文摘
癌症生物学的研究主要集中在恶性上皮肿瘤细胞,尽管肿瘤也含有基质间,这是由干细胞,肿瘤相关成纤维细胞(taf),内皮细胞、免疫细胞、脂肪细胞、细胞因子和各种类型的大分子组成的细胞外基质(ECM)。肿瘤基质的发展逐渐在上皮癌细胞在恶性进展的需要开始从当地增加血管通透性和结束多松散血管基质ECM重塑。不断双向交互上皮肿瘤细胞与周围的微环境允许破坏基质细胞使用作为癌细胞的营养来源,保持基质更新因此像伤口不愈合,并影响肿瘤的间充质干细胞的特点/基质细胞(msc)。尽管msc协调肿瘤细胞生长,休眠,迁移,入侵,转移和耐药性,最近他们已经成功地用于治疗造血系统恶性肿瘤,增强全身irradiation-hematopoietic干细胞移植治疗的效果。因此,针对基质元素结合常规化疗和骨髓间充质减弱移植物抗宿主病的使用可能会提供新的策略来克服癌症治疗失败和复发的疾病。
1。介绍
肿瘤是organ-like结构(1)由许多细胞类型的交互需要动力和促进自身的生长和转移2,3]。致癌细胞从邻近的招募nontumorigenic细胞同时在本地组织以及循环构建肿瘤微环境,通过互惠cancer-stroma互动一起改变通过旁分泌信号促进癌症恶化和物理相互作用[4- - - - - -8]。肿瘤微环境包含癌症相关的成纤维细胞(保护)2),内皮细胞(9,10)、免疫细胞(11,12),脂肪细胞(13),癌症干细胞(CSC)分化成转移性上皮细胞(14,15),间充质干细胞/基质细胞(msc)可以代表间充质细胞分化为成纤维细胞和其他类型的血统(16,各种类型的细胞外基质(ECM)的蛋白质(3)相互传递所需的刺激肿瘤的生长。基质,特别是msc和基质细胞来自msc、最近被公认为一个球员在致癌作用,影响肿瘤的生长、发展和发展开始在肿瘤发生的早期步骤4),影响微环境的建设,上皮间充质转变,和转移,也就是说,功能是必不可少的维护和肿瘤转移到其他组织(17- - - - - -21]。
2。肿瘤基质的进化
同时与上皮细胞的变化导致不灭,有一个逐渐演变的肿瘤微环境,包括局部血管通透性增加;(2)等离子体和大分子的外渗,如纤维蛋白原和纤溶酶原,物(3)激活的凝血机制发展中肿瘤微环境;(iv)纤维蛋白凝胶形成的存款;(v)的形成一个临时基质包括肿瘤细胞、成纤维细胞、免疫细胞;(vi)的血管生成启动临时基质;(七)临时基质的降解和替换与高度血管化造粒结缔组织纤维蛋白;(八)基质的变换多见,松散的血管,和致密结缔组织;和(ix)基质ECM的重塑,诱导局部肿瘤细胞迁移和转移(22- - - - - -26]。
2.1。增加血管通透性
msc可能导致血管通透性增加单独或通过吸引肥大细胞能够启动和维持细胞贩运。增加血管内皮生长因子a (VEGF-A)生产的一个主要驱动力血管研究进展(27,28]。VEGF-A绑定VEGF受体2 (VEGFR2)诱导受体的构象变化和随后的二聚,导致自身磷酸化和启动下游信号转导(29日]。激活信号转导导致血管通透性增加通过两种机制:通过transcellular内皮毛孔的合成或瞬态paracellular内皮连接。VEGF的作用取决于活性氧和氮物种(ROS, RNS),激活的SRC protooncogenes的家庭,和他们接触adherens结VE-cadherin蛋白(28,30.]。据最近报道,肥大细胞导致血管通透性分泌组胺,5 -羟色胺,platelet-activating因素激活古墓/ Nur77孤儿核转录因子信号。古墓/ Nur77增加血管通透性,抑制内皮细胞附着junction-associated蛋白的表达(VE-cadherin,β连环蛋白,γ连环蛋白和p120)和紧密连接蛋白CLAUDIN 5,维持血管内稳态31日,32]。另外,肥大细胞分泌组胺诱发血管渗透性一氧化氮-(没有)依赖性血管扩张和PKC /摇滚/一氧化氮内皮屏障破坏或绑定到H1受体激活g蛋白耦合内皮细胞钙流入增强血管通透性相关的信号转导(33,34]。
2.2。纤维蛋白Matrix-Derived临时基质的发展到成熟的基质
血浆外渗的组件,如纤维蛋白原、凝血蛋白(凝血酶原和因素V,七世,X,和十三),通过内皮细胞层是最早的环境和提升者是癌前病变组织的变化反应类似于伤口愈合(22,24,27,34,36- - - - - -40]。从纤维蛋白原的合成纤维蛋白凝血酶的作用作为第一个肿瘤基质(发展的里程碑22,27,36,39,41,42]。凝血酶裂解纤维蛋白原转化为可溶性纤维蛋白单体,激活凝血因子十三XIIIa因素,然后将可溶性的纤维蛋白单体转化为不溶性纤维蛋白聚合物形成交联纤维蛋白矩阵(43]。纤维蛋白基质的形成极大地改变了组织成分通过创建一个凝胶吸收和逮捕等离子溶质,导致组织水肿。因此,纤维蛋白凝胶形成了最初的“临时”实质肿瘤细胞基质,间充质基质细胞,造血炎症细胞可以迁移到组成最后的肿瘤微环境(44]。纤维蛋白凝胶本身增强了血管生成,另一个早期肿瘤基质的现象,从退化、保护血管生成生长因子诱导的生产proangiogenic分子,并通过直接创建血管生成因素,如碎片E [45]。下一阶段发展的肿瘤微环境和成熟的肿瘤基质的形成是由于巨噬细胞渗透的协调行动和fibroblast-derived蛋白酶降解的“临时”基质纤维蛋白,代之以疏松结缔组织(22,39]。疏松结缔组织,类似于伤口愈合的肉芽组织,刺激成纤维细胞的生长和新的血管。
2.3。基质粘连形成的发展
癌症发展的组织学基础之一是形成致密纤维基质矩阵由ECM和激活成纤维细胞(myofibroblasts)。在基质开发的最后阶段,肉芽组织转换成多致密结缔组织可怜的血管化的特征。激活基质粘连形成,可以解释为一种企图治愈的肿瘤组织损伤产生的渗透、破坏癌细胞的生长,表明肿瘤的侵袭性和恶性特征。然而,有人建议,粘连形成的胶原蛋白合成增加,加上myofibroblast-induced组织收缩,可能矛盾构成入侵特色保护机制(10]。从力学上看,多见的反应是一个鲜为人知的过程与侵袭性肿瘤,如扩散渗透性的胰腺和胃的癌和浸润性导管癌(scrirrhous)乳房,和涉及的过度生产类型我和III胶原蛋白和弹性蛋白(10]。myofibroblasts scrirrhous癌乳腺癌,与纤维蛋白和胶原蛋白三世,大多出现在不成熟的间充质基质在肿瘤周边,虽然collagen-I表达肿瘤中心的成熟的僵化的结缔组织(11]。
在几种类型的肿瘤,如甲状腺癌,多见的反应是一个比较常见的现象,在多达80%的甲状腺髓样肿瘤和淋巴结转移相关(46]。事实上,激活基质一直被视为入侵和转移性癌症发展的一个标志。在甲状腺癌,粘连形成导致增加生产的胶原蛋白基质成纤维细胞在未分化甲状腺和甲状腺髓样癌比在乳头状甲状腺癌,直接与增加侵略性和淋巴结转移相关(46]。因此作为术中预后标记(47,48]。在甲状腺癌多见间质包含激活成纤维细胞(癌症相关的成纤维细胞(保护)或myofibroblasts),连同其他基质组件,启动细胞外基质的重塑49]。ROS已被证明会促使这些成纤维细胞的活化,然后增加肿瘤细胞增殖,肿瘤相关炎症和血管生成和酶表达invasion-associated因素,如成纤维细胞激活蛋白α(FAPα)和矩阵metalloproteases (MMP),它能够降低和改造ECM (50- - - - - -52]。
2.4。重构的基质ECM促进癌细胞的迁移
ECM的重构导致迁移,入侵和转移的细胞通过刺激上皮细胞转化和当地移民通过改变交联基质结构。因此,代表了一个癌症恶化的关键元素。蛋白水解降解ECM的影响细胞的integrin-mediated锚地,焦粘连在细胞膜,细胞细胞骨架组织和信号转导调节这些结构。的一个主要nonreceptor酪氨酸激酶的影响在这个过程是粘着斑激酶(FAK),直接通过SRC致癌基因家族激酶信号,连接信号转导RAS-BRAF-MEK-ERK促分裂原通路信号,从而诱导肿瘤细胞的恶性发展53,54]。
3所示。msc和战乱国家肿瘤基质
在肿瘤,msc分化或保持其原始的表型,从而参与建设的癌症细胞生长基质和支持通过分泌细胞因子和生长因子(55- - - - - -58]。肿瘤的来源msc尚未完全阐明,尽管他们已经从最孤立的组织(59),这表明他们有一个当地的起源。另一个潜在来源是循环骨骨髓来源msc渗出液的循环,然后回家,嫁接到越来越多的肿瘤(60- - - - - -62年]。取得证据的肿瘤趋向性msc在活的有机体内研究,移植msc在演示了迁移到肿瘤(60]。有趣的是,骨髓间充质肿瘤的迁移似乎增加了细胞损伤,通常是用于临床治疗癌症,如放射治疗,可能是因为受伤组织的细胞因子和趋化因子的分泌增加(61年]。虽然详细的机制(s)的骨髓间充质肿瘤的迁移和自导不是有据可查,msc有炎症细胞类似的导航机制,造血干细胞和癌症细胞,它们使用相同的粘附分子和细胞因子/趋化因子,尤其是CXCR4-CXCL12 receptor-ligand绑定系统[63年,64年]。
癌症相关的成纤维细胞(战乱国家)都来源于间充质干细胞/基质细胞和局部成纤维细胞(60,65年),从而支持观察表明原始未分化的msc的存在即使在先进的癌症。msc和战乱国家都是异类人群,甚至可能有不同的表型特征在同一类型的癌症(66年,67年]。战乱国家丰富的增长促进分子(如胶质瘤、LOXL2 TENASCIN-C)和proangiogenic因素(例如,VEGF),因此在癌症的发展过程中发挥的重要作用和转移(65年)通过刺激上皮间充质转变(如TWIST1和蜗牛生产),导致表观遗传变化,通过改变ECM的三维结构(例如,通过MMP和纤溶酶原激活物蛋白质生产)(67年,68年]。众所周知,战乱国家支持生存和增殖的癌细胞转移在一个类似的机制,如原发肿瘤。战乱国家的一个有趣的特征是他们一起迁移上皮癌细胞的能力,因此建议在上皮细胞内渗和外渗的转移过程,促进癌细胞轮回通过内皮细胞层69年,70年),因此支持假设原发肿瘤可以促进转移通过提供微环境。
先前的文件表明,在某些情况下战乱国家,同样与msc、维持正常成纤维细胞肿瘤抑制的特点。Receptor-ligand ROBO1-SLIT2 cancer-stroma交互被证明能减少肿瘤细胞增殖减少PI3K -β连环蛋白和SDF1-CXCR4信号转导和顺向癌细胞恶性肿瘤(71年,72年]。有趣的是,攻击癌细胞缺乏ROBO1受体分子增加了战乱国家表达SLIT1配体(73年),而RNAi SLIT1肝细胞生长factor-mediated癌细胞迁移和入侵增加了移植CDC42ρGTPase活性(74年),从而提供更多的洞察的战乱国家inhibitory-stimulatory机制可能取决于基质细胞的表型差异和恶性上皮细胞。高桥和同事的研究证实了选择性肿瘤抑制战乱国家的性质。根据他们的观察,podoplanin积极战乱国家贫穷的生存和预测结果在肺腺癌和鳞状细胞癌患者中,而在小细胞肺癌podoplanin积极性建议更好的预后(75年]。而msc和战乱国家的特征记录在肿瘤的支持,还需要更多的工作来研究骨髓间充质癌症相关的成纤维细胞分化和肿瘤抑制这些细胞群的性质。
3.1。肿瘤msc不同于正常的msc
重要的是要注意,msc和战乱国家本地化在肿瘤间质有不同的表型与msc及成纤维细胞与正常组织相比,这可能是由于持续的接触这些细胞的炎症和癌症细胞分泌细胞因子诱导procancerous特征(76年- - - - - -78年]。虽然肿瘤相关msc与正常组织细胞表面标记和功能相似msc、旁分泌对肿瘤细胞增殖的影响是不同的(58]。而正常组织msc被建议减少炎症和癌症细胞增殖(79年,80年),肿瘤相关msc增加他们的增长(53- - - - - -55]。msc的表型和功能修改进一步支持的案例报告展示不同寻常的乳头状甲状腺癌,肺carcinoma-associated瘤内异养骨化(81年,82年]。然而,由于异位骨化msc分化成osteoprogenitor细胞进一步分化细胞(83年)也可能是异常分化的结果信号来自周围的肿瘤间质。
3.2。msc实质细胞肿瘤微环境的支持
大多数转化细胞株移植后无法生存,因此被认为是细胞不断生长没有致瘤的特征。即使在高度致癌的细胞系中,只有一小部分窝藏干细胞的特征能够启动肿瘤生长在活的有机体内(84年]。由于他们的表型和功能特性,与克隆肿瘤起源细胞能力被称为癌症干细胞(二者)或肿瘤起源细胞(抽搐)。二者/抽搐驻留在肿瘤微环境中的特定利基市场,维持他们的可塑性,保护他们免受免疫防御机制,和修改他们的转移潜力。msc已被证明与二者互动/抽搐,支持薄壁组织的细胞生长,导致增加抵抗治疗(35),癌细胞休眠,逃避免疫系统(85年)通过旁分泌分泌(35,57)或缝隙连接联系(85年]。另外,msc可以通过直接接触影响上皮癌细胞功能,导致增加的microrna的表达,如mir199a和茎细胞相关因素,在上皮细胞(86年]。政府内部msc分泌各种促进增长的经济细胞因子、生长因子和小分子核糖核酸,在某些情况下是存储在细胞外膜泡粒子(液)87年]。液是小直径(40 - 100 nm)膜结合细胞器功能作为细胞间通信机制的一部分。在肿瘤发生过程中,exosome-bound因素被证明修改上皮肿瘤细胞的表型或肿瘤基质细胞支持积极的表型和肿瘤进展。液典型包括各种类型的分子,包括矩阵metalloproteases [88年),血小板源生长因子(89年),分子激活信号转导(90年),oncomiRs、生物活性脂质和代谢产物(91年]。
基质细胞和薄壁组织的细胞之间的缝隙连接的重要门户微转移。有趣的是,差距junction-transferredCXCL12 -针对小分子核糖核酸mir127,mir197,mir222,mir223,甚至可以减少癌症细胞增殖和诱导休眠可能持续几十年,最终导致疾病的复发,由于骨髓转移(91年]。最近的一项研究表明,骨髓msc之间有间隙连接调控细胞间通讯和原始Oct4-expressing乳腺癌肿瘤起源细胞(91年),这表明有一个偏爱缺口连接调控细胞窝藏干细胞特征之间的联系,也表明这些细胞造血干细胞休眠(显示相似之处92年,93年]。
除了缝隙连接的结构,它已经表明,乳腺癌细胞和msc(形成混合动力车94年]。最近,许多出版物表明,msc和癌症之间有直接的联系的细胞,导致增加上皮细胞生长和存活(55,95年- - - - - -99年]。癌症细胞和间质细胞之间的直接连接在癌症研究cell-stromal细胞coculture系统本身可能促进细胞间的联系。典型,主要是非细胞与其他细胞,避免直接接触限制其经济增长和迁移,这种现象称为接触抑制(One hundred.]。我们学习了转化细胞之间的相互作用和人类骨骨髓来源间充质干细胞和证明物理MSC-MSC或MSC-cancer细胞相互作用介导通过颞膜突起,这直接的运动细胞(补充电影1在网上补充材料http://dx.doi.org/10.1155/2016/4824573)[97年]。与主细胞,肿瘤细胞失去接触抑制表型(101年),因此典型创建网络连接通过向其他癌症细胞和是非的主要细胞,如msc(补充电影2)。癌细胞的侵略coculture可以诱导msc和激活细胞凋亡损伤,msc运动的随之而来的损失(97年]。固定化的基质细胞受损,无法避免接触很容易癌细胞侵犯,导致材料从基质细胞上皮癌细胞(图1)[97年,99年]。因此,转化细胞的肿瘤启动和prometastasis效果显著增加,这与线粒体活动增加。重要的是,我们证明了连续稀释移植和流仪分析集群转化细胞的分化标记没有任何干细胞特征,表明增加代谢活动调节上皮细胞的侵袭性。有趣的是,转化细胞的细胞计数分析表明,只有轻微的增长在细胞质物质转移,而控制细胞生长没有损坏msc显示连续的细胞增殖(图2)[97年]。因此,这些观察结果可能表明,癌细胞可以删除受伤和死亡的肿瘤细胞,从而暂时增加自己的生长特性。这个假设被证实的发现表明有增加小鼠肿瘤细胞生长的癌细胞凋亡或成纤维细胞,突显出细胞损伤的重要性直接细胞间接触和细胞大分子的转移55,97年,102年,103年]。
除了paracrine-mediated、间隙连接调控和肿瘤发生的直接contact-based支持,基质细胞已经被证明能够影响转录组的肿瘤,特别是在患者疾病的复发。数据分析证明upregulation与病人相关的基因表达模式的生存(19- - - - - -21]。分析表明,结肠癌患者相关基因的表达水平明显高于有复发的风险,如TGF -β,CALD1,POSTN,FAP,IGFBP7,英里/加仑,在他们的基质细胞与上皮癌细胞(19,20.]。值得注意的是,在所有基质细胞群中,战乱国家显示最强的表达水平的阀杆/锯齿叶缘,间叶细胞转录子类型的结直肠癌(20.]。因此,“基质签名”的特点不同的结直肠癌亚型可能有临床意义,甚至可能成为疾病的预后标记(20.]。
4所示。msc在癌症和移植物抗宿主病治疗
虽然癌症治疗的临床前研究MSC异种移植小鼠模型中有矛盾的结果,这可能是由于实验中使用的模型系统,MSC移植的时机,传播细胞的协议体外(104年),msc在癌症治疗中保持着他们的治疗潜力。在持续的I / II期研究(NCT02008539)自体msc转导与单纯疱疹virus-thymidine激酶(HSV-TK)逆转录病毒是通过静脉注射到晚期胃肠道肿瘤患者随后更昔洛韦治疗治疗的安全性和耐受性研究[105年]。更兴奋了msc提高造血干细胞移植的财产,防止移植物抗宿主病(GVHD)。移植物抗宿主病,被移植的免疫细胞的攻击与收件人的组织,是一个频繁的并发症的自体骨髓移植治疗血液恶性肿瘤。MSC移植已经证明是安全的临床试验研究中二十血液恶性肿瘤患者接受了MSC移植和同种异体造血细胞输血。一年期nonrelapse cotransplantation导致10%的死亡率,整体存活率80%,60%无进展生存,10% graft-derived死亡。类似的治疗没有MSC cotransplantation导致一年期nonrelapse死亡率37%,总体存活率44%,38%无进展生存,31% graft-derived死亡。在另一个临床试验,MSC输血的影响,研究了在75年持续的急性移植物抗宿主病,患者免疫抑制药物没有回应。GVHD状态MSC治疗之前提高2.7%的患者,持平在29.3%的病人,恶化或显示最大GVHD水平在66.7%的病人。串行MSC输血展示了一个令人鼓舞的总体响应率为61.3%,其次是100天的生存水平78.1%,而病人没有回应MSC注入100天只有31%的生存。的体外文化msc在输血前降低了患者的总体生存虽然I / II期临床试验的过程中被证明是安全的106年- - - - - -109年]。目前新的临床试验(EudraCT号码2006-004101-26,EudraCT号码2009-014980-38,NCT01763099,NCT01763086,NCT01941394)招募病人进一步探讨msc预防移植物抗宿主病的能力。因此,基于观测数据和正在进行的研究中,msc移植是一种很有前途的工具来提高癌症治疗的效率。
5。肿瘤基质作为药物耐药性的目标和中介
分子药物对激活癌基因的持续表达对肿瘤细胞的生存至关重要,这种现象称为癌基因依赖,代表了癌症治疗的最新发展。然而,这些治疗方法的疗效降低耐药性的发展。细胞自动耐药性,也被称为主要阻力,是由本构激活(突变)的下游信号传感器的目标分子或补偿的同时激活途径。最初二级或获得性耐药时观察到肿瘤细胞敏感分子抑制剂失去他们对这些药物的反应。这可以发生目标激活或补偿绕过。细胞自动机制意味着有辅助致癌突变激酶渲染它耐火材料治疗。相比之下,补偿旁路包括补偿性激活替代激酶,从而减少药物的生物效应(110年]。
一起的细胞自动机制抵抗分子抑制剂,很多研究表明,一个重要的角色是由noncell自治信号,细胞起源的组件的肿瘤微环境110年]。转移性肿瘤细胞的一个显著特征是他们能力可塑性适应不同的微环境条件,克服单一药物治疗。耐药性的机制这一模式在很大程度上是难以捉摸,因此被强烈的临床前研究的主题。最近的研究突显出一个至关重要的角色癌细胞和肿瘤微环境之间的相互作用,导致研究者假设一个完全不同的和非传统的机制抵抗分子抑制剂(97年,99年,103年]。虽然在coculture这些研究进行了系统,他们形成一个原理的证明,证明一个新颖的机制癌细胞可以生存在极端的压力下,甚至利用严重的文化条件来改善其生长特性。
同时不包含多基质支持肿瘤发生和形成一个屏障对于化疗药物,使其作为一个有吸引力的药物目标。联合治疗针对基质和癌细胞的细胞毒素在临床前和临床实验中取得了可喜的成果。完整的基质消耗ipi - 926和声波刺猬抑制剂,与吉西他滨管理,增加了药在临床前小鼠模型,从而突显出肿瘤基质的开发和维护的重要性,进一步表明联合治疗的疗效目标肿瘤细胞和肿瘤基质成分(111年]。临床研究部分基质消耗使用CD40-activated巨噬细胞以及临床前工作利用ECM透明质酸的酶消耗了改善病人生存和提高药物输送到肿瘤(112年]。除了整个基质的破坏,临床前研究表明减少肿瘤发生损耗后stroma-supporting myofibroblasts使用抗体针对成纤维细胞激活蛋白(FAP) [113年]。临床研究已经证明安全注入anti-FAP结直肠癌患者,转移性结直肠癌,小细胞肺癌虽然没有观察到肿瘤反应(114年,115年]。尽管贫穷在癌症治疗的成功,最近anti-FAP恶性胸膜间皮瘤的临床前研究,不治之症造成接触石棉,建议FAP阳性细胞的溶菌作用,抑制肿瘤的生长,显著延长小鼠的生存(116年]。鼓励研究小组的数据从瑞士苏黎世大学,打开一个新的临床一期试验(NCT01722149)研究的影响FAP-specific恶性胸膜间皮瘤患者CD8 + T细胞。试验的病人注射了1×106过继转移FAP-specific逆转录病毒重组T细胞在胸腔积液中直接评价安全性和免疫治疗的疗效。除了抗体FAP疫苗研究已经导致了一些兴奋在临床前水平证明显著降低肿瘤的生长和转移在B16转椅/ F10.9黑色素瘤,4 t1乳腺癌,EL4胸腺瘤小鼠模型(117年,118年]。机械化接种成纤维细胞CD8 t细胞攻击处于敏感状态,从而导致减少胶原蛋白生产和显著增加化疗药物的吸收119年]。
间质纤维化也可以使用抗氧化剂抑制,大剂量维生素E等增加生存在大鼠模型(120年)或针对血管紧张素ⅱ1型受体和血管紧张素转换酶活性(121年]。在一个未分化甲状腺癌异种移植模型中,贝伐单抗(阿瓦斯汀)治疗减少了巨噬细胞浸润和炎性细胞因子的表达。更重要的是,贝伐单抗治疗血管通透性降低,从而影响肿瘤基质的第一步发展(122年]。迄今为止没有令人信服的临床研究表明基质抑制肿瘤的功效在最激进的形式的甲状腺癌。然而,因为没有治疗甲状腺癌的未分化形式,联合疗法的研究针对肿瘤细胞和基质可以提供临床相关的协议和治疗选择。
集体,不断开发肿瘤基质,同时包含不同基质发育阶段有多才多艺的能力来支持上皮癌细胞的生长。虽然间充质干细胞的存在和功能在肿瘤微环境仍不完全清楚,目前的知识表明一个至关重要的角色msc在微环境的建设,培育CSC /抽搐细胞,并支持分化上皮癌细胞。这些知识的基础上,针对基质成分结合肿瘤细胞本身可能会增加癌症治疗的疗效。
缩写
| CAF: | 癌症相关成纤维细胞 |
| CDC42: | 细胞分裂控制蛋白质42同族体 |
| CSC: | 癌症干细胞 |
| CXCL12: | 1或SDF-1基质衍生因素 |
| 趋化因子受体CXCR4: | C-X-C趋化因子受体4或SDF-1受体类型 |
| ECM: | 细胞外基质 |
| FAK: | 粘着斑激酶 |
| FAP: | 成纤维细胞激活蛋白 |
| 移植物抗宿主病: | 移植物抗宿主病 |
| HGF: | 肝细胞生长因子 |
| HSV-TK: | 单纯疱疹virus-thymidine激酶 |
| LOXL2: | Lysyl oxidase-like 2 |
| MMP的: | 基质金属蛋白酶 |
| 硕士: | 间充质干细胞 |
| 没有: | 一氧化氮 |
| PKC: | 蛋白激酶C |
| ROBO1: | 车道(轴突引导受体) |
| 石: | Rho-associated卷曲螺旋激酶 |
| RNAi: | RNA干扰 |
| ROS: | 活性氧 |
| RNS: | 活性氮物种 |
| SLIT2: | 狭缝同族体蛋白2 |
| 蜗牛: | 蜗牛家庭锌指1 |
| TAF: | 肿瘤相关成纤维细胞 |
| 抽搐: | 肿瘤启动细胞 |
| TWIST1: | 扭曲的家庭我BHLH转录因子 |
| VEGF: | 血管内皮生长因子。 |
利益冲突
作者没有利益冲突。
补充材料
细胞培养:人类骨髓间充质基质细胞(msc)和HEK 293 t细胞(写明ATCC马纳萨斯,弗吉尼亚州,美国)培养αmem 10%的边后卫αmem粉(表达载体猫# 12000 - 014,佩斯利,英国),定义“的边后卫”(美国UT HyClone猫# SH3007003M,洛根)补充penicillin-streptomycin(σ,圣路易斯,密苏里州,美国),谷氨酰胺(表达载体猫# 25030024),和最小的必需氨基酸,NEAA(表达载体猫# 11140035)。的αmem粉溶解水(σ)商业细胞培养水平。碳酸钠(σ)(2.2 g / l)过滤前加入。浓缩的无血清培养基从支流HEK 293 t文化是添加到MSC。HEK 293 t细胞用于培养,因为他们的强劲增长能力和强大的潜在压力严重的细胞生存。msc治疗(2 x105细胞)被播种每10厘米约10 - 20 HEK 293 t细胞盘允许培养持续4 - 6通道。通过在日的间隔。
生长曲线分析:生长曲线分析10000个细胞被播种在6-well板块,在12小时的间隔数一式三份。
延时成像:细胞生长在CO2-independent介质(表达载体)补充10%的边后卫,MEAA、青霉素、链霉素和谷氨酰胺对prewarmed支持7天。媒介在每3天刷新。细胞生长和运动被延时成像监测(20 x放大)每隔2分钟(蔡司Axiovert 200倒置显微镜,卡尔蔡司,从,德国)。