间充质干细胞促进转移的肺癌细胞表达下调全身抗肿瘤免疫反应

文摘

由于大多数系统管理的间充质干细胞(msc)成为禁锢在肺部,我们使用转移性肺癌模型,静脉注射引起的路易斯肺癌1 (LLC1)细胞,探讨分子机制参与MSC-mediated调制的转移。msc显著增强肺癌转移,减弱促炎细胞因子(TNF -的浓度α、IL-17)和增加免疫抑制il - 10的水平,一氧化氮和犬尿氨酸LLC1-treated小鼠的血清。msc深刻地减少了巨噬细胞的浸润,肿瘤坏死因子-α第树突状细胞(dc)、肿瘤坏死因子-α和IL-17-producing CD4 + T细胞,但增加IL-10-producing CD4 + T淋巴细胞在肺部肿瘤的动物。lung-infiltrated总数、细胞毒性FasL perforin-expressing, TNF -α和IL-17-producing CD8 + T淋巴细胞,NKG2D-expressing自然杀伤(NK)细胞显著减少LLC1 + MSC-treated老鼠。细胞毒性抑制NK细胞的MSC-conditioned媒介。这种现象被废除的抑制剂诱导一氧化氮合酶(间接宾语)和吲哚胺2,3-dioxygenase (IDO),表明伊诺的重要性和被罩MSC-mediated抑制NK细胞的抗肿瘤细胞毒性。该研究提供了证据,msc促进肺癌转移通过抑制抗肿瘤免疫反应有关的安全担忧MSC-based治疗患者为恶性疾病遗传易感性。

1。介绍

间充质干细胞(msc) self-renewable成人干细胞呈形态,可以发现在几乎所有产后组织(1]。msc目前使用广泛的临床试验由于其multilineage分化潜力和免疫调节的特点。msc分化为中胚层来源的细胞在体外和体内,但最近公布的数据表明,在特定的文化条件下,msc的塑性应扩展到nonmesenchymal血统的neuroectodermal(神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞)或内胚层的(肝细胞)起源2]。

msc可以促进血管生成分化转移到内皮细胞,通过生产几个proangiogenic因素(肝细胞生长因子(HGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β(TGF -β)和白介素- 6 (IL)) (3]。

msc抑制免疫反应衰减迁移和成熟的树突状细胞(dc),促进替代激活巨噬细胞,并减少核扩散,激活,和B和T淋巴细胞的效应函数,自然杀伤(NK)细胞和自然杀伤T (NKT) (1]。

尽管proangiogenic msc是有益的和免疫抑制特性退化性和自身免疫性疾病的治疗,他们可以代表一个严重的问题,如果病人收到msc原发性或转移性肿瘤。因此,安全性MSC-based治疗仍然是一个有争议的问题。主要关心的是潜在的恶性转变管理msc。最近的一项荟萃分析部分向科学界显示,恶性肿瘤在MSC-treated注意到患者发生只在以前或现在恶性肿瘤患者,在没有形成新创肿瘤(4]。然而,骨髓间充质促进新血管形成和抑制抗肿瘤免疫的潜力仍然是现有的重大关切有关MSC-based安全的疗法,应进一步探索在临床前和临床研究。

msc至少有三个函数能够促进肿瘤转移:导航网站组织受损,包括转移性损伤、免疫调节因子的生产,和proangiogenic分泌细胞因子和生长因子,促进新血管形成使肿瘤细胞的转移1,4]。

Lung-infiltrated细胞以及他们的产品有助于肿瘤逃逸机制和宿主免疫抑制是成为重要的介质在促进肺癌生长和转移(5,6]。

因为绝大多数静脉注射msc最初成为裹入肺中msc与tumor-infiltrated免疫细胞(1),我们使用转移性肺癌小鼠模型来研究分子和细胞机制MSC-mediated调制的抗肿瘤免疫反应和肺癌转移的进展。

因此,我们表明,静脉应用程序msc在肿瘤的老鼠明显抑制全身抗肿瘤免疫反应,减少lung-infiltrated DCs的总数、巨噬细胞、CD4 + T淋巴细胞,ctl, NK细胞,减抗肿瘤的细胞毒性ctl和NK细胞产生的转移性肺部病变的扩张。

2。材料和方法

2.1。细胞

C57BL / 6小鼠骨髓msc隔绝买来Gibco(目录号码s1502 - 100)。修改完成杜尔贝科的鹰的细胞培养介质(DMEM)包含heat-inactivated 10%胎牛血清的边后卫,100国际单位/毫升青霉素G和100μg / mL链霉素(Sigma-Aldrich,慕尼黑,德国),37°C的5%的股份有限公司₂孵化器。msc在通道3在整个实验。

小鼠肺癌细胞系(Lewis肺癌LLC1) (3 ll, H2b),源自C57BL小鼠肺内植入卢(刘易斯)肺癌,从美国购买类型文化集合(写明ATCC)(目录号码crl - 1642™)。细胞通常生长在悬挂在完整的DMEM培养基,在37°C公司5%₂孵化器。LLC1细胞通道3使用整个实验。

2.2。代MSC-Conditioned介质(MSC-CM)

msc被播种密度的10000细胞/厘米²。为了收集MSC-CM, msc第一次培养血清完全培养基和孵化37°C在潮湿的气氛中有5%的公司²。80%的融合,细胞被洗两次1 x磷酸盐(PBS,英杰公司),和介质改为无血清培养基。48小时后,中收集,离心机13000×在4°C 10分钟,储存在−80°C到使用(7]。

2.3。药物抑制吲哚胺2,3-Dioxygenase (IDO)和诱导一氧化氮合酶(间接宾语)

msc在培养基培养48 h 1-methyltryptophan包含1毫米,(1-MT Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州),IDO酶活性的抑制剂(8]。

阻止伊诺活动,msc是培养48 h的1毫米伊诺的抑制剂,L-N^G柠檬酸单甲精氨酸(L-NMMA Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州)(9]。

2.4。动物

6-8-week-old C57Bl / 6雄性老鼠。所有动物受到人类保健和所有的实验都通过,按照指南进行动物伦理委员会的医学科学学院Kragujevac大学的塞尔维亚。老鼠被安置在12小时的光暗周期温度控制的环境中,与标准的实验室管理食物和水随意。

2.5。诱导实验性转移和系统性应用msc

实验转移引起的静脉注射5×10⁴LLC1细胞(10]。小鼠静脉注射收到5×10⁵msc或生理盐水注射后一周LLC1细胞。老鼠牺牲28天的实验,如前所述[5]。

2.6。组织病理学分析

所有老鼠都牺牲在大气饱和乙醚(β哼哼,贝尔格莱德)和肺组织病理学分析孤立转移性肿瘤诱导后殖民地28天。

孤立肺在10%福尔马林固定石蜡和嵌入式,和连续4μm组织部分安装在幻灯片。部分被苏木精和伊红染色())和低功耗下检查(100 x)光microscopy-equipped数码相机(蔡司Axioskop 40,耶拿,德国)。转移验证了光学显微镜(放大10倍和40 x)特征褐黑色色素“热点”与巨大的多核细胞明显受限于周围肺组织。

2.7。免疫组织化学

免疫组织化学染色,石蜡包埋部分(4μ米)的小鼠肺组织。在柠檬酸缓冲Heat-mediated抗原检索(pH = 6.0)。Deparaffinized组织切片与初级孵化鼠标anti-CD3 (sc - 20047,圣克鲁斯生物技术),anti-CD4 (ab183685 Abcam) anti-CD68 (ab49777 Abcam) anti-TNF -α抗体(ab6671 Abcam)和anti-IL-17 (ab79056 Abcam)。染色被使用鼠标具体合/民建联可视化检测包含IHC工具包(CD3和CD68 ab64259 Abcam)和兔特定合/原子能委员会包含IHC检测设备(ab94361 Abcam) CD4, TNF -α,IL-17。部分和迈耶的苏木精复染色。部分是显微照片与数码相机安装在光学显微镜(日本奥林巴斯BX51)、数字化、和分析。

2.8。隔离Lung-Infiltrated免疫细胞

肺,获得控制,LLC1和LLC1 + MSC-treated 28天的小鼠实验中,用无菌磷酸盐(PBS)洗净,放置在培养皿DMEM补充10%的边后卫。解剖肺组织孵化在介质中含有胶原酶IV型(0.5毫克/毫升)和IV型牛胰脏DNAse(罗氏诊断;1毫克/毫升)37°C 45分钟。这些细胞被过滤100μm细胞尼龙滤网清洁50毫升锥形管。然后,细胞颗粒状通过离心法在300×10分钟,10°C。耗尽了红细胞裂解缓冲(NH4Cl 0.144米,0.0169米三基地,pH值7.4)在37°C公司5%₂大气为5分钟(11]。

2.9。流式细胞术分析细胞内染色Lung-Infiltrated免疫细胞

Lung-infiltrated免疫细胞筛选各种细胞表面和细胞内标记流式细胞术。简单地说,1×10⁶细胞孵化与anti-mouse CD45 F4/80, CD4, CD8, CD11c, CD11b, CD49b, FasL, CD107,穿孔素,NKG2D单克隆抗体结合与异硫氰酸荧光素(FITC),藻红蛋白(PE), peridinin叶绿素蛋白质(PerCP),或allophycocyanin (APC)(都来自BD生物科学,圣何塞、钙、美国)后,制造商的指示。免疫细胞来源于肺则同时染色的细胞内内容TNF -α、il - 10和IL-17使用固定/透化作用工具包和anti-mouse单克隆抗体结合与异硫氰酸荧光素(FITC),藻红蛋白(PE), peridinin叶绿素蛋白质(PerCP)和allophycocyanin (APC) (BD生物科学)。细胞内细胞因子染色,细胞被刺激50 ng / mL PMA和500 ng / mL ionomycin 5 h,和GolgiStop (BD生物科学)补充道。细胞被固定在Cytofix / Cytoperm,洋溢着0.1%皂素,染上荧光Abs。流仪分析了BD生物科学的FACSCalibur和使用流动分析软件分析程序。

2.10。测量血清细胞因子和生长因子的肿瘤的老鼠

水平的肿瘤坏死因子-αIL-17, il - 10,在鼠标血清HGF 14日21日和28日天的实验测量使用ELISA试剂盒特定的老鼠细胞因子(研发系统,明尼阿波利斯,美国)根据制造商的指示。

血清一氧化氮(NO)浓度测定在格里斯试剂而活动以来的犬尿氨酸通过分光光度测量油催化新陈代谢的色氨酸犬尿氨酸(12]。没有和犬尿氨酸的浓度测定小鼠血清在14日21日和28日天的实验。

2.11。隔离的NK细胞磁性细胞分选

28天的实验中,脾脏NK细胞被孤立的LLC1和LLC1 + MSC-treated老鼠通过磁性细胞排序根据制造商的指示。单细胞悬浮体的单核细胞来自于脾脏被贴上单克隆anti-mouse CD49b抗体,抗体和单克隆anti-biotin配共轭微(Miltenyi研究)。标记细胞被分离在随后耗尽mac列(Miltenyi研究),这是放置在磁场的mac分离器(Miltenyi研究)。孤立的NK细胞被用于coculture纯化NK细胞实验和细胞毒性试验。

2.12。细胞毒性试验

的DP版本xCELLigence系统(罗氏)用于本研究测定NK细胞的细胞毒性。DP版本包含一个测量单元内安置一个标准组织文化孵化器3站,每个需要E16天板(每个E16天板有16井)。100年μL的完全培养基添加到每个好,和背景阻抗板测量xCELLigence RTCA DP仪器在37°C和5%的公司₂。LLC1细胞NK细胞作为目标。播种密度4×10⁴LLC1细胞/被认为是最优的,用于所有化验。效应的目标比(E: T比值)10:1使用[13]。LLC1细胞在DMEM resuspended FCS在4×10 10%⁵细胞每毫升。总共有100μL肿瘤细胞被添加到每个E16天板的,当时放在xCELLigence RTCA DP。NK细胞,分离出LLC1和LLC1 + MSC-treated 28天的小鼠实验中,被数和resuspended 4×10的浓度⁶细胞在DMEM + 10% FCS媒体每毫升。然后,100年μL NK细胞或媒体就被添加到各自的井。E-plate 16是放在xCELLigence RTCA DP,和阻抗测量每15分钟记录24小时37°C和5%的公司₂。NK细胞介导肿瘤细胞的死亡是实时监控和减少表明细胞指数。数据分析与RTCA软件1.2(究其生物科学)。

2.13。统计分析

使用学生结果进行了分析t以及。所有的数据都在本研究中被表示为平均值±标准平均误差(SEM)。的值 被视为具有统计学意义。

3所示。结果

3.1。静脉注射的msc显著增强肺癌转移

首先,我们调查了系统性应用msc能否调节自发LLC1肿瘤细胞转移到肺部。我们观察到LLC1 + MSC-treated肿瘤小鼠肺转移的数量增加(图展出1(一)动物只有LLC1细胞相比)。显著提高肿瘤细胞的多形性原子核,安排在聚合形式,注意到在肺部MSC-treated肿瘤的实验动物在28日的一天。虽然肿瘤细胞的血管周的渗透也注意到在肺部隔绝LLC1-treated老鼠,这些老鼠恶性组织的扩张相比,明显降低LLC1 + MSCs-treated动物肺组织和肿瘤细胞(图几乎完全取代1(一))。肺组织广泛证实恶性肿瘤的组织学得分LLC1-treated小鼠静脉注射获得msc(图1 (b))。

3.2。msc改变血清水平的细胞因子和生长因子,在抗肿瘤免疫反应中发挥了重要作用

为了探索是否MSC-dependent肺转移病灶的扩张是其对系统的影响免疫反应的结果,细胞因子在肿瘤动物的血清浓度测定在14日21日和28日天的实验。根据组织学分析,msc大大改变血清细胞因子和生长因子的抗肿瘤免疫反应中扮演重要的角色在所有时间点测量。抗肿瘤细胞因子TNF -的浓度α(图1 (c))和IL-17(图1 (d))的浓度显著降低,而免疫抑制il - 10(图1 (e))、犬尿氨酸(图1 (g)),没有(图1 (h))都明显高于血清LLC1-treated老鼠收到msc。没有任何显著差异实验组之间血清的免疫调节HGF水平(图1 (f))。

3.3。msc显著降低DCs的总数、巨噬细胞、CD4 +辅助T细胞在肺部LLC1-Treated老鼠和改变他们的细胞因子

接下来,我们分析了细胞构成的肺部肿瘤注射后28天为了确定细胞目标LLC1-treated MSC-mediated抑制抗肿瘤免疫反应的动物。msc深刻CD45 +白细胞的浸润到肺实质( ;图2(一个))。流式细胞仪分析显示的总数CD45 + F4/80 +巨噬细胞(图2 (b), )、CD45 + CD11c + CD11b +炎症DCs(图2 (c)左面板, )和CD4 +辅助T细胞(图2 (d), )显著降低肺肿瘤的老鼠获得msc。

细胞内染色显示,系统性的TNF - msc的应用减少了渗透α第DCs(图2 (c)右面板, )、肿瘤坏死因子-α第(图2 (d)中间面板, ),IL-17-producing CD4 +辅助T细胞(图2 (d)右面板, )和增加CD4 + T细胞的存在产生免疫抑制il - 10(图2 (e), )。

免疫组织化学分析证实了这些发现。静脉注射的msc减少CD3 + T淋巴细胞(图的存在3(一个)(图),CD4 + T辅助细胞3 (b))、CD68 +巨噬细胞(图3 (c))、肿瘤坏死因子-α第(图3 (d)(图),IL-17-producing细胞3 (e))在肺部LLC1-treated小鼠肿瘤诱导后28天。

3.4。msc减少渗透肺部的ctl LLC1-Treated老鼠和减毒的FasL的表达,穿孔素,CD107表面

静脉注射的msc显著降低细胞毒性CD8 + ctl总数(图4(一), )在肺部LLC1-treated 28天的小鼠实验。此外,分析细胞毒性分子参与CTL-mediated抗肿瘤免疫反应(FasL、穿孔素和CD107)表明,msc设法减弱涌入FasL + ctl(图4(b), ),穿孔素+ ctl(图4(c), ),CD107 + ctl(图4(d), )在肺部肿瘤的动物。

细胞内染色显示系统的应用msc减弱ctl的能力产生抗肿瘤细胞因子(数字4(e) -4(f))。有显著降低TNF -的数量α第(图4(e), )和IL-17-producing ctl(图4(f), )在MSC + LLC1-treated老鼠相比LLC1-only对待动物。

3.5。抗肿瘤的细胞毒性NK细胞明显减毒在MSC + LLC1-Treated老鼠旁分泌,不,和IDO-Dependent的方式

由流式细胞术,后28天肿瘤诱导,CD49b + NK细胞的存在显著降低了LLC1 + MSC-treated老鼠相比LLC1-only对待动物(图5(一个), )。

此外,NK细胞的总数,激活受体NKG2D表达,参与抗肿瘤免疫反应,明显降低肺部的肿瘤小鼠获得msc(图5 (b), )。因此,xCELLigence实时监测系统获得的结果表明NK细胞毒性隔绝LLC1 + MSC-treated老鼠大大减少细胞毒性对LLC1细胞NK细胞与动物,只有LLC1细胞(图5 (c)),这表明静脉注射的msc显著降低抗肿瘤NK细胞的细胞毒性。

直接表明可溶性因子,而不是细胞细胞负责MSC-mediated接触抑制NK细胞的细胞毒性与LLC1细胞,MSC-CM的影响进行评估。因为它是图所示5 (d)对LLC1 MSC-CM显著抑制NK细胞的细胞毒性细胞。这种现象在伊诺抑制剂的存在完全废除(L-NMMA)或被罩抑制剂(1-MT),表明伊诺我作为重要因素MSC-mediated抑制NK细胞的抗肿瘤细胞毒性(图5 (d))。

4所示。讨论

众所周知,msc天生tumor-homing细胞,几个小时全身注射后,迁移在肺部(14,15]。许多受体、细胞外基质蛋白和可溶性tumor-derived因素已报告影响肿瘤趋向性的静脉注射msc (15,16]。最近,这是表明巨噬细胞移动抑制因子(MIF) / CXCR4和单核细胞化学引诱物蛋白1 (MCP-1) / CCR2通路负责迁移msc在肺部的肿瘤微环境15,16]。MIF从肿瘤细胞分泌吸引msc CXCR4-dependent方式到肺部。击倒的趋化因子受体CXCR4或MIF废除MSC归航以体内肿瘤肺转移模型(15]。同样,msc的归巢能力压制后推倒MCP-1的表达在肺癌细胞表面或阻塞CCR2表示msc、指示的重要作用MCP-1 / CCR2轴取向的msc肺肿瘤(16]。后立即移植,msc与tumor-infiltrated免疫细胞相互作用,影响抗肿瘤免疫反应(17]。因此,发现MSC-based调制相关的抗肿瘤免疫msc的可能对临床应用有重要影响。

在这里,我们提供的证据表明,系统性应用msc tumorbearing动物促进扩张肺转移的抑制抗肿瘤免疫反应的抑制先天(DCs, NK细胞)和自适应(CD4 + T辅助,CD8 + ctl)免疫力。

显著降低巨噬细胞的数量(数字2 (b)和3 (c)),DCs(图2 (c))、效应CD4 +辅助T细胞(数字2 (d)和3 (b))和CD8 + ctl(数字4(一),4(b),4(c),4(d),4(e)4(f))以及NK细胞数量和细胞毒性的降低(图5)表明,系统性应用msc感应和影响效应阶段的抗肿瘤免疫反应。

静脉注射的msc抑制,几乎瞬间,迁移的DCs引流淋巴结显著影响DCs的能力对CD4 + T细胞抗原呈递和cross-presentation CD8 + T细胞(18,19]。因此,显著降低CD11c + CD11b + DCs(图2 (c))是伴随着减少数量的CD4 +(数字2 (d)和3 (b))和CD8 + T细胞(图3(一个))在肺部LLC1-treated老鼠收到msc。

DC的成熟也受msc (20.,21]。直流接触tnf和msc未能上调成熟标记(19]。转,不成熟的DCs强烈阻碍的能力产生TNF -α和其他促炎细胞因子,抑制肿瘤的生长和转移22]。符合这些观察,血清TNF的表达下调α(图1 (c))是伴随着低数量的TNF -α第DCs在肺部LLC1 + MSCs-treated老鼠相比LLC1-only对待动物(图2 (c))。

除了抑制幼稚T细胞活化,msc能够诱导效应的抑制CD4 + T辅助细胞主要是通过生产可溶性介导因素包括语言,不,il - 10,前列腺素E2 (PGE2)、胶质瘤、TGF -β(23]。因此,静脉注射的msc与更高的血清il - 10水平(图了1 (e))、犬尿氨酸(图1 (g)),没有(图1 (h)),其次是减少数量的lung-infiltrated效应CD4 + T细胞(数字2 (d)和3 (b)),产生抗肿瘤细胞因子TNF -α和IL-17(图2 (d))。

进步的炎性疾病,包括肿瘤、相关的损失IL-17-producing CD4 + Th17细胞和互惠的分数增加免疫抑制IL-10-producing CD4 + T淋巴细胞在外周血和发炎组织(24]。MSC-derived被罩是一种酶,具有强大的免疫调节作用,导致其酶活性,从而导致分解代谢的必需氨基酸色氨酸L-kynurenine (25]。代谢物的L-kynurenine通路已经被证明作为关键分子开关刺激IL-10producing T细胞的免疫抑制特性和同步块重组成IL-17-producing效应T细胞(26]。因此,在这里,我们表明,注入msc增加血清犬尿氨酸水平LLC1-treated老鼠(图1 (g)),伴随着IL-10-producing CD4 + T淋巴细胞数量的增加和减少的数量IL-17-producing Th17细胞(图2 (d))。

如上所述,msc的直流衰减能力cross-presentation和CD8 + T细胞的活化18]。此外,msc抑制ctl的增殖和抑制表面分子的表达参与CTL-mediated细胞毒性对肿瘤细胞(27]。符合这些发现,显著降低lung-infiltrated CD8 + ctl FasL表达(图4(b)和穿孔素(图)4(c))被发现在MSC + LLC1-treated老鼠相比LLC1-only对待动物表明系统性管理MSC抑制穿孔素和FasL-mediated ctl的抗肿瘤细胞毒性机制。

msc抑制NK细胞的增殖和细胞毒性,以及[28- - - - - -30.]。这种抑制作用的msc与激活NK细胞受体表达下调表达,如NKG2D,主要是由被罩,PGE2, TGF -β1 (29日,30.]。在这里,我们表明,msc减少的总数lung-infiltrated NKG2D-expressing LLC1-treated小鼠NK细胞(图5 (b))和显著减弱他们对肺癌细胞的细胞毒性体外(图5 (c))。伊诺和被罩抑制剂设法几乎完全恢复细胞毒性对LLC1 NK细胞的活性细胞体外(图5 (d)),这表明伊诺和语言信号的重要性MSC-mediated抑制NK细胞毒性抗肿瘤。众所周知,炎性细胞因子,如肿瘤坏死因子-α骨髓间充质使用iNOS-dependent机制,引发不生产(9,31日]。MSC-derived没有可以直接抑制淋巴细胞的增殖或可能增加被罩活动可能导致的衰减NK细胞的细胞毒性(9,31日]。

5。结论

我们的研究提供的证据表明,系统性应用msc可以促进转移的肺癌细胞抑制抗肿瘤免疫反应。这些发现引起严重担忧关于安全的静脉应用msc的患者为恶性疾病遗传易感性。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

确认

本研究支持的“科学”启动授予由菲利普·莫里斯和领导力发展中心,瑞士国家科学基金会项目(范围IZ73Z0_152454/1),塞尔维亚科技部(ON175069和ON175103),大学和医学科学的教师Kragujevac (MP01/14和MP01/12)。

引用

1. m . Gazdic诉Volarevic: Arsenijevic, m .斯托伊科维奇博士“间充质干细胞:朋友还是敌人在免疫介导的疾病,”干细胞的评论和报道,11卷,不。2、280 - 287年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. a . Gebler o·扎贝尔,b .谢利格尔,“间充质干细胞的免疫调节能力,”分子医学的趋势,18卷,不。2、128 - 134年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. h·道,z汉,z . c .汉和z,“Proangiogenic间充质干细胞的特性及其治疗的应用程序,“干细胞国际卷,2016篇文章ID 1314709, 2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. m·m·拉鲁·l·麦金太尔,c . Pugliese et al .,“细胞疗法的安全性与间充质基质细胞(SafeCell):系统回顾和荟萃分析的临床试验,”《公共科学图书馆•综合》,7卷,不。10篇文章e47559 2012。视图:谷歌学术搜索
5. p·c·哈克勒,罗伊斯,r . l .香港j·b·特拉弗斯和r . p . Sahu“系统性platelet-activating因子受体激活增强实验性肺肿瘤的生长和转移,”肿瘤生长转移卷。7日,新,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. 毛y, d .杨、j .他和m . j . Krasna“肺癌的流行病学,”肿瘤外科诊所北美,25卷,不。3、439 - 445年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. 即Linero o .查,“间充质干细胞旁分泌效应来源于人类脂肪组织在骨再生,”《公共科学图书馆•综合》,9卷,不。9篇文章e107001 2014。视图:谷歌学术搜索
8. i . h . m . j ., s·h·杨公园Yoon et al .,“可溶性介质从间充质干细胞抑制T细胞增殖诱导il - 10,”实验与分子医学第41卷。。5,315 - 324年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. g . Ren l .张x赵et al .,“间充质干细胞细胞介导免疫抑制趋化因子的发生通过协调一致的行动和一氧化氮,”细胞干细胞,卷2,不。2、141 - 150年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. m . s .蔡,c . c . Chang m . l .郭和y . t . Wu”长有肿瘤血管内皮生长因子a和变化与路易斯肺癌小鼠模型,”Oncolology字母,卷2,不。6,1143 - 1147年,2011页。视图:谷歌学术搜索
11. e . p . Amaral s c·里贝罗v . r .车道et al .,“肺感染hypervirulent分枝杆菌P2X7受体的揭示了一个重要角色积极形式的结核病,”PLoS病原体,10卷,不。7篇文章e1004188 2014。视图:谷歌学术搜索
12. w·凌j . Zhang z元et al .,“间充质干细胞使用被罩在肿瘤微环境调节免疫力,”癌症研究,卷74,不。5,1576 - 1587年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. 王,x, y Ju et al .,“microrna - 146 a反馈抑制T细胞免疫功能通过瞄准Stat1在慢性乙型肝炎患者,”《免疫学,卷191,不。1,第301 - 293页,2013。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. b·罗斯特s Gottig r·路德维希et al。“间充质干细胞显示协调滚动和内皮细胞粘附行为,”血,卷108,不。12日,第3944 - 3938页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. s . Lourenco诉特谢拉,t·卡尔布,r·j·何塞·r·a·Floto和s·m·琼斯,“巨噬细胞迁移抑制factor-CXCR4是占主导地位的趋化现象的轴在人类间充质干细胞招聘肿瘤,”《免疫学,卷194,不。7,3463 - 3474年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. c .严,x的歌,w . Yu et al .,“人类脐带间充质干细胞提供sTRAIL回家肺癌由MCP-1 / CCR2轴和具有抗肿瘤效应,”肿瘤生物学,37卷,不。6,8425 - 8435年,2016页。视图:谷歌学术搜索
17. a . Poggi马苏之后,即Dapino, m . Zocchi“肿瘤逃避免疫系统的机制:间充质基质细胞的作用,“免疫学的信,卷159,不。1 - 2,55 - 72、2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. 基,s . Morbelli s Morando et al .,“间充质干细胞影响体内t细胞树突细胞启动,”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷108,不。42岁,17384 - 17389年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. 英国英语,f·p·巴里,b . p .马洪”小鼠间充质干细胞抑制树突状细胞迁移,成熟和抗原表示,“免疫学的信,卷115,不。1、58、2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. 刘张x x, y, b . et al .,“人类间充质干细胞抑制monocyte-derived树突状细胞的分化和功能,“血,卷105,不。10日,4120 - 4126年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. w·张,w .通用电气、c·李et al。”效果的间充质干细胞分化、成熟、人类monocyte-derived树突细胞和功能,“干细胞与发展,13卷,不。3、263 - 271年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. a . j . Nauta a . b . Kruisselbrink e . Lurvink r . Willemze和w·e·Fibbe“间充质干细胞抑制生成和CD34 +派生和monocyte-derived树突状细胞功能,“《免疫学,卷177,不。4、2080 - 2087年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. 诉Volarevic: Arsenijevic, m . l . Lukic和m .斯托伊科维奇博士“简洁点评:间充质干细胞治疗糖尿病的并发症,”干细胞卷,29号1,5 - 10,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. d . Favre j .模具p·w·亨特et al .,“色氨酸分解代谢的吲哚胺2,3-dioxygenase 1改变平衡TH17调节性T细胞在艾滋病毒疾病,”科学转化医学,卷2,不。32岁的第三十二条ra36, 2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. h . Ito m .法师h . Ohtaki et al .,“语言能力减弱alpha-galactosylceramide-induced肝炎的肝损伤模型,”免疫学杂志,卷185,不。8,4554 - 4560年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. g . Matteoli大肠马志尼、身份证Iliev et al .,“肠道CD103 +树突状细胞表达吲哚胺2,3-dioxygenase影响监管/ T效应T细胞平衡和口服耐受诱导,“肠道卷,59号5,595 - 604年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. Rasmusson, m . Uhlin k .勒布朗和诉Levitsky,“间充质干细胞不能引发效应功能的细胞毒性T淋巴细胞,”《白细胞生物学,卷82,不。4、887 - 893页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. Prigione, f . Benvenuto p .喷口l . Battistini a .乌切利对诉皮斯托亚,“互惠人类间充质干细胞和gammadelta T细胞之间的相互作用或不变的自然杀伤T细胞,”干细胞,27卷,不。3、693 - 702年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. 通用Spaggiari, a Capobianco h . Abdelrazik f . Becchetti m . c . Mingari和l . Moretta作品“间充质干细胞抑制自然杀伤细胞增殖,细胞毒性,细胞因子和生产:吲哚胺2,3-dioxygenase和前列腺素E2,”血,卷111,不。3、1327 - 1333年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. p . a . Sotiropoulou s a·佩雷斯公元Gritzapis, c . n . Baxevanis和m . Papamichail“人类间充质干细胞和自然杀伤细胞之间的相互作用,”干细胞,24卷,不。1,第85 - 74页,2006。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. 黄g . w . Li任,y et al .,“间充质干细胞:一把双刃剑在调节免疫反应,”细胞死亡与分化,19卷,不。9日,第1513 - 1505页,2012年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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