用的细胞是hPDLCs。它们被用于总共51项研究(2D: 38;3 d: 13)(补充2和4.)．根据应用的分离方法，我们区分了以下来源:“外植体方法”[15那16) (2 d: 18;3D: 4)、“酶消化法”[4.]（2D：9; 3D：6），商业来源（2D：3; 3D：1），或“没有可用的详细信息”（2D：8; 3D：2）。
3．4．研究中的基因和物质
2D和3D WAB研究中检测的基因和代谢物的完整概述，以及它们表达的细节可以在补充剂中找到2和3.(2 d)和补充4.(3 d)。
在本次审查中，特别注意HPDLCS作为研究中的最常见的细胞类型以及在OTM中的突出作用。与HPDLC相关的最多检查的基因和代谢物是TNF超家族成员11（TNFSF11），TNF受体超家族成员11B（TNFRSF11B），前列腺素 - 内转氧化物合酶2（PTGS2）和前列腺素E.2(铂族元素2)．在表1，其表达/分泌的细节，包括在哪个时间点或力量值达到最高/最低的信息，被总结。
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2D:二维细胞培养;3D（Coll.Gel）：three-dimensional cell culture, collagen gel; 3D (PLGA): three-dimensional cell culture using PLGA scaffolds; 3D (PLLA modif.): three-dimensional cell culture, hydrophilically modified PLLA scaffolds; qPCR: quantitative polymerase chain reaction (e.g., real-time PCR); sqPCR: semiquantitative polymerase chain reaction, followed by reference gene used; nr: not reported; na: not applicable; ELISA: enzyme-linked immune absorbent assay; WB: Western blot; IF: immunofluorescence; FLM: fluorescence microscopy; EIA: enzyme immunoassay. |
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3．5．串分析和KEGG通路
3.5.1。蛋白质 - 蛋白质相互作用的构建（PPI）网络
为了阐明OTM的分子机制以及hPDLCs和骨细胞在这一过程中的作用，我们使用STRING构建了PPI网络。从那些使用hPDLCs的研究中编译了两个单独的基因列表(“hPDLC列表”;补充的数据3.)，以及使用hOB或人类骨细胞和细胞系的人(“hOB列表”;补充的数据2和3.)．hPDLC包含48个不同的基因(图4(一))， hOB列出了51个不同的基因(图4 (b))．
(一)
(b)
基于具有高置信度(>0.700)的相互作用，获得了两个独立的PPI网络(图4.)．网络中的节点代表由单个蛋白质编码基因位点产生的蛋白质;边代表蛋白质相互作用。根据边缘的颜色，可以区分“基因邻域”、“基因融合”、“共现”、“共表达”、“实验”、“数据库”和“文本挖掘”等8种不同的交互作用[12］．图中还显示了两个基因列表中连接度最高的前10个节点4.．PPI浓缩在STRING中计算每个构建网络的值。这些结果表明，两个PPI网络的交互作用显著大于预期，节点不是随机的(PP富集)值< 1.0E.-16）。
3.5.2。鉴定Kegg途径
根据我们的STRING分析，表中列出了每组基因与OTM相关的KEGG通路2．
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(一)
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4.讨论
在活的有机体内OTM过程中的骨重塑是一个复杂的生物学过程，由机械刺激引起。OTM涉及大量的事件，由不同的细胞类型、信号因素和网络在空间上和临时地协调和协调[1］．系统地分解和分析这一复杂过程的单个组分是了解其分子背景的关键，也是加速和改进这一过程的可能途径。因此，多种多样体外已经建立了机械装载模型[5.那6.］．的体外基于权重法的加载模型被认为是在压缩部位刺激正畸力最合适的加载模型[6.］．
4．1.二维和三维WAB的特性在体外加载模型
4.1.1。常规2D WAB.
体外加载模型，最初由Kanai等人描述[7.，已经被用于研究压迫诱导的破骨细胞发生超过二十年，并且仍然被认为是金标准。它代表了一种简单有效的方法应用静态压缩，单向力的细胞单层。
WAB的优势体外加载模型如下:(我)它减少了对动物研究的需求，而动物研究既昂贵又耗时。(2)它能够独立地或与其他感兴趣的细胞独立地或在共培育中分析特定细胞类型。(3)人类原代细胞可用于更好地接近临床情况。
从我们的角度来看，它的主要缺点是缺少对周围自然环境的影响。人们对三维细胞培养WAB的开发越来越感兴趣体外在加载模型的最后几年，为了近似体外情况下,在活的有机体内的情况。
4.1.2。3D WAB.在体外加载模型
在过去的几年里，更多的研究已经将细胞纳入生物支架而不是单层培养。这是由于模仿细胞外基质的需求，这有利于细胞的行为，而不是在人造塑料细胞培养表面生长细胞[46］．根据我们的数据，到目前为止使用三种类型的脚手架与3D WAB结合使用体外加载模型。首批确定的研究使用了I型胶原支架[26那47那48.］．虽然胶原凝胶仍然广泛用于此目的，但是对由合成聚合物组成的支架的发展越来越令人兴趣。2011年，李等人。[33]引入的PLGA支架，在相比于胶原凝胶和弹性模量非常接近人类PDL的具有更高的刚性。唯一的缺点是，在PLGA生长的细胞显示一种无序成长模式从一个在自然PDL不同[33］．Liao等人。[14]更进一步，引入了亲水性改性PLLA基体。这种基质具有以下几个优点:较高的营养和氧渗透性和更好的细胞附着，使其更适合长期施加力[14］．
4．2．在研究中使用的力大小
根据施瓦茨[49]，临床正畸的最佳正牙力(OOF)应为毛细血管压力(≈25 g/cm)2) [49］．在组织水平上，OOF应能获得理想的临床结果，而不会引起不良副作用，例如牙根吸收。在细胞水平上，它应该引起最佳的生物细胞反应而不显著抑制细胞增殖[27］．最佳的矫正力体外不同型号之间变化。OOF的估计每个体外模型对于OTM模拟的成功应用至关重要[20.那33］．
在2D细胞培养WAB中体外加载模型，施加的力在0.2和5.0g / cm之间变化。2．我们的数据显示为2.0 g/cm2是迄今为止研究中最常用的力大小。根据Kanzaki等人[20.，这个力的大小被证明能诱导最佳的细胞反应。很少有研究报道了力量依赖性的细胞活力下降，特别是在4 g/cm的应用下2力(20.那37那50那51］．
在应用3D WAB的研究中体外加载模型，所使用的力大小是根据支架的刚度选择的。研究中使用的胶原凝胶支架最常用6g /cm2力到他们的体外模型。根据Araujo等人[47，该力与治疗性正畸力相对应，细胞反应最佳。PLGA支架在25 g/cm力值下表现最佳2(范围:5-35 g / cm2)．在Liao等人的研究中应用了相同的力范围[14采用亲水性改性聚乳酸支架基质。这一范围也与临床使用的范围相吻合，表明这些支架的力学性能最接近于在活的有机体内自由人民党(14那33］．这也使它们成为研究轻力和重力的合适模型，这些力被认为是导致正畸治疗失败的原因。
4．3．执行警队的时间
在这些研究中，施加力的时间很少超过72小时。在大多数情况下，施加的力可达24和48小时。考虑到首十天对OTM至关重要([52[， p. 303)，在大多数已进行的研究中，施加力的持续时间不足以充分了解OTM的分子背景。此外，我们想指出的是，只有少数研究在实验中观察到细胞活力。他们中的大多数人都证实了细胞活力的降低，这不仅与力量水平有关，也与时间有关[19那50那51］．我们假设其中一个限制，特别是在2D WAB体外模型中，压力区域的营养和氧气供应受到损害。为了克服特别是以前模型的时间限制，Liao等人[14]介绍了亲水性改性聚乳酸基质作为三维培养的新型支架。他们已经证明，这种支架可以使用长达14天而不影响细胞活力，声称它可以在较长时间内提供良好的营养和氧气灌注[14］．建立一个体外适合长期施加力(10天或10天以上)的模型有利于该领域的研究进展。
4．4.PDL和hPDLCs在OTM中的作用
由于缺乏PDL的，强直的牙齿和植入物不能进行OTM，其中描绘了传送机械刺激和启动骨重塑过程[最好的PDL的关键作用1那53］．除了其机械转导特性外，它还有助于组织的稳态和修复，这主要是由于间充质干细胞的存在，这是正常hPDLC人群中的重要组成部分[4.］．已知这部分hPDLCs在“酶切法”分离的hPDLCs中存在程度较高[54，在本综述的研究中常用，特别是在3D组。
４．５．在使用hPDLCs的研究中，大多数检测的基因
为了解释hPDLCs的OTM在分子水平上的贡献，我们总结了关于该细胞类型中最常用的检查和基因物质的所有数据（表1)．这些曾经是TNFSF11那PTGS2和铂族元素2，称为破骨细胞发生诱导剂TNFRSF11B.，被称为骨壳发生抑制剂。
TNFSF11(亦称“RANKL”)[55]在OTM时压迫侧骨吸收中起关键作用，诱导破骨细胞形成。TNFSF11在所有使用2D WAB的研究中，基因表达均增加体外加载模型(表1)．在大多数使用这个模型的研究中，TNFSF11基因表达量和蛋白分泌量与施力时间和强度均呈正相关，在施力12-24小时后达到最大表达量。使用3D WAB进行研究体外加载模型也报道TNFSF11分泌增多，6小时力的应用（表后，大部分1)．在PLGA支架细胞中，力的大小与基因表达呈正相关，而力的持续时间与基因表达呈负相关。
TNFRSF11B.，也称为骨保护素(OPG)，是TNFSF11的拮抗剂，可抑制破骨细胞发生[55］．大多数研究都应用了2D WAB体外负载模型报道基因表达（没有观察到变化 )，但有两项研究报告了下调[40]或短暂的下调[8.)(表1)．考虑到蛋白质分泌，结果是矛盾的。然而，大多数研究报告蛋白质分泌减少或没有报告任何变化。使用3D WAB的研究结果体外装载也相反，取决于使用的脚手架。在一项使用胶原凝胶支架的研究中，增加了TNFRSF11B.观察到基因表达[26］．在所有应用PLGA支架的研究中，TNFRSF11B分泌的减少与力的大小呈正相关，与力的持续时间呈负相关[27那28那31那33那43］．除了一个例外[28，比较TNFSF11和TNFRSF11B.在上述研究中，基因表达的快速下降/调节TNFRSF11B.似乎与快速上调的TNFSF11在3 d war体外装载。由于这两个基因都代表骨转换调节的拮抗剂，这被解释为OTM期间压缩侧骨代谢循环变化的一个很好的代表[31那33］．也有人建议下调TNFSF11在后期可能有一些不与其他诱导剂延长破骨细胞促进[33］．
基因表达的PTGS2在二维和三维研究中，在施加力的情况下增加了。在大多数2D WAB研究中，PTGS2在实验和基因表达的持续时间之间显示出正相关（表1)．在这些研究中，使用3D WAB体外加载模型,PTGS2似乎与力持续时间呈负相关，与力大小呈正相关。另一方面，Western blotting显示PTGS2蛋白数量与持续时间和力大小均呈正相关(表)1)．因为PTGS2参与前列腺素E2新陈代谢，一个上调PTGS2基因表达(最大在施加力后24 ~ 48小时)与PGE的上调相关2secretion (maximum at 48 h after force application) in all studies (Table1)．
综上所述，使用2D和3D WAB的研究似乎有些不一致体外加载模型。2D WAB组的研究结果非常相似，具有可比性。然而，在使用3D WAB的研究中，异质性明显更高体外加载模型是可识别的。这种异质性可以与使用支架的类型。
4.6。字符串PPI分析
我们对选定的两组基因(“hPDLC列表”和“hOB列表”)进行了STRING PPI分析。PPI浓缩从两个PPI网络获得的值(图4.)的互动明显多于预期。这意味着研究中检测的基因不是随机选择的。从我们的角度来看，这并不奇怪，因为大多数研究都是选择“感兴趣的基因”进行分析，这些基因都是之前已知或怀疑与骨代谢有关的。只有少数研究进行了微阵列分析，以确定所有对强制应用作出反应的基因[26那32那44那48.］．
此外，每组基因在STRING分析中都鉴定出与OTM相关的KEGG通路(表)2)是发现可能影响OTM的新基因的有用来源。
5.结论
总之，WAB体外载荷模型是研究OTM过程中分子事件的一种简单而有效的方法。这篇综述的目的是概述所有使用过的WAB形式体外负载模型（2D和3D与不同支架组合），目前所有目前的研究结果，并且在它们的进一步改进某些问题指出。
3D WAB.体外通过引入更真实的环境，加载模型在未来的研究中被证明是有前景的体外设置。然而，与成熟的2D模型提供了类似的结果，3D模型显示结果不一致。显然，是为了需要进一步改进建立规范的体外提供可比较结果的模型。此外，有必要阐明在较长时间的力量应用中的分子事件。因此，未来的目标是建立二维和三维加载模型，使我们能够进行长期的研究。Liao等人的研究[14]就是一个很好的例子，在这个方向上应该有更多的研究。
缩写
| 2 d: | 二维 |
| 3 d: | 三维 |
| ATP： | 三磷酸腺苷 |
| 营： | 环状腺苷一磷酸酯 |
| ECM: | 细胞外基质 |
| ELISA: | 酶联免疫吸附试验 |
| H2史: | 硫化氢 |
| hOBMCs: | 人口腔骨髓细胞 |
| 就业机会: | 人类成骨细胞 |
| hPDLCs: | 人牙周韧带细胞 |
| KEGG: | 京都基因和基因组百科全书 |
| 没有: | 一氧化氮 |
| 力量: | 最佳的矫正力 |
| 功能: | Osteoprotegerin |
| 移动: | 矫正牙齿运动 |
| PDL: | 牙周韧带 |
| 铂族元素2： | 前列腺素E.2 |
| PLGA: | Polylactic-co-glycolic酸 |
| 丙交脂: | Poly-L-lactide酸 |
| PPI: | 蛋白质相互作用 |
| PTGS2： | Prostaglandin-endoperoxide合酶2 |
| RANKL: | 核因子受体激活因子Β配位体 |
| ROS： | 反应性氧气 |
| 字符串: | 检索相互作用的基因/蛋白质的搜索工具 |
| 肿瘤坏死因子: | 肿瘤坏死因子 |
| TNFRSF11B： | TNF受体超家族成员11b |
| TNFSF11： | TNF超家族成员11 |
| WAB： | 基于重量的方法。 |
的利益冲突
作者声明，本手稿的出版没有利益冲突。
致谢
米拉Janjic收到了助学金从BAYHOST（巴伐利亚Hochschulzentrum献给Mittel-，Ost- UNDSüdosteuropa，雷根斯堡，德国），并从基金塞尔维亚共和国青年人才（塞尔维亚共和国，青年和体育部的政府，贝尔格莱德，塞尔维亚）。
补充材料
补充1．搜索策略设计用于研究应用体外基于与原因全文阅读之后，在2D或3D细胞培养，并列出排除研究细胞中的权重方法加载模型。
补充2．应用二维权重法研究来自口腔面部区域的人原代细胞，即人牙周韧带细胞(hPDLC)、人口腔骨髓细胞(hOBMC)和人牙槽骨成骨细胞(hOB)。对于每个基因或代谢物力的大小和持续时间的力，施加在基因表达或物质分泌（增加，减少，和没有变化）的变化和技术中给出。
补充3．施加于人类和非人类细胞和细胞系的2D权重方法的研究在补充不包括2（即，人原代从口面部区域的细胞）。对于每个基因或代谢物力的大小和持续时间的力，施加在基因表达或物质分泌（增加，减少，和没有变化）的变化和技术中给出。
补充4．应用3D重量方法对人和非人体和细胞系的研究。对于每个基因或代谢物力的大小和持续时间的力，施加在基因表达或物质分泌（增加，减少，和没有变化）的变化和技术中给出。
参考文献
- a . Wichelhaus正畸治疗 - 从根本上治疗概念，乔治Thieme，第纽约，2017年。查看在：出版商的网站
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