文摘
癌症干细胞(二者)已报告的关键起始,维护和发展的癌症。干细胞标记物的表达,比如podoplanin (PDPN), CD133,巢蛋白,可能是与恶性发展。然而,二者的影响和干细胞标记在癌症患者的临床结果仍不明朗。在这项研究中,我们评估了神经胶质瘤的预后作用二者(gCSCs)隔离和原发性胶质母细胞瘤患者的干细胞标记(pGBM)。一群39 pGBM患者分为两组,那些积极或消极gCSCs, gCSC和患者生存之间的关系进行评估。我们观察到显著不同的累积生存率()当比较病人gCSC gCSCs患者积极和消极。gCSCs阳性的患者中,我们观察到在存活率无显著差异的gCSCs PDPN每个积极或消极,CD133或巢蛋白。这项研究强烈支持的预后价值gCSCs隔离pGBM患者的生存。
1。介绍
癌症干细胞(二者)启动至关重要,维护和发展发展的肿瘤和抗治疗(1),尽管肿瘤微环境也很重要,这些过程(2- - - - - -5]。积累的证据表明二者之间的联系和恶性肿瘤(6,7)导致了相当多的研究二者在癌症患者的预后作用8]。密切关联之间观察到的临床结果和CSC的存在特性在不同的肿瘤,如干细胞标记物的表达,遗传特性和肿瘤的形成球体(9- - - - - -13]。也观察到类似的发现在神经胶质瘤患者,neurosphere形成和干细胞标记物的表达,比如podoplanin (PDPN), CD133,巢蛋白,被发现是预后标志物的临床结果(14- - - - - -16]。相比之下,其他的研究也发现,CSC的存在特性,如干细胞标记物的表达,并不是影响预后显著(8,17,18),将质疑CSC的预后价值功能。
在这项研究中,我们评估了隔离神经胶质瘤的预后作用二者(gCSCs)和表达干细胞标记(PDPN、CD133和巢蛋白)。这两个因素应该是与肿瘤恶性肿瘤密切相关,患者pGBM [15]。gCSCs我们评估之前定义的人群,形成gliomaspheres属性,包括能力,接受神经分化,诱导肿瘤发生在活的有机体内(6]。在这项研究中,一群39 pGBM患者分为两组,那些积极或消极gCSCs, gCSC和患者生存之间的关系进行评估。我们也评估了干细胞标记物的表达(PDPN、CD133和巢蛋白)在gCSCs及其与患者生存的关系,解决在pGBM这些标记的可能的预后价值。
2。材料和方法
2.1。患者人群
pGBM患者治疗两个机构在2009年和2013年之间被包括在本研究(表1);二次GBM患者被排除在外。所有患者经病理诊断的神经病理学家和分级根据2007年的分类(20.]。所有的病人提供书面知情同意,这项研究是两个机构的机构审查委员会批准(KC10SNSI0466和4-2012-0212)。
2.2。治疗
所有患者接受联合治疗,包括手术,其次是并发化疗和放疗和辅助化疗(表2)[19]。手术的目的是总计肿瘤切除,定义为宏观切除肿瘤的100%。病人不适合全部切除进行了全切除,定义为删除< 100%,但肿瘤≥90%的宏观质量,或部分切除,定义为切除肿瘤(< 90%的宏观21]。肿瘤切除的程度估计的神经外科医生术后复查和确认的磁共振成像(MRI)扫描。所有患者术后辅助放疗和伴随的佐剂temozolomide (TMZ),如前所述[19]。复发性肿瘤治疗与抢救temozolomide(200毫克/米2)[22]在16个病人和放疗治疗的一个病人,而不是在六个病人。
2.3。隔离gCSCs
肿瘤标本被收集在胶质母细胞瘤患者手术的手术室,紧随其后的是隔离gCSCs在1小时内使用先前描述的机械分离方法(6]。只有形成gliomaspheres细胞显示能力,接受神经分化和诱导在活的有机体内肿瘤发生,在我们以前的报告所述6),被定义为gCSCs。孤立的gCSC准备化验了PDPN的表达,CD133,巢蛋白免疫细胞化学(表1)[6]。这些选择过程和采用的分析使用协议执行中描述我们的以前的报告6]。生存的结果pGBM确诊的患者随访。
2.4。统计分析
主要的研究结果是总生存期(OS),测量pGBM手术证实诊断日期的日期的最后的随访中或死亡。生存曲线被绘制使用kaplan meier方法相比,使用log-rank (Mantel-Cox)测试。使用Mann-Whitney病人的人口学特征进行比较测试连续变量和确切概率法对分类变量。所有统计分析使用SPSS 18.0版ko软件(SPSS韩国,汉城,韩国)被认为具有统计显著性。
3所示。结果
3.1。病人
的39 pGBM患者在我们的机构从2009年4月到2013年12月,十五被归类为积极和24负gCSCs(表1)。这些病人中19个男性和20名女性,年龄在11到82年。在15的39 pGBM病人,gCSCs被孤立。采用免疫分析表明(6),15例阳性gCSCs,九PDPN+,十四CD133+,14个巢蛋白+gCSCs(表1)。
3.2。患者生存
39 pGBM患者的人口统计学和临床特点如表所示2。所有39 pGBM患者的平均生存时间是725天。24 gCSC阴性患者的平均生存时间(855天)远远超过15 gCSC积极的病人(520天)。年龄没有显著差异()、性别(),平均随访(),手术范围(),复发率(),1 p 19 codeletion (),O-6-methylguanine-DNA甲基转移酶(管理)甲基化(gCSC积极和gCSC消极组之间)的患者。kaplan meier曲线显示在图演示了操作系统的比例1在累积生存方面,显示出统计上的显著差异(两组之间的)。
gCSCs阳性的患者中,我们观察到在存活率无显著差异的gCSCs正面(9个病人)或负面(6个病人)PDPN表达式(),正面(14例)或负面(一个病人)CD133 (),正面(14例)或负面(一个病人)巢蛋白()。
4所示。讨论
我们观察到在操作系统统计上的显著差异gCSC正面和负面gCSC pGBM患者。二者可能会影响肿瘤的生长和抗治疗(1),gCSCs应该在预测预后作用pGBM病人的临床结果。据报道,CSC特性在各种类型的癌症预后差(9- - - - - -13]。类似的研究结果发表在神经胶质瘤患者neurosphere的形成与临床结果较差(14,23,24]。我们的研究结果的统计分析提供可靠的证据隔离gCSC是一个独立的预后因素pGBM患者的临床结果。
进一步确定候选人pGBM患者预后标记,我们分析了PDPN的存在之间的关系+,CD133+,巢蛋白+gCSCs pGBM患者和生存。一些研究报道,PDPN、CD133和巢蛋白表达在神经胶质瘤患者预后。恩斯特et al。25和三岛等。15)报道,PDPN表达式在星形细胞瘤患者预后。CD133的表达(26和巢蛋白27)是与贫穷相关的结果在许多癌症,包括脑癌。在本系列中,然而,没有PDPN之间在统计上有显著差异的总体生存+,CD133+,巢蛋白+gCSCs和PDPN−,CD133−,巢蛋白−gCSCs。的平均生存时间PDPN-expressing gCSCs积极和消极组相似,400天,408天,分别有两组之间没有显著差异在操作系统()。CD133和巢蛋白表达在大多数患者阳性gCSCs CD133和只有一个案例−和巢蛋白−gCSC,比较两组在统计学上是不可能的。这些发现表明PDPN——的存在,CD133和nestin-expressing gCSCs不是生存pGBM病人预后指标。从其他研究也证明了这一结论数据,报告说,干细胞标记物的表达没有神经胶质瘤患者预后意义(8,18,28]。
在这项研究中,只有pGBM患者包括调整神经胶质瘤的品位。我们之前报道的存在gCSC增加比例作为神经胶质瘤的那些成绩上升(6]。研究中包括各种等级的神经胶质瘤样本,贫穷的预后与隔离gCSC应该受到密切相关的神经胶质瘤的年级,因为gCSC隔离率和神经胶质瘤的品位。因为gCSC隔离率的逐步增长的趋势,根据世界卫生组织的等级的神经胶质瘤,干细胞标记应该表达更多的高级别胶质瘤患者。我们发现大多数gCSCs表达干细胞标记,如CD133和巢蛋白,在这项研究中。
这项研究有一些局限性。的在体外测定的隔离gCSC需要长时间和需要的专业技术来执行它。所以,它可能不是适合预测pGBM短生存期患者的预后。我们研究了具备干细胞表面抗原的表达只在neurospheres而不是在父肿瘤。关于它的持续时间和技术需求在体外分析、调查家长具备干细胞表面抗原的表达的肿瘤可能更适合评估预后。这些建议需要额外的研究评估之间的关联具备干细胞表面抗原在父肿瘤和pGBM患者的临床结果。
5。结论
总之,我们表明,单独的gCSCs明显预后pGBM患者的操作系统。尽管我们发现PDPN的存在+,CD133+,巢蛋白+gCSCs不是预后的操作系统,我们的研究表明,这个问题需要进一步调查。我们正在执行一个继续研究的大量患者进一步解决gCSCs pGBM患者的具体作用。
利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
作者的贡献
Byung Ho, Hyung月亮,和Yong-Min嗯了同样co-first作家这个工作。
确认
本研究支持的基础科学研究项目通过韩国国家研究基金会(NRF)由教育部科学技术(NRF - 2013 r1a1a2006427)和格兰特的韩国卫生技术研发项目,卫生和福利部,大韩民国(HI13C1509)。也是支持的国家研究基金会和教育部科技、韩国政府通过其国家核技术项目(2012 m2b2b1055639)。