孕产妇适应性免疫细胞蜕膜Parietalis显示更多的激活和Coinhibitory表型而蜕膜

文摘

蜕膜胎盘的母体部分,由母体免疫细胞、蜕膜基质细胞,extravillous胎儿滋养层。在成功怀孕,这些细胞间相互作用提供了一个复杂的平衡胎儿宽容和抗菌防御。这些过程还差两个解剖特征不同的蜕膜组织,下橄榄和parietalis。我们检查了免疫细胞蜕膜胎盘和parietalis词( 用流式细胞术)。通过使用多元判别分析,我们发现了一个清晰分离两个蜕膜间基于81年调查的参数。蜕膜parietalis更显示激活淋巴细胞表型与coinhibitory标记的表达高于那些孤立的从下橄榄和包含T调节细胞的频率更高。蜕膜含有较高比例的单核细胞,B细胞,mucosal-associated不变的T (MAIT)细胞。下橄榄B细胞更不成熟,parietalis MAIT表型细胞表现出更多的激活。传统的T细胞、NK细胞和MAIT细胞从隔间有说服力地回答——干扰素的产生γ和/或细胞毒性分子反应的刺激。最后,白细胞在蜕膜和parietalis显示显著的表型差异,表明相应的基质微环境提供不同的免疫调节信号。

1。介绍

在怀孕期间,胎儿接受营养,气体交换和免疫预防感染的母亲通过胎盘。同时,母体免疫系统必须保持攻击的同种异体胎儿。胎儿脐带(加州大学)和胎盘蜕膜包裹,孕产妇膜来自分化子宫内膜细胞在怀孕早期1]。蜕膜可以分成两个不同部分解剖;蜕膜覆盖基板的胎盘,而蜕膜parietalis线胎膜。蜕膜基质细胞(DSCs)构成的连接结构的基础蜕膜和parietalis已被证明利用特定的基因沉默表观遗传程序以减少孕产妇的吸引效应T细胞在小鼠2]。在体外,DSCs显示诱导T调节细胞以及抑制T细胞增殖利用语言和铂族元素₂以及调节T细胞反应的诱导能力受损[- 23- - - - - -5]。滋养层细胞构成的外屏障胎儿胎盘,在怀孕的过程中,滋养层侵入周围的胎盘蜕膜层。这些extravillous滋养层缺乏古典多态类HLA分子但表达HLA-C HLA-G, HLA-E [6]。这提供了某些方面的胎儿逃脱免疫识别和响应。

之前的研究在不同的子集的孕产妇免疫细胞浸润蜕膜组织很少分辨蜕膜parietalis和下橄榄。在怀孕早期,大多数的蜕膜白细胞noncytotoxic NK细胞,已被证明是至关重要的形成和重塑的胎盘组织的血液供应。蜕膜巨噬细胞有一个重要的角色在维护耐受性环境健康的怀孕,但还可以与促炎细胞因子在细菌刺激反应(7]。蜕膜巨噬细胞人口还包含一个子类M2表型,产生高水平的il - 10 (8]。T细胞数量的增加在怀孕,是30至80%的蜕膜淋巴细胞总数的术语(9]。T调节细胞的数量升高在蜕膜隔间和有能力对胎儿(抑制免疫反应10]。PD-1的表达和TIM-3蜕膜上大大增加T细胞,和在活的有机体内封锁这些分子在老鼠身上导致增加流产率(11]。

胎盘组织已经成为一种很有前途的干细胞来源的临床试验(12),是重要的特征的生理状态在这个车厢里周围的免疫细胞的数量。免疫细胞组成和影响因素激活状态在蜕膜和parietalis特征还非常少,但是很有可能,这两个网站不同的基质微环境的影响。

本研究的目的是检验这两个蜕膜组织的免疫细胞组成。使用流式细胞仪,我们进行了深入描述了不同的蜕膜隔间内淋巴细胞数量简单怀孕后胎盘捐赠。这提供了新的免疫景观的基本知识在这些组织中,以及潜在的见解不同的蜕膜基质环境网站如何调解免疫调节。

2。材料和方法

2.1。胎盘捐助者

怀孕后简单的词(平均妊娠39周,范围38-42),健康的个人( ,平均年龄32岁,范围意向)选择性剖腹产后捐赠自己的胎盘。从捐赠者获得书面知情同意,该地区在卡罗林斯卡医学院的研究伦理审查委员会批准的捐献外周血和胎盘(输入数字2009/418-31/4 2010/2061-32和2015/1848-31/2)。数据在一些免疫参数在蜕膜parietalis从11 15捐助者的部分被包含在另一个出版(13),但没有数据在蜕膜免疫细胞曾被发表。

2.2。细胞隔离

胎盘是直接运输到我们实验室从相邻建筑物的手术室,和细胞隔离开始在不到30分钟后胎盘交付。配对样本收集tissue-resident淋巴细胞蜕膜和parietalis使用方法类似于他人(14]。胎膜(包括蜕膜parietalis)减少≥1厘米从胎盘的边缘和放置在一个无菌培养皿和洗广泛与PBS。从绒毛膜parietalis被解剖,然后一起丢弃羊膜。组织切成小块,放在PBS。此后,胎盘与脐带朝下放置,用PBS洗广泛。的下橄榄强烈胎盘组织,因此我们用手术刀小心翼翼地刮掉下橄榄灰色薄膜放置在PBS。两种类型的组织在PBS洗离心,享年600岁1分钟。上层清液被丢弃,过程重复了五次以上,直到上层清液是清楚的。淋巴细胞是由非酶的释放组织机械解集使用gentleMACS分离器(Miltenyi研究,Bergisch格拉德巴赫,德国)。组织是100年然后连续过滤μ米金属网,然后到70年μm和40μm细胞过滤器(VWR,二,PA)。离心后,细胞颗粒resuspended在裂解缓冲(物联网3,贝克曼库尔特,富勒顿、钙、美国),洗一次,染色细胞外流仪分析。剩余的细胞在液态氮冷冻RPMI (HyClone, GE健康科学、南洛根、UT)中补充10%胎牛血清,100 U /毫升青霉素,100μg / ml链霉素(完全培养基)含10% DMSO溶液。

2.3。流式细胞术

大多数的细胞外流式细胞仪实验进行直接在新鲜的细胞,但对六个捐助者,T细胞标记CD69、CD25、CXCR3, CCR6, CD38、HLA-DR, CD127, PD-1配对冷冻样品进行了分析。染色在96孔板进行≤1×10⁶在50个细胞/好μl CliniMACS PBS / EDTA缓冲区(格拉德巴赫Bergish Miltenyi生物技术,德国)补充0.1%牛血清白蛋白。这些细胞被孵化马伯30分钟在4°C。细胞内染色进行细胞外染色后使用BD Cytofix / Cytoperm™工具(BD生物科学,富兰克林湖,新泽西)根据制造商的指示。7法染色用于生活和死细胞如果没有细胞内染色。在这项研究中使用的抗体是补充表中列出可以在网上https://doi.org/10.1155/2017/8010961。数据收集使用BD FACSCanto流式细胞分析仪和分析与FlowJo软件(美国或树明星,亚什兰)。结果subgating只包括亲本种群由≥80个细胞。

2.4。细菌刺激试验

单核细胞是由密度梯度离心法分离(Lymphoprep Axix-Shield,邓迪,苏格兰)和resuspended在完全培养基。新鲜细胞被培养在37°C和5%的公司₂在一个3×10的浓度⁶96 -孔板细胞/毫升,单独或与紫外线照射过大肠杆菌(大肠杆菌一起)的感染复数30 1.25μg / ml anti-CD28mAb (CD28.2 BioLegend,圣地亚哥,CA)。经过12个小时的文化,10μg / ml Brefeldin-A(论坛,Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州)补充道,紧随其后的是一个额外的4小时的文化。文化的总16小时后,细胞收获和染色流式细胞术。

2.5。PMA / Ionomycin刺激试验

冷冻细胞解冻和单核细胞是由密度梯度离心法分离(Lymphoprep Axix-Shield)。外周血单核细胞(PBMCs)健康献血者(健康对照组)被用作控制。在完全培养基和培养细胞resuspended 37°C和5%的公司₂在2×10的浓度⁶细胞在96孔板/毫升。10μg / ml论坛(Sigma-Aldrich)被添加到所有井,和一半的样本与25 ng / ml PMA刺激(Sigma-Aldrich)和1μg / ml ionomycin (Sigma-Aldrich)。文化,5小时后细胞收获和染色流式细胞术。

2.6。统计数据

多元正交投影潜在结构通过偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)是用于获得最大的分离X变量,即免疫细胞变量,基于类信息,即下橄榄和parietalis数字1 (b),2(一个),3 (b)(期刊SIMCA软件、缝匠肌Stedim生物技术,瑞典)。每一个的贡献X- variable, VIP值,OPLS-DA模型图1(一)计算(补充图S)。X变量与一个VIP值低于0.98被排除在外,和一个新的模型生成基于剩余变量(图1 (b))。规模上y设在OPLS的情节是一个无量纲规模;加载向量归一化单位长度。OPLS质量的分析是基于R2,这表明变量的变化是如何用模型来解释,Q2,估计模型的预测能力。利用OPLS-DA分析筛查组,差异的因素大部分分离进行了进一步分析使用一个双尾Wilcoxon配对符号秩测试(GraphPad软件,拉霍亚,CA)。的alpha值< 0.05被认为是显著的。

(一)

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(d)

图1

不同的白细胞数量蜕膜parietalis和下橄榄。(a) OPLS-DA观察图显示白细胞从蜕膜和parietalis之间的分离。(b) OPLS阴谋后一个变量影响投影(VIP)为0.98,显示蜕膜室之间的关联和表型白细胞标记((a, b))。(c)的分布主要白细胞配对样本子集的蜕膜和parietalis与非参数Wilcoxon测试。线在图描绘了中间值(n= 11 - 12)。流式细胞术(d)代表情节显示初始控制策略中使用,以及闸门(c)的子集。 ; ; 。

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图2

淋巴细胞在蜕膜parietalis表达更多coinhibitory标记而下橄榄。(一)OPLS情节展示蜕膜室之间的关联和表型coinhibitory标记(n= 10 - 12)。(b)表面表达等高线图和直方图代表显示的表达式表示在蜕膜细胞外标记和parietalis T细胞(CD3⁺)相比,荧光- 1 (FMO)控制PD-1 (),LAG-3 (),TIM-3 (),PD-1⁺TIM-3⁺()。(c) B细胞(CD19⁺)表面表达PD-1 (),TIM-3 (),CTLA-4 (),PD-1⁺TIM-3⁺()。(d) NK细胞(CD56⁺CD3⁻)表面表达LAG-3 ()。等高线图(e)代表直方图和显示的表达式表示在蜕膜细胞外标记和parietalis细胞(c)到(d)与荧光- 1 (FMO)控制。线图表描绘了中位数。比较之间的配对样本使用非参数Wilcoxon测试。ns =不显著; ; ; 。

(一)

(b)

(c)

(d)

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(f)

(g)

图3

MAIT蜕膜细胞多,但parietalis MAIT表型细胞显示更多的激活。流式细胞术(a)代表情节显示控制策略基于CD3 MAIT细胞⁺T细胞(左到右)。(b) OPLS情节展示蜕膜室之间的关联和表型MAIT细胞标记(n= 8日至13日)。(c)的数量MAIT CD3细胞百分数表示⁺在成对样本T细胞蜕膜和parietalis ()。(d) MAIT CD4和CD8细胞表面表达的配对样本的蜕膜和parietalis ()。(e) MAIT细胞表面表达CD69 ()、CD25 (),CD127^高()、CD38 ()和PD-1 ()。(f)代表直方图显示的表达式表示MAIT蜕膜细胞和细胞外标记parietalis相比荧光- 1 (FMO)控制。(g)轮廓图和直方图显示指定的蜕膜细胞内分子的表达(上)和parietalis(底部)如果(黑)相比大肠杆菌对干扰素(橙色)——刺激条件γ(IFN -γ,),granzyme B (GrzB,),穿孔素()。线图表描绘了中位数。比较之间的配对样本使用非参数Wilcoxon测试。ns =不显著; ; ; 。

3所示。结果

3.1。一些免疫细胞的数量的比例在蜕膜和Parietalis不同

通过多元OPLS-DA,我们检查,如果81免疫免疫细胞变量评估不同蜕膜和parietalis之间。观察图在图中描述1(一),一个清晰的分离蜕膜和parietalis被发现。的X变量显示最严重的下橄榄或parietalis OPLS-DA加载图在图所示1 (b)模型的基础上X变量与VIP值≥0.98。所有参数的VIP列情节是补充图所示。进一步调查使用单变量统计分析两组,差异被认为在所有主要的免疫细胞的数量调查。单核细胞的比例,B细胞和CD56^昏暗的NK细胞下橄榄parietalis相比较高,而CD3总额⁺T细胞,CD56^明亮的NK细胞,NKT-like细胞被发现在更高的频率下橄榄parietalis相对于(图1 (c),控制策略如图1 (d))。

3.2。蜕膜Parietalis显示更多的激活T细胞表型与蜕膜相比

证明了OPLS-DA图1 (b)T细胞的表型差异,B细胞,NK细胞显示蜕膜和parietalis之间。基于CCR7和CD45RA表达式,我们发现CD4细胞⁺和CD8⁺从两个隔间都由一个效应T细胞记忆T细胞表型的幼稚细胞(图4(一))。这一般成分对比周边T细胞在孕妇和妊娠妇女13,15]。蜕膜parietalis包含更高比例的CD4记忆效应和中央内存⁺蜕膜相比,T细胞(图4(一))。控制策略如图4 (b)。的标记T细胞激活和导航也有不同的表达模式之间的两个隔间(数字4 (c),4 (d),4 (e),4 (f),4 (g),4 (h),4(我))。从parietalis T细胞有较高表达早期的激活和/或组织居住CD69标志(图4 (d)),以及增加的表达α链- 2受体的CD25(图4 (e))。没有观察到显著差异表达的活化标记HLA-DR后期,虽然有增加的趋势从parietalis T细胞(图表达4 (f))。的表达α链IL-7受体,CD127在parietalis显著下降,进一步表明一个更活化表型而下橄榄T细胞(图4 (g))。的表达的趋化因子受体CXCR3和CCR6既增加parietalis相比下橄榄(数字4 (h)和4(我))。

(一)

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(h)

(我)

(j)

图4

蜕膜parietalis包含比下橄榄激活T细胞。(一)CD4⁺和CD8⁺T细胞是封闭的根据CD45RA和CCR7的表达(控制策略(b))和分成幼稚,中央内存(CM)、记忆效应(EM),或终末分化(TD)的子集()。(c)代表直方图显示的表达式表示在蜕膜细胞外标记和parietalis相比荧光- 1 (FMO)控制。比较蜕膜和parietalis CD4之间⁺和CD8⁺T细胞CD69的表达(d)、CD25 (e), HLA-DR (f), CD127^高(g)、CXCR3 (h)和CCR6(我)((d, e)和(我) ,(f, g) ,(h))。(j)配对下橄榄单核细胞()和parietalis ()与PMA刺激5小时/ ionomycin或如果离开了。数据从健康对照组细胞(PBMC)作为控制()。细胞内的表达干扰素-γ(IFN -γ)和granzyme B (GrzB)是由流式细胞术。被分成CD4 T细胞⁺(左上角)和CD8⁺等高线图(中上),代表在各自细胞子集。GrzB测量如果样品中只有(右上),代表直方图显示在右下角。线在图描绘了中间值。比较之间的配对样本使用非参数Wilcoxon测试。ns =不显著; ; ; 。

在与PMA刺激/ ionomycin, CD4细胞⁺和CD8⁺T细胞干扰素的生产γ(IFN -γ)在类似水平的PBMCs从健康的捐赠者(图4 (j))。蜕膜CD8⁺T细胞表达granzyme B (GrzB)处于静止状态,但相比周边T细胞表达的中位数从健康的捐赠者(图4 (j))。正如所料,GrzB是低CD4的表达⁺T细胞。

3.3。不同的B细胞和NK细胞和T子集监管蜕膜细胞Parietalis和下橄榄

B细胞可分为不成熟/过渡,成熟/天真,和记忆细胞基于CD24和CD38表达式(图5(一个))。过渡B细胞(CD24的频率^高CD38^高CD19之间)⁺CD20⁺B细胞下橄榄与parietalis相比,价格高而成熟/天真的隔间(CD24^intCD38^int在parietalis(图)高5(一个))。没有显著差异在B细胞记忆舱(CD24^高CD38^低/否定)。

(一)

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图5

成熟的B细胞和频率调节T细胞蜕膜室之间的不同。(一)控制策略(左)(右)和图形表示的B细胞分化状态的配对样本的蜕膜和parietalis ()。(b)的比例控制策略和T调节细胞亚群)CD4的百分比⁺T细胞(中间)和平均荧光强度(MFI) CD25的封闭的亚(右)()。(c)控制策略(左)和(右)图示CD16表达CD56^昏暗的蜕膜细胞配对样本和parietalis ()。(d) (c)但是对于CD56一样^高细胞()。从下橄榄(e)配对单核细胞()和parietalis ()与PMA刺激5小时/ ionomycin或如果离开了。数据从健康对照组细胞(PBMC)作为控制()。细胞内的表达干扰素-γ(IFN -γ)和granzyme B (GrzB)是由流式细胞术。T细胞分为CD56^昏暗的(左上角)和CD56^明亮的等高线图(中上),代表在各自细胞子集。GrzB测量如果样品中只有(右上),代表直方图显示在右下角。线图表描绘了中位数。比较之间的配对样本使用非参数Wilcoxon测试。ns =不显著; ; 。

以往的经验显示,CD4细胞⁺CD25⁺CD127^低T细胞与Foxp3蜕膜组织很大程度上重叠⁺T调节细胞亚群)和他们相比,妊娠前三个月增加外周血(16]。我们发现parietalis包含CD4的比例更高⁺CD25⁺CD127^低亚群中CD4⁺下橄榄T细胞相比,中等强度的CD25表达在亚高parietalis(图5 (b))。

Fc受体的表达CD16调查在两个NK细胞群居住在蜕膜组织。正如所料,经典的CD3⁻CD56^昏暗的CD16 NK细胞有高表达(图5 (c)),而蜕膜CD3的表情⁻CD56^明亮的NK细胞很低(图5 (d))。CD16表达显著降低对NK细胞数量parietalis相比下橄榄(数字5 (c)和5 (d))。另一方面,有一个趋势在单核细胞低表达CD16 parietalis相比下橄榄(补充图一个)。

与PMA / ionomycin刺激后,我们发现干扰素-γ表达CD56^昏暗的,以及CD56^明亮的NK细胞下橄榄和parietalis(图5 (e))。的比例从蜕膜NK细胞表达干扰素-γ是至少高达外围NK细胞健康的捐赠者。我们进一步指出CD56^昏暗的NK细胞干扰素的表达——显示一个模式的背景γ,这不是CD56观察到的^明亮的细胞。虽然统计分析实验太少,CD56的比例^昏暗的在蜕膜NK细胞表达GrzB似乎较低而外周血(图5 (e))。但是,没有这样的区别在CD56 GrzB表达式^明亮的NK细胞。

3.4。蜕膜Parietalis免疫细胞表达高水平的Coinhibitory标记而下橄榄

的表面表达coinhibitory分子PD-1 TIM-3, LAG-3, CTLA-4 CD4化验⁺和CD8⁺T细胞,CD19⁺B细胞和CD56⁺NK细胞。基于这些20参数流式细胞术结果,OPLS-DA模型表明,有更高比例的细胞表达coinhibitory分子,主要是B细胞和CD4细胞⁺下橄榄T细胞,在parietalis相比(图2(一个))。进一步分析与单变量统计证实了这个模型。PD-1, LAG-3, TIM-3 coexpression PD-1和TIM-3 parietalis下橄榄CD4相比更高⁺T细胞(图2 (b))。同样的结果被认为对CD8 LAG-3表达式⁺T细胞,但只有其他标记(图趋势明显2 (b))。CTLA-4 T细胞上的表达并不是统计不同下橄榄和parietalis(补充图b)。增加频率的b细胞parietalis表示PD-1 TIM-3, CTLA-4,以及双PD-1和TIM-3(人物的表情2 (c)和2 (e))。对于NK细胞,LAG-3较高的表达在样本parietalis相比下橄榄(数字2 (d)和2 (e))。虽然不明显不同,我们还提到一个更高的平均趋势表达TIM-3在parietalis NK细胞(67%)下橄榄相比(51%, ,补充图c)。

3.5。Mucosal-Associated不变(MAIT) T细胞比例和表型在蜕膜下橄榄和Parietalis有所不同

MAIT细胞可以快速响应与刺激时,分泌的促炎细胞因子和细胞毒性分子microbial-derived维生素B在MHC-related分子代谢物1 - (MR1)依赖的方式(17),但很少有人知道它们的重要性在怀孕。MAIT细胞被确定为Vα7.2⁺和CD161^高T细胞(图3(一个))。OPLS-DA演示了一个分离蜕膜和基于MAIT parietalis细胞比例和表现型(图3 (b))。的频率MAIT CD3细胞⁺T细胞是高下橄榄parietalis相比(图3 (c))。CD8的分布⁺双重否定(DN)和CD4细胞⁺MAIT细胞相似之前报道在外周血17),但CD4的比例⁺MAIT细胞高parietalis相比下橄榄CD8的牺牲⁺MAIT细胞(图3 (d))。类似于我们观察到传统的T细胞,从parietalis MAIT细胞CD69、CD25表达高于下橄榄和低表达的CD127(数字3 (e)和3 (f))。CD38、MAIT细胞激活的另一个标志18)和coinhibitory PD-1标志,也增加了parietalis MAIT细胞相比下橄榄(数字3 (e)和3 (f))。因此,蜕膜parietalis MAIT细胞表现出更多的激活表型相比下橄榄MAIT细胞。

检查的功能MAIT蜕膜组织,细胞单核细胞与紫外线照射过的刺激大肠杆菌16小时。对细菌的反应是通过细胞内表达干扰素-来衡量的γ(两个捐助者)和GrzB穿孔素(捐赠)。大部分的蜕膜细胞MAIT捐助者干扰素-都做出了回应γ表达式(图3 (g))。细菌刺激诱导表达的细胞毒性分子GrzB和穿孔素在蜕膜细胞MAIT(图3 (g))。

4所示。讨论

这项研究提供了最全面的免疫细胞子集映射蜕膜parietalis和下橄榄。通过分析使用成对样品等大量的因素,我们可以提出一个多层面的概述免疫系统的偏振不同蜕膜隔间内怀孕。使用OPLS-DA创建一个模型基于进一步的单变量测试提供了一个更客观的统计分析的基础上使用的所有参数,根据它们的相对添加到模型中。歧视分析显示大免疫细胞成分的差异之间的蜕膜parietalis和下橄榄。

在一般的白细胞数量,蜕膜中含有更多的B细胞,单核细胞和CD56^昏暗的NK细胞,而parietalis是由更多的T细胞,NKT-like细胞和CD56^明亮的NK细胞。这种模式一般符合之前的出版物审查蜕膜免疫细胞(子集19- - - - - -22]。

蜕膜NK细胞构成> 70%的蜕膜白细胞在妊娠前三个月和重要指导入侵的滋养层蜕膜细胞因子和趋化因子的梯度,以及螺旋动脉的增长和重构。在怀孕的过程中,这些数字下降达到类似水平在妊娠妇女的子宫内膜任期23]。•波特曼列出等人发现,CD16表情下橄榄蜕膜NK细胞增加怀孕的(21]。我们观察到,CD16表达明显高于下橄榄CD56 parietalis相比^昏暗的和CD56^明亮的NK细胞。现在还不知道如果蜕膜NK细胞移植的表达CD16表达式在怀孕期间或如果有CD16的渗透⁺后面的怀孕中NK细胞。两个NK细胞产生干扰素-子集γ当与PMA刺激/ ionomycin,但CD56^昏暗的细胞有一个背景表达,而CD56^明亮的细胞没有。这将是进一步研究感兴趣的蜕膜NK细胞和生理刺激的反应。

蜕膜的T细胞群倾向于一个效应记忆表型的幼稚T细胞,parietalis找到最突出。这是符合的结果Sindram-Trujillo et al .,以及连续工作的蒂尔堡et al .,显示一个浓缩效应记忆T细胞的蜕膜组织和外周血相比,也有最显著的变化在parietalis [20.,24]。这些效应细胞含有大量的信使rna编码细胞毒性分子,但是翻译成蛋白质功能受损。符合这些发现,我们观察到的趋势下橄榄和T细胞大量GrzB parietalis有低于T细胞从外周T细胞健康对照组。高架激活T细胞在蜕膜组织中地位也被证明之前(20.]。我们的数据证实了这些发现,观察CD127在蜕膜降低T细胞表达进一步支持效应内存状态和活化表型(25]。

表达的趋化因子受体CXCR3和CCR6更高的T细胞蜕膜parietalis而下橄榄。这可能反映了显性效应的发现内存表型,但也可能意味着更大比例的Th1细胞和Th17细胞(26,27]。DSCs已被证明有一个受损的生产CXCR3配体CXCL9和CXCL102),但extravillous滋养层浸润蜕膜组织结构上产生CXCL10 [28]。Svensson-Arvelund等人进一步显示出高产量CCR6配体CCL20的细胞从胎盘组织外植体(28]。CCR6⁺T细胞在第一学期蜕膜被证明是减少外周血匹配相比,表明降低Th17极化在怀孕早期(16]。另一方面,Feyaerts等人表明,蜕膜parietalis包含更高比例的干扰素-γ和IL-17产生T细胞相比,外围和子宫内膜T细胞(15]。与我们的研究结果,这表明Th1细胞和Th17细胞相对频率的增加在parietalis怀孕的过程中,进一步促进活化的T细胞在这个舱。

尽管B细胞通常被忽视了在蜕膜免疫学的背景下,他们的存在已经证明在以前的出版物通过流式细胞术(20.,22,29日,30.)和免疫组织化学(31日]。我们曾表明DSCs蜕膜和parietalis容易产生肿瘤坏死因子家族的B细胞激活因子(金属)与干扰素刺激后22),暗示角色B细胞蜕膜中成熟。我们发现B细胞的频率下橄榄与parietalis相比,价格高,但parietalis包含更高比例的成熟/天真的B细胞的过渡B细胞。这可能表明parietalis微环境因素,包括高飞球的一击,诱导蜕膜B细胞成熟。有趣的是,最近表明,B细胞成分的改变在蜕膜和高高飞球的一击表达式与早产有关[31日]。

亚群提出了发挥重要作用在母婴宽容和影响已经被其他几个调查在蜕膜组织中(14,30.,32- - - - - -34]。蒂尔堡等人表现出相关性HLA-C母亲和胎儿之间CD4和比例的激活⁺CD25^昏暗的T细胞和CD4⁺CD25^高假定的亚群在蜕膜parietalis [35]。这表明在蜕膜促进孕产妇胎儿同种抗原T细胞激活和也感应的亚群。符合parietalis T细胞激活状态的增加,我们发现CD4的比例⁺CD25⁺CD127^低亚比下橄榄parietalis价格高。CD25表达的强度在parietalis亚也更高,进一步表明更多激活Treg表型。我们曾表明DSCs parietalis提升alloantigen-stimulated T细胞CD25表达升高,这在一定程度上解释了诱导亚(4)和2水平升高在上层清液由于减少容量的T细胞通过受体- 2信号复杂(5]。因此,DSCs可能作用在塑造蜕膜组织中T细胞表型。

虽然coinhibitory标记表达式在蜕膜在某种程度上已被调查之前,我们的研究提供了一个更完整的分析,这些标记T, B,以及NK细胞子集,蜕膜隔间之间的比较。OPLS-DA模型基于PD-1 coinhibitory标记的表达,TIM-3, LAG-3, CTLA-4给了一个清晰的分离parietalis和下橄榄。Parietalis与绝大多数的表达增加有关调查在多个淋巴细胞标记的子集。大部分的T细胞在蜕膜间表达PD-1 TIM-3,符合其他研究表明,蜕膜相比,这些标记T细胞表达高水平的外周血(11,36]。PD-1、TIM-3 LAG-3表情T细胞在parietalis最为明显,也包含大量CD4⁺T细胞群表达PD-1和TIM-3。PD-1的配体,PD-L1 PD-L2,已被证明在蜕膜巨噬细胞和基质细胞表达和功能在抑制T细胞增殖和细胞因子的生产4,36,37]。怀孕的老鼠接受抗体阻断PD-1和TIM-3住胎儿相比,控制动物的数量减少,从而证明这些标记的重要性对于一个成功的怀孕结果在小鼠11]。在怀孕LAG-3没有被广泛研究,但它已经表明,蜕膜亚表达LAG-3 [38]。当我们与PMA刺激单核细胞/ ionomycin,我们发现CD4细胞⁺和CD8⁺T细胞的干扰素-γ反应符合观察PBMCs健康对照组。将感兴趣的探索蜕膜淋巴细胞反应胎儿和病毒抗原进一步研究coinhibitory标记的作用抑制蜕膜淋巴细胞反应。

相对较大比例的蜕膜parietalis B细胞表达PD-1, TIM-3, CTLA-4,表情一直高于parietalis而下橄榄。PD-1表达式被证明能增加在B细胞活化反应(39)和表达的分组人口管理B细胞参与肝癌进展(40]。尽管CTLA-4主要描述表达的T细胞,据报道,它还可以表达的小鼠B细胞在T cell-induced激活(41]。CTLA-4表达蜕膜B细胞没有前面描述的那样,但我们观察到一个明显的CTLA-4⁺B细胞parietalis人口。然而这些标记在B细胞的直接影响还不清楚,和普通B细胞在母婴公差影响中的作用需要进一步调查。

MAIT维生素B细胞被激活的代谢物来源于特定的菌株的代谢17]。对MAIT细胞在妊娠,但是我们以前表明MAIT在蜕膜细胞存在parietalis对外界刺激的反应能力和有一个类似的外围MAIT细胞(13]。有趣的是,我们可以在一个单独的下橄榄和parietalis OPLS-DA模型基于收集的数据只有在MAIT细胞,主要展示MAIT细胞表型差异这两个隔间。下橄榄包含更高频率MAIT细胞CD3之一⁺细胞,但一个更大比例的MAIT在parietalis CD4细胞⁺CD8为代价的⁺MAIT细胞。类似传统的T细胞,MAIT parietalis显示更激活细胞表型和下橄榄相比,但parietalis MAIT细胞也有更高的表达CD38激活标志。此外,parietalis MAIT疲惫的细胞有较高表达PD-1标志,进一步展示其长期活化表型在蜕膜组织。尽管捐赠者对泛函分析的数量不多,我们发现MAIT细胞下橄榄和parietalis迅速产生干扰素-γ、GrzB和穿孔素作为回应大肠杆菌刺激。我们之前工作MAIT蜕膜细胞parietalis还显示,蜕膜MAIT比例和外周血细胞产生这些因素在类似MAIT细胞(13]。PD-1结扎被描述阻碍MAIT细胞功能(42),但尽管高PD-1表情蜕膜MAIT细胞,其功能能力仍完好无损。我们的研究提供了第一个证据的存在,表型,和下橄榄MAIT细胞的功能,以及与从parietalis MAIT细胞进行比较。

淋巴细胞表型的差异的生理原因parietalis和下橄榄是未知的。一个可能的解释是,术语下橄榄更血管parietalis相比,这可能允许一个更高的涌入外周免疫细胞的活化表型,而parietalis更静态的免疫成分。下橄榄这也可能意味着更暴露在血源性病原体,而parietalis主要提供保护粘膜病原体以及共生的微生物群。另一个假设是,劳动是诱导炎性免疫细胞的激活或招聘的膜(43),parietalis膜破裂的网站。Marcellin等人最近发现的面积parietalis覆盖子宫颈显示免疫表型的改变在术语的其他部分相比parietalis膜(44]。多态的表达HLA分子调节,NK细胞群转向经典的细胞毒性表型,和immunotolerant M2巨噬细胞下降。我们从整个蜕膜分离出淋巴细胞parietalis膜和发现一般白细胞人口主要由活化表型。这将是有趣的探讨T细胞表型parietalis蜕膜组织覆盖子宫颈术语检查如果Marcellin等人也观察到明显影响T细胞。

与我们隔离方法,我们针对采购组织居民尽可能代表免疫细胞的生理条件。尽管组织广泛洗处理之前,我们无法确定,我们的样品是完全没有污染周边血液。自从蜕膜血管更组织parietalis相比,也有可能下橄榄的污染较大的样本。同样,虽然我们没有使用酶消化的组织,组织的机械解集可能已经改变了某些表面分子的表达。另一个限制因素是,样本容量不够大,调查是否胎盘交付时间等因素分析,供体的年龄、妊娠周也影响免疫细胞的分离或分析的结果。

Placenta-derived正在探讨基质细胞作为细胞疗法潜在的候选人,因为它们是参与调节炎症免疫反应(12,45,46]。基质细胞和成纤维细胞来自身体的不同解剖网站即使被证明有不同的转录模式在体外扩张,表明基质细胞的位置记忆(47]。因此它可能的重要性考虑组织的免疫表型的基质细胞是孤立的。之间的差异与蜕膜基质细胞隔离parietalis和下橄榄没有彻底探索,但我们immunophenotyping就是明证,他们有不同的能力可能影响免疫反应。

5。结论

我们已经进行了全面描述成对样本中白细胞数量的蜕膜parietalis和下橄榄。我们发现,免疫细胞数量差异强烈两个调查之间的隔间。蜕膜parietalis淋巴细胞以及MAIT细胞表现出更多的激活表型具有更高的表达比下橄榄隔绝coinhibitory标记。自从蜕膜parietalis网站膜破裂,有趣的是,parietalis通常含有T细胞的活化和分化表型而下橄榄。同时,这两个不同的解剖网站可能受到不同因素的影响,可能在怀孕期间扮演不同的角色。本研究的结果也可能给线索如何蜕膜基质微环境在不同网站可能影响免疫细胞的监管,这可能应该考虑在选择基质细胞的组织来源隔离细胞疗法。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关这篇文章的出版。

作者的贡献

马丁焊料设计、执行和分析实验,解释结果,并写了论文。拉娅Gorchs设计,执行,分析和解释实验结果。Anna-Carin Lundell构思和分析实验,解释结果,并进行统计分析。Eleonor Tiblad和塞巴斯蒂安Gidlof解释结果。海伦Kaipe构思,设计,分析了实验,解释结果,并写了论文。所有作者参与了手稿的最终批准。

确认

作者要感谢助产士在妇产科,卡罗琳斯卡大学医院Huddinge招募的母亲和处理胎盘。海伦Kaipe得到了瑞典研究理事会,瑞典儿童癌症基金会,癌症协会在斯德哥尔摩,瑞典癌症基金会,斯德哥尔摩郡议会,卡罗林斯卡医学院。马丁焊料被卡罗林斯卡医学院支持。塞巴斯蒂安Gidlof是斯德哥尔摩郡议会的支持。

补充材料

补充图S1。OPLS情节基于81参数,显示蜕膜室之间的关联和表型白细胞标记( $n = 8 - 13$ )。补充图S2。(一)对比蜕膜和parietalis CD16 CD14表达⁺单核细胞( $n = 11$ )。(B)对比蜕膜和parietalis CTLA-4 CD4的表达⁺和CD8⁺T细胞( $n = 11$ )。(C)对比蜕膜和parietalis TIM-3表达CD56⁺细胞( $n = 11$ )。线在图描绘了中间值。比较之间的配对样本用非参数Wilcoxon测试。补充表S1。抗体和可行性染料用于流式细胞术。

引用

b . Gellersen和j·j·布洛,”循环decidualization生殖健康和人类子宫内膜的失败,”内分泌检查,35卷,不。6,851 - 905年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
p .南希·e . Tagliani c·s·泰p . Asp, d . e . Levy a .苏欣,“在蜕膜基质细胞趋化因子基因沉默限制T细胞进入母胎界面,“科学,卷336,不。6086年,第1321 - 1317页,2012年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
h . Karlsson t .据美国纳瓦,s .鲁姆m . Westgren o . Ringden,“从术语胎膜基质细胞体外高度抑制同种异体设置,“临床和实验免疫学,卷167,不。3、543 - 555年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
T .据美国纳瓦,j·约瑟夫·o . Ringden和h . Kaipe“蜕膜基质细胞促进细胞调节性T细胞并抑制alloreactivity contact-dependent方式,“干细胞与发展,22卷,不。19日,2596 - 2605年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
T .据m .焊料l . Verleng et al .,“前线科学:placenta-derived蜕膜基质细胞改变IL-2R alloantigen-activated T细胞表达和信号,”《白细胞生物学,卷101,不。3、623 - 632年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
r .应用s p·墨菲,r·费尔南多·l·加德纳,阿哈德t ., a·莫菲特,“人类白细胞抗原(HLA)的表达主要滋养层细胞和胎盘细胞系,确定使用单抗原珠子描述异型anti-HLA抗体的特异性,”免疫学,卷127,不。1、26 39,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
j . Svensson-Arvelund和j . Ernerudh”巨噬细胞的作用在促进和维持体内平衡母婴界面影响,”美国生殖免疫学》杂志上,卷74,不。2、100 - 109年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
j . Svensson m . c . Jenmalm a . Matussek r . Geffers g . Berg和j . Ernerudh”在母婴替代的界面表达标记影响巨噬细胞激活和csf和il - 10,”《免疫学,卷187,不。7,3671 - 3682年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
T·蒂尔堡p.h. Claas, s . a . Scherjon“爱思唯尔滋养层研究奖演讲:蜕膜T细胞的独特性质及其在免疫调控作用在人类孕期、”胎盘,卷。31日S82-S86, 2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
t·蒂尔堡,d . l . Roelen b . j . van der桅杆et al .,“证据fetus-specific CD4的选择性迁移⁺CD25^明亮的调节性T细胞从外周血蜕膜在人类怀孕,”《免疫学,卷180,不。8,5737 - 5745年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
黄懿慧s . c . Wang, h·l·朴et al .,“PD-1 Tim-3通路与监管CD8相关联⁺t细胞功能在蜕膜和维护正常的怀孕,”细胞死亡和疾病》第六卷,e1738条,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
o . Parolini f . Alviano g . p . Bagnara et al .,”简明点评:隔离和表征的胎盘细胞从人类术语:第一届国际研讨会的结果胎盘提取干细胞,”干细胞,26卷,不。2、300 - 311年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
m .焊料l . Gorchs t .据et al .,“MAIT细胞积聚在胎盘intervillous空间和显示一个高细胞毒性表型在细菌刺激,”科学报告,7卷,不。1,p。6123年,2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
t·蒂尔堡,d . l . Roelen b . j . van der桅杆et al .,”CD4的微分分布⁺CD25^明亮的和CD8⁺CD28⁻在人类妊娠蜕膜和产妇血液中的t细胞,”胎盘补充一个,卷。27日,S47-S53, 2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
d . Feyaerts m·本纳b . van Cranenbroek o·w·h·范德Heijden Joosten,和r·g·范德Molen“人类子宫淋巴细胞获得更有经验和耐受性表型怀孕期间,“科学报告,7卷,不。1,p。2884年,2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
j . Mjosberg g . Berg m . c . Jenmalm FOXP3和j·Ernerudh。⁺调节性T细胞和T辅助1,辅助T 2,和17辅助T细胞在人类早孕蜕膜、”生物的繁殖,卷82,不。4、698 - 705年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
l . Le Bourhis e·马丁,即Peguillet et al .,“抗菌活性mucosal-associated不变的T细胞,”自然免疫学,11卷,不。8,701 - 708年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
e . Leeansyah j .斯瓦德j·迪亚斯et al .,“武装MAIT细胞细胞溶解的抗菌活性IL-7和缺陷在hiv - 1感染,”PLoS病原体,11卷,不。8篇文章e1005072 2015。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
a . p . Sindram-Trujillo s . a . Scherjon p p范Hulst-van Miert et al .,“微分分布在蜕膜NK细胞与蜕膜parietalis简单的人类怀孕后,“人类免疫学,卷64,不。10日,921 - 929年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
a . Sindram-Trujillo s Scherjon h . Kanhai d . Roelen和f . Claas”增加t细胞活化在蜕膜parietalis蜕膜相比简单的人类怀孕,”美国生殖免疫学》杂志上卷,49号5,261 - 268年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
c•波特曼列出美国e·塞格尔l . Rieger m·卡普m . Sutterlin和美国卡摩尔,“量化的主要免疫细胞的数量在蜕膜在整个人类怀孕,”美国生殖免疫学》杂志上,卷71,不。2、109 - 119年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
a·c·Lundell Nordstrom, k . Andersson et al .,“干扰素I型和II诱导人类蜕膜基质细胞分泌物,金属”科学报告第39904条,卷。7日,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
n Jabrane-Ferrat和j . Siewiera”蜕膜自然杀伤细胞的:怀孕的免疫学新发展,”免疫学,卷141,不。4、490 - 497年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
t·蒂尔堡,d . Schonkeren m . Eikmans et al .,“人类蜕膜组织包含分化CD8⁺effector-memory T细胞具有独特的属性。”《免疫学,卷185,不。7,4470 - 4477年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
f . Carrette和c, d . Surh IL-7信号和CD127受体调节T细胞内稳态的控制,”研讨会在免疫学,24卷,不。3、209 - 217年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
e . v . Acosta-Rodriguez l . Rivino j . Geginat et al .,“人类白介素17-producing表面表型和抗原特异性T辅助记忆细胞,”自然免疫学,8卷,不。6,639 - 646年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
k . Van Raemdonck p e . Van den Steen s Liekens j . Van Damme和s . Struyf“CXCR3配体在疾病和疗法,”细胞因子和生长因子的评论,26卷,不。3、311 - 327年,2015页。视图:谷歌学术搜索
j . Svensson-Arvelund r·b·梅塔·r·林道市et al .,“人类胎儿胎盘对胎儿semiallogeneic促进宽容通过诱导调节性T细胞和体内平衡M2巨噬细胞,”《免疫学,卷194,不。4、1534 - 1544年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
j . r . Wilczynski h . Tchorzewski m . Banasik e . Glowacka a . Wieczorek和p . Lewkowicz“淋巴细胞分布和细胞因子分泌子集在晚期妊娠蜕膜在正常和子痫前期,“欧洲的妇产科和生殖生物学》杂志上,卷109,不。1、地位,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
a . p . Sindram-Trujillo s . a . Scherjon p p范Hulst-van Miert, h . h . Kanhai d l . Roelen和p.h. Claas”比较蜕膜白细胞在简单自然阴道分娩和选择性剖腹产后人类怀孕,”生殖免疫学杂志,卷62,不。1 - 2、125 - 137年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
黄,a . n . Faucette m . d . Pawlitz et al .,“Interleukin-33-induced表达PIBF1蜕膜B细胞预防早产,”自然医学,23卷,不。1,第135 - 128页,2017。视图:谷歌学术搜索
j .嘉尼•海基宁m . Mottonen a Alanen, o .斯莱虽然“调节性T细胞的表型鉴定人类蜕膜”临床和实验免疫学,卷136,不。2、373 - 378年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
y佐佐木,m .酒井法子宫崎骏,s . Higuma盐崎恭久,和美国齐藤蜕膜和外周血CD4⁺CD25⁺调节性T细胞在怀孕早期主题和自然流产的情况下,“人类生殖的分子,10卷,不。5,347 - 353年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
k . Galazka l . Wicherek k Pitynski et al .,”CD25的分组人口的变化⁺CD4⁺和具体⁺调节性T细胞在蜕膜对劳动力的发展,缺乏抑制B7-H4类比分组人口的变化⁺巨噬细胞,初步报告。”美国生殖免疫学》杂志上,卷61,不。2、136 - 146年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
T·蒂尔堡,s . a . Scherjon b . j . van der桅杆et al .,“母婴HLA-C失配与蜕膜影响T细胞激活和诱导功能T调节细胞,”生殖免疫学杂志,卷82,不。2、148 - 157年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
美国峡山,t . Nagamatsu d . j . Schust et al .,“人类蜕膜巨噬细胞抑制干扰素-γ生产T细胞通过costimulatory B7-H1:怀孕初期PD-1信号。”生殖免疫学杂志,卷100,不。2、109 - 117年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
t . Nagamatsu d . j . Schust j .杉本和b·f·障碍,“人类蜕膜基质细胞抑制同种异体的CD4细胞因子分泌的⁺T细胞通过PD-1配体的相互作用,”人类生殖,24卷,不。12日,第3171 - 3160页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
t . Dimova o . Nagaeva a.c. Stenqvist et al .,“孕产妇Foxp3表达CD4细胞⁺CD25⁺和CD4⁺CD25⁻监管t细胞数量丰富人类正常早期妊娠蜕膜:表型研究配对蜕膜和外周血样本,”美国生殖免疫学》杂志上补充1卷。66年,44-56,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
诉礁泻湖,r·d·谢蒂m·拉尔森和e . m . Shankar”的角色PD-1 co-inhibitory通路在艾滋病毒感染和潜在的治疗选择,”Retrovirology2015年,12卷,p。14日。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
x, x m .老挝m . m . Chen等人“PD-1hi标识一个小说监管人类肝癌b细胞数量,促进疾病进展,”癌症的发现》第六卷,没有。5,546 - 559年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
d·科万特·h·霍夫,m·鲁道夫,s . Fillatreau和m . c . Brunner-Weinzierl”的新角色CTLA-4在thymus-dependent B细胞免疫反应体内,”《免疫学,卷179,不。11日,第7324 - 7316页,2007年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
h . j .江x Wang et al .,“Mucosal-associated不变的t细胞程序性死亡1信号函数调制的活动性结核病患者,”美国呼吸和重症监护医学杂志》上,卷190,不。3、329 - 339年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
n . Gomez-Lopez r . Vega-Sanchez m . Castillo-Castrejon r·罗梅罗k . Cubeiro-Arreola f . Vadillo-Ortega,“证据适应性免疫反应的作用在人类分娩,”美国生殖免疫学》杂志上,卷69,不。3、212 - 230年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
l . Marcellin t .施密茨m . Messaoudene et al .,“免疫修改胎儿膜覆盖子宫颈先于人类分娩,”《免疫学,卷198,不。3、1345 - 1356年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
o . Ringden t .据美国纳瓦et al .,“胎膜细胞治疗steroid-refractory急性移植物抗宿主病,”干细胞没有,卷。31日。3、592 - 601年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
t .据h . Kaipe美国纳瓦et al .,“严重慢性移植物抗宿主病的治疗与蜕膜基质细胞和跟踪(111)铟放射性标记,”干细胞与发展,24卷,不。2、253 - 263年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
h . y . Chang j . t .太极s Dudoit et al .,“多样性、地形分异和位置记忆人类成纤维细胞,”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷99,不。20日,第12882 - 12877页,2002年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

干细胞国际

治疗使用Extraembryonic-Derived组织

孕产妇适应性免疫细胞蜕膜Parietalis显示更多的激活和Coinhibitory表型而蜕膜

文摘

1。介绍

2。材料和方法

2.1。胎盘捐助者

2.2。细胞隔离

2.3。流式细胞术

2.4。细菌刺激试验

2.5。PMA / Ionomycin刺激试验

2.6。统计数据

3所示。结果

3.1。一些免疫细胞的数量的比例在蜕膜和Parietalis不同

3.2。蜕膜Parietalis显示更多的激活T细胞表型与蜕膜相比

3.3。不同的B细胞和NK细胞和T子集监管蜕膜细胞Parietalis和下橄榄

3.4。蜕膜Parietalis免疫细胞表达高水平的Coinhibitory标记而下橄榄

3.5。Mucosal-Associated不变(MAIT) T细胞比例和表型在蜕膜下橄榄和Parietalis有所不同

4所示。讨论

5。结论

的利益冲突

作者的贡献

确认

补充材料

引用

版权

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