间充质基质细胞不增加病毒再活化的风险也不是病毒事件的严重程度在同种异体干细胞移植接受者

文摘

间充质基质细胞(MSC)在临床试验中测试治疗移植物抗宿主病(GvHD)干细胞移植(SCT)。在体外研究了MSC的广泛的免疫抑制活性。SCT后感染代表一个重大风险,重要的是要理解MSC在这种背景下的角色。我们分析了24例(pts)接收MSC移植物抗宿主病在我们单位在2009年和2011年之间。我们记录病毒而与聚合酶链反应以全血为100天之后MSC。患者记录病毒再活化后的头3天msc注入的频率特异性IFNgamma-producing细胞是通过酶联immunospot试验确定的。在我们的患者群病毒再活化MSC输液后发生在45%的情况下,没有明显不同于历史的患者群的发病率影响类固醇抗移植物抗宿主病,与传统的免疫抑制治疗。没有病人呈现严重的感染。两种情况可以检查免疫反应病毒刺激和证明病毒特定T-cytotoxic淋巴细胞活动。在我们的经验中MSC注入并不能证明引发更频繁或强烈的病毒而在移植后设置。

1。介绍

间充质基质细胞(msc)多功能细胞具有多种免疫调节特性。首先从人类骨髓和分离的特点是他们的自我更新能力和分化成mesodermic组织,在过去十年里他们的免疫潜力被广泛利用在试图治疗炎症、自身免疫和同种免疫的疾病(1]。许多组织将注意力集中到了使用MSC管理移植物抗宿主病(GvHD) stem-cell-transplanted患者在临床成功的第一份报告记录了勒布朗等人(2004年2]。

最近的研究在体外在小鼠模型(3- - - - - -6)表明,msc具有多向性的免疫抑制免疫alloreaction行动正在进行。之前考虑的几组建立了msc抑制t细胞增殖反应同种抗原和特异性的有丝分裂原。这个过程被认为是介导通过分泌可溶性因子,如吲哚胺2、3加双氧酶,HLA-G,前列腺素E2、一氧化氮和细胞间接触。msc可以抑制T - b细胞增殖和损害NK和树突细胞活动(7]。有趣的是,在体外研究表明,msc强烈抑制同种抗原诱导t细胞反应无干扰抗病毒t细胞活动(8,9]。此外,它已经表明,MSC抑制t细胞的能力alloresponse是独立于主要组织相容性复合体10]。

免疫缺陷的宿主中病毒并发症影响的抗移植物抗宿主病仍然是一个主要临床问题(11),我们试图理解如果MSC施加的免疫抑制活性在活的有机体内输液可能有一些影响病毒的风险而在抗病毒免疫反应的正确安装。

本报告分析为巨细胞病毒(CMV)感染病毒的风险,eb病毒(EBV)和腺病毒(副词)一群病人注射了从第三方MSC,扩大与血小板溶解产物(PL)按照良好生产规范(GMP)条件下,由我们组(详细如前所述12]。

2。患者和方法

所有患者接受MSC类固醇抗移植物抗宿主病两个伙伴机构(Ospedale圣杰勒德蒙扎和Ospedali Riuniti,贝加莫)从2009年7月到2011年12月,为巨细胞病毒监控每周两次,EBV,或难以复活,以聚合酶链反应(PCR)测定全血。病毒复活被定义为病毒载量的证据在外周血≥1000拷贝/毫升。只有MSC输液后而发生的第一次记录和病人已经接受抗病毒治疗MSC输液的时候被排除在分析之外。对于本文的目的,病毒检测发生在0和+ 100天MSC输液后记录下来。根据当地政策患者接受或不与更昔洛韦治疗或Foscavir antiCD20moAb,或Cidofovir,分别对巨细胞病毒,EBV,睡觉。

任何病人分析寻找病毒性的疾病如果出现发烧的症状或器官的参与与病毒再活化有关。

为了让一个回顾性比较,所有患者接受同种异体干细胞移植分析了2007年1月至2008年12月,和那些发达类固醇抗后病毒而移植物抗宿主病,但是没有收到MSC,被认为是作为对照组。

类型的移植,t细胞耗竭,调节方案,和免疫抑制的行数管理当时病毒再活化的记录,以及移植物抗宿主病分级。

在重新激活巨细胞病毒2例,频率特异性细胞,分泌干扰素-γ在回答一个鸡尾酒CMV-specific肽(13有关酶联免疫斑点试验)是衡量(美国圣地亚哥CA EBioscience),之前和MSC灌注后不同时间点。

msc从第三方获得捐助者与PL扩张后,和其他地方一样描述(12]。患者接受MSC知情同意后,注册在一个阶段我双心的,未来的审判,被当地和国家机关批准。每个MSC注入旨在提供中等剂量的1×10⁶收件人/公斤体重,最少2注入给每个病人。

3所示。结果

3.1。临床监测

从2009年7月到2011年12月,24例获得msc在正在进行的免疫抑制疗法治疗类固醇抗移植物抗宿主病。其中,11(45%)首次开发出了一种病毒激活后注入MSC。其他2例(8.3%)患者发达MSC输液前病毒复活,没有详细分析了本研究的目的。

所有患者接受分析的同种异体移植恶性(10例)或良性的疾病(1例)。病人数量4和14收到不匹配的捐献者的贪污,而其他所有患者接受移植从匹配相关(2)或无关的(7捐助者。在我们的患者群9收到完全骨髓的调节,在基础和2 4例创伤性脑损伤降低强度调节根据当地政策。没有人分析患者的t细胞耗竭贪污,但9患者接受在活的有机体内t细胞耗竭GvHD预防方案(表的一部分1)。所有的描述病人遭受急性移植物抗宿主病二级IV涉及1(6例)或多个器官(5例)。所有患者接受免疫抑制治疗的病毒复活。七11病人开发出一种从单个病毒再活化代理(表2)。

巨细胞病毒是最常见的病原体发生在4个血清反应阳性的病人血清反应阴性的移植,以及3患者表现出更有利的血清学模式(供体和受体巨细胞病毒免疫球蛋白阳性)。所有的病人发展与更昔洛韦治疗巨细胞病毒感染或Foscavir根据当地的指导方针。两个病人(UPN # 14和16)收到了更昔洛韦和Foscavir CMV-related结肠炎治疗,因为,通过肠道活组织检查记录。两个病人了肠道GvHD。另一个病人(UPN # 10)转向Foscavir治疗,以避免长时间接触更昔洛韦后骨髓毒性。

EBV阳性检测6例。四人用抗CD20单克隆抗体治疗,但没有考虑病人发达的迹象或症状EBV-related淋巴增生症(PTLD)具有重要的意义。

副词激活发生在3例,并记录在粪便和血液,而在一个案例中(UPN # 16)肠活检还揭示了副词积极性。移植物抗宿主病是肠道在所有三个病人。他们成功地与Cidofovir接受治疗。

巨细胞病毒感染是最快速的提高我们的队列的平均时间后外观第一MSC输液2天(范围1到31天)其次是副词(平均7天,范围3 - 40天)和EBV(平均21天,范围1到100)。总的来说,病毒而发生在中值时间后17天的类固醇治疗这些病人的开始。

所有患者接受多个MSC描述注入(范围2 - 8),和病毒再活化检测第一次输液后3例和8例后进一步注资。没有一个病人在我们的队列为viral-related死的原因。总体生存在这个队列的患者45岁,5%的平均跟踪20个月后MSC输液6到31个月(范围)。MSC和移植物抗宿主病治疗,2例的群体提供了一个完整的对治疗的反应,4部分反应,3没有回应MSC治疗,2例反应MSC并没有可评价的,因为死亡的前28天+后最后MSC输液,代表评价时间点根据本协议。

3.2。免疫监视

试着去理解,如果在活的有机体内输液,MSC可以影响特异性T-cell-mediated免疫反应,有关酶联免疫斑点化验我们评估的频率特异性T细胞在外周血循环(PB) 2例经历巨细胞病毒激活后不久MSC注入(UPN # 9和14)。两个病人显示增加CMV-specific干扰素-γ生产PB和巨细胞病毒激活细胞,尽管多个MSC的同时注入剂量(图1)。特别是UPN # 9 CMV-specific细胞增加18倍在HSCT后44天,在巨细胞病毒激活(PB 16700巨细胞病毒DNA拷贝/毫升),而天35 (preinfection水平)。特异性细胞然后开始减少巨细胞病毒感染的决议和复活在巨细胞病毒激活的事件第二天86。同样,在UPN # 14, CMV-specific T细胞增加了4倍与巨细胞病毒激活HSCT后80天。

3.3。与历史的患者群

2007年1月至2008年12月,52名患者接受同种异体干细胞移植在圣杰勒德医院(蒙扎)。14他们收到一个HLA相同的干细胞相关的捐赠者,4来自一个相关的不匹配的供者,其余病人从一个HLA-matched-unrelated捐献者。现年42岁的六名病人收到脐带血干细胞从骨髓,从边缘干细胞和4。只有一个贪污是t细胞耗竭。移植物抗宿主病的预防包括ATG 35例。在这组患者20发达急性或chronic-steroid-resistant GvHD的二级或办法。他们收到后进一步行治疗类固醇根据GvHD病人特征(2到6行治疗)。10的患者(50%)出现病毒再活化后移植物抗宿主病发作。5人面对EBV和巨细胞病毒复活,一个病人出现孤立EBV和4与孤立的巨细胞病毒激活。这些患者表现出PTLD或巨细胞病毒疾病。 Median time from start of GvHD treatment to viral reactivation was 13 days (range 2 to 39). Eight of these 10 patients are alive with a median followup of 48 months from HSCT (range 34 to 62 months), none of those patients died from viral-related causes.

4所示。讨论

MSC被证明是一个有用的工具在管理对常规治疗移植物抗宿主病的抵抗力。根据不同的出版的观察,反应率随52 70%,成人和儿童之间的不同14,15]。

尽管临床疗效的证据,它仍未揭露的这些细胞是如何能够调整alloreactivity收件人。我们最近表明,msc、输液后,能够将一个炎症环境生理发展,在细胞水平上,促进t - reg的增加外周血细胞循环,在分子水平上,减少炎性细胞因子的浓度(16]。然而,问题是最近出现的可能性,msc,通过他们的免疫抑制作用,影响抗病毒t细胞反应(17]。

这些细胞是否也会影响其他效应T细胞的免疫活动,即抗病毒和抗菌能力,首先解决了Karlsson et al。9]。在一系列非常详细的评估,他们记录在两个不同的患者,病毒特异性T细胞的效应函数MSC注入后可以保留。没有其他临床详细数据是可用的,据我们所知,来支持这个最初的观察。刘振前et al。18)报道在体外抗菌活性的MSC,没有进一步评估抗病毒特性。唯一的III期随机研究,这是迄今为止对MSC政府也报道一般注意之间的感染率实验和对照组的队列19]。

最近的一份报告(17]Ringden等人描述一群31 MSC输液aGVHD或出血性膀胱炎患者描述的巨细胞病毒而高发病率和轻微的疾病CMV-related疾病(31%)。这种高频预计患者steroid-refractory GVHD,代表一个开发病毒性疾病的高危人群。因此,他们报告说,巨细胞病毒病发生在一个类似的患者数量在同一队列之前注入MSC。

在我们描述人口总体MSC输液后病毒再活化率为45%,只有8.3%的(即CMV-related疾病。结肠炎)。在我们的群体中,以及在一个被Ringden报道,患者接受已经至少一行免疫抑制的MSC。因为这个原因是不可能限制我们的数据MSC管理的重要性。总之相关突显出,我们的病毒传染率类似报告的其他群体在接受抗实验性治疗移植物抗宿主病的病人中除了MSC (20.),所有患者在我们的群能够克服常规治疗的病毒复活,没有报告任何viral-infection-related死亡。此外,回顾与一群患者病毒再活化类固醇耐火GvHD和没有收到MSC治疗后还显示相似比例的病毒而MSC治疗组(50%比45%)和类似的延迟在类固醇治疗的开始和病毒再活化。

支持我们的临床数据,我们证明,通过免疫监测,患者暴露于巨细胞病毒激活后MSC注入能够挂载生理抗病毒免疫反应。重要的是要注意,同时分析患者对MSC注入,证明了逐渐衰减的移植物抗宿主病临床总得分。特别是,每一集的观察病毒再活化伴随着增加CMV-specific T细胞增加,随着采用抗病毒药物治疗,导致的间隙感染,表明msc都不会干扰抗病毒反应。这些结果,符合数据已经通过其他作者,msc可以支持这一概念,在活的有机体内灌注、抑制移植物抗宿主病促进异体抗原诱导t细胞反应保留某种程度上的特异免疫反应(9]。这个数据适用于我们的病人即使反复博览会MSC,从而允许一个安全的重复使用这些细胞。

本文证实了安全数据可能使用MSC移植的病人。我们的经验表明,没有扩增病毒再活化或疾病的风险对于MSC-infused患者,而那些开发病毒复活不出现更严重的疾病,因为容量扩大病毒特异性T细胞不受损。

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