文摘
人类脂肪tissue-stromal派生细胞(对asc)被认为是再生医学的角度工具。根据应用程序模式ASC /同种异体免疫细胞相互作用下可以发生在体循环大量高浓度的O2较低的O和在目标组织2的水平。我们检查的影响同种异体PHA-stimulated外周血单核细胞(PBMCs)对asc在氧气环境(20%)和“生理”缺氧(5%啊2)。与微阵列分析显示对asc在20%以下2更受到激活PBMCs,表现在微分的超过300个基因的表达,而在5%啊2只有140个基因被改变。改变基因模式只是在不同O部分重叠2条件。在阿2对asc保留他们的增殖和分化能力,间质表型,细胞内细胞器的状态。对asc是促炎激活转录水平上证实了他们的抑制能力激活和扩散mitogen-stimulated PBMCs。ASC / PBMCs交互导致抗炎转变的旁分泌调节调节介质与免疫抑制的生活水平的显著增加。我们的数据表明,在环境和O约2对asc具有免疫抑制潜在功能和维护活动。在“生理”对asc缺氧不太容易“启动”同种异体增殖PBMCs。
1。介绍
多能间充质基质细胞的能力(msc)生产生物活性分子,在几个间充质快速增殖,分化谱系及其免疫抑制活性细胞疗法使他们非常有吸引力的工具和再生医学1]。此外,msc可以应用在同种异体由于缺乏/低的表达主要组织相容性分子二类(mhc II)和costimulatory分子在细胞表面(2- - - - - -4]。MSC免疫调节的分子和细胞机制目前正在积极研究[5- - - - - -9]。免疫抑制的表现,msc必须被激活(启动)10- - - - - -13]。这个启动可以由细胞因子激活淋巴细胞,首先,TNF -α干扰素-γ,il - 1β(11]。激活后msc成为可见的免疫系统细胞,如NK (14- - - - - -16]。因此,他们现在比immunotolerant msc认为更多的是免疫逃避,这可能影响他们的功能在同种异体的应用程序(17]。最近的研究集中在msc的免疫调节特性,而他们的函数不直接相关的免疫抑制研究甚少。到目前为止,MSC间质表型的稳定(SSEA4 CD73, CD90、CD105, CD29、CD44)与促炎细胞因子(启动后12,18)和保留multilineage间充质分化已经证明(12]。这些细胞因子调节不同增殖活动(12),细胞因子,启动迁移msc (11]。然而,同种异体msc被应用在活的有机体内会暴露,而不是某些细胞因子的免疫细胞的促炎介质。此外,正如先前所显示的,MSC /免疫细胞相互作用的因素是由当地的组织微环境,O2水平是最重要的一个19]。这取决于应用程序模式,MSC /同种异体免疫细胞相互作用下可以发生在体循环大量高浓度的O2和在目标组织以低得多的O2的水平。因此,在这里,我们研究了同种异体的旁分泌作用激活外周血单核细胞(PBMCs)在不同O2水平微环境在人类脂肪的功能状态和regeneration-related特征tissue-derived基质细胞(对asc)。
2。材料和方法
2.1。隔离和脂肪Tissue-Derived文化间充质基质细胞(对asc)
脂肪组织样本获得科学的框架协议从多学科诊所“Souz”(莫斯科,俄罗斯)在局部麻醉的情况下选择的抽脂手术后患者健康的书面知情同意。脂肪组织使用指南专门处理生物医学伦理委员会批准的生物医学问题研究所俄罗斯科学院(俄罗斯的生理部分生物伦理委员会,俄罗斯联邦为联合国教科文组织全国委员会,允许# 314 /МCK / 09/03/13)。脂肪基质细胞(对asc)孤立使用标准方法所描述的祖克等人与修改Buravkova et al。20.,21]。细胞被扩大αGibco mem(22561 - 021年,表达载体,英国)50 U /毫升penicillin-streptomycin (PanEco、俄罗斯)和10%胎牛血清(的边后卫)(美国HyClone sv30160.03)环境啊2紧张(20%股份有限公司2、有限公司2孵化器(日本三洋))或在低O2(5%啊2)使用multigas孵化器(三洋)。细胞在第二和第三段落被用于实验。对asc扩大在不同O2的特征是(22在使用前)。
2.2。分离外周血单核细胞(PBMCs)
PBMCs被密度梯度离心法分离(美国Sigma-Aldrich Histopaque 1077)全血从健康志愿者获得知情同意后根据标准协议。孤立的细胞resuspended rpmi - 1640年(31870 - 025,Gibco) heat-inactivated penicillin-streptomycin和5%的边后卫。与10 PBMCs被激活μg / mL phytohaemagglutinin (PHA)(美国Sigma-Aldrich L8754-5MG)。
2.3。Coculture对asc PBMCs
对asc镀到众议院的6-well transwell板块(美国康宁3412,0.4μ米孔隙大小)。单层对asc率达到70 - 80%,介质改为rpmi - 1640, 5%的边后卫,10μ克/毫升PHA。激活PBMCs (106/毫升)被添加到transwell的上院。细胞被cocultured 72 h O 20%和5%2。
2.4。ASC可行性
对asc trypsinised,暂停沾膜联蛋白V, FITC工具包(美国贝克曼库尔特PN IM3546)。生活(),凋亡(安+)和坏死(安−π+)细胞被发现使用流式细胞分析仪(史诗XL,贝克曼库尔特)。
2.5。ASC扩散
确定对asc核扩散活动之前计入5固定随机选择视图字段coculture后实验和在相同的点。图像采集是使用徕卡执行DMIL(德国)和尼康Eclipse蒂乌(日本)显微镜配备数码相机、和细胞数使用SigmaScan Pro 5.0图像分析软件(SPSS Inc .)、美国)。ASC的核扩散活动定性为褶皱变化数量后实验第0天相比。
2.6。Osteodifferentiation
实验结束后对asc在完整的培养αmem论述补充(100 nM地塞米松、10毫米sodium-b-glycerophosphate和0.05毫米抗坏血acid-2-phosphate)(美国微孔)为3周。细胞被固定在4%多聚甲醛和沾40毫米茜素红S (Sigma-Aldrich)的解决方案。然后matrix-bound染料溶解在10%氯化十六烷吡啶(10毫米钠磷酸盐缓冲剂、pH7 w / v)和OD测量spectrometrically 562海里。
2.7。线粒体、溶酶体、内质网(ER)、活性氧(ROS)的评估
线粒体、溶酶体、内质网和ROS贴上MitoTracker红调频,LysoTracker绿色ERTracker, H2DCFDA(美国表达载体分子探针),分别根据制造商的协议。对asc和trypsin-EDTA分离和分析流式细胞术(史诗XL)。
2.8。Immunophenotypic分析
对asc的immunophenotypic性质是由流式细胞术(史诗XL)使用以下单克隆抗体:CD45-phycoerythrin (PE), CD73-fluorescein异硫氰酸酯(FITC) CD90-FITC, CD105-PE, CD54-PE (IO测试,贝克曼库尔特)。Trypsinised细胞抗体孵育后,制造商的指示。
2.9。激活PBMCs
描述激活,PBMCs沾抗体HLA-DR (PE) (IO测试、贝克曼库尔特)制造商的指示和HLA-DR-positive细胞的比例估计通过流式细胞术。
2.10。PBMCs扩散
之前实验PBMCs沾carboxyfluorescein succinimidyl酯(CFSE,英杰公司)根据标准协议(23]。增殖率是评估后流式细胞术的比例减少分裂PBMCs CFSE荧光。
2.11。检测条件培养液的细胞因子
条件培养基(CM)收集coculture后,离心去除细胞碎片,并存储在−80°C(低温冰箱三洋)。使用人类th1 / th2细胞因子被发现在CM 11丛FlowCytomix多路复用设备(BMS810FF eBioscience,本德MedSystems)。FlowCytomix探针进行了分析使用FaxCalibur血细胞计数器(美国,正欲)和FlowCytomix Pro软件。生活在CM中浓度估计与人类酶联免疫试剂盒(美国Abcam ab100582)。
2.12。RNA分离和微阵列分析
执行总RNA基因表达图谱对asc隔绝单作和经过72小时的coculture PBMCs 20%和5%2。培养对asc和0.05% trypsin-EDTA分离,用PBS洗净,保存在RNAlater(美国试剂盒)−30°C。在分析之前,对asc洗从稳定剂和RNA的标准程序隔离使用试剂盒应用(根据制造商的协议)。使用一个Nanodrop RNA浓度测定;然后,200 ng的RNA是放大Illumina公司TotalPrepTM RNA扩增工具包(美国Ambion)。放大RNA随后用于微阵列杂交芯片使用Human-Ref-12表达式(美国Illumina公司)。使用Illumina公司的数组进行扫描和分析基因组工作室v2009.2软件(基因表达模块v1.5.4 Illumina公司)。错误发现率是通过调整控制值通过Benjamini-Hochberg算法,其次是基因集富集的性能分析和称为单侧确切概率法。22184个基因的微阵列数据被应用过滤两个标准的意义:和褶皱变化(FC) > 2。进一步分析数据缓解v2.0是用于基因基因本体组的分布(生物功能)。
2.13。统计分析
统计分析了使用“微软Excel 2010”和“Statistica 7.0”软件包。差异是由Mann-Whitney评估非参数测试。所有的实验都是复制,至少三次,数据意味着±SEM和被认为是具有统计学意义。
3所示。结果
3.1。在对asc的影响PHA-Stimulated PBMCs细胞接触独立设置
旁分泌作用与激活PBMCs 72小时并不影响ASC形态学ASC单作相比(数字1(一)和1 (b))。
(一)
(b)
表现型对asc cocultured表明,几乎所有的这些细胞CD73是积极的(%),CD90 (%)和CD105 (%),发现这些对asc间充质干细胞/基质细胞根据Cytotherapy[国际社会的建议24)(图2(一个))。平均荧光强度(MFI)特征ASC表面抗原分子的数量,并没有改变CD73或CD105。然而,CD90 MFI cocultured对ascО下显著降低5%2(图2 (b))。
(一)
(b)
(c)
(d)
细胞细胞器和ROS水平特征对asc cocultured与适当的染色后荧光跟踪(图3)。低于20%啊2显著增加MitoTracker红调频MFI检测,显示线粒体跨膜电位升高(图3(一个))。没有显著的变化观察MFI LysoTracker绿色指示对asc的一成不变的溶酶体活动后与PBMCs(图3 (b))。ER隔间的分析显示大幅下滑的ER绿色染色对asc cocultured O在20%和5%2(图3 (c))。ROS水平没有改变后对asc互动PBMCs不管O2浓度(图3 (d))。
(一)
(b)
(c)
(d)
与同种异体激活PBMCs旁分泌作用后,对asc cocultured的可行性高,没有对asc不同于在单一(图4(一))。对asc增殖活性略增加在coculture PBMCs(图4 (b))。ASC成骨的能力揭示了矿化基质生产不受交互PBMCs和阿不显著低于5%2在单作和后coculture PBMCs(数字4 (c)和4 (d)),确认我们的最新发现25]。
(一)
(b)
(c)
(d)
对asc coculture后,保留了免疫调节活动显示抑制t细胞的活化(减少的份额HLA-DR-positive PBMCs)和扩散(表1)。
与PBMCs互动后,几乎所有对asc CD54-positive,然而,对asc在单作,只有一半的表达了这种抗原(图2 (c))。此外,CD54 MFI coculture低于20% O后高出5倍2和2倍5% O2(),表明增加每ASC ICAM-1分子(图的数量2 (d))。
旁分泌调节介质(CM)的介质ASC和PBMC单一栽培和coculture后发现(图5)。il - 10,肿瘤坏死因子-α和干扰素-γ只有激活PBMCs分泌,而il - 6,引发,生活中发现两个单一栽培。细胞因子分泌的水平对asc和PBMCs并不取决于O2除了肿瘤坏死因子的浓度α,PBMCs合成更少的趋化因子在5%以下2。细胞间的相互作用影响的旁分泌。除了膜结合ICAM1、可溶性粘附分子的形式被发现后coculture(图5)。减少促炎il - 6和TNF -的浓度α揭示了(图5)。没有明显的变化引发的水平,il - 10和干扰素-γ(图5)。同时,生活水平,这是参与ASC免疫抑制,coculture后显著增加(图5)。没有影响生产氧浓度的可溶性介质coculture后指出。
因此,72小时的间接互动mitogen-stimulated同种异体PBMCs没有导致任何改变ASC功能而引发了一个重大转变的介质的形象。这是感兴趣的评估PBMCs ASC转录活性的影响。
3.2。在ASC基因表达的影响PHA-Stimulated PBMCs:微阵列分析
在这项研究中,我们确定了差异表达的基因相互作用激活后对asc PBMCs在不同O2条件。微阵列分析发现显著变化的ASC转录组简介:304个基因在20% O2和142年的5%2差异表达。总共104个基因共同持平在20%和5%2(图6(一))。排名根据基因本体论(去)表明,在组信号转导,细胞增殖、免疫反应,细胞粘附、应激反应、细胞内信号转导,细胞运动性20或更多的基因差异表达低于20%2。在5%啊2基因表达改变的数量在同一组低。在某些团体,只发现在20%的差异表达基因2(细胞内稳态,蛋白质的生物合成和胞内运输)(图6 (b))。
(一)
(b)
变更的某些最重要的ASC基因的表达在不同的官能团是总结表2。ASC促炎activation-involved基因证明对ASC的重大upregulation确认“启动”PHA-stimulated PBMCs。这个“启动”的程度几乎不依赖于O2环境除了TRAF3IP2和COLEC12的upregulation更高的5%以下2。在旁分泌regulation-entailed分子的重要发现upregulationСС,科学家,和IL-families:处于受控,CXCL12,CXCL5,CXCL6,CCL2 (MCP-1),CCL5,IL11,IL1B,IL8。是很重要的,除了MCP-1和IL-1β环境下的超表达更明显的20%2。此外,处于受控,CXCL5,CXCL6的表达增加十多个或一棵在20%以下2低于5%啊,没有改变2。Immunosuppression-associated基因显示在不同的差别均对这些O2条件。所以,PTGIS和TGFBI是消极监管下20%啊2,显示积极的监管下5% O2。上的数据生活上面给出的表达式支持ELISA数据增强生产的中介在5%以下2。的基因,与细胞外基质重塑,显示显著增加基质金属蛋白酶(MMP1,MMP3与胶原蛋白upregulation(同时)基因转录COL7A1)。表达的基因,编码cell-matrix interaction-mediating分子(ITGA11,ITGB5,PODXL,MFGE8ASC / PBMCs交互后),明显下调20%以下2和没有变化在5% O2。只有PDPN是调节下啊2浓度。Migration-associated基因(HAS1,SLIT2O)显示增强转录为20%和5%2。proliferation-regulated基因的表达(CDKN3,CCNB2)只有在增加环境啊2,而CDC20和MCM4调节在啊2条件。
总之,ASC基因的微分表达式的数据交互激活后同种异体PBMCs演示表达模式的重大转变的变化取决于O2条件。
4所示。讨论
细胞间的相互作用是一个动态的过程由当地的环境。应对微环境的挑战时,细胞不仅调节自己,而且调节其他细胞的属性按照他们的新国家。在目前的研究中,我们研究了同种异体的旁分泌作用的影响对asc PBMCs和激活函数和后者的转录组在约“生理”缺氧(O2)。这些影响已经在两个方面:首先,促炎激活的同种异体PBMCs如何影响对ASC本身的特性(内部状态),其次,ASC函数如何改变与激活免疫细胞相互作用后?
促炎的激活被认为是一个先决条件诱导msc(潜在的免疫调节26]。结果表明,这种效应的存在提供了激活免疫细胞,以及某些炎症介质(TNF -α干扰素-γ,il - 1β,IL - 6)的影响的某些细胞因子和鸡尾酒由激活PBMCs可以显著差异(11- - - - - -13,27]。迄今为止,全球差异基因表达分析显示只有部分匹配的基因表达水平改变了msc暴露于某些细胞因子,组合,从激活PBMCs或者鸡尾酒。在这些特定的细胞因子刺激IDO-mediated免疫抑制的msc、鸡尾酒从激活免疫细胞铂族元素造成的2-immunosupression [27]。
摘要基因微阵列分析表明,经过72小时的ASC / PHA-activated同种异体PBMC旁分泌作用ASC基因表达改变的数量低于20%的两倍多25%啊2下,只有一半的人共同改变啊2条件。基因直接参与“再生”的upregulation ASC函数中检测出这群“联合”。有基因调控细胞周期:CDKN3(细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂),CCNB2(细胞周期蛋白B),CDC20(细胞周期20同族体),MCM4的活动与DNA复制的起始。此外,负调节细胞增殖,CDKN2B表达下调,这也可能与对asc增殖活动的增加有关。除此之外,其他几个重要分子的转录后调节对asc在交互:HAS1透明质酸合酶,酶负责生产透明质酸,这是一个活跃的修复过程中产生允许基质细胞的迁移和血管增长;SLIT2一种蛋白质,积极调节其他重要的膜结合蛋白聚糖的生产,glypican,提供细胞的粘附和迁移;和SPHK1,鞘氨醇激酶磷酸化sphingosine-1-phosphate鞘氨醇,一个重要的监管分子相互作用,细胞迁移和增殖。
我们的数据表明,ASC PBMCs“启动”发生在交互激活。因此,我们发现的upregulation TNF -α和INF-inducible蛋白基因(TNFAIP3,IF44,2英镑等)反映ASC“促炎”激活需要刺激免疫抑制因素的生产。的确,对asc调节的活动HLA-I之前,这是符合描述增加相应的蛋白质(28]。我们还显示转录升高PTGS2前列腺素G / H合酶和环氧合酶被激活铂族元素的生产2的主要因素之一,抑制t细胞的增殖。
ASC / PBMC交互显著刺激转录CC,科学家,细胞因子IL家庭对ASC的基因。最重要的upregulation证明了多向性的趋化因子(CXCL5,处于受控,IL8,IL1B,IL11,生活)。这些分子提供趋化作用、细胞间和细胞内信号和调节细胞增殖包括自分泌路径,参与免疫应答和炎症,并且负责血液白细胞的规定,如单核细胞(MCP-1),淋巴细胞(CXCL12)、粒细胞(CXCL6)和中性粒细胞(CXCL5,引发,处于受控)。此外,处于受控和CXCL5参与血管生成的刺激,这对再生也是非常重要的。细胞因子基因活动在某些情况下并不取决于O的浓度2(CCL5,IL11);的基因(CXCL5,CXCL6,IL8)有重大upregulation 20%啊2为别人,而这是发现在5% O2(CCL2,IL1B,生活)。
转录的基因,与细胞外基质重塑,msc的最重要的功能,如胶原蛋白(COL7A1)和基质金属蛋白酶(MMP1,MMP3),在ASC / PBMC交互调节。的表达MMP3增长了近300倍。增加对asc matrix-remodeling活动显然是与整合蛋白的微分表达式(ITGA11,ITGB3,ITGB5),它介导cell-matrix交互和减少消极的表达调节器的迁移,podokan (PODN)。
因此,微阵列分析显示的upregulation基因,蛋白质产品提供对asc的增殖活动增加,和迁移能力增强的细胞外基质重塑。环境下啊2(20%)更多的基因改变了他们的交互激活后表达PBMCs相比约O2(5%)。而转录组变化显示在O2浓度,效果不显著的低于5%2。应该注意的是,一些关键的基因IL-1b,生活,HAS1更重要的是调节5%以下O220%啊2。
因此,可以得出结论,与同种异体激活对asc PBMCs可以唤醒潜在的“再生”至少在转录水平。此外,细胞因子水平的重大转变coculture条件培养基检测相比PBMC, ASC单一栽培。众所周知,在炎性微环境对asc MSC /合成各种可溶性介质,高重要性的再生过程的实现如EGF、FGF, PDGF TGF -β、VEGF、胶质瘤、igf - 1、Ang-1 KGF, SDF-1 [26]。免疫抑制分子的生产由msc启动后观察细胞因子激活白细胞,尤其是干扰素-γ结合TNF -α,il - 1α或il - 1β(26]。
我们比较了ASC和PBMC细胞因子水平单一栽培后与细胞因子概要contact-independent coculture。为介质分泌PBMCs只,共培养后,明显降低TNF -的浓度α了,而干扰素水平-γ和il - 10在单作是一样的。对asc和PBMCs单作合成引发。引发的浓度单一栽培的coculture是一样的,这表明这个细胞因子的生产减少至少一种类型的细胞进行交互。基于显著upregulationIL8我们发现的转录与PBMCs coculture后也大幅抑制引发生产PBMCs应该应该。在ASC和PBMC单一栽培我们检测到两个il - 6总科介质,il - 6本身和生活。共培养后il - 6的浓度显著低于单一栽培相比,这可能表明降低il - 6对asc合成以及PBMCs。鉴于对asc缺乏转录的il - 6的变化,它是合理的假设这是一个重要的抑制白介素在PBMCs生产。相比之下,比单一栽培coculture生活后显著增加。此外,我们注意到upregulation生活表达对asc cocultured。因此,考虑到减少促炎介质像TNF -的浓度αil - 6和生活生产的增加,这是众所周知的ASC免疫抑制介质(9,26]ASC / PBMC交互后的细胞因子可以作为抗炎为特征。
摘要我们已经证明ASC / PBMC旁分泌作用伴随着增加的数量对ASC ICAM-1-expressing以及ICAM-1分子/细胞。此外,我们还发现可溶性sICAM-1 coculture后调节中。众所周知,ICAM-1扮演着一个重要的角色在炎症的白细胞粘附和迁移。Majumdar et al。29日)认为这样增加ICAM-1表达式MSC激活TNF -α和/或干扰素-γ,由PBMCs激活。然而,尽管Faßlrinner et al。30.]还发现增加ICAM-1表达式PBMCs和骨髓msc互动后,他们表明,阻止干扰素-γ肿瘤坏死因子-α没有完全阻止ICAM-1海拔暗示ICAM-1表达式的存在额外的刺激。因此,任et al。31日)也显示il - 1诱导ICAM-1表达式。作者认为MSC的仰角与增强的免疫抑制ICAM-1活动由于“浓度”免疫细胞在MSC。我们的数据在增加对asc ICAM-1 MFI coculture PBMCs支持任et al。(31日)发现。有必要指出,在约O2每个细胞增加ICAM-1并不明显。除了ICAM-1我们还分析了另一个粘附分子的表达Thy-1 (CD90),白细胞的counterreceptor整合素Mac-1,通常被认为是间充质细胞标记。虽然几乎所有的mono -和coculture CD90-positive也Thy-1的每个细胞表达明显减少约下O2。是显示之前下降CD90表情msc可以导致免疫抑制活性的损失(32]。虽然我们没有检测到衰减ASC免疫抑制的“生理”缺氧,胶粘剂的报道减少ICAM-1和Thy-1每个细胞表达可能支持上述的假设下的弱促炎对ASC激活组织O2。
ASC可行性和胞内舱功能没有阻碍后72小时的旁分泌与同种异体PBMCs激活。对asc保留他们的间质表型(CD73+,CD90+CD105,+、CD45−)和增殖能力和osteodifferentiate,这表明无论O ASC的保存功能2浓度。早些时候,作物et al ., 2010年,显示没有影响炎症激活ASC骨的——和adipodifferentiation甚至发现ASC增殖率的增加coculturing[7天后27]。增加了MSC增殖6 - 8天后的刺激激活淋巴细胞旁分泌鸡尾酒也证明(30.]。在这种情况下,显然不仅属于IFN -关键的作用γ的行动通常是与促炎msc的“启动”有关,但通过其他细胞因子(30.,33]。保留ASC的功能,不管O的浓度2微环境的一个重要应用方面的同种异体ASC再生潜力的认识在活的有机体内。
“生理”缺氧微环境的关键参数之一,它可以调节细胞的性质及其相互作用。在一些论文已经令人信服地表明,msc O约下的扩张2他们转向糖酵解能量代谢,伴随着增加增殖和减少分化(22]。此外,“具备干细胞”基因的upregulation证明(34- - - - - -38]。这些数据表明,在约O2未提交的祖细胞的msc可以拥有属性。因此,这种变化也会影响msc的促炎的启动。因此,我们证明了在“生理”缺氧(约O2促炎的方式对asc)被激活,保留其功能在环境和约O2对asc,尽管表现出较小的促炎的激活在5% O2。这些数据表明,ASC的净效果与其他细胞类型的交互,考虑的在活的有机体内情况下,取决于一系列复杂的因素,包括组织微环境的具体问题。
5。结论
我们的数据表明,旁分泌作用的同种异体mitogen-stimulated PBMCs环境下对asc和O2以及在“生理”对asc缺氧导致的“启动”的重大upregulation基因参与炎症激活、免疫抑制,细胞增殖,细胞因子调控,细胞外基质重塑。在约啊2明显更少的基因差异表达与20%相比,对asc O2。与此同时,在两个O2条件对asc保留其功能,免疫抑制潜力,提供抗炎细胞因子的转变。这些数据是重要的同种异体ASC实现在细胞治疗和再生医学。
利益冲突
作者宣称没有利益冲突有关的出版。
确认
这项工作是支持的从俄罗斯科学基金会的资助。14-15-00693。微阵列分析是由拨款程序没有。7俄罗斯科学院主席团。